Композиция бис(тио-гидразид амида)

Изобретение относится к области медицины и фармацевтики и касается композиции для лечения рака, включающей соединение, представленное структурной формулой (I), и фармацевтически приемлемый кристаллический объемный наполнитель, где мольное соотношение соединения (1) к указанному наполнителю составляет от 1:20 до 1:1, а также способа ее получения. Композиция обладает повышенной активностью. 3 н. и 47 з.п. ф-лы, 3 табл.

 

Предпосылки создания изобретения.

В настоящее время доступно множество препаратов, которые могут использоваться в лечении рака. Однако во многих случаях не наблюдается отклика на противораковое лечение или рост раковой опухоли и/или метастазов только замедляется. Даже если опухоль первоначально реагирует на противораковое лечение, уменьшаясь в размере или переходя в стадию ремиссии, она вырабатывает резистентность к лекарственному средству. По этим причинам существует потребность в новых противораковых средствах и новых препаратах, которые могут использоваться в лечении рака с резистентностью к нескольким лекарствам.

Некоторые композиции бис(тио-гидразид амида) были описаны как обладающие значительной цитотоксичностью по отношению к раковым клеткам, включая раковые клетки, которые обрели устойчивость ко множеству лекарственных средств, а также улучшающие противораковое действие других противораковых лекарств, таких как таксол и аналоги таксола (см., например, патентную заявку США №10/758589 и патенты США №6762204 и 6800660).

Эти бис(тио-гидразид амиды) сами по себе только незначительно растворимы в воде. Однако их дисоли (описанные в патентной заявке США №11/157213) демонстрируют высокую растворимость в воде и биодоступность. Обычным недостатком этих дисолей является длительное время ресуспендирования в воде, а из-за низкой температуры стеклования эти дисоли требуют использования специального лиофилизационного оборудования, которое увеличивает затраты, связанные с сушкой дисолей.

Поэтому существует потребность в способах, которые позволят уменьшить затраты, связанные с сушкой указанных дисолей, и сократить время ресуспендирования дисолей.

Сущность изобретения

Было обнаружено, что время ресуспендирования некоторых бис(тио-гидразид амидных) дисолей может быть значительно сокращено путем лиофилизации и отжига дисолей в присутствии кристаллического объемного наполнителя в определенных условиях. Было также обнаружено, что лиофилизация и отжиг этих дисолей в присутствии кристаллического объемного наполнителя не требует применения специального лиофилизационного оборудования, поэтому затраты на производство значительно сокращаются.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции, включающей соединение, представленное структурной формулой (I):

,

где

Y - ковалентная связь или замещенная или незамещенная неразветвленная гидрокарбильная группа.

R₁-R₄ независимо представляют собой -Н, алифатическую группу, замещенную алифатическую группу, арильную группу или замещенную арильную группу, или R₁ и R₃, взятые вместе с атомами углерода и азота, с которыми они связаны, и/или R₂ и R₄, взятые вместе с атомами углерода и азота, с которыми они связаны, образуют неароматическое гетероциклическое кольцо, необязательно слитое с ароматическим кольцом.

Z означает -О или -S.

М⁺ является фармацевтически приемлемым моновалентным катионом, а М²⁺ - фармацевтически приемлемым двухвалентным катионом.

2 г композиции, включающей соединение, представленное структурной формулой (I), ресуспендируется в 10 мл воды в течение менее 10 минут.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции, включающей соединение, представленное структурной формулой (I), и фармацевтически приемлемый наполнитель, причем мольное отношение указанного соединения к указанному наполнителю составляет от 1:20 до 1:1.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения лиофилизата композиции, включающей соединение, представленное структурной формулой (I), и фармацевтически приемлемый кристаллический объемный наполнитель. Способ включает этапы:

a) приготовления водного раствора соединения и наполнителя, в котором мольное отношение указанного соединения к указанному наполнителю составляет от 1:20 до 1:1;

b) замораживания раствора, полученного на этапе а), при температуре ниже температуры стеклования соединения с образованием замороженного концентрата;

c) отжига замороженного концентрата при температуре выше температуры стеклования соединения, но ниже температуры плавления замороженного раствора, включающего замороженный концентрат, с образованием отожженной композиции;

а) замораживания отожженной композиции при температуре ниже температуры стеклования соединения; и

е) высушивания отожженной композиции из этапа е) с получением лиофилизата с содержанием влаги менее 10%.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к лиофилизату, включающему соединение, представленное структурной формулой (I), и фармацевтически приемлемый кристаллический объемный наполнитель. Лиофилизат готовят согласно описанному выше способу.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения лиофилизата композиции, включающей соединение, представленное структурной формулой (I), и фармацевтически приемлемый наполнитель, выбранный из группы гидроксиэтил крахмала, декстрана и их сочетаний. Способ включает этапы:

a) приготовления водного раствора соединения и наполнителя;

b) замораживания раствора, полученного на этапе а), при температуре ниже температуры стеклования соединения с образованием замороженного концентрата; и

с) высушивания указанного замороженного концентрата с получением лиофилизата с влажностью менее 10%.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к лиофилизату, включающему соединение, представленное структурной формулой (I), и фармацевтически приемлемый наполнитель, выбранный из группы гидроксиэтил крахмала, декстрана и их сочетаний. Лиофилизат готовят согласно описанному выше способу.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к использованию раскрытых здесь композиций в лечении, например, в качестве противораковых средств.

Настоящее изобретение также предлагает способ лечения пациента с раковым заболеванием. Способ включает введение пациенту эффективного количества раскрытой здесь композиции. Композиция вводится в виде монотерапии (т.е. в качестве единственного лекарственного средства против рака, вводимого пациенту), или вводится совместно с одним или несколькими другими противораковыми препаратами.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к использованию композиции или лиофилизата, раскрытых здесь, в производстве медикамента для лечения рака у пациента.

Раскрытые способы позволяют сушить лиофилизированные (и, необязательно, отожженные) композиции и хранить их в течение длительного времени без ухудшения качества композиций. Кроме того, высокая растворимость в воде раскрытых здесь лиофилизированных (и, необязательно, отожженных) композиций обеспечивает их быстрое ресуспендирование без необходимости в применении специального оборудования, такого как акустические ванны и т.д. Описанный здесь процесс лиофилизации и отжига также проводится при стандартных условиях без необходимости в высоком вакууме и низких температурах, которые обычно требуются для соединений с низкими температурами стеклования, что значительно повышает затраты, связанные с процессом лиофилизации.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение относится к композициям, включающим соединение бис(тио-гидразид амид), являющееся соединением, структура которого охватывается формулой, выбранной из Структурных формул (I)-(V), описанных ниже, 2 г которого может ресуспендироваться в 10 мл в течение менее чем 10 минут; предпочтительно - в течение менее чем 5 минут, более предпочтительно - в течение менее чем 2 минут, еще более предпочтительно - в течение менее чем 1 минуты и еще более предпочтительно - в течение менее чем 30 секунд.

Употребляемые здесь термины "ресуспендируемый" или "ресуспендированный" означают, что композиция или отожженная композиция и/или лиофилизированная композиция согласно настоящему изобретению может быть полностью растворена в воде в условиях окружающей среды.

В предпочтительном варианте осуществления композиция также включает фармацевтически приемлемый наполнитель. Употребляемый здесь термин "фармацевтически приемлемый наполнитель" относится к веществу, добавляемому к раствору перед лиофилизацией для улучшения таких характеристик, как цвет, текстура, прочность и объем лиофилизированной лепешки. Фармацевтически приемлемые наполнители могут быть, например, буферами и регуляторами рН, кристаллическими объемными наполнителями, стабилизаторами и агентами, повышающими тоничность.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления фармацевтически приемлемый наполнитель - это кристаллический объемный наполнитель. Употребляемые здесь термины "кристаллический объемный наполнитель" или "кристаллический объемный агент" означают наполнитель, который обеспечивает объем и структуру лиофилизационной лепешки. Эти кристаллические наполнители инертны и не реагируют с бис(тио-гидразид амидом). Кроме того, кристаллические объемные агенты способны к кристаллизации в условиях лиофилизации. Кристаллический объемный агент может образовывать кристаллическую структуру в сочетании с бис(тио-гидразид амидом) или может образовывать кристаллическую структуру независимо от бис(тио-гидразид амида).

Примеры подходящих кристаллических объемных агентов включают гидрофильные наполнители, такие как водорастворимые полимеры; сахары, такие как маннитол, сорбит, ксилит, глюцитол, дуцитол, инозитиол, арабинитол, арабитол, галактитол, идитол, аллитол, мальтитол, фруктоза, сорбоза, глюкоза, ксилоза, трегалоза, аллоза, декстроза, альтроза, лактоза, глюкоза, фруктоза, гулоза, идоза, галактоза, талоза, рибоза, арабиноза, ксилоза, ликсоза, сахароза, солодовый сахар, лактоза, лактулоза, фукоза, рамноза, мелецитоза, мальтотриоза, раффиноза, альтритол, их оптически активные формы (D- или L-формы), а также соответствующие рацематы; неорганические соли, минеральные и органические минеральные, такие как, соли кальция, такие как лактат, глюконат, глицерилфосфат, цитрат, фосфат, одноосновный и двухосновный, сукцинат, сульфат и тартрат, а также такие же соли алюминия и магния; углеводы, такие как, обычные моно- и дисахариды, а также соответствующие многоатомные спирты; белки, такие как альбумин; аминокислоты, такие как глицин; эмульгируемые жиры и поливинилпирролидон.

Предпочтительные кристаллические объемные агенты выбраны из группы, состоящей из глицина, маннитола, декстрана, декстрозы, лактозы, сахарозы, поливинилпирролидона, трегалозы, глюкозы и их сочетаний. Другими предпочтительными кристаллическими объемными агентами являются глицин или маннитол. В некоторых других предпочтительных вариантах осуществления кристаллический объемный агент является маннитолом.

В некоторых вариантах осуществления кристаллические объемные агенты присутствуют в мольном отношении бис(тио-гидразид амидов) к наполнителю от 1:20 до 1:1, предпочтительно от 1:10 до 1:1. Как правило, наполнители присутствуют в избытке мольного отношения дисоли бис(тио-гидразид амида) к наполнителям, например, от 1:20 до 1:2, предпочтительно от 1:10 до 1:2, еще более предпочтительно от 1:5,5 до 1:2,0.

В других вариантах осуществления фармацевтически приемлемый наполнитель может использоваться в сочетании с бис(тио-гидразид амидом), причем фармацевтически приемлемый наполнитель образовывает желатиновую или полимерную структуру, которая может быть аморфной или кристаллической. Примеры таких фармацевтически приемлемых наполнителей включают гидроксиэтил крахмал, декстран, поливинилпирролидон, желатин, пуллан, крахмал, пектин, амилопектин, хитин и их сочетания, предпочтительно наполнитель выбирают из гидроксиэтил крахмала, декстрана и их сочетаний. Обычно эти наполнители присутствуют в весовом соотношении бис(тио-гидразид амида) к инертному наполнителю от 1:0,5 до 1:20, предпочтительно от 1:1 до 1:10, более предпочтительно от 1:1 до 1:5, еще более предпочтительно от 1:1 до 1:2.

Для одного варианта осуществления композиция, включающая бис(тио-гидразид амид) и фармацевтически приемлемый наполнитель, является лиофилизированной, более предпочтительно лиофилизированной и отожженной композицией. Альтернативно, раскрытые композиции являются лиофилизированными или нелиофилизированными. Нелиофилизированные композиции могут служить исходным материалом для приготовления лиофилизированных и отожженных композиций согласно изобретению с помощью описанных ниже процессов.

Употребляемый здесь термин "лиофилизация" означает метод сушки или дегидратации замораживанием, включающий удаление растворителя, предпочтительно смешивающегося с водой растворителя, более предпочтительно - воды из композиции, обычно путем сублимации под высоким вакуумом, когда композиция находится в замороженном состоянии. Лиофилизация стабилизирует композицию и минимизирует окисление и другие процессы разрушения, обеспечивая длительное хранение композиции при температурах выше замерзания.

Употребляемые здесь термины "лиофилизированная композиция", "лиофилизированная лепешка" или "лиофилизат" означают твердый остаток или лепешку, получаемую или остающуюся после определенной выше процедуры лиофилизации. В некоторых вариантах осуществления, лиофилизированная композиция или лиофилизат содержит менее 10% влаги, предпочтительно менее 5%, более предпочтительно менее 2%, еще более предпочтительно менее 1%. Конечная влажность лиофилизированной композиции может быть измерена способом Karl Fisher или другими методами.

