Способ получения n-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов, обладающих цитотоксической и противоопухолевой активностью



Способ получения n-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов, обладающих цитотоксической и противоопухолевой активностью
Способ получения n-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов, обладающих цитотоксической и противоопухолевой активностью
Способ получения n-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов, обладающих цитотоксической и противоопухолевой активностью
Способ получения n-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов, обладающих цитотоксической и противоопухолевой активностью
Способ получения n-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов, обладающих цитотоксической и противоопухолевой активностью
Способ получения n-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов, обладающих цитотоксической и противоопухолевой активностью

 


Владельцы патента RU 2427585:

Учреждение Российской академии медицинских наук Российский онкологический научный центр имени Н.Н. Блохина РАМН (RU)

Изобретение относится к способу получения N-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-диона общей формулы (Iа-г).

где Gly означает (а) L-арабинопиранозил-, (б) D-галактопиранозил-, (в) D-рибопиранозил-, (г) D-ксилопиранозил-. Предложенный способ включает 1) взаимодействие соответствующего ацетилгликозилиндола с оксалилхлоридом в хлористом метилене с получением соответствующего ацетилгликозида индол-3-илглиоксилилхлорида, 2) добавление 1-формилиндол-3-ил-уксусной кислоты и триэтиламина в среде диоксана с получением соответствующего производного 3-(индол-3-ил)-4-(ацетилсликозилиндол-3-ил)фуран-2,5-диона, который выделяют добавлением в реакционную массу воды с отделением полученного продукта в виде осадка, не требующего предварительной очистки для проведения дальнейших стадий, 3) фотохимическое окисление полученного на предыдущей стадии продукта в присутствии йода в бензоле до соответствующего производного фуранокарбазола, 4) последующую обработку производного фуранокарбазола водным раствором аммиака в N,N-диметилформамиде при повышенной температуре и давлении. Получаемые таким образом гликозиды индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-диона обладают выраженной цитотоксической и противоопухолевой активностью в отношении рака шейки матки РШМ-5, лимфоцитарной лейкемии L-5178y и асцитной опухоли Эрлиха. 2 з.п. ф-лы, 1 табл.

 

Изобретение относится к области фармацевтической химии и касается способа получения N-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов с различными углеводными остатками общей формулы (Iа-г), обладающих цитотоксической и противоопухолевой активностью.

где Gly - гликозидный остаток: (а) L-арабинопиранозил-, (б) D-галактопиранозил-, (в) D-рибопиранозил-, (г) D-ксилопиранозил-.

Известны синтетические способы получения гликозидов индолокарбазолов (введение углеводного остатка непосредственно в молекулу индолокарбазола или его предшественника - производного индола):

а) гликозилирование по методу Кенигса-Кнорра с использованием ацетобромглюкозы, серебряных или ртутных солей в качестве активирующих агентов [патенты США 5.668.271, 5.591.842 и патент Японии 9-604293]. В этом случае гликозиды образуются с невысоким выходом в виде смеси аномеров;

б) гликозилирование по методу Данишевского с использованием 1,2-ангидросахара [Michel Gallant, James Т. Link and Samuel J. Danishefsky, J. Org. Chem., 58 (1993), p.343-349; Margaret M. Faul, Leonard L. Winneroski and Christine Krumrich, J. Org. Chem., 64 (1999), p.2465-2470] также приводит к образованию смеси аномеров;

в) использование реакции Мицунобу [патенты США 5.804.564, 5.922.860 и патент Японии 9-530682] значительно повышает выход продукта гликозилирования.

Недостатком этих способов является их трудоемкость, так как они требуют добавления в схему синтеза дополнительных стадий - введения защитных групп в индолокарбазол и последующего их удаления, многостадийного синтеза производного углевода, применяемого в реакции гликозилирования, с дальнейшим хроматорафическим разделением смесей изомеров.

