Комбинация производных пиримидиламинобензамида и иматиниба для лечения или профилактики пролиферативных заболеваний

120

Представлена группа изобретений, включающая применение комбинации 4-метил-3-[[4-(3-пиридинил)-2-пиримидинил]амино]-N-[5-(4-метил-1H-имидазол-1-ил)-3-(трифторметил)фенил]бензамида или его фармацевтически приемлемой соли и иматиниба или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства, предназначенного для способа лечения желудочно-кишечных (ЖК) стромальных опухолей. Использование данной комбинации для лечения ЖК стромальных опухолей является клинически значимой в отличие от монотерапии за счет синергетического эффекта препаратов и при этом достигается стабилизация заболевания. 2 н.п. ф-лы, 1 табл.

 

Настоящее изобретение относится к фармацевтической комбинации, включающей (а) производное пиримидиламинобензамида и (б) 4-(4-метилпиперазин-1-илметил)-N-[4-метил-3-(4-пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил]бензамид (иматиниб с торговым названием гливек (Gleevec®)), и к применению такой комбинации для лечения пролиферативных заболеваний, более предпочтительно желудочно-кишечных стромальных опухолей (GIST).

Желудочно-кишечные стромальные опухоли (GIST) в последнее время относят к семейству мезенхимных новообразований, которые образуются в желудочно-кишечном тракте, в большинстве случаев в желудке (от 60 до 70% всех опухолей GIST).

В прошлом указанные опухоли относили к следующим различным классам: лейомиома, эпителиоидная лейомиома или лейомиосаркома. Однако в настоящее время известно, что опухоли GIST представляют собой определенную клинико-патологическую группу заболеваний, основанную на уникальном патогенезе и клинических признаках. Обычно опухоли GIST образуются у пациентов среднего или пожилого возраста (средний возраст составляет от 50 до 60 лет) вне зависимости от пола. Установлено, что, по крайней мере, от 10 до 30% опухолей GIST являются злокачественными, характеризуются внутрибрюшинным распространением и метастазированием и в большинстве случаев образуют метастазы в печени и брюшной полости. Ежегодная частота возникновения злокачественных опухолей GIST составляет приблизительно 0,3 новых случаев на 100000 человек в год. В большинстве случаев симптомами заболевания являются неопределенные боли в верхнем отделе брюшной полости. В большинстве случаев заболевание (30%) является бессимптомным, при этом опухоли GISTs диагностируются только после обследования анемии, возникшей в результате связанного опухолью желудочно-кишечного кровотечения.

Лечение метастазов и неоперабельность опухолей GIST являются серьезной проблемой, так как известно, что опухоли GIST практически не поддаются химиотерапии. Например, недавно в ходе клинических испытаний в фазе II, у 12 из 18 (67%) пациентов с прогрессирующей лейомиосаркомой наблюдается ответная реакция на курс лечения следующими препаратами: дакарбазин, митомицин, доксорубицин, цисплатин и саграмостим, и только у одного из 21 пациентов с GIST (5%) наблюдается ответная реакция (J.Edmonson, R.Marks, J.Buckner, M.Mahoney, Contrast of response to D-MAP + sargramostin between patients with advanced malignant gastrointestinal stromal tumors and patients with other advanced leiomyosarcomas, Proc. Am. Soc. Clin. Oncol, 18:541a (1999)). Результаты лечения другими химиотерапевтическими агентами также оказались неутешительными. Что касается клинической устойчивости к химиотерапии: экспрессия Р-гликопротеина и белка устойчивости MRP1 ко многим лекарственным средствам, которые связаны с развитием устойчивости к множеству лекарственных средств (MDR), является более выраженной у пациентов со злокачественной опухолью GIST по сравнению с пациентами с лейомиосаркомой.

Несмотря на применение множества способов лечения пациентов с пролиферативными заболеваниями, существует необходимость в разработке эффективных и безопасных противопролиферативных агентов, а также в их предпочтительном применении для комбинированного лечения.

В настоящее время неожиданно было установлено, что опухоли GIST можно эффективно лечить производными пиримидиламинобензамида или их фармацевтически приемлемыми солями как в отдельности, так и в комбинации с иматинибом.

Краткое изложение сущности настоящего изобретения

В настоящее время было установлено, что комбинация, включающая (а) по крайней мере, одно производное пиримидиламинобензамида и (б) иматиниб, например, как определено ниже, оказывает благоприятное действие при лечении пролиферативных заболеваний, например опухолей, прежде всего GIST.

Подробное описание вариантов осуществления изобретения

Настоящее изобретение относится к применению производных пиримидиламинобензамида формулы (I)

где R1 означает водород, (низш.)алкил, (низш.)алкокси(низш.)алкил, ацилокси(низш.)алкил, карбокси(низш.)алкил, (низш.)алкоксикарбонил(низш.)алкил или фенил(низш.)алкил,

R2 означает водород, (низш.)алкил, необязательно замещенный одним или более одинаковыми или различными заместителями R3, циклоалкил, бензоциклоалкил, гетероциклил, арильную группу или моно- или бициклическую гетероарильную группу, не содержащую или содержащую один, два или три атома азота в цикле и не содержащую или содержащую один атом кислорода и не содержащую или содержащую один атом серы, причем указанные группы в каждом случае являются незамещенными, моно- или полизамещенными, а R3 означает гидрокси, (низш.)алкокси, ацилокси, карбокси, (низш.)алкоксикарбонил, карбамоил, N-моно- или N,N-дизамещенный карбамоил, амино, моно- или дизамещенный амино, циклоалкил, гетероциклил, арильную группу или моно- или бициклическую гетероарильную группу, не содержащую или содержащую один, два или три атома азота в цикле и не содержащую или содержащую один атом кислорода и не содержащую или содержащую один атом серы, причем указанные группы в каждом случае являются незамещенными, моно- или полизамещенными,

