Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3

Авторы патента:


Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3
Комбинации, включающие агонист рецептора s1p и ингибитор киназы jak3

 


Владельцы патента RU 2415678:

НОВАРТИС АГ (CH)

Изобретение относится к лекарственным средствам и касается фармацевтической комбинации, предназначенной для использования в способе лечения или профилактики аутоиммунных заболеваний или нарушений, или отторжения трансплантатов, включающей 2-амино-2-[2-(4-октилфенил)этил]пропан-1,3-диол (FTY720), фосфат или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения и ингибитор киназы JAK3, представляющий собой моноцитрат 3-{(3R-,4R)-4-метил-3-[метил-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидин-1-ил}-3-оксопропионитрила (СР-690555), в эффективных количествах. Также раскрыт способ лечения или профилактики аутоиммунных заболеваний или отторжения трансплантатов клеток, тканей или органов с использованием указанной комбинации. Задачей изобретения является обеспечение эффективных и безопасных агентов для лечения или профилактики аутоиммунных заболеваний и состояний или отторжения трансплантатов. 2 н. и 7 з.п. ф-лы.

 

Настоящее изобретение относится к фармацевтической комбинации, включающей по крайней мере один агонист рецептора сфингозин-1-фосфата (S1P) и по крайней мере один ингибитор киназы JAK3, а также к применению такой композиции для лечения аутоиммунных заболеваний, например для лечения или профилактики сахарного диабета I типа и связанных с ним заболеваний, или при пересадке органов.

Несмотря на наличие широкого круга возможностей в области пересадки органов и лечения пациентов с аутоиммунными заболеваниями, все еще существует необходимость в эффективных и безопасных иммунодепрессантах, а также необходимость их преимущественного использования в комбинированной терапии.

Было установлено, что комбинация, включающая по крайней мере один агонист или модулятор рецептора S1P и ингибитор киназы Janus 3 (JAK3) киназы, например как указано ниже, оказывает благоприятное воздействие при лечении аутоиммунных заболеваний, например диабета I типа и связанных с ним заболеваний или отторжения трансплантата.

Агонисты или модуляторы рецептора S1P - это соединения, которые передают сигнал при проявлении агонистической активности в отношении одного или более рецепторов сфингозин-1-фосфата, например, S1P1 - S1P8. Связывание агониста с рецептором S1P может приводить, например, к диссоциации внутриклеточных гетеротримерных G-белков на субъединицах Gα-ГТФ и Gβ-ГТФ и/или к повышению уровня фосфорилирования связанного с агонистом рецептора и активации с понижением активности сигнальных путей/киназ.

Связывающая активность агонистов или модуляторов рецептора S1P с конкретным рецептором S1P человека определяют по следующей методике.

Агонистическую или модулирующую активность соединений определяют с использованием рецепторов S1P человека: S1P1, S1P3, S1P2, S1P4 и S1P5. Функциональную активацию рецептора оценивают, измеряя количество ГТФ [γ-35S], связанного с мембранным белком, полученным из трансфектированных клеток СНО или RH7777, которые устойчиво экспрессируют соответствующий рецептор S1P человека, причем указанное связывание опосредуется соединением. Для анализа используют сцинцилляционные гранулы. Готовят серийные разведения соединений из растворов в ДМСО и добавляют к гранулам SPA (Amersham-Pharmacia) с иммобилизованным рецептором S1P, экспрессирующим мембранный белок (10-20 мкг в лунке) в присутствии 50 мМ Hepes, 100 мМ NaCl, 10 мМ MgCl2 10 мкМ ГДФ, 0,1% БСА и 0,2 нМ ГТФ [γ-35S] (1200 Ки/ммоль). После инкубации в 96-луночном микропланшете при КТ в течение 120 мин несвязанный ГТФ [γ-35S] отделяют центрифугированием. Люминесценцию гранул SPA, индуцированную связанным с мембраной ГТФ [γ-35S], измеряют на ридере TOPcount plate reader (Packard). Величины ЕС50 рассчитывают с использованием стандартного программного обеспечения для аппроксимации кривых. По данным указанного анализа аффинность агонистов рецептора S1P при связывании с рецептором S1P предпочтительно составляет <50 нМ.

Предпочтительными агонистами или модуляторами рецептора S1P являются, например, соединения, которые кроме связывания с рецептором S1P также ускоряют доставку лимфоцитов к мишени (homing), например, соединения, вызывающие лимфопению, в результате перераспределения, предпочтительно обратимого, лимфоцитов из кровотока во вторичные лимфотические ткани, и не вызывающие при этом генерализованного иммунодепрессантного действия. Наивные клетки связываются и стимулируется миграция CD4 и CD8 Т-клеток и В-клеток из кровотока в лимфатические узлы (LN) и пееровые бляшки (РР).

Доставку лимфоцитов в мишень оценивают по истощению уменьшения лимфоцитов крови:

Агонист или модулятор рецептора S1P или носитель вводят крысам перорально через желудочный зонд. Кровь для анализа отбирают из хвостовой вены в день - 1 для определения индивидуальной базовой линии, а также через 2, 6, 24, 48 и 72 ч после введения лекарственного средства. Согласно данному анализу агонист или модулятор рецептора S1P приводит к истощению периферических лимфоцитов крови, например, на 50% при введении дозы, например, <20 мг/кг.

Примеры пригодных агонистов или модуляторов рецептора S1P включают, например:

- соединения, описанные в заявке ЕР 627406 А1, например соединение формулы I

где R1 означает прямую или разветвленную (C12-C22) цепь,

- соединение, содержащее в цепи связь или гетероатом, выбранные из группы, включающей двойную связь, тройную связь, О, S, NR6, где R6 означает Н, С14алкил, арил(С14)алкил, ацил или (С14алкокси)карбонил и карбонил и/или

- соединение, содержащее в качестве заместителя С14алкокси, С24алкенилокси, С2-C4алкинилокси, арил(С14)алкилоксиацил, C14алкиламино, С14алкилтио, ациламино, (С14алкилокси)карбонил, (С14алкокси)карбониламино, ацилокси, (С14алкил)карбамоил, нитро, галоген, амино, гидроксиимино, гидрокси или карбокси или

R1 означает

- фенилалкил, где алкил означает прямую или разветвленную углеводородную цепь (С620) или

- фенилалкил, где алкил означает прямую или разветвленную углеводородную цепь (C130), причем указанный фенилалкил содержит в качестве заместителя

- прямую или разветвленную углеводородную цепь (С6-20), необязательно замещенную галогеном,

- прямую или разветвленную цепь (С620)алкокси, необязательно замещенную галогеном,

- прямой или разветвленный (С620)алкенилокси,

- фенил(С114)алкокси, галогенфенил(С14)алкокси, фенил(С114)алкокси(С114)алкил, фенокси(С14)алкокси или фенокси(С14)алкил,

- циклоалкилалкил, замещенный С620алкилом,

- гетероарилалкил, замещенный С620алкилом,

- гетероциклический С620алкил или

- гетероциклический алкил, замещенный С220алкилом,

и где

алкильный остаток содержит

- в углеводородной цепи связь или гетероатом, выбранные из группы, включающей двойную связь, тройную связь, атом О, S, сульфинил, сульфонил или NR6, где R6 определен выше и

- в качестве заместителя С14алкокси, С2-C4алкенилокси, С24алкинилокси, арил(С14)алкилокси, ацил, С14алкиламино, С14алкилтио, ациламино, (С14алкокси)карбонил, (С14алкокси)карбониламино, ацилокси, (С14алкил)карбамоил, нитро, галоген, амино, гидрокси или карбокси, и каждый R2, R3, R4 и R5 независимо означает Н, С14алкил или ацил, или их фармацевтически приемлемую соль или гидрат,

- соединения, описанные в заявке ЕР 1002792 А1, например, соединение формулы II

где m равно 1-9 и каждый из радикалов R'2, R'3, R'4 и R'5 независимо означает Н, C16алкил или ацил или их фармацевтически приемлемые соль или гидрат,

- соединения, описанные в заявке ЕР 0778263 А1, например, соединение формулы III

где W означает Н, C16алкил, С26алкенил или С26алкинил, незамещенный или замещенный ОН-группой фенил, R"4O(CH2)n или С16алкил, содержащий от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, С38циклоалкил, фенил и фенил, замещенный ОН-группой,

Х означает Н или незамещенную или замещенную прямую алкильную группу, содержащую р атомов углерода, или незамещенную или замещенную прямую алкоксигруппу, содержащую (р-1) атомов углерода, например, содержащую от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, включающей C16алкил, ОН, C16алкокси, ацилокси, амино, C16алкиламино, ациламино, оксо, галогенС16алкил, галоген, незамещенный фенил или фенил, содержащий от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, включающей C16алкил, ОН, C16алкокси, ацил, ацилокси, амино, C16алкиламино, ациламино, галогенС16алалкил и галоген, Y означает Н, C16алкил, ОН, C16алкокси, ацил, ацилокси, амино, C16алкиламино, ациламино, галогенС16алкил или галоген, Z2 означает простую связь или прямую алкиленовую группу, содержащую q атомов углерода,

р и q независимо равны целому числу от 1 до 20, при условии, что 6≤p+q≤23, m' равно 1, 2 или 3, n равно 2 или 3,

каждый из радикалов R"1, R"2, R"3 и R"4 независимо означает Н, C14алкил или ацил,

или их фармацевтически приемлемые соль или гидрат,

- соединения, описанные в заявке WO 02/18395, например, соединение формулы IVa или IVb

или

где Ха означает О, S, NR1s или группу -(СН2)na-, незамещенную или содержащую в качестве заместителя от 1 до 4 атомов галогена, na равно 1 или 2, R1s означает Н или (С14)алкил, незамещенный или замещенный галогеном, R1a означает Н, ОН, (С14)алкил или O(С14)алкил, причем алкил является незамещенным или содержит в качестве заместителей от 1 до 3 атомов галогена, R1b означает Н, ОН или

14)алкил, причем алкил является незамещенным или замещенным галогеном, каждый из радикалов R2a независимо выбирают из группы, включающей Н или (С14)алкил, причем алкил является незамещенным или замещенным галогеном, R3a означает Н, ОН, галоген или O(С14)алкил, причем алкил является незамещенным или замещенным галогеном, R3b означает Н, ОН, галоген, (С14)алкил, причем алкил является незамещенным или замещенным группами гидрокси или O(С14)алкил, причем алкил является незамещенным или содержит в качестве заместителя атом галогена, Ya означает -СН2-, -С(O)-, -CH(OH)-, -C(=NOH)-, О или S, а R4a означает (С414)алкил или (С414)алкенил,

или их фармацевтически приемлемые соли или гидраты,

- соединения, описанные в заявке WO 02/076995, например, соединение формулы V

где mc рано 1, 2 или 3,

Хс означает О или простую связь;

R1c означает Н, C16алкил, необязательно содержащий в качестве заместителя группы ОН, ацил, галоген, С330циклоалкил, фенил или гидроксифенилен, или означает С26алкенил, С26алкинил или фенил, необязательно замещенный группой ОН,

R2c означает

где R5c означает Н или C14алкил, необязательно замещенный 1, 2 или 3 атомами галогена, a R6c означает Н или С14алкил, необязательно замещенный атомом галогена,

каждый из радикалов R3c и R4c независимо означает Н, С14алкил, необязательно замещенный галогеном, или ацил,

Rc означает С1320алкил, необязательно содержащий в цепи атом кислорода и необязательно замещенный группами нитро, галоген, амино, гидрокси или карбокси, или означает остаток формулы (а)

где R7c означает Н, С14алкил или С14алкокси, a R8c замещенный C120алканоил, фенилС114алкил, причем С114алкил необязательно замещен галогеном или ОН группой, циклоалкилС114алкокси или фенилС114алкокси, причем циклоалкильное или фенильное кольцо необязательно замещено галогеном, группами С14алкил и/или С14алкокси, фенил(С114)алкокси(С114)алкил, фенокси(С114)алкокси или фенокси(С114)алкил,

Rc также означает остаток формулы (а), где R8c означает С114алкокси, причем R1c означает С14алкил, С26алкенил или С26алкинил,

или соединение формулы VI

где nx равно 2, 3 или4,

R1x означает Н, C16алкил, необязательно замещенный группами ОН, ацил, галоген, циклоалкил, фенил или гидрокси-фенилен, и означает С26алкенил, С26алкинил или фенил, необязательно замещенный ОН группой,

R2x означает Н, С14алкил или ацил,

каждый из радикалов R3x и R4x независимо означает Н, С14алкил, необязательно замещенный группами галоген или ацил,

R5x означает Н, С14алкил или С14алкокси, а

R6x означает С120алканоил, замещенный циклоалкилом и означает циклоалкил(С14)алкокси, причем циклоалкильное кольцо необязательно замещено группами галоген, С14алкил и/или С14алкокси, и означает фенил(С14)алкокси, причем фенильное кольцо необязательно замещено группами галоген, С14алкил и/или С14алкокси,

R6x также означает С414алкокси, если R1x означает С24алкил, замещенный ОН группой, или означает пентилокси или гексилокси, если R1x означает С14алкил,

при условии, что R6x не означает фенилбутиленокси, если R5x означает Н или R1x означает метил,

или их фармацевтически приемлемые соли или гидраты,

- соединения, описанные в заявке WO 02/06268 A1, например, соединение формулы VII

где каждый из радикалов R1d и R2d независимо означает Н или аминозащитную группу,

R3d означает водород, гидроксизащитную группу или остаток формулы

R4d равно С14алкил,

nd равно целому числу от 1 до 6,

Xd означает этилен, винилен, этинилен, группу формулы -D-СН2- (причем D означает карбонил, -СН(ОН)-, О, S или N), арил или арил, содержащий вплоть до трех заместителей, выбранных из группы, как описано в данном контексте,

Yd означает простую связь, С14алкилен, C110алкилен, содержащий вплоть до трех заместителей, выбранных из групп а и b, C110алкилен, содержащий атомы О или S в центральном или в концевом фрагменте углеводородной цепи, или С110алкилен, содержащий атомы О или S в центральном или в концевом фрагменте углеводородной цепи, которая, в свою очередь, содержит вплоть до трех заместителей, выбранных из групп а и b,

R5d означает водород, С36циклоалкил, арил, гетероциклическую группу, С36циклоалкил, содержащую вплоть до трех заместителей, выбранных из групп а и b, арил, содержащий вплоть до трех заместителей, выбранных из групп а и b, или гетероциклическую группу, содержащую вплоть до трех заместителей, выбранных из групп а или b,

каждый из радикалов R6d и R7d независимо означает H или заместитель, выбранный из группы а,

каждый из радикалов R8d и R9d независимо означает Н или С14алкил, необязательно замещенный атомом галогена;

<группа а> означает галоген, (низш.)алкил, галоген(низш.)алкил, (низш.)алкокси, (низш.)алкилтио, карбоксил, (низш.)алкоксикарбонил, гидрокси, (низш.)алифатический ацил, амино, моно(низш.)алкиламино, ди(С14)алкиламино, ациламино, циано или нитро,

<группа b> означает С36циклоалкил, арил или гетероциклическую группу, каждый из которых необязательно содержит вплоть до трех заместителей, выбранных из группы а,

при условии, что если R5d означает водород, то Yd означает простую связь или линейный C110алкилен или фармакологически приемлемые соль, сложный эфир или гидрат указанного соединения,

- соединения, описанные в патенте JP-14316985 (JP 2002316985), например, соединение формулы VIII

где R1e, R2e, R3e, R4e, R5e, R6e, R7e, ne, Хе и Ye описаны в патенте JP-14316985

или его фармакологически приемлемые соль, сложный эфир или гидрат указанных соединенеий,

- соединения, описанные в заявках WO 03/29184 и WO 03/29205, например, соединения формулы IX

где Xf означает О, S, SO или SO2,

R1f означает галоген, тригалогенметил, ОН, С17алкил, С14алкокси, трифторметокси, фенокси, циклогексилметилокси, пиридилметокси, циннамилокси, нафтилметокси, феноксиметил, CH2-OH, СН2-СН2-ОН, C14алкилтио, С14алкилсульфинил, С14алкилсульфонил, бензилтио, ацетил, нитро или циано, или фенил, фенил(С14)алкил или фенил(С14)алкокси, причем каждая фенильная группа необязательно замещена группами галоген, CF3, С14алкил или С14алкокси,

R2f означает Н, галоген, тригалогенметил, С14алкокси, С17алкил, фенетил или бензилокси,

R3f означает Н, галоген, CF3, ОН, С17алкил, С14алкокси, бензилокси или С14алкоксиметил,

каждый из радикалов R4f и R5f независимо означает Н или остаток формулы

где каждый из радикалов R8f и R9f независимо означает Н или С14алкил, необязательно замещенный атомом галогена и

nf равно целому числу от 1 до 4,

например, 2-амино-2-[4-(3-бензилоксифенокси)-2-хлорфенил]пропил-1,3-пропандиол, 2-амино-2-[4-(3-бензилоксифенилтио)-2-хлорфенил]пропил-1,3-пропандиол или его фармакологически приемлемые соль или гидрат,

- соединения, описанные в заявке WO 03/062252 A1, например, соединение формулы Х

где Ar означает фенил или нафтил, mg и ng независимо равны 0 или 1, А выбирают из группы, включающей СООН, РО3Н2, РО2Н, SO3H, PO(C13алкил)ОН и 1Н-тетразол-5-ил, каждый из радикалов R1g и R2g независимо означает Н, галоген, ОН, СООН или С14алкил, необязательно замещенный атомом галогена, R3g означает Н или С14алкил, необязательно замещенный атомом галогена или группой ОН; каждый радикал R4g независимо означает галоген или необязательно замещенный атомом галогена С14алкил или C13алкокси, каждый из радикалов Rg и М имеет значение, как указано для В и С, соответственно, в заявке WO 03/062252 A1,

- соединения, описанные в заявке WO 03/062248 A2, например, соединение формулы XI

где Ar означает фенил или нафтил, n равно 2, 3 или 4, А означает СООН, 1H-тетразол-5-ил, РО3Н2, PO2H2, -SO3H или PO(R5h)OH, где R5h выбирают из группы, включающей С14алкил, гидроксиС14алкил, фенил, -CO(C13)алкокси и -СН(ОН)фенил, причем указанный фенил или фенильный остаток необязательно замещен, каждый из радикалов R1h и R2h независимо означает Н, галоген, ОН, СООН или необязательно замещенный галогеном С16алкил или фенил, R3h означает Н или С14алкил, необязательно замещенный галогеном и/или ОН группой, каждый радикал R4h независимо означает галоген, ОН, СООН, С14алкил, S(O)0,1 или 2(С13)алкил, C13алкокси, С36циклоалкокси, арил или аралкокси, причем алкильный фрагмент необязательно замещен 1-3 атомами галогена, и каждый из радикалов Rh и М имеет одно из значений, указанных для В и С, соответственно, в заявке WO 03/062248 A2.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения агонистом или модулятором рецептора S1P, используемым в комбинации по настоящему изобретению, является селективный рецептор S1P1, например, соединение, характеризующееся селективностью в отношении рецептора S1P1, которая по сравнению с рецептором S1P3 по крайней мере в 20 раз выше, например, в 100, 500, 1000 или 2000 раз, причем указанную селективность оценивают по соотношению ЕС50 для рецептора S1P1 к ЕС50 для рецептора S1P3, которые рассчитывали по данным анализа связывания с 35S-ГTФγS, при этом указанное соединение характеризуется значением EC50 при связывании с рецептором S1P1, равным 100 нМ или менее, по данным анализа связывания с 35S-ГTФγS. Типичными примерами агонистов или модуляторов рецептора S1P1 являются, например, соединения, перечисленные в заявке WO 03/061567, включенной в данное описание в качестве ссылки, например, соединение формулы

или

Если в молекуле формул I-XIII содержится один или более ассиметрических центров, то настоящее изобретение включает различные оптические изомеры, а также рацематы, диастереоизомеры и их смеси. Соединения формулы III-IVb, при условии, что атом углерода, связанный с аминогруппой является ассиметричным, предпочтительно имеют R-конфигурацию указанного атома углерода.

Соединения формул I-XIII существуют в свободной форме или в форме соли. Примеры фармацевтически приемлемых солей соединений формул I-XIII включают соли неорганических кислот, такие как гидрохлорид, гидробромид и сульфат, соли органических кислот, такие как ацетат, фумарат, малеат, бензоат, цитрат, малат, метансульфонат и бензолсульфонат, или, соответственно, соли, с металлом, таким как натрий, калий, кальций или алюминий, соли аминов, таких как триэтиламин, и соли двухосновных аминокислот, таких как лизин. Соединения и соли в составе комбинаций по настоящему изобретению включают гидраты и сольваты.

Ацил, описанный выше, означает остаток Ry-CO-, где Ry означает С16алкил, С36циклоалкил, фенил или фенил(С14)алкил. Если не указано иное, алкил, алкокси, алкенил или алкинил являются прямыми или разветвленными.

Арил означает фенил или нафтил, предпочтительно фенил.

Если в соединении формулы I углеводородная цепь R1 содержит заместители, то предпочтительными заместителями являются галоген, нитро, амино, гидрокси или карбокси. Если углеводородная цепь содержит необязательно замещенный фенилен, то углеводородная цепь предпочтительно является незамещенной. Если остаток фенилена содержит заместитель, предпочтительными заместителями являются галоген, нитро, амино, метокси, гидрокси или карбокси.

Предпочтительными соединениями формулы I являются соединения, в которых R1 означает С1320алкил, необязательно замещенный группами нитро, галоген, амино, гидрокси или карбоксил, и, более предпочтительно соединения, в которых R1 означает фенилалкил, замещенный группой С614алкил, необязательно замещенный галогеном, а алкильный остаток означает С16алкил, необязательно замещенный гидроксигруппой. Более предпочтительно, R1 означает фенил(С16)алкил, замещенный в фенильном остатке прямой или разветвленной, предпочтительно прямой цепью С614алкил. Остаток С614алкил находится в орто-, мета- или пара-положении, предпочтительно в пара-положении.

Предпочтительно каждый из радикалов R2-R5 означает Н.

В приведенной выше формуле VII «гетероциклическая группа» означает 5-7-членный гетероцикл, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из S, О и N. Примеры таких гетероциклических групп включают гетероарильные группы, описанные выше, и гетероциклические соединения, соответствующие частично или полностью гидрированным гетероарильным группам, например фурил, тиенил, пирролил, азепинил, пиразолил, имидазолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, триазолил, тетразолил, тиадиазолил, пиранил, пиридил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, тетрагидропиранил, морфолинил, тиоморфолинил, пирролидинил, пирролил, имидазолидинил, пиразолидинил, пиперидинил, пиперазинил, оксазолидинил, изоксазолидинил, тиазолидинил или пиразолидинил. Предпочтительными гетероциклическими группами являются 5-6-членные гетероарильные группы, наиболее предпочтительными гетероциклическими группами являются морфолинил, тиоморфолинил или пиперидинил.

Предпочтительным соединением формулы I является 2-амино-2-тетрадецил-1,3-пропандиол. Наиболее предпочтительным агонистом рецептора S1P формулы I является FTY720, т.е. 2-амино-2-[2-(4-октилфенил)этил]пропан-1,3-диол в свободной форме или в виде фармацевтически приемлемой соли (в данном контексте соединение А), например, гидрохлорид, как показано ниже:

Предпочтительным соединением формулы II является соединение, в котором каждый из радикалов R'2-R'5 означает Н, a m равно 4, т.е. 2-амино-2-{2-[4-(1-оксо-5-фенилпентил)фенил]этил}пропан-1,3-диол в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли (в данном контексте соединение В), например гидрохлорид.

Предпочтительным соединением формулы III является соединение, в котором W означает СН3, каждый из радикалов R"1-R"3 означает Н, Z2 означает этилен, Х означает гептилокси, a Y означает H, т.е. 2-амино-4-(4-гептилоксифенил)-2-метилбутанол в свободной форме или в виде фармацевтически приемлемой соли (в данном контексте соединение С), например гидрохлорид. Наиболее предпочтительным является R-энантиомер.

Предпочтительным соединением формулы IVa является фосфат FTY720 (R2a означает Н, R3a означает ОН, Ха означает О, R1a и R1b означают ОН). Предпочтительным соединением формулы IVb является фосфат соединения С (R2a означает Н, R3b означает ОН, Ха означает О, R1a и R1b означают ОН, Ya означает О, a R4a означает гептил). Предпочтительным соединением формулы V является фосфат соединения В.

Предпочтительным соединением формулы V является моно-[(R)-2-амино-2-метил-4-(4-пентилоксифенил)бутиловый]эфир фосфорной кислоты.

Предпочтительным соединением формулы VII является (2R)-2-амино-4-[3-(4-циклогексилоксибутил)бензо[b]тиен-6-ил]-2-метилбутан-1-ол.

JAK3 означает фермент, экспрессия которого главным образом происходит в Т- и В-клетках. Этот фермент играет ключевую роль в росте и функционировании Т-клеток. Ингибиторами киназы JAK3 являются, например, соединения, значение IC50 которых составляет <5 мкМ, предпочтительно <1 мкМ, более предпочтительно <0,1 мкМ, причем IC50 определяют по следующим методикам:

Зависимая от интерлейкина-2 (IL-2) пролиферация клеток CTL/L и НТ-2

Зависимые от IL-2 Т-клетки мыши линий CTL/L и НТ-2 культивировали в среде RPMI 1640 (Gibco 52400-025) в смеси, содержащей 10% Fetal Clone I (HyClone), 50 мкМ 2-меркаптоэтанола (31350-010), гентамицин 50 мкг/мл (Gibco 15750-037), 1 мМ пируват натрия (Gibco 11360-039), аминокислоты (Gibco 11140-035, 100х) и IL-2 мыши 250 Ед./мл (супернатант трансфектированных клеток X63-Ag8, содержащий 50000 Ед./мл IL-2 мыши по стандарту Genzyme). Культуры расщепляли два раза в неделю 1:40.

Перед использованием клетки дважды промывали клеточной средой, не содержащей IL-2 мыши. Уровень пролиферации определяли при плотности 4000 CTL/L клеток в лунке или 2500 НТ-2 клеток в лунке в 96-луночном планшете с плоским дном для культур тканей, содержащем исследуемые соединения в соответствующем разбавлении в клеточной среде при концентрации 50 Ед./мл IL-2 мыши. Культуры клеток CTL/L инкубировали при 37°С в течение 24 ч, а культуры клеток НТ-2 в течение 48 ч. Затем добавляли 1 мкКи мкК 3Н-тимидина, выдерживали в течение ночи, клетки собирали на волоконном фильтре и измеряли радиоактивность.

Зависимая от интерлейкина-2 пролифереация моноядерных клеток периферической крови человека

Моноядерные клетки периферической крови человека выделяли в градиенте плотности фикала из лейкоцитной пленки неизвестного типа HLA (Blutspendezentrum, Kantonsspital, Базель, Швейцария). Клетки до использования хранили при плотности 2×107 клеток/мл (90% ФСТ, 10% ДМСО) в криопробирках (Nunc) в жидком азоте.

Клетки выдерживали в течение четырех сут при 37°С в инкубаторе с увлажненным СО2 (7%) во флаконах (Costar) при плотности 7×105 клеток/мл в клеточной среде, содежащей RPMI 1640 (Gibco, Pacely, Англия) и пируват Na (1 мМ, Gibco), заменимые аминокислоты MEM и витамины (Gibco), 2-мекаптоэтанол (50 мкМ), L-глутамин (2 мМ), гентамицин и пенициллин/стрептомицин (100 мкг/мл, Gibco), бактоаспарагин (20 мкг/мл, Difco), инсулин человека (5 мкг/мл, Sigma), трансферин человека (40 мкг/мл, Sigma), эмбриональную телячью сыворотку (ЭТС) (10%, Hyclone Laboratories, Logan, UT) и фитогемагглутинин 100 мкг/мл. Клетки дважды промывали в среде RPMI 1640, содержащей 10% ФСТ и выдерживали в течение 2 ч. После центрифугирования клетки помещали в описанную выше клеточную среду (не содержащую фитогемагглутинин), содержащую интерлейкин-2 (Chiron, 200 Ед./мл), добавленную в 96-луночные планшеты для культур тканей с плоским дном (Costar, №3596) в трех повторах при плотности 5×104 клеток/0,2 мл в присутствии исследуемых соединений в соответствующей концентрации и выдерживали при 37°С в течение 72 ч. В последние 16 ч добавляли 3Н-тимидин (1 мкКи/0,2 мл). Затем клетки собирали и измеряли радиоактивность на сцинцилляционном счетчике радиоактивности.

Пригодные ингибиторы киназ JAK3 включают, например,

- соединения, описанные в заявке USP 2003/0073719 А1, например соединения формулы XIV

где каждый из радикалов R2j и R3j независимо выбирают из группы, включающей Н, амино, галоген, ОН, нитро, карбокси, С26алкенил, C26алкинил, CF3, трифторметокси, C16алкил, C16алкокси, С36циклоалкил, причем алкил, алкокси или циклоалкил необязательно содержат в качестве заместителя от одной до трех групп, выбранных из группы, включающей галоген, ОН, карбокси, амино, С16алкилтио, C16алкиламино, (C16алкил)2амино, С59гетероарил, С29 гетероциклоалкил, С39циклоалкил или С610арил, или каждый из радикалов R2j и R3j независимо означает С310диклоалкил, С310циклоалкокси, C16алкиламино, (С16алкил)2амино, С610ариламино, C16алкилтио, С610арилтио, C16алкилсульфинил, С610арилсульфинил, C16алкилсульфонил, С610арилсульфонил, C16ацил, C16алкокси-CO-NH-, C16алкиламино-СО-, С59гетероарил, С29гетероциклоалкил или С610арил, причем гетероарил, гетероциклоалкил и арил независимо содержат от одного до трех заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, С16алкил, С16алкил-СО-NH-, C16алкокси-CO-NH-, С16алкил-СО-NH-(С16)алкил, С16алкокси-СО-NH-(С16)алкил, С16алкокси-СО-NH-(С16)алкокси, карбокси, карбокси(С16)алкил, карбокси(С16)алкокси, бензилоксикарбонил(С16)алкокси, C16алкоксикарбонил(С16)алкокси, С610арил, амино, амино(С16)алкил, С27алкоксикарбониламино, С610арил(С27)алкоксикарбониламино, C16алкиламино, (С16алкил)2амино, С16алкиламино(С16)алкил, (C16алкил)2амино(С16)алкил, гидрокси, C16алкокси, карбокси, карбокси(С16)алкил, С27алкоксикарбонил, С27алкоксикарбонил(С16)алкил, C16алкокси-CO-NH-, С16алкил-СО-NH-, циано, С59 гетероциклоалкил, амино-CO-NH-, С16алкиламино-СО-NH-, (С16алкил)2амино-СО-NH-, С610ариламино-CO-NH-, С59гетероариламино-СО-NH-, C16алкиламино-СО-NH-(С16)алкил, (С16алкил)2амино-СО-NH-(С16)алкил, C6-C10ариламино-CO-NH-(C16)алкил, С59гетероариламино-СО-NH-(С16)алкил, С16алкилсульфонил, C16алкилсульфониламино, C16алкилсульфониламино(С16)алкил, С610арилсульфонил, С610арилсульфониламино, С610арилсульфониламино(С16)алкил, С1-C6алкилсульфониламино, С16алкилсульфониламино(С16)алкил, C59гетероарил или С29гетероциклоалкил, например, метил-[(3R,4R)-4-метил-1-(пропан-1-сульфонил)-пиперидин-3-ил]-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амин, метиловый эфир (3R,4R)-4-метил-3-[метил-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидин-1-карбоновой кислоты, 3,3,3-трифтор-1-{(3R,4R)-4-метил-3-[метил-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидин-1-ил}пропан-1-он, диметиламид (3R,4R)-4-метил-3-[метил-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидин-1-карбоновой кислоты, этиловый эфир {(3R,4R)-4-метил-3-[метил-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидин-1-карбонил}амино)уксусной кислоты, 3-{(3R,4R)-4-метил-3-[метил-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидин-1-ил}-3-оксопропионитрил, 3,3,3-трифтор-1-{(3R,4R)-4-метил-3-[-метил-(5-метил-7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидин-1-ил}пропан-1-он, 1-{(3R,4R)-4-метил-3-[метил-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидин-1-ил}бут-3-ин-1-он, 1-{(3R,4R)-3-[(5-[хлор-7Н-пирроло-[2,3-d]пиримидин-4-ил)метиламино]-4-метилпиперидин-1-ил}пропан-1-он, 1-{(3R,4R)-3-[(5-фтор-7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)метиламино]-4-метилпиперидин-1-ил}пропан-1-он, (3R,4R)-N-циано-4-метил-3-[метил-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]-N'-пропилпиперидин-1-карбоксамидин или (3R,4R)-N-циано-4-N,N-триметил-3-[метил-7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидин-1-карбоксамидин,

- соединения, описанные в заявке WO 02/092571, например, соединение формулы XV

где

Ar1 выбирают из группы, включающей фенил, тетрагидронафтенил, индолил, пиразолил, дигидроинденил, 1-оксо-2,3-дигидроинденил или индазолил, каждый из которых необязательно замещен одной или более групп, выбранных из группы, включающей галоген, гидрокси, циано, С18алкокси, CO2R8k, CONR9kR10k, С18алкил-O-(С18)алкил, С1-C8алкил-NR8k(C18алкил, С1-C8aлкил-CONR8-(C1-C8)алкил, С1-C8алкил-CONR9kR10k NR8kCO(C1-C8)алкил, C1-C8тиоалкил, C1-C8алкил (каждый радикал необязательно замещен одной или более группами ОН или циано или фтор) или C1-C8алкокси,

Xk означает NR3k или О, nk равно 0 или 1,

каждая группа Rk независимо означает водород или C1-C8aлкокси,

каждый из радикалов R1k и R2k независимо выбирают из группы, включающей Н, галоген, нитро, циано, C1-C8aлкил, C1-C8aлкокси, ОН, арил, Yk(CR11k2)pkNR4kR5k, Yk(CR11k2)pkCONR4kR5kYk(CR11k2)pkCO2R6k, Yk(CR11k2)pkOR6k, Yk(CR11k2)pkR6k или R1k и R1k вместе образуют -ОСНО- или -OCH2CH2O-,

каждый из радикалов R11k независимо означает Н, С18алкил, гидрокси или галоген, pk равно 0, 1, 2, 3, 4 или 5,

R3k означает Н или C1-C8aлкил,

Yk означает кислород, СН2 или NR7kR3k означает водород или C1-C8aлкил,

каждый из радикалов R4k и R5k независимо означает Н, C1-C8aлкил, или R4k и R5k вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-7-членную насыщенную или ароматическую гетероциклическую кольцевую систему, необязательно содержащую дополнительный атом или группу О, S, NR6k, или один из радикалов R4k и R5k означает Н или С18алкип, а другой означает 5- или 6-членную гетероциклическую кольцевую систему, необязательно содержащую дополнительный атом О, S или N,

R6k означает Н, С18алкил, фенил или бензил,

R7k означает Н или С18алкил,

R8k означает Н или С18алкил, каждый из радикалов R9k и R10 независимо означает водород или С18алкил,

- соединения, описанные в заявке US 2002/0055514 А1, например, соединение формулы XVI

где Xo означает NH, NR11o, S, О, СН2 или R11oCH,

R11o означает Н, С14алкил или С14алканоил,

каждый из радикалов R1o-R8o независимо означает Н, галоген, ОН, меркапто, амино, нитро, С14алкил, С14алкокси или С14алкилтио, причем два радикала из R1o-R5o вместе с фенильным кольцом, к которому они присоединены, необязательно образуют конденсированное кольцо, например, нафтил или тетрагидронафтил, и причем кольцо, образованное двумя соседними группами R1o-R5o необязательно замещено 1, 2, 3 или 4 атомами галогена, группами гидрокси, меркапто, амино, нитро, С14алкил, С14алкокси или С14алкилтио, при условии, что по крайней мере один из радикалов R2o-R5o означает ОН и

каждый из радикалов R9o и R10o независимо означает Н, галоген, С1-4алкил, С1-С4алкокси или С14алканоил, или R9o и R10o вместе образуют метилендиокси,

- соединения, описанные в заявке WO 04/052359, например соединение формулы XVII

где np равно 1, 2, 3, 4 или 5,

R1p означает Н, СН3 или CH2N(СН3)2, а

R3p означает CH2N(СН3)2,

в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли.

Соединения формул XIV-XVII существуют в свободной форме или в форме соли. Примеры фармацевтически приемлемых солей соединений формулы XIV-XVI включают соли неорганических кислот, такие как гидрохлорид, соли органических кислот, таких как уксусная или лимонная, или, соответственно, соли металла, такого как натрий или калий, соли аминов, таких как триэтиламин, и соли двухосновных аминокислот, таких как лизин.

Если соединения формулы XIV-XVII содержат в молекуле один или более ассиметрических центров, настоящая заявка включает различные оптические изомеры, а также рацематы, диастереоизомеры и их смеси. Если соединения формулы XIV-XVII содержат в молекуле двойную связь, соединение находится в цис- или транс-конформации или образует смесь указанных изомеров.

В формуле XIV С610арил означает фенил или нафтил. С29 гетероциклоалкил означает пирролидинил, тетрагидрофуранил, дигидрофуранил, тетрагидропиранил, пиранил, тиопиранил, азиридинил, оксиранил, метилендиокси, изоксазолидинил, 1,3-оксазолидин-3-ил, изотиазолидинил, 1,3-тиазолидин-3-ил, 1,2-пиразолидин-2-ил, 1,3-пиразолидин-1-ил, пиперидинил, морфолинил, пиперазинил и т.п. Указанные группы присоединены через атом С или N. С29 гетероарил означает, например фурил, тиенил, тиазолил, пиразолил, изотизолил, оксазолил, изоксазолил, пирролил, триазолил, тетразолил, имидазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, пиридил, пиримидил, пиразинил, пиридазинил, триазинил, пиразоло[3,4-b]пиридинил, циннолинил, птеридинил, пуринил, бензоксазолил, бензотиазолил, бензофуранил, изоиндолил, индолил, индолизинил, индазолил, изохинолил, хинолил, фталазинил, хиноксалинил, хиназолинил, бензоксазинил и т.п. Эти группы присоединены через атом С или N.

Предпочтительные ингибиторы киназы JAK3 включают, например, N-бензил-3,4-дигидроксибензилиденцианоацетамид α-циано-(3,4-дигидрокси)-]N-бензилциннамамид (Tyrphostin AG 490), продигиозин 25-С (PNU 156804), [4-(4'-гидроксифенил)амино-6,7-диметоксихиназолин] (WHI-P131), [4-(3'-бром-4'-гидроксилфенил)амино-6,7-диметоксихиназолин] (WHI-P-154), [4-(3',5'-дибром-4'-гидроксилфенил)амино-6,7-диметоксихиназолин] WHI-P97 и 3-{(3R,4R)-4-метил-3-[метил-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино]пиперидин-1-ил}-3-оксопропионитрил, в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли, например моноцитрат (соединение СР-690550) или соединение формулы XVII.

Все публикации, цитированные в данном описании, включены в настоящее изобретение в качестве ссылок. В настоящее изобретение также включены фармацевтически приемлемые соли указанных соединений, соответствующие рацематы, диастереоизомеры, энантиомеры, таутомеры, а также соответствующие кристаллические модификации указанных выше соединений, например сольваты, гидраты и полиморфные формы, описанные в настоящей заявке. Соединения, используемые в качестве активных ингредиентов в составе комбинации по настоящему изобретению, получают и вводят, как описано в цитированных документах, соответственно. В настоящее изобретение также включены комбинации более двух различных активных ингредиентов, т.е. фармацевтические комбинации по настоящему изобретению включают три активных ингредиента или более.

В настоящее изобретение включены

1. Фармацевтическая комбинация, включающая:

а) по крайней мере один агонист или модулятор рецептора S1P и

б) по крайней мере один ингибитор киназы JAK3.

2. Способ лечения или профилактики аутоиммунных заболеваний и состояний или отторжения трансплантатов клеток, тканей или органов, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, причем указанный способ включает совместное введение указанному субъекту, например, одновременно или последовательно, терапевтически эффективного количества по крайней мере одного агониста или модулятора рецептора S1P и по крайней мере одного ингибитора киназы JAK3, например, как описано выше.

Примеры аутоиммунных заболеваний включают, например саркоидоз, пневмофиброз, идиопатическую интерстициальную пневмонию, обструктивное заболевание дыхательных путей, включая астму, врожденную астму, приобретенную астму, аллергическую астму на пыль, хроническую или застарелую астму (например, позднюю астму или гиперчувствительность дыхательных путей), бронхит, включая бронхиальную астму, детскую астму, аллергический ревматоидный артрит, системную красную волчанку, нефротический синдром красной волчанки, хронический лимфатозный тереоидит Хасимото, рассеянный склероз, бульбоспинальный паралич, сахарный диабет тип I и связанные с ним осложнения, сахарный диабет типа II у взрослых, увеит, нефротический синдром, стероидзависимый и стероидустойчивый нефроз, ладонно-подошвенный пустулез, аллергический энцефаломиелит, гломерулонефрит, псориаз, псориатический артрит, атопическая экзема (диффузный нейродерматит), контактные дерматиты и другие экзематозные дерматиты, себорейный дерматит, пемфигоидный плоский лишай, пемфигус, буллезный пемфигоид, буллезный эпидермолиз, крапивница, отек Квинке, васкулиты, эритемы, кожный ацидоцитоз, угри, очаговая аллопеция, эозинофильный фасцит, атеросклероз, конъюнктивит, кератоконъюнктивит, кератит, весенний конъюнктивит, увеит, связанный с болезнью Бехчета, герпетический кератит, коническая роговица, эпителиальная дистрофия роговицы, помутнение роговицы, буллезный мукосинехиальный атрофический дерматит, разъедающая язва роговицы, склерит, офтальмопатия Грейвса, тяжелое внутриглазное воспаление, воспаление слизистой оболочки или кровеносных сосудов, такие как заболевания, опосредованные лейкотриеном В4, язва желудка, повреждения сосудов, в результате ишемии и тромбоза, ишемическое заболевание кишечника, воспаление кишечника (например, заболевание Крона и язвенный колит), некротизирующий энтероколит, заболевания почек, включая интерстициальный нефрит, синдром Гудпасчера, гемолитическо-уремический синдром и диабетическая нефропатия, заболевания ЦНС, включая множественный миозит, инфекционный полиневрит, болезнь Меньера и радикулопатию, диффузные болезни соединительной ткани, включая склеродермию, глаукому Вегенера и синдром Шегрена, хронические аутоиммунные заболевания печени, включая аутоиммунный гепатит, билиарный первичный цирроз печени и склерозирующий холангит), частичная резекция печени, острый некроз печени (например, некроз, вызванный токсинами, вирусный гепатит, шок или аноксия), вирусный гепатит типа В, гепатиты, не относящиеся к типам А и В, и цирроз печени, фульминантный гепатит, пустулезный псориаз, болезнь Бехчета, активный хронический гепатит, синдром Эванса, сенная лихорадка, идиопатический гипопаратиреоидизм, Адиссонова болезнь, аутоиммунный атрофический гастрит, люпоидный гепатит, тубулоинтерстициальный нефрит, мембранный нефрит, боковой амиотрофический склероз или ревматизм.

Отторжение трансплантата означает острое или хроническое отторжение клеток, тканей или органов алло- или ксенотрансплантатов, например островков Лангерганса, стволовых клеток, костного мозга, кожи, мышц, ткани роговицы, нейронной ткани, сердца, легких, совместного трансплантата сердце-легкие, почек, печени, кишечника, поджелудочной железы, трахеи или пищевода, или заболевание трансплантат против хозяина. Хроническое отторжение также называется отторжением трансплантатов сосудов или васкулопатией.

3. Фармацевтическая комбинация, как определено выше в пункте 1), например, в форме набора, который включает инструкции по применению, например, для использования согласно способу, как определено в пункте 2) выше.

4. Фармацевтическая комбинация, как определено выше в пункте 1) для применения при получении лекарственного средства, предназначенного для применения согласно способу, как описано выше в пункте 2).

Применение комбинации по настоящему изобретению в способе, как определено выше, описано в методиках испытаний на моделях животных, а также в ходе клинических испытаний, например, по описанным ниже методикам.

А1. Трансплантация сердца крысы

Для испытаний использовали комбинации штаммов: Male Lewis (RT1 гаплотип) и BN (RT1 гаплотип). Животных анастезировали ингаляцией изофлуорана. После гепаринизации крысы-донора через нижнюю полую брюшную вену с одновременным обескровливанием через аорту, грудную клетку вскрывали и быстро охлаждали сердце. Аорту перевязывали и отделяли до первого ответвления, плечеголовной ствол отделяли до первого разветвления. Левую легочную артерию перевязывали и отделяли, правую сторону отделяли, а левую открывали. Все остальные сосуды иссекали, перевязывали и отделяли, а донорское сердце помещали на лед в физиологическом растворе.

Рецепиента готовили, иссекая и пережимая нижнюю брюшную подпочечную аорту и полую вену. Трансплантат имплантировали анастомозом «конец в бок», с использованием хирургической мононити 10/0, между плечеголовым стволом донора, аортой реципиента и правой легочной артерией донора к полой вене реципиента. Зажимы удаляли, трансплантат закрепляли в брюшной полости, брюшную полость промывали теплым физиологическим раствором, животное зашивали и оставляли для восстановления под нагревательной лампой. Приживаемость трансплантата регистрировали ежедневной пальпацией бьющегося донорского сердца через брюшную стенку. Отторжение признавали полным, если сердцебиение прекращалось. Улучшение приживаемости трансплантата наблюдали у животных, которым вводили комбинацию по настоящему изобретению, например, комбинацию соединения А в форме гидрохлорида и соединения СР-690550 в форме моноцитрата, причем каждый компонент комбинации вводили перорально, в суточной дозе от 0,1 до 50 мг/кг. Таким образом, при введении соединения А в форме гидрохлорида, в суточной дозе от 0,3 до 3 мг/кг и моноцитрата соединения СР-690550 при ЕС50 (концентрация лекарственного средства в крови, при которой у 50% животных наблюдается функционирование трансплантата в течение >28 сут) 60 мг/мл, наблюдается значительное увеличение приживаемости трансплантата.

А2. Трансплантат островковых клеток

Островковые клетки мышей BALB/C (H-2d) трансплантировали под (почечную капсулу STZ-индуцированных диабетических мышей СВА (Н-2k).

Реципиентам в течение 50 сут после трансплантации островковых клеток перорально вводили комбинацию по настоящему изобретению, причем каждый компонент предпочтительно вводили в суточной дозе от 0,1 до 40 мг/кг. Функционирование трансплантата регистрировали, измеряя уровень глюкозы в крови один раз в сутки. Например, нормальная гликемия сохранялась у животных в течение 80±5 и в течение >115 сут у леченных животных, а у нелеченных животных в течение 10±2 сут, например, при лечении гидрохлоридом соединения А в дозе от 1 до 3 мг/сут и моноцитратом СР 690550 в дозе от 0,5 до 75 мг/кг/сут.

В. Комбинированное лечение

Пригодными клиническими испытаниями являются, например, испытания с открытой этикеткой и с увеличением дозы для пациентов, страдающих от псориаза или рассеянного склероза. Такие испытания подтверждают синергетическое действие активных ингредиентов в составе комбинации по настоящему изобретению. Благоприятное действие при лечении псориаза или рассеянного склероза определяли напрямую по результатам указанных испытаний, как известно специалистам в данной области знаний. Такие испытания прежде всего пригодны для сравнения действия монотерапии при использовании активных ингредиентов и комбинации по настоящему изобретению. Предпочтительно дозу агента (а) увеличивают до достижения максимально переносимой допустимой дозы, а агент (b) применяют в фиксированной дозе. В другом варианте агент (а) применяют в фиксированной дозе, а дозу агента (b) увеличивают. Каждый пациент получает дозы агента (а) ежедневно или через определенные промежутки времени. Эффективность лечения определяют в таких испытаниях, например, через 12, 18 или 24 недели, оценивая интенсивность симптомов каждые 6 недель.

В еще одном варианте для оценки преимуществ комбинации по настоящему изобретению используют плацебо-контролируемые двойные, слепые испытания, например, при трансплантации органа, ткани или клеток, например островковых клеток Лангерганса.

Введение фармацевтической комбинации по настоящему изобретению обеспечивает не только благоприятный эффект, например синергетический терапевтический эффект, приводящий, например, к облегчению, приостановке развития или подавлению симптомов заболевания, но также и проявление других неожиданных благоприятных эффектов, например уменьшение побочных действий, улучшение качества жизни пациента или снижение заболеваемости по сравнению с монотерапией с использованием только одного из фармацевтически активных ингредиентов, использованных в комбинации по настоящему изобретению.

Следующим преимуществом является возможность использования меньших доз активного ингредиента в комбинации по настоящему изобретению, например, дозировка не только уменьшается, но также снижается частота введения, что уменьшает число и тяжесть побочных эффектов. Такие преимущества удовлетворяют требованиям пациентов, нуждающихся в лечении.

Термины «совместное введение», «комбинированное введение» или т.п., используемые в данном контексте, означают введение выбранных терапевтических агентов одному пациенту, при этом используют схему лечения, при которой агенты не обязательно вводить одним и тем же способом или одновременно.

Один объект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, включающей такое количество лекарственного средства, которое оказывает совместное терапевтически эффективное действие против отторжения трансплантата, аутоиммунных заболеваний или нарушений и связанных с ними заболеваний, причем указанная композиция включает комбинацию по настоящему изобретению. При испытании данной композиции агенты (а) и (b) вводят совместно, последовательно друг за другом или в отдельности в виде одной объединенной лекарственной формы или в виде двух отдельных лекарственных форм. Стандартная лекарственная форма может представлять собой фиксированную комбинацию.

Фармацевтические композиции для отдельного введения агента (а) и агента (b) или для введения в виде фиксированной комбинации, т.е. в виде отдельной галеновой композиции, включающей по крайней мере два компонента а) и b) по настоящему изобретению, получают по известным методикам, и указанные композиции пригодны для энтерального, например перорального или ректального введения и парентального введения млекопитающим (теплокровным животным), включая человека. Такие композиции включают терапевтически эффективное количество по крайней мере одного фармацевтически активного компонента комбинации, например указанного выше, или в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем, прежде всего, предназначенного для энтерального или парентального введения.

Пригодные фармацевтические композиции включают, например, от приблизительно 0,1% до приблизительно 99,9%, предпочтительно от приблизительно 1% до приблизительно 60% активного ингредиента(ов). Фармацевтические композиции, предназначенные для комбинированной терапии и энтерального или парентального введения, включают, например, композиции, в виде стандартной лекарственной формы, такие как таблетки с сахарным покрытием, таблетки, капсулы, суппозитории или ампулы. Если не указано иное, эти композиции получают по известным методикам, например при стандартном смешивании и гранулировании, нанесении сахарного покрытия, растворении или лиофилизации. Следует отметить, что содержание каждого компонента в индивидуальной лекарственной форме не обязательно составляет эффективное количество, так как необходимое эффективное количество достигается при введении множества лекарственных форм.

Прежде всего, терапевтически эффективное количество каждого компонента комбинации по настоящему изобретению вводят одновременно или последовательно в любом порядке, и компоненты также вводят в отдельности или в виде фиксированной комбинации. Например, способ предотвращения или лечения отторжения трансплантатов или аутоиммунных заболеваний по настоящему изобретению включает (1) введение первого агента а) в свободной форме или в виде фармацевтически приемлемой соли и (2) введение агента b) в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли, одновременно или последовательно в любом порядке, в терапевтически эффективных количествах, предпочтительно в синергетически эффективных количествах, например, в виде суточных доз или доз, введенных попеременно, в соответствии с указанными в данном контексте количествами. Отдельные компоненты комбинации по настоящему изобретению вводят в отдельности в различное время в течение курса лечения или одновременно в виде нескольких или одной формы комбинации. Более того, термин «введение» означает применение активного компонента комбинации в виде пролекарства, которое превращается in vivo в активный компонент. Настоящее изобретение включает все режимы одновременного или попеременного лечения, также как и термин «введение».

Эффективная доза каждого компонента в комбинации по настоящему изобретению изменяется в зависимости от конкретного соединения или применяемой фармацевтической композиции, способа введения, состояния, подлежащего лечению, и тяжести заболевания. Таким образом, режим лечения с использованием комбинации по настоящему изобретению выбирают с учетом множества различных факторов, включая способ введения и состояние почек и печени пациента. Терапевт, клиницист или ветеринар может определить и назначить эффективную дозу каждого из активных ингредиентов, необходимую для облегчения интенсивности симптомов, лечения или приостановки прогрессирования заболевания. Оптимальную точность при определении концентрации активного ингредиента в интервале проявления эффективности в отсутствии токсичности рассчитывают с учетом кинетики доставки активных ингредиентов в участки-мишени.

Суточные дозы агентов а) или b) зависят от множества факторов, например, от конкретного соединения, состояния, подлежащего лечению, и требуемого эффекта. В общем случае, однако, удовлетворительные результаты достигаются при введении агента а) в дозе приблизительно от 0,03 до 5 мг/кг в сутки, прежде всего от 0,1 до 5 мг/кг в сутки, например, от 0,1 до 2,5 мг/кг в сутки, в виде единой дозы или в виде нескольких раздельных доз. Агонист или модулятор рецептора S1P, например, соединение формулы I-XIII, например, соединение А или В, вводят любым пригодным способом, прежде всего энтерально, например перорально, например, в форме таблеток, капсул, питьевых растворов или парентально, например в форме растворов или суспензий для инъекций. Пригодные стандартные лекарственные формы для перорального введения включают приблизительно от 0,02 до 50 мг активного ингредиента, обычно от 0,1 до 30 мг, например, соединения А или В, в смеси с одним или более фармацевтически приемлемых разбавителей или носителей.

Агент b), например соединение СР-690550 или соединение формулы XVII, вводят человеку в суточной дозе от 0,5 до 1000 мг. Пригодные стандартные лекарства для перорального введения включают от приблизительно 0,1 до 500 мг активного ингредиента в смеси с одним или более фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.

Введение фармацевтической комбинации по настоящему изобретению обеспечивает не только благоприятный эффект, например синергетический терапевтический эффект, например, при подавлении отторжения трансплантатов у пациентов, а также при замедлении или приостановке развития аутоиммунных заболеваний, но также обеспечивает другие неожиданные благоприятные эффекты, например снижение побочных действий, улучшение качества жизни или снижение заболеваемости, по сравнению с монотерапией при введении только одного из фармацевтически активных ингредиентов, которые используются в комбинации по настоящему изобретению. Другое преимущество настоящего изобретения заключается в том, что можно использовать более низкие дозы активного ингредиента, входящего в состав комбинации, например, требуется вводить не только более низкие дозы, но и вводить их более редко, что в свою очередь позволяет снизить побочные действия. Такие характеристики находятся в соответствии с требованиями и пожеланиями пациентов, нуждающихся в лечении.

Предпочтительной является комбинация гидрохлорида FTY720 и моноцитрата СР-690555.

1. Фармацевтическая комбинация, предназначенная для использования в способе лечения или профилактики аутоиммунных заболеваний или нарушений или отторжения трансплантатов, включающая 2-амино-2-[2-(4-октилфенил)этил]пропан-1,3-диол (FTY720), фосфат или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения и ингибитор киназы JAK3, представляющий собой моноцитрат 3-{(3R,4R)-4-метил-3-[метил-(7Н-пирроло[2,3-с1]пиримидин-4-ил)амино]пиперидин-1-ил}-3-оксопропионитрила (СР-690555), в эффективных количествах.

2. Фармацевтическая комбинация по п.1, включающая фосфат FTY720.

3. Фармацевтическая комбинация по п.1, включающая гидрохлоридную соль FTY720.

4. Фармацевтическая комбинация по любому из пп.1-3, в которой ингибитор киназы JAK3 обладает значением IC50<0,1 мкМ по данным анализа IL-2-зависимой пролиферации клеток CTL/L и НТ-2 и по данным анализа IL-2-зависимой пролиферации моноядерных клеток периферической крови человека.

5. Фармацевтическая комбинация по любому из пп.1-4, предназначенная для использования в способе лечения или профилактики аутоиммунного заболевания или нарушения.

6. Фармацевтическая комбинация по любому из пп.1-5, где комбинация представляет собой набор.

7. Способ лечения или профилактики аутоиммунных заболеваний или нарушений или отторжения трансплантатов у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий совместное введение указанному субъекту, например, одновременно или последовательно терапевтически эффективных количеств 2-амино-2-[2-(4-октилфенил)этил]пропан-1,3-диола, фосфата или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения и ингибитора киназы JAK3, представляющего собой моноцитрат 3-{(3R,4R)-4-метил-3-[метил-(7Н-пирроло[2,3-с1]пиримидин-4-ил)амино]пиперидин-1-ил}-3-оксопропионитрила (СР-690555).

8. Способ по п.7, в котором используют фосфат FTY720.

9. Способ по п.7, в котором используют гидрохлоридную соль FTY720.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины и фармакологии и касается применения 3-(1-метил-1Н-индол-3-ил)-4-[1-{(1-пиридин-2-илметил)пиперидин-4-ил}-1Н-индол-3-ил]пиррол-2,5-диона или 3-(1-метил-1Н-индол-3-ил)-4-[1-(пиперидин-4-ил)-1Н-индол-3-ил]пиррол-2,5-диона, изготовления фармацевтической композиции для лечения и предупреждения отторжения трансплантата органа или ткани с высокой эффективностью.

Изобретение относится к производным тиофена формулы (I): где А представляет собой -CONH-CH2 -, -CO-CH=CH-, -СО-СН2СН2-, -СО-СН 2-О-, -CO-CH2-NH-, или R1 представляет собой водород, C1-5-алкил или C1-5-алкокси; R2 представляет собой водород, С1-5-алкил, C1-5 -алкокси, трифторметил или галоген; значения R3, R 31, R32, R33, R34, R 4, R5, R6, R7, k, m, n описаны в п.1 формулы.

Изобретение относится к соединению, представленному формулой (Ib) в которой R1 представляет (1) -N(R 1A)SO2-R1B, (2) -SO2NR 1CR1D, (3) -COOR1E, (4) -OR1F , (5) -S(O)mR1G, (6) -CONR1H R1J, (7) -NR1KCOR1L, или (8) циано, где m представляет 0, 1 или 2; Х представляет собой связь или спейсер, содержащий 1-3 атома, в качестве основной цепи; R1A, R1B, R1C, R1D , R1E, R1F, R1G, R1H , R1J, R1K и R1L каждый независимо представляет собой (1) атом водорода, (2) С1-8алкильную группу, которая может иметь заместитель(заместители), выбранные из группы, состоящей из [1] гидрокси группы, [2] карбокси группы, [3] С1-6алкокси группы, которая может быть замещена галогеном, и [4] моно- или дизамещенного аминозамещенного С1-8 алкильной группой или (3) тетрагидропиран, пиперазин, пиперидин, азетидин, пирролидин или морфолин, каждый из которых может иметь заместитель (заместители), выбранные из группы, состоящей из гидрокси, галогена, С1-8алканоила и C1-10галогеналкила, и где R1C и R1D или R1H и R1J вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать пиперазин, пиперидин, азетидин, пирролидин или морфолин, каждый из которых может иметь заместитель (заместители), выбранные из группы, состоящей из гидрокси, галогена, С1-8алканоила и C1-10галогеналкила; кольцо А представляет собой бензольное кольцо или пиридиновое кольцо, каждое из которых может иметь заместитель (заместители), выбранные из группы, состоящей из С1-8алкила, нитро, C1-6алкокси и галогена; кольцо В представляет собой бензольное кольцо, пиридиновое кольцо или пиразиновое кольцо, каждое из которых может иметь заместитель (заместители), выбранные из группы, состоящей из С1-8алкила; R51 представляет собой (1) С1-8алкил, С2-8алкенил или С2-8алкинил, каждый из которых может иметь заместитель (заместители) бензола или (2) бензол, пиразол, пиридин, изоксазол, тиофен, бензотиазол, каждый из которых может иметь заместитель (заместители), выбранные из группы, состоящей из С1-4алкокила, C1-6алкокси, C1-6алкилтио, С1-6алкилсульфинила, C1-6алкилсульфоинила и галогена; R52 представляет собой атом водорода; R53 представляет собой (1) С1-8алкил, С2-8алкенил или С2-8алкинил, каждый из которых может иметь заместитель (заместители) бензола или (3) бензол, пиразол, пиридин, тиофен, бензодиоксан, циклогексан или тетрагидропиран, каждый из которых может иметь заместитель(заместители), выбранные из группы, состоящей из [1] гидрокси группы, [2] циано, [3] карбомоила, [4] аминокарбонила, замещенного одним или двумя заместителями выбранными из (а) гидрокси группы, (b) амино, (с) С1-4алкокси, (d) моно или дизамещенного амина, замещенного С1-8углеводородной группой, (е) карбоксила и (f) C1-6алкоксикарбонила, [5] карбокси, [6] галогена, [7] C1-6алкокси, [8] С1-6алкилсульфонила, [9] амино, [10] C1-6ациламино, [11] алкил-сульфониламино, [12] циклического аминокарбонила и [13] С1-8углеводородная группа, замещенная 1 или 2 заместителями, выбранными из (а) гидрокси, (b) амино, (с) С1-4алкокси, (d) моно или дизамещенного амина, замещенного С1-8углеводородной группой, и (е) аминокарбонила, замещенного С1-8углеводородной группой; к его соли, его N-оксиду, его сольвату.

Изобретение относится к области медицины и фармакологии. .

Изобретение относится к новым кристаллическим модификациям [6-метокси-5-(2-метоксифенокси)-2-пиридин-4-илпиримидин-4-ил]амида 5-метилпиридин-2-сульфоновой кислоты, продуцирующим эндотелиальный антагонистический эффект и пригодным для лечения заболеваний связанных с аномальным сосудистым тонусом и эндотелиальной дисфункцией, таких как сердечная недостаточность, легочная гипертензия и др.

Изобретение относится к новым соединениям формулы I где R1, R2, R3 и R4 независимо друг от друга обозначают водород, F, Cl, Br, I; R5 обозначает водород, алкил с 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомами С, или циклоалкил с 3, 4, 5 или 6 атомами С; R6 обозначает водород; R7 и R8 независимо друг от друга обозначают водород, W обозначает CrH 2r или CsH2s-2; причем одна или несколько СН2-групп в CrH2r и Cs H2s-2 могут быть замещены NR17, кислородом или S; R17 обозначает водород, алкил с 1, 2, 3 или 4 атомами С; r обозначает 1, 2, 3, 4, 5 или 6; s обозначает 2, 3 или 4; X обозначает -С(O)- или -S(O)2-; Z обозначает -С(O)- или связь; а также к их фармацевтически приемлемым солям и трифторацетатам.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к композиции для ранозаживляющего наполнения кожного повреждения, при котором имеет место потеря кожного материала.

Изобретение относится к лекарственным средствам и касается фармацевтической композиции, включающей (i) фармакологически эффективные количества каждого из действующих веществ: а) ингибитора нейтральной эндопептидазы, b) ингибитора эндогенной продуцирующей эндотелин системы и с) ингибитора ГМГ (гидроксиметилглутарил) СоА редуктазы, выбранного из группы, включающей аторвастин и симвастатин или любые их физиологически приемлемые соли, сольваты или эфиры, где субкомбинация ингибитора нейтральной эндопептидазы а) и ингибитора эндогенной продуцирующей эндотелин системы (b) является соединением двойного действия, которое способно ингибировать нейтральную эндопептидазу и человеческую растворимую эндопептидазу, которым является даглутрил, и (ii) предпочтительно фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества и/или носители, для профилактики или лечения сердечно-сосудистых расстройств у млекопитающих и человека.
Изобретение относится к биотехнологии и генной инженерии. .

Изобретение относится к лекарственным средствам и касается фармацевтической композиция для профилактики или лечения сердечно-сосудистых заболеваний, включающей фармакологически эффективное количество а) даглутрила и/или его физиологически совместимых солей и б) гидрохлортиазида или любых его физиологически совместимых таутомеров, солей, сольватов или сложных эфиров.
Изобретение относится к микробиологической промышленности и биотехнологии и касается нового штамма Bacillus thuringiensis (Bt), обладающего противовирусной активностью, в частности, относительно высокопатогенного вируса гриппа птиц A/chicken/Kurgan/05/2005 (A/H5N1) и антикандидозной активностью, в частности, относительно Candida albicans 620.
Изобретение относится к лекарственным средствам и касается комбинации для лечения респираторного заболевания, представляющего собой астму, острый или хронический бронхит, эмфизему, хроническое обструктивное заболевание легких (COPD), бронхиальную гиперреактивность или ринит, содержащей эффективное количество (а) ингибитора PDE4 и эффективное количество (b) антагониста мускариновых рецепторов М3, представляющего собой (3R)-1-фенэтил-3-(9Н-ксантен-9-карбонилокси)-1-азонийбицикло[2.2.2]октан в форме соли с анионом X, представляющим собой фармацевтически приемлемый анион моно- или поливалентной кислоты.

Изобретение относится к соединениям, содержащим N-гетероарильный остаток, который связан через кислород, серу или азот или через метиленовый мостик и кислород, серу или азот с конденсированным циклическим остатком, и к применению их в лекарственных средствах для лечения заболеваний, связанных с NAD(P)H-оксидазами, и для ингибирования активации тромбоцитов.
Наверх