Наиболее близким к предлагаемому способу является способ получения N-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов общей формулы (Iа-г), включающий использование в качестве исходных пер-O-ацетилированных гликозидов индола, которые под действием оксалилхлорида в хлористом метилене превращали в гликозиды индол-3-илглиоксилилхлорида и конденсировали их с индол-3-илуксусной кислотой в дихлорэтане с триэтиламином. Полученные бис(индолил)фурановые производные фотохимическим окислением кислородом воздуха в бензоле превращали в соответствующие ацетилгликозиды индолофуранокарбазола. Взаимодействие этих соединений с аммиаком в N,N-диметилформамиде приводило к гликозидам индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов общей формулы (Iа-г) [С.Я.Мельник, А.А.Бахмедова, Л.Д.Гараева, Т.Д.Миникер, И.Л.Плихтяк, Л.В.Эктова, Т.П.Иванова, В.М.Аданин, И.В.Ярцева, Биоорган, химия, 1996 г., т.22, №№10-11, с.832-837; А.А.Бахмедова, Л.Д.Гараева, О.В.Горюнова, Т.Д.Миникер, И.Л.Плихтяк, Л.В.Эктова, Т.П.Иванова, В.М.Аданин, И.В.Ярцева, С.Я.Мельник, Биоорганическая химия, 1997 г., т.23, №8, с.667-674, патент РФ №2255089]. Этот способ был выбран в качестве прототипа.

Прототип имеет следующие недостатки:

1) выход ацетилгликозидов бис(индолил)фурановых производных, ключевых соединений для получения гликозидов индолопирролокарбазолов, составляет лишь 5-10%;

2) длительность проведения ключевой реакции получения ацетилгликозидов бис(индолил)фурандионов составляет 6 часов;

3) для выделения ацетилгликозидов бис(индолил)фурановых производных требуется трудоемкая хроматографическая очистка.

Задачей настоящего изобретения является устранение указанных недостатков путем создания усовершенствованного способа получения N-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов, обладающих цитотоксической и противоопухолевой активностью.

Способ осуществляется следующим образом: на пер-0-ацетилированные гликозиды индола действуют оксалилхлоридом в хлористом метилене, полученные ацетилгликозиды индол-3-илглиоксилилхлорида кипятят в диоксане в присутствии триэтиламина с 1-формилиндоло-3-илуксусной кислотой не более двух часов и выливают реакционную смесь в воду. Осадок 3-(1-формилиндол-3-ил)-4-(ацетилгликозилиндол-3-ил) фуран-2,5-дионов общей формулы (IIа-г) фильтруют и подвергают фотохимическому окислению кислородом воздуха в бензоле в присутствии каталитических количеств йода с образованием соответствующих производных карбазола общей формулы (IIIa-г). Взаимодействие этих соединений с водным аммиаком в диметилформамиде приводит к получению N-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов формулы (Iа-г).

Примеры осуществления изобретения

Пример 1

Способ получения 3-(1-Формилиндол-3-ил)-4-[1-(2,3,4-три-O-ацетил-α-L-арабинопиранозил)индол-3-ил]фуран-2,5-диона (IIа)

К раствору 1,2 ммоль 1-(2,3,4-три-O-ацетил-α-L-арабинопиранозил)индола [Preobrazhenskaya M.N., Korbukh I. A. "Chemistry of Nucleosides and Nucleotides" v.3, N.Y.: Plenum Press, 1993. p.1-105; Magnin A.A. Stephen A.M., Davies R.J.H. Tetrahedron. 1972, v.28, p.3069-3085] в 10 мл CH2Cl2 прибавили 1,8 ммоль оксалилхлорида. Реакционную смесь выдерживали 18 часов при температуре 20-22°С, затем упаривали досуха. К остатку добавляли 12 мл диоксана, 1,2 ммоль N-формилиндол-3-илуксусной кислоты и 2,4 ммоль триэтиламина, смесь кипятили в течение 2 ч и вылили в воду. Осадок отфильтровали, высушили и получили соединение (IIа) с выходом 63%. 1Н-ЯМР (СDСl3): 9.22 (уш с, 1Н, СНО), 8.37 (уш с, 1Н индол), 8.16 (с, 1Н индол), 7.98 (уш с, 1Н индол), 7.54 (д, 1Н индол), 7.27 (т, 1Н, индол), 7.14 (т, 1Н, индол), 7.03-6.99 (м, 2Н, индол), 6.73 (д, 2Н, индол), 5.68 (дд, 1Н, Н2', J2'3' 10.1), 5.52 (д, 1Н, H1', J1'2' 8.9), 5.50 (т, 1Н, Н4'), 5.32 (дд, 1Н, Н3', J3'4' 3.45), 4.31 (дд, 1Н, Н5', J5'4' 2.1), 3.99 (д, 1Н, Н5'', J5'5'' 13.4), 2.29, 2.05, 1.74 (3 с, 9Н, 3 Ас). Масс-спектр: М+ 614.