или где R1 и R2 вместе означают алкилен, содержащий четыре, пять или шесть атомов углерода, необязательно моно- или дизамещенный группами: (низш.)алкил, циклоалкил, гетероциклил, фенил, гидрокси, (низш.)алкокси, амино, моно- или дизамещенный амино, оксо, пиридил, пиразинил или пиримидинил, означают бензалкилен, содержащий четыре или пять атомов углерода; оксаалкилен, содержащий один атом кислорода и три или четыре атома углерода, или азаалкилен, содержащий один атом азота и три или четыре атома углерода, причем азот является незамещенным или замещенным группами: (низш.)алкил, фенил(низш.)алкил, (низш.)алкоксикарбонил(низш.)алкил, карбокси(низш.)алкил, карбамоил(низш.)алкил, N-моно- или N,N-дизамещенный карбамоил(низш.)алкил, циклоалкил, (низш.)алкоксикарбонил, карбокси, фенил, замещенный фенил, пиридинил, пиримидинил или пиразинил,

R4 означает водород, (низш.)алкил или галоген,

и к применению N-оксида или фармацевтически приемлемой соли такого соединения для получения фармацевтической композиции, предназначенной для лечения зависимых от киназ заболеваний.

Основные термины, использованные в данном контексте, имеют следующие значения, если не указано иное.

Термин "(низш.)" означает заместитель, содержащий и включающий максимум 7, прежде всего до 7, и включающий максимум 4 атома углерода, причем указанный заместитель содержит прямую или разветвленную цепь с одним или более разветвлениями.

Если соединения, соли и т.п. указаны во множественном числе, то такая форма включает также соединение, соль или т.п. в единственном числе.

Любые асимметрические атомы углерода находятся в (R)-, (S)- или (R,S)-конфигурации, предпочтительно в (R)- или (S)-конфигурации. Таким образом, указанные соединения присутствуют в виде смесей изомеров или в виде чистых изомеров, предпочтительно энантиомерно чистых диастереомеров.

Настоящее изобретение также относится к возможным таутомерам соединений формулы I.

(Низш.)алкил предпочтительно означает алкил с прямой или разветвленной цепью, включающий от 1 до 7 атомов углерода, предпочтительно включающий от 1 до 4 атомов углерода, предпочтительный (низш.)алкил означает бутил, такой как н-бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, пропил, такой как н-пропил или изопропил, этил или метил. Предпочтительный (низш.)алкил означает метил, пропил или трет-бутил.

(Низш.)ацил предпочтительно означает формил или (низш.)алкилкарбонил, прежде всего ацетил.

Арильная группа означает ароматический заместитель, который присоединен к основной молекуле через атом углерода в ароматическом кольце. В предпочтительном варианте арил означает ароматический заместитель, содержащий от 6 до 14 атомов углерода, прежде всего фенил, нафтил, тетрагидронафтил, флуоренил или фенантренил, и означает незамещенный или замещенный одним или более, предпочтительно до трех, прежде всего одним или двумя заместителями, которые, прежде всего, выбирают из группы, включающей амино, моно- или дизамещенный амино, галоген, (низш.)алкил, замещенный (низш.)алкил, (низш.)алкенил, (низш.)алкинил, фенил, гидрокси, гидрокси в виде простого или сложного эфира, нитро, циано, карбокси, этерифицированный карбокси в виде сложного эфира, алканоил, бензоил, карбамоил, N-моно- или N,N-дизамещенный карбамоил, амидино, гуанидино, уреидо, меркапто, сульфо, (низш.)алкилтио, фенилтио, фенил(низш.)алкилтио, (низш.)алкилфенилтио, (низш.)алкилсульфинил, фенилсульфинил, фенил(низш.)алкилсульфинил, (низш.)алкилфенилсульфинил, (низш.)алкилсульфонил, фенилсульфонил, фенил(низш.)алкилсульфонил, (низш.)алкилфенилсульфонил, галоген(низш.)алкилмеркапто, галоген(низш.)алкилсульфонил, такой как, прежде всего, трифторметансульфонил, дигидроксибор (-В(ОН)₂), гетероциклил, моно- или бициклическая гетероарильная группа и (низш.)алкилендиокси, присоединенный к соседним атомам углерода в цикле, такой как метилендиокси. Арил более предпочтительно означает фенил, нафтил или тетрагидронафтил, который в каждом случае является незамещенным или независимо замещенным одним или двумя заместителями, которые выбирают из группы, включающей галоген, прежде всего фтор, хлор или бром; гидрокси, гидрокси, этерифицированный (низш.)алкилом (простой эфир), например группами метил, галоген(низш.)алкил, например трифторметил, или фенил; (низш.)алкилендиокси, присединенный к двум соседним атомам углерода, например метилендиокси, (низш.)алкил, например метил или пропил; галоген(низш.)алкил, например трифторметил; гидрокси(низш.)алкил, например гидроксиметил или 2-гидрокси-2-пропил; (низш.)алкокси(низш.)алкил, например метоксиметил или 2-метоксиэтил; (низш.)алкоксикарбонил(низш.)алкил, например метоксикарбонилметил; (низш.)алкинил, такой как 1-пропинил, этерифицированный карбокси (сложный эфир), прежде всего (низш.)алкоксикарбонил, например метоксикарбонил, н-пропоксикарбонил или изопропоксикарбонил; N-монозамещенный карбамоил, прежде всего карбамоил, монозамещенный группами (низш.)алкил, например метил, н-пропил или изопропил; амино, (низш.)алкиламино, например метиламино, ди(низш.)алкиламино, например диметиламино или диэтиламино, (низш.)алкиленамино, например пирролидино или пиперидино, (низш.)оксаалкиленамино, например морфолино, (низш.)азаалкиленамино, например пиперазино, ациламино, например ацетиламино или бензоиламино, (низш.)алкилсульфонил, например метилсульфонил, сульфамоил, или фенилсульфонил.

Циклоалкильная группа предпочтительно означает циклопропил, циклопентил, циклогексил или циклогептил и является незамещенной или замещенной одним или более, прежде всего одним или двумя, заместителями, которые выбирают из вышеуказанной группы заместителей для арила, более предпочтительно включающей (низш.)алкил, такой как метил, (низш.)алкокси, такой как метокси или этокси, или гидрокси, и, кроме того, оксо или конденсированное бензольное кольцо, такое как бензоциклопентил или бензоциклогексил.

