Средство, обладающее антимикробным, противовоспалительным и анестезирующим действием, и способ его получения
Владельцы патента RU 2396971:
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО ПГФА Росздрава) (RU)
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству, обладающему антимикробным, противовоспалительным и анестезирующим действием. Предлагается средство, обладающее антимикробным, противовоспалительным и анестезирующим действием, содержащее сухой экстракт травы вероники дубравной, анилокаин и димексид в виде смеси с водой очищенной в соотношении 1:1, при определенном содержании компонентов, а также способ получения средства, включающий растворение сухого экстракта травы вероники дубравной в смеси, содержащей димексид и воду очищенную в соотношении 1:1, при определенных условиях, далее раствор охлаждают до комнатной температуры, добавляют анилокаин при перемешивании и процеживают. Вышеописанное средство обладает эффективным комплексным противомикробным, противовоспалительным и анестезирующим действием. 2 н.п. ф-лы, 6 табл.
Изобретение относится к области фармации и касается состава и способа получения комбинированного средства, обладающего антимикробным, противовоспалительным и анестезирующим действием.
В основе многих заболеваний сосудов, мышц, суставов лежит воспалительный процесс, вызванный патогенными микроорганизмами. К таким заболеваниям относятся артриты, артрозы, миозиты и другие.
Для лечения этих заболеваний используется обширный арсенал лекарственных средств, в том числе и комбинированных. Комбинирование субстанций из различных фармакологических групп обосновано и направлено на подавление роста патогенных микроорганизмов, уменьшение воспалительного процесса, купирование болевого синдрома.
Известны комбинированные антимикробные средства, полученные на основе экстрактов из лекарственных растений. В качестве экстрагента биологически активных веществ при получении таких средств используется диметилсульфоксид (ДМСО) или его аналог более высокой степени очистки - димексид. Наиболее близким прототипом по составу и технической сущности получения является антибактериальное средство на основе ДМСО экстрактов из лекарственных растений, взятое нами за прототип [Патент RU №2088246].
Прототип, так же как и заявляемое средство, содержит биологически активные вещества из растений, димексид и дополнительно синтетические низко- и высокомолекулярные полиэтиленоксиды. Антибактериальный эффект прототипа обусловлен наличием в составе противомикробных компонентов - синтетических антибиотиков, сульфаниламидов, производных нитрофурана. В качестве растительных компонентов используются цветки календулы, листья подорожника, трава зверобоя, тысячелистника и череды. Не исключается применение и других видов сырья.
Сырье экстрагируют в реакторе, оборудованном паровой рубашкой, в два приема 100% димексидом, нагретым до температуры 90-100°С, в течение 2-4 часов. Антибактериальные компоненты и полиэтиленоксиды растворяют в горячем экстракте. Полиэтиленоксиды, входящие в прототип, имеют различную молекулярную массу и в зависимости от их соотношения получают лекарственные формы различной консистенции - линименты, мази, суппозитории.
Прототип имеет следующие недостатки.
1. Процесс получения препарата многостадиен и требует использования специального оборудования - экстрактора или диффузора, оборудованного паровой рубашкой и механической мешалкой.
2. Технология получения препарата предусматривает длительное (около 5 часов) нагревание (при температуре 100°С) биологически активных веществ, содержащихся в растительном сырье, что приводит к их термическому разложению. Особенно неустойчивы такие вещества, как терпеноиды, каротиноиды, гликозиды, витамины, содержащие лабильные группы - альдегидные, ацильные, лактонные, енольные, спиртовые и другие.
3. На стадии получения экстракта неизбежны потери димексида, так как он является высококипящим веществом (tкип.+189°С) и трудно отделимым от шрота. Рекуперация димексида острым паром невозможна, в связи с его физико-химическими свойствами.
4. Димексид является более дорогостоящим экстрагентом растительного сырья по сравнению с традиционно применяемым - спиртом этиловым и его смесями с водой.
5. Полиэтиленоксиды, входящие в препарат, вступают в межмолекулярные взаимодействия с биологически активными веществами растений и активными центрами антибактериальных компонентов, образуют сольватные оболочки на их поверхности, что затрудняет их биологическую доступность и снижает фармакологическую активность.
