Способ определения аргинина, изолейцина и лизина в полиаминокислотных препаратах

Авторы патента:

G01N33 - Исследование или анализ материалов особыми способами, не отнесенными к предыдущим группам

G01N27/26 - путем определения электрохимических параметров; путем электролиза или электрофореза (определение коррозионной стойкости G01N 17/00; путем разделения на составные части с использованием адсорбции, абсорбции или подобных процессов или с использованием ионного обмена, например хроматографии G01N 30/00; иммуноэлектрофорез G01N 33/561; электрохимические процессы и аппараты вообще B01J; стандартные элементы H01M 6/28)

Владельцы патента RU 2390010:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежская государственная технологическая академия" (RU)

Изобретение относится к аналитической химии органических соединений применительно к анализу фармацевтических средств и препаратов для спортивного питания. Способ заключается в том, что предварительно готовят водную вытяжку аминокислот из препарата, содержащего в качестве активных компонентов аргинин, изолейцин и лизин, добавляют высаливатель в виде кристаллического сульфата лития в количестве 20-25 мас.%, раствор перемешивают, после чего добавляют к нему в объемном соотношении 1:10 смесь гидрофильных растворителей, состоящую из 30 мас.% н. бутилового спирта, 30 мас.% этилацетата и 40 мас.% ацетона, перемешивают, процесс экстракции осуществляют в течение 20 мин, экстракт отделяют и определяют в нем содержание аргинина, изолейцина и лизина методом капиллярного электрофореза с применением системы «Капель-105». Достигается возможность определения на уровне концентраций 5-15 мг/мл. 1 табл.

Изобретение относится к аналитической химии органических соединений и может быть использовано для определения аминокислот в составе фармацевтических средств и препаратах для спортивного питания.

Технической задачей изобретения является разработка способа определения аргинина, изолейцина и лизина в полиаминокислотных препаратах с применением высаливателя и смеси гидрофильных растворителей.

Для решения технической задачи предложен способ определения аргинина, изолейцина и лизина, характеризующийся тем, что предварительно готовят водную вытяжку аминокислот из препарата, содержащего в качестве активных компонентов аргинин, изолейцин и лизин, добавляют высаливатель в виде кристаллического сульфата лития в количестве 20-25 мас.%, раствор перемешивают, после чего добавляют к нему в объемном соотношении 1:10 смесь гидрофильных растворителей, состоящую из 30 мас.% н. бутилового спирта, 30 мас.% этилацетата и 40 мас.% ацетона, перемешивают, процесс экстракции осуществляют в течение 20 мин, экстракт отделяют и определяют в нем содержание аргинина, изолейцина и лизина методом капиллярного электрофореза с применением системы «Капель-105».

Технический результат заключается в определении активных компонентов (аргинина, изолейцина и лизина) в водной вытяжке полиаминокислотного препарата с применением высаливателя и смеси гидрофильных растворителей на уровне концентраций 5-15 мг/мл.

Предлагаемый способ определения аргинина, изолейцина и лизина в полиаминокислотных препаратах осуществляют по следующей методике.

Таблетки полиаминокислотного препарата, содержащего аргинин, изолейцин и лизин, взвешивают на аналитических весах, измельчают в ступке и готовят водную вытяжку, содержащую аминокислоты, с концентрациями (мг/мл): аргинин - 8,5; лизин - 6; изолейцин - 13. К 30 мл водной вытяжки аминокислот добавляют 20-25 мас.% высаливателя (кристаллический сульфат лития). Предварительно готовят смесь гидрофильных растворителей, состоящую из 30 мас.% н. бутилового спирта, 30 мас.% этилацетата и 40 мас.% ацетона, которую затем добавляют к водно-солевому раствору аргинина, изолейцина и лизина в количестве 3 мл (соотношение водно-солевой раствор - смесь гидрофильных растворителей 10:1). Далее экстрагируют на вибросмесителе 5 мин до установления межфазного равновесия, выдерживают 1-2 мин, после расслаивания фаз экстракт отделяют и анализируют методом капиллярного электрофореза («Капель-105»).