Способ получения 13-Формил-12-(2,3,4-три-O-ацетил-α-L-арабинопиранозил)индоло[2,3-а]фурано[3,4-с]карбазол-5,7-диона (IIIа)

К раствору 0.37 ммоль 3-(1-формилиндол-3-ил)-4-[1-(2,3,4-три-O-ацетил-α-L-арабинопиранозил) индол-3-ил]фуран-2,5-диона (IIа) в 200 мл бензола, помещенному в кварцевую колбу, добавляли 20 мг йода и облучали ртутной лампой, контролируя ход реакции с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ) на силуфоле в системе бензол-ацетон=4:1. Растворитель упаривали в вакууме, остаток очищали препаративной ТСХ в системе бензол-ацетон=4:1. Выход соединения (IIа) - 66%. 1Н-ЯМР (CDCl3): 9.87 (с, 1Н, СНО), 9.12 (д, 1Н, Ar), 9.10 (д, 1Н, Ar), 8.57 (д, 1Н, Ar), 8.057 (уш д, 1Н, Ar), 7,77 (т, 1Н, Ar), 7.72 (т, 1Н, Ar), 7.67 (т, 1Н, Ar), 7.58 (т, 1Н, Ar), 5.83 (д, 1Н, H1', J1'2' 8.7), 5.74 (уш с, 1Н, Н2'), 5.48 (с, 1Н, Н4'), 5.14 (дд, 1Н, Н3' J3'2' 9.6, J3'4' 3.3), 4.48 (дд, 1Н, Н5', J5'4' 2.2), 4.07 (д, 1Н, Н5'', J5'5'' 13.6), 1.88, 1.26, 0.95 (3 с, 9Н, 3 Ас). Масс-спектр: M+ 612.

Способ получения 12-(α-L-Арабинопиранозил)индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-диона (Iа)

Смесь, состоящую из 0.33 ммоль 13-формил-12-(2,3,4-три-O-ацетил-α-L-арабинопиранозил)индоло[2,3-а]фурано[3,4-с]карбазол-5,7-диона (IIIа), 5 мл диметилформамида и 5 мл 33%-ного водного аммиака, нагревали в течение 4 часов в автоклаве при температуре 140°С и далее оставляли на 18 часов при температуре 20-22°С. Растворитель упаривали в вакууме, к остатку добавляли воду. Выпавший осадок отфильтровывали, сушили и очищали препаративной ТСХ в системе хлороформ-метанол 4:1. Выход соединения (Iа) - 65%. 1Н-ЯМР (DMSO-d6): 12.07 (с, 1Н, NH), 9.97 (с, 1Н, NH индол), 9.19 (д, 1Н, Ar), 9.09 (д, 1Н, Ar), 7.89 (д, 1Н, Ar), 7.67 (д, 1Н, Ar), 7.54 (м, 2Н, Ar), 7.35 (м, 2Н, Ar), 6.05 (уш д, 1Н, H1', J1'2' 9.0), 6.75, 5.26, 5.14 (3 уш с, 3Н, 3-ОН), 4.22 (м, 1Н, Н2'), 4.30-4.10 (м, 3Н, Н3', Н5', Н5''), 3.89 (м. 1Н, Н4'). Масс-спектр: M+ 457.

Пример 2

Способ получения 3-(1-Формилиндол-3-ил)-4-[1-(2,3)4,6-тетра-O-ацетил-β-D-галактопиранозил) - индол-3-ил]фуран-2,5-диона (IIб).

Бис(индолил)фуран-2,5-дион (IIб) получали из 1-(2,3,4,6-тетра-O-ацетил-β-D-галактопиранозил)индола аналогично способу получения соединения (IIа). Выход соединения (IIб) - 62%. 1Н-ЯМР (СDСl3): 9.22 (уш с, 1Н, СНО), 8.37 (уш с, 1Н индол), 8.11 (с, 1Н индол), 7.97 (уш с, 1Н индол), 7.56 (д, 1Н индол), 7.28 (т, 1Н, индол), 7.15 (т, 1Н, индол), 7.03 (м, 2Н, индол), 6.76 (с, 2Н, индол), 5.66 (т, 1Н, Н2', J2'3' 9.9), 5.61-5.57 (м, 2Н, H1', Н4'), 5.30 (т, 1Н, Н3', J3'4' 3.3), 4.31-4.20 (м, 3Н, Н5', Н6', Н6''), 2.28, 2.08, 2.02, 1.76 (4 с, 12Н, 4 Ас). Масс-спектр: М+ 687.

