Противоопухолевые соединения



Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения
Противоопухолевые соединения

 


Владельцы патента RU 2428425:

ФАРМА МАР, С.А. (ES)

Изобретение касается новых противоопухолевых соединений общей формулы I

где R1-16 являются группами, независимо выбранными из водорода, защищенного или незащищенного гидроксила, C1-C24 алкила, C2-C24 алкенила, =O и ORa, OCORa; X и Y являются C5-C12 алкильными группами, которые замещены одной или несколькими C16 алкильными группами, гидроксильными группами и/или тетрагидропираном, который необязательно может быть замещен алкилом и/или группой ORa; Ra независимо выбирают из водорода и C112 алкила; и пунктирная линия показывает присутствие двойной связи. А также способа их получения, фармацевтической композиции, на основе данных соединений, обладающей противоопухолевой активностью, и применения соединений формулы I для получения лекарственного средства, направленного на лечение рака. Технический результат: получены и описаны новые соединения, которые обладают цитотоксической активностью и могут быть использованы для лечения рака. 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 2 табл.

 

Уровень техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к новым противоопухолевым соединениям, содержащим их фармацевтическим композициям и их применению в качестве противоопухолевых агентов.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Было показано, что некоторые асимметричные димерные макролиды обладают противоопухолевыми, противовирусными и/или противогрибковыми свойствами. В частности, Kitagawa и др. (Chem. Pharm. Bull., 1994, 42(1), 19-26) выделили несколько асимметричных димерных макролидов из окинавской морской губки Theonella swinhoei:

Показано, что Swinholide А (1), В (2) и С (3) проявляют цитотоксическую активность против L1210 и КВ клеток со значением IC50 0,03, 0,30 и 0,14 мкг/мл (для L1210) и 0,04, 0,04 и 0,05 мкг/мл (для КВ), соответственно. Однако наблюдалось, что isoswinhokide A (4) показывал меньшую цитотоксичность [IC50 1,35 мкг/мл (L1210) и 1,1 мкг/мл (КВ)] по сравнению с другими, ранее указанными аналогами.

Kitagawa и др. также проверили цитотоксичность некоторых димеров, полученных из Swinholide А (1):

наблюдая, что оба димера (8 и 9) показывают слабую способность ингибирования роста КВ клеток (51,1% ингибирования при 50 мкг/мл и 19,3% ингибирования при 10 мкг/мл, соответственно).

Другие димерные макролиды, которые были получены из Swinholide А (1), были следующими:

Цитотоксичность данных соединений (10-13) против L1210 и КВ клеток является меньшей, чем цитотоксичность, показанная Swinholide A (1).

Помимо этого, Kitagawa и др. проверили противоопухолевый эффект Swinholide A (1) и его изомеров против Р388 лейкемии у CDF1 мыши. Неожиданно было обнаружено, что Swinholide А (1), isoswinholide А (4) и изомер 11 были токсичны и не показали многообещающей противоопухолевой активности.

Кроме этого, заявка на патент WO 88/00195 описывает следующие соединения (Misakinolide А (15) и производные (15)), которые были выделены из морской губки рода Theonella:

В указанной заявке на патент описывается противоопухолевая активность Misakinolide А (14) in vitro против Р388, НСТ-8, А549 и MDA-MB-231 раковых клеток. Также было описано, что кроме ярко выраженной цитотоксичности [IC50 0,035 мкг/мл (L1210)], Misakinolide А также обладает противоопухолевой активностью [T/C 140% при дозе 0,1 мг/кг (мыши), против Р388 лейкемии] (Chem. Pharm. Bull., 1994, 42(1), 19-26).

Рак продолжает быть одной из главных причин смерти среди видов животных и человека. Были предприняты и продолжают предприниматься огромные усилия, направленные на поиск средств предохранения и новых эффективных противоопухолевых агентов, которые внесут вклад в увеличение терапевтического арсенала, необходимого для эффективного лечения пациентов с этим заболеванием. В этом смысле настоящее изобретение направлено на решение данной проблемы, предоставляя новые соединения, эффективные при лечении рака.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение направлено на асимметрические димерные макролиды с общей формулой I, а также на их соответствующие фармацевтически приемлемые соли, производные, пролекарства и стереоизомеры,

где R1-16 являются группами, независимо выбранными из водорода, защищенного или незащищенного гидроксила, замещенного или незамещенного С124 алкила, замещенного или незамещенного С224 алкенила, замещенного или незамещенного С224 алкинила, =О, ORa, OCORa, NRaRb, NRaCORb, CONRaRb, CORa, COORa и галогена.