Замещенный алкил означает вышеуказанный алкил, прежде всего (низш.)алкил, предпочтительно метил, содержащий один или более, прежде всего до трех, заместителей, которые, прежде всего, выбирают из группы, включающей галоген, прежде всего фтор, амино, N-(низш.)алкиламино, N,N-ди(низш.)алкиламино, N-(низш.)алканоиламино, гидрокси, циано, карбокси, (низш.)алкоксикарбонил и фенил(низш.)алкоксикарбонил. Прежде всего предпочтительным является трифторметил.

Моно- или дизамещенный амино означает, прежде всего, аминогруппу, замещенную одним или двумя заместителями, которые независимо друг от друга выбирают из группы: (низш.)алкил, такой как метил, гидрокси(низш.)алкил, такой как 2-гидроксиэтил, (низш.)алкокси(низш.)алкил, такой как метоксиэтил, фенил(низш.)алкил, такой как бензил- или 2-фенилэтил, (низш.)алканоил, такой как ацетил, бензоил, замещенный бензоил, причем фенильный заместитель является, прежде всего, замещенным одним или более, предпочтительно одним или двумя, заместителями, которые выбирают из группы: нитро, амино, галоген, N-(низш.)алкиламино, N,N-ди(низш.)алкиламино, гидрокси, циано, карбокси, (низш.)алкоксикарбонил, (низш.)алканоил и карбамоил, и фенил(низш.)алкоксикарбонил, причем фенильный заместитель является незамещенным или, прежде всего, замещенным одним или более, предпочтительно одним или двумя, заместителями, которые выбирают из группы: нитро, амино, галоген, N-(низш.)алкиламино, N,N-ди(низш.)алкиламино, гидрокси, циано, карбокси, (низш.)алкоксикарбонил, (низш.)алканоил и карбамоил, и предпочтительно означает N-(низш.)алкиламино, такой как N-метиламино, гидрокси(низш.)алкиламино, такой как 2-гидроксиэтиламино или 2-гидроксипропил, (низш.)алкокси(низш.)алкил, такой как метоксиэтил, фенил(низш.)алкиламино, такой как бензиламино, N,N-ди(низш.)алкиламино, N-фенил(низш.)алкил-N-(низш.)алкиламино, N,N-ди(низш.)алкилфениламино, (низш.)алканоиламино, такой как ацетиламино, или заместитель, который выбирают из группы, включающей бензоиламино и фенил(низш.)алкоксикарбониламино, причем фенильный заместитель в каждом случае является незамещенным или, прежде всего, замещенным заместителями: нитро или амино, или также галоген, амино, N-(низш.)алкиламино, N,N-ди(низш.)алкиламино, гидрокси, циано, карбокси, (низш.)алкоксикарбонил, (низш.)алканоил, карбамоил или аминокарбониламино. Дизамещенный амино означает также (низш.)алкиленамино, например пирролидино, 2-оксопирролидино или пиперидино, (низш.)оксаалкиленамино, например морфолино, или (низш.)азаалкиленамино, например пиперазино или N-замещенный пиперазино, такой как N-метилпиперазино или N-метоксикарбонилпиперазино.

Галоген означает, прежде всего, фтор, хлор, бром или иод, прежде всего фтор, хлор или бром.

Этерифицированный гидрокси в виде простого эфира означает, прежде всего, С₈-С₂₀алкилокси, такой как н-децилокси, (низш.)алкокси (предпочтительный), такой как метокси, этокси, изопропилокси или трет-бутилокси, фенил(низш.)алкокси, такой как бензилокси, фенилокси, галоген(низш.)алкокси, такой как трифторметокси, 2,2,2-трифторэтокси или 1,1,2,2-тетрафторэтокси, или (низш.)алкокси, замещенный моно- или бициклическим гетероарилом, содержащим один или два атома азота, предпочтительно (низш.)алкокси, замещенный имидазолилом, таким как 1Н-имидазол-1-ил, пирролил, бензимидазолил, такой как 1-бензимидазолил, пиридил, прежде всего 2-, 3- или 4-пиридил, пиримидинил, прежде всего 2-пиримидинил, пиразинил, изохинолинил, прежде всего 3-изохинолинил, хинолинил, индолил или тиазолил.

Этерифицированный гидрокси в виде сложного эфира означает, прежде всего, (низш.)алканоилокси, бензоилокси, (низш.)алкоксикарбонилокси, такой как трет-бутоксикарбонилокси или фенил(низш.)алкоксикарбонилокси, такой как бензилоксикарбонилокси.

Этерифицированный карбокси в виде сложного эфира означает, прежде всего, (низш.)алкоксикарбонил, такой как трет-бутоксикарбонил, изопропоксикарбонил, метоксикарбонил или этоксикарбонил, фенил(низш.)алкоксикарбонил или фенилоксикарбонил.

Алканоил означает, прежде всего, алкилкарбонил, прежде всего (низш.)алканоил, например ацетил.

N-Моно- или N,N-дизамещенный карбамоил, прежде всего, замещен одним или двумя заместителями, которые независимо выбирают из группы: (низш.)алкил, фенил(низш.)алкил и гидрокси(низш.)алкил, или (низш.)алкилен, окса(низш.)алкилен или аза(низш.)алкилен, необязательно замещенный у концевого атома азота.