6. Термическое воздействие на антибактериальные компоненты (особенно антибиотики и сульфаниламиды) приводит к частичной потере основного эффекта.
7. Прототип может использоваться только как антибактериальное средство. Он не обладает местноанестезирующим и противовоспалительным действием.
8. Отсутствие параметров стандартизации и возможности контроля качества антибактериального средства.
Целью изобретения является состав и способ получения средства с антимикробным, противовоспалительным и анестезирующим действием для лечения воспалительных заболеваний, вызванных патогенными микроорганизмами.
Цель достигается тем, что в качестве антимикробного и противовоспалительного компонента в препарате используется сухой экстракт вероники дубравной Veronica chamaedrys L. (сем. Scrophulariaceae). Экстракт вероники дубравной содержит большой набор биологически активных веществ (флавоноиды, иридоиды, фенолокислоты и др.) и обладает сильным антимикробным, противовоспалительным и Р-витаминным действием, что делает его целесообразным компонентом комплексного препарата [Гусев Н.Ф. Вероники Кунгурско-Красноуфимской лесостепи Предуралья и перспективы их использования: Автореф. дисс. канд. биол. наук. - Пермь, 1976; Растительные ресурсы СССР Семейства Caprifoliaceae - Plantaginaceae. - Л.: Наука, 1990].
Обезболивающий эффект в препарате обуславливается анилокаином - анестетиком отечественного производства, сочетающим в себе высокую анестезирующую активность с умеренным противовоспалительным действием [Панцуркин В.В., Алексеева И.В. Анилокаин, поиск, свойства. Начальный опыт применения лекарственных форм в медицинской практике / В.И.Панцуркин, И.В.Алексеева. - Пермь: 2006. - 174 с.].
В качестве растворителя и средообразующего вещества используется смесь димексида и воды очищенной (1:1) в терапевтической концентрации [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Медицина, 1993, Т.1, с.222], что позволяет получать препарат, готовый к употреблению. Димексид является универсальным растворителем, растворяющим как липофильные, так и гидрофильные вещества, обладает проводниковой активностью и способствует проведению биологически активных веществ вероники дубравной внутрь органов и тканей.
Сущность изобретения
10 г сухого экстракта из травы вероники дубравной, полученного по способу [Патент RU 2220735], растворяют в 85 г смеси димексида (ФС 42-2980-98) и воды очищенной, в соотношении 1:1 в плоскодонной колбе при температуре 100°С в течение 15 мин, при перемешивании. Раствор охлаждают до комнатной температуры, добавляют 5 г анилокаина (ВФС 42-2846-97) и растворяют в течение 5 мин, при легком перемешивании. Жидкость процеживают через три слоя марли и получают готовый препарат. Изобретение иллюстрируют следующим примером.
Пример. 10 г сухого экстракта из травы вероники дубравной (Veronica chamaedrys L.) растворяют в 85 г смеси димексида и воды очищенной в соотношении 1:1 в плоскодонной колбе при температуре 100°С в течение 15 мин при перемешивании. Раствор охлаждают до комнатной температуры, добавляют 5 г анилокаина и растворяют в течение 5 мин при легком перемешивании. Жидкость процеживают через три слоя марли и получают готовый препарат.
Препарат представляет собой прозрачную жидкость, темно-коричневого цвета, специфического запаха (запах ДМСО), смешивается с водой и спиртом этиловым в любых соотношениях.
Параметры подлинности и качества препарата
Подлинность препарата подтверждается качественными реакциями, хроматографическими пробами и УФ-спектральными характеристиками.
1. Реакции подлинности на содержание биологически активных веществ вероники дубравной и анилокаина:
а) Флавоноиды
К 1 мл препарата добавляют 1 мл воды очищенной, 10 мг кристаллического магния и 5 капель кислоты хлористо-водородной концентрированной, нагревают на кипящей водяной бане 3 мин, появляется красно-коричневое окрашивание (проба Синода);
б) Иридоиды
К 1 мл препарата добавляют 1 мл воды очищенной и 5 капель реактива Шталя (1 г п-диметиламинобензальдегида, 5 г кислоты фосфорной и 50 г кислоты уксусной ледяной, разбавленной водой до 100 мл), доводят до кипения на водяной бане, появляется синее окрашивание;
в) Фенолкарбоновые кислоты
К 1 мл препарата добавляют 1 мл воды очищенной и 5 капель 1% водного раствора квасцов железоаммониевых, нагревают на кипящей водяной бане в течение 5 мин, появляется осадок черного цвета;
г) Анилокаин
К 1 мл препарата добавляют 1 мл воды очищенной и 5 капель 10% водного раствора натрия гидроксида, нагревают на кипящей водяной бане 1 мин, выпадает осадок темно-коричневого цвета.
