Способ оценки степени тяжести состояния доношенных новорожденных детей по данным кислотных и осмотических эритрограмм

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии и неонатологии, и может быть использовано для экспресс-оценки функционального состояния организма новорожденного по сочетанию показателей осмотической и кислотной резистентности эритроцитов. Для осуществления способа определяют показатели Gmax и G120, выраженные в процентах, и учитывают уровень обоих показателей. В случае если Gmax больше 96,6% и G120 меньше или равно 1%, делают заключение о легкой степени нарушений тяжести состояния новорожденных; если Gmax лежит в диапазоне от 80,25% до 96,59%; G120 от 1,1 до 2,12, делают заключение об умеренной степени нарушений тяжести состояния новорожденных; если Gmax менее 80,2% и G120 более 2,1%, делают заключение о тяжелой степени нарушений состояния новорожденных детей, требующей повышенного внимания, назначения и проведения необходимых лечебных манипуляций. 2 табл.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии и неонатологии, и может быть использовано для экспресс-оценки функционального состояния организма новорожденного по сочетанию показателей осмотической и кислотной резистентности эритроцитов.

Известен способ оценки тяжести состояния доношенных детей грудного возраста путем комплексного анализа результатов клинического обследования, биохимического и цитохимического исследования крови, а именно: определение в лимфоцитах периферической венозной крови уровней териотропного гормона (ТТГ), свободного тироксина (Т4 своб.), кортизола и сукцинатдегидрогеназы (СДГ), глицеофосфатдегидрогеназы (-ГФДГ), кислой фосфатазы (КФ). Диагноз - перинатальное гипоксическое поражение головного мозга устанавливали, если одновременно отмечалось по отношению к норме повышение уровня ТТГ, снижение Т4 своб. и кортизола, активация СДГ, снижение активности -ГФДГ, повышение активности КФ. Причем о степени тяжести гипоксического поражения судят по количественному отклонению от нормы исследуемых показателей: чем отклонение больше, тем выше степень тяжести гипоксического поражения головного мозга [3].

Недостаток известного способа состоит в том, что он применяется, начиная с первого месяца жизни ребенка, и не позволяет проводить раннюю диагностику в первые дни жизни после рождения. Кроме того, известный способ - трудоемкий; так как оценка тяжести состояния доношенных детей грудного возраста достигается путем комплексного анализа результатов клинического обследования, биохимического и цитохимического исследования крови.

Известен способ оценки степени тяжести перинатального гипоксического поражения ЦНС у новорожденных методом иммуноферментного анализа с определением содержания интерлейкина IL-1, где моделью исследования также являются иммунокомпетентные клетки - лимфоциты [5].

Недостатки известного способа в относительной его специфичности в связи с тем, что определяют содержание только интерлейкина IL-1, а также с кратковременным присутствием в крови цитокинов, что требует быстрого проведения исследования после забора крови. Последнее повышает трудоемкость способа. Для проведения исследования требуется достаточно большой объем крови (до 3 мл).

Известен способ оценки степени тяжести гипоксического перинатального поражения ЦНС у доношенных новорожденных детей, в котором степень тяжести оценивают по содержанию провоспалительных и противовоспалительных цитокинов и изменению концентрации нейроспецифической енолазы (NSE). Для чего определяют цитокиновый профиль (IL-1, IL-4, TNF, IL-6) и концентрацию NSE в сыворотке периферической венозной крови и в ликворе. Исследования проводят в 1, 3, 7 сутки и с 14 по 21 сутки. Степень тяжести гипоксического перинатального поражения оценивают по величине отклонения исследуемых параметров от нормы [1].

Известен способ оценки степени тяжести гипоксического перинатального поражения ЦНС у доношенных новорожденных детей, в котором исследуют популяцию лимфоцитов, а именно анализируют показатели активности митохондриальных ферментов в популяции лимфоцитов: сукцинатдегидрогеназы (СДГ), глутаматдегидрогеназы, -глицерофосфатдегидрогеназы (-ГФДГ), лактатдегидрогеназы, малатдегидрогеназы. Кроме того, определяют состояние клеточного звена иммунитета с учетом общего количества лейкоцитов и субпопуляций лимфоцитов CD3, CD4, CD8, CD16, CD20, CD95, CD25 и исследуют уровень иммуноглобулинов А, М, G, интерлейкинов-4, -6, -1, фактора некроза опухолей (ФНО-) в сыворотке крови. Исследования проводят в 1 сутки жизни, в 3 сутки, затем с 5 по 6 сутки и затем с 28 по 30 сутки. Степень тяжести гипоксического перинатального поражения оценивают по величине отклонения исследуемых параметров от нормы [2].