Моно- или бициклическая гетероарильная группа, не содержащая или содержащая один, два или три атома азота в цикле и не содержащая или содержащая один атом кислорода, и не содержащая или содержащая один атом серы, причем указанные группы в каждом случае являются незамещенными или моно- или полизамещенными, означает гетероциклический остаток, содержащий ненасыщенный цикл, связывающий гетероарильный остаток с основным фрагментом молекулы формулы I, и предпочтительно означает цикл, причем в связующем цикле, но необязательно в любом конденсированном цикле, по крайней мере, один атом углерода заменен на гетероатом, который выбирают из группы, включающей азот, кислород и серу, а связывающий цикл предпочтительно включает от 5 до 12, более предпочтительно 5 или 6 атомов в цикле, и который является незамещенным или замещенным одним или более, прежде всего одним или двумя, заместителями, которые выбирают из вышеуказанных заместителей для арила, более предпочтительно из группы: (низш.)алкил, такой как метил, (низш.)алкокси, такой как метокси или этокси, или гидрокси. Предпочтительную моно- или бициклическую гетероарильную группу выбирают из группы: 2Н-пирролил, пирролил, имидазолил, бензимидазолил, пиразолил, индазолил, пуринил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, 4Н-хинолизинил, изохинолил, хинолил, фталазинил, нафтиридинил, хиноксалил, хиназолинил, хинолинил, птеридинил, индолизинил, 3Н-индолил, индолил, изоиндолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, триазолил, тетразолил, фуразанил, бензо[d]пиразолил, тиенил и фуранил. Более предпочтительную моно- или бициклическую гетероарильную группу выбирают из группы, включающей пирролил, имидазолил, такой как 1Н-имидазол-1-ил, бензимидазолил, такой как 1-бензимидазолил, индазолил, прежде всего 5-индазолил, пиридил, прежде всего 2-, 3- или 4-пиридил, пиримидинил, прежде всего 2-пиримидинил, пиразинил, изохинолинил, прежде всего 3-изохинолинил, хинолинил, прежде всего 4- или 8-хинолинил, индолил, прежде всего 3-индолил, тиазолил, бензо[d]пиразолил, тиенил и фуранил. В одном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения пиридил замещен гидроксилом в орто-положении в отношении атома азота и, следовательно, существует по крайней мере частично в форме соответствующего таутомера, пиридин-(1Н)2-она. В другом предпочтительном варианте пиримидинил замещен гидроксилом в положении 2, и в положении 4 и, следовательно, существует в нескольких таутомерных формах, например в форме пиримидин-(1Н,3Н)2,4-диона.

Гетероциклил означает, прежде всего, пяти-, шести- или семичленную гетероциклическую систему, содержащую один или два гетероатома, которые выбирают из группы, включающей азот, кислород и серу, причем указанная система является ненасыщенной или полностью или частично насыщенной и незамещенной или замещенной, прежде всего, группами: (низш.)алкил, такой как метил, фенил(низш.)алкил, такой как бензил, оксо или гетероарил, такой как 2-пиперазинил, гетероциклил означает, прежде всего, 2- или 3-пирролидинил, 2-оксо-5-пирролидинил, пиперидинил, N-бензил-4-пиперидинил, N-(низш.)алкил-4-пиперидинил, N-(низш.)алкилпиперазинил, морфолинил, например 2- или 3-морфолинил, 2-оксо-1Н-азепин-3-ил, 2-тетрагидрофуранил или 2-метил-1,3-диоксолан-2-ил.

Соли означают, прежде всего, фармацевтически приемлемые соли соединений формулы I.

Указанные соединения образуют, например, кислотно-аддитивные соли предпочтительно органических или неорганических кислот и соединений формулы I, включающих основный атом азота, прежде всего фармацевтически приемлемые соли. Пригодными неорганическими кислотами являются, например, галогенводородные кислоты, такие как соляная кислота, серная кислота или фосфорная кислота. Пригодными органическими кислотами являются, например, карбоновая, фосфоновая, сульфоновая или сульфаминовая кислоты, например уксусная кислота, пропионовая кислота, каприловая кислота, каприновая кислота, додекановая кислота, гликолевая кислота, молочная кислота, фумаровая кислота, янтарная кислота, адипиновая кислота, пимелиновая кислота, субериновая кислота, азелаиновая кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота, аминокислоты, такие как глутаминовая кислота или аспарагиновая кислота, малеиновая кислота, гидроксималеиновая кислота, метилмалеиновая кислота, циклогексанкарбоновая кислота, адамантанкарбоновая кислота, бензойная кислота, салициловая кислота, 4-аминосалициловая кислота, фталевая кислота, фенилуксусная кислота, миндальная кислота, коричная кислота, метан- или этансульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, этан-1,2-дисульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, 1,5-нафталиндисульфоновая кислота, 2-, 3- или 4-метилбензолсульфоновая кислота, метилсерная кислота, этилсерная кислота, додецилсерная кислота, N-циклогексилсульфаминовая кислота, N-метил-, N-этил- или N-пропилсульфаминовая кислота, или другие органические протонные кислоты, такие как аскорбиновая кислота.

В присутствии отрицательно заряженных заместителей, таких как карбокси или сульфо, указанные соединения также образуют соли оснований, например соли металлов или аммония, такие как соли щелочных металлов или щелочноземельных металлов, например соли натрия, калия, магния или кальция, или соли аммония или пригодных органических аминов, таких как третичные моноамины, например триэтиламин или три(2-гидроксиэтил)амин, или гетероциклические основания, например N-этилпиперидин или N,N'-диметилпиперазин.

Если в одной и той же молекуле присутствует основная группа и кислотная группа, то соединение формулы I образует также внутренние соли.

Для выделения или очистки также можно использовать фармацевтически неприемлемые соли, например, пикраты или перхлораты. Для лечения используют только фармацевтически приемлемые соли или свободные соединения (которые пригодны в форме фармацевтических препаратов), и, следовательно, которые являются предпочтительными.

В связи с родственной структурой новых соединений в свободной форме и соединений в форме их солей, включая соли, которые используются в качестве промежуточных соединений, например, при очистке или идентификации новых соединений, любая ссылка на свободные соединения в данном контексте означает ссылку на соответствующие соли.