Осуществление способа иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1

Таблетки, содержащие аргинин, изолейцин и лизин, взвешивают на аналитических весах и измельчают в ступке, предварительно удалив окрашенную оболочку. Точную навеску измельченных таблеток растворяют в 30 мл дистиллированной воды, интенсивно перемешивая, раствор фильтруют через фильтр «белая лента». Концентрация аминокислот в полученной водной вытяжке составляет (мг/мл): аргинин - 8,5; лизин - 6; изолейцин - 13. К 30 мл водной вытяжки аминокислот добавляли 25 мас.% высаливателя (кристаллический сульфат лития), раствор тщательно перемешивали до полного растворения высаливателя, добавляли 3 мл (соотношение водно-солевой раствор - смесь гидрофильных растворителей 10:1) предварительно приготовленной смеси гидрофильных растворителей, состоящей из 50 мас.% н. бутилового спирта, 20 мас.% этилацетата и 30 мас.% ацетона, экстрагируют на вибросмесителе 5 мин (в течение этого времени достигается межфазное равновесие), выдерживают 1-2 мин. Полученный экстракт анализировали методом капиллярного электрофореза («Капель-105»).

В органическую фазу переходит 98,2, 98,9 и 95,3 мас.% аргинина, лизина и изолейцина соответственно. Достигается практически полное извлечение аминокислот, способ выполним.

Пример 2

Анализ выполняли аналогично примеру 1, но к водной вытяжке, содержащей аргинин, изолейцин и лизин, добавляли высаливатель в количестве 25 мас.%. В органическую фазу переходит 97,5, 98,3 и 97,8% аргинина, лизина и изолейцина соответственно от их содержания в исходном растворе. Достигается практически полное извлечение аминокислот, способ выполним.

В таблице приведена сравнительная характеристика примеров определения аргинина, лизина и изолейцина в полиаминокислотном препарате по заявляемому способу.

Таблица
Сравнительная характеристика примеров определения аргинина, лизина и изолейцина в полиаминокислотных препаратах по заявляемому способу
Номер примера	Содержание, мас.%	Степень извлечения, %
высаливателя	н. бутиловый спирт	этилацетат	ацетон	аргинин	изолейцин	лизин
1	20	50	20	30	98,2	98,9	95,3
2	25	50	20	30	97,5	98,3	97,8

Как следует из таблицы, положительный эффект по предлагаемому способу достигается при содержании высаливателя 20-25 мас.%, применении смеси гидрофильных растворителей, состоящей из 50 мас.% н. бутилового спирта, 20 мас.% этилацетата и 30 мас.% ацетона, соотношении водно-солевой раствор - смесь гидрофильных растворителей 10:1.

При содержании высаливателя в системе менее 20 мас.%, органическая фаза не образуется, при содержании более 25 мас.% выделяются кристаллы соли, экстракция неосуществима.

Способ определения аргинина, изолейцина и лизина, заключающийся в том, что предварительно готовят водную вытяжку аминокислот из препарата, содержащего в качестве активных компонентов аргинин, изолейцин и лизин, добавляют высаливатель в виде кристаллического сульфата лития в количестве 20-25 мас.%, раствор перемешивают, после чего добавляют к нему в объемном соотношении 1:10 смесь гидрофильных растворителей, состоящую из 30 мас.% н.бутилового спирта, 30 мас.% этилацетата и 40 мас.% ацетона, перемешивают, процесс экстракции осуществляют в течение 20 мин, экстракт отделяют и определяют в нем содержание аргинина, изолейцина и лизина методом капиллярного электрофореза с применением системы «Капель-105».

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования течения деструктивных процессов в раннем послеоперационном периоде органосохраняющих вмешательств при воспалительных трубно-яичниковых образованиях.

