Ассоциированная вакцина против оспы овец и чумы мелких жвачных животных


 


Владельцы патента RU 2406535:

Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии (RU)

Изобретение относится к области ветеринарии. Вакцина содержит суспензию культуральных вакцинных штаммов Б/5-96 вируса оспы овец и 45G37/35-K вируса чумы мелких жвачных животных с активностью не менее 4,5 lg ТЦД50/см3, лактозо-пептонный или сахарозо-желатиновый стабилизатор и деминерализованную воду при следующем содержании компонентов, об.%: вакцинный штамм Б/5-96 вируса оспы овец 22,0-27,0, вакцинный штамм 45G37/35-K вируса чумы мелких жвачных животных - 22,0-27,0, лактозо-пептонный или сахарозо-желатиновый стабилизатор - 40,0-44,0 деминерализованная вода - остальное. Вакцина обладает высокой иммуногенностью и ареактогенностью, безвредна и стабильна при хранении. 3 табл.

 

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к применению вакцинных препаратов для одновременной специфической профилактики оспы овец (OO) и чумы мелких жвачных животных (ЧМЖЖ).

За рубежом для профилактики этих болезней применяют вакцины, изготовленные из штаммов Peregro, RM/65 и Romanian вируса оспы овец [1, 2], а также штаммы «pprv 75/1 L К6 ВК2 Vero 70» и «Nigeria 75/1» вируса чумы мелких жвачных (Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. PART 2. SECTION 2.1. Chapter 2.1.5. [Электронный ресурс] / OIE.. - www.oie.int/eng/normes/mmanual/A_0028htpn.

В настоящее время для профилактики чумы мелких жвачных животных и оспы овец широко применяются культуральные моновакцины. Так, в России и странах СНГ для конструирования вакцины против оспы овец рекомендованы вакцинные штаммы НИСХИ, ВНИИЗЖ и Б/5-96 [3-5]. Для изготовления вирусвакцины против чумы мелких жвачных используют штамм «45G37/35-К» [6]. Указанные штаммы выращивают в первичных культурах клеток почки ягненка (ПЯ) и перевиваемых культурах клеток почки овцы (ПО) и гонады козы (ГК). С этой же целью используют вакцинный штамм 45G37/35-K вируса ЧМЖ, адаптированный к перевиваемой культуре клеток почки сайги («Науч. осн. произ. ветер, биолог. препар.», 2005, стр.167-170) [7].

Вирусвакцины против оспы овец и чумы мелких жвачных безвредны для овец и коз, создают напряженный иммунитет на 7 и 21 сутки соответственно, продолжительностью не менее 12 месяцев. Прививная доза каждого штамма составляет не менее 1000 ТЦД50.

Раздельное применение этих вакцин не может создать иммунитет у животных одновременно против двух болезней - оспы овец и чумы мелких жвачных, а также требует удвоенного количества материальных и трудовых затрат, оказывает дополнительное стрессовое воздействие на организм животных и, как следствие, снижение продуктивности.

Цель изобретения - создание ассоциированной вакцины против оспы овец и чумы мелких жвачных животных, обладающая высокой иммуногенностью, ареактогенностью, безвредностью для овец и коз и стабильностью при хранении.

Указанная цель достигается смешиванием культуральных вакцинных вирусов оспы овец (штамм Б/5-96) и чумы мелких жвачных животных (штамм 45G37/35-К), инфекционная активность которых составляет не менее 4,75 lg ТЦД50/см3, со стабилизатором со следующим содержанием компонентов в вакцине (об.%): культуральный вирус оспы овец - 22,0-27,0; чумы мелких жвачных животных - 22,0-27,0; лактозо-пептонный либо ГЛА-сахарозо-желатиновый стабилизатор - 40,0-44,0, дистиллированная вода - остальное.

Вируссодержащий культуральный материал объединяют с лактозо-пептонным либо с ГЛА-сахарозо-желатиновым стабилизатором и лиофилизируют. Инфекционная активность каждого вируса в лиофилизированной ассоциированной вакцине составляет не менее 4,5 lg ТЦД50/см3, что соответствует 30 прививным дозам. В одной прививной дозе содержится не менее 3,0 lg ТЦД50/см3 вакцинного штамма каждого вируса. Расчет количества прививных доз проводят по вирусу, имеющего в ассоциированной вакцине наименьшую биологическую активность.

Предлагаемая ассоциированная вакцина создает иммунитет у однократно привитых овец и коз на 21 сутки одновременно против оспы овец и чумы мелких жвачных, при этом по иммуногенности она аналогична моновакцинам, применяемым против этих болезней, и стабильна при хранении.

Примеры конкретного выполнения

Пример 1.

К 22,0 мл культурального вируса оспы овец штамм Б/5-96 с активностью 4,75 lg ТЦД50/см3 добавляют 22,0 мл культурального вируса чумы жвачных штамм 45G37/35-K с активностью 5,0 lg ТЦД50/см3 и 40,0 мл лактозо-пептонного стабилизатора (лактоза - 4,0%, пептон - 20,0%) и 16,0 мл дистиллированной воды.

Смесь перемешивают, фасуют в ампулы по 1,0 мл и лиофилизируют до содержания массовой доли влаги в пределах 2,0-4,0%. Отпайку ампул проводят под вакуумом.

Пример 2.

К 27,0 мл культурального вируса оспы овец штамм Б/5-96 с активностью 4,75 lg ТЦД50/см3 добавляют 27,0 мл культурального вируса чумы жвачных штамм 45G37/35-K с активностью 5,0 lg ТЦД50/см3 и 44,0 мл ГЛА-сахарозо-желатинового стабилизатора (сахароза - 10,0%, желатин - 2,0%) и 2,0 мл дистиллированной воды.

Смесь перемешивают, фасуют в ампулы по 1,0 мл и лиофилизируют до содержания массовой доли влаги в пределах 2,0-4,0%.

Биологические свойства и физико-химические показатели приготовленной таким образом 3-х серий ассоциированной вакцины представлены в табл.1.

Таблица 1
Биологические и физико-химические показатели ассоциированной вакцины
Характеристика вакцины Результаты определения биологических и физико-химических свойств вакцины по сериям
Серия №1 Серия №2 Серия №3
Титр вируса OO, lg ТЦД50/см3 4,5 4,5 4,66
Титр вируса ЧМЖ, lg ТЦД50/см3 4,83 4,75 4,75
Массовая доля влаги, % 2,7 3,2 3,0
Количество доз в 1,0 см3 30 30 45
Цвет и форма таблетки Гомогенная таблетка светло-коричневого цвета Гомогенная таблетка светло-коричневого цвета Гомогенная таблетка светло-желтого цвета

Лиофилизированная вакцина представляет собой гомогенную пористую таблетку от светло-желтого до светло-коричневого цвета с массовой долей влаги от 2,7 до 3,2%. Титр вакцинного вируса оспы овец и чумы мелких жвачных составляет 4,5-4,75 lg ТЦД50/см3 и 4,75-4,83 lg ТЦД50/см3 соответственно.

В 1,0 см3 (ампуле) ассоциированного препарата содержится от 30 (серия №1 и №2) до 45 (серия №3) прививных доз вакцины.

Пример 3.

В экспериментах на овцах показано, что ассоциированная вакцина по иммуногенности отвечает требованиям МЭБ к моновакцинам против оспы овец и чумы мелких жвачных животных. Иммуногенность вакцины оценивали по результатам контрольного заражения овец вирулентным вирусом ОО штамм «Монгольский» и по уровню ВН-антител к вирусам ЧМЖЖ и ОО.

Результаты проверки иммуногенности ассоциированной вакцины серия 1 приведены в табл.2.

Таблица 2
Иммуногенность ассоциированной и моновакцин против оспы овец и чумы мелких жвачных животных
Группа и кол-во
животных
Кол-во доз вак-ны Температурная реакция на прививку (°С) Титр ВН-антител (14-21 сут) Реакция на контрольное заражение
длит. темп. р-ии (сут) макс. темп. (°С) вирус OO вирус ЧМЖЖ
Вирусвакцина против оспы овец сухая культуральная. ТУ 9384-014-00495549-98
I (2 гол.) 1 ПВД - - 1:2-1:4 - Отсутствует
Вирусвакцина против чумы мелких жвачных животных сухая культуральная. ТУ 9384-06-00495549-04
II (2 гол.) 1 ПВД 1 40.3 (5 сут) - 1:16-1:64 Отсутствует
Ассоциированная вакцина против оспы и чумы мелких жвачных животных
III (4 гол.) 1 ПВД 2 40.4 1:2-1:4 1:32-1:128 Отсутствует
IV (2 гол.) 10 ПВД 3 40.6 1:4-1:8 1:64 На 4-6 сут у одного ягненка подъем t° тела до 40,5°С
V (2 гол.) Контроль Угнетение, анарексия, папулезно-пустулезные поражения на коже, кератит, t° на 4-12 сут до 41,6°С

Таким образом, испытуемая серия вакцины отвечала требованиям МЭБ, предъявляемым к монопрепаратам против этих болезней, индуцировала образование в защитных титрах ВН-антител к BOO и ВЧМЖ (1:64-128) и предохраняла животных от заражения вирулентным BOO штамм «Монгольский». Вакцина безвредна для овец в 10-кратной прививной дозе.

Пример 3.

В течение 12 месяцев хранения была изучена сохраняемость ассоциированной вакцины при различных температурных режимах. Результаты этих опытов приведены в табл.3.

Таблица 3
Инфекционная активность штаммов в составе вакцины при различных температурных режимах хранения
Серия вакцины Вакцинный вирус Исходный титр, lg ТЦД50/см3 Температура хранения (°С) Активность при хранении
3 мес 6 мес 12 мес
1 OO 4,5 4,0±4,0 4,5 4,5 4,5
20,0±2,0 4,5 4,25 3,75
ЧМЖЖ 4,83 4,0±4,0 4,83 4,83 4,83
20,0±2,0 4,75 4,5 4,0
2 OO 4,5 4,0±4,0 4,5 4,5 4,5
20,0±2,0 4,5 3,75 3,75
ЧМЖЖ 4,75 4,0±4,0 4,75 4,75 4,75
20,0±2,0 4,5 4,0 3,5

Как видно из табл.3, при рекомендуемой температуре хранения (4,0±4,0)°С вакцина, штаммы вируса оспы овец и чумы мелких жвачных животных сохраняют исходную активность в течение 12 мес. В то же время при хранении вакцины при (20,0±2,0)°С уже через 3 мес наблюдалось снижение ее активности.

Иммунобиологические свойства вакцины подтверждены во внутриинститутских комиссионных испытаниях.

Источники информации

1. Fassi - Fehri M Etude experimentale de 1 immunitete anticlavelense post-vaccinale / Ann. Rech. Vet. 1984, v.15, №1, p.59-64.

2. Jadhan К. M., Pandey A.K., Radatin N.S. Field observation on sheep pox tissue culture vaccine. / Indian vet. J. 1989, v.66, №10, p.908-912.

3. Иванющенков В.Н., Кореба О.В., Кекух В.Г., Уфимцева Т.Н., Уфимцев К.П., Зайцев В.А., Курченко Ф.П. Биологические свойства вакцинного штамма НИСХИ вируса оспы овец / Ветеринария, 1990, №8, с.22-24.

4. Диев В.И. Оспа овец и ее профилактика вакциной из штамма ВНИИЗЖ / Современные аспекты патологии животных: докл. конф., посвящ. 40-лет. ВНИИЗЖ. - Владимир, 1988, с.111-124.

5. Балышев В.М. и др. Вирусвакцина против оспы овец сухая культуральная, результаты разработки и производственных испытаний / Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными, экзотическими и зооантропонозными болезнями животных. Сб. ст.: Материалы Международной науч.-практ. конф., посвященной 75-летию со дня рождения И.А.Бакулова / ГНУ ВНИИВВиМ. - Покров, 2000, с.131-133.

