Способ оптимизации активности протеина с при анемии у новорожденных телят и поросят
Владельцы патента RU 2403022:
Медведев Илья Николаевич (RU)
Беспарточный Борис Дмитриевич (RU)
Изобретение относится к области биологии. Способ включает применение ферроглюкина по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двукратно с интервалом 10 суток, фоспренила внутримышечно, двукратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,07 мл/кг через шесть дней после первой инъекции ферроглюкина, и крезацина 4 мг/кг при включении его в схему выпаивания на 10 суток. Способ позволяет оптимизировать активность протеина С у новорожденных телят и поросят с анемией через 2 суток после окончания лечения, поддерживать его в оптимальном состоянии, снизить риск тромботических осложнений, оздоровить стадо, увеличить привесы, снизить падеж и повысить качество и объем получаемой мясной продукции. 1 табл.
Изобретение относится к биологии и ветеринарии, а именно к гематологии.
Аналогов предлагаемого способа оптимизации активности протеина С у новорожденных телят и поросят с анемией не существует.
В литературе имеются сведения о применении при анемии у телят и поросят ферроглюкина (Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных. / Под ред. В.М.Данилевского. М.: «Агропромиздат», 1991. - 576 с.).
В качестве эффективных стимуляторов жизнедеятельности растущего организма в современной ветеринарии применяются фоспренил - препарат на основе фосфатов полипренолов, получаемых из хвои (Деева А.В., Салахова З.А., Лобова Т.П. и др. Повышение сохранности и продуктивности поросят при использовании фоспренила и гамавита. // Ветеринария. - 2006. - №4. - С.13-15), и крезацин (производное ароксиалкилкарбоновых кислот) - эффективный стимулятор живых организмов, повышающий выживаемость животных в неблагоприятных и экстремальных условиях, стимулируя или нормализуя жизненные процессы (Байматов В.П., Латыпов М.М. Влияние крезацина на состояние птицы. Ветеринария, 2006, №11, с.49-51).
Однако никогда ранее лечебный комплекс, состоящий из ферроглюкина, фоспренила и крезацина, не применялся у новорожденных телят и поросят с анемией с целью оптимизации активности протеина С.
Целью изобретения является повышение эффективности коррекции нарушений активности протеина С у новорожденных телят и поросят с анемией.
Протеин С - синтезируемый в гепатоцитах витамин K-зависимый гликопротеин, циркулирующий в крови в виде профермента. Под действием комплекса тромбин-тромбомодулин (или активатора из змеиного яда) протеин С активируется и действует как антикоагулянт, вызывая протеолиз факторов Va и VIIIa в присутствии своего кофактора - протеина S и фосфолипидов. При тромбофилиях у новорожденных телят и поросят, в т.ч. при анемии, нарушения в системе гемостаза могут быть обусловлены дефицитом протеина С.
Сущность заявляемого способа заключается в том, что для оптимизации активности протеина С новорожденным телятам и поросятам с анемией назначается ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двукратно с интервалом 10 суток, фоспренил внутримышечно, двукратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,07 мл/кг через шесть дней после первой инъекции ферроглюкина, и крезацин 4 мг/кг при включении его в схему выпаивания на 10 суток.
Способ позволяет оптимизировать активность протеина С у новорожденных телят и поросят с анемией через 2 суток после окончания лечения, переводя его на уровень, близкий к таковому для здоровых животных. При соблюдении рекомендаций заявляемого способа возможно поддержание в дальнейшем активности протеина С в оптимальном состоянии, что позволит у новорожденных телят и поросят с анемией существенно снизить риск тромботических осложнений, оздоровить стадо, увеличить привесы, снизить падеж и повысить качество и объем получаемой мясной продукции.
Заявляемый способ осуществляется следующим образом.
Для диагностики у новорожденных телят и поросят с анемией нарушения уровня в крови протеина С проводится его оценка по следующей методике (Баркаган З.С., Момот А.П. Основы диагностики нарушений гемостаза. М, 1999. - С.118-120).
Протеин С в образцах исследуемой плазмы активируют специфическим активатором из яда щитомордника - Agkistrodon contortrix. Активированный при этом протеин С вызывает протеолиз факторов Va и VIIIa в дефицитной по протеину С плазме. Последнее приводит к удлинению времени свертывания, по которому оценивается активность протеина С в исследуемом образце. Активность протеина С, выраженную в процентах к норме, находят по предварительно построенной калибровочной кривой.
Используются реактивы: 1. Активатор протеина, лиофилизированный, разводится 3 мл дистиллированной воды. 2. Плазма, дефицитная по протеину С, лиофилизированная, разводится в 1 мл дистиллированной воды. 3. Neothromtin, лиофилизированный - аналог каолин-кефалинового реагента, содержащий взамен каолина эллаговую кислоту и фосфолипиды, разводится 3 мл дистиллированной воды.
Кроме того, требуются мединаловый буфер (рН 7,6), использующийся для разведения образцов исследуемой и стандартной плазмы, и раствор хлорида кальция (0,025 М). Для построения калибровочной кривой необходима также стандартная фирменная или контрольная нормальная плазма с известной активностью протеина С или пулированная (взятая не менее чем от 10 здоровых телят или соответственно поросят), активность протеина С в которой принимается за 100%.
Материалом для исследования служит цитратная бедная тромбоцитами плазма.
Перед проведением анализа исследуемая плазма разводится мединаловым буфером в 10 раз.
В пробирку (или кювету коагулометра), подогретую до +37°С, вносят предварительно прогретые при той же температуре 0,1 мл разведенной (1:10) плазмы, 0,1 мл плазмы, дефицитной по протеину С, 0,1 мл активатора протеина С и 0,1 мл аналога каолин-кефалинового реагента. Смесь выдерживают на водяной бане при
+37°С в течение 4 мин. Затем к смеси добавляют 0,1 мл раствора хлорида кальция, предварительно подогретого до 37°С, включают секундомер или таймер коагулометра и регистрируют время свертывания.
Результаты оцениваются по калибровочной кривой.
Построение калибровочной кривой. Приготавливают серию разведений пула контрольной плазмы или стандартной фирменной плазмы при помощи мединалового буфера (табл.).
| Схема приготовления разведений плазмы для построения калибровочной кривой при определении активности протеина С | |||
| № | Протеин С, % | Разведение | Получение разведений |
| 1 | 200 | 1:5 | 0,2 мл плазмы + 0,8 мл буфера |
| 2 | 100 | 1:10 | 0,1 мл плазмы + 0,9 мл буфера |
| 3 | 50 | 1:20 | 0,1 мл плазмы + 1,9 мл буфера |
| 4 | 20 | 1:50 | 0,1 мл разведения №1 + 0,9 мл буфера |
| 5 | 10 | 1:100 | 0,1 мл разведения №2 + 0,9 мл буфера |
С каждым из образцов разведенной плазмы определяют время свертывания по указанной выше методике.
При построении калибровочной кривой по логарифмической оси ординат откладывают время свертывания в секундах, по логарифмической оси абсцисс - активность протеина С в % в соответствии с указанными в таблице разведениями.
В норме активность протеина С составляет 70-140%.
При установлении снижения активности протеина С новорожденным телятам и поросятам с анемией необходимо назначать следующий лечебный комплекс.
Сущность заявляемого способа заключается в том, что для оптимизации активности протеина С новорожденным телятам и поросятам с анемией назначается ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двукратно с интервалом 10 суток, фоспренил внутримышечно, двукратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,07 мл/кг через шесть дней после первой инъекции ферроглюкина, и крезацин 4 мг/кг при включении его в схему выпаивания на 10 суток.
Пример 1. У новорожденного теленка с анемией №07 при обследовании было выявлено снижение активности протеина С - 55%. Так, количество гемоглобина у него составляло 81,0 г/л, эритроцитов 4,01×1012/л, сидероцитов 1,0% при уровне железа в сыворотке 12,2 мкмоль/л с повышением общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 67,0 мкмоль/л.
Теленку был назначен ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двукратно с интервалом 10 суток, фоспренил внутримышечно, двукратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,07 мл/кг через шесть дней после первой инъекции ферроглюкина, и крезацин 4 мг/кг при включении его в схему выпаивания на 10 суток.
Через 2 суток после окончания лечения у теленка улучшились показатели красной крови. Так, количество гемоглобина у него возросло до 126,0 г/л, эритроцитов - до 4,92×1012/л, сидероцитов до 8,0% при увеличении железа в сыворотке до 26,6 мкмоль/л и снижении общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 32,4 мкмоль/л.
Было получено увеличение уровня активности протеина С (84%) до нормы, в дальнейшем оставшегося на достигнутом уровне.
Пример 2. У новорожденного поросенка с анемией №17 при обследовании было выявлено снижение активности протеина С - 59%.
У данного поросенка отмечалось нарушение эритропоэза с признаками снижения уровня содержания железа в его организме, сопровождавшееся изменением показателей крови. Так, количество гемоглобина у него составляло 79,0 г/л, эритроцитов 3,96×1012/л, сидероцитов 1,1% при уровне железа в сыворотке 12,0 мкмоль/л с повышением общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 68,2 мкмоль/л.
Животному был назначен ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двукратно с интервалом 10 суток, фоспренил внутримышечно, двукратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,07 мл/кг через шесть дней после первой инъекции ферроглюкина, и крезацин 4 мг/кг при включении его в схему выпаивания на 10 суток.
Через 2 суток после окончания лечения у поросенка нормализовалась красная кровь. Так, количество гемоглобина у него возросло до 120,7 г/л, эритроцитов - до 5,36×1012/л, сидероцитов до 8,3% при увеличении железа в сыворотке до 28,3 мкмоль/л и снижении общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 32,0 мкмоль/л.
Была достигнута полная нормализация активности протеина С (109%), в дальнейшем не испытавшая отрицательной динамики.
Использование предлагаемого способа оптимизации активности протеина С в ветеринарии и биологии поможет избежать многих сосудистых осложнений у новорожденных телят и поросят с анемиией, оздоровить стадо, снизить падеж, увеличить привесы, повысить качество и объем получаемой мясной продукции и получать в дальнейшем от этих телят и поросят здоровое потомство.
Способ оптимизации активности протеина С у новорожденных телят и поросят с анемией путем применения ферроглюкина по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двукратно с интервалом 10 суток, фоспренила внутримышечно, двукратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,07 мл/кг через шесть дней после первой инъекции ферроглюкина и крезацина 4 мг/кг при включении его в схему выпаивания на 10 суток.