Способ получения 13-Формил-12-(2,3,4,6-тетра-O-ацетил-β-D-галактопиранозил)индоло[2,3-а]фурано[3,4-с]карбазол-5,7-диона (IIIб)

Фуранокарбазол (IIIб) получали из бис(индолил)фуран-2,5-диона (116) аналогично способу получения фуранокарбазола (IIIa). Выход соединения (IIIб) - 63%. 1Н-ЯМР (CDCl3): 9.90 (с, 1Н, СНО), 9.11 (д, 1Н, Аr), 9.09 (д, 1Н, Ar), 8.55 (д, 1Н, Ar), 8.06 (д, 1Н. Ar), 7.78-7.71 (м, 2Н, Ar), 7.66 (т, 1Н, Ar), 7.58 (т, Н, Ar), 5.91 (д, 1Н, H1', J1'2' 8.8), 5.78 (т, 1Н, Н2'), 5.61 (д, 1Н, Н4', J4'3' 2.6), 5.16 (дд, 1Н, Н3'), 4.51 (дд, 1Н, Н5'), 4.35 (м, 2Н, Н6', Н6''), 2.35, 2.22. 1.88, 0.99 (4 с, 12Н, 4 Ас). Масс-спектр: M+ 685.

Способ получения 12-(β-D- галактопиранозил)индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-диона (Iб)

Пирролокарбазол (Iб) получали из фуранокарбазола (IIIб) аналогично способу получения пирролокарбазола (Iа). Выход соединения (Iб) - 62%. 1Н-ЯМР (DMSO-d6): 12.17 (с, 1Н, NH), 11.07 (с, 1Н, NH индол), 9.20 (д, 1Н, Ar), 9.09 (д, 1Н, Ar), 7.95 (д, 1Н, Ar), 7.70 (д, 1H, Ar), 7.59 (м, 2Н, Аr), 7.37 (м, 2Н, Аr), 6.18 (д, 1H, H1', J1'2' 7.0), 6.82, 5.35, 5.21, 4.86 (4 уш c, 4H, 4-OH), 4.23 (м, 1Н, Н2'), 3.84 (м, 1Н, Н3'), 4.20-4.10 (м, 2Н, Н4', Н5'), 3.80-3.60 (м, 2Н, Н6', Н6''). Масс-спектр: М+ 487.

Пример 3

Способ получения 3-(1-Формилиндол-3-ил)-4-[1-(2,3,4-три-O-ацетил-β-D-рибопиранозил)индол-3-ил]фуран-2,5-Диона (IIв)

Бис(индолил)фуран-2,5-дион (IIв) получали из 1-(2,3,4-три-O-ацетил-β-D-рибопиранозил)индола аналогично соединению (IIа). Выход соединения (IIв) - 62%. 1Н-ЯМР (CDCl3): 9.22 (уш с, 1Н, СНО), 8.40 (уш с, 1Н индол), 8.05 (с, 1Н индол), 7.98 (уш с, 1Н индол), 7.46 (д, 1Н индол), 7.26 (м, 1Н индол), 7.15 (т, 1Н индол), 6.96 (д, 2Н, индол), 6.78 (м, 2Н, индол), 5.84 (д. 1Н, H1', J1'2' 9.1), 5,76 (уш.с., 1Н, Н3'), 5.41 (дд, 1Н, Н2', J2'3' 2.9), 5.23 (м, 1Н, Н4'), 4.15 (дд, 1Н, Н5', J5'4' 5.3, J5'5'' 11.0), 4.04 (т, 1Н, Н5''), 2.29, 2.08, 1.75 (4 с, 9Н, 3 Ас). Масс-спектр: М+ 614.

Способ получения 13-Формил-12-(2,3,4-три-O-ацетил-β-D-рибопиранозил)индоло[2,3-а]фурано[3,4-с]карбазол-5,7-диона (IIIв)

Фуранокарбазол (IIIв) получали из бис(индолил)фуран-2,5-диона (IIв) аналогично способу получения фуранокарбазола (IIIа). Выход соединения (IIIв) - 63%. 1Н-ЯМР (CDCl3): 9.98 (с, 1Н, СНО), 9.15 (д, 1Н, Ar), 9.07 (д, 1Н, Ar). 8.64 (д. 1Н, Ar), 7.89 (д, 1Н, Ar), 7.78 (т, 1Н, Ar), 7.68 (т, 1Н, Ar), 7.55 (т, 1Н, Ar), 6.17 (д, 1Н, Н1', J1'2' 8.7), 5.68 (уш.с., 1Н, Н3'), 5.54 (дд, 1Н, Н2'), 5.30 (м, 1Н, Н4'), 4.36 (дд, 1Н, Н5', J5'4' 5.5, J5'5'' 11.1), 4.14 (т, 1Н, Н5''), 2.07, 2.05, 1.26 (3с, 9Н, 3 Ас). Масс-спектр: М+ 612.

