Препарат для коррекции стрессовых состояний у сельскохозяйственных животных

Изобретение относится к области ветеринарии. Препарат включает лития оксибат, натрия селенит, кислоту аскорбиновую и воду для инъекций при следующем соотношении компонентов в мас.%: лития оксибат - 4,0-7,0, натрия селенит - 0,2-0,5, кислота аскорбиновая - 3,0-12,0, вода для инъекций - остальное. Препарат обладает выраженными ноотропной активностью и иммуностимулирующим действием, а также удобен для введения. 1 ил., 4 табл.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к ветеринарной фармации, в частности к препаратам для коррекции стрессовых состояний у сельскохозяйственных животных, обладающим антиоксидантными и иммуностимулирующими свойствами.

Уровень техники

Известен препарат по способу профилактики и коррекции транспортного стресса у крупного рогатого скота, сущность которого предусматривает скармливание животным за 3-7 суток до их транспортировки в дозе 125-257 мг/кг живой массы в сутки солевой композиции, включающей, мас.%:

Хлористый натрий	7,4-9,8
Углекислый натрий	0,4-0,8
Карбонат кальция	8,0-11,0
Карбонат магния	1,0-1,4
Аскорбиновую кислота	0,1-0,3
Глюкоза	18,0-22,0

Средство дается в виде соли в смеси с концентрированными кормами (см. пат. RU №2033048, кл. A01K 67/02, A61K 33/00, опубл. 20.04.1995 г.).

Недостатком данного препарата является невысокий антиоксидантный и антистрессовый эффект, недостаточное повышение общей резистентности организма.

Известен препарат по способу профилактики и коррекции транспортного стресса у крупного рогатого скота, который предусматривает скармливание животным за 4-5 суток до их транспортировки в дозе 210-230 мг/кг живой массы в сутки добавки, включающей, мас.%:

Бишофит	78,75-80,85
Аскорбиновая кислота	0,15-0,25
Глюкоза	19,0-21,0

Добавку скармливают в смеси с концентрированными кормами (см. пат. RU №2153802, кл. A01K 67/02, A61K 33/00, опубл. 10.08.2000 г.).

Недостатком данного препарата является отсутствие в его составе специфического ноотропного компонента и за счет этого невысокий антистрессовый эффект.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту и принятое авторами за прототип является лекарственное средство, обладающее ноотропной активностью (варианты).

Лекарственное средство в форме водного раствора содержит следующие компоненты в мас.%:

Димефосфон	15,0-30,0
Карбонат лития	0,5-5,0
Лимонная кислота	3,0-4,0
Вода деионизированная	до 100

Лекарственное средство в форме сиропа имеет следующий состав в мас.%:

Димефосфон	3,0-5,0
Карбонат лития	1,0-1,2
Лимонная кислота	4,0-5,0
Сахарный сироп	89,0-92,0

(см. пат. RU 2341973, кл. A23K 1/175, опубл. 27.12.2008 г.).

Недостатком данного препарата является недостаточное антиоксидантное действие, невысокий эффект повышения общей резистентности организма.

Раскрытие изобретения

Задачей предлагаемого изобретения является разработка препарата для коррекции стрессовых состояний у сельскохозяйственных животных, обладающего выраженным антистрессовым, антиоксидантным действием, высокой эффективностью при наличии иммуностимулирующего эффекта.

Технический результат, который может быть достигнут с помощью предлагаемого изобретения, сводится к антистрессовому и антиоксидантному действию, повышению резистентности организма, профилактике и лечению технологического стресса.

Технический результат достигается с помощью препарата для коррекции стрессовых состояний у сельскохозяйственных животных, включающего лития оксибат, аскорбиновую кислоту и воду для инъекций, при этом препарат дополнительно содержит натрия селенит при следующем соотношении компонентов в мас.%:

Лития оксибат	4,0-7,0
Натрия селенит	0,2-0,5
Кислота аскорбиновая	3,0-12,0
Вода для инъекций	остальное

Сущность получения препарата для коррекции стрессовых состояний у сельскохозяйственных животных заключается в следующем: исходные вещества в мас.%, а именно лития оксибат 4,0-7,0, натрия селенит 0,2-0,5, кислота аскорбиновая 3,0-12,0, вода для инъекций - остальное, смешивают в асептических условиях и упаковывают.

Одной из причин неполного проявления генетического потенциала продуктивности сельскохозяйственных животных следует считать стрессовые нагрузки, возникающие по причине необходимости проведения различных зооветеринарных мероприятий: транспортировка, формирование производственных групп, нумерация, перегоны, взвешивание, ветобработка, и др., что приводит к потерям свыше 20% ожидаемой продуктивности и снижению экономических показателей производства продукции животноводства (см. Сало А., Киньябулатова Р. // Молочное и мясное скотоводство. - 2009. - №2. - С.19-21).