Все соединения формулы I и способ их получения описаны в заявке WO 04/005281, опубликованной 15 января 2004 года, которая включена в настоящее описание в качестве ссылки. Предпочтительным является 4-метил-3-[[4-(3-пиридинил)-2-пиримидинил]амино]-N-[5-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)-3-(трифторметил)фенил]бензамид и его фармацевтически приемлемые соли формулы (II)

Комбинации по настоящему изобретению включают 4-(4-метилпиперазин-1-илметил)-N-[4-метил-3-(4-пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил]бензамид (иматиниб, торговое название гливек®) формулы (III):

Получение соединения (III) и его применение, прежде всего в качестве противоопухолевого агента, описано в заявке ЕР-А-0564409 (пример 21), опубликованной 6 октября 1993 г., и в эквивалентных заявках и патентах других стран, например в патенте US 5521184 и в патенте Японии 2706682.

Кислотно-аддитивная соль монометансульфоновой кислоты и соединения (III) и ее предпочтительная кристаллическая форма описаны в заявке РСТ WO 99/03854, опубликованной 28 января 1999 г.

Настоящее изобретение включает фармацевтически приемлемые соли указанного соединения и соответствующие рацематы, диастереомеры, энантиомеры, таутомеры, а также соответствующие кристаллические модификации вышеописанных соединений, например сольваты, гидраты и полиморфные формы, которые описаны в данном контексте. Соединения, используемые в качестве активных ингредиентов в комбинациях по настоящему изобретению, получают и вводят, как описано в цитируемых документах соответственно. Кроме того, настоящее изобретение включает комбинацию, включающую более двух отдельных активных ингредиентов, как описано выше, то есть фармацевтическая комбинация по настоящему изобретению включает три или более активных ингредиента.

Предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения включают:

1. фармацевтическую комбинацию, включающую

а) производное пиримидиламинобензамида формулы (I) и

б) иматиниб формулы (III),

2. способ лечения или профилактики пролиферативных заболеваний у субъектов, нуждающихся в таком лечении, который заключается в том, что указанному субъекту совместно вводят, например, одновременно или последовательно, терапевтически эффективное количество производного пиримидиламинобензамида формулы (I) и иматиниба формулы (III), например, как описано выше,

примеры пролиферативных заболеваний включают, например, опухоли, прежде всего опухоли GIST,

3. фармацевтическую комбинацию, как определено выше в п.1), например, для применения в способе, как определено выше в п.2),

4. фармацевтическую комбинацию, как определено выше в п.1), для применения при получении лекарственного средства, предназначенного для применения в способе, как определено выше в п.2),

5. фармацевтическую комбинацию, включающую

а) предпочтительно соединение формулы (II) и

б) иматиниб формулы (III),

6. способ для лечения или профилактики пролиферативных заболеваний у субъекта, нуждающегося в таком лечении, который заключается в том, что указанному субъекту совместно вводят, например, одновременно или последовательно, терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) и иматиниба формулы (III), например, как описано выше,

7. фармацевтическаую комбинацию, как определено выше в п.5), например, для применения в способе, как определено выше в п.6),

8. фармацевтическую комбинацию, как определено выше в п.5), для применения при получении лекарственного средства, предназначенного для применения в способе, как определено выше в п.7).

Применимость комбинации по настоящему изобретению в описанном выше способе можно оценивать при испытании на моделях животных, а также в ходе клинических испытаний, например, как описано в данном контексте.

А. Комбинированное лечение.

Пригодные клинические испытания включают, например, испытания с открытой этикеткой, с постепенным увеличением дозы с использованием пациентов с пролиферативными заболеваниями, прежде всего GIST. Такие испытания подтверждают, прежде всего, синергизм активных ингредиентов комбинации по настоящему изобретению. Благоприятное действие на заболевание GIST определяют непосредственно по результатам указанных испытаний, которые известны специалистам в данной области медицины. Такими испытаниями являются, прежде всего, испытания, пригодные для сравнения результатов лечения в режиме монотерапии с использованием активных ингредиентов с комбинацией по настоящему изобретению. Предпочтительно дозу агента (а), например соединения (I) или предпочтительно соединения (II), увеличивают до достижения максимальной переносимой дозы, а агент (б) вводят в фиксированной дозе. В другом варианте агент (а) водят в фиксированной дозе, а дозу агента (б) увеличивают. Каждому пациенту вводят дозу агента (а) либо ежедневно, либо периодически. Эффективность лечения в таких испытаниях определяют, например, через 12, 18 или 24 недель, оценивая комплекс симптомов через каждые 6 недель.

Введение фармацевтической комбинации по настоящему изобретению оказывает не только благоприятное действие, например наблюдается синергетический терапевтический эффект, например, в отношении снижения интенсивности симптомов, замедления прогрессирования или подавления симптомов, но также оказывает неожиданные благоприятные действия, например наблюдается снижение побочных действий, улучшение качества жизни или снижение заболеваемости по сравнению с лечением в режиме монотерапии только одним из фармацевтически активных ингредиентов, применяемых в комбинации по настоящему изобретению.

Другим преимуществом является возможность использовать более низкие дозы активных ингредиентов комбинации по настоящему изобретению, например, при этом не только можно снизить дозы, но также снизить частоту введения, что позволяет снизить заболеваемость или тяжесть побочных эффектов. Указанное преимущество соответствует требованиям пациентов, нуждающихся в таком лечении.

Термин "совместное введение", который используют в данном контексте, означает введение отдельных терапевтических агентов конкретному пациенту и включает курсы лечения, при которых агенты вводят необязательно одинаковым способом или в одно и тоже время.

Один объект настоящего изобретения включает фармацевтическую композицию, включающую количество комбинации по настоящему изобретению, которое оказывает совместное терапевтическое действие при лечении или профилактике пролиферативных заболеваний, прежде всего GIST. В указанной композиции агент (а) и агент (б) вводят в смеси, один за другим или раздельно в виде одной комбинированной стандартной лекарственной формы или в виде двух раздельных лекарственных форм. Стандартной лекарственной формой также является фиксированная комбинация.

Фармацевтические композиции для раздельного введения агента (а) и агента (б) или для введения в виде фиксированной комбинации, т.е. единую галеновую композицию, содержащую, по крайней мере, два компонента комбинации (а) и (б) по настоящему изобретению, получают по известным методикам, в форме пригодной для энтерального, такого как пероральный или ректальный, и парентерального введения млекопитающим (теплокровным животным), включая человека, причем указанные композиции включают терапевтически эффективное количество, по крайней мере, одного фармакологически активного компонента комбинации, например, как указано выше, или в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем, прежде всего пригодным для энтерального или парентерального введения.