Способ получения 12-(β-D-рибопиранозил)индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-диона (Iв)

Пирролокарбазол (Iв) получали из фуранокарбазола (IIIв) аналогично способу получения пирролокарбазола (Iа). Выход соединения (IIIв) - 50%. 1Н-ЯМР ((СD3)2СО): 10.66 (с, 1Н, NH), 9.86 (с, 1Н, NH индол), 9.27 (д, 1Н, Ar), 9.20 (д, 1Н, Ar), 7.90-7.30 (м, 6Н, Ar), 6.41 (уш д, 1Н, H1'), 4,70-4.00 (м, 5Н, Н2', Н3', Н4', Н5', Н5''). Масс-спектр: M+ 457.

Пример 4

Способ получения 3-(1-Формилиндол-3-ил)-4-[1-(2,3,4-три-O-ацетил-β-D ксилопиранозил)индол-3-ил]фуран-2,5-диона (IIг).

Бис(индолил)фуран-2,5-дион (IIг) получали из 1-(2,3,4-три-O-ацетил-β-D-ксилопиранозил)индола аналогично способу получения соединения (IIа). Выход соединения (IIг) - 61%. 1Н-ЯМР (CDCl3): 9.22 (уш с, 1Н, CHO), 8.37 (уш с, 1Н индол), 8.11 (с, 1Н индол), 7.97 (уш с, 1Н индол), 7.45 (д, 1Н индол), 7.26 (т, 1Н, индол), 7.14 (м, 1Н, индол), 6.98 (д, 2Н, индол), 6.75 (д, 2Н, индол), 5.57 (д., 1Н, Н1', J1'2' 8.9), 5.49 (т, 1Н, Н3', J3'4' 9.6), 5.39 (т, 1Н, Н2', J2'3' 9,6), 5.23 (ддд, 1Н, Н4', J4'5' 5.7, J4'5'' 10.5), 4.41 (дд, 1Н, Н5', J5'5'' 11.1), 3.64 (т, 1Н, Н5''), 2.11, 2.06, 1.70 (3 с, 9Н, 3 Ас). Масс-спектр: М+ 614.

Способ получения 13-Формил-12-(2,3,4-три-O-ацетил-β-D-ксилопиранозил)индоло[2,3-а]фурано[3,4-с]карбазол-5,7-диона (IIIг)

Фуранокарбазол (IIIг) получали из бис(индолил)фуран-2,5-диона (IIг) аналогично способу получения фуранокарбазола (IIIа). Выход соединения (IIIг) - 85%. 1Н-ЯМР (CDCl3): 9.89 (с, 1Н, CHO), 9.13 (д, 1Н, Аr), 9.08 (д, 1Н, Ar), 7.94 (д, 1Н, Ar), 7.81-7.67 (м, 3Н, Ar), 7.58 (д, 1Н, Ar), 5,85 (д, 1Н, H1', J1'2' 9.0), 5.45 (т, 1Н, Н2'), 5.29-5.25 (м, 2Н, Н3', Н4'), 4.62(дд, 1Н, Н5', J5'4' 5.2), 3.71 (т. 1Н, Н5', J5'5'' 11-6), 2.10, 1.89, 0.96 (3 с, 9Н, 3 Ас). Масс-спектр: М+ 614.

Способ получения 12-(β-D-ксилопиранозил)индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-диона (Iг)

Пирролокарбазол (Iг) получали из фуранокарбазола (IIIг) аналогично способу получения пирролокарбазола (Iа). Выход соединения (IIIг) - 70%. 1Н-ЯМР ((СD3)2СО): 10.62 (с, 1Н, NH), 9.88 (с, 1Н, NH индол), 9.27 (д, 1Н, Ar), 9.20 (д, 1Н, Ar), 7.95 (д, 1Н, Ar), 7.81 (д, 1Н, Ar), 7.58 (т, 1Н, Ar), 7.55 (т, 1Н, Ar), 7.38 (т, 1Н, Ar), 7.36 (т.1Н, Ar), 6.24 (уш.д., 1Н, Н1'), 4.70- 3.75 (м, 5Н, Н2', Н3', Н4', Н5', Н5''). Масс-спектр: M+ 457.