X и Y являются группами, независимо выбранными из замещенного или незамещенного С124 алкила, замещенного или незамещенного С224 алкенила, замещенного или незамещенного С224 алкинила, =О, ORa, OCORa, NRaRb, NRaCORb, CONRaRb, CORa, COORa и галогена;

Ra и Rb являются группами, независимо выбранными из водорода, галогена, замещенного или незамещенного С112 алкила, замещенного или незамещенного С212 алкенила, замещенного или незамещенного С212 алкинила, замещенного или незамещенного арила и замещенного или незамещенного гетероцикла; и пунктирная линия показывает необязательное присутствие двойной связи.

Изобретение также относится к выделению соединений формулы I из губок семейства Theonellidae, рода Theonella и вида swinhoei, и к образованию производных выделенных соединений.

Кроме этого, настоящее изобретение также относится к соединению общей формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, производному, пролекарству или стереоизомеру, для его применения в качестве лекарственного средства.

Изобретение также направлено на применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, производного, пролекарства или стереоизомера для получения лекарственного средства для лечения рака.

Также настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединение формулы I или его соответствующие фармацевтически приемлемые соли, производные, пролекарства или стереоизомеры в смеси с фармацевтически приемлемым эксципиентом или разбавителем.

Подробное описание изобретения

Соединения, являющиеся целью изобретения, относятся к асимметрическим димерным макролидам общей формулы I

где R1-16 являются группами, независимо выбранными из водорода, защищенного или незащищенного гидроксила, замещенного или незамещенного С124 алкила, замещенного или незамещенного С224 алкенила, замещенного или незамещенного С224 алкинила, =О, ORa, OCORa, NRaRb, NRaCORb, CONRaRb, CORa, COORa и галогена.

X и Y являются группами, независимо выбранными из замещенного или незамещенного С124 алкила, замещенного или незамещенного С224 алкенила, замещенного или незамещенного С224 алкинила, =О, ORa, OCORa, NRaRb, NRaCORb, CONRaRb, CORa, COORa и галогена;

Ra и Rb являются группами, независимо выбранными из водорода, галогена, замещенного или незамещенного С124 алкила, замещенного или незамещенного С224 алкенила, замещенного или незамещенного С224 алкинила, замещенного или незамещенного арила и замещенного или незамещенного гетероцикла; и пунктирная линия показывает необязательное присутствие двойной связи.

Группы или заместители в данных соединениях могут быть выбраны согласно следующим условиям.

Термин алкил обозначает линейную или разветвленную углеродную цепь, имеющую от 1 до 24 атомов углерода. Предпочтительными являются алкильные группы от 1 до 6 атомов углерода, и особенно предпочтительны те, которые состоят из 1, 2, 3 и 4 атомов углерода. В соединениях настоящего изобретения особенно предпочтительными алкильными группами являются метильная, этильная, пропильная, изопропильная, бутильная, втор-бутильная и трет-бутильная группы. Также термин алкил, используемый в настоящем изобретении, относится как к циклической, так и нециклической группе, принимая во внимание, что циклические группы будут содержать, по крайней мере, три атома углерода в кольце. Другими предпочтительными алкильными группами являются такие, которые имеют от 5 до 12 атомов углерода, причем особенно предпочтительны такие, которые состоят из 6, 7, 8, 9 и 10 атомов углерода. В соединениях настоящего изобретения особенно предпочтительными алкильными группами являются гексильная, гептильная, 1,3-диметилпентильная, октильная, 1,3-диметилгексильная и нонильная группы.

Термины алкенил и алкинил обозначают линейную или разветвленную ненасыщенную алкильную цепь, содержащую от 2 до 24 атомов углерода, и включающую одно или несколько ненасыщенных положений. Предпочтительными являются алкенильные, алкинильные группы, имеющие от 2 до 6 атомов углерода, и особенно предпочтительны те, которые состоят из 2, 3 и 4 атомов углерода. Также термины алкенил и алкинил, используемые в настоящем изобретении, относятся как к циклическим, так и нециклическим группам, принимая во внимание, что циклические группы будут содержать, по крайней мере, три атома углерода в кольце. Другими предпочтительными алкенильными и алкинильными группами являются такие, которые имеют от 5 до 12 атомов углерода. В число арильных групп, которые могут присутствовать в соединениях изобретения, включены такие, которые содержат одно или несколько колец, включая множественные кольца с разделенными или конденсированными арильными или гетероарильными группами. Обычно арильные группы содержат от 1 до 3 колец и от 4 до 18 атом углерода в кольце(ах). Предпочтительными арильными группами являются фенил, нафтил, бифенил, фенантрил и антрацил, причем все они замещены или незамещены.