Пригодные фармацевтические композиции содержат, например, от приблизительно 0,1% до приблизительно 99,9%, предпочтительно от приблизительно 1% до приблизительно 60% активного ингредиента(ов). Фармацевтические препараты для комбинированной терапии для энтерального или парентерального введения включают, например, препараты в виде стандартной лекарственной формы, такой как таблетки с сахарным покрытием, таблетки, капсулы или суппозитории, или ампулы. Если не указано иное, указанные лекарственные формы получают стандартными методами, например при обычном смешивании, гранулировании, нанесении сахарного покрытия, растворении или лиофилизации. Следует понимать, что содержание компонента комбинации в составе каждой лекарственной формы необязательно составляет эффективное количество, так как необходимое эффективное количество достигается при введении множества лекарственных форм.

Прежде всего, терапевтически эффективное количество каждого компонента комбинации по настоящему изобретению можно вводить одновременно или последовательно и в любом порядке, и компоненты можно вводить раздельно или в виде фиксированной комбинации. Например, способ профилактики или лечения пролиферативных заболеваний по настоящему изобретению заключается в том, что (1) первый агент (а) вводят в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли и (2) агент (б) вводят в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли, одновременно или последовательно в любом порядке, в совместных терапевтически эффективных количествах, предпочтительно в синергетически эффективных количествах, например в суточной или дробной дозах в соответствии с количествами, описанными в данном тексте. Индивидуальные компоненты комбинации по настоящему изобретению можно вводить раздельно в различные периоды времени в течение курса лечения или одновременно в виде разделенных доз или однократной дозы. Кроме того, термин "введение" также означает применение пролекарства компонента комбинации, которое превращается in vivo в компонент комбинации. Следовательно, настоящее изобретение включает все указанные курсы одновременного или поочередного лечения, и термин "введение" включает указанные курсы.

Эффективная доза каждого компонента комбинации по настоящему изобретению изменяется в зависимости от конкретного соединения или фармацевтической композиции, способа введения, конкретного заболевания и тяжести заболевания. Таким образом, дозы комбинации по настоящему изобретению выбирают в соответствии с различными факторами, включающими способ введения, а также функцию почек и печени пациента. Клиницист или лечащий врач может определить эффективное количество отдельных активных ингредиентов, требуемых для снижения и устранения симптомов или замедления прогрессирования заболевания. Точную оптимальную дозу для достижения концентрации активных ингредиентов в диапазоне, которая обеспечивает эффективность в отсутствие токсичности, определяют по данным кинетики доступности активных ингредиентов для доставки в участок-мишень.

Суточные дозы агента (а) или (б) изменяются в зависимости от различных факторов, например от конкретного соединения, прежде всего конкретного заболевания и требуемого эффекта.

Соединение формулы (I), агент (а), предпочтительно вводят перорально, причем предпочтительная суточная доза составляет от 1 до 300 мг/кг массы тела или, для более крупных приматов, суточная доза составляет от 50 до 5000 мг, предпочтительно от 500 до 3000 мг. Предпочтительная пероральная суточная доза составляет от 1 до 75 мг/кг массы тела или, для более крупных приматов, суточная доза составляет от 10 до 2000 мг, которую вводят в виде однократной дозы или разделенных многократных доз, например два раза в сутки.

Агент (б) вводят человеку в виде суточной дозы в диапазоне от 0,5 до 1000 мг. Пригодные стандартные лекарственные формы для перорального введения включают от приблизительно 0,1 до 500 мг активного ингредиента, в смеси с одним или более фармацевтически приемлемыми разбавителями или носителями.

Однако удовлетворительные результаты обычно достигаются при введении агента (б) в суточной дозе приблизительно от 0,03 до 5 мг/кг/сут, прежде всего от 0,1 до 5 мг/кг/сут, например от 0,1 до 2,5 мг/кг/сут, в виде однократной дозы или разделенных доз. Агент (а) и агент (б) вводят стандартным способом, прежде всего энтерально, например перорально, например, в форме таблеток, капсул, питьевых растворов, или парентерально, например, в форме растворов или суспензий для инъекций, в смеси с одним или более фармацевтически приемлемыми разбавителями или носителями.

Введение фармацевтической комбинации по настоящему изобретению приводит не только к благоприятному действию, например к синергетическому терапевтическому эффекту, например, в отношении ингибирования разрегулированной пролиферации, или к замедлению прогрессирования роста опухолей, но также к другим неожиданным положительным эффектам, например к снижению побочных эффектов, улучшению качества жизни или снижению заболеваемости по сравнению с лечением в режиме монотерапии только одним фармацевтически активным ингредиентом, используемым в комбинации по настоящему изобретению.

Другим положительным результатом является использование более низких доз активных ингредиентов комбинации по настоящему изобретению, например, при этом можно не только снизить дозы, но также снизить частоту введения, что позволяет снизить заболеваемость и тяжесть побочных эффектов. Указанные эффекты соответствуют требованиям пациентов, нуждающихся в таком лечении.

В. Заболевания, предназначенные для лечения.

Термин "пролиферативное заболевание" включает, без ограничения перечисленным, опухоли, псориаз, рестеноз, склеродермит и фиброз.

Термин "рак крови", означает, прежде всего, лейкоз, прежде всего, при котором наблюдается экспрессия киназ Bcr-Abl, c-Kit или Flt-3, и включает, без ограничения перечисленным, хронический миелоидный лейкоз и острый лимфоцитарный лейкоз (ALL), прежде всего острый лимфоцитарный лейкоз, положительный к Филадельфийской хромосоме (Ph+ALL), также как и лейкоз, устойчивый к STI57I.

Термин "солидная опухоль" означает, прежде всего, рак яичников, рак молочной железы, рак ободочной кишки и, в основном, желудочно-кишечного тракта, рак шейки матки, рак легких, например мелкоклеточный рак легких и немелкоклеточный рак легких, рак головы и шеи, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы или саркома Капоши.