Синтезированные гликозиды охарактеризованы данными спектров 1Н-ЯМР и масс-спектров высокого разрешения. Спектры 1Н-ЯМР записаны на приборе Bruker WH-360 (Германия) с программным обеспечением, внутренний стандарт - тетраметилсилан, химические сдвиги δ приведены в миллионных долях (м.д.). При описании формы сигналов приведены следующие сокращения: с - синглет, д - дублет, т - триплет, м - мультиплет, дд - дублет дублетов, уш. с - уширенный синглет; значения констант спин-спинового взаимодействия J приведены в герцах. Масс-спектры зарегистрированы на масс-спектрометре Finnigan MAT 8430 (Германия) с системой обработки данных SS-300 при ускоряющем напряжении 3 кВ, энергии ионизирующих электронов 70 эВ, температуре источника ионов 250°С, температуре испарения образца 170-250°С, с применением системы прямого ввода вещества в область ионизации. Приведены значения m/z. Препаративную ТСХ проводили на пластинах (20×20 см) с силикагелем LSL254 5-40 мкм (Chemapol, ЧР) при толщине слоя 1 мм. Аналитическую ТСХ проводили на силуфоле (Chemapol, ЧР).

Техническим результатом заявленного способа является то, что внесенные на стадии получения гликозидов бис (индолил)фуран-2,5-дионов общей формулы (IIа-г) изменения, а именно использование в качестве одного из реагентов формилиндолилуксусной кислоты и диоксана в качестве растворителя, позволяют повысить выход гликозидов бисиндолов с 5-10% до 61-63%, сокращают время проведения реакции с 6 до 2-х часов и значительно упрощают их выделение с чистотой, достаточной для использования на следующей стадии фотохимического окисления в производные фуранокарбазола (IIIa-г).

Полученные согласно предлагаемому способу соединения общей формулы (Iа-г) относятся к потенциальным противоопухолевым препаратам. У этих соединений выявлена ранее неизвестная противоопухолевая активность в отношении рака шейки матки РШМ-5 и лимфоцитарной лейкемии L-5178y.

Цитотоксические свойства синтезированных гликозидов изучали в Российском онкологическом научном центе им. Н.Н. Блохина РАМН на культурах опухолевых клеток человека: CaOv - рака яичника, MS - меланомы Симпсона, MCF-7 - рака молочной железы. Цитотоксический эффект оценивали с помощью МТТ - анализа (Microculture Tetrazolium Test), основанного на спектрометрическом измерении количества голубого формазана, который образуется из желтой соли тетразолия под действием дегидрогеназ живых клеток [Campling В..Т., Pym J., Baker H.M., Cole S.P., Lam Y.M., Br. J. Cancer, 1991,63(1) p.75-83]. Критерием активности служил цитотоксический индекс IC50 (концентрация препарата в микромолях, подавляющая рост опухолевых клеток на 50%). Полученные результаты приведены в таблице.

Порядковый номер Углеводный остаток (Gly) Линия клеток и IC50 (10-6 M)*)
L-Ara CaOv 5.0; MS 0.7; MSF-7 0.3;
D-Gal CaOv 0.1; MS 0.1;
D-Rib CaOv 5.0;
D-Xyl CaOv 0.7; MS 0.1.
*) Значения IC50, меньшие или равные 10-5 M, соответствуют критерию отбора соединений для изучения противоопухолевой активности in vivo.

Противоопухолевую активность изучали по стандартным методикам [в кн. «Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и США». - Под ред. З.П.Софьиной. А.Б.Сыркина (СССР), А.Голдина, А.Кляйна (США). - М.: Медицина, 1979 с.296] на экспериментальных животных-опухоленосителях - мышах линии СВА и мышах гибридах первого поколения BDF-1, полученных из питомника «Столбовая». Экспериментальными моделями служили солидные опухоли (рак шейки матки РШМ-5, асцитная карцинома Эрлиха) и лимфоцитарная лейкемия L-5178y. Мышам прививали взвесь опухолевых клеток солидной опухоли в количестве 30-60 мг (разведение в стандартной среде 1:10) подкожно или асцитную жидкость, содержащую 106 лейкозных клеток, в количестве 0.3 мл, внутрибрюшинно. Лечение начинали через 24 часа после прививки лейкоза или через 48 часов после прививки солидной опухоли. Препараты готовили непосредственно перед введением и вводили внутрибрюшинно в течение 5 дней. Критериями противоопухолевой активности служили: увеличение продолжительности жизни (УПЖ≥25%) при лейкозах и торможение роста опухоли (ТРО≥50%) при солидных опухолях.