В число гетероциклических групп, которые могут присутствовать в соединениях изобретения, включены как гетероароматические, так и гетероалициклические группы. Гетероароматические группы содержат один, два или три гетероатома, выбранных из N, O и S, например, включая группы, такие как кумаринил, предпочтительно 8-кумаринил, хинолинил, предпочтительно 8-хинолинил, пиридил, пиразинил, пиримидил, фурил, пирролил, тиенил, тиазолил, оксазолил, имидазолил, индолил, бензофуранил и бензотиазолил. Гетероалициклические группы содержат один, два или три гетероатома, выбранных из N, O и, S, и, например, включая группы, такие как тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, пиперидинил, морфолин и пирролидинил. Гетероциклические группы могут быть как замещенными, так и незамещенными.

Ранее упомянутые группы, возможно, могут быть замещены по их одному или нескольким доступным положениям, независимо одним или несколькими подходящими заместителями, такими как OR`, =О, SR`, SOR`, SO2R`, NO2, NHR`, N(R`)2, =N-R`, NHCOR`, N(COR`)2, NHSO2R`, NR`C(=NR`)NHR`, CN, галоген, С(=O)R`, COOR`, OC(=O)R`, CONHR`, CON(R`)2, замещенный или незамещенный С124 алкил, замещенный или незамещенный С224 алкенил, замещенный или незамещенный С224 алкинил, замещенный или незамещенный арил и замещенный или незамещенный гетероцикл, где каждая группа R` независимо выбрана из Н, ОН, NO2, NH2, SH, CN, галогена, =О, С(=O)Н, С(=O)алкила, СООН, замещенного или незамещенного С112 алкила, замещенного или незамещенного С212 алкенила, замещенного или незамещенного С212 алкинила, замещенного или незамещенного арила и замещенного или незамещенного гетероцикла. В число галогеновых заместителей, которые могут присутствовать в соединениях настоящего изобретения, включены F, Cl, Br и I. В случае таких групп, которые в свою очередь замещены, соответствующие заместители могут быть выбраны из указанного здесь списка заместителей.

Гидроксильная группа, возможно, может быть защищена. Существует огромное число гидроксильных защитных групп, и они хорошо известны специалисту в данной области техники. Для справки см. Protecting groups, Kocienski, 2004, 3-е изд.

Термин «фармацевтически приемлемые соли, производные, пролекарства» относится к любой фармацевтически приемлемой соли, сложному эфиру, сольвату, гидрату или какому-либо другому соединению, которое после его введения пациенту способно (напрямую или опосредованно) дать соединение формулы I. Однако следует принимать во внимание, что не фармацевтически приемлемые соли также находятся в рамках изобретения, так как они могут быть пригодными при получении фармацевтически приемлемых солей. Получение солей, пролекарств и производных может быть осуществлено с помощью способов, известных в области техники.

Например, фармацевтически приемлемые соли соединений настоящего изобретения получаются из соответствующих соединений, имеющих кислотные или основные части, с помощью традиционных химических методов. В основном указанные соли образуются, например, посредством реакции соответствующей основной или свободнокислотной формы указанного соединения со стехиометрическим количеством подходящего основания или кислоты в воде, органическом растворителе или в их смеси. Обычно предпочтительными неводными средами являются эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил. В число солей, полученных добавлением кислоты, входят соли, полученные добавлением минеральных кислот, такие как гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, сульфат, нитрат и фосфат, и соли, полученные добавлением органических кислот, такие как ацетат, трифторацетат, малеат, фумарат, цитрат, оксалат, сукцинат, тартрат, соль яблочной кислоты, соль миндальной кислоты, метансульфанат и паратолуолсульфанат. В число солей, полученных добавлением основания, входят неорганические соли, такие как натриевые, калиевые, кальциевые и аммонийные соли, и органические соли, такие как соли этилендиамина, этаноламина, N,N-диалкиленэтаноламина, триэтаноламина и основные соли аминокислот.

Соединения настоящего изобретения могут быть в кристаллической форме как в виде свободных соединений, так и сольватов (например, гидратов), причем обе формы включены в объем настоящего изобретения. Способы сольватации в основном хорошо известны в области техники.

Любое соединение, которое является пролекарством соединения общей формулы I, включено в объем настоящего изобретения. Термин «пролекарство» используется в широком смысле и включает все производные, которые могут быть превращены in vivo в любые соединения изобретения. Специалист в области техники знает, какие это производные могут быть, и они включают, например, соединения, в которых свободная гидроксильная группа превращена в сложноэфирное производное, или сложный эфир модифицирован посредством переэтерификации или образования подходящего амида.

Соединения настоящего изобретения, представленные общей формулой I, имеют более чем один стереогенный центр, так что изобретение в равной степени относится к каждому и любому из возможных энантиомеров и диастериомеров, которые могут быть получены, а также к возможным Z и Е стереоизомерам, которые могут быть образованы при наличии в молекуле двойной связи. В рамках настоящего изобретения находятся как чистые изомеры, так и смеси изомеров указанных соединений.