Следовательно, комбинации по настоящему изобретению, которые ингибируют активность указанных протеинкиназ, прежде всего тирозинпротеинкиназ, указанных в данном контексте, можно использовать для лечения зависимых от протеинкиназ заболеваний. Зависимые от протеинкиназ заболевания, прежде всего, включают пролиферативные заболевания, предпочтительно доброкачественные или, прежде всего, злокачественные опухоли (например, карцинома почек, легкого, надпочечников, мочевого пузыря, молочной железы, желудка, яичников, ободочной кишки, прямой кишки, предстательной железы, поджелудочной железы, легких, влагалища или щитовидной железы, саркома, глиобластомы и множество опухолей головы и шеи, а также лейкозы). При введении комбинаций наблюдается регрессия опухолей и предотвращение образования метастазов, а также роста микрометастазов. Кроме того, указанные комбинации можно использовать при эпидермальной гиперпролиферации (например, при псориазе), при гиперплазии предстательной железы и при лечении неоплазий, прежде всего эпителиального характера, например карциномы молочной железы. Комбинации по настоящему изобретению можно также использовать при лечении заболеваний иммунной системы, прежде всего, если в развитии заболеваний принимают участие несколько и, прежде всего, одна индивидуальная тирозинпротеинкиназа; кроме того, комбинации по настоящему изобретению можно также использовать при лечении заболеваний центральной или периферической нервной системы, если наблюдается нарушение передачи сигнала с участием по крайней мере одной тирозинпротеинкиназы, прежде всего выбранной из указанных в данном контексте.

При хроническом миелоидном лейкозе (CML) взаимно сбалансированная хромосомальная транслокация в кроветворных стволовых клетках (HSC) приводит к образованию гибридного гена BCR-ABL, который кодирует онкогенный гибридный белок Bcr-Abl. В то время как ABL кодирует строго регулируемую протеинтирозинкиназу, которая играет фундаментальную роль в регуляции пролиферации, адгезии и апоптоза клеток, гибридный ген BCR-ABL кодирует конститутивно активированную киназу, которая трансформирует клетки HSC, при этом продуцируется фенотип с разрегулированной клональной пролиферацией, который характеризуется сниженной адгезией к строме костного мозга и снижением апоптозного ответа на мутагенный стимул, причем указанный фенотип прогрессивно накапливает более злокачественные трансформации. Образующиеся гранулоциты не способны развиваться в зрелые лимфоциты и высвобождаться в кровоток, что приводит к недостатку зрелых клеток и повышенной восприимчивости к инфекции. Описаны АТФ-конкурентные ингибиторы Bcr-Abl, которые предотвращают активацию киназы по митогенному и антиапоптозному путям (например, киназы Р-3 и STAT5) и приводят к гибели указанного фенотипа клеток BCR-ABL и, следовательно, указанные ингибиторы можно использовать для эффективного лечения CML. Таким образом, комбинации по настоящему изобретению, прежде всего, пригодны для лечения заболеваний, связанных со сверхэкспрессией указанных киназ, прежде всего лейкозов, таких как лейкозы, например, CML или ALL.

Комбинации по настоящему изобретению, прежде всего, подавляют рост кровеносных сосудов и таким образом проявляют эффективность, например, при лечении ряда заболеваний, связанных с разрегулированным ангиогенезом, прежде всего заболеваний, вызванных образованием новых сосудов в тканях глаза, прежде всего ретинопатии, такой как диабетическая ретинопатия или возрастная дегенерация желтого пятна, псориаз, гемангиобластома, такая как гемангиома, нарушения пролиферации мезангиальных клеток, такие как хронические или острые почечные заболевания, например диабетическая нефропатия, злокачественный нефросклероз, синдром тромботической микроангиопатии или отторжение трансплантата, или прежде всего воспалительные почечные заболевания, такие как гломерулонефрит, прежде всего мезангиальный пролиферативный гломерулонефрит, гемолитическо-уремический синдром, диабетическая нефропатия, гипертензивный нефросклероз, атерома, артериальный рестеноз, аутоиммунные заболевания, диабет, эндометриоз, хроническая астма и, прежде всего, опухолевые заболевания (солидные опухоли, а также лейкоз и рак крови), такие как, прежде всего, рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак легких (прежде всего мелкоклеточный рак легких), рак предстательной железы или саркома Капоши. Комбинации по настоящему изобретению подавляют рост опухолей и, прежде всего, пригодны для профилактики распространения опухолевых метастазов и роста микрометастазов.

Настоящее изобретение относится к способу лечения миеломы, прежде всего миеломы, которая устойчива к обычной химиотерапии. Термин "миелома", использованный в данном контексте, относится к опухоли, состоящей из типа клеток, которые в норме находятся в костном мозге. Термин "множественная миелома", использованный в данном контексте, означает диссеминированную злокачественную неоплазму плазматических клеток, которая характеризуется множеством очагов опухолевых клеток костного мозга и секрецией компонента М (фрагмент моноклонального иммуноглобулина), которая связана с широко распространенными разрушающими костную ткань повреждениями, которые вызывают боли в кости, патологические переломы, гиперкальцемию и нормохромную нормоцитарную анемию. Множественная миелома не поддается лечению при использовании традиционных лекарственных средств химиотерапии в высоких дозах. Настоящее изобретение относится к способу лечения миеломы, прежде всего миеломы, устойчивой к традиционной химиотерапии.

Примеры

Известно, что активация мутации альфа-рецептора тромбоцитарного фактора роста (PDGFRa) выявлена у группы пациентов с желудочно-кишечной стромальной опухолью (GIST), у которых отсутствует экспрессия мутантного рецептора фактора стволовых клеток, с-KIT. Восприимчивость к иматинибу у пациентов, GIST положительных в отношении к мутанту PDGFRα, зависит от локализации мутации PDGFRα. Например, мутация V561D в последовательности околомембранного домена является более чувствительной к иматинибу по сравнению с мутацией D842V в домене киназы. В указанном примере исследовали воздействие соединения (II) и иматиниба (соединение (III)) на пациентов GIST с двумя мутациями PDGFRα V561D и D842V, которые характеризуются различной чувствительностью к иматинибу.

Линии клеток и клеточная культура

Векторы кДНК D842V-, V561D- и дикий тип PDGFRα, клонированные в pcDNA3.1 (предоставлены М.С.Heinrich в университете Oregon Health & Science University Cancer Institute, Портланд, штат Оригон, США), устойчиво трансфектировали в клетки Ba/F3 методом электропорации, и отбирали клетки, устойчивые к неомицину и рост которых не зависит от IL3. Все клетки культивировали в присутствии 5% СО₂ при температуре 37°С до концентрации 5×10⁵ клеток/мл в среде для культивирования клеток RPMI 1640 (фирмы Mediatech, Inc. Herndon, штат Вирджиния, США), содержащей 10% эмбриональную телячью сыворотку (ЭТС; фирмы Harlan Bioproducts, Индианаполис, штат Индиана, США), 1% глютамин и пенициллин/стрептомицин. Родительские клетки Ba/F3 или клетки дикого типа PDGFRα-Ba/F3 культивировали в среде, содержащей 15% WEHI в качестве источника IL-3. Все трансфектированные клетки культивировали в среде, содержащей 1 мг/мл G418.

Антитела и иммуноблоттинг

Для иммуноблоттинга использовали антитела к р-Tyr (клон 4G10, Upstate Biotechnology, Нью-Йорк, США) в разведении 1:1000 и антитела к PDGFRα (С-20, Santa Cruz Biotechnology, штат Калифорния, США) в разведении 1:200. Белковый лизис и иммуноблоттинг проводили, как ранее описано в статье Weisberg и др., Cancer Cell, 1, 433-443 (2002).

Анализ пролиферации

Для анализа пролиферации клеток использовали вытеснительный метод с трипановым синим, как описано в статье (Weisberg и др., Cancer Cell, 1, 433-443 (2002)). Соединение II и иматиниб добавляли одновременно в фиксированных соотношениях к клеткам D842V- или V561D-PDGFRα-Ba/F3. Строили кривые зависимости ответная реакция/доза и рассчитывали коэффициенты эффективности комбинаций, как описано в статье Weisberg и др., Cancer Cell, 7, 129-141 (2005).

Испытания на модели мышей и визуализация in vivo

Клетки D842V-PDGFRα-Ba/F3 трансдуцировали ретровирусом, кодирующим люциферазу из светляков (MSCV-Luc), и отбирали клетки в присутствии пуромицина при концентрации 0,5 мкг/мл, при этом получали линию клеток D842V-PDGFRα-Ba/F3-luciferase (luc+). Перед внутривенным введением мышам клетки, не содержащие микоплазму и примеси вируса, ресуспендировали в солевом растворе Hank′s Balanced Salt Solution (фирмы HBSS, Mediatech, Inc., штат Вирджиния, США). Растворы соединения II получали при растворении 200 мг в 1,0 мл NMP, получали прозрачный раствор и перед введением каждый день разбавляли 9,0 мл ПЭГ300. Мышам из группы плацебо вводили наполнитель (вместо соединения II) отдельно через 30-45 мин.

Самцам мышей NCR-nude (возраст 5-6 недель, Taconic, штат Нью-Йорк, США) вводили 600000 клеток D842V-PDGFRα-Ba/F3-luc+ внутривенной инъекцией в хвостовую вену. Мышей подвергали визуализации и рассчитывали общую интенсивность люминисценции на мышь, как описано ранее в статье (Armstrong и др., Cancer Cell, 3, 173-1839 (2003)). При визуализации измеряли базовую линию интенсивности люминисценции через 1 день после прививки опухоли, которую использовали для распределения мышей в группе по массе опухоли. Указанным группам мышей вводили перорально наполнитель, 150 мг/кг/сут соединения II (получали, как описано выше, продолжительность лечения 6 сут). Через различные промежутки времени проводили повторную визуализацию.

Эффективность действия комбинации соединения II и иматиниба на клетки D842V-PDGFRα-Ba/F3

Эффективность комбинации соединения II и иматиниба оценивали с использованием клеток D842V-PDGFRA-Ba/F3. При введении соединения II и иматиниба наблюдается суммарное положительное действие. Анализ Calcusyn комбинированного действия соединения II и иматиниба свидетельствует о действии от синергетического до близкого к аддитивному для всех исследованных доз (ED25-ED75), в дозе ED90 наблюдается антагонизм (см. таблицу).

Эффективность действия комбинации соединения II и иматиниба на клетки V561D

Эффективность комбинации соединения II и иматиниба оценивали с использованием клеток V561D-PDGFRα-Ba/F3. В основном, при введении обеих комбинаций наблюдается различная степень антагонизма в отношении линии клеток V561D-PDGFRα-Ba/F3 для всех использованных доз (см. таблицу).

Коэффициенты эффективности, рассчитанные с использованием кривых зависимости ответная реакция/доза
Линия клеток (для проведения курса лечения)	ED25	ED50	ED75	ED90
D842V-Ba/F3 (соединение II + иматиниб)	0,48812	0,73221	1,09836	1,64762
V561D-Ba/F3 (соединение II + иматиниб)	0,80100	1,00712	1,81556	5,23012

1. Способ лечения желудочно-кишечных стромальных опухолей, включающий введение комбинации 4-метил-3-[[4-(3-пиридинил)-2-пиримидинил]амино]-N-[5-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)-3-(трифторметил)фенил]бензамида или его фармацевтически приемлемой соли формулы

и иматиниба формулы

или его фармацевтически приемлемой соли.

2. Применение комбинации 4-метил-3-[[4-(3-пиридинил)-2-пиримидинил]амино]-N-[5-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)-3-(трифторметил)фенил]бензамида или его фармацевтически приемлемой соли формулы

и иматиниба формулы

или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства, предназначенного для лечения желудочно-кишечных стромальных опухолей.