Как правило, лиофилизацию выполняют в лиофилизационном оборудовании (лиофилизаторе), включающем сушильный шкаф с регулированием температуры, конденсатор для сбора воды и вакуумную систему для снижения давления в сушильном шкафу.

Процесс лиофилизации обычно включает два этапа: этап замораживания и этап первичной сушки или сублимации и может необязательно включать этап вторичной сушки. Процесс лиофилизации может также включать стадию предварительной обработки, выполняемую перед стадией замораживания и стадией отжига, выполняемой перед стадией сушки.

Употребляемый здесь термин "предварительная обработка" включает любой способ обработки композиции или раствора перед замораживанием. Это может включать, например, концентрацию раствора, пересмотр композиции (т.е. добавление компонентов для повышения стабильности и/или улучшения обработки), или предварительное охлаждение раствора.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления композиция или раствор предварительно охлаждены до температуры от 10°C до -10°C, предпочтительно, от 0°C до -10°C в течение времени от 10 секунд до 1 часа, предпочтительно, от 1 минуты до 30 минут.

Для приготовления раскрытых ресуспендируемых композиций бис(тиогидразид амид) и фармацевтически приемлемый наполнитель растворяют или суспендируют в подходящем растворителе, предпочтительно бис(тио-гидразид амид) и фармацевтически приемлемый наполнитель растворяют в подходящем растворителе с образованием раствора. Как правило, растворитель - это водный растворитель, и он может необязательно включать другие ингредиенты, такие как буферы, фармацевтически приемлемые соли или другие фармацевтически приемлемые ингредиенты, растворенные в нем. Как правило, растворитель - стерилизованная вода без других ингредиентов. В альтернативном варианте растворитель - это неводный растворитель, такой как спирт, например, метанол, этанол, трет-бутиловый спирт или водная/спиртовая смесь, диметилсульфоксид (DMSO), тетрагидрофуран (THF) или диметилформамид (DMF).

Первая стадия раскрытого процесса лиофилизации, после любых этапов предварительной подготовки, является замораживанием. На этапе замораживания раствор замораживается при температуре ниже температуры стеклования бис(тио-гидразид амида) с образованием замороженного концентрата.

Температура стеклования (Tg), как определено здесь, - это температура, при которой соединение меняет состояние от стекловидного твердого состояния до вязкой жидкости. Например, при температуре ниже Tg материалы обычно являются твердыми или стекловидными, а выше Tg - резинообразными или похожими на кожу. Стеклование не всегда является острым переходом и в некоторых случаях может быть постепенным переходом. Для бис(тио-гидразид амида) Структурной формулы (II) Tg равняется -44,7°C.

По мере замерзания раствора концентрация соединения и наполнителя в растворе увеличивается, Tg' является температурой стеклования при максимальной концентрации лекарственного средства и наполнителя в растворе.

В результате замораживания получают "замороженный концентрат" высококонцентрированной композиции или смеси, состоящей из соединения согласно настоящему изобретению и наполнителя или наполнителей, находящихся в промежутках между кристаллами льда.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления на этапе замораживания раствор замораживают при температуре от -44,7°C до -80°C, предпочтительно от -44,7°C до -60°C, предпочтительно от -44,7°C до -50°C, в течение времени от 10 минут до 10 часов, предпочтительно от 30 минут до 3 часов, более предпочтительно от 30 минут до 2 часов.

В следующем этапе раскрытой процедуры лиофилизации "замороженный концентрат" необязательно отжигают. Употребляемые здесь термины "отожженный" или "отжиг" означают процесс поддержания температуры замороженного концентрата на постоянном уровне в течение времени, необходимого для кристаллизации кристаллического объемного наполнителя. Как правило, замороженный концентрат отжигают при температуре между точкой плавления замороженного раствора, включающего замороженный концентрат, и Tg соединения согласно настоящему изобретению. Точка плавления замороженного раствора, включающего замороженный концентрат, здесь означает температуру, при которой замороженный раствор, включающий бис(тио-гидразид амид) и инертный наполнитель, переходит из замороженного состояния в жидкое состояние или начинает таять. Обычно эта температура составляет приблизительно 0°C, но может меняться в зависимости от концентрации раствора. Когда замороженный концентрат согласно настоящему изобретению отожжен, кристаллический объемный наполнитель образует кристаллическую структуру, независимую от соединения настоящего изобретения.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления этап отжига выполняют один раз. В некотором более предпочтительном варианте осуществления этап отжига выполняют несколько раз, например дважды, трижды, пять раз или десять раз. Как правило, этап отжига выполняют дважды.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления на этапе отжига замороженный концентрат отжигают при температуре от 0°C до -44,7°C, предпочтительно от 0°C до -40°C и предпочтительно от 0°C до -30°C в течение времени от 10 минут до 10 часов, предпочтительно от 2 часов до 6 часов, более предпочтительно от 3 часов до 5 часов.

Употребляемый здесь термин "отожженная композиция" означает любую композицию, отожженную как определено выше.

На следующем этапе раскрытой процедуры лиофилизации отожженная композиция может быть заморожена до температуры ниже Tg бис(тио-гидразид амида). На этом этапе замораживания раствор замораживают при температуре от -44,7°C до -80°C, предпочтительно от -44,7°C до -60°C, предпочтительно от -44,7°C до -50°C в течение времени от 10 минут до 10 часов, предпочтительно от 30 минут до 3 часов, более предпочтительно от 30 минут до 1,5 часов.

Термин "высушивание" охватывает здесь любой способ удаления воды или растворителя из замороженного концентрата или отожженной композиции при поддержании застеклованного состояния замороженного концентрата или отожженной композиции.

Первичный этап высушивания включает сублимацию водного раствора или компонентов растворителя под вакуумом при температурах, достаточно низких для предотвращения коллапса замороженного концентрата. В некоторых особых вариантах осуществления водные компоненты или компоненты растворителя удаляют сублимацией во время первичной сушки. Температура на этапе сушки должна быть достаточно высокой, чтобы обеспечить достаточную скорость сублимации жидких компонентов, но все же достаточно низкой, чтобы все компоненты замороженного концентрата остались замороженными. Так как сублимация обеспечивает значительное охлаждение продукта, температуры для этапа сушки обычно намного выше, чем для этапа замораживания.

На этапе первичной сушки замороженный концентрат или отожженную композицию высушивают путем сублимации при температуре от 20°C до -20°C, предпочтительно от 10°C до -10°C, предпочтительно от 10°C до 0°C, дополнительные значения температуры сублимации включают величины от 0°C до -30°C, предпочтительно от 0°C до -25°C. Обычно сублимацию проводят в условиях вакуума при давлении от 200 мТорр до 20 мТорр, предпочтительно от 200 мТорр до 100 мТорр, более предпочтительно от 180 мТорр до 130 мТорр.

Сублимацию выполняют в течение времени между 5 часами и 40 часами, предпочтительно между 10 часами и 30 часами, более предпочтительно между 20 часами и 30 часами, дополнительно сублимацию выполняют в течение времени между 10 часами и 80 часами, предпочтительно между 30 часами и 60 часами.

После удаления ледяных кристаллов путем сублимации остающийся замороженный концентрат или отожженная композиция все еще могут содержать связанную воду / растворитель, которые могут быть удалены медленным нагреванием, которое необязательно проводят в условиях вакуума, с получениям лиофилизированной лепешки. Это - заключительная часть цикла лиофилизации, где остаточную влажность снижают до уровней, которые более не поддерживают биологический рост и химические реакции. Этот процесс - вторичное высушивание. Снижение влажности во время вторичного высушивания достигают путем повышения температуры до температуры окружающей среды или выше.

На этапе вторичной сушки замороженный концентрат или отожженную композицию высушивают путем десорбции при температуре от 20°C до 80°C, предпочтительно от 30°C до 60°C, предпочтительно от 40°C до 50°C, дополнительные значения температуры десорбции включают величины от 10°C до 80°C, предпочтительно от 10°C до 30°C. Обычно десорбцию проводят в условиях вакуума при давлении от 200 мТорр до 20 мТорр, предпочтительно от 200 мТорр до 100 мТорр, более предпочтительно от 180 мТорр до 130 мТорр.

В особом варианте осуществления десорбцию проводят в течение времени между 10 минутами и 10 часами, предпочтительно между 30 минутами и 5 часами, более предпочтительно между 1 часом и 3 часами, дополнительное время десорбции включает интервалы 10-30 часов, предпочтительно 10-20 часов.

Лиофилизированную композицию или лиофилизат обычно сушат, пока его влажность не станет меньше 10%, предпочтительно меньше 5%, более предпочтительно меньше 2%, еще более предпочтительно меньше 1%. Конечная влажность лиофилизированной композиции может быть измерена способом Kari Fisher или другими методами.

Типичный цикл лиофилизации, используемый в соответствии с настоящим изобретением, предоставлен ниже. Циклы могут изменяться в зависимости от имеющегося оборудования и средств известным из уровня техники образом.

В одном варианте осуществления лиофилизированную композицию готовят в соответствии со следующей процедурой. Температуру камеры необязательно уменьшают до значения между 10°C и -10°C и поддерживают в течение времени между 5 минутами и 5 часами перед замораживанием. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -80°C и поддерживают в течение времени от 10 минут до 10 часов. Затем температуру повышают до величины между 0°C и -44,7°C и поддерживают в течение 10 минут - 10 часов. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -80°C и поддерживают в течение времени от 10 минут до 10 часов. Затем температуру необязательно повышают до величины между 0°C и -44,7°C и поддерживают в течение 10 минут - 10 часов. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -80°C и поддерживают в течение времени от 10 минут до 10 часов. Потом давление в лиофилизационной камере уменьшают до 20-200 мТорр. После снижения давления в камере температуру линейно повышают до 20°C- -20°C и поддерживают в течение 4-40 часов. Затем температуру необязательно линейно повышают до величины между 20°C и 80°C и поддерживают в течение 10 минут - 10 часов. Конечная влажность лиофилизированного продукта предпочтительно составляет от менее чем приблизительно 10% до менее чем приблизительно 1%, обычно приблизительно 1%.

В дополнительном варианте осуществления лиофилизированную композицию готовят в соответствии со следующей процедурой. Температуру камеры необязательно уменьшают до величины от 10°C до 0°C и поддерживают в течение времени от 5 минут до 1 часа перед замораживанием. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -60°C и поддерживают в течение времени от 30 минут до 3 часов. Затем температуру повышают до величины между 0°C и -40°C и поддерживают в течение 2-6 часов. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -60°C и поддерживают в течение времени от 30 минут до 3 часов. Затем температуру необязательно повышают до величины между 0°C и -40°C и поддерживают в течение 2-6 часов. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -60°C и поддерживают в течение времени от 30 минут до 3 часов. Потом давление в лиофилизационной камере уменьшают до 100-200 мТорр. После снижения давления в камере температуру линейно повышают до 10°C- -10°C и поддерживают в течение 20-30 часов. Затем температуру необязательно линейно повышают до величины между 30°C и 60°С и поддерживают в течение 1-3 часов. Конечная влажность лиофилизированного продукта предпочтительно составляет от менее чем приблизительно 10% до менее чем приблизительно 1%, обычно приблизительно 1%.

В другом дополнительном варианте осуществления лиофилизированную композицию получают в соответствии со следующей процедурой. Температуру камеры необязательно уменьшают до -5°C и поддерживают в течение 15 минут. Затем температуру камеры уменьшают до -48°C и поддерживают в течение приблизительно 1 часа. Потом температуру повышают до -20°C и поддерживают в течение приблизительно 4 часов. Затем температуру камеры уменьшают до -48°C и поддерживают в течение приблизительно 1 часа. Затем температуру необязательно повышают до -20°C и поддерживают в течение приблизительно 3 часов. Затем температуру камеры уменьшают до -48°C и поддерживают в течение приблизительно 1 часа. Потом давление в лиофилизационной камере уменьшают до 100-200 мТорр. После снижения давления в камере температура линейно повышается до +5°C и поддерживается в течение приблизительно 25 часов. Затем температуру необязательно линейно повышают до +45°C и поддерживают в течение 3 часов. Конечная влажность лиофилизированного продукта предпочтительно составляет менее чем приблизительно 2% и обычно около 1%.