6. Патент РФ №2284193 от 27.09.2006 г., авторы: Курченко Ф.П., Евсеев A.M., Балышев В.М., Жестерев В.И., Горшкова Т.Ф., Калантаенко Ю.Ф., Луницин А.В., Уфимцев К.П., Михалкин И.П.

7. В.М. Балышев, Михалкин И.П., Т.Ф. Горшкова, А.Н. Жуков, Ф.А. Бадаев. Изучение иммунобиологических свойств аттенуированного штамма «45G37/36-K вируса чумы мелких жвачных, выращенных в перевиваемой культуре клеток почки сайги / Науч. основы произ. ветер.биолог.преп.: матер. Международной науч.-практ. конф., посвященной 35-летию ин-та. Щелково, 2005, с.167-170.

Ассоциированная вакцина против оспы овец и чумы мелких жвачных животных, отличающаяся тем, что она содержит суспензию культуральных вакцинных штаммов Б/5-96 вируса оспы овец и 45G37/35-K вируса чумы мелких жвачных животных с активностью не менее 4,5 lg ТЦД50/см3, лактозо-пептонный или сахарозо-желатиновый стабилизатор и деминерализованную воду при следующем содержании компонентов, об.%:

вакцинный штамм Б/5-96 вируса оспы овец 22,0-27,0
вакцинный штамм 45G37/35-K вируса чумы
мелких жвачных животных 22,0-27,0
лактозо-пептонный или сахарозо-желатиновый
стабилизатор 40,0-44,0
деминерализованная вода остальное


 

Похожие патенты:
Изобретение относится к ветеринарии и представляет собой композицию, обладающую пролонгированным противовирусным, иммуномодулирующим и антибактериальным действием, содержащую комплекс человеческого рекомбинантного интерферона альфа-2b, сорбированного на двух полимерах - декстране и метилцеллюлозе, антибиотик и солевой буфер для стабилизации рН в районе 5,0-7,5, а также лекарственное средство пролонгированного действия для ветеринарии в виде стерильного раствора для инъекций, содержащее вышеуказанную композицию.

Изобретение относится к ветеринарии и представляет собой композицию для ветеринарии, обладающую пролонгированным противовирусным и иммуномодулирующим действием, содержащую комплекс человеческого рекомбинантного интерферона альфа-2b, сорбированного на двух полимерах - декстране и метилцеллюлозе, и солевой буфер для стабилизации рН в районе 5,0-7,5, а также лекарственное средство пролонгированного действия для ветеринарии в виде стерильного раствора для инъекций или стерильного лиофилизата для приготовления раствора для инъекций, содержащее вышеуказанную композицию.
Изобретение относится к медицине и медицинской промышленности, а именно к технологии лекарственных средств, и представляет собой противовирусное средство в виде геля, содержащее интерферон человеческий лейкоцитарный, основу, консервант нипагин, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит физиологический раствор, а в качестве основы хитозана сукцинат, при определенном соотношении компонентов в 1 мл смеси.

Изобретение относится к протеиновым аналогам интерферона- , в которых аспарагин в положении 25, в соответствии с нумерацией аминокислот в нативном интерфероне- , деамидирован, и цистеин в положении 17, в соответствии с нумерацией аминокислот в нативном интерфероне- , делетирован или замещен нейтральной аминокислотой, которые проявляют повышенные уровни биологической активности нативного интерферона- человека и не требуют НА для стабилизации протеина.

Изобретение относится к области биологически активных соединений и касается нового соединения - дигидрата натриевой соли 2-этилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, обладающего противовирусным действием и предназначенного для лечения и профилактики инфекционных заболеваний животных и человека вирусной природы.

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии. .

Изобретение относится к области медицины и ветеринарии, а именно к дезинфицирующим средствам против вирусных и бактериальных инфекций. .

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии. .
Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии. .
Изобретение относится к области биотехнологии. .

Изобретение относится к области ветеринарии
Наверх