Приведенные выше способы оценки степени тяжести состояния доношенных новорожденных детей имеют ряд существенных недостатков. Основной недостаток - это сложность выполнения, что ухудшает воспроизводимость известных способов. Это объясняется следующим. Определение цитокинов и популяций клеток требует тщательной обработки материала, а также хранения при заданной постоянной температуре. Кроме того, трудность определения цитокинов заключается также в мимолетности и нестабильности их присутствия в опыте. В результате быстрого разрушения цитокинов нужны условия для стабилизации исследуемого материала и хранения клеток. При исследовании митохондриальных ферментов требуется немедленное выполнение реакции, так как в этом случае исследуемый материал длительно хранить нельзя. Кроме того, необходимость и сложность соблюдения правил выполнения способов снижает и точность количественной оценки конечных результатов. Трудности при воспроизводимости и снижение точности количественной оценки в известных способах снижает их достоверность. В известных способах оценки степени тяжести состояния доношенных новорожденных детей для диагностики используют критерии, которые применяют и для диагностики других заболеваний, что снижает специфичность известных способов.

Для клинической практики важно располагать сведениями о ряде важнейших показателей, отражающих функциональное состояние организма в целом для постановки диагноза и определения индивидуальной схемы лечения каждого новорожденного. К их числу относятся показатели крови и, в частности, кислотная и осмотическая резистентность эритроцитов, изменяющиеся в динамике заболевания.

Цель: разработать способ оценки состояния новорожденного при нарушении периода адаптации с использованием неинвазивного метода, учитывающего данные кислотной и осмотической эритрограмм.

Технический результат достигается путем забора крови из вены головы новорожденного, которую помещают в пробирку со стабилизатором - 5% раствором цитрата натрия. Кровь разводят физиологическим раствором и трижды центрифугируют при 1500 об/мин в течение 10-15 минут с промежуточным отмыванием от стабилизатора и плазмы 0,9% раствором хлорида натрия. Дальнейшую обработки эритроцитов проводят по следующей схеме.

Используют установку для регистрации эритрограмм, состоящую из фотоэлектрического колориметра ФЭК - 56М в авторской модификации [6], цифрового вольтметра типа В7 - 20 и регистрационного блока типа ЛКД 4-003. Гемолиз эритроцитов проводят в кюветах с наружными размерами 20×40×10 мм и рабочим объемом 5 мл. Измерения проводят при светофильтре (№5) с максимумом пропускания в области 490 нм, т.к. при данной длине волны тестируется не выход гемоглобина в среду инкубирования, а светорассеяние образцов, интенсивность которого прямо пропорционально зависит от объема эритроцита и содержания в среде эритроцитарных клеток, т.е G=f(V₁×N), где G - доля разрушенных клеток (%), V₁ - объем одного эритроцита, N - количество эритроцитов в среде. Следовательно, выход гемоглобина - явление вторичное и при используемой длине волны (490 нм) практически не влияет на регистрируемый сигнал. Предлагаемый метод позволяет с высокой точностью (G±1%) оценить изменения структурно-функциональных свойств эритроцитов периферической крови.

Исследования осмотической резистентности эритроцитов крови новорожденных были проведены с помощью метода регистрации во времени кинетики осмотического гемолиза эритроцитов, помещенных в 0,55% раствор NaCl. Выбор данной концентрации хлорида натрия в качестве «рабочего» раствора обусловлен созданием режима предгемолитического состояния эритроцитов, при котором они находятся в течение 15-30 минут в стабильном положении. Это состояние сфероцитов нами названо «критической точкой резистентности», что позволило повысить чувствительность метода оценки структурного состояния эритроцитов в 1000 раз.

Взвесь эритроцитов в 0,55% растворе NaCl получают методом половинного разведения исходного объема клеток крови - 0,9% NaCl, D=0,8 при длине волны (λ), равной 490 нм, гипоосмотическим раствором - 0,2% раствор хлорида натрия. Эритроциты с неизмененными структурными свойствами в данном растворе могут длительное время оставаться в стадии сферуляции, а эритроциты с измененной проницаемостью мембраны, нарушением белково-липидных взаимодействий быстро вступают в стадию гемолиза. При данной концентрации хлорида натрия (0,55%) реализуется возможность оценить структурную неоднородность эритроцитарной популяции.

Кинетику гемолиза эритроцитов в 0,55% растворе NaCl или растворе HCl фиксируют непосредственно после добавления 0,2% раствора NaCl 0,08 моль/л HCl к эритроцитарной взвеси на 0,9% NaCl. При смешивании суспензии эритроцитов и гипоосмотического раствора хлорида натрия, по 2,5 мл каждого, начальная величина светопропускания (t₀) составляла 40±5% при длине волны 490 нм.

Величина G₁₂₀ является мерой осмотической резистентности эритроцитов и характеризует долю (в %) эритроцитов, подвергнувшихся гемолизу в гипотонической среде (0,55%). За контроль принимают долю гемолизированных эритроцитов, не превышающую за 2 мин (G₁₂₀) 1%. По величине G₁₂₀ более 1% судят о накоплении скрытых структурных нарушений в мембране эритроцитов. О функциональных свойствах эритроцитарных мембран судили по изменению длительности t_lat (характеризует меру стойкости эритроцитов к действию кислоты), по величине G_max (характеризует долю сверхстойких эритроцитов в кровяном русле), по значению K_max (характеризует степень дифференцировки среднестойких эритроцитов по чувствительности к действию кислоты).

Совокупность основных параметров, перечисленных выше, позволяет получить и оценить важную информацию о характере и степени протекающего патологического процесса. В частности: при значениях параметра G₁₂₀ менее 1-3% - начальная фаза развития патологического (деструктивного) процесса; при регистрации величины G₁₂₀, превышающей 3-5%, состояние ребенка можно характеризовать как средней тяжести; при повышении доли гемолизированных клеток, G₁₂₀ более 5%, - высокая выраженность патологического процесса.

Изменение константы максимальной скорости гемолиза (K_max) позволяет судить о повышении или понижении гемолитической чувствительности средней популяции эритроцитов к ацидозу (то есть значение K_max более 0,6 свидетельствует о повышенной чувствительности, а менее 0.6 - о пониженной).

Уменьшение значений величины G_max до 70% и ниже характеризует накопление в периферической крови сверхстойкой популяции эритроцитов, что может быть обусловлено двумя факторами: активизацией эритрона либо комплексированием мембран эритроцитов продуктами гликолитического обмена или метаболитами АФК.

Оценку функционального состояния эритроцитов проводят по отношению к контролю [4], основные параметры которых характеризуются следующим образом: G_max - 95%, K_max - 0,6 отн. ед., t_lat - 180 с.

Комплексная оценка структурно-функциональных свойств эритроцитов позволяет оценить тяжесть состояния новорожденного, в динамике контролировать терапевтический эффект проводимого лечения и корректировать индивидуальную схему лечения, что повышает благоприятный исход заболевания, то есть вносит вклад в развитие доказательной медицины.

Предлагаемым способом было обследовано 25 новорожденных детей первой недели жизни, находившихся в общем отделении и в отделении реанимации и интенсивной терапии родильного дома (см. табл.1).

Таблица 1
Показатели кислотного и гипоосмотического гемолиза эритроцитов новорожденных
№ новорожд.	Диагноз при выписке из род. дома	Показатели кислотного и гипоосмотического гемолиза
Gmax, %	Kmax, отн. ед.	Tlat, с	G120, %
1	Постгипоксическое состояние. Транзиторная гипербилирубинемия.	70	0,13	255	4
2	Церебральная ишемия II-ой ст. Гипертензионный синдром. Анемия I-ой степени.	84	0,47	0	4
3	Постгипоксическое состояние. Транзиторная гипербилирубинемия. Гормонально-половой криз. Морфофункциональная незрелость.	70	0,60	127	6
4	Морфофункциональная незрелость.	52	0,33	150	3
5	Постгипоксическое состояние. Транзиторная гипербилирубинемия.	68	0,53	127	4
6	Постгипоксическое состояние. Транзиторная гипербилирубинемия.	70	0,87	0	31
7	Постгипоксическое состояние.	96	0,93	307	1
8	Токсическая эритема. Транзиторная гипербилирубинемия. Гормонально-половой криз.	96	0,93	300	1
9	Постгипоксическое состояние. Гормонально-половой криз. Анемия I-ой степени	91	0,87	150	2
10	Церебральная ишемия II ст. Недоношенность I степ. Конъюгационная гипербилирубинемия. Токсическая эритема.	91	0,87	255	2
11	Гормонально-половой криз. ЗВУР 2-й степени, гипопластический вариант.	95	0,93	210	1
12	Постгипоксическое состояние.	93	0,87	75	1
13	Постгипоксическое состояние. Транзиторная гипербилирубинемия. Гормонально-половой криз.	83	1,07	142	2
14	Постгипоксическое состояние.	81	0,93	165	2
15	Токсическая эритема. Транзиторная гипербилирубинемия. Гормонально-половой криз.	90	1,27	127	1
16	Церебральная ишемия I степени. Транзиторная гипербилирубинемия. Гормонально-половой криз.	89	0,87	127	2
17	Конъюгационная гипербилирубинемия. Церебральная ишемия II степ., синдром угнетения ЦНС. Врожденный гипотиреоз, синдром Дауна? Недоношенность I степени. Перинатальный контакт по вирусному гепатиту «В».	85	0,87	232	2
18	Церебральная ишемия I степени.	70	0,60	180	2
19	Перинатальное поражение ЦНС смешанного генеза. Тяжелый гипертензионный синдром. Синдром вегетативных дисфункций. Транзиторная гипербилирубинемия.	89	0,60	255	1
20	Церебральная ишемия II степени. Кардиопатия. Транзиторная гипербилирубинемия.	70	0,53	255	14
Контрольная группа по данным Леоновой В.Г.	95	0,6	180	1

В качестве контроля были использованы данные Леоновой В.Г. (1967 год), которая с помощью метода кислотных эритрограмм изучала различия в качественном составе эритроцитов в зависимости от периода развития человеческого организма, начиная от ранних стадий эмбриогенеза до пубертатного возраста. Эритрограммы доношенных новорожденных характеризуются следующими параметрами: длительность латентной фазы (t_lat) 180 с, константа максимальной скорости гемолиза (K_max) 0,6, максимальная доля гемолизированных клеток (G_max) 95% [4].

Представляет интерес исследование изменений параметров кислотной и осмотической эритрограмм у 3-х новорожденных. Особого внимания заслуживает 6-й новорожденный с двукратным тугим обвитием пуповины вокруг шеи, с выпадением петель пуповины во время родов, который родился в состоянии острой умеренной асфиксии (оценка по шкале Апгар 5-7 баллов). У него была зарегистрирована наименьшая осмотическая резистентность эритроцитов (31%), что в сочетании с отсутствием латентной фазы на кислотной эритрограмме (t_lat=0) указывает на ярко выраженные процессы деструктивного характера в мембранах низкостойкой популяции эритроцитов. Учитывая, что величина G_max достигала 70%, а K_max 0,87, можно думать о том, что и сверхстойкие незрелые и среднестойкие эритроциты подверглись модификации продуктами нарушенного метаболизма либо в крови циркулирует популяция молодых незрелых эритроцитов, более устойчивая к действию гемолитика как следствие компенсаторной реакции эритрона на развившуюся гипоксию.

Сравнительный анализ кислотных и осмотических эритрограмм у 7-го ребенка с однократным обвитием пуповины вокруг шеи позволил также выявить некоторые особенности (взаимосвязи) в выраженности (сопряженности) между величиной G₁₂₀ и другими параметрами кислотной эритрограммы. В частности, у 7-го новорожденного нами зарегистрирована наибольшая осмотическая резистентность эритроцитов (1%). Повышение осмотической резистентности клеток крови может быть обусловлено двумя факторами: с одной стороны, - это накопление в периферическом русле старых эритроцитов, мембраны которых химически модифицированы и по этой причине обладают повышенной осмотической стойкостью; с другой стороны, - это повышение может быть связано с элиминацией (до 50%) старой популяции эритроцитов, что в конечном итоге и вызвало повышение осмотической стойкости. Анализ параметров кислотной эритрограммы показал, что величина G_max У 7-го ребенка достигала 96%, это указывает на циркуляцию в кровяном русле популяции молодых эритроцитов, тождественной таковой в контроле, следовательно, факт экспрессии эритроном молодых незрелых эритроцитов можно отвергнуть. При рассмотрении значения величины K_max, достигающей 0,93, мы пришли к заключению, что в организме этого ребенка превалируют процессы интоксикации, к продуктам которых наиболее чувствительны популяции низко- и среднестойких эритроцитов, что нашло свое отражение в высоких значениях K_max и в повышенной длительности латентной фазы гемолиза (t_lat), что обусловлено доминированием процессов модификации мембран старой популяции эритроцитов над процессами деструктивного характера. Следовательно, повышение уровня осмотической резистентности эритроцитов крови 7-го ребенка, сочетанное с высокими значениями K_max, G_max, t_lat, свидетельствует в пользу представления о том, что в организме новорожденного развиваются процессы, приводящие к образованию комплексов «метаболит-мембрана», причем такое комплексообразование, вызывающее повышение кислотной и осмотической резистентности, протекает преимущественно между эритроцитами старой и частично среднестойкой популяции эритроцитов, в то время как мембраны молодых эритроцитов обладают повышенной устойчивостью (вследствие формирования комплексов на мембране) к модифицирующему действию интоксикантов.

В другом случае у 4-го новорожденного нами зарегистрировано повышение гемолитической активности эритроцитов крови, помещенных в гипоосмотическую среду (0,55% раствор хлорида натрия) до 4%. Повышение содержания в крови низкостойких эритроцитов свидетельствует о протекании процессов деструктивного характера, приводящих к появлению структурных дефектов в эритроцитарных мембранах. Одним из главных факторов, вызывающих такие изменения величины G₁₂₀, может быть химическая интоксикация продуктами ПОЛ и, в частности МДА, который накапливается в результате окисления арахидоновой кислоты, входящей в состав липидов. Другим фактором может быть интоксикация недоокисленными продуктами гликолитических процессов, развивающихся в условиях гипоксии, которые в конечном итоге приводят к ацидозу. Высказанные воззрения о протекании процессов интоксикации нашли свое подтверждение при анализе основных параметров кислотной эритрограммы. У этого ребенка, по нашему мнению, имеет место более активный процесс химической интоксикации клеточных мембран, о чем мы судили по величине G_max (не превышающей 52%). По всей вероятности, активность комплексообразования «метаболит-мембранный белок» была максимальной у данного ребенка и отражала процесс повышения кислотной резистентности (а, следовательно, и повышение барьера проницаемости молодой популяции эритроцитов). Установленное нами снижение относительно контроля (0,6 отн.ед.) значения K_max (0,33) указывает на увеличение дисперсии структурной неоднородности (увеличение количества) среднестойких эритроцитов, что также нашло свое отражение в повышенной гемолитической активности низкостойкой (старой) популяции эритроцитов, помещенных в гипоосмотическую среду. По выявленному нами сочетанному (разнонаправленному) процессу модификации сверхстойких эритроцитов, с одной стороны, и химической деструкции средних и старых эритроцитов, с другой стороны, можно судить о степени начального повреждения эритроцитарных клеток продуктами нарушенного метаболизма, а также о силе и характере воздействующего фактора на развитие патологического процесса.

Расчет средних значений изученных показателей для выделенных нами клинических групп, обозначенных как легкая, умеренная или тяжелая степень нарушения функционального состояния организма новорожденного показал следующее (см. табл.2).

Наименьшие, близкие к приводимым в литературе нормам, значения изученных показателей отмечены в группе новорожденных с легкими нарушениями состояния, что можно расценить как нормальную адаптацию.

В группе с умеренными проявлениями клинических нарушений показатели Gmax, Kmax, Tlat оказались меньшими в сравнении с группой, имеющей легкие нарушения, а показатель G120 увеличенным в два раза.

Таблица 2
Сравнительная характеристика показателей кислотного и гипоосмотического гемолиза эритроцитов новорожденных в зависимости от степени тяжести клинического состояния
Степень тяжести клинического состояния	Gmax, %	Kmax, отн. ед.	Tlat, с	G120, %
Средние значения и их ошибка
легкая	92,6±1,36	0,92±0,1	193,4±41,14	1±0
умеренная	80,25±4,71	0,8±0,08	175,125±16,0	2,12±0,12
тяжелая	75,43±3,99	0,58±0,1	153±46,97	9,14±3,95
Достоверность различий между группами по коэффициенту Стьюдента
легкая - умеренная	0,035422492	0,400679	0,69542	0,00000427
легкая - тяжелая	0,000009145	0,22978	0,315345	0,083028
средняя - тяжелая	0,000001713	0,046615	0,663962	0,0108254

В группе с тяжелыми проявлениями клинических нарушений тенденция к снижению Gmax, Kmax, Tlat и увеличению G120 сохранилась.

Расчет статистической значимости выявленных различий с использованием коэффициента Стьюдента показал, что достоверных различий между группами нет только по показателям Tlat. Незначимыми оказались различия между группами с легкой и умеренной степенью проявления нарушений и группами с легкой и тяжелой степенью проявления нарушений по показателю Kmax.

Таким образом, представленные расчеты позволяют заключить, что показатели Kmax и Tlat следует учитывать при оценке степени проявлений нарушений адаптации у новорожденных, но окончательные выводы могут считаться достоверно обоснованными, если учитывать показатели Gmax и G120. Причем о легкой степени клинических проявлений нарушения адаптации можно говорить, если Gmax больше девяноста двух и шести десятых процента, G120 равно или меньше одного процента. Умеренная степень нарушений соответствует следующим значениям Gmax от 80,25 до 96,59; G120 от 1,1 до 2,12. Тяжелая степень нарушений, требующая повышенного внимания и назначения и проведения необходимых лечебных манипуляций, характеризуется следующими диапазонами изученных показателей Gmax менее 80,2 процентов; G120 более 2,1 процентов.

Литература

1. Громада Н.Е. Клинико-диагностическое значение цитокинов и нейроспецифической енолазы у новорожденных с перинатальным гипоксическим поражением ЦНС / Н.Е.Громада // Тезисы докладов международного научного конгресса «Бехтерев - основоположник нейронауки: творческое наследие, история и современность». - 2007 г. - С.99.

2. Громада Н.Е., Ковтун О.П. Иммунные нарушения и биоэнергетическая недостаточность у детей с перинатальными гипоксическими поражениями центральной нервной системы и их коррекция. / Н.Е.Громада, О.П.Ковтун // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2007. - № 1. - С.26-30.

3. Изменения адаптации и их коррекция у детей грудного возраста с постгипоксическими изменениями ЦНС. / Измайлова Т.Д. [и др.] // Педиатрия. - 2002. - № 1. - С.27-30.

4. Леонова В.Г. Качественный состав красной крови в онтогенезе человека. / В.Г Леонова // Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. - М.: Наука, 1967. - Вып.2. - С.63-73.

5. Пат. РФ 2291443, МПК G01N 33/68, G01N 33/53. Способ выявления новорожденных, угрожаемых по развитию гипоксически-ишемической энцефалопатии; № 2005138808/15 / Е.Г.Самсонова, М.М.Герасимова, С.Ф. Гнусаев; заявитель и патентообладатель - Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования; Тверская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию; заявл. 14.12.05; опубл. 01.10.07.

6. Резван С.Г. Анализ молекулярных механизмов взаимодействия синтетических гомологов ретинола с компонентами эритроцитарной мембраны и свободным гемоглобином. Автореф. дис.… канд. биол. наук / С.Г.Резван; Воронежский гос. ун-т. - Воронеж, 1996. - 24 с.

Способ оценки степени тяжести состояния доношенных новорожденных детей, отличающийся тем, что оценку степени тяжести состояния доношенных новорожденных детей проводят по данным кислотных и осмотических эритрограмм с определением показателей Gmax и G120 выраженных в процентах, при этом, в случае если Gmax больше 96,6% и G120 меньше или равно 1%, делают заключение о легкой степени нарушений состояния новорожденных; если Gmax лежит в диапазоне от 80,25 до 96,59%; G120 от 1,1 до 2,12% делают заключение о умеренной степени нарушений состояния новорожденных; если Gmax менее 80,2% и G120 более 2,1%, делают заключение о тяжелой степени нарушений состояния новорожденных детей, требующей повышенного внимания, назначения и проведения необходимых лечебных манипуляций.