Предпочтительными соединениями настоящего изобретения являются такие, у которых R1-16 являются группами, независимо выбранными из водорода, защищенного или незащищенного гидроксила, ORa, OCORa, =О, NRaRb, NRaCORb, галогена и замещенного или незамещенного С124 алкила, где Rа определен выше. Особенно предпочтительными являются такие соединения, в которых R1-7 и R9-15 являются группами, независимо выбранными из водорода, гидроксила, С16 алкила и ORа; и среди них предпочтительными являются водород, гидроксил, метил и метокси. Также особенно предпочтительно, чтобы R8 и R16 группы были =О.

Предпочтительно Х и Y являются группами, независимо выбранными из замещенного или незамещенного С512 алкила и замещенного или незамещенного С512 алкенила. Особенно предпочтительно, чтобы они были независимо замещены одним или несколькими подходящими заместителями, и, в частности, замещены одним или несколькими следующими заместителями: ОН, OR`, NHCOR` и замещенным или незамещенным гетероциклом, где R` определен ранее. Более предпочтительно, чтобы X и Y были С512 алкильными группами, замещенными одной или несколькими гидроксильными группами и/или замещенными гетероциклами. Особенно предпочтительно, когда X и Y являются

В данных участках структуры предпочтительно наличие двойных связей, показанных пунктирной линией в общей формуле I.

Следующие соединения являются особенно предпочтительными соединениями настоящего изобретения:

Соединение А

Соединение А является природным продуктом, выделенным из морской губки, а именно из губки вида Theonella swinhoei (Класс: Demosponhiae, Подкласс: Tetractinomorpha, Отряд: Lithistida, Подотряд: Triaenosina, Семейство: Theonellidae). Указанный организм был собран на Островах Глорьез (северо-запад Мадагаскара).

Данные виды губок обычны для запада Тихого Оокеана, в Индийском Океане и в Красном Море, причем располагаются по побережью на глубине до 48 метров. Образцы были найдены:

- Кения, Момбаса, Shelly Beach, на внешнем откосе рифа, на глубине 12-16 метров.

- North Kenya Banks (02° 25,`ю.ш. - 40° 42,5` в.д., на глубине 48 метров)

- Tulear, область Ifaty (Мадагаскар)

- Острова Albadra (северо-запад Мадагаскара)

- Ternate, Celebes, Ambon, Manila, Formosa (Филиппины), Тайвань.

Кроме этого, аналоги указанных соединений могут быть синтезированы специалистом в данной области техники с помощью, например, кислотного или основного гидролиза, окисления, этерификации, альдолльной конденсации, озонолиза, реакции Виттига, реакции Хорнера-Эммонса, эпоксидирования по Шарплессу или реакции Пиктеда-Спенглера. Соединение А и его аналоги могут быть синтезированы, например, посредством описанных синтезов подходящим образом защищенных мономерных единиц Swinholide A и Misakinolide A, последующего проведения реакций макролактонизации, которые позволяют получить Соединение А и его аналоги (см. K-S. Yeung и I. Paterson. Angew. Chem. Int. Ed. 2002, 41, 4632-4653).

Важным аспектом соединений настоящего изобретения является их биологическая активность и, в частности, их цитотоксическая активность. Следовательно, настоящее изобретение обеспечивает новые фармацевтические композиции соединений общей формулы I, имеющих цитотоксический эффект, а также их применение в качестве противоопухолевых агентов. Кроме этого, настоящее изобретение также обеспечивает фармацевтические композиции, содержащие соединение настоящего изобретения или фармацевтически приемлемую соль, производное, пролекарство или стереоизомер в смеси с фармацевтически приемлемым наполнителем или разбавителем.

Фармацевтические композиции, включенные в качестве примеров, являются любыми твердыми (таблетки, пилюли, капсулы, гранулы и т.п.) или жидкими (растворы, суспензии или эмульсии) композициями для орального, топического или парентерального введения. Фармацевтические композиции, содержащие соединения настоящего изобретения, также могут быть получены в форме липосом или наносфер, составов замедленного высвобождения или любых других традиционных систем высвобождения.

Введение соединений или композиций настоящего изобретения может быть осуществлено с помощью любых обычных способов, таких как внутривенное вливание, составы для орального введения и/или внутрибрюшинного и внутривенного введения. Предпочтительно, чтобы используемые времена вливания не превышали 24 часа, предпочтительно были от 1 до 12 часов и еще более предпочтительно от 1 до 6 часов. Короткие времена вливания особенно желаемы, так как это позволяет проводить лечение без необходимости проводить ночь в госпитале. Однако времена вливания от 12 до 24 часов и включая большие, при необходимости могут быть использованы. Вливание может быть проведено с подходящими интервалами, такими как от 1 до 4 недель.

