Способ прогнозирования течения заболевания у детей при острых респираторных вирусных инфекциях

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для прогнозирования течения острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ) у детей в первые дни заболевания и своевременного назначения иммуномодулирующих препаратов. Для этого методом иммуноферментного анализа определяют иммунологические показатели спонтанного и индуцированного интерферона-γ in vitro (ИФН-γ). Проводят расчет индекса стимуляции интерферона-γ (ИС ИФН-γ) путем деления показателя индуцированного уровня на показатель спонтанного уровня интерферона-γ. Проводят также расчет индекса активации лимфоцитов (ИАЛ ИФН-γ) на 1000 лимфоцитов путем деления показателя индуцированного интерферона-γ на абсолютное число лимфоцитов пациента. Дополнительно в плазме крови определяют содержание интерлейкина-10 (ИЛ-10). При значениях ИС ИФН-γ больше 3, ИАЛ ИФН-γ равном или больше 40, ИЛ-10 от 30 до 60 пг/мл прогнозируют благоприятный исход заболевания при терапевтическом лечении без включения иммуномодуляторов. При ИС ИФН-γ меньше 3, ИАЛ ИФН-γ меньше 40, ИЛ-10 от 60 до 100 пг/мл прогнозируют тяжелое течение заболевания и развитие осложнений, требующее срочного лечения путем иммуномодулирующей терапии. При ИС ИФН-γ меньше 3, ИАЛ ИФН-γ меньше 30, ИЛ-10 больше 100 пг/мл прогнозируют затяжное течение заболевания с развитием бронхолегочных осложнений и возможной хронизацией патологического процесса и повторных ОРВИ, что требует дополнительного включения иммуномодулирующих препаратов. Способ обеспечивает повышение точности раннего прогнозирования тяжести течения заболевания и развития осложнений у детей с ОРВИ, в том числе в возрасте от 1 месяца, что позволяет своевременно проводить необходимую противовирусную и иммуномодулирующую терапию, направленную на усиление клеточных реакций иммунитета. 3 табл.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и клинической лабораторной диагностике. Оно может быть использовано для прогнозирования течения заболевания, такого как острая респираторная вирусная инфекция (ОРВИ), у детей в возрасте от 1 месяца до 18 лет. Изобретение позволяет предсказать развитие осложнений у детей и на ранней стадии заболевания назначить терапевтические препараты, предотвращающие неблагоприятный ход болезни, в частности выбрать оптимальную иммуномодулирующую терапию.

Изобретение основано на способе оценки общей иммунореактивности организма детей по отдельным показателям интеферонового (ИФН) статуса и по содержанию интерлейкина-10 (ИЛ-10) в плазме крови больного в первые дни (1-й, 2-й день) заболевания ОРВИ.

Факторами, определяющими тяжесть течения, особенность клинических проявлений и исход ОРВИ, кроме свойств возбудителя, являются характеристики способности иммунной системы адекватно реагировать на инфекционный антиген. Острый воспалительный процесс, как правило, сопровождается нарушениями в иммунной системе, которые в большинстве случаев обратимы. Однако развитие осложнений может быть связано с изначальным дефектом в иммунной системе или с недостаточностью функций макрофагальных и иммунокомпетентных клеток.

В диагностике и прогнозе течения заболеваний изменения продукции цитокинов используют достаточно широко.

Известна работа:

Pitkäranta A., Nokso-Koivisto J., Jäntti V., Takala A., Kilpi Т., Hovi T. Lowered yields of virus-induced interferon production in leukocyte cultures and risk of recurrent respiratory infections in children. Journal of Clinical Virology. - Volume 14, Issue 3, December 1999, P. - 199-205.

В ней охарактеризовано, как снижение уровня продукции интерферонов лейкоцитами in vitro повышает риск повторных респираторных инфекций у детей. Недостатком данного способа прогнозирования является трудоемкость метода с использованием культур клеток и тест-вируса.

Известен патент РФ 2159936, G01N 33/68, Ариненко Р.Ю., Аникин В.Б., Иовлев В.И., Малиновская В.В. Способ выбора типа иммуномодулирующей терапии и определения прогноза исхода заболевания на основе анализа интерферонового статуса больного.

Это изобретение касается способа выбора иммуномодулирующей терапии и определения прогноза заболевания на основе интерферонового статуса больного. Способ включает определение активности общих сывороточных интерферонов (S-ИФН), продукции лейкоцитами in vitro интерферона-α и интерферона-γ.

Определение проводят в образцах цельной крови, инкубированных в среде RPMI-1640, 100 мкл, с добавлением вируса болезни Ньюкасла (NDV) и фитогемагглютинина (ФГА) для индукции ИФН-α и ИФН-γ соответственно. Его осуществляют посредством титрования исследуемых образцов на культуре клеток с последующей инкубацией с вирусом везикулярного стоматита. При этом используют перевиваемые культуры, чувствительные к действию ИФН. Данный способ позволяет прогнозировать течение заболевания, однако является длительным по времени, трудоемким и требует специального оборудования и навыков исполнителя, т.к.предполагает работу с культурой ткани и вирусами.

Известен патент РФ №2169923, G01N 33/53, Сенько О.В. Способ прогнозирования частоты рецидивов инфекционных заболеваний дыхательных путей и стойкости эффекта оздоровления у дошкольников.

Авторы предлагают способ прогнозирования возможной частоты рецидивов инфекционных заболеваний дыхательных путей с использованием ряда биохимических показателей. Способ включает оценку качества и количества корреляционных связей между данными лабораторных показателей.

Известен патент РФ №2008686, G01N 33/53, Сизякина Л.П., Чернышов В.Н., Андреева И.И., Болгаринов Н.К. Способ прогнозирования развития осложнений у детей, больных ОРВИ.

Этот способ основан на определении в ранний период заболевания количества нейтрофилов периферической крови, экспрессирующих рецепторы к Fcj фрагменту иммуноглобулина G (Fc jP) в реакции розеткообразования с эритроцитами барана. В случае увеличения процента нейтрофилов с FcjP выше 58% прогнозируют развитие осложнения.

Известен патент РФ №2297003 G01N 33/68, Усейнова Н.Н., Шовкун В.А., Мизерницкий Ю.Л. Способ прогнозирования частоты повторных заболеваний у детей раннего возраста, страдающих острыми респираторными заболеваниями.

Способ осуществлялся следующим образом: у больного утром натощак производили забор венозной крови в количестве 5 мл, выделяли мононуклеарные клетки и культивировали в течение 24-48 часов при 37°С в присутствии 5% CO2 в культуральной среде RPMI1640 с 10% инактивированной телячьей сывороткой, 5×10,5 М2-меркаптоэтанола, 2-миллимоль глютамина, 10 миллимоль буфера HEPES, 50 мкг/мл гентамицина с добавлением митогенов (липополисахарид-с для индукции фактора некроза опухоли-альфа и форболмиристиат ацетат для индукции интерферона-гамма). Параллельно определяли спонтанную продукцию, добавляя равный объем культуральной среды. Уровень цитокинов в супернатантах определяли иммуноферментным методом наборами фирмы «Протеиновый контур». Рассчитывали индекс соотношения индуцированной и спонтанной продукции данных цитокинов и при значении индекса соотношений для фактора некроза опухоли альфа ниже 0,85, а для интерферона гамма ниже 0,45 определяют возможность повторных респираторных заболеваний. Здесь идет речь только о предрасположенности к повторным ОРЗ.

Прототипом заявленного изобретения является способ, описанный в диссертации Образцовой Е.В. «Препараты интерферона и его индукторы в лечении гриппа и острых респираторных вирусных инфекций у детей» (Автореф. дисс. канд. мед. наук. - Санкт-Петербург, 2007. - 23 с).

Способ включает определение спонтанной и индуцированной продукции лейкоцитами in vitro ИФН-α и ИФН-γ по методу С.С.Григорян. На основе полученных результатов производят расчет индекса соотношения индуцированной и спонтанной продукции данных цитокинов - индекс стимуляции (ИС) ИС ИФН-α или -γ, индекс активации лимфоцитов (ИАЛ) - ИАЛ ИФН-α или -γ.

Данные показатели дают представление об активности иммунокомпетентных клеток (ИКК), что характеризует резервные возможности интерферонпродуцирующих клеток. Это позволило автору разработать критерии назначения препаратов интерферона и его индукторов при различном течении ОРВИ у детей.

Система интерферона (ИФН) обеспечивает неспецифическую противовирусную резистентность организма и влияет на весь комплекс его специфических и неспецифических защитных реакций.

Отражением функционального состояния системы ИФН является ИФН статус, оценка которого проводится по нескольким известным показателям [Вопросы общей вирусологии, под ред. О.И.Киселева, 2007, Санкт-Петербург], основные из которых:

1. Количество циркулирующего в крови ИФН-α и -γ (сывороточный ИФН).

2. Уровень продукции ИФН-α лейкоцитами (или лимфоцитами) in vitro при его индукции вирусными индукторами.

3. Уровень продукции ИФН-γ лейкоцитами (или лимфоцитами) - при его индукции митогенами in vitro.

Задача заявляемого изобретения состоит в разработке способа прогнозирования течения ОРВИ у детей на самых ранних стадиях заболевания с помощью определения показателей иммунореактивности организма пациента, практически применимого и экономически выгодного.

По результатам диагностики перспективным направлением терапии осложненного и затяжного течения ОРВИ становится использование методов иммунотерапии, направленных на усиление клеточных реакций иммунитета, в дополнение к комплексному терапевтическому лечению.

Предлагаемый способ прогнозирования легко воспроизводим, не требует специальных условий (например, стерильных боксов), связанных с работой с культурой ткани и тест-вирусами для проведения исследования. Он менее трудоемок по числу проводимых действий при анализе. Преимуществом является то, что для исследования не требуется сыворотка крови, что позволяет брать кровь в меньшем объеме, а это является важным условием при обследовании маленьких детей: от 1 месяца.

Цель - раннее прогнозирование тяжести течения заболевания и развития осложнений у детей, больных ОРВИ, и упрощение способа диагностики.

Из достаточно большого клинического материала были отобраны наиболее информативные показатели, позволяющие адекватно оценить функциональное состояние иммунной системы больного ребенка, а именно интерферон-гамма и интерлейкин-10. Ранее в таком сочетании эти показатели не использовали.

При определении изменения выбранных показателей можно оценить тяжесть патологического процесса и возможность развития осложнений ОРВИ, причем процент точности прогноза повышается по сравнению с известными комбинациями других показателей иммунореактивности ребенка.

Сущностью изобретения является установление цифровой закономерности в величинах определяемой in vitro спонтанной и индуцированной фитогемагглютинином продукции лейкоцитами ИФН-γ с расчетом индекса стимуляции (ИС), индекса активации лимфоцитов (ИАЛ), а также привнесение в точность прогноза значений уровня интерлейкина-10 в плазме крови. Учет взаимозависимости всех указанных показателей позволяет назначить адекватное терапевтическое лечение, предотвращающее возможные осложнения.

Авторами была показана возможность использования только данных СП ИФН-γ и ИП ИФН-γ in vitro. Дополнительное определение уровня ИЛ-10 в плазме крови позволяет оценить направление и интенсивность иммунного реагирования организма детей, больных ОРВИ.

ИЛ-10 вырабатывается Т-хелперами 2-го типа, ответственными за переключение на гуморальный антиген-специфический иммунный ответ, и играет роль антагониста ряда цитокинов, в том числе интерферона-гамма. Этот факт может являться неблагоприятным признаком, так как связан с проявлениями иммуносупрессии в виде подавления пролиферативного ответа Т-лимфоцитов и соответственно менее эффективной защитой при вирусной инфекции [Детские инфекции. 2003. №3. с.58-61].

Известно, что система интерферонов относится к ранним цитокиновым реакциям при развитии инфекции. ИНФ-γ, продуцируемый преимущественно Т-хелперами I типа и цитотоксическими лимфоцитами, является мощным иммуностимулятором и индуктором неспецифической защиты, стимулирует фагоцитоз, а также активность нейтрофилов и естественных киллеров, способствует адгезии гранулоцитов к эндотелиальным клеткам, а так же регулирует силу иммунного ответа [Иммунология. 2002. №2. - с.77-80].

Повышение спонтанной продукции интерферона-гамма происходит при развитии воспалительных процессов в верхних дыхательных путях (Acta Paediatrica. - 2008. - Volume 74. - Issue 1, P. - 118-121).

Для диагностики и прогноза в отличие от способа-прототипа проводилось только исследование индуцированной фитогемагглютинином (ФГА) и спонтанной продукции (СП) ИФН-γ in vitro. Для этого анализа у пациента утром натощак брали кровь из вены или пальца в объеме 1,0 мл в пробирку с гепарином 10-15 ед./мл. Отобранная таким образом кровь может храниться 5-6 часов при +4°С без потери всех необходимых свойств.

Оставшуюся кровь центрифугировали и в плазме определяли уровень интерлейкина-10. Определение проводили методом ИФА стандартными наборами производства ООО «Цитокин», СПб.

Дальнейший учет результатов проводили автоматически с помощью ридера для иммуноферментного анализа при длине волны 490 нм. Уровень ИФН в анализируемом образце определяется с помощью калибровочной кривой в зависимости от оптической плотности. Это дает возможность получать воспроизводимый результат.

Авторами использовался показатель, названый - индекс стимуляции продукции ИФН-γ (ИС ИФН-γ), дающий представление о степени активности ИКК, об их способности отвечать синтезом ИФН-γ на введение индуктора, характеризующий резервные возможности интерферон-продуцирующих клеток. ИС ИФН-γ определяли путем деления уровня индуцированной продукции ИП ИФН-γ на величину показателя спонтанной продукции СП ИФН-γ:

В связи с тем, что имеются возрастные особенности содержания интерферонпродуцирующих клеток, основными из которых являются лимфоциты, был введен следующий показатель - индекс активации лимфоцитов (ИАЛ ИФН) - показатель, дающий представление об индивидуальной ИФН продуцирующей активности лимфоцитов (в пересчете на тысячу лимфоцитов), который является частным от деления показателя ИП ИФН-γ на абсолютное число лимфоцитов пациента:

Статистическая обработка полученных результатов показала определенную закономерность. У 36 здоровых детей были получены уровни СП ИФН-γ 10-50 пг/мл, ИФН-γ - 150-450 пг/мл. ИС ИФН-γ=9-45. ИАЛ ИФН-γ>40. Уровень ИЛ-10=2-50 пг/мл.

При ОРВИ с отсутствием осложнений наиболее часто в начале заболевания встречались пациенты с высоким уровнем СП ИФН (в 61,6% случаях). У детей с исходно низкими уровнями СП ИФН-γ и ИС ИФН-γ, при уровне ИЛ-10>60 пг/мл чаще, чем в других группах, встречались больные с пневмонией и бронхитом, тогда как при высоких показателях СП ИФН-γ (>50 пг/мл) и ИС ИФН-γ (>4,0), уровне ИЛ-10<50 пг/мл в 90,9% случаях встречались дети с ОРВИ без бронхолегочных поражений и лишь в 9,1% - был выявлен бронхит.

Наиболее высокий уровень СП ИФН-γ в крови (58,3±4,3 пг/мл) и ИС ИФН-γ>4, при уровне ИЛ-10<50 пг/мл выявлены у детей при ОРВИ без осложнений, а наиболее низкие - при пневмонии (39,0±5,4 пг/мл, ИС ИФН-γ<3 при уровне ИЛ-10>60 пг/мл), различия показателей статистически значимы (р<0,05).

ИП ИФН-γ, а также ИАЛ ИФН-γ были достоверно более низкими у детей, переносящих ОРВИ с поражением нижних отделов респираторного тракта, что свидетельствует о сниженных способностях организма противодействовать возбудителю, то есть уровень поражения респираторного тракта в определенной степени зависит от активности ИКК пациента. Содержание ИЛ-10 в плазме крови у пациентов с тяжелым течением заболевания ОРВИ и с наличием осложнений было статистически значимо выше, чем у детей с течением средней тяжести и без осложнений.

При низкой активности ИКК (низкой СП ИФН и низком ИС) чаще встречается затяжное течение заболевания, чем при более высокой активности ИКК. Наличие высокой интерферонпродуцирующей активности клеток даже у лиц с низким уровнем СП ИФН способствует уменьшению продолжительности как синдрома интоксикации, так и всего заболевания в целом (Табл.1).

Таблица 1
Прогностическая ценность двух способов прогнозирования уровня поражения респираторного тракта у детей с ОРВИ
Показатель	ИС ИФН-γ	ИЛ-10	Заявленный способ ИС ИФН-γ + ИЛ-10 (абс./%)	Способ -прототип ИС ИФН-α + ИС ИФН-γ (абс./%)
≤2,0; >50	>2,0; ≤50	≤2,0; ≤2,0	>2,0; >2,0
ОРИ, n=298	4,5±0,4	30,5±1,3	56/19,0	242/81,0	71/24,0	227/76,0
ОРИ, бронхит, + осложнения, n=93	2,6±0,7*	55,9±2,1*	81/87,0#	12/24,0#	32/34,0	61/66,0
ОРИ, пневмония, затяжное течение, n=42	1,2±0,4*	76,4±1,9*	37/88,0#	5/12,0#	27/64,0	15/36,0
* - р<0,05 - по отношению к ОРИ без бронхолегочных поражений # - р<0,05 - по отношению к способу-прототипу

Чувствительность заявленного способа - 87%, что значительно выше, чем у способа-прототипа - 66,0%.

Специфичность заявленного способа 81,0%, а у способа-прототипа - 76,0%.

Таким образом, заявленный способ значительно точнее прогнозирует развитие осложнений и затяжного течения заболевания ОРВИ у детей, что позволит своевременно назначить иммуномодулирующую терапию с учетом иммунного реагирования пациента.

Выявлена зависимость ИФН продуцирующей активности ИКК пациентов от содержания у них абсолютного числа лимфоцитов и их способности к выработке ИФН-γ (Табл.2).

Таблица 2
Характеристика ИАЛ ИФН-γ у детей с ОРВИ в зависимости от уровня поражения респираторного тракта
Показатель	ИАЛ ИФН-γ (абс.%)
≤30,0, n=118	>30,0, n=294
ОРИ, n=317	69/21,8	248/78,2#
ОРИ, бронхит, n=73	35/47,9	38/52,1
ОРИ, пневмония, n=22	14/63,6*	8/36,4*
Абс. число лимфоцитов, 109/л	4,6±0,5	2,5±0,3#
ИАЛ ИФН-γ (10-3 пг)	21,1±1,2	51,1±2,9#
*р<0,05 - по отношению к ОРИ без бронхолегочных поражений # - к детям с ИАЛ ИФН-γ≤30,0·10-3 пг

При содержании абсолютного числа лимфоцитов в крови >2,0×10⁹/л у детей, ИАЛ ИФН-γ>30,0 заболевание протекает более легко с достоверным уменьшением продолжительности лихорадочного периода и синдрома интоксикации, реже развиваются осложнения.

Характер течения заболевания также зависит от индивидуальной интерферонпродуцирующей активности ИКК. Так, затяжное течение заболевания наиболее часто встречается у пациентов с низкой ИАЛ ИФН-γ (≤30 пг 10^-3).

По способу, заявляемому в изобретении, были обследованы 578 детей от 1 мес до 18 лет. Достоверность результатов и выводов приведена в таблице 3.

Выводы:

Выявленная закономерность в сочетании показателей иммунореактивности при разных характерах течения заболевания статистически достоверна.

Таким образом, при определении СП ИФН-γ и ИП ИФН-γ в первые дни заболевания ОРВИ, вычислив ИС ИФН-γ и ИАЛ ИФН-γ, определив уровень интерлейкина 10 в плазме крови, можно правильно оценить состояние иммунореактивности организма больного ребенка и с достаточной степенью уверенности прогнозировать характер течения заболевания.

Авторы впервые установили, какой минимум характеристик иммунитета необходим и достаточен для адекватной оценки иммунного реагирования детей, больных ОРВИ.

Варианты иммунного ответа неразрывно связаны с клиническими особенностями течения заболевания. Использованный авторами комплекс показателей иммунитета позволил с высокой степенью точности - до 87%, осуществить краткосрочное прогнозирование осложненного и затяжного течения ОРВИ.

Определение содержания в плазме крови ИЛ-10 способствует более точной и ранней оценке степени тяжести заболевания, развития осложнений, а также возможных повторных заболеваний ОРВИ.

Если у здоровых детей уровни СП ИФН-γ 10-50 пг/мл, ИФН-γ -150-450 пг/мл, ИС ИФН-γ=9-45, ИАЛ ИФН-γ>40, уровень ИЛ-10=2-50 пг/мл, то при заболевании ОРВИ при установлении следующих показателей - СП ИФН-γ=50-75 пг/мл, ИП ИФН-γ≥150 пг/мл, ИС ИФН-γ>3, а также ИАЛ ИФН-γ≥40, уровень ИЛ-10=30-60 пг/мл - прогнозируют благоприятный исход заболевания.

При СП ИФН-γ=50-75 пг/мл, ИП ИФН-γ=90-100 пг/мл, ИС ИФН-γ≤3, а также ИАЛ ИФН-γ≤40, уровень ИЛ-10=60-100 пг/мл - прогнозируют тяжелое течение и развитие осложнений, требующих иммунозаместительной терапии.

При СП ИФН-γ=20-35 пг/мл, ИП ИФН-γ=60-100 пг/мл и ИС ИФН-γ<3, а также ИАЛ ИФН-γ≤30, уровень ИЛ-10>100 пг/мл - прогнозируют затяжное течение с развитием бронхолегочных осложнений и возможной хронизацией патологического процесса и повторных ОРВИ.

Настоящий способ оценки иммунного реагирования пациентов с диагнозом ОРВИ позволяет своевременно предсказать развитие затяжного и осложненного течения заболевания и вовремя провести необходимую противовирусную и иммуномодулирующую терапию, направленную на усиление клеточных реакций иммунитета. Способ может быть использован в работе инфекционных отделений детских больниц.

Клинический пример.

1. Девочка М., 5,7 г., формализованная карта обследования №152, обследована при поступлении в первый день инфекционного заболевания дыхательных путей.

СП ИФН-γ - 55 пг/мл; ИП ИФН-γ - 190 пг/мл; лейкоциты (абсолютное количество) 5,8×10⁹/л; лимфоциты - 45%. ИС ИФН-γ=3,5, ИАЛ ИФН-γ=72,9; ИЛ-10=32,4 пг/мл. Данные показатели позволили предположить гладкое течение заболевания, что в дальнейшем подтвердилось клинико-лабораторными данными. Поставлен диагноз ОРВИ. Продолжительность заболевания 6 дней. Умеренные изменения иммунологических показателей соответствовали быстрому клиническому выздоровлению от ОРВИ и подтвердили правильность прогноза и выбора методов лечения.

2. Мальчик И., 4,6 г., формализованная карта обследования №120, обследован при поступлении в первый день инфекционного заболевания дыхательных путей.

СП ИФН-γ - 50 пг/мл; ИП ИФН-γ - 90 пг/мл; лейкоциты (абсолютное количество) 7,4×10⁹/л; лимфоциты - 36%. ИС ИФН-γ=1,8, ИАЛ ИФН-γ=33,8; ИЛ-10=73,6 пг/мл. Полученный результат позволил предположить затяжное течение с развитием осложнений, что подтвердилось клинико-лабораторными данными. Поставлен диагноз острый бронхит. Кроме симптоматической была назначена заместительная терапия препаратами интерферона (виферон или аналоги). Продолжительность заболевания 10 дней.

3. Мальчик В., 6,5 г., формализованная карта обследования №128, обследован при поступлении в первый день инфекционного заболевания дыхательных путей. В анамнезе частые острые респираторные заболевания.

СП ИФН-γ - 35 пг/мл; ИП ИФН-γ - 70 пг/мл; лейкоциты (абсолютное количество) 5,2×10⁹/л; лимфоциты - 36%. ИС ИФН-γ=2,0, ИАЛ ИФН-γ=37,4; ИЛ-10=138,5 пг/мл. Данные показатели позволили предположить затяжное течение с развитием осложнений, что подтвердилось клинико-лабораторными данными. Поставлен диагноз пневмония, правосторонний катаральный отит. Заключение: низкая иммунная реактивность, неблагоприятный прогноз течения заболевания. Дополнительно была назначена иммуномодулирующая терапия. Продолжительность заболевания 16 дней. Таким образом, предварительный прогноз после проведения лабораторного обследования предложенным способом оказался верным.

Способ прогнозирования течения болезни у детей при острых респираторных вирусных инфекциях (ОРВИ) в первые дни заболевания, включающий определение методом иммуноферментного анализа иммунологических показателей спонтанного и индуцированного интерферона-γ in vitro (ИФН-γ) и расчет его индекса стимуляции (ИС ИФН-γ) путем деления показателей индуцированного уровня на спонтанный, расчет индекса активации лимфоцитов (ИАЛ ИФН-γ) на 1000 лимфоцитов, путем деления показателя индуцированного интерферона γ на абсолютное число лимфоцитов пациента (ИАЛ ИФН-γ), отличающийся тем, что в плазме крови дополнительно определяют содержание интерлейкина 10 (ИЛ-10), после чего делают заключение: при ИС ИФН-γ больше 3, ИАЛ ИФН-γ равном или больше 40, ИЛ-10 от 30 до 60 пг/мл - прогнозируют благоприятный исход заболевания при терапевтическом лечении без включения иммуномодуляторов; при ИС ИФН-γ меньше 3, ИАЛ ИФН-γ меньше 40, ИЛ-10 от 60 до 100 пг/мл - прогнозируют тяжелое течение заболевания и развитие осложнений, требующее срочного лечения путем иммунозаместительной терапии; причем при ИС ИФН-γ меньше 3, ИАЛ ИФН-γ меньше 30, ИЛ-10 больше 100 пг/мл - прогнозируют затяжное течение с развитием бронхолегочных осложнений и возможной хронизацией патологического процесса и повторных ОРВИ, что требует дополнительного включения иммуномодулирующих препаратов.