Фармакологическое действие препарата, заключается в том, что с применением лития происходит нормализующее воздействие на клеточную мембрану и течение биологических процессов в самой клетке, ионы лития при этом выступают как посредники нервной и гормональной регуляции отдельных органов и целых систем, участвуют в иммунных, гомеостатических и адаптационных реакциях целостного организма, обладают психотропным свойством (см. Лазарева Д.Н., Алехин Е.К. Стимуляторы иммунитета. - М. - 1984. - С.198-199.; Мхитарян В.Г., Ерицян Л.Н. Журнал экспериментальной и клинической медицины. - 1981. - №2. - С.121-125).

Одним из наиболее важных фармакологических свойств солей лития является их способность увеличивать популяцию полиморфно-ядерных лейкоцитов (см. Яворковский Л.Л. Проблемы гематологии. - 1982. - №11. - С.50-56; Gregson M.W. Canad. J. Med. Technol. - 1979. - Vol. - 41. - P.158-164; Murphy D.L., Goldsmith F.K., Bunney W.E. Amer. J. Psychiat. - 1971. - Vol. - 127. - P.1559-1561). Избирательно накапливаясь в вилочковой железе, препараты лития отчетливо воздействуют на Т-лимфоциты, при этом заметно усиливается их киллерная функция (см. Perez Cruet J Waite, Mallya A., Khaiawali A.M. Lithium Contraversies and Unresolved Issues. - Amsterdam. - 1979. - P.881-894).

В последнее время особое место в ряду веществ, обладающих одновременно антиоксидантными и адаптогенными свойствами, исследователи отводят соединениям селена (См. Цогоев Ф.Н. Ветеринарный врач. - 2009. - №5. - С.41-42).

При изучении микроэлементного статуса животных в Ставропольском крае выявлен значительный недостаток в крови таких жизненно важных микроэлементов, как селен и медь, непосредственно влияющих на гомеостаз организма и течение окислительно-восстановительных реакций в нем (см. Киреев И.В. Фармако-токсикологические свойства экстраселена и его применение в ветеринарии. Автореф. дис. на соиск. учен. степ. канд. биол. наук. - Краснодар. - 2009. - 22 с.).

Окислительный стресс, в основе которого лежит нарушение процессов свободнорадикального окисления, в настоящее время рассматривается как один из ведущих патогенетических механизмов возникновения болезней различной этиологии (см. Зенков Н.К. Окислительный стресс: биохимический и патофизиологический аспекты. - М.: Наука/Педагогика, 2001 - 343 с.). Селен является незаменимым элементом для глутатион-глутатионпероксидазной системы защиты от окислительного стресса (см. Кармолиев Р.Х. Ветеринария. - 2005. - №4. - С.42-47).

Селен принимает участие в функционировании антиоксидантной системы за счет того, что он находится в составе четырех селензависимых глутатионпероксидаз, которые отличаются количеством атомов селена, дислокацией в организме, структурой и специфичностью функций, при этом классическая глутатионпероксидаза защищает клетки от окислительного стресса путем восстановления гидропероксидов любого типа (см. Liboska J. Prax. Vet. - 1984. - Vol.32. - №4/6. - P.231-236).

Аскорбиновая кислота является эффективным и доступным антиоксидантом, за счет наличия двух сопряженных двойных связей имеет способность к обратимому окислению, а основным моментом в механизме ее действия является возможность реконверсии в дегидроаскорбиновую кислоту, что в свою очередь обусловило способность перехватывать синглетный кислород, супероксид-анион радикал, перекись водорода и гидроксильный радикал (см. Георгиевский В.И. Физилогия сельскохозяйственных животных. - М.: Агропромиздат, 1990. - 512 с.; Соколов В.Д., Рабинович М.И., Горшков Г.И. и др. Фармакология. - М.: Колос, 1997. - 543 с.; Уша Б.В., Беляков И.М., Пушкарев Р.П. Клиническая диагностика внутренних незаразных болезней животных. - М.: КолосС, 2003. - 487 с.).

Осуществление изобретения

Примеры конкретного выполнения получения и испытания препарата для коррекции стрессовых состояний у сельскохозяйственных животных.

Пример 1

Препарат для коррекции стрессовых состояний у сельскохозяйственных животных готовят путем смешения компонентов в асептических условиях и растворения в воде для инъекций при следующем соотношении компонентов в мас.%:

Лития оксибат	3,0
Натрия селенит	0,1
Кислота аскорбиновая	1,0
Вода для инъекций	остальное

Полученный препарат при испытаниях в условиях смоделированного стресса у кроликов показал относительно невысокое уменьшение ТБК-активных продуктов в крови - на 2,27%, активность каталазы возросла на 4,71%, а активность глутатионпероксидазы на 7,18%, также незначительно уменьшилось содержание восстановленного глутатиона - на 0,42%, глюкозы - на 0,79%, уменьшение живой массы в среднем за 10 дней составило 214 г.

Пример 2

Проводят аналогично примеру 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас.%:

Лития оксибат	4,0
Натрия селенит	0,2
Кислота аскорбиновая	3,0
Вода для инъекций	остальное

Полученный препарат при испытаниях в условиях смоделированного стресса показал выраженную положительную динамику относительно активности ферментов антиоксидантного звена; так, активность каталазы увеличилась на 7,34%, а активность глутатионпероксидазы - на 11,02%, количество восстановленного глутатиона увеличилось на 1,92%, уровень глюкозы в крови возрос на 0,39%. Уменьшение живой массы за аналогичный период составило 92 г.

Пример 3

Проводят аналогично примеру 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас.%:

Лития оксибат	5,0
Натрия селенит	0,3
Кислота аскорбиновая	6,0
Вода для инъекций	остальное

Полученный препарат при испытаниях в условиях смоделированного стресса показал тенденцию к стабилизации биохимических показателей. Уровень селена в крови возрос до 10,23 мкг%, что является физиологической нормой. Уровень ТБК-активных продуктов уменьшился на 13,24%, активность каталазы возросла на 9,06%, глутатионпероксидазы - на 11,58%, уровень глюкозы увеличился на 0,71%, восстановленного глутатиона - на 3,12%. Потеря живой массы за аналогичный период составила 76 г.

Пример 4

Проводят аналогично примеру 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас.%:

Лития оксибат	6,0
Натрия селенит	0,4
Кислота аскорбиновая	9,0
Вода для инъекций	остальное

Полученный препарат при испытаниях в условиях смоделированного стресса показал незначительное уменьшение прироста живой массы - на 62 г. Уровень ТБК-активных продуктов уменьшился на 14,20%. Активность каталазы и глутатионпероксидазы увеличилась на 11,33% и 15,42% соответственно. Уровень глюкозы в крови увеличился на 0,95%, а количество восстановленного глутатиона - на 3,64%.

Пример 5

Проводят аналогично примеру 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас.%:

Лития оксибат	7,0
Натрия селенит	0,5
Кислота аскорбиновая	12,0
Вода для инъекций	остальное

Полученный препарат при испытаниях в условиях смоделированного стресса показал уменьшение прироста живой массы на 71%. Уровень ТБК-активных продуктов уменьшился на 10,26%. Активность каталазы и глутатионпероксидазы увеличилась на 9,92% и 12,34% соответственно. Уровень глюкозы в крови увеличился на 0,78%, а количество восстановленного глутатиона - на 2,83%.

Пример 6

Проводят аналогично примеру 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас.%:

Лития оксибат	8,0
Натрия селенит	0,6
Кислота аскорбиновая	12,0
Вода для инъекций	остальное

Полученный препарат при испытаниях в условиях смоделированного стресса показал значительное уменьшение живой массы - на 167 г. Концентрация ТБК-активных продуктов уменьшилась на 3,24%. Уровень восстановленного глутатиона и глюкозы уменьшился на 0,39% и 0,14% соответственно. Активность каталазы и глутатионпероксидазы увеличилась на 5,22% и 9,51% соответственно. При этом увеличился уровень общего билирубина на 2,12%, АсАт и АлАт на 3,42% и 1,81% соответственно, что может - выступать как свидетельство проявления токсического эффекта от применения препарата в данном соотношении компонентов.

Таким образом, наиболее оптимальными являются примеры 2, 3, 4 и 5, так как в результате применения препарата наглядно видно, что при анализе динамики живой массы кроликов она понижалась незначительно (от 62 г до 76 г), что также повышалась активность ферментов из ферментативного звена антиоксидантной системы защиты организма, в частности активность глутатионпероксидазы (от 11,02% и до 15,42%) и каталазы (от 7,34% и до 11,33%), что, в свою очередь, обусловило уменьшение концентрации ТБК-активных продуктов - побочных продуктов свободнорадикальных реакций - и предупредило развитие окислительного стресса.

Для проведения оценки препарата для коррекции стрессовых состояний у сельскохозяйственных животных на острую токсичность брали следующее соотношение компонентов в мас.%:

Лития оксибат	6,0
Натрия селенит	0,4
Кислота аскорбиновая	9,0
Вода для инъекций	остальное

Токсикологические исследования проведены на белых лабораторных мышах и лабораторных крысах, что позволило определить летальные дозы и классифицировать препарат по ГОСТу и отнести к 3 классу (табл.1, график).