Правильная доза соединений меняется в зависимости от типа используемого состава, формы применения и местоположения, хозяина и опухоли, которую необходимо лечить. Также должны приниматься во внимание другие факторы, такие как возраст, вес тела, пол, режим питания, время введения, скорость выведения, состояние здоровья хозяина, комбинация активных ингредиентов, чувствительность с точки зрения реакций и серьезности заболевания. Введение может быть проведено непрерывно или периодически с максимально переносимой дозой.

Соединения и композиции настоящего изобретения могут быть использованы вместе с другими активными ингредиентами в комбинированной терапии. Другие активные ингредиенты могут быть частью той же композиции или могут быть введены посредством другой композиции, причем одновременно или в различное время.

ПРИМЕРЫ

ПРИМЕР 1: ОПИСАНИЕ ОРГАНИЗМА И МЕСТО СБОРА

Несколько образцов губки Theonella swinhoei были собраны при погружении на Островах Глорьез (северо-запад Мадагаскара, запад Индийского Океана) на глубине 18 метров в ноябре 2003 г. Координаты места сбора образцов являются следующими: широта 11° 34` 995`` с.ш. и долгота 47° 16` 829`` в.д. Дно моря было скалистым и песчаным, и подложка образцов была скалистой.

Описание организма: массивная губка. Верхняя поверхность покрыта несколькими округлыми отверстиями (поры). Поверхность является гладкой и консистенция твердая, однако выдержанные образцы являются хрупкими. Цвет живой губки коричневый и ее внутренность светло-бежевого цвета. Дермальная мембрана равномерно пористая. Данные образцы легко характеризуются посредством скелетных элементов. Скелет образован неправильными узлами стронгилидов, направленных по касательным к поверхности, и помощью малоразветвленных спикул (кремнистая спикула губок неправильной формы). Внутренний скелет состоит из тетразоновых спикул, которые могут быть гладко или слабо покрыты бугорками.

ПРИМЕР 2: ВЫДЕЛЕНИЕ СОЕДИНЕНИЯ А

Замороженный образец (604 г) губки Примера 1 нарезают на кусочки и экстрагируют Н2О (3×500 мл) и затем смесью МеОН:CH2Cl2 (50:50, 3×500 мл). Объединенные органические экстракты концентрируют, получая остаток (7,48 г), который разделяют вакуумной жидкостной хроматографией на Lichroprep RP-18 с градиентом от Н2О:МеОН до CH2Cl2. Соединение А (5,8 мг) выделяют из фракции, элюированной с МеОН, которую очищают с помощью полупрепаративной ВЭЖХ (SymmetryPrep C-18, 7 мкм, 7,8 мм×150 мм, градиент Н2О:CH3CN, УФ-детектирование), получая фракцию, содержащую Соединение А, и которую снова очищают с помощью полупрепаративной ВЭЖХ (SymmetryPrep C-18, 7 мкм, 19 мм×150 мм, градиент Н2О:CH3CN, УФ-детектирование).

Соединение А: MS (ESI)=1362 (M+). MS (APCI)=1345(M+1-H2O)+. 1Н и 13С ЯМР см. Таблицу 1.