Способ установления давности смерти человека на поздних сроках посмертного периода // 2389433

Изобретение относится к медицине, а именно к судебной медицине, и может быть использовано для установления давности смерти человека на поздних сроках посмертного периода.

Способ прогнозирования рецидивов рака гортани // 2389030

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии. .

Способ диагностики нарушений гепатобилиарной системы у новорожденных и детей раннего возраста из группы перинатального риска // 2389029

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии. .

Способ диагностики пародонтита путем определения уровня остеопротегерина в сыворотке крови // 2389028

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии. .

Способ ранней диагностики диабетической энцефалопатии у детей // 2389027

Изобретение относится к медицине, а именно к детской эндокринологии и неврологии. .

Способ определения активности апурин/апиримидин-эндонуклеазы человека // 2389026

Изобретение относится к области молекулярной биологии и биохимии. .

Способ прогнозирования рецидивирующего течения ларинготрахеита у детей // 2389025

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования рецидивирующего течения ларинготрахеита у детей. .

Способ прогнозирования рецидивирующего течения ларинготрахеита у детей // 2389025

Способ исследования клеток с помощью иммунологического биочипа // 2389024

Изобретение относится к области медицины, а именно к гематологии, клинической иммунологии, онкологии. .

Способ оценки депуринизации нуклеиновых кислот и устройство для его осуществления // 2390009

Изобретение относится к области физики и может быть использовано для анализа материалов с помощью биохимических электродов. .

Способ количественного определения гесперидина методом дифференциальной вольтамперометрии // 2381502

Изобретение относится к области аналитической химии, в частности к инверсионному вольтамперометрическому способу определения флавоноида, обладающего высокой антиоксидантной активностью и клинической эффективностью в лечении ряда заболеваний.

Способ количественного определения анавидина методом инверсионной вольтамперометрии // 2381501

Изобретение относится к области аналитической химии, изучающей возможность определения анавидина методом инверсионной вольтамперометрии. .

Способ электрохимического мультисенсорного обнаружения и идентификации алкалоидов // 2375705

Изобретение относится к области химического и биологического анализа, в частности для электрохимического детектирования алкалоидов. .

Способ определения дисперсного состава в эмульсиях типа "вода в углеводороде" и устройство для его осуществления // 2371712

Изобретение относится к измерительной технике, предназначенной для определения дисперсного состава жидкостных эмульсий и может быть использовано в нефтяной, нефтеперерабатывающей и химической промышленности для контроля качества разделения или приготовления жидкостных эмульсий.

Бипотенциостат // 2361197

Способ определения суммарной антиоксидантной активности биологически активных веществ // 2356050

Изобретение относится к области медицины, фармакологии, аналитической химии и может быть использовано для оценки антиоксидантной активности (АОА) различных лекарственных экстрактов и препаратов, пищевых продуктов, напитков и биологически активных добавок к пище (БАД).

Способ определения массовой доли основного вещества о-алкилметилфосфонатов // 2354661

Изобретение относится к исследованию или анализу небиологических материалов химическими способами, конкретно к определению массовой доли основного вещества в стандартных образцах состава O-алкилметилфосфонатов (в частности, O-изопропилметилфосфоната, O-изобутилметилфосфоната, O-пинаколилметилфосфоната) путем титрования их водных растворов с использование автоматического потенциометрического титратора АТП-02 или его аналогов.

Селективный ион-чувствительный ph-микродатчик // 2352928

Изобретение относится к измерительной технике и может быть использовано для непрерывного селективного экспресс-анализа элементов жидких, газообразных и твердых сред.

Способ изготовления селективного ион-чувствительного ph-микродатчика // 2352927

Изобретение относится к измерительной технике и может быть использовано для изготовления селективных ион-чувствительных рН-микродатчиков, предназначенных для анализа элементов жидких сред.

Способ диагностики электроизоляционных жидкостей на основе высоковольтной поляризации // 2391652

Изобретение относится к электроэнергетике и может быть использовано для диагностики жидких диэлектриков