Результаты проведенных исследований:

- у мышей с РШМ-5 при применении соединения (Iа) в дозе 40 мг/кг ТРО составило 86% в первый день и 58% на 22-й день после окончания лечения; при применении соединения (Iб) в дозе 75 мг/кг ТРО составило 79,5% в первый день и 61% на 26-й день после окончания лечения; при применении соединений (Iв) в дозе 40 мг/кг ТРО составило по 53% в первый день после окончания лечения и на 21-й день - 48%, при применении соединения (Iг) в дозе 40 мг/кг ТРО составило 53% в первый день после окончания лечения и на 21 день - 56%;

- у мышей с асцитной опухолью Эрлиха при использовании соединения (Iа) в дозе 40 мг/кг УПЖ составило 309% (более 3,5 месяцев) и у одной мыши достигнут полный эффект. При применении соединения (Iб) в дозе 100 мг/кг УПЖ составило 272% (более 3,5 месяцев) и у одной мыши достигнут полный эффект. При использовании соединения (Iв) в дозе 40 мг/кг УПЖ составило 87%, а при применении соединения (Iг) в дозе 40 мг/кг - 147%;

- у мышей с лимфоцитарной лейкемией L5178y (неадаптированной) при использовании соединения (Iа) в дозе 40 мг/кг УПЖ составило 47% и при применении соединения (Iб) в дозе 100 мг/кг - 54%; при адаптированной форме лейкемии L5178y применение соединения (Iб) в дозе 100 мг/кг привело к УПЖ 223%; для соединения (Iв) в дозе 40 мг/кг УПЖ составило 96%, а для соединения (Iг) в дозе 40 мг/кг УПЖ составило 187%.

Таким образом, на опытных животных установлена выраженная противоопухолевая активность соединений общей формулы (Iа-г).

1. Способ получения N-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов, обладающих цитотоксической и противоопухолевой активностью, общей формулы (Ia-г)

где Gly - гликозидный остаток: (а) L-арабинопиранозил-, (б) D-галактопиранозил-, (в) D-рибопиранозил-, (г) D-ксилопиранозил путем взаимодействия соответствующего ацетилгликозилиндола с оксалилхлоридом в хлористом метилене с получением соответствующего ацетилгликозида индол-3-илглиоксилилхлорида, добавления к нему производного индол-3-илуксусной кислоты и триэтиламина в среде растворителя с получением соответствующего производного 3-(индол-3-ил)-4-(ацетилсликозилиндол-3-ил)фуран-2,5-диона, применения фотохимического окисления в присутствии йода в бензоле до соответствующего производного фуранокарбазола с последующей обработкой полученного продукта водным раствором аммиака в N,N-диметилформамиде при повышенной температуре и давлении, отличающийся тем, что в качестве производного индол-3-ил-уксусной кислоты используют 1-формилиндол-3-илуксусную кислоту, а в качестве растворителя - диоксан; продукт, полученный после реакции с 1-формил-индол-3-илуксусной кислотой, выделяют добавлением в реакционную массу воды с отделением полученного продукта в виде осадка, не требующего предварительной очистки для проведения дальнейшего фотохимического окисления.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что получены неописанные ранее N-ацетилгликозиды бис(индолил)фурандионов общей формулы (IIa-г)

где Gly - гликозидный остаток: (а) L-арабинопиранозил-, (б) D-галактопиранозил-, (в) D-рибопиранозил-, (г) D-ксилопиранозил-.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что получены неописанные ранее N-ацетилгликозиды индолофуранокарбазолов общей формулы (IIIa-г)

где Gly - гликозидный остаток: (а) L-арабинопиранозил-, (б) D-галактопиранозил-, (в) D-рибопиранозил-, (г) D-ксилопиранозил-.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к циклическим биоизостерам производных пуриновой системы, имеющих общую структурную формулу, приведенную ниже, где R1=-Н, -NH2, -Br, -Cl, -ОН, -СООН; А=-N- при В=-N=, Z=-СН-; А=-СН= при В=-N=Z=-СН-; А=-СН= при В=-N=, Z=-N=; А=-СН= при В=-СН=, Z=-СН=; А=-СН= при В=-СН=, Z=-N=, за исключением соединений, в которых А=-СН= при В=-СН=, Z=-СН=, R=Li, Na или К и R'=-NH2 в 5-ом положении бензо[d]-3Н-пиридазин-1,4-дионового ядра, и его фармакологически приемлемым солям, обладающим нормализующим действием на внутриклеточные процессы.