Соединение А

Таблица 1
Данные 1Н и 13С ЯМР (CD3OD) соединения А
1 Н, мультиплетность, J=Гц 13 C COSY HMBC
1/32 - 170,7/171,1 - -
2 5,91, д, 16,0 116,1 H-3 C-1, C-4
3 7,50, д, 16, 0 152,4 H-2 C-1, C-2, C-4, 4-Мe, C-5
4/33 - 135,6/129,9 - -
4-Мe/33-Мe 1,86, с/1,89, с 12,7/13,22 H-5/H-34 C-3, 4-Мe, C-5/C-32, C-33, C-34
5/34 6,16, т, 7,0/6,99, т, 6,0 140,9/142,1 4-Мe, H-6/33-Мe, H-35 C-3, C-4, C-6, C-7/C-32, 33-Мe, C-35, C-36
6/35 2,44, м/2,38, м 38,8/38,6 H-5, H-7/H-34, H-36 C-4, C-5, C-7/C-33, C-34, C-36
7/36 4,02, м/4,08, м 68,4/67,8 H-6, H-8/H-35, H-37 C-8/C-37
8/37 1,38, м/1,80, мa 41,58/41,63b H-7, H-9/H-36, H-38 -
9/38 4,49, д, 10,5 70,60/70,64с H-8/H-37, H-40 C-10/C-39
10/39 5,68, м 131,1 H-11, H-13/H-40, H-41 C-9, C-11, C-12/C-38, C-40, C-41
11/40 5,83, м 125,05/125,20d H-10, H-12/H-38, H-39 C-10/C-39
12/41 2,00, м 32,37/32,44е H-11, H-13/H-39, H-42 C-10, C-11/C-39, C-40
13/42 3,57, м 65,5/65,7f H-10, H-12, H-14/H-41, H-43 -
14/43 1,58, м/1,82, мg 37,1/37,4h H-13, H-15/H-42, H-44 C-13/C-42
15/44 3,78, м 79,04/79,05i H-14/H-43 -/C-45
15-ОМе/44-ОМе 3,33, с 57,1/57,2j - C-15/-
16/45 1,58, м 43,6/43,8k 16-Мe/45-Мe C-15, C-18, C-19/C-47, C-48
1б-Ме/45-Ме 0,84, д, 5,5/0,86, д, 5,5l 9,05/9,40m H-16/H-45 C-15, C-16, C-17/C-46, C-44, C-45
17/46 3,65, м/3,66, м11 73,8/74,2° H-18/H-47 -
18/47 1,62, м/1,68, мp 39,0/39,2кв. H-17, H-19/H-46, H-48 C-19/C-48
19/48 3,94, м 70,9/70,8r H-18/H-47 -
20/49 1,90, м 40,2/40,5 H-21, 20-Мe/H-50, 49-Мe C-21/C-50
20-Ме/49-Ме 0,92, д, 7,5/0,95, д, 7,5с 9,4/9,5t H-20/H-49 С-19, С-20, С-21/С-48, С-49, С-50
21/50 5,41, м 76,5/76,0 H-20/H-49 С-19, С-20, С-22, 22-Ме, С-23, С-32/С-1, С-48, С-49, 51-Мe, C-51, С-52
22/51 2,03, м 38,5/38,3 22-Мe/51-Мe 22-Ме, С-23/51-Ме, С-52
22-Ме/51-Ме 0,97, м 10,1/9,9 H-22/H-51 С-22, С-23/С-51, С-52
23/52 3,13, дд, 2,0, 8,0 77,7/77,6U - -
24/53 1,73, м 34,7 24-Мe/53-Мe -
24-Ме/53-Ме 0,98, д, 7,0/0,99, д, 7,0v 18, 0/18,1w H-24/H-53 С-24, С-25/С-53, С-54
25/54 1,23, м/1,43, мx 25,30/25,35 H-26/H-55 С-24, С-26/С-53, С-55
26/55 1,94, м 30,0 H-25, H-27/Н-54, Н-56 С-24, С-29/С-53, С-58
27/56 4,01, м 73,03/73,06y Н-26, Н-28/Н-57, Н-55 -
28/57 1,52, м/1,88, мz 36,1 Н-27, Н-29/Н-56, Н-58 С-26, С-27, С-29, С-ЗО/С-55, С-56, С-58, С-59
29/58 3,62, м 74,5 Н-28, Н-ЗО/Н-57, Н-59 -
29-ОМе/58-ОМе 3,36, с 55,6 - С-29/С-58
30/59 1,11, кв., 12,5/2,03, мaz 40,0 Н-29, Н-31/Н-58, Н-60 С-28, С-29, С-31/С-57, С-58, С-60
31/60 3,76, м 66,0 Н-30/Н-59 -
31-Ме/О-Ме 1,21, д, 6,5 22,1 - С-29, С-30, С-31/С-58, С-59, С-60
a-az верхний индекс в ячейке означает, что значения химического сдвига могут быть взаимозаменяемыми.

ПРИМЕР 3: БИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ

Анализ противоопухолевой активности позволяет обнаруживать выделения или соединения с цитотоксической активностью (клеточной гибелью) или цитостатической активностью (ингибирование роста) в in vitro культурах опухолевых клеток человеческого происхождения.

ЛИНИИ КЛЕТОК

Название № В Американской коллекции типовых культур Виды Ткани Характеристики
А549 CCL-185 Человек Легкое “NSCL” рак легкого
НТ29 НТВ-38 Человек Толстая кишка Аденокарцинома толстой кишки, аденокарцинома молочной железы
MDA-MB-231 HTB-26 Человек Молочная железа Her2/neu+ (плевральный выпот)

ИССЛЕДОВАНИЯ ИНГИБИРОВАНИЯ КЛЕТОЧНОГО РОСТА С ПОМОЩЬЮ КОЛОРИМЕТРИЧЕСКОГО АНАЛИЗА

Измерение клеточного роста in vitro проводилось с помощью колориметрического анализа с сульфородомином В (SRB) (следуя адаптации, ранее описанного способа Philip Skehan и др. 1990, J. Natl. Cancer Inst., 82:1107-1112).

В данном типе анализа используется 96-луночные микроплашки культур (Mosmann, 1983, Faircloth, 1988). Большинство использованных линий клеток получено из Американской коллекции типовых культур (АТСС) и от различных типов человеческих опухолей.