В еще одном дополнительном варианте осуществления лиофилизированную композицию получают в соответствии со следующей процедурой. Температуру камеры необязательно снижают до значения от 10°C до 0°C и поддерживают в течение времени от 5 минут до 1 часа. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -60°C и температуру поддерживают в течение времени от 30 минут до 3 часов. Потом давление в лиофилизационной камере уменьшают до 100 мТорр-200 мТорр. После снижения давления в камере температуру линейно повышают до 0°C--30°C и поддерживают в течение 30-60 часов. Затем температуру необязательно линейно повышают до величины между 10°C и 30°C и поддерживают в течение 10-30 часов. Конечная влажность лиофилизированного продукта предпочтительно составляет от менее чем приблизительно 10% до менее чем приблизительно 1%, обычно приблизительно 1%.

Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, включающая лиофилизированный, ресуспендированный бис(тио-гидразид амид), раскрытый здесь, и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

Для описанных здесь бис(тио-гидразид амидов) Структурной формулы (I)-(V), М⁺ является фармацевтически приемлемым моновалентным катионом. М²⁺ является фармацевтически приемлемым двухвалентным катионом. "Фармацевтически приемлемый" означает, что катион является подходящим для введения пациенту. Примеры М⁺ или М²⁺ включают Li⁺, Na⁺, K⁺, Mg²⁺, Са²⁺, Zn²⁺ и NR₄ ⁺, где каждый R независимо представляет собой водород, замещенную или незамещенную алифатическую группу (например, гидроксиалкильную группу, аминоалкильную группу или аммонийалкильную группу) или замещенную или незамещенную арильную группу, или две R группы, взятые вместе, образуют замещенное или незамещенное неароматическое гетероциклическое кольцо, необязательно слитое с ароматическим кольцом. Предпочтительно, фармацевтически приемлемый катион является Li⁺, Na⁺, K⁺, NH₃(C₂H₅OH)⁺, N(СН₃)₃(C₂H₅OH)⁺, аргинином или лизином. Более предпочтительно, фармацевтически приемлемый катион является Na⁺ или К⁺, Na⁺ еще более предпочтен.

В Структурной формуле (I) Z предпочтительно является -О. Более предпочтительно, Z является -О; R₁ и R₂ одинаковы; и R₃ и R₄ одинаковы.

В одном варианте осуществления Y в Структурной формуле (I) -ковалентная связь, -C(R₅R₆)-, -(CH₂CH₂)-, транс-(СН=СН)-, цис-(СН=СН)- или -(СС)- группа, предпочтительно -C(R₅R₆)-. R₁-R₄ - такие, как описано выше для Структурной формулы (I). R₅ и R₆ - каждый независимо представляет собой -Н, алифатическую или замещенную алифатическую группу, или R₅ - -Н, и R₆ -замещенная или незамещенная арильная группа, или R₅ и R₆ вместе являются С2-С6 замещенной или незамещенной алкиленовой группой. Фармацевтически приемлемый катион является таким, как описан выше.

В одном варианте осуществления бис(тио-гидразид амиды), описанные здесь, представлены Структурной формулой (III):

.

R₁-R₆ и фармацевтически приемлемый катион описаны выше для Структурной формулы (I).

В другом варианте осуществления бис(тио-гидразид амид) представлен Структурной формулой (III), где R₁ и R₂ каждый является замещенной или незамещенной арильной группой, предпочтительно замещенной или незамещенной фенильной группой; R₃ и R₄ - каждый замещенная или незамещенная алифатическая группа, предпочтительно алкильная группа, более предпочтительно, метил или этил; и R₅ и R₆ описаны выше, но R₅ является предпочтительно -Н, a R₆ - предпочтительно -Н, алифатическая или замещенная алифатическая группа.

Кроме того, R₁ и R₂ - каждый является замещенной или незамещенной арильной группой; R₃ и R₄ - каждый является замещенной или незамещенной алифатической группой; R₅ является -Н; и R₆ является -Н, алифатической или замещенной алифатической группой. Предпочтительно, R₁ и R₂ - каждый является замещенной или незамещенной арильной группой; каждый из R₃ и R₄ является алкильной группой; и R₅ является -Н; и R₆ является -Н или метилом. Еще более предпочтительно, каждый из R₁ и R₂ является замещенной или незамещенной фенильной группой; каждый из R₃ и R₄ является метилом или этилом; и R₅ является -Н; и R₆ является -Н или метилом. Подходящие заместители для арильной группы, представленной R₁ и R₂, и алифатической группы, представленной R₃, R₄ и R₆, описаны ниже для арильных и алифатических групп.

В другом варианте осуществления бис(тио-гидразид амид) представлен Структурной формулой (III), где каждый из R₁ и R₂ является замещенной или незамещенной алифатической группой, предпочтительно С3-С8 циклоалкильной группой, необязательно замещенной, по меньше мере, одной алкильной группой, более предпочтительно, циклопропилом или 1-метил циклопропилом; и R₃ и R₄ описаны выше для Структурной формулы (I), предпочтительно оба являются замещенной или незамещенной алкильной группой; и R₅ и R₆ описаны выше, но R₅ является предпочтительно -Н, a R₆ - предпочтительно -Н, алифатическая или замещенная алифатическая группа, более предпочтительно - -Н или метил.

Кроме того, бис(тио-гидразид амид) представлен Структурной формулой (III), где R₁ и R₂ каждый является замещенной или незамещенной алифатической группой; и R₃ и R₄ описаны выше для Структурной формулы (I), предпочтительно оба являются замещенной или незамещенной алкильной группой; и R₅ - это -Н и R₆ - это -Н или необязательно замещенная алифатическая группа. Предпочтительно, R₁ и R₂ оба являются С3-С8 циклоалкильной группой, необязательно замещенной, по меньшей мере, одной алкильной группой; оба, R₃ и R₄, описаны выше для Структурной формулы (I), предпочтительно оба являются алкильной группой; и R₅ - это -Н и R₆ - это -Н или алифатическая или замещенная алифатическая группа. Более предпочтительно, R₁ и R₂ оба являются С3-С8 циклоалкильной группой, необязательно замещенной, по меньшей мере, одной алкильной группой; оба, R₃ и R₄, являются алкильной группой; и R₅ является -Н; и R₆ является -Н или метилом. Еще более предпочтительно, R₁ и R₂ оба являются циклопропилом или 1-метилциклопропилом; R₃ и R₄ оба являются алкильной группой, предпочтительно метилом или этилом; и R₅ является -Н; и R₆ является -Н или метилом.

Далее приведены конкретные примеры дисолей бис(тио-гидразид амида), представленных Структурной формулой (III): R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ - -Н, a R₆ - этил; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются фенилом; a R₅ и R₆ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 2-тиенилом; R₃ и R₄ оба являются фенилом; a R₅ и R₆ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 4-цианофенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н, и R₆ является бензилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ - -Н, a R₆ - этил; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются этилом; R₅ - -Н, a R₆ - n-бутил; R₁ и R₂ оба являются 2,5-диметоксифенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ - -Н, a R₆ - изо-пропил; R₁ и R₂ оба являются 3-нитрофенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются 4-хлорфенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ - Н, и R₆ является 3-тиенилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; a R₅ и R₆ вместе являются пропиленом; R₁ и R₂ оба являются 2,3-диметоксифенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются 2-хлор-5-метоксифенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются 2,5-дифторфенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются 2,5-дихлорфенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются 2,6-диметоксифенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются 2,5-диметилфенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются 2,5-диметоксифенилом; R₃ и R₄ оба являются этилом; R₅ - -Н, R₆ является метилом, а R₁ и R₂ оба являются 2,5-диэтоксифенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются циклопропилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются циклопропилом; R₃ и R₄ оба являются этилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются циклопропилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является метилом; R₆ является -Н; R₁ и R₂ оба являются 1-метилциклопропилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются 1-метилциклопропилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является метилом, и R₆ является -Н; R₁ и R₂ оба являются 1-метилциклопропилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ - этил, a R₆ - -Н; R₁ и R₂ оба являются 1-метилциклопропилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ - n-пропил, a R₆ - -Н; R₁ и R₂ оба являются 1-метилциклопропилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ и R₆ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 1-метилциклопропилом; R₃ и R₄ оба являются этилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются 1-метилциклопропилом; R₃ является метилом, а R₄ - этил; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются 2-метилциклопропилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются 2-фенилциклопропилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются 1-фенилциклопропилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются циклобутилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются циклопентилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются циклогексилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются циклогексилом; R₃ и R₄ оба являются фенилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются метилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются метилом; R₃ и R₄ оба являются t-бутилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются метилом; R₃ и R₄ оба являются фенилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются t-бутилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ являются этилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ и R₆ оба являются -Н; R₁ и R₂ оба являются n-пропилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ и R₆ оба являются -Н. В этих примерах фармацевтически приемлемый катион, представленный М⁺ и М²⁺, - такой как описан для Структурной формулы (I), предпочтительно Li⁺, Na⁺, K⁺, NH₃(C₂H₅OH)⁺ или N(CH₃)₃(C₂H₅OH)⁺ более предпочтительно Na⁺ или K⁺ еще более предпочтительно Na⁺.

Для многих дисолей бис(тио-гидразид амида), представленных Структурной формулой (III), R₅ и R₆ оба являются -Н. Например: R₁ и R₂ оба являются фенилом; а R₃ и R₄ оба являются о-СН₃-фенилом; R₁ и R₂ оба являются о-СН₃С(O)O-фенилом; а R₃ и R₄ оба являются фенилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; а R₃ и R₄ оба являются этилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; а R₃ и R₄ оба являются n-пропилом; R₁ и R₂ оба являются р-цианофенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются р-нитрофенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 2,5-диметоксифенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; а R₃ и R₄ оба являются n-бутилом; R₁ и R₂ оба являются р-хлорфенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 3-нитрофенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 3-цианофенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 3-фторфенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 2-фуранилом; а R₃ и R₄ оба являются фенилом; R₁ и R₂ оба являются 2-метоксифенилом; a R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 3-метоксифенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 2,3-диметоксифенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 2-метокси-5-хлорфенилом; а R₃ и R₄ оба являются этилом; R₁ и R₂ оба являются 2,5-дифторфенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 2,5-дихлорфенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 2,5-диметилфенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 2-метокси-5-хлорфенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 3,6-диметоксифенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; а R₃ и R₄ оба являются 2-этилфенилом; R₁ и R₂ оба являются 2-метил-5-пиридилом; a R₃ и R₄ оба являются метилом; или R₁ является фенилом; R₂ является 2,5-диметоксифенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются метилом; а R₃ и R₄ оба являются р-CF₃-фенилом; R₁ и R₂ оба являются метилом; а R₃ и R₄ оба являются о-СН₃-фенилом; R₁ и R₂ оба являются (-СН₂)₃СООН; R₃ и R₄ оба являются фенилом; R₁ и R₂ оба представлены следующей структурной формулой:

,

R₃ и R₄ оба являются фенилом; R₁ и R₂ оба являются n-бутилом; а R₃ и R₄ оба являются фенилом; R₁ и R₂ оба являются n-пентилом; R₃ и R₄ оба являются фенилом; R₁ и R₂ оба являются метилом; а R₃ и R₄ оба являются 2-пиридилом; R₁ и R₂ оба являются циклогексилом; а R₃ и R₄ оба являются фенилом; R₁ и R₂ оба являются метилом; а R₃ и R₄ оба являются 2-этилфенилом; R₁ и R₂ оба являются метилом; а R₃ и R₄ оба являются 2,6-дихлорфенилом; R₁-R₄ все являются метилом; R₁ и R₂ оба являются метилом; а R₃ и R₄ оба являются t-бутилом; R₁ и R₂ оба являются этилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются t-бутилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются циклопропилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются циклопропилом; а R₃ и R₄ оба являются этилом; R₁ и R₂ оба являются 1-метилциклопропилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 2-метилциклопропилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 1-фенилциклопропилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 2-фенилциклопропилом; a R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются циклобутилом; a R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются цикпопентилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом; R₁ является циклопропилом, R₂ является фенилом; а R₃ и R₄ оба являются метилом. В этих примерах фармацевтически приемлемый катион, представленный М⁺ и М²⁺, - такой как описан для Структурной формулы (I), предпочтительно Li⁺, Na⁺, К⁺, NH₃(C₂H₅OH)⁺ или N(СН₃)₃(C₂H₅OH)⁺, более предпочтительно Na⁺ или К⁺, еще более предпочтительно Na⁺.

Предпочтительные примеры дисолей бис(тио-гидразид амида) для использования в настоящем изобретении представлены следующими структурными формулами:

;

; и

.

2 М⁺ и М²⁺ описаны выше для Структурной формулы (I). Предпочтительно, фармацевтически приемлемый катион является 2 М⁺, где М⁺ является Li⁺, Na⁺, К⁺, NH₃(C₂H₅OH)⁺ или N(CH₃)₃(C₂H₅OH)⁺. Более предпочтительно, M⁺ является Na⁺ или K⁺. Еще более предпочтительно, М⁺ является Na⁺.

