Средство, обладающее противоопухолевой активностью



Средство, обладающее противоопухолевой активностью
Средство, обладающее противоопухолевой активностью
Средство, обладающее противоопухолевой активностью

 


Владельцы патента RU 2414920:

Учреждение Российской академии наук Тихоокеанский институт биоорганической химии Дальневосточного отделения РАН (ТИБОХ ДВО РАН) (RU)

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к созданию средства, обладающего противоопухолевой активностью. В качестве средства, обладающего противоопухолевой активностью в отношении клеток рака кишечника НТ-29 и DLD-1, применяют сухой экстракт ядровой древесины маакии амурской. Средство расширяет арсенал противоопухолевых средств, активных в отношении клеток рака кишечника НТ-29 и DLD-1. 3 ил.

 

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии, и касается противоопухолевых средств.

Известен биологически активный стильбен, выделенный из винограда - резвератрол, который ингибирует инициирование, развитие и прогрессию канцерогенного процесса [Kim S., Min S.Y., Lee S.K., Cho W.-J. (2003) Chem. Pharm. Bull. V.51 N.5. P.16-521]. Экспериментально доказано, что резвератрол вызывает апоптоз у трудноизлечиваемых раковых клеток простаты (РС-3 и DU145) [Gill С. et. al. (2007) The Prostate. V.67. I.15. P.1641-1653]. Считается, что использование резвератрола может быть одним из самых эффективных способов, с помощью которого можно увеличить чувствительность опухолевых клеток простаты к химиотерапии, поскольку он не токсичен и эффективен даже при низких концентрациях, что было подтверждено экспериментально на животных. Резвератрол детоксифицирует канцерогенные вещества и стимулирует генетические механизмы, включающие апоптоз раковых клеток.

Известны изофлавоноиды, выделенные из сои, такие как даидзеин и генистеин, проявляющие противоопухолевые свойства [Jian L. (2009) Mol Nutr Food Res. V.53. P.217-226]. Экспериментально был подтвержден ингибирующий эффект генистеина на рост клеток рака молочной железы, таких как MDA-MB-231, MDA-MB-435, МКФ 7 и раковых клеток простаты РС3 и LNCaP. Он также эффективен против раковых клеток легкого Н460 и Н322 и некоторых видов лейкоза [Sarkar F.H., Li Y. (2003) Cancer Investigation. V.21. N.5. P.744-757; Sarkar F.H., Li Y. (2002) Cancer Metastas. Rev. V.21, N.3. P.265-280; Tominaga Y., Wang A., Wang R.-H., Wang X., Cao L., Deng С.-Х. (2007) Cell Death Differ. V.14. N.3. P.472-479; Chen W.-F, Huang M.-H, Tzang C.-H, Yang M, Wong M.-S. (2003) Biochim. Biophys. Acta. V.1638. N.2. P.187-196].

Прототипом заявляемого средства является растительный компонент - изофлавоноид генистеин, который в сочетании с 5-фтороурацилом способствует индуцированию клеточного апоптоза клеток рака толстой кишки НТ-29 [Фазлул X., Саркар и Ивей Ли, Cancer Res., 2006; 66: (7), April 1, review].

Задачей изобретения является расширение арсенала противоопухолевых средств.

Поставленная задача достигается применением сухого экстракта ядровой древесины маакии амурской в качестве противоопухолевого средства в отношении клеток рака кишечника НТ-29 и DLD-1.

Средство представляет собой высушенный под вакуумом спиртовой экстракт, полученный из измельченной ядровой древесины этого растения, и состоит из растительных полифенолов, обладающих гепатозащитным действием [RU Патент №2104027 C1, 10.02.1998].

Сухой экстракт ядровой древесины маакии амурской зарегистрирован в качестве субстанции (Р №003309/01 от 12.04.2004 г.) для приготовления лекарственного средства «Максар® таблетки, покрытые оболочкой, 60 мг» (Р №003294/01 от 12.04.2004 г.), применяемого для лечения хронических гепатитов [RU 2175237 С2, 27.10.2001].

Известно применение препарата маакии амурской экстракт сухой в качестве гемореологического и антитромбоцитарного средства [RU 2342944 C1, 10.01.2009].

Использование сухого экстракта ядровой древесины маакии амурской в качестве противоопухолевого средства в отношении клеток рака кишечника в доступной патентной и другой научно-технической литературе не описано. Это новое свойство известного препарата явным образом не вытекает из уровня техники. Сухой экстракт ядровой древесины маакии амурской может выпускаться в лекарственной форме и в виде биологически активных добавок для лечения и профилактики заболеваний рака кишечника.

Новые свойства сухого экстракта ядровой древесины маакии амурской были найдены экспериментальным путем.

Изобретение иллюстрируется следующими чертежами.

Фиг.1. Жизнеспособность DLD-1 и НТ-29 клеток, обработанных сухим экстрактом ядровой древесины маакии амурской.

Фиг.2. Ингибирующее действие сухого экстракта ядровой древесины маакии амурской на рост колоний клеток рака кишечника человека НТ-29 (А) и DLD-1 (Б). Колонии клеток рака кишечника человека были оценены с использованием обратимого микроскопа и Motic Image Plus программы. Графические данные, представленные на фигурах, проиллюстрированы имиджами.

Применение сухого экстракта ядровой древесины маакии амурской в качестве средства, обладающего противоопухолевым действием в отношении клеток рака кишечника, иллюстрируется экспериментом.

В эксперименте использовали клеточные линии JB6 С141 (нормальные клетки кожи мышей, АТСС # CRL-2010), НТ-29 (клетки рака кишечника человека, АТСС # НТВ-38), DLD-1 (клетки рака кишечника человека, АТСС # CCL-221) и RPMI-7951 (клетки меланомы кожи человека, АТСС # НТВ-66) из американской коллекции культур (АТСС, США) и питательные среды McCoy, RPMI 1640, MEM, BME.

Культивирование клеток. Нормальные клетки кожи мышей JB6 С141 культивировали в инкубаторе при 37°С и 5% CO2 в среде MEM с добавлением 5% FBS. Клетки рака кишечника человека НТ-29 и DLD-1 культивировали в инкубаторе при 37°С и 5% СО2 в среде МсСоу с добавлением 10% FBS и RPMI 1640 с добавлением 10% FBS, соответственно. Клетки рака кишечника человека RPMI 7951 культивировали в инкубаторе при 37°С, 5% СО2 в среде MEM с добавлением 10% FBS. Все среды содержали 2 мМ L-глутамина, 100 ед/л пенициллина и 100 мкг/л стрептомицина.

Статистическая обработка данных проведена с использованием t-критерия Стъюдента в условиях заданной доверительной вероятности, равной 95% [программа SigmaPlot 2000, версия 6, (SPSS Inc., USA)].

Пример 1. Определение цитотоксичности заявляемого средства.

Для оценки цитотоксичности были использованы нормальные клетки кожи мышей JB6 С141, опухолевые клетки НТ-19, DLD-1 (рак кишечника человека), RPMI-7951 (меланома человека) и применен MTS-метод. Клетки (1×104/мл) рассеивали в 96-луночные планшеты и культивировали в 200 мкл соответствующей среды в инкубаторе при температуре 37°С в течение 24 часов. Затем клетки обрабатывали веществами различной концентрации и инкубировали в течение 24 часов. После инкубации в лунки добавляли по 15 мкл 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-5-(3-карбоксиметоксифенил)-2-(4-сульфофенил)-2Н-тетразолия (MTS-реагент) и помещали в инкубатор (37°С) на 4 часа. MTS-метод основан на свойстве живых клеток трансформировать MTS-реагент в формазан. Количество образовавшегося формазана пропорционально количеству оставшихся в живых клеток после воздействия вещества и определяется спектрофотометрически при 492 нм. Оптическую плотность измеряли на спектрофотометре «Bio-Tek Instruments» (США).

Концентрации, при которых заявляемое средство проявило цитотоксичность, были следующие: 28 мкг/мл, 52 мкг/мл и 73 мкг/мл для клеток JB6 С141, DLD-1 и НТ-19, соответственно. Оно не проявило цитотоксичность для клеток RPMI-7951 в концентрации до 100 мкг/мл.

Пример 2. Определение способности заявляемого средства ингибировать рост колоний клеток рака кишечника человека и меланомы человека (метод мягкого агара).

Метод мягкого агара основан на том, что раковые клетки, находящиеся в неприкрепленном состоянии в толще мягкого агара дают рост клеточных колоний, тогда как вещества, обладающие антиопухолевым действием, ингибируют рост клеточных колоний. Эксперимент был выполнен на клетках рака кишечника НТ-29, DLD-1, как описано Colburn с некоторыми модификациями [Colburn, N.H. et. al. (1981) Proc Natl Acad Sci USA V.78. I.11. P.6912-6916]. Все вещества были растворены в диметилсульфоксиде (ДМСО), в качестве контроля для обработки клеток использовали ДМСО. Клетки рака кишечника человека НТ-29, DLD-1 и меланомы кожи человека RPMI-7951 (2,4×104 клеток/мл) были обработаны экстрактами веществ в концентрации до 7 мкг/мл в 1 мл 0,33% ВМЕ агара поверх 3,5 мл 0,5% ВМЕ агара, содержащего экстракты веществ в концентрации до 7 мкг/мл. Клетки были культивированы при 37°С, 5% CO2 в течение 30 дней. Колонии клеток были оценены с использованием обратимого микроскопа (Motic AE 20, China) и Motic Image Plus программы (China). Для каждого вещества были выполнены два независимых эксперимента с тремя образцами для каждой концентрации.

Для определения действия заявляемого средства на рост колоний клеток рака кишечника человека и меланомы кожи человека в мягком агаре были выбраны концентрации до 7 мкг/мл, поскольку средство при концентрации 14 мкг/мл ингибировало рост колоний клеток НТ-29 и DLD-1 практически на 90%. Следует отметить, что при исследованных концентрациях (до 7 мкг/мл) не наблюдалось ингибирование роста колоний клеток меланомы кожи человека RPMI-7951, что указывает на избирательное действие сухого экстракта ядровой древесины маакии амурской по отношению к клеткам рака кишечника человека.

Результаты показывают, что под действием заявляемого средства в исследованном интервале концентрации происходит ингибирование роста колоний клеток рака кишечника человека DLD-1 и НТ-29 по сравнению с контролем. Ингибирование роста колоний на 50% для клеток DLD-1 и НТ-29 происходит при концентрациях 4,1 и 8,8 мкг/мл соответственно. Ингибирование роста колоний клеток рака кишечника человека НТ-29 под действием генистеина и сухого экстракта ядровой древесины маакии амурской при концентрации 14 мкг/мл составляет 48% и 87%, соответственно. Эти результаты указывают на то, что заявляемое средство обладает более сильным противоопухолевым действием по отношению к клеткам рака кишечника человека по сравнению с генистеином.

Применение сухого экстракта ядровой древесины маакии амурской в качестве противоопухолевого средства в отношении клеток рака кишечника НТ-29 и DLD-1.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении рака легкого. .

Изобретение относится к новым 5,7-диаминозамещенным пиразоло[1,5-а]пиримидинам, выбранным из конкретных соединений, например, указанных ниже, обладающих свойствами ингибиторов циклин-зависимых киназ, таких как CDK2.

Изобретение относится к новым 5,7-диаминозамещенным пиразоло[1,5-а]пиримидинам, выбранным из конкретных соединений, например, указанных ниже, обладающих свойствами ингибиторов циклин-зависимых киназ, таких как CDK2.

Изобретение относится к кристаллическим формам гидрата дигидрохлорида 5-(4-{[6-(4-амино-3,5-диметилфенокси)-1-метил-1-Н-бензимидазол-2-ил]метокси}бензил)-1,3-тиазолидин-2,4-диона, представленного формулой (I).

Изобретение относится к новым соединениям формулы (I) где R3 представляет собой Н, [(C1-С6)алкилен]0-1-R'; R3 представляет собой Н; R4 представляет собой Н, галоген или (C1-С6)алкил; R 5 представляет собой Н или галоген; R6 представляет собой Н, (C1-C8)алкил, R', (C1 -С6) алкилен-R'; R7 и R8 независимо друг от друга представляют собой Н, галоген, (C 1-С6) алкил, О-(С1-С6)алкил, R'; R9 представляет собой (С1-С 6)алкил; n равно 0 или 1; L представляет собой О или O-(С 1-С6)алкилен; где R' представляет собой (С3-C8)циклоалкил; (С5-С 10)гетероциклил, который обозначает ароматическую или насыщенную моно- или бициклическую кольцевую систему, которая включает кроме атома углерода один или несколько гетероатомов, таких как атомы азота, кислорода и серы; или (С6-С10) арил; причем гетероциклил является незамещенным или замещен (С 1-С6)алкилом, а арил является незамещенным или замещен галогеном, (C1- С4)алкилом, -O-(С 1-С4)алкилом, SO2-(C1-C 4) алкилом или N[(С1-С4)алкил] 2; и где в группах R4, R6 и R 7 алкил может быть галогенирован в одном или более положениях; или их фармацевтически приемлемым солям и/или стереоизомерным формам.

Изобретение относится к новому соединению, представленному общей формулой (I), где значения заместителей RX, R3, R4, Х и А определены в формуле изобретения, ингибирующему тирозинкиназу рецептора EGF и тирозинкиназу HER2, а так же, к применению соединения формулы (I) и фармацевтической композиции, содержащей это соединение или его фармацевтически приемлемую соль.

Изобретение относится к соединению, имеющему формулу IV: где R1 представляет собой С1 или F; R3 представляет собой H, Me, Et, ОН, МеО-, ЕtO-, НОСН2CH2О-, HOCH2C(Me) 2O-, (S)-MeCH(OH)CH2O-, (R)-НОСН2 СН(ОН)СН2O-, циклопропил-СН2O-, НОСН 2СН2-, , , , , или R7 представляет собой метил или этил, которые возможно замещены одним или более чем одним F; R8 представляет собой Вr, 1 или SMe; и R9 представляет собой Н, С1-С4алкил, С1 или CN, где указанный алкил возможно замещен одной или более группами, независимо выбранными из F или CN, при условии, что когда а) R1 представляет собой F, R8 представляет собой Вr, R9 представляет собой Н, и R7 представляет собой либо Me, либо Et, тогда R3 не может представлять собой HOCH2CH2O; б) R1 представляет собой F, R8 представляет собой I, R9 представляет собой Н, и R3 представляет собой МеО, тогда R7 не может представлять собой Me; в) R1 представляет собой F, R8 представляет собой Me, R9 представляет собой Н, и R3 представляет собой НОСH2СН2 О, тогда R7 не может представлять собой Me; и г) R 1 представляет собой F, R8 представляет собой Вr, R9 представляет собой Н, и R3 представляет собой циклопропил-СН2O, тогда R7 не может представлять собой Me, а также к применению этого соединения в изготовлении лекарственного средства для лечения гиперпролиферативного расстройства или воспалительного состояния и к фармацевтической композиции, которая ингибирует МЕК.
Изобретение относится к области экспериментальной медицины и касается средств для повышения противоопухолевой резистентности организма. .
Изобретение относится к области ветеринарной медицины. .
Изобретение относится к области косметологии и эстетической медицины и представляет собой способ получения косметической маски, предусматривающий ферментацию пастеризованной осветленной творожной сыворотки закваской чистых культур микроорганизмов, смешивание полученной смеси с кедровым маслом, глицерином, термически обработанной бентонитовой глиной, отличающийся тем, что в качестве закваски используют закваску чистых культур Propionibacterium Shermani, при этом ферментацию проводят в присутствии термически обработанной бентонитовой глины при температуре 28-30°С в течение 9-10 часов.
Изобретение относится к области косметологии, более конкретно касается косметического средства для ухода за кожей на основе фитоэстрогенов, причем в качестве источников фитоэстрогенов средство содержит экстракт семян сои культурной (соевое молоко, ферментированное лактобактериями), экстракт корня ангелики, экстракт корня шлемника байкальского, экстракт листьев и корня солодки, масло и экстракт листьев шалфея мускатного, экстракт луковицы беламканды китайской (лилии леопардовой), экстракт цветков клевера красного, масло яблочных семечек, масло плода авокадо, экстракт зерен гороха, экстракт листьев виноградовника лесного (ампелопсиса), экстракт цветков банана, экстракт оболочки семян арахиса, экстракт листьев малины, экстракт оболочки семян айвы, экстракт гриба сирокикурагэ (серебряного уха, дрожалки фукусовидной) и экстракт цедры и мякоти мандарина.
Изобретение относится к области косметологии, более конкретно касается косметического средства для ухода за кожей на основе фитоэстрогенов, причем в качестве источников фитоэстрогенов средство содержит экстракт семян сои культурной (соевое молоко, ферментированное лактобактериями), экстракт корня ангелики, экстракт корня шлемника байкальского, экстракт листьев и корня солодки, масло и экстракт листьев шалфея мускатного, экстракт луковицы беламканды китайской (лилии леопардовой), экстракт цветков клевера красного, масло яблочных семечек, масло плода авокадо, экстракт зерен гороха, экстракт листьев виноградовника лесного (ампелопсиса), экстракт цветков банана, экстракт оболочки семян арахиса, экстракт листьев малины, экстракт оболочки семян айвы, экстракт гриба сирокикурагэ (серебряного уха, дрожалки фукусовидной) и экстракт цедры и мякоти мандарина.
Изобретение относится к фармакологии и медицине и представляет собой композицию для защиты кожи или лечения кожных болезней, включающую цинк пиритион в качестве действующего вещества, гидрофобную фазу, представляющую собой изопропилмиристат, цетостеарил изонаноат и диметикон, гидрофильную фазу, представляющую собой воду и многоатомный спирт, эмульгатор и консервант, при определенном соотношении компонентов в г/100 г композиции.

Изобретение относится к косметическим средствам, а именно к способу изготовления двухцветного косметического средства, предназначенного для макияжа. .

Изобретение относится к фармацевтическому составу или добавке к рациону, предназначенной для активации иммунной системы. .
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно: к получению средства, обладающего гипохолестеринемическим и гиполипидемическим действием. .

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности. .

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к стресспротекторному средству
Наверх