Культуры клеток поддерживались в культурной среде DMEM (с добавлением 10% эмбриональной бычий сыворотки (FBS), 1% пенициллин/стрептомицин 1% глутамин) при 37°С, 5% СО2 и 98% влажности.

Для анализов, клетки трипсинизируются и высеваются в 96-луночные микроплашки при различной концентрации в зависимости от линии клеток и инкубируются в течение 24 часов в активной среде без ингредиента с целью их стабилизации. Затем культуры обрабатываются (конечная концентрация изменяется в зависимости от типа анализа) носителем (DMSO:DMEM, 1:1) или активным ингредиентом. После 48 часов экспонирования активному ингредиенту противоопухолевый эффект измеряют посредством указанного ранее SRB способа, который по существу состоит из: фиксации клеток 1% раствором глутарового альдегида (30 минут, комнатная температура), промывки фиксированных клеток фосфатно-буферным солевым раствором (3 промывки, комнатная температура), окрашивания культур 0,4% раствором SRB (30 минут, комнатная температура), промывки красящего агента в 1% уксусной кислоте (3 промывки, комнатная температура), сушки планшетов на воздухе и окончательной экстракции красящего агента Трис-буфером. Количественное измерение анализа проводят с помощью показаний оптической плотности планшетов в спектрофотометрическом планшет-ридере при одной длине волны 490 нм.

Для определения клеточного роста из полученных значений оптической плотности применялся алгоритм (эквивалентный алгоритму, применяемому в программе противоопухолевого скрининга NCI), который позволяет рассчитывать проценты роста по отношению к нулевому времени (начало эксперимента) как в отсутствии, так и в присутствии активного ингредиента в исследовании. Рассчитанные параметры клеточного ответа по отношению к активному ингридиенту являются следующими: GI50=концентрация, вызывающая 50% ингибирования роста, TGI=концентрация, вызывающая полное ингибирование роста (цитостатический эффект) и LC50=концентрация, вызывающая 50% клеточной гибели (цитотоксический эффект).

В Таблице 2 представлены данные биологической активности Соединения А.

Таблица 2
Данные противоопухолевой активности (Молярные)
Толстая кишка Молочная железа NSCL (легкое)
HT29 MDA-MB-231 A549
Соединение А GI50 3,38E-7 8,08E-7 2,28E-7
TGI 8,81E-7 2,35E-6 2,28E-7
LC50 2,20E-6 4,77E-6 5,29E-7

1. Соединение общей формулы I или его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер,

где R1-16 являются группами, независимо выбранными из водорода, защищенного или незащищенного гидроксила, C1-C24 алкила, С224 алкенила, =O и ORa, OCORa;
X и Y являются C5-C12 алкильными группами, которые замещены одной или несколькими C16 алкильными группами, гидроксильными группами и/или тетрагидропираном, который необязательно может быть замещен алкилом и/или группой ORa;
Ra независимо выбирают из водорода и C1-C12 алкила; и
пунктирная линия показывает присутствие двойной связи.

2. Соединение по п.1, где R1-7 и R9-15 являются группами, независимо выбранными из водорода, гидроксила, C16 алкила и ORa.

3. Соединение по п.2, где R1-7 и R9-15 являются группами, независимо выбранными из водорода, гидроксила, метила и метокси.

4. Соединение по п.3, где R1, R5, R9 и R13 являются метилом.

5. Соединение по п.3, где R2, R4, R7, R10; R12 и R15 являются гидроксилом.

6. Соединение по п.3, где R3 и R11 являются водородом.

7. Соединение по п.3, где R6 и R14 являются метокси.

8. Соединение по любому из пп.1-7, где R8 и R16 являются =O.

9. Соединение по любому из пп.1-7, где Х и Y являются

10. Соединение по п.8, где Х и Y являются

11. Соединение по п.1, имеющее следующую формулу:

12. Способ получения соединения, определенного по любому из предшествующих пунктов, включающий его экстракцию и выделение из организма вида Theonella swinhoei.

13. Фармацевтическая композиция, обладающая противоопухолевой активностью, содержащая соединение по любому из пп.1-11 или его фармацевтически приемлемую соль или стереоизомер, в смеси с фармацевтически приемлемым эксципиентом или разбавителем.

14. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер для применения в качестве лекарственного средства, обладающего противоопухолевой активностью.

15. Применение соединения по любому из пп.1-11 или его фармацевтически приемлемой соли или стереоизомера для получения лекарственного средства, направленного на лечение рака.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к новым производным миканолида формулы I: соответствующей общим субформулам (I)1 и (I)2: где R1, R2 и R3 имеют значения, указанные в описании. .

Изобретение относится к новым производным ксантона формулы I где R1 представляет собой атом водорода, метальную группу, С2-С6-алкильную группу, ацетильную группу, -СО-С2-6-алкильную группу или -СО-С6-18-арильную группу, незамещенную или замещенную -ОН или -O-С1-6-алкильной группой; или противо-катион, выбранный из группы, включающей катионы щелочных или щелочноземельных металлов, таких как Li+, Na+, K+, Са++, Mg++, NR16R17R18R19(+), где R16, R17, R18 и R19 независимо друг от друга выбраны из атома водорода или C1-С6-алкила; R2 и R3 образуют часть группы с двойной связью С17= C18, или его таутомер, энантиомер, или стереоизомер, или его физиологически приемлемая соль, или сольват, или их смеси.

Изобретение относится к антипаразитическим агентам и, в частности, к соединениям, родственным авермектинам и милбемицинам, но содержащим заместители в 3-положении. .

Изобретение относится к новым производным миканолида формулы I: соответствующей общим субформулам (I)1 и (I)2: где R1, R2 и R3 имеют значения, указанные в описании. .

Изобретение относится к новым способам получения циклических перксиацеталь-лактоновых, -лактоловых или эфирных соединений. .

Изобретение относится к способу получения триоксепана формулы (I) содержащего менее 3,5 мас.% диалкилпероксида относительно общего количества пероксидов, включающий стадии взаимодействия гликоля формулы R3CHOH-CH2 -C(CH3)2OH с пероксидом водорода в присутствии кислоты с образованием гидропероксида гликоля, очистки гидропероксида гликоля, взаимодействия очищенного гидропероксида гликоля с кетоном или альдегидом формулы R1R2CO в присутствии кислоты с образованием триоксепана и очистки триоксепана, где R1, R2 и R3 выбирают, независимо, из водорода и (С1-С20)-алкила, (С3 -С20)-циклоалкила, (С6-С20)-арила, (С7-С20)-аралкила и (С7-С 20)-алкарила, где указанные группы могут включать линейные или разветвленные алкильные группы, в то время как две группы из R1-3 могут соединяться с образованием циклоалкильного кольца; причем необязательные один или несколько заместителей у каждого R1-3 выбирают из группы, состоящей из гидрокси, алкокси, линейного или разветвленного алк(ен)ила, арилокси, галогена, карбоновой кислоты, сложного эфира, карбокси, нитрила и амидо, при условии, что если и R1, и R2, оба представляют собой метильные группы, то R3 не является водородом.
Изобретение относится к способу получения триоксана, основанному на реагировании концентрированных водных растворов формальдегида в присутствии вольфрамовых гетерополикислот, в том числе с добавками неорганических солей, при котором из отработанной реакционной массы регенерируют гетерополикислоту, содержащийся в отработанной реакционной массе формальдегид удаляют отгонкой с использованием воды в качестве экстрактивного агента, полученный водный раствор гетерополикислоты упаривают и после удаления формальдегида добавляют кислоту, которую выбирают из следующего ряда: азотная кислота, серная кислота, соляная кислота, фосфорная кислота, катионит, затем добавляют экстрагент, в качестве которого используют органический растворитель из группы: бутанол-1, бутанол-2, пентанол-1, пентанол-2, циклогексанол, октанол-1, деканол-1, 4-метил-2-пентанон, бутиловый эфир, бензол, нитробензол, этилацетат или их смеси, полученный экстракт упаривают до первоначального объема реакционной массы, затем переводят гетерополикислоту в водную фазу, проводя процесс азеотропной отгонки экстрагента с использованием воды в качестве азеотропообразующего агента, водный раствор гетерополикислоты подвергают экстрактивной ректификации с использованием формальдегида (50-60 мас.% водный раствор) в качестве экстрактивного агента, при этом в кубе колонны получают раствор гетерополикислоты, воды и формальдегида, пригодный для дальнейшего синтеза.

Изобретение относится к составам с циклическими пероксидами кетонов, использующимся в процессах (со)полимеризации и модификации (со)полимеров. .

Изобретение относится к пероксидным композициям, предназначенным для использования в способах полимеризации и модификации (со)полимеров. .

Изобретение относится к области медицины и касается применения циклического эфира (R)-3-гидроксибутирата формулы (1) для лечения болезненных состояний, опосредованных свободными радикалами, токсическими агентами, такими как пептиды и белки, и генетическими дефектами, вредными для метаболизма клетки, устойчивостью к инсулину или другими дефектами обмена глюкозы или состояниями, вызывающими дефект, ишемии, травмы головы, и/или повышения эффективности работы клетки.

Изобретение относится к композиции, содержащей циклический пероксид кетона и флегматизатор, имеющий точку 95% выкипания в пределах 220-265oС, наиболее предпочтительно 235-250oС.
Наверх