Вакцина против колибактериоза кроликов
Владельцы патента RU 2404802:
Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Кубанский государственный аграрный университет (RU)
Изобретение относится к области ветеринарной медицины. Вакцина в качестве антигена содержит суспензию клеток чистой культуры возбудителя Escherichia coli О35, полученной путем отбора пораженных органов от павших кроликов из местного эпизоотического очага, приготовления суспензии, посева на дифференциально-диагностические среды, выделения чистой культуры возбудителя и выращивания в мясо-пептонном бульоне до концентрации микробных клеток 5-6 млрд в 1 см3, формалин и гидроокись алюминия при следующем соотношении компонентов, мас.%: суспензия клеток чистой культуры возбудителя Escherichia coli 035 в мясо-пептонном бульоне с титром 5-6 млрд микробных клеток в 1 см3 - 83,0-85,5, формалин - 1,0-2,0, гидроокись алюминия - остальное. Полученная вакцина безвредна, высокоиммуногенна, специфична, стабильна при хранении. 1 табл.
Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к вакцинам, и может быть использовано в учреждениях, занимающихся конструированием биологических препаратов, а также на предприятиях биологической промышленности.
Известны вакцина против сальмонеллеза кур и способ профилактики сальмонеллеза кур, содержащая суспензию клеток вакцинного штамма Salmonella enteritidis ВГНКИ 204 с концентрацией живых микробных клеток 175-250 млрд в 1 см3 при следующем соотношении компонентов, об.%:
| суспензия клеток штамма Salmonella enteritidis | |
| ВГНКИ 204 с концентрацией живых микробных | |
| клеток 175-250 млрд в 1 см3 | 42,0-55,0 |
| сахароза | 5,0-7,5 |
| желатин | 1,5-2,0 |
| дистиллированная вода | остальное |
Для профилактики сальмонеллеза кур эту вакцину вводят цыплятам 2-3-дневного возраста с водой путем выпаивания из расчета 0,5-1,0 млрд микробных клеток на одного цыпленка, двукратно с интервалом 48 ч после 18-24-часовой голодной выдержки (патент РФ №2030916 от 07.04.92, МКИ А61K 39/125, 39/135), для нутрий не применяется.
Известна вакцина против стрептококкоза нутрий (патент РФ на изобретение №2099082 от 30.09.94, МКИ А61K 39/125, 39/135). Данная вакцина содержит в качестве антигена суспензию штамма Streptococcus zooepidemicus ВГНКИ №К-ДЕП с титром 4,0-6,0 млрд микробных клеток в 1 см3 в культуральной среде, глюкозу, формалин и гидроокись алюминия.
Данная вакцина применяется для профилактики стрептококкоза нутрий. Сырье получают путем культивирования штамма возбудителя стрептококкоза нутрий в питательной среде с низкой активностью. Эта вакцина может вызывать у привитых животных различные поствакцинальные осложнения (воспалительные процессы, абсцессы на месте введения, хромоту и др.).
Техническим решением задачи изобретения является устранение перечисленных недостатков, в частности, повышение специфичности и иммуногенности вакцины против колибактериоза кроликов, стабильной при хранении, путем введения новой культуры возбудителя и эффективных компонентов.
Решение задачи достигается тем, что вакцина против колибактериоза кроликов, включающая инактивированный антиген, адъювант, в качестве антигена содержит суспензию клеток чистой культуры возбудителя Escherichia coli О35, полученной путем отбора пораженных органов от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготовления суспензии, посева на дифференциально-диагностические среды, выделения чистой культуры возбудителя и выращивания в мясо-пептонном бульоне с глюкозой до концентрации микробных клеток 5-6 млрд в 1 см3, формалина и гидроокиси алюминия при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензия клеток чистой культуры | |
| возбудителя Escherichia coli О35 | |
| в мясо-пептонном бульоне с титром | |
| 5-6 млрд микробных клеток в 1 см3 | 83,0-85,5 |
| формалин | 1,0-2,0 |
| гидроокись алюминия | остальное |
Новизна заявляемого технического решения обусловлена тем, что в отличие от известных вакцин для получения сырья проводят отбор пораженных органов от павших кроликов из местного эпизоотического очага, приготовление суспензии, посев на дифференциально-диагностические среды, выделение чистой культуры возбудителя Escherichia coli О35 и выращивание его в мясо-пептонном бульоне, что позволяет повысить специфичность, иммуногенность вакцины и получать концентрацию микробных клеток не менее 5-6 млрд в 1 см3. Инактивирование баксырья формалином в 0,4-0,5%-ной конечной концентрации при температуре 37°С в течение 48-72 часов при периодическом перемешивании позволяет подавить патогенность возбудителя и сохранить иммуногенные свойства в течение 12 месяцев. Использование 3%-ного раствора гидроокиси алюминия в количестве 20% к объему и тщательное смешивание не вызывает у привитых кроликов поствакцинальных осложнений, позволяет обеспечить формирование напряженного иммунитета через 12-15 суток после однократного внутримышечного или подкожного введения продолжительностью не менее 9 месяцев (срок наблюдения).
По данным научно-технической и патентной литературы не обнаружена аналогичная совокупность признаков, компонентов, что позволяет судить об изобретательском уровне заявленного технического решения.
Что касается критерия «промышленная применимость», то компоненты, входящие в состав вакцины, известны и широко применяются в ветеринарной практике при изготовлении инактивированных вакцин (инструкция по изготовлению и контролю формолвакцины поливалентной гидроокисьалюминиевой против колибактериоза (эшерихиоза) поросят, телят и ягнят, утвержденная ГУВ МСХ СССР 26.04.1984 г.; инструкция по изготовлению и контролю вакцины против брадзота, инфекционной энтеротоксемии, злокачественного отека овец и дизентерии ягнят, поливалентная концентрированная гидроокисьалюминиевая, утвержденная Главным управлением ветеринарии с государственной ветеринарной инспекцией 10.10.1991 г.).
Предложенная вакцина против колибактериоза кроликов проста в исполнении, доступна и является промышленно применимой.
Вакцина против колибактериоза кроликов содержит инактивированную формалином чистую культуру возбудителя Escherichia coli О35, адсорбированную на гидрате окиси алюминия. По внешнему виду вакцина представляет собой жидкость светло-желтого цвета с рыхлым осадком, который при встряхивании легко разбивается в гомогенную взвесь. Срок хранения в сухом, темном месте при температуре от 2 до 10°С 1 год. Вакцина против колибактериоза кроликов предназначена для профилактики колибактериоза кроликов. Она вызывает образование специфического иммунитета против колибактериоза кроликов. Вакцина безвредна и ареактогенна. Иммунитет у кроликов, привитых вакциной против колибактериоза, формируется через 12-15 суток после вакцинации и сохраняется не менее 9 месяцев. Вакцину применяют в благополучных, неблагополучных и угрожаемых по колибактериозу кроликов хозяйствах. В благополучных, неблагополучных и угрожаемых по колибактериозу хозяйствах вакцину вводят однократно внутримышечно в область бедра молодняку с 1,5-месячного возраста по 1,0 см3. Продукты убоя вакцинированных кроликов используют без ограничений независимо от сроков вакцинации.
К факторам, обуславливающим получение вакцины заданного свойства, относятся последовательность изготовления и процентное соотношение между компонентами, входящими в препарат. Приведено пять примеров, содержащих компоненты в различных соотношениях на 100 см3 вакцины.
Пример 1
Берут пораженные органы от павших кроликов из местного эпизоотического очага, приготавливают суспензию из патологического материала, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистую культуру возбудителя Escherichia coli О35, заражают мясо-пептонный бульон, культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию клеток чистой культуры 82,0 с титром 5-6 млрд микробных клеток в 1 см3, инактивируют внесением формалина 0,9, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензия клеток чистой культуры возбудителя | |
| Escherichia coli О35, выделенная из пораженных | |
| органов от павших кроликов из местного | |
| эпизоотического очага при колибактериозе в | |
| мясо-пептонном бульоне с титром 5-6 млрд в 1 см3 | 82,0 |
| формалин | 0,9 |
| гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина против колибактериоза кроликов обладает незначительной эффективностью, может у отдельных животных вызывать слабое раздражение на месте введения.
Пример 2
Берут пораженные органы от павших кроликов из местного эпизоотического очага, приготавливают суспензию из патологического материала, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистую культуру возбудителя Escherichia coli О35, заражают мясо-пептонный бульон, культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию микробных клеток чистой культуры 83,0 с титром 5-6 млрд микробных клеток в 1 см3, инактивируют внесением формалина 1,0, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензия клеток чистой культуры возбудителя | |
| Escherichia coli О35, выделенной из местного | |
| эпизоотического очага в мясо-пептонном бульоне | |
| с титром 5-6 млрд микробных клеток в 1 см3 | 83,0 |
| формалин | 1,0 |
| гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина против колибактериоза кроликов обладает хорошей иммуногенной активностью, не вызывает у животных поствакцинальных осложнений.
Пример 3
Берут пораженные органы от павших кроликов из местного эпизоотического очага, приготавливают суспензию из патологического материала, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистую культуру возбудителя Escherichia coli О35, заражают мясо-пептонный бульон, культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию микробных клеток чистой культуры 84,5 с титром 5-6 млрд микробных клеток в 1 см3, инактивируют внесением формалина 1,5, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензия клеток чистой культуры возбудителя | |
| Escherichia coli О35, выделенной из местного | |
| эпизоотического очага в мясо-пептонном | |
| бульоне с титром 5-6 млрд микробных клеток в 1 см3 | 84,5 |
| формалин | 1,5 |
| гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина против колибактериоза кроликов обладает незначительной эффективностью, может у отдельных животных вызывать слабое раздражение на месте введения.
Пример 4
Берут пораженные органы от павших кроликов из местного эпизоотического очага, приготавливают суспензию из патологического материала, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистую культуру возбудителя Escherichia coli О35, заражают мясо-пептонный бульон, культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию микробных клеток чистой культуры 85,5 с титром 5-6 млрд микробных клеток в 1 см3, инактивируют внесением формалина 2,0, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензия клеток чистой культуры возбудителя | |
| Escherichia coli О35, выделенной из местного | |
| эпизоотического очага в мясо-пептонном бульоне | |
| с титром 5-6 млрд микробных клеток в 1 см3 | 85,5 |
| формалин | 2,0 |
| гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина против колибактериоза кроликов обладает выраженной эффективностью, не вызывает у животных воспалительных процессов на месте введения (см. таблицу).
Пример 5
Берут пораженные органы от павших кроликов из местного эпизоотического очага, приготавливают суспензию из патологического материала, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистую культуру возбудителя Escherichia coil О35, заражают мясо-пептонный бульон, культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию микробных клеток 86,5 с титром 5-6 млрд микробных клеток в 1 см3, инактивируют внесением формалина 2,5, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензия клеток чистой культуры возбудителя | |
| Escherichia coli О35, выделенной из местного | |
| эпизоотического очага в мясо-пептонном | |
| бульоне с титром 5-6 млрд микробных клеток в 1 см3 | 86,5 |
| формалин | 2,5 |
| гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина против колибактериоза кроликов обладает слабой иммуногенной активностью, не вызывает у животных поствакцинальных осложнений.
Таким образом, предлагаемая вакцина против колибактериоза кроликов более специфична и эффективнее по сравнению с прототипом.
Вакцина против колибактериоза кроликов, включающая инактивированный антиген и адъювант, отличающаяся тем, что в качестве антигена содержит суспензию клеток чистой культуры возбудителя Escherichia coli O35, полученной путем отбора пораженных органов от павших кроликов из местного эпизоотического очага, приготовления суспензии, посева на дифференциально-диагностические среды, выделения чистой культуры возбудителя и выращивания в мясопептонном бульоне до концентрации микробных клеток 5-6 млрд в 1 см3, формалин и гидроокись алюминия при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензия клеток чистой культуры | |
| возбудителя Escherichia coli O35 в | |
| мясопептонном бульоне с титром | |
| 5-6 млрд микробных клеток в 1 см3 | 83,0-85,5 |
| формалин | 1,0-2,0 |
| гидроокись алюминия | остальное |