Таблица 1
Острая токсичность препарата для коррекции стрессовых состояний у сельскохозяйственных животных
Вид животных	Параметры токсичности	SLD50
МПД	LD16	LD50	LD84	LD100
Белые мыши	50	91,6	170	238,3	300	1,83
Белые крысы	63,2	105,3	176,9	275,9	379,2	2,13

Эффективность препарата изучали на овцах возрастом 1,4-1,7 месяцев в условиях комбинированного стресса. Профилактику технологического стресса проводили во время стрижки. Заключалось это в том, что до стрижки овцы были разделены на две группы (n=10). Животным первой группы за 24 часа до начала стрижки ввели препарат в дозе 3,9 мг/кг по действующему веществу, вторая группа препарат не получала и служила контролем. Подопытные овцы сразу после стрижки помещали в ограниченный загон, где площадь на одну овцу составила 1,3 м², и это явилось смоделированной составляющей стрессовой ситуации. Животных в загоне содержали в течение пяти суток при этом кормление и поение не ограничивали. Через 4 часа после стрижки овцам опытной группы аналогично ввели препарат, введение повторили через трое суток. Кровь брали до введения, через 4 часа после стрижки (до второго введения) и по истечении 5 дней после стрижки и через 10 дней после стрижки. Взвешивание проводили на электронных весах в аналогичные сроки с взятием крови.

При анализе результатов исследований установлено уменьшение количества эритроцитов в обеих группах: в опытной - на 2,5%, в контрольной - на 13,4% (табл.2). Похожая динамика наблюдалась и в отношении уровня гемоглобина, который уменьшился в первой группе на 3,6%, а во второй - на 7,0%. Уровень общего белка уменьшился у овец опытной группы на 0,27%, в контрольной - на 1,8%. Уровень общего кальция в крови понизился в первой и второй группе на 2,27% и 1,56% соответственно, а неорганического фосфора - на 1,65 и 6,30% соответственно. Значительно изменилась концентрация селена в крови, которая в первой группе увеличилась в 7,5 раз, а в контрольной незначительно уменьшилась и была в 6 раз ниже физиологической нормы. Уровень витамина С в сыворотке крови овец, которым вводили препарат, увеличился на 39%, а у контрольных - уменьшился на 14,5%.

Значительные изменения произошли в отношении показателей, значимых для функционирования антиоксидантной защиты организма, которая одной из первых в организме реагирует в ответ на стресс-реакцию. Так, уровень восстановленного глутатиона в опытной группе увеличился на 8,8%, а в контрольной уменьшился на 18,75%. Активность каталазы и пероксидазы в первой группе увеличилась на 11,05% и 19,21% соответственно, а во второй уменьшилась на 13,45% и 19,21%. Активность глутатионпероксидазы увеличилась в первой группе на 22,1%, а во второй уменьшилась на 9,2%. Концентрация диеновых конъюгатов в крови овец из первой группы оставалась неизменна по истечении 10 дней, а в крови контрольных овец - увеличилась на 15,9%. Уровень малонового диальдегида в первой группе уменьшился на 0,43%, а во второй группе увеличился на 28,12%.

Одним из наиболее критических показателей во время воздействия стресс-факторов является динамика живой массы. При анализе результатов взвешивания овец установлено, что за 10 дней опыта животные первой группы потеряли в среднем 0,87 кг, а животные второй группы - 2,65 кг (табл.4).

Таблица 4
Динамика живой массы овец, кг
Группа	До введения	Через 4 часа после стрижки	Через 5 суток после стрижки	Через 10 суток после стрижки
1	38,51±2,92	38,56±2,93	37,93±2,74	37,64±2,82
2	36,92±2,34	36,84±2,37	34,18±2,42	34,27±2,61

Преимущества предлагаемого препарата в том, что он содержит в комплексе природные антиоксиданты и лития оксибат - соединение, обладающее выраженной ноотропной активностью и иммуностимулирующим действием. Наряду со специфическим антистрессовым действием он обладает способностью нормализации обмена селена, что способствует увеличению активности ферментативного звена антиоксидантной защиты организма и обусловливает возможность лечения и профилактики окислительного стресса у животных.

Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими техническими решениями имеет следующие технические преимущества:

- повышение антистрессового эффекта;

- повышение антиоксидантного действия;

- увеличение биологической активности;

- удобство введения и дозировки.

Препарат для коррекции стрессовых состояний у сельскохозяйственных животных, отличающийся тем, что включает лития оксибат, натрия селенит, кислоту аскорбиновую и воду для инъекций при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Лития оксибат	4,0-7,0
Натрия селенит	0,2-0,5
Кислота аскорбиновая	3,0-12,0
Вода для инъекций	остальное