Способ прогнозирования перехода миопии в прогрессирующую форму


 


Владельцы патента RU 2408890:

Саматова Регина Рамилевна (RU)

Изобретение относится к медицинской диагностике, а именно к офтальмологии. Предложен способ прогнозирования прогрессирования приобретенной в школьные годы близорукости у детей 10-14 и 15-17 лет. В сыворотке крови определяют содержание карбоксипропептидпроколлагена I типа с помощью «сэндвич» иммуноферментного анализа. При его содержании в пределах 316,8-456 нг/мл у детей 10-14 лет и 388,8-579,6 нг/мл у детей 15-17 лет прогнозируют стационарное течение близорукости. При его содержании 458,4-595,2 нг/мл в 10-14 лет и 285,6-309,6 нг/мл в 15-17 лет прогнозируют прогрессирующее течение близорукости. Способ позволяет повысить точность прогноза течения заболевания.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и может быть использовано в медицинской практике для прогнозирования перехода приобретенной в школьные годы миопии в прогрессирующую форму.

Способы прогноза перехода миопии в прогрессирующую форму основаны на изучении при этом заболевании нарушений в системе обмена соединительной ткани, а также в системе антиоксидантной защиты как на уровне общего, так и глазного метаболизма (М.И.Винецкая, З.К.Болтаева с соавт. Офтальмологический журнал, 1988, №3, С.155-158; Винецкая М.И., Иомдина Е.Н. с соавт. Вестник офтальмологии, 2000, №5, С.54-55).

Способ прогноза прогрессирования близорукости путем определения концентрации антител класса G и М в сыворотке крови (Патент РФ №2079136, 1997 г.) взят за прототип.

Техническим результатом изобретения является повышение точности прогноза прогрессирования.

Указанный технический результат достигается за счет того, что в способе прогнозирования течения миопии у детей школьного возраста, включающем определение содержания маркера в сыворотке крови, согласно изобретению в качестве маркера определяют содержание карбоксипропептидпроколлагена I типа, при его содержании в пределах 316,8-456 нг/мл у детей 10-14 лет и 388,8-579,6 нг/мл у детей 15-17 лет прогнозируют стационарное течение близорукости, а при его содержании 458,4-595,2 нг/мл в 10-14 лет и 285,6-309,6 нг/мл в 15-17 лет - прогрессирующее.

Карбоксипропептидпроколлаген I типа в сыворотке крови отщепляется от синтезированной остеобластами молекулы проколлагена специфическими протеазами перед встраиванием коллагена в растущую коллагеновую фибриллу. Выход этого пептида в циркуляцию позволяет по его уровню оценивать интенсивность биогенеза коллагена I типа.

Подтверждением достоверности предлагаемого способа прогноза является совпадение показателей концентрации исследуемого пептида в сыворотке крови с прогрессирующим течением близорукости в среднем в 100% случаев.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

Взятие крови без антикоагулянта для получения сыворотки осуществляют в утренние часы натощак из локтевой вены обследуемых в строго стерильных условиях.

Определение уровня карбоксиконцевого пропептида проколлагена I типа (КТППКI) в сыворотке крови больных проводят методом «сэндвич» иммуноферментного анализа с применением щелочной фосфатазы в качестве индикаторного фермента с использованием тест-систем Metra CICP EIA («Quidel Metra», США).

В соответствующие лунки микропланшета с иммобилизованными антителами вносят по 100 мкл CICP стандартов, контролей и исследуемых образцов сыворотки крови, разведенных рабочим буфером в соотношении 1:12. Планшет инкубируют 2 часа при комнатной температуре (18-25°С) при непрерывном встряхивании, затем жидкость из лунок удаляют и планшет 3 раза промывают буфером. Планшет сушат путем постукивания по поверхности лабораторного стола, покрытого фильтровальной бумагой.

В каждую ячейку микропланшета вносят по 100 мкл кроличьих анти-CICP антител. Планшет инкубируют в течение 45-50 минут при комнатной температуре при непрерывном встряхивании. Затем жидкость из ячеек удаляют и стрипы 3 раза промывают буфером. Планшет сушат путем постукивания по поверхности лабораторного стола, покрытого фильтровальной бумагой.

В каждую лунку микропланшета вносят по 100 мкл конъюгата козьих антикроличьих антител с щелочной фосфатазой, разведенного буфером. Планшет инкубируют в течение 45-50 мин при комнатной температуре. Жидкость из лунок удаляют и 3 раза промывают буфером. Планшет сушат путем постукивания по поверхности лабораторного стола, покрытого фильтровальной бумагой.

Во все лунки планшета вносят по 100 мкл рабочего раствора субстрата. Микропланшет инкубируют в течение 30-35 минут при комнатной температуре. Реакцию останавливают добавлением 50 мкл стоп-реагента в каждую лунку. Общее время постановки исследования - 5 часов.

Учет результатов проводят с использованием автоматического фотометра «Multiscan» при длине волны 405 нм, устанавливают нулевое поглощение по лунке со стандартом 0. Результаты выражают в нг/мл. При содержании карбоксипропептидпроколлагена I типа в пределах 316,8-456 нг/мл у детей 10-14 лет и 388,8-579,6 нг/мл у детей 15-17 лет прогнозируют стационарное течение близорукости. При содержании карбоксипропептидпроколлагена I типа 458,4-595,2 нг/мл в 10-14 лет и 285,6-309,6 нг/мл в 15-17 лет прогнозируют прогрессирующее течение заболевания.

У 50 больных с приобретенной в школьные годы близорукостью было изучено содержание карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови. При этом детей 10-14 лет было 25 человек и 15-17 лет - 25 человек. Взятие крови без антикоагулянта для получения сыворотки осуществляли натощак из локтевой вены обследуемых в строго стерильных условиях.

Определение уровня карбоксиконцевого пропептида проколлагена I типа (КТППКI) в сыворотке крови больных проводили методом «сэндвич» иммуноферментного анализа с применением щелочной фосфатазы в качестве индикаторного фермента.

В соответствующие лунки микропланшета с иммобилизованными антителами вносили по 100 мкл CICP стандартов, контролей и исследуемых образцов сыворотки крови, разведенных рабочим буфером в соотношении 1:12. Планшет инкубировали 2 часа при комнатной температуре (18-25°С) при непрерывном встряхивании, затем жидкость из лунок удаляли и планшет 3 раза промывали буфером. Планшет сушили путем постукивания по поверхности лабораторного стола, покрытого фильтровальной бумагой.

В каждую ячейку микропланшета вносили по 100 мкл кроличьих анти-CICP антител. Планшет инкубировали в течение 45-50 минут при комнатной температуре при непрерывном встряхивании. Затем жидкость из ячеек удаляли и стрипы 3 раза промывали буфером. Планшет сушили путем постукивания по поверхности лабораторного стола, покрытого фильтровальной бумагой.

В каждую лунку микропланшета вносили по 100 мкл конъюгата козьих антикроличьих антител с щелочной фосфатазой, разведенного буфером. Планшет инкубировали в течение 45-50 мин при комнатной температуре. Жидкость из лунок удаляли и 3 раза промывали буфером. Планшет сушили путем постукивания по поверхности лабораторного стола, покрытого фильтровальной бумагой.

Во все лунки планшета вносили по 100 мкл рабочего раствора субстрата. Микропланшет инкубировали в течение 30-35 минут при комнатной температуре. Реакцию останавливали добавлением 50 мкл стоп-реагента в каждую лунку. Общее время постановки исследования - 5-5,5 часов.

Учет результатов проводили с использованием автоматического фотометра «Multiscan» при длине волны 405 нм, устанавливая нулевое поглощение по лунке со стандартом 0. Результаты выражали в нг/мл. Нормальный уровень карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови у практически здоровых лиц (контрольная группа) был равен 349,0±30,92 нг/мл у детей 10-14 лет и 527,2±11,26 у детей 15-17 лет.

У 10 (40%) из 25 больных миопией 10-14 лет наблюдалось прогрессирующее течение заболевания. При этом содержание карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови было выявлено в пределах 458,4-595,2 нг/мл у 10 (100%) пациентов. У 15 (60%) из 25 больных миопия имела стационарный характер течения. При этом содержание карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови было выявлено в пределах 316,8-456 нг/мл у 13 (86,7%) пациентов.

У 10 (40%) из 25 больных миопией 15-17 лет наблюдалось прогрессирующее течение заболевания. При этом содержание карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови было выявлено в пределах 285,6-309,6 нг/мл у 10 (100%) пациентов. У 15 (60%) из 25 больных миопия имела стационарный характер течения. При этом содержание карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови было выявлено в пределах 388,8-579,6 нг/мл у 14 (93,3%) пациентов.

Таким образом, предлагаемый способ прогноза прогрессирующего течения приобретенной близорукости являлся правильным у 10 из 10 больных в обеих возрастных группах, что было достоверно в 100% случаев.

Предлагаемый способ иллюстрируется следующими клиническими примерами.

Пример 1. Больная М., 11 лет. Близорукость возникла в возрасте 7,5 лет. В течение последних 3-х лет наблюдалось прогрессирование миопии на 1,0 Дптр в год. Определение карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови проводилось по вышеописанной методике. Содержание карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови было равно 516 нг/мл. Следовательно, содержание карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови совпало с прогрессирующим течением близорукости.

Пример 2. Больная П., 13 лет. Близорукость возникла в возрасте 8 лет. За последние 3 года наблюдения не отмечалось прогрессирования заболевания. Определение карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови проводилось по вышеописанной методике. Содержание карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови было равно 362,4 нг/мл. Это свидетельствует о подтверждении стационарного течения близорукости.

Пример 3. Больной Н., 15 лет. Близорукость возникла в возрасте 9 лет. За последние 3 года наблюдения отмечается прогрессирование заболевания на 1 Дптр в год. Определение карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови проводилось по вышеописанной методике. Содержание карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови было равно 295,2 нг/мл. Это свидетельствует о подтверждении прогрессирующего характера течения миопии.

Пример 4. Больной Б., 16 лет. Близорукость возникла в возрасте 9 лет. За последние 3 года наблюдения не отмечалось прогрессирования заболевания. Определение карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови проводилось по вышеописанной методике. Содержание карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови было равно 523,2 нг/мл. Это свидетельствует о подтверждении стационарного течения близорукости.

Таким образом, предлагаемый способ прогноза перехода приобретенной в школьные годы близорукости в прогрессирующую форму позволяет оценить характер течения этого заболевания по содержанию карбоксипропептидпроколлагена I типа в сыворотке крови пациентов.

При выявлении содержания карбоксипропептидпроколлагена I типа 458,4-595,2 нг/мл в 10-14 лет и 285,6-309,6 - в 15-17 лет прогнозируют прогрессирование заболевания.

Способ прогнозирования течения миопии у детей школьного возраста, включающий определение содержания маркера в сыворотке крови, отличающийся тем, что в качестве маркера определяют содержание карбоксипропептидпроколлагена I типа, при его содержании в пределах 316,8-456 нг/мл у детей 10-14 лет и 388,8-579,6 нг/мл у детей 15-17 лет прогнозируют стационарное течение близорукости, а при его содержании 458,4-595,2 нг/мл в 10-14 лет и 285,6-309,6 нг/мл в 15-17 лет - прогрессирующее.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии и лучевой терапии. .
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в технологии приготовления панели сывороток, содержащих антитела к тестируемому вирусу, для контроля чувствительности, специфичности и сроков годности иммуноферментных, иммунохемилюминесцентных тест-систем и иммуноблотов.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике. .
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и отоларингологии. .

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической иммунологии и аллергологии, и может быть использовано в педиатрии для диагностики бронхиальной астмы у детей раннего возраста.
Изобретение относится к офтальмологии и предназначено для диагностики развития осложнений при пролиферативной диабетической ретинопатии у пациентов с непрозрачными оптическими средами глаза.
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству, и касается способа прогнозирования угрозы прерывания беременности. .
Изобретение относится к области медицины, а именно к терапии, пульмонологии, и касается способа диагностики объема поражения легочной ткани при внебольничной пневмонии у взрослых.
Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и касается способа прогнозирования возникновения рака легкого у больных хронической обструктивной болезнью легких.
Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностике в области акушерства и гинекологии
Изобретение относится к области медицины и касается способа прогнозирования устойчивости спектрин-актинового комплекса мембран эритроцитов беременной при обострении герпес-вирусной инфекции в третьем триместре
Изобретение относится к области медицины и касается способа оценки содержания белка теплового шока Hsp70 в плаценте беременной при вспышке гепрес-вирусной инфекции в III триместре беременности

Изобретение относится к медицинской микробиологии, может быть использовано для обнаружения антител к протективному антигену в сыворотках людей и животных, больных сибирской язвой, в сыворотках зараженных, а также иммунизированных протективным антигеном животных

Изобретение относится к области иммунохимии
Изобретение относится к биохимическим методам анализа, в частности к иммуноферментному анализу, и может быть использовано в санитарно-эпидемиологических, медицинских и ветеринарных исследованиях

Изобретение относится к области иммунологической диагностики
Наверх