Специфичность проб подлинности подтверждается реакциями на модельной смеси, состоящей из водного раствора димексида (50%) с анилокаином, взятых в одинаковых с препаратом пропорциях (табл.1).
2. Хроматографическая характеристика флавоноидов
На лист хроматографической бумаги марки «Ленинградская - С» размером 30×40 см наносят 0,1 мл препарата и хроматографируют в стеклянной камере восходящим методом в системе растворителей бутанол - кислота уксусная - вода (4:1:2) в течение 17 часов (первое направление). Хроматограмму вынимают из камеры, высушивают, поворачивают на 90° таким образом, чтобы флавоноиды, распределившиеся в первом направлении, были внизу, помещают в 15% раствор кислоты уксусной, где выдерживают в течение 8 часов (второе направление). По истечении времени хроматограмму вынимают из камеры, высушивают и просматривают в УФ-свете до и после обработки парами аммиака, а также обрабатывают хромогенными реактивами - 1% спиртовым раствором алюминия хлоридом и 3% спиртовым раствором цирконила нитратом. Результаты хроматографического анализа представлены в таблице 2.
На основании люминесцентно-хроматографических свойств и реакций с хромогенными реактивами установлено, что в препарате с экстрактом вероники дубравной содержится шесть веществ флавоноидной природы. Значение коэффициентов распределения (Rf) этих веществ служит показателем подлинности препарата.
3. УФ-спектральная характеристика
УФ-спектры препарата в разведении 1:2000 представлены в таблице 3. Как следует из полученных данных, в УФ-спектрах препарата присутствует два максимума - коротковолновый 240 нм и длинноволновый 316 нм. При добавлении хромогенного реактива (AlCl3) наблюдается гипсохромный сдвиг коротковолнового максимума поглощения (Δλ=17 нм) и батохромный длинноволнового (Δλ=12 нм). Изменения в УФ-спектрах подтверждают наличие флавоноидов в препарате и участие их в реакциях комплексообразования.
Совместное добавление комплексообразующего (AlCl3) и ионизирующего (CH3COONa) агентов, за счет сольватационных эффектов, приводит к еще более значительному батохромному сдвигу длинноволнового максимума.
В дифференциальном спектре препарата с алюминия хлоридом и натрия ацетатом присутствует также два максимума. Длинноволновый максимум (388 нм) находится в области спектра, свободной от поглощения простых фенольных соединений (простых фенолов, гидроксикоричных кислот, кумаринов и др.) и может использоваться как для подтверждения подлинности, так и для разработки метода количественного определения флавоноидов в препарате.
4. Количественное определение флавоноидов
В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г препарата (точная навеска), доводят до метки водой очищенной (раствор А). 5 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, добавляют 2 мл 2% спиртового раствора алюминия хлорида и 2 мл 8% спиртового раствора натрия ацетата, доводят объем раствора до метки водой очищенной, через 30 мин измеряют оптическую плотность на спектрофотометре СФ-2000 (или другой марки) при длине волны 388 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 5 мл раствора А, доведенного водой очищенной до метки в мерной колбе объемом 50 мл.
Содержание флавоноидов в % (X) в пересчете на цинарозид вычисляют по формуле:
где D - оптическая плотность исследуемого раствора; 
- удельный показатель поглощения комплекса цинарозида с реактивами при λ388=428; а - точная навеска препарата, г.
Содержание флавоноидов в препарате составляет 0,71±0,06%.
5. Содержание анилокаина
0.5 мл препарата разводят в 10 мл 0,05 М раствора кислоты хлористоводородной в воде, добавляют 5 мл хлороформа и 1-2 капли смешанного индикатора диметилового желтого с метиленовым синим в соотношении 2:1. Титруют 0,01 М раствором натрия лаурилсульфата до появления оранжевой окраски хлороформного слоя.
Содержание анилокаина в % (X) вычисляют по формуле:
где Т - титр 0,01 М раствора натрия лаурилсульфата по анилокаину = 0,003357 г/мл;
V - объем титранта, мл;
Кп - коэффициент поправки титранта, вычисляется согласно ВФС 42-2846-97;
а - навеска препарата, мл.
Содержание анилокаина в препарате составляет 5,0±0,3%.
6. Содержание димексида
Концентрация димексида в препарате определяется по значению плотности. Нами установлена линейная зависимость плотности от концентрации димексида в интервале 20-60% в модельной смеси и препаратах, включающих сухой экстракт с влажностью 5%.
Уравнение линейной регрессии, описывающее эту зависимость, используется для определения концентрации димексида.
Количественное содержание димексида в % (X) в препарате находят по формуле:
где ρ - плотность препарата, г/см3.
Содержание димексида в препарате составляет 50,0±5,0%.
7. Физико-химические параметры
Значения плотности составляет 1,1188±0,0011 г/см3, показателя преломления 1,4305±0,0030 и сухого остатка 12,4±0,5% и устанавливаются по методикам ГФ XI [Государственная фармакопея СССР, вып.1, М., 1987, 336 с].
8. Фармакологическая активность
Для подтверждения фармакологической активности заявленного состава на противовоспалительную и противомикробную активность испытаны препараты сравнения, содержащие экстракты из других растений семейства Норичниковые (Очанки и Зубчатки), а также димексид и смесь димексида с анилокаином. Все компоненты в испытанных образцах взяты в одинаковых с препаратом соотношениях.
а) Противовоспалительная активность
Оценку противовоспалительной активности препарата проводили на беспородных крысах обоего пола массой 180-200 г по общепринятой методике [Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению нестероидных противовоспалительных фармакологических веществ, 1982];
Асептическое воспаление конечностей вызывали субплантарным введением в правую заднюю лапу крысы 0,1 мл 1% раствора карагенина. Препарат вводили внутрибрюшинно в дозе 50 мл/кг в 1 мл воды очищенной за один час до моделирования воспаления. Животным контрольной группы в равном объеме вводили воду очищенную. Через 1 и 3 часа после введения карагенина определяли величину отека онкометрическим методом, по разности между объемами воспаленной и невоспаленной лапок животных. Статистическую обработку данных фармакологического эксперимента проводили по критерию Стьюдента. Эффект считали достоверным при р≤0,05 [Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта, 2-е изд., Л.: Медицинская литература, 1963].
Как следует из полученных данных (табл.4), препарат с экстрактом вероники дубравной, на пике воспаления (3 часа), обладает наивысшей активностью. Он тормозит воспалительный процесс на 63% по сравнению с контролем.
Препараты сравнения в аналогичных условиях менее активны. Сила противовоспалительного действия средства с экстрактом зубчатки обыкновенной ниже заявляемого препарата на 30%, а с экстрактом очанки коротковолосистой на 50%. Противовоспалительный эффект модельной смеси (анилокаин с 50% раствором димексида в воде) составляет 14% и является статистически недостоверным. Раствор димексида в воде (50%) на данной модели воспаления практически не оказывает антиотечного действия;
б) Антимикробная активность
Определение противомикробного действия препаратов проводили по методике, рекомендованной Государственной Фармакопеей 11 издания [Государственная фармакопея СССР: Вып.2 - М.: Медицина, 1989. - 398 с. ил.]. Была исследована активность в отношении штаммов из коллекции Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А.Тарасевича (Москва): Escherichia coli АТСС 25922, Staphylococcus aureus АТСС 6538-Р. Готовили двукратные разведения образцов препаратов, используя мясопептонный бульон.
Культуры Е. coli, St. aureus выращивали на жидкой питательной среде при температуре 30-35°С в течение 18-20 часов. Готовили разведение культур 1:1000, используя стерильный 0,9% раствор натрия хлорида изотонический. В приготовленные разведения образцов вносили взвесь каждого тест-штамма из расчета 1 мл взвеси на 10 мл разведения. Параллельно готовили контроли среды и испытуемых культур микроорганизмов, без добавления препаратов.
Разведения препаратов с внесенными в них микроорганизмами и контрольные образцы выдерживали в течение 18-20 часов при температуре 30-35°С. Учет результатов проводили по отсутствию визуальных признаков роста микроорганизмов (бактериостатическая активность) и отсутствию роста микроорганизмов на плотной питательной среде (мясопептонный агар) после высева соответствующего разведения препарата (бактерицидная активность). Результаты представлены в таблице 5.
Бактериостатическая активность препарата с экстрактом вероники дубравной в отношении золотистого стафилококка и кишечной палочки в два раза выше по сравнению с препаратом на основе экстракта очанки и в семь раз выше по сравнению с препаратом на основе экстракта зубчатки.
Бактерицидная активность, в отношении St. aureus, препаратов с экстрактами вероники и очанки одинакова и во много раз превышает активность препарата с экстрактом зубчатки. Бактерицидное действие на Е. coli у препарата с экстрактом вероники выше, чем у препаратов сравнения в 4-15 раз.
9. Сравнение с прототипом
Сравнительная характеристика заявленного состава средства и способа его получения с прототипом представлена в таблице 6.
Состав средства, несмотря на общую концепцию создания, существенно отличается от прототипа. Он позволяет реализовать комплексное действие средства (противомикробное, анестезирующее, противовоспалительное). В качестве антибактериального компонента в заявляемом средстве выступает нетоксичный комплекс биологически активных веществ вероники дубравной, а в прототипе синтетические продукты - антибиотики, сульфаниламиды, производные нитрофурана.
Способ получения позволяет:
- получить средство с антимикробной, местноанестезирующей и противовоспалительной активностью, готовое непосредственно к применению;
- исключить длительное нагревание и разрушение природных биологически активных веществ в ходе получения;
- контролировать технологические стадии получения и стандартизовать целевой продукт;
- исключить потери средообразующего вещества - димексида;
- исключить использование специального технологического оборудования.
Технический результат от использования изобретения заключается в повышении эффективности средства за счет включения в состав экстракта вероники дубравной, местного анестетика и димексида.
Вышеуказанные преимущества в сочетании с простой схемой получения, исключающей загрязнение окружающей среды отходами производства, способствуют рациональному использованию лекарственного растительного сырья, расширяют ассортимент лекарственных средств для лечения заболеваний мышц и опорно-двигательного аппарата и открывают перспективу внедрения данного препарата в фармацевтическую промышленность.
Литература
1. Антибактериальное средство и способ его получения. Патент RU №2088246 от 20.07.1993.
2. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта, 2-е изд.. Л.: Медицинская литература, 1963.
3. Временная фармакопейная статья «Анилокаин» 42-2846-97.
4. Государственная фармакопея СССР, вып.1, М., 1987, 336 с.
5. Государственная фармакопея СССР: Вып.2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. - 11 изд., доп. - М.: Медицина, 1989. - 398 с., ил.
6. Гусев Н.Ф. Вероники Кунгурско-Красноуфимской лесостепи Предуралья и перспективы их использования: Автореф. дисс. канд. биол. наук / Н.Ф.Гусев. - Пермь, 1976.-26 с.
7. Лекарственный препарат и способ лечения заболеваний опорно-двигательного аппарата, периферической нервной системы и кожных покровов Патент RU №2261720 от 16.04.2004.
8. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению нестероидных противовоспалительных фармакологических веществ. Одобрено фармакологическим комитетом МЗ СССР, 1982.
9. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Медицина, 1993, T.1, с.222.
10. Панцуркин В.В., Алексеева И.В. Анилокаин, поиск, свойства. Начальный опыт применения лекарственных форм в медицинской практике / В.В.Панцуркин, И.В. Алексеева. - Пермь: ГОУ ВПО «ПГФА Росздрава», 2006. - 174 с.
11. Растительные ресурсы СССР: цветковые растения, их химический состав, использование. Семейства Caprifoliaceae - Plantaginaceae. - Л.: Наука, 1990. - 362 с.
12. Способ получения средства, обладающего противовоспалительной и гипотензивной активностью. Патент RU №2220735 от 10.01.2004.
13. Фармакопейная статья «Димексид» 42-2980-98.
| Таблица 2 | ||||||
| Люминесцентно-хроматографическая характеристика флавоноидов, содержащихся в препарате | ||||||
| № | Rf | Rf | Окраска пятен | |||
| пятна | БУВ (4:1:2) | 15%СН3СООН | УФ | УФ+NH3 | AlCl3 | ZrO(NO3)2 |
| 1 | 0,14 | 0,69 | фиолетовая | темно-фиолетовая | желто-коричневая | --- |
| 2 | 0,14 | 0,54 | --- | желто-зеленая | желто-зеленая | бледно-желтая |
| 3 | 0,16 | 0,38 | темно-фиолетовая | темно-фиолетовая | желтая | сиреневая |
| 4 | 0,24 | 0,37 | бледно-фиолетовая | желто-коричневая | желтая | темно-желтая |
| 5 | 0,30 | 0,37 | фиолетовая | салатная | желтая | красно-фиолетовая |
| 6 | 0,47 | 0,15 | темно-фиолетовая | желтая | желтая | желтая |
| Таблица 3 | ||||
| УФ-спектральная характеристика препарата | ||||
| * | Препарат | Препарат+AlCl3 | Препарат+AlCl3+CH3COONa | |
| ** | Димексид (50%) | Димексид (50%) | Димексид (50%) | Препарат |
| λмакс. | λмакс. | λмакс. | λмакс. | |
| 240 | 223 | 226 | 229 | |
| 316 | 328 | 369 | 388 | |
| Примечание: * рабочий раствор; ** раствор сравнения. |
| Таблица 4 | |||||
| Противовоспалительная активность заявляемого препарата, модельных смесей и препаратов сравнения | |||||
| №п/п | Препарат | Доза, мг/кг | Число животных | Торможение отека | |
| при внутрибрюшинном введении, % | |||||
| через 1 час | через 3 часа | ||||
| 1 | С экстрактом вероники | 50 | 6 | 30* | 63* |
| 2 | С экстрактом зубчатки | 50 | 6 | 39* | 42* |
| 3 | С экстрактом очанки | 50 | 6 | 10 | 30* |
| 4 | Димексид (50%)+анилокаин | 50 | 6 | 14 | 14 |
| 5 | Димексид (50%) | 50 | 6 | 0 | 0 |
| 6 | Контроль (вода) | --- | 7 | --- | --- |
| Примечание: * при р<0,05. |
| Таблица 5 | |||||
| Противомикробная активность заявляемого препарата, модельных смесей и препаратов сравнения | |||||
| №и/и | Препарат | Разведение | |||
| Е. coli | St. aureus | ||||
| бактериостатическая | бактерицидная | бактериостатическая | бактерицидная | ||
| 1 | С экстрактом вероники | 1:2560 | 1:1280 | 1:2560 | 1:1280 |
| 2 | С экстрактом зубчатки | 1:320 | 1:160 | 1:160 | 1:80 |
| 3 | С экстрактом очанки | 1:1280 | 1:1280 | 1:1280 | 1:320 |
| 4 | Димексид (50%)+анилокаин | -* | 1:20 | - | 1:10 |
| 5 | Димексид (50%) | - | 1:10 | - | 1:10 |
| Примечание: -* -активность не установлена. |
1. Средство, обладающее антимикробным, противовоспалительным и анестезирующим действием, содержащее активное вещество и димексид, отличающееся тем, в качестве активного вещества оно содержит сухой экстракт травы вероники дубравной; дополнительно включает анестетик - анилокаин, а димексид входит в состав в виде смеси с водой очищенной в соотношении 1:1, при следующем содержании компонентов, г:
| Сухой экстракт вероники дубравной | 10 |
| Анилокаин | 5 |
| Смесь димексида и воды очищенной (1:1) | 85 |
2. Способ получения средства по п.1, состоящий в том, что растворяют сухой экстракт травы вероники дубравной в смеси, содержащей димексид и воду очищенную в соотношении 1:1, при температуре 100°С в течение 15 мин при перемешивании, далее раствор охлаждают до комнатной температуры, добавляют анилокаин при перемешивании и процеживают.