Изобретение относится к новым нуклеозидным аналогам, которые обладают свойствами ингибиторов пуринфосфорибозилтрансферазы, пуриннуклеозидфосфорилазы, 5'-метилтиоаденозинфосфорилазы, 5'-метилтиоаденозиннуклеозидазы и/или нуклеозидгидролазы и могут быть использованы для лечения злокачественных новообразований, бактериальных инфекций, протозойных инфекций, заболеваний, опосредованных Т-клетками.

Изобретение относится к области химии, медицины и биологии и касается гликозидов производных индолокарбазола и, в частности, L-арабинопиранозидов индолокарбазолов, проявляющих цитотоксическую и противоопухолевую активность.
Изобретение относится к способу получения комплексных соединений циркония или гафния с D-фруктозой общей формулы Me4(OH)8-n(C6Н9O5)nН2O16-2n]Cl8, где Me - цирконий или гафний, n = 1 - 4, целое число, путем взаимодействия оксихлорида циркония или гафния с D-фруктозой.
Изобретение относится к комплексным соединениям ванадия с D-фруктозой общей формулы VO(С6Н9О5)n, где n=2 или 3. .

Изобретение относится к производному пуринового L-нуклеозида формулы (I), где R1, R2', R3' и R4 - Н; R2, R3 и R5 - ОН; Z1 - N; Z2 выбран из N и СН; Z3 - из -NR-, -С(R)2, -S-, где R, одинаковые или разные, выбраны из Н, Br, NH2, алкила и алкенила; Z4 выбран из -С=O, -NR-, -C(R)2-, где R, одинаковые или разные, выбраны из Н и Br; Z5 - N; Х выбран из Н, ОН, SH, -SNH2, -S(O)NH2, -S(O)2NH2; Y - из Н и NН2; W - О, и когда Y представляет собой NH2, тогда Z3 не представляет собой -S-.

Изобретение относится к производным 3-Н-1,2,3-триазоло-[4,5d]-пиримидина общей формулы I, в которой В представляет собой О или СН2; Х выбирают из NR1R2, SR1 и C1-C7-алкила; Y выбирают из SR1, NR1R2 и C1-C7-алкила; R1 и R2 каждый независимо представляет Н или C1-C7-алкил или R1 представляет C1-C7-алкил, необязательно замещенный в алкильной цепи одним атомом О или S или одним или более галогенами, и R2 представляет водород; R3 и R4 оба представляют водород или вместе образуют связь; А представляет СООН, С(О)NН(СН)рСООН, С(О)N[(СН2)q-СООН] 2, С(О)NНСН(СООН)(СН2)rСООН или 5-тетразолил, в которых р, q и r каждый независимо равен 1, 2 или 3, а также их фармацевтически приемлемым солям или эфирам.

Изобретение относится к производным индолокарбазолов, блокирующим васкулогенную мимикрию в опухоли, которые могут быть использованы в медицине, общей формулы I: где Gly - остатки пентоз и гексоз, R представляет амино-группу 6-амино-12-(α-L-арабинопиранозил)индоло[2,3-a]пирроло[3,4-c]карбазол-5,7-диона; формамидо-группу 6-формамидо-12-(β-D-ксилопиранозил)индоло[2,3-a]пирроло[3,4-c]карбазол-5,7-диона; оксиэтиламино-группу 6-(2-оксиэтил)амино-12-(α-L-арабинопиранозил)индоло[2,3-a]пирроло[3,4-c]карбазол-5,7-диона; цианоэтиламино-группу 6-(2-цианоэтил)амино-12-(β-D-ксилопиранозил)индоло[2,3-a]пирроло[3,4-c]карбазол-5,7-диона и 6-(2-цианоэтил)амино-12-(β-D-галактопиранозил)индоло[2,3-a]пирроло[3,4-c]карбазол-5,7-диона; пиколиноамидо-группу 6-пиколинамидо-12-(β-D-ксилопиранозил)индоло[2,3-a]пирроло[3,4-c]карбазол-5,7-диона. Предложены новые соединения с цитотоксическими и антиангиогенными свойствами, активные в отношении клеток рака толстой кишки HCT-116 и меланомы Mel Kor. 6 пр., 1 табл., 3 ил.
Наверх