В Структурных формулах (I) и (III), R₁ и R₂ одинаковы или различны и/или R₃ и R₄ одинаковы или различны. Предпочтительно, R₁ и R₂ одинаковы, и R₃ и R₄ одинаковы.

Раскрытые дисоли бис(тио-гидразид амида) могут иметь таутомерные формы. В качестве примера таутомерные формы соединений, представленных, например, Структурной формулой (I), где Y является -СН₂-, приведены ниже:

;

; и

.

Следует понимать, что если одна таутомерная форма раскрытого соединения изображена структурно, имеются в виду также и другие таутомерные формы.

"Неразветвленная гидрокарбильная группа" является алкиленовой группой, т.е. -(СН₂)_у-, одной или несколькими (предпочтительно одной) внутренними метиленовыми группами, необязательно замененными соединительной группой, у - положительное целое число (например, от 1 до 10), предпочтительно от 1 до 6 и более предпочтительно от 1 до 2. "Соединительная группа" означает функциональную группу, которая замещает метилен в неразветвленном гидрокарбиле. Примеры подходящих соединительных групп связи включают кетон (-С(О)-), алкен, алкин, фенилен, эфир (-O-), тиоэфир (-S-) или амин (-N(R^a)-), где R^a определен ниже. Предпочтительная соединительная группа - -С(R₅R₆)-, где R₅ и R₆ определены выше. Подходящие заместители для алкиленовой и гидрокарбильной группы - те, которые по существу не влияют на противораковое действие раскрытых соединений. R₅ и R₆ - предпочтенные заместители для алкиленовой или гидрокарбильной группы, представленной Y.

Алифатическая группа - неразветвленный, разветвленный или циклический неароматический углеводород, который полностью насыщен или который содержит одну или несколько единиц ненасыщенности. Как правило, неразветвленная или разветвленная алифатический группа содержит от 1 до приблизительно 20 атомов углерода, предпочтительно от 1 до приблизительно 10, а циклическая алифатическая группа содержит от 3 до приблизительно 10 атомов углерода, предпочтительно от 3 до приблизительно 8. Алифатическая группа - предпочтительно неразветвленная или разветвленная алкильная группа, например, метил, этил, n-пропил, изо-пропил, n-бутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, гексил, пентил или октил, или циклоалкильная группа с 3 - приблизительно 8 атомами углерода. С1-С8 неразветвленная или разветвленная алкильная группа или С3-С8 циклическая алкильная группа также называется группой "низшего алкила".

Термин "ароматическая группа" может использоваться взаимозаменяемо с термином "арил", "арильное кольцо", "ароматическое кольцо", "арильная группа" и "ароматическая группа." Ароматические группы включают карбоциклические ароматические группы, такие как фенил, нафтил и антрацил, и гетероарильные группы, такие как имидазолил, тиенил, фуранил, пиридил, пиримидил, пиранил, пиразолил, пирроил, пиразинил, тиазол, оксазолил и тетразол. Термин "гетероарильная группа" может использоваться взаимозаменяемо с терминами "гетероарил", "гетероарильное кольцо," "гетероароматическое кольцо" и "гетероароматическая группа." Гетероарильные группы - это ароматические группы, включающие один или несколько гетероатомов, таких как сера, кислород и азот, в кольцевой структуре. Предпочтительно, гетероарильные группы содержат от одного до четырех гетероатомов.

Ароматические группы также включают сплавленные полициклические ароматические кольцевые системы, в которых карбоциклическое ароматическое кольцо или гетероарильное кольцо сплавлены с одним или несколькими другими гетероарильными кольцами. Примеры включают бензотиенил, бензофуранил, индолил, хинолинил, бензотиазол, бензооксазол, бензимидазол, хинолинил, изохинолинил и изоиндолил.

Термин "арилен" относится к арильной группе, которая связана с остатком от молекулы двумя другими связями. В качестве примера ниже приведена структура 1,4-фениленовой группы:

Заместители ариленовой группы такие же, как описаны ниже для арильной группы.

Неароматические гетероциклические кольца - это неароматические кольца, которые включают один или несколько гетероатомов, таких как азот, кислород или сера в кольце. Кольцо может быть пяти-, шести-, семи- или восьмичленным. Предпочтительно, гетероциклические группы включают от одного приблизительно до четырех гетероатомов. Примеры включают тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенил, морфолино, тиоморфолино, пирролидинил, пиперазинил, пиперидинил и тиазолидинил.

Подходящие заместители на алифатической группе (включая апкиленовую группу), неароматической гетероциклической группе, бензиловой или арильной группе (карбоциклической и гетероарильной) - это те, которые по существу не влияют на противораковое действие раскрытых соединений. Заместитель по существу влияет на противораковое действие, если оно снижается более чем приблизительно на 50% у соединения с заместителем по сравнению с соединением без заместителя. Примеры подходящих заместителей включают -R^a, -ОН, -Br, -Cl, -I, -F, -OR^a, -O-COR^a, -COR^a, -CN, -NO², -COOH, -SO₃H, -NH₂, -NHR^a, -N(R^aR^b), -COOR^a, -CHO, -CONH₂, -CONHR^a, -CON(R^aR^b), -NHCOR^a, -NR^cCOR^a, -NHCONH₂, -NHCONR^aH, -NHCON(R^aR^b), -NR^cCONH₂, -NR^cCONR^aH, -NR^cCON(R^aR^b), -C(=NH)-NH₂, -C(=NH)-NHR^a, -С(=NH)-N(R^aR^b), -C(=NR^c)-NH₂, -C(=NR^c)-NHR^a, -C(=NR^c)-N(R^aR^b), -NH-C(=NH)-NH₂, -NH-C(=NH)-NHR^a, -NH-C(=NH)-N(R^aR^b), -NH-C(=NR^c)-NH₂, -NH-C(=NR^c)-NHR^a, -NH-C(=NR^c)-N(R^aR^b), NR^dH-С(=NH)-NH₂, -NR^d-C(=NH)-NHR^a, -NR^d-C(=NH)-N(R^aR^b), -NR^d-C(=NR^c)-NH₂, -NR^d-C(=NR^c)-NHR^a, -NR^d-C(-NR^c)-N(R^aR^b), -NHNH₂, -NHNHR^a, -NH R^aR^b, -SO₂NH₂, -SO₂NHR^a, -SO₂NR^aR^b, -CH=CHR^a, -CH=CR^aR^b, -CR^c=C R^aR^b, -CR^c=CHR^a, -CR^c=CR^aR^b, -CCR^a, -SH, -SR^a, -S(O)R^a, -S(O)₂R^a.

Каждый независимо из R^a-R^d является алкильной группой, ароматической фуппой, неароматической гетероциклической группой или -N(R^aR^b), взятые вместе, образуют замещенную или незамещенную неароматическую гетероциклическую группу. Алкильная, ароматическая и неароматическая гетероциклическая группа, представленная R^a-R^d и неароматическая гетероциклическая группа, представленная -N(R^aR^b), каждая необязательно и независимо замещена одной или несколькими группами, представленными R^#.

R^# - это R⁺, -OR⁺ -О(галоалкил), -SR⁺ -NO₂, -CN, -NCS, -N(R⁺)₂, -NHCO₂R⁺, -NHC(O)R⁺, -NHNHC(O)R⁺, -NHC(O)N(R⁺)₂, -NHNHC(O)N(R⁺)₂, -NHNHCO₂R⁺, -C(O)C(O)R⁺, -C(O)CH₂C(O)R⁺, -CO₂R⁺, -C(O)R⁺, -C(O)N(R⁺)₂, -OC(O)R⁺, -OC(O)N(R⁺)₂, -S(O)₂R⁺, -SO₂N(R⁺)₂, -S(O)R⁺, -NHSO₂N(R⁺)₂, -NHSO₂R⁺, -C(=S)N(R⁺)₂ или -C(=NH)-N(R⁺)₂.

R⁺ - это -Н, С1-С4 алкильная группа, моноциклическая гетероарильная группа, неароматическая гетероциклическая группа или фенильная группа, необязательно замещенная алкилом, галоалкилом, алкокси, галоалкокси, гало, -CN, -NO₂, амином, алкиламином или диалкиламином. Необязательно, группа -N(R⁺)₂ является неароматической гетероциклической группой, при условии, что неароматические гетероциклические группы, представленные R⁺ и -N(R⁺)₂, которые включают вторичный кольцевой амин, необязательно ацилированы или алкилированы.

Предпочтительные заместители для фенильной группы, включая фенильные группы, представленные R₁-R₄, включают С1-С4 алкил, С1-С4 алкокси, С1-С4 галоалкил, С1-С4 галоалкокси, фенил, бензил, пиридил, -ОН, -NH₂, -F, -Cl, -Br, -I, -NO₂ или -CN.

Предпочтительные заместители для циклоалкильной группы, включая циклоалкильные группы, представленные R₁ и R₂, являются алкильными группами, такими как этильная или метильная группа.

Подходящие фармацевтически приемлемые носители могут содержать инертные ингредиенты, которые не ингибируют биологическую активность раскрытых дисолей. Фармацевтически приемлемые носители должны быть биосовместимыми, т.е. нетоксичными, не вызывающими воспаление, неиммуногенными и не вызывающими других нежелательных реакций при введении пациенту. Могут использоваться стандартные способы составления фармацевтических композиций, такие как описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA. Вводимая композиция соединения будет отличаться в зависимости от выбранного пути введения (например, раствор, эмульсия, капсула). Подходящие фармацевтические носители для парентерального введения включают, например, стерилизованную воду, физиологический раствор, бактериостатический солевой раствор (солевой раствор, содержащий около 0,9% мг/мл бензилового спирта), фосфатный-буферный солевой раствор, раствор Хэнка, лактат Рингера и т.п. Методы инкапсулирования композиций (такие как с покрытием из твердого желатина или циклодекстринов) известны из уровня техники (Baker, et al, "Controlled Release of Biological Active Agents", John Wiley and Sons, 1986).

Другой вариант осуществления настоящего изобретения - способ лечения пациента с раковым заболеванием. Необязательно, способ изобретения может использоваться в случае рака со множественной резистентностью к лекарственным средствам, как описано ниже. Способ включает этап введения эффективного количества описанной здесь ресуспендированной, лиофилизированной дисоли бис(тио-гидразид амида). Предпочтительно, один или несколько дополнительных противораковых препаратов вводят совместно с ресуспендированной, лиофилизированной дисолью бис(тио-гидразид амида). Примеры противораковых препаратов описаны ниже. Предпочтительно, совместно вводимое противораковое лекарственное средство является агентом, стабилизирующим микротрубки, такие как таксол или аналог таксола.

"Пациент" является млекопитающим, предпочтительно человеком, но также может быть животным, нуждающимся в ветеринарном лечении, например животным-компаньоном (например, собака, кошка и т.п.), сельскохозяйственным животным (например, корова, овца, свинья, лошадь и т.п.) и лабораторным животным (например, крыса, мышь, морская свинка и т.п.).

Как отмечено выше, один вариант осуществления настоящего изобретения связан с лечением пациентов с раковым заболеванием. "Лечение пациента с раковым заболеванием" включает достижение, частично или по существу, одного из следующего: задержка роста или распространения рака, сокращение степени рака (например, уменьшение размера опухоли или сокращение количества пораженных участков), ингибирование темпов роста рака и ослабление или устранение клинических симптомов или индикаторов, связанных с раком (таких как ткань или серологические компоненты).

Виды рака, лечение или профилактика которых может проводиться в соответствии со способами настоящего изобретения, включают (без ограничения) саркомы и карциномы людей, например фибросаркома, миксосаркома, липосаркома, хондросаркома, остеогенная саркома, хордома, ангиосаркома, эндотелиосаркома, лимфангиосаркома, лимфангиоэндотелиосаркома, синовиома, мезотелиома, опухоль Юинга, лейомиосаркома, рабдомиосаркома, рак толстой кишки, панкреатический рак, рак молочной железы, овариальный рак, рак простаты, плоскоклеточный рак, базально-клеточный рак, аденокарцинома, рак потовой железы, рак сальной железы, папиллярный рак, папиллярные аденокарциномы, цистаденокарцинома, медуллярная карцинома, бронхогенный рак, почечно-клеточный рак, гепатома, рак желчного протока, хориокарцинома, семинома, эмбриональный рак, опухоль Вильмса, цервикальный рак, тестикулярная опухоль, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, рак мочевого пузыря, эпителиальный рак, глиома, астроцитома, медуллобластома, краниофарингиома, эпендимома, пинеалома, гемангиобластома, акустическая неврома, олигодендроглиома, менингиома, меланома, нейробластома, ретинобластома; лейкозы, например острый лимфоцитарный лейкоз и острый миелоцитарный лейкоз (миелобластовая, промиелоцит, миеломоноцитарная, моноцитарная и эритролейкемия); хронический лейкоз (хронический миелоцитарный (гранулоцитарный) лейкоз и хронический лимфоцитарный лейкоз); и истинная полицитемия, лимфома (болезнь Ходжкина и неходжкинская лимфома), множественная миелома, макроглобулинемия Вальденстрема и заболевание тяжелой цепи.

Другие примеры лейкозов включают острые и/или хронические лейкозы, например лимфоцитарный лейкоз (например, как иллюстрируется р388 (мышиной) линией клеток), крупнозернистый лимфоцитарный лейкоз и лимфобластный лейкоз; Т-клеточные лейкозы, например Т-клеточная лейкемия (например, как иллюстрируется СЕМ, Jurkat, и HSB-2 (острая), YAC-1 (мышиные) клеточными линиями), Т-лимфоцитарная лейкемия и Т-лимфобластная лейкемия; В-клеточная лейкемия (например, как иллюстрируется SB (острая) клеточными линиями) и В-лимфоцитарная лейкемия; смешанные клеточные лейкемии, например В- и Т-клеточная лейкемия и В- и Т-лимфоцитарная лейкемия; миелоидные лейкемии, например гранулоцитарный лейкоз, миелоцитарный лейкоз (например, как иллюстрируется HL-60 (промиелоцит) линией клеток), миелогенный лейкоз (например, как иллюстрируется К562 (хронический) линией клеток); нейтрофильный лейкоз; эозинофильный лейкоз; моноцитарный лейкоз (например, как иллюстрируется ТНР-1 (острый) линией клеток); миеломоноцитарный лейкоз; миелоидная лейкемия типа Наегели; и нелимфоцитарный лейкоз. Другие примеры лейкозов описаны в Главе 60 The Chemotherapy Sourcebook, Michael С. Perry Ed., Williams & Williams (1992) и Разделе 36 Holland Frie Cancer Medicine 5^th Ed., Bast et al. Eds., B.C.Decker Inc. (2000). В одном варианте осуществления раскрытый способ, как полагают, особенно эффективен для лечения пациента с несолидными опухолями, такими как множественная миелома. В другом варианте осуществления раскрытый метод, как полагают, особенно эффективен против Т-лейкемии (например, как иллюстрируется клеточными линиями Jurkat и СЕМ); В-лейкемии (например, как иллюстрируется клеточной линией SB); промиелоцитов (например, как иллюстрируется клеточными линиями HL-60); саркомы матки (например, как иллюстрируется клеточными линиями MES-SA); моноцитарного лейкоза (например, как иллюстрируется ТНР-1 (острый) линией клеток); и лимфомы (например, как иллюстрируется клеточной линией U937); наиболее предпочтительно, этот вариант осуществления способа использует динатриевую соль Соединения (1).

Раскрытый способ особенно эффективен при лечении пациентов, у которых рак стал резистивным к множеству лекарств. Рак, который первоначально реагировал на лекарственное средство против рака становится резистентным к лекарственному средству против рака, когда лекарственное средство против рака больше не является эффективным в лечении пациента с раковым заболеванием. Например, многие опухоли вначале реагируют на лечение противораковыми средствами, уменьшаясь в размере или даже переходя в стадию ремиссии, но затем только вырабатывают устойчивость к лекарственному средству. Устойчивые к лекарственным средствам опухоли характеризуются возобновлением их роста и/или повторным появлением после того, как они (как выглядело) переходили в стадию ремиссии, несмотря на введение увеличенных доз лекарственного средства против рака. Рак, который выработал устойчивость к двум или больше препаратам против рака, называют раком с устойчивостью ко множеству лекарств. Например, для рака характерно становиться устойчивым к трем или большему числу средств против рака, часто к пяти или больше средствам против рака или даже к десяти или больше средствам против рака.

Термин "эффективное количество" и пути введения - такие, как описано ранее в патентной заявке США №11/157213.

Необязательно, раскрытые дисоли бис(тио-гидразид амида) могут совместно вводиться с другими средствами против рака, такими как адриамицин, дактиномицин, блеомицин, винбластин, цисплатин, ацивицин; акларубицин; акодазол гидрохлорид; акронин; адоцелезин; алдеслейкин; альтретамин; амбомицин; аметантрон ацетат; аминоглютетимид; амсакрин; анастрозол; антрамицин; аспарагиназа; асперлин; азацитидин; азетепа; азотомицин; батимастат; бензодепа; бикалютамид; бизантрин гидрохлорид; биснафид димесилат; бизелесин; блеомицин сульфат; брехинар натрий; бропиримин; бусульфан; кактиномицин; калюстерон; карацемид; карбетаймер; карбоплатин; кармустин; карубицин гидрохлорид; карзелесин; цедефингол; хлорамбуцил; циролемицин; кладрибин; криснатол мезилат; циклофосфамид; цитарабин; дакарбазин; даунорубицин гидрохлорид; децитабин; дексормаплатин; дезагуанин; дезагуанин мезилат; диазихон; доксорубицин; доксорубицин гидрохлорид; дролоксифен; дролоксифен цитрат; дромостанолон пропионат; дуазомицин; эдатрексат; эфлорнитин гидрохлорид; элсамитруцин; энлоплатин; энпромат; эпипропидин; эпирубицин гидрохлорид; эрбулозол; эзорубицин гидрохлорид; эстрамустин; эстрамустин фосфат натрий; этанидазол; этопозид; этопозид фосфат; этоприн; фадрозол гидрохлорид; фазарабин; фенретинид; флоксуридин; флударабин фосфат; фтороурацил; флуроцитабин; фосхидон; фостриецин натрий; гемцитабин; гемцитабин гидрохлорид; гидроксимочевина; идарубицин гидрохлорид; ифосфамид; илмофосин; интерлейкин II (включая рекомбинантный интерлейкин или rIL2), интерферон альфа-2а; интерферон альфа-2b; интерферон альфа-n1; интерферон альфа-n3; интерферон бета-Ia; интерферон гамма-Ib; ипроплатин; иринотекан гидрохлорид; ланреотид ацетат; летрозол; лейпролид ацетат; лиарозол гидрохлорид; лометрексол натрий; ломустин; лозоксантрон гидрохлорид; мазопрокол; мейтензин; мехлоретамин гидрохлорид; мегестрол ацетат; меленгестрол ацетат; мелфалан; меногарил; меркаптопурин; метотрексат; метотрексат натрий; метоприн; метуредепа; митиндомид; митокарцин; митокромин; митогиллин; митомалцин; митомицин; митоспер; митотан; митоксантрон гидрохлорид; микофенольная кислота; нокодазол; ногаламицин; ормаплатин; оксисуран; пегаспаргаза; пелиомицин; пентамустин; пепломицин сульфат; перфосфамид; пипоброман; пипосульфан; пироксантрон гидрохлорид; пликамицин; пломестан; порфимер натрий; порфиромицин; преднимустин; прокарбазин гидрохлорид; пуромицин; пуромицин гидрохлорид; пиразофурин; рибоприн; роглетимид; сафингол; сафингол гидрохлорид; семустин; симтразин; спарфосат натрий; спарсомицин; спирогерманий гидрохлорид; спиромустин; спироплатин; стрептонигрин; стрептозоцин; сулофенур; тализомицин; текогалан натрий; тегафур; телоксантрон гидрохлорид; темопорфин; тенипозид; тероксирон; тестолактон; тиамиприн; тиогуанин; тиотепа; тиазофурин; тирапазамин; торемифин цитрат; трестолон ацетат; трицирибин фосфат; триметрексат; триметрексат глюкуронат; трипторелин; тубулозол гидрохлорид; урацильная горчица; уредепа; вапреотид; вертепорфин; винбластин сульфат; винкристин сульфат; виндесин; виндесин сульфат; винепидин сульфат; винглицинат сульфат; винлеурозин сульфат; винорелбин тартрат; винрозидин сульфат; винзолидин сульфат; ворозол; зениплатин; зиностатин; зорубицин гидрохлорид.

Другие препараты против рака включают (без ограничения): 20-эпи-1,25 дигидроксивитамин D3; 5-этинилурацил; абиратерон; акларубицин; ацилфулвен; адеципенол; адоцелезин; алдеслейкин; антагонисты ALL-TK; альтретамин; амбамустин; амидокс; амифостин; аминолевулиновая кислота; амрубицин; амсакрин; анагрелид; анастрозол; андрографолид; ингибиторы ангиогенеза; антагонист D; антагонист G; антареликс; антидорсализирующий морфогенетический белок-1; антиандроген, карцинома простаты; антиэстроген; антинеопластон; антисмысловые олигонуклеотиды; афидиколин глицинат; модулятора гена апоптоза; регуляторы апоптоза; апуриновая кислота; apa-CDP-DL-PTBA; аргинин деаминаза; азулакрин; атаместан; атримустин; аксинастатин 1; аксинастатин 2; аксинастатин 3; азасетрон; азатоксин; азатирозин; производные баккатина III; баланол; батимастат; антагонисты BCR/ABL; бензохлорины; бензоилстауроспорин; производные бета лактама; бета-алетин; бетакламицин В; бетулиновая кислота; ингибитор bFGF; бикалютамид; бизантрин; бисазиридинспермин; биснафид; бистратен А; бизелесин; брефлат; бропиримин; будотитан; бутионин сульфоксимин; кальципотриол; калфостин С; производные камптотецина; канарипокс IL-2; капецитабин; карбоксамид-амино-триазол; карбоксиамидотриазол; CaRest M3; CARN 700; ингибитор, полученный из хряща; карзелесин; ингибиторы казеин киназы (ICOS); кастаноспермин цекропин В; цетрореликс; хлорине; хлорхиноксалин сульфонамид; цикапрост; цис-порфирин; кпадрибин; аналоги кломифена; клотримазол; коллисмицин А; коллисмицин В; комбретастатин А4; аналоги комбретастатина; конагенин; крамбесцидин 816; криснатол; криптофицин 8; производные криптофицина А; курацин А; циклопентантрахиноны; циклоплатам; ципемицин; цитарабин окфосфат; цитолитический фактор; цитостатин; дакликсимаб; децитабин; дегидродидемнин В; деслорелин; дексаметазон; дексифосфамид; дексразоксан дексверапамил; диазихон; дидемнин В; дидокс; диэтилнорспермин; дигидро-5-азацитидин; 9-диоксамин; дифенил спиромустин; докозанол; доласетрон; доксифлуридин; дролоксифен; дронабинол; дуокармицин SA; эбселен; экомустин; эделфосин; эдреколомаб; эфлорнитин; элемен; эмитефур; эпирубицин; эпристерид; аналог эстрамустина; агонисты эстрогена; антагонисты эстрогена; этанидазол; этопозид фосфат; экземестан; фадрозол; фазарабин; фенретинид; филграстим; финастерид; флавопиридол; флезеластин; флуастерон; флударабин; фтордауноруницин гидрохлорид; форфенимекс; форместан; фостриецин; фотемустин; гадолиний тексафирин; галлия нитрат; галоцитабин; ганиреликс; ингибиторы желатиназы; гемцитабин; ингибиторы глютатиона; гепсульфам; герегулин; гексаметилен бисацетамид; гиперицин; ибандроновая кислота; идарубицин; идоксифен; идрамантон; илмофосин; иломастат; имидазоакридоны; имихимод; иммуностимулирующие пептиды; ингибитор рецептора инсулиноподобного фактора роста 1; агонисты интерферона; интерфероны; интерлейкины; иобенгуан; йододоксорубицин; ипомеанол, 4-; ироплакт; ирсогландин; изобенгазол; изогомогаликондрин В; итасетрон; ясплакинолид; кахалалид F; ламелларин-N триацетат; ланреотид; лейнамицин; ленограстим; лентинан сульфат; лептолстатин; летрозол; лейкемия ингибирующий фактор; лейкоцитарный альфа интерферон; лейпролид+эстроген+прогестерон; лейпрорелин; левамизол; лиарозол; аналог линейного полиамина; липофильный дисахаридный пептид; липофильные соединения платины; лиссоклинамид 7; лобаплатин; ломбрицин; лометрексол; лонидамин; лозоксантрон; ловастатин; локсорибин; луртотекан; лутетий тексафирин; лизофиллин; лизирующие пептиды; майтанзин; манностатин А; маримастат; мазопрокол; маслин; ингибиторы матрилизина; матричные ингибиторы металлопротеиназы; меногарил; мербарон; метерелин; метиониназа; метоклопрамид; ингибитор MIF; мифепристон; милтефозин; миримостим; несогласованная двухцепочечная РНК; митогуазон; митолактол; аналоги митомицина; митонафид; фактор роста митотоксин фибробласта - сапорин; митоксантрон; мофаротен; молграмостим; моноклональное антитело, человеческий хорионический гонадотропин; монофосфорил липид А+клеточная стенка миобактерии sk; мопидамол; ингибитор гена резистентности к нескольким лекарственным средствам; терапия на основе суппрессора множественных опухолей 1; горчичный противораковый агент; микапероксид В; экстракт клеточных стенок микобактерий; мириапорон; N-ацетилдиналин; N-замещенные бензамиды; нафарелин; нагрестип; налоксон+пентазоцин; напавин; нафтерпин; нартограстим; недаплатин; неморубицин; неридроновая кислота; нейтральная эндопептидаза; нилутамид; низамицин; модуляторы оксида азота; нитроксидный антиоксидант; нитруллин; O6-бензилгуанин; октреотид; окиценон; олигонуклеотиды; онапристон; ондансетрон; ондансетрон; орацин; пероральный индуктор цитокина; ормаплатин; осатерон; оксалиплатин; оксавуномицин; палауамин; пальмитоилризоксин; памидроновая кислота; панакситриол; паномифен; парабактин; пазеллиптин; пегаспаргаза; пелдесин; пентосан полисульфат натрий; пентостатин; пентрозол; перфлуброн; перфосфамид; периллиловый спирт; феназиномицин; фенилацетат; ингибиторы фосфатазы; пицибанил; пилокарпин гидрохлорид; пирарубицин; пиритрексим; плацетин А; плацетин В; ингибитор активатора плазминогена; платиновые комплексы; соединения платины; платина-триаминовый комплекс; порфимер натрий; порфиромицин; преднизон; пропил бис-акридон; простагландин J2; ингибиторы протеазомы; иммуномодулятор на основе белка А; ингибитор протеинкиназы С; ингибиторы протеинкиназы С, микроводоросли; ингибиторы протеинтирозинфосфатазы; ингибиторы пурин нуклеозид фосфорилазы; пурпурины; пиразолоакридин; конъюгат пиридоксилированного гемоглобина и полиоксиэтилена; антагонисты raf; ралтитрексид; рамосетрон; ингибиторы ras фарнесил протеинтрансферазы; ингибиторы ras; ингибитор ras-GAP; ретеллиптин деметилированный; рений Re 186 этидронат; ризоксин; рибозимы; ретинамид RII; роглетимид; рогитукин; ромуртид; рохинимекс; рубигинон В1; рубоксил; сафингол; саинтопин; SarCNU; саркофитол А; сарграмостим; миметики Sdi 1; семустин; ингибитор старения 1; смысловые олигонуклеотиды; ингибиторы передачи сигналов; модуляторы передачи сигналов; одноцепочечный антиген-связывающий белок; сизофиран; собузоксан; натрия борокаптат; натрий фенилацетат; сольверол; соматомедин-связывающий белок; сонермин; спарфосовая кислота; спикамицин D; спиромустин; спленопентин; спонгистатин 1; скаламин; ингибитор стволовых клеток; ингибитор деления стволовых клеток; стипиамид; ингибиторы стромелизина; сульфинозин; суперактивный вазоактивный антагонист кишечного пептида; сурадиста; сурамин; свуейнсонин; синтетические гликозаминогликаны; таллимустин; тамоксифен метиодид; тауромустин; тазаротен; текогалан натрий; тегафур; теллурапирилиум; ингибиторы теломеразы; темопорфин; темозоломид; тенипозид; тетрахлордекаоксид; тетразомин; талибластин; тиокоралин; тромбопоэтин; миметик тромбопоэтина; тималфасин; агонист рецептора тимопоэтина; тимотринан; тиреостимулирующий гормон; олово этил этиопурпурин; тирапазамин; титаноцин бихлорид; топсентин; торемифен; фактор тотипотентных стволовых клеток; ингибиторы трансляции; третиноин; триацетилуридин; трицирибин; триметрексат; трипторелин; трописетрон; туростерид; ингибиторы тирозин киназы; тирфостины; ингибиторы UBC; убенимекс; ингибирующий фактор роста, производный мочеполового синуса; антагонисты рецептора урокиназы; вапреотид; вариолин В; векторная система, эроцитно-генная терапия; веларезол; верамин; вердинс; вертепорфин; винорелбин; винксалтин; витаксин; ворозол; занотерон; зениплатин; зиласкорб; и зиностатина стималамер. Предпочтительные дополнительные противораковые препараты - это 5-фторурацил и лейковорин.

Примеры терапевтических антител, которые могут использоваться, включают (без ограничения) HERCEPTIN® (трастузумаб) (Genentech, СА) - гуманизированное анти-НЕР2 моноклональное антитело для лечения пациентов с метастатическим раком молочной железы; REOPRO® (абциксимаб) (Centocor) - антигликопротеид рецептора IIb/IIIa на тромбоцитах для предотвращения образования сгустка; ZENAPAX® (даклизумаб) (Roche Pharmaceuticals, Switzerland) - иммуносупрессивное, гуманизированное анти-CD25 моноклональное антитело для профилактики острого отторжения почечного аллотрансплантата; PANOREX^тм- мышиный анти-17-IA поверхностный клеточный антиген антитела lgG2a (Glaxo Wellcome/Centocor); BEC2 - мышиное антиидиотипическое (эпитоп GD3) IgG антитело (ImClone System); IMC-C225 -химерное анти-EGFR IgG антитело (ImClone System); VITAXIN^ТМ - гуманизированное антитело интегрина анти-αVβ3 (Applied Molecular Evolution/Medlmmune); Campath 1H/LDP-03 - гуманизированное анти-CD52 антитело lgG1 (Leukosite); Smart M195 - гуманизированное IgG анти-CD33 антитело (Protein Design Lab/Kanebo); RITUXAN^тм - химерное анти-CD20 lgG1 антитело (IDEC Pharm/Genentech, Roche/Zettyaku); LYMPHOCIDE^тм - гуманизированное IgG анти-CD22 антитело (Immunomedics); LYMPHOCIDE^тм Y-90 (Immunomedics); Lymphoscan (ТС-99m-меченый; радиовизуализация; Immunomedics); Nuvion (против CD3; Protein Design Labs); CM3 гуманизированное анти-ICAM3 антитело (ICOS Pharm); IDEC-114 приматизированное анти-CD80 антитело (IDEC Pharm/Mitsubishi); ZEVALIN^тм - радиомеченное мышиное анти-CD20 антитело (IDEC/Schering AG); IDEC-131 - гуманизированное анти-CD40L антитело (IDEC/Eisai); IDEC-151 - приматизированное анти-CD4 антитело (IDEC); IDEC-152 - приматизированное анти-CD23 антитело (IDEC/Seikagaku); SMART анти-CD3 - гуманизированное анти-CD3 IgG (Protein Design Lab); 5G1.1 - гуманизированное антикомплементарный фактор 5 (С5) антитело (Alexion Pharm); D2E7 -гуманизированное анти-TNF-α антитело (CAT/BASF); CDP870 - фрагмент гуманизированного анти-TNF-α Fab (Celltech); IDEC-151 - приматизированное анти-CD4 IgG1 антитело (IDEC Pharm/SmithKline Beecham); MDX-CD4 -человеческое анти-CD4 IgG антитело (Medarex/Eisai/Genmab); CD20-срептавидин (+биотин-иттрий 90; NeoRx); CDP571 - гуманизированное анти-TNF-α IgG4 антитело (Celltech); LDP-02 - гуманизированное анти-α4β7 антитело (LeukoSite/Genentech); OrthoClone OKT4A - гуманизированное IgG анти-CD4 антитело (Ortho Biotech); ANTOVA^тм - гуманизированное анти-CD40L IgG антитело (Biogen); ANTEGREN^тм - гуманизированное анти-VLA-4 IgG антитело (Elan); и CAT-152 - человеческое анти-TGF-β2 антитело (Cambridge Ab Tech).

Химиотерапевтические средства, которые могут использоваться в способах и композициях изобретения, включают (без ограничения): алкилирующие агенты, антиметаболиты, естественные продукты или гормоны. Примеры алкилирующих агентов, которые могут использоваться для лечения или профилактики злокачественного развития Т-клеток в способах и композициях изобретения, включают (без ограничения) следующие: азотистый иприт (например, мехлорэтамин, циклофосфамид, хлорамбуцил и т.д.), алкилсульфонаты (например, бусульфан), нитрозомочевины (например, кармустин, ломустин и т.д.), или триазины (декарбазин и т.д.). Примеры антиметаболитов, которые могут использоваться для лечения или профилактики злокачественного развития Т-клеток в способах и композициях изобретения, включают (без ограничения) следующие: аналог фолиевой кислоты (например, метотрексат) или аналоги пиримидина (например, цитарабин), аналоги пурина (например, меркаптопурин, тиогуанин, пентостатин). Примеры естественных продуктов, которые могут использоваться для лечения или профилактики злокачественного развития Т-клеток в способах и композициях изобретения, включают (без ограничения) следующие: алкалоиды барвинка (например, винбластин, винкристин), эпиподофиллотоксины (например, этопозид), антибиотики (например, даунорубицин, доксорубицин, блеомицин), ферменты (например, L-аспарагиназа) или модификаторы биологического отклика (например, интерферон альфа).

Примеры алкилирующих агентов, которые могут использоваться для лечения или профилактики рака в способах и композициях изобретения, включают (без ограничения) следующие: азотистый иприт (например, мехлорэтамин, циклофосфамид, хлорамбуцил, мелфалан и т.д.), этиленимин и метилмеламины (например, гексаметилмеламин, тиотепа), алкилсульфонаты (например, бусульфан), нитрозомочевины (например, кармустин, ломустин, семустин, стрептозоцин и т.д.), или триазины (декарбазин и т.д.). Примеры антиметаболитов, которые могут использоваться для лечения или профилактики рака в способах и композициях изобретения, включают (без ограничения) следующие: аналог фолиевой кислоты (например, метотрексат) или аналоги пиримидина (например, флорурацил, флоруридин, цитарабин), аналоги пурина (например, меркаптопурин, тиогуанин, пентостатин). Примеры естественных продуктов, которые могут использоваться для лечения или профилактики рака в способах и композициях изобретения, включают (без ограничения) следующие: алкалоиды барвинка (например, винбластин, винкристин), эпиподофиллотоксины (например, этопозид, тенипозид), антибиотики (например, актиномицин D, даунорубицин, доксорубицин, блеомицин, пликамицин, митомицин), ферменты (например, L-аспарагиназа) или модификаторы биологического отклика (например, интерферон альфа). Примеры гормонов и антагонистов, которые могут использоваться для лечения или профилактики рака в способах и композициях изобретения, включают (без ограничения) следующие: адренокортикостероиды (например, преднизон), прогестины (например, гидроксипрогестерон капроат, мегестрол ацетат, медроксипрогестерон ацетат), эстрогены (например, диэтилстилбестрол, этинил эстрадиол), антиэстроген (например, тамоксифен), андрогены (например, тестостерон пропионат, флуоксиместерон), антиандроген (например, флутамид), аналог гонадотропина (например, лейпролид). Другие средства, которые могут использоваться в способах и вместе с композициями данного изобретения для лечения или профилактики рака, включают следующие: платиновые координационные комплексы (например, цисплатин, карбоплатин), антрациндион (например, митоксантрон), замещенная мочевина (например, гидроксимочевина), производная метил гидразина (например, прокарбазин), адренокортикальное супрессивное средство (например, митотан, аминоглютетимид).

Применяемый здесь термин "стабилизатор микротубулина" означает средство против рака, действующее путем удерживания клеток в фазах G2-M благодаря стабилизации микротрубочек. Примеры стабилизаторов микротубулина включают таксол и аналоги таксола. Дополнительные примеры стабилизаторов микротубулина включают (без ограничения) следующие продаваемые и разрабатываемые препараты: дискодермолид (также известный как NVP-XX-A-296); эпотилоны (такие как эпотилон А, эпотилон В, эпотилон С (также известный как дезоксиэпотилон А или dEpoA); эпотилон D (также называемый KOS-862, dEpoB и дезоксиэпотилон В); эпотилон Е; эпотилон F; эпотилон В N-оксид; эпотилон А N-оксид; 16-аза-эпотилон В; 21-аминоэпотилон В (также известный как BMS-310705); 21-гидроксиэпотилон D (также известный как дезоксиэпотилон F и dEpoF), 26-фторэпотилон; FR-182877 (Fujisawa, также известный как WS-9885B), BSF-223651 (BASF, также известный как ILX-651 и LU-223651); AC-7739 (Ajinomoto, также известный как AVE-8063A и CS-39.HCl); АС-7700 (Ajinomoto, также известный как AVE-8062, AVE-8062A, CS-39-1-Ser.HCl и RPR-258062A); фиджианолид В; лаулималид; карибаэозид; карибаэолин; таккалонолид; элеутеробин; саркодиктиин; лаулималид; диктиостатин-1; сложные эфиры ятрофана; и их аналоги и производные.

Применяемый здесь термин "ингибитор микротубулина" означает средство против рака, действующее путем ингибирования полимеризации тубулина или составления микроканальца. Примеры ингибиторов микротубулина включают (без ограничения) следующие продаваемые и разрабатываемые препараты: эрбулозол (также известный как R-55104); доластатин 10 (также известный как DLS-10 и NSC-376128); мивобулин изэтионат (также известный как CI-980); винкристин; NSC-639829; ABT-751 (Abbot, также известный как Е-7010); альториртины (такие как альториртин А и альториртин С); спонгистатины (такие как спонгистатин 1, спонгистатин 2, спонгистатин 3, спонгистатин 4, спонгистатин 5, спонгистатин 6, спонгистатин 7, спонгистатин 8 и спонгистатин 9); цемадотин гидрохлорид (также известный как LU-103793 и NSC-D-669356); ауристатин РЕ (также известный как NSC-654663); соблидотин (также известный как TZT-1027), LS-4559-P (Pharmacia, также известный как LS-4577); LS-4578 (Pharmacia, также известный как LS-477-P); LS-4477 (Pharmacia), LS-4559 (Pharmacia); RPR-112378 (Aventis); винкристин сульфат; DZ-3358 (Daiichi); GS-164 (Takeda); GS-198 (Takeda); KAR-2 (Академия наук Венгрии); SAH-49960 (Lilly/Novartis); SDZ-268970 (Lilly/Novartis); AM-97 (Armad/Kyowa Hakko); AM-132 (Armad); AM-138 (Armad/Kyowa Hakko); IDN-5005 (Indena); криптофицин 52 (также известный как LY-355703); витилевуамид; тубулизин А; канаденсол; центауреидин (также известный как NSC-106969); Т-138067 (Tularik, также известный как Т-67, TL-138067 и TI-138067); COBRA-1 (Parker Hughes Institute, также известный как DDE-261 и WHI-261); H10 (Kansas State University); H16 (Kansas State University); онкоцидин А1 (также известный как ВТО-956 и DIME); DDE-313 (Parker Hughes Institute); SPA-2 (Parker Hughes Institute); SPA-1 (Parker Hughes Institute, также известный как SPIKET-P); 3-IAABU (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine, также известный как MF-569); наркозин (также известный как NSC-5366); наскапин, D-24851 (Asta Medica), A-105972 (Abbott); гемиастерлин; 3-BAABU (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine, также известный как MF-191); TMPN (Arizona State University); ванадоцен ацетилацетонат; Т-138026 (Tularik); монсатрол; инаноцин (также известный как NSC-698666); 3-IAABE (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine); A-204197 (Abbott); T-607 (Tularik, также известный как Т-900607); RPR-115781 (Aventis); элеутеробины (такие как десметилэлеутеробин, дезаэтилэлеутеробин, изоэлеутеробин А и Z-элеутеробин); галихондрин В; D-64131 (Asta Medica); D-68144 (Asta Medica); диазонамид A; A-293620 (Abbott); NPI-2350 (Nereus); TUB-245 (Aventis); A-259754 (Abbott); диозостатин; (-)-фенилагистин (также известный как NSCL-96F037); D-68838 (Asta Medica); D-68836 (Asta Medica); миосеверин В; D-43411 (Zentaris, также известный как D-81862); A-289099 (Abbott); A-318315 (Abbott); HTI-286 (также известный как SPA-110, трифторацетатная соль) (Wyeth); D-82317 (Zentaris); D-82318 (Zentaris); SC-12983 (NCI); ресверастатин фосфат натрий; BPR-OY-007 (National Health Research Institutes); SSR-250411 (Sanofi); комбретастатин А4; и их аналоги и производные.

Таксол, также называемый паклитакселом, - известное противораковое лекарственное средство, действующее путем усиления и стабилизации образования микротрубочек. Известно множество аналогов таксола, включая таксотер. Таксотер также называют доцетаксолом. Структуры других аналогов таксола показаны в патентной заявке США №11/157213. Эти соединения имеют основной таксановый скелет в виде общей структурной особенности. Также было показано, что они способны задерживать клетки в фазах G2-M благодаря стабилизации микротрубочек. Таким образом, таксановый скелет может "украшать" множество заместителей без отрицательного влияния на биологическую активность. Также видно, что ни одно, одно или оба циклогексановых кольца аналога таксола могут иметь двойную связь в указанных положениях. Для ясности базовый таксановый скелет показан ниже в Структурной формуле (VI):

.

Двойные связи не показаны в циклогексановых кольцах таксанового скелета, представленного Структурной формулой (VI). Базовый таксановый скелет может не включать ни одной или включать одну двойную связь в одном или обоих циклогексановых кольцах, как показано в Структурных формулах (VII) и (VIII) ниже. Многие атомы не показаны в Структурной формуле (VI), чтобы указать участки, в которых часто наблюдаются структурные вариации в аналогах таксола. Например, замещение в таксановом скелете обычным атомом кислорода указывает, что в этом месте обычно находится гидроксил, ацил, алкокси или другой содержащий кислород заместитель. Эти и другие замещения в таксановом скелете могут быть выполнены без утраты возможности усиления и стабилизации образования микротрубочек. Таким образом, употребляемый здесь термин "аналог таксола" означает соединение, имеющее базовый таксоловый скелет и способствующее образованию микротрубочек. Аналоги таксола могут быть составлены в виде коллоидной композиции наночастиц, чтобы обеспечить лучшее время инфузии и избавить от необходимости доставки лекарственного средства с применением кремофора, который вызывает реакции гиперчувствительности у некоторых пациентов. Примером аналога таксола, составленного в виде коллоидной композиции наночастиц, является ABI-007, который является коллоидной композицией наночастиц белок-стабилизированного паклитаксела, ресуспендированного в солевом растворе.

Как правило, используемые здесь аналоги таксола представлены Структурной формулой (VII) или (VIII):

.

.

R₁₀ - группа низшего алкила, замещенная группа низшего алкила, фенильная группа, замещенная фенильная группа, -SR₁₉, -NHR₁₉ или -OR₁₉.

R₁₁- группа низшего алкила, замещенная группа низшего алкила, арильная группа или замещенная арильная группа.

R₁₂ - -Н, -ОН, низший алкил, замещенный низший алкил, низший алкокси, замещенный низший алкокси, -O-С(O)-(низший алкил), -O-С(O)-(замещенный низший алкил), -O-СН₂-O-(низший алкил) -S-СН₂-O-(низший алкил).

R₁₃ - -Н, -СН₃ или, вместе с R₁₄, -CH₂-.

R₁₄ - -Н, -ОН, низший алкокси, -O-С(O)-(низший алкил), замещенный низший алкокси, -O-С(O)-(замещенный низший алкил), -O-СН₂-O-Р(O)(ОН)₂, -O-СН₂-O-(низший алкил), -O-СН₂-S-(низший алкил) или, вместе с R₂₀, двойная связь.

R₁₅ -Н, низший ацил, низший алкил, замещенный низший алкил, алкоксиметил, алктиометил, -ОС(O)-O (низший алкил),-ОС(O)-O (замещенный низший алкил),-ОС(O)-NH (низший алкил) или -ОС(O)-NH (замещенный низший алкил).

R₁₆ - фенил или замещенный фенил.

R₁₇ - -Н, низший ацил, замещенный низший ацил, низший алкил, замещенный низший алкил, (низший алкокси)метил или (низший алкил)тиометил.

R₁₈ -H, -СН₃ или, вместе с R17 и атомами углерода, с которыми R₁₇ и R₁₈ соединены, пяти- или шестичленное неароматическое гетероциклическое кольцо.

R₁₉ - группа низшего алкила, замещенная группа низшего алкила, фенильная группа, замещенная фенильная группа.

R₂₀ - -H или галоген.

R₂₁ - -H, низший алкил, замещенный низший алкил, низший ацил или замещенный низший ацил.

Предпочтительно, переменные в Структурных формулах (VII) и (VIII) определены следующим образом: R₁₀ - фенил, трет-бутокси, -S-СН₂-СН-(СН₃)₂, -S-СН(СН₃)₃, -S-(СН₂)₃СН₃, -O-СН(СН₃)₃, -NH-СН(СН₃)₃, -СН=С(СН₃)₂ или парахлорфенил; R₁₁- фенил, (СН₃)₂СНСН₂-, -2-фуранил, циклопропил или паратолуил; R₁₂ - -H, -ОН, СН₃СО- или -(СН₂)₂-N-морфолино; R₁₃ - метил или R₁₃ и R₁₄, вместе, - -СН₂-;

R₁₄ - -H, -CH₂SCH₃ или -СН₂-O-Р(O)(ОН)₂; R₁₅ - СН₃СО-;

R₁₆ - фенил; R₁₇ -H, или R₁₇ и R₁₈, вместе, -O-СО-O-;

R₁₈ является -H; R₂₀ является -H или -F; и R₂₁ - -H, -С(O)-CHBr-(СН₂)₁₃-СН₃ или -С(O)-(СН₂)₁₄-СН₃; -С(O)-СН₂-СН(ОН)-СООН, -C(O)-CH₂-O-C(O)-CH₂CH(NH₂)-CONH₂, -С(O)-СН₂-O--CH₂CH₂OCH₃ или -С(O)-O-С(O)-СН₂СН₃.

Аналог таксола может также быть соединен или связан с фармацевтически приемлемым полимером, таким как полиакриламид. Один пример полимера этого типа показан в патентной заявке США №11/1572213. Используемый здесь термин "аналог таксола" включает указанные полимеры.

Раскрытые здесь дисоли бис(тио-гидразид амида) могут быть получены согласно следующему способу. Способ получения раскрытых дисолей бис(тио-гидразид амида) включает этапы объединения нейтрального бис(тио-гидразид амида), органического растворителя и основания с образованием раствора бис(тио-гидразид амида); и объединение раствора и органического антирастворителя, таким образом, преципитируя дисоль бис(тио-гидразид амида) (например, соединения, представленные Структурными формулами (I)-(V)). Нейтральные формы раскрытых дисолей бис(тио-гидразид амида) могут быть получены в соответствии со способами, описанными в патентных публикациях США №№2003/0045518 и 2003/0119914, обе с названием SYNTHESIS OF TAXOL ENHANCERS (Средства, улучшающие синтез таксола), а также способами, описанными в патентной публикации США №2004/0225016 А1 TREATMENT FOR CANCERS (Лечение рака).

Обычно, по меньшей мере, приблизительно два мольных эквивалента основания используются для каждого мольного эквивалента нейтрального бис(тио-гидразид амида); как правило, от приблизительно 2 до приблизительно 5 эквивалентов, или предпочтительно от приблизительно 2,0 до приблизительно 2,5 эквивалентов.

Подходящие основания могут быть достаточно сильными, чтобы реагировать с бис(тио-гидразид амидом) с образованием дисоли. В различных вариантах осуществления основание может быть амином (например, триэтиламин, дифениламин, бутиламин или аналогичные); гидроксид аммония (например, тетраметиламмонийгидроксид, тетрабутиламмонийгидроксид или аналогичные); гидроксид щелочного металла (гидроксид лития, гидроксид натрия, гидроксид калия или аналогичные;) С1-С6 алкоксид щелочного металла или амид щелочного металла (например, натрий амид, литий диизопропил амид или аналогичные). В некоторых вариантах осуществления основа - гидроксид натрия, гидроксид калия, натрий С1-С6 алкоксид, калий С1-С6 алкоксид, амид натрия или амид калия, или предпочтительно, гидроксид натрия, метоксид натрия или этоксид натрия.

В различных вариантах осуществления основание может быть гидридом щелочного металла (например, гидрид натрия, гидрид калия или аналогичные), основанием двухвалентного металла (например, оксид магния), С1-С6 алкилом щелочного металла (например, бутиллитий), арилом щелочного металла (например, фениллитий). Как правило, основа - гидрид лития, гидрид натрия, гидрид калия, бутиллитий, бутилнатрий, бутилкалий, фениллитий, фенилнатрий или фенилкалий.

Используемый здесь термин "щелочной металл" включает литий, натрий, калий, цезий и рубидий.

Органический растворитель может быть любым органическим растворителем, который является стабильным при добавлении основания к смеси бис(тио-гидразид амида) и органического растворителя. Как правило, органический растворитель является достаточно полярным для того, чтобы растворить соль бис(тио-гидразид амида), полученную согласно данному способу, с образованием раствора. В различных вариантах осуществления органический растворитель является растворимым в воде. Органический растворитель может, как правило, быть выбран из следующих: С1-С4 алифатический спирт (например, метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол или аналогичные), С1-С4 алифатический кетон (например, ацетон, метил этил кетон, 2-бутанон или аналогичные), С2-С4 алифатический эфир (например, диэтиловый эфир, дипропиловый эфир, диизопропиловый эфир или аналогичные), С2-С4 циклоалифатический эфир (например, тетрагидрофуран, диоксан или аналогичные), диметил формамид, диметил сульфоксид, N-метил пирролидон, гликоль (например, этиленгликоль, пропиленгликоль, тетраметиленгликоль или аналогичные), алкил гликолевый простой эфир (например, этилен гликоль диметиловый простой эфир или аналогичные) и ацетонитрил. Как правило, органический растворитель может быть выбран из следующих: метанол, этанол, пропанол (например, 1-пропанол, 2-пропанол), бутанол (например, 1-бутанол, трет-бутиловый спирт или аналогичные), ацетон, тетрагидрофуран и метил этил кетон. Предпочтительно, органический растворитель может быть выбран из метанола, этанола, ацетона и метил этил кетона.

Используемый здесь термин "органический антирастворитель" - это растворитель, который при добавлении к раствору, созданному путем объединения основания, бис(тио-гидразид амида) и органического растворителя, приводит к выпадению дисоли бис (тиогидразид амида) в осадок из раствора. Как правило, органический антирастворитель может быть выбран из следующих: С5-С10 алкан (например, пентан, петролейный эфир, гексан, гептан, октан, изооктан или аналогичные), С5-С10 циклоалкан (например, циклогексан, циклопентан или аналогичные), С3-С10 алкиловый сложный эфир (например, этилацетат, пропилацетат, метилбутират или аналогичные), С3-С10 алкиловый простой эфир (например, метилэтиловый эфир, диэтиловый эфир, метилпропиловый эфир или аналогичные), бензол, толуол и ксилол. Как правило, органический антирастворитель может быть выбран из следующих: диэтиловый эфир, дипропиловый эфир (например, пропил, такой как 1-пропил или 2-пропил), метилпропиловый простой эфир, этилпропиловый простой эфир, метил трет-бутиловый простой эфир, метилацетат, этилацетат, пропилацетат, пентан, гексан, циклогексан, гептан и петролейный эфир. В некоторых вариантах осуществления органический антирастворитель может быть С5-С10 алканом или С5-С10 циклоалканом. В различных предпочтительных вариантах осуществления органический антирастворитель может быть гептаном; или органический антирастворитель может быть диэтиловым эфиром или этилацетатом. В различных предпочтительных вариантах осуществления органический антирастворитель может быть метиловым трет-бутиловым эфиром.

В различных вариантах осуществления нейтральный бис(тио-гидразид амида) может быть по существу нерастворимым в органическом растворителе, таким образом образовывая смесь, причем объединением основания со смесью формируется бис(тио-гидразид амид) раствор. Как правило, раствор бис(тио-гидразид амида) может быть прозрачным. В целом, приблизительно от 0,25 до приблизительно 2,5 моль нейтрального бис(тио-гидразид амида) объединяют на каждый литр органического растворителя, или обычно от приблизительно 0,75 до приблизительно 1,5 моль нейтрального бис(тио-гидразид амида) объединяют на каждый литр органического растворителя. Предпочтительно, приблизительно 1 моль нейтрального бис(тио-гидразид амида) объединяют на каждый литр органического растворителя.

Используемый здесь термин "бис(тио-гидразид амида) раствор", при образовании из органического растворителя, нейтрального бис(тио-гидразид амида) и основания, может включать одну или несколько разновидностей, таких как нейтральный бис(тио-гидразид амид), моносоль бис(тио-гидразид амида), дисоль бис(тио-гидразид амида) и т.п.

В предпочтительных вариантах осуществления органическим растворителем является этанол. Предпочтительно, основание - это от приблизительно 2 моль до приблизительно 5 моль водного гидроксида натрия, или, более предпочтительно, от приблизительно 2 до приблизительно 2,5 моль.

В предпочтительных вариантах осуществления органическим растворителем является ацетон. Предпочтительно, основание - это от приблизительно 2 моль до приблизительно 5 моль этанольного этоксида натрия, или, более предпочтительно, от приблизительно 2 до приблизительно 2,5 моль.

Дисоли бис(тио-гидразид амида), полученные в соответствии с настоящим изобретением - раскрытые здесь дисоли, включая представленные Структурными формулами (I)-(V). Нейтральные бис(тио-гидразид амиды), используемые в раскрытом способе для получения дисолей, представленных Структурными формулами (I)-(II), могут быть представлены следующими Структурными формулами (I′)-(II′), где переменные имеют такие же значения и предпочтительные значения, как в Структурных формулах (I)-(II), соответственно:

.

Таким образом, указанный здесь нейтральный бис(тио-гидразид амид) имеет, по меньшей мере, два атома водорода (например, атомы водорода, связанные с атомами азота в Структурных формулах (I′) и (II′), которые могут реагировать с описанными здесь основаниями с образованием дисоли.

В Структурной формуле (I), M⁺ является фармацевтически приемлемым моновалентным катионом. M²⁺ является фармацевтически приемлемым двухвалентным катионом, как описано выше.

В различных предпочтительных вариантах осуществления органический растворитель может быть ацетоном; основание может быть этанольным натрий этоксидом; органический растворитель может быть этанолом; основание может быть водным натрий гидроксидом; антирастворитель может быть гептаном; нейтральный бис(тио-гидразид амид) может быть:

.

и/или нейтральный бис(тио-гидразид амид) может быть:

; или

.

Настоящее изобретение проиллюстрировано следующими примерами, которые не предназначены для того, чтобы ограничить изобретение каким-либо образом.

Примеры

Пример 1. Разработка параметров сушки замораживанием

Полку устройства сушки и замораживания охлаждали при 0,1°C/мин, 0,2°C/мин, 0,4°C/мин, 1,0°C/мин и быстро замораживали пробирки при - 80°C в морозильнике. Хуже всего выглядели лепешки, полученные при замораживании продукта при -80°C в морозильнике. Эта термообработка давала отдельный слой в верхней части образца, называемый "хлопьями" во всем этом исследовании. Образование хлопьев может быть объяснено намного большим сопротивлением верхней части лепешки потоку газа по сравнению с материалом, составляющим остаток лепешки. Более тонкие хлопья отделялись от верхней части высушенной лепешки при охлаждении полок со скоростью 1°C/мин. Хлопья не обнаруживались при использовании оптимизированной композиции (высушенной с использованием параметров, указанных в Таблице 1), когда полки охлаждали со скоростью 0,1°C/мин, 0,2°C/мин или 0,4°C/мин. Следует отметить, что другие переменные были изменены при снижении скорости охлаждения (например, скорость нагревания в процессе первичной сушки).

Этап отжига включали для того, чтобы вызвать кристаллизацию маннитола и управлять размером кристаллов. Проверяли две температуры отжига: -8°C и -20°C. Кроме того, определяли влияние времени отжига и количества циклов отжига на кристаллизацию маннитола и оценивали внешний вид лепешки. Для отжига выбирали конечную температуру -20°C. Циклы замораживания-сушки выполняли с использованием одного или двух этапов отжига. Циклы с использованием двух этапов отжига давали более красивую лепешку.

Первичную сушку проводили при температуре полки в диапазоне от -10°C до 10°C (соответствует температурам продукта от -34°C до -24°C в начале первичной сушки). Первичная сушка при температуре полки -10°C требовала очень длительного времени сушки (температура продукта была все еще на 12°C ниже температуры полки после 17 часов). Температуры полки выше 5°C во время первичной сушки вели к оплавлению в нижнем слое пробирки. Температура полки 5°C была выбрана в качестве конечной первичной температуры сушки. Чтобы предотвратить слишком быстрое нагревание образца, использовали медленное линейное нарастание от -48°C до -15°C со скоростью 0,5°C/мин и от -15°C до 5°C со скоростью 0,1°C/мин. Расслаивание лепешки на хлопья перестало быть проблемой в выбранной композиции после того, как начальная скорость охлаждения и скорость первичного нагревания для сушки были снижены. Дополнительные исследования необходимы для того, чтобы полностью различить влияния этих двух параметров, однако визуальное наблюдение за формированием хлопьев в самом начале цикла первичной сушки, когда композиции охлаждались быстрее, говорит о важной роли соответствующей скорости охлаждения для предотвращения фазового разделения продукта.

Вторичная сушка состояла в линейном изменении температуры от 5°C до 45°C и этапа удержания на уровне 45°C. 45°C выбрали, поскольку проведение вторичной сушки при этой температуре приводит к превращению маннитол гидрата в безводный маннитол. Конечная скорость линейного изменения температуры составляла 1°C/мин, а этап удержания на постоянном уровне длился 3 часа.

Рекомендуемый цикл сушки замораживанием, выбранный для этого продукта, приведен в Таблице 1.

Анализ DSC выполняли для того, чтобы охарактеризовать температуры стеклования композиций динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата. Tg′ приблизительно -34°C обнаружили для композиции, содержащей 55 мг/мл динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолат и 11% (мас./об.) маннитола, когда термообработка не включала этапа отжига. Tg′ не обнаруживали после этапа отжига при -8°C в течение одного часа. Цель отжига состоит в кристаллизации маннитола в соединении. Отсутствие Tg′ (характеристика аморфного маннитола) в композициях, которые прошли этап отжига, показывало, что отжиг был достаточен для кристаллизации маннитола.

Анализ DSC проводили для высушенных заморозкой образцов, чтобы определить Tg′ и подтвердить отсутствие маннитол гидрата. Концентрация маннитол гидрата может быть оценена на основании его характерного эндотермического плавления при 80°C. Tg′ высушенной замораживанием композиции динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолат составляла приблизительно 56°C. Расплавы маннитол гидрата не наблюдались в высушенном продукте, указывая на то, что этап вторичной сушки был достаточен для преобразования метастабильного маннитол гидрата в безводную форму маннитола. Кроме того, экзотермы кристаллизации не обнаруживали в термосканах, показывая, что маннитол кристаллизовался в процессе замораживания и отжига.

В высушенных замораживанием продуктах 1% (мас./мас.) остаточной влажности считали характерным для полностью высушенного продукта. Чтобы оценить время вторичной сушки, необходимое для получения продукта с уровнем влажности ниже 1%, композиции извлекали из устройства замораживания и сушки в различные моменты времени вторичной сушки, используя пробоотборник. Этап вторичной сушки заключительного цикла (45°C температура полки в течение 3 часов) был достаточен для того, чтобы получить сухой продукт. Заключительный цикл сушки замораживанием, выбранный для этого исследования, дал возможность получить продукт с остаточной влажностью 0,9%.

Стабильность динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата во время сушки замораживанием оценивали с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ. Динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолат оказался стабильным в процессе всех протестированных циклов сушки замораживанием, так как продукты распада не были обнаружены. В среднем, главная пиковая чистота 97% наблюдалась для динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата, чем лепешки.

Хлопья, полученные во многих пробах сушки и замораживания, проверяли на действие и сравнивали с лепешкой. Одинаковые массы обоих видов ресуспендировали в одинаковом объеме деионизированной воды. Этот анализ показал, что хлопья содержат более высокую концентрацию динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата, чем лепешка. Это может быть вызвано небольшим разделением фаз во время замораживания. Разделение, похоже, не влияет на стабильность продукта.

Анализ обращенно-фазовой ВЭЖХ показал, что процесс сушки замораживанием, используемый в этом исследовании, не оказывал отрицательного влияния на стабильность динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата.

Осмотическую концентрацию высушенного замораживанием продукта (55,5 мг/мл динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолат и 11% маннитол) определяли после ресуспендирования в воде для инъекции (WFI), 0,9% (мас/об) NaCl в WFI или 5% (мас/об) декстрозы в WFI. Определяли осмотическую концентрацию после ресуