Способ получения осажденного препарата из березового гриба чага
Владельцы патента RU 2425686:
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Казанский государственный технологический университет" (RU)
Изобретение относится к фармацевтической, косметической промышленности. Способ получения осажденного препарата из березового гриба чага включает получение диффузионного сока чаги, его обработку водным раствором Boltorn 40 при определенных условиях, осаждение полифенольного комплекса с получением осадка полифенольного комплекса. Вышеописанный способ позволяет получить препарат, обладающий повышенной антиоксидантной и гепатопротекторной активностью. 2 табл.
Изобретение относится к фармацевтической, косметической промышленности.
Прототипом является способ получения осажденного препарата из березового гриба чага (патент №2366439, А61К 36/06, авторы Сысоева М.А., Гамаюрова В.С., Иванова Г.А., Кутырев Г.А.).
Недостатками являются низкая антиоксидантная активность и низкая гепатопротекторная активность.
Задачей является повышение антиоксидантной активности и гепатопротекторной активности.
Задача осуществляется тем, что в способе получения осажденного препарата из гриба чага, включающем получение диффузионного сока чаги, его обработку водным раствором гиперразветвленного полимера с концентрацией 1·10-7-10·10-20%, в соотношении 10:1 при комнатной температуре в течение 0,5-1,5 часа, осаждение полифенольного комплекса 20% раствором соляной кислоты до рН 2,0-2,2 с получением осадка полифенольного комплекса, согласно изобретению в качестве гиперразветвленного полимера используют Boltorn 40.
Для экспериментальной проверки осажденного препарата из березового гриба чага было приготовлено несколько образцов, описанных в примерах 1-2.
Пример 1. Диффузионный сок чаги, полученный из 10 г сырья, обрабатывают водным раствором гиперразветвленного полимера Boltorn 40 с концентрацией 1·10-8%, используя соотношение диффузионный сок:раствор гиперразветвленного полимера Boltorn 40-10:1, при комнатной температуре в течение 0,5-1,5 часа. Проводят осаждение полифенольного комплекса 20% раствором соляной кислоты до рН 2,0-2,2, получают 1,31 г осадка. Антиоксидантная емкость (АОЕ) выделенного полифенольного комплекса - ПФК (1) - составляет 116±1,2 кКл/100 г, Sr=0,05.
Пример 2. Диффузионный сок чаги, полученный из 10 г сырья, обрабатывают водным раствором гиперразветвленного полимера Boltorn 40 с концентрацией 1·10-14%, используя соотношение 10:1, при комнатной температуре в течение 1 часа. Проводят осаждение полифенольного комплекса 20% раствором соляной кислоты до рН 2,0-2,2, получают 1,36 г осадка. Антиоксидантная емкость (АОЕ) выделенного полифенольного комплекса ПФК (2) составляет 93±1 кКл/100 г, Sr=0,05.
Результаты многократно проведенных экспериментов обсчитаны с помощью программы «Статистика 6», которые представлены в таблице 1, при Р=0,95, n=5.
| Таблица 1 | |||||
| Антиоксидантная активность осажденного полифенольного комплекса при использовании Boltorn 30 и Boltorn 40 | |||||
| Образец | Концентрация полимера, % | Масса ПФК, | АОЕ ПФК, кКл/100 г | ||
| г | % к сырью | ||||
| По прототипу Boltorn 30 | Контроль | 0 | 1,3470±0,0019 | 13,47 | 37±1,0 |
| 1 | 10-12 | 1,3259±0,0074 | 13,25 | 64±1,4 | |
| 2 | 10-20 | 1,3367±0,0064 | 13,36 | 67±1,7 | |
| По изобретению Boltorn 40 | Контроль | 0 | 1,3470±0,0019 | 13,47 | 37±1,0 |
| 1* (Пример 1) | 10-8 | 1,3116±0,0027 | 13,11 | 116±1,2 | |
| 2* (Пример 2) | 10-14 | 1,3572±0,0093 | 13,57 | 93±1,0 | |
| 3* | 10-18 | 1,4075±0,0041 | 14,07 | 99±1,0 |
Используемый в изобретении гиперразветвленный полимер Boltorn 40 отличается от применяемого в прототипе гиперразветвленного полимера Boltorn 30 по строению и химическим свойствам. Их молекулярная масса составляет у Boltorn 40-7250, у Boltorn 30-3570. Молекула Boltorn 40 имеет 64 периферийные гидроксильные группы, что в два раза больше, чем у молекулы Boltorn 30. Имея большее количество периферийных гидроксильных групп, Boltorn 40 может оказывать большее влияние на частицы полифенольного комплекса, что способствует значительному повышению антиоксидантной активности осажденного полифенольного комплекса, а также проявлению им гепатопротекторной активности.
Согласно данным Таблицы 1 количество осажденного полифенольного комплекса по изобретению одинаково по сравнению с количеством осажденного полифенольного комплекса по прототипу и с контролем. В прототипе антиоксидантная активность осажденного полифенольного комплекса повышается по отношению к контролю на 81%. Использование полимера Boltorn 40 по изобретению способствует повышению антиоксидантной активности осажденного полифенольного комплекса на 213% (Пример 1) по сравнению с контролем и на 73% по сравнению с прототипом.
Проведены эксперименты по исследованию гепатопротекторной активности осажденного полифенольного комплекса. Опыты проведены на беспородных белых крысах. Крысы содержались в виварии на стандартной диете со свободным доступом к еде и воде, при естественном световом режиме. Получены данные по гепатопротекторной активности осажденного полифенольного комплекса по изобретению (Пример 2) в модели CCl4-гепатита. Для сравнения использован широко применяемый в медицинской практике в качестве гепатопротектора препарат «Карсил». Данные Таблицы 2 свидетельствуют о повышенной гепатопротекторной активности осажденного полифенольного комплекса по изобретению, где ПФК - осажденный полифенольный комплекс (Контроль), ПФК40 - осажденный полифенольный комплекс по изобретению.
| Таблица 2 | |||||||
| Биохимические показатели сыворотки крови подопытных крыс | |||||||
| Группы животных | В сыворотке крови | ||||||
| ЩФ*, Е/Л | АсАТ*, Е/Л | АлАТ*, Е/Л | Белок, г/л | Билирубин общий, мкмоль/л | Холестерин, ммоль/л | Мочевина, моль/л | |
| Интактные | 92±28,1 | 59,36±5,47 | 39,36±2,25 | 67,30±5,02 | 3,74±0,17 | 4,87±0,16 | 4,28±0,13 |
| CCl4-гепатит | 458±35,41 | 138,64±16,40 | 68,54±6,79 | 42,94±3,43 | 14,22±0,14 | 10,5±0,86 | 7,35±0,14 |
| ПФК (100 мг/кг) + CCl4-гепатит | 187±15,16 | 79±6,18 | 55,46±2,78 | 50,73±2,45 | 8,72±0,32 | 6,78±0,93 | 5,63±0,19 |
| ПФК40 (100 мг/кг) + CCl4-гепатит | 167±22,65 | 65,46±7,54 | 48,45±3,33 | 55,1±4,01 | 6,94±0,19 | 6,12±0,24 | 5,39±0,02 |
| Карсил (100 мг/кг) + CCl4-гепатит | 196±18,74 | 93,18±9,17 | 61,47±8,33 | 51,37±4,36 | 9,41±0,23 | 7,66±0,31 | 6,37±0,17 |
| Примечание: * - ЩФ - щелочная фосфатаза, АсАТ - аспартатаминотрансфераза, АлАТ - аланинаминотрансфераза |
В патогенезе острого гепатита, вызванного интоксикацией организма четыреххлористым углеродом, существенную роль играет перекисное окисление липидов. По биохимическим показателям сыворотки крови животных можно судить о значительном снижении интенсивности процессов липопероксидации, следовательно, и разрушении мембран гепатоцитов. Количественное содержание печеночных ферментов (АсАТ, АлАТ), билирубина, холестерина в сыворотке крови животных, получавших в опыте осажденный полифенольный комплекс по изобретению, более приближено к содержанию этих показателей в сыворотке крови здоровых животных по сравнению с животными, принимавшими препарат «Карсил».
Получены микрофотографии срезов печени опытных животных. Показано, что в случае употребления животными осажденного полифенольного комплекса по изобретению (Пример 2) в дозе 100 мг/кг структура печеночных долей этих животных сравнима со структурой печеночных долей здоровых животных. Фиброзные изменения в печени животных, принимавших осажденный полифенольный комплекс по изобретению, выражены меньше.
Использование предлагаемого изобретения позволяет:
- повысить антиоксидантную активность полифенольного комплекса, полученного по изобретению, в 1,7 раз по сравнению с полифенольным комплексом, полученным по прототипу;
- значительно повысить гепатопротекторную активность полифенольного комплекса, полученного по изобретению по сравнению с фармакологическим препаратом "Карсил", о чем свидетельствуют показатели сыворотки крови подопытных животных и микрофотографии срезов печени.
Изобретение может быть использовано для получения на его основе лекарственных препаратов, биологически активных добавок, функциональных продуктов питания и косметических средств.
Способ получения осажденного препарата из березового гриба чага, включающий получение диффузионного сока чаги, его обработку водным раствором гиперразветвленного полимера с концентрацией 1·10-7-1·10-20 % в соотношении 10:1 при комнатной температуре в течение 0,5-1,5 ч, осаждение полифенольного комплекса 20%-ным раствором соляной кислоты до рН 2,0-2,2 с получением осадка полифенольного комплекса, отличающийся тем, что в качестве гиперразветвленного полимера используют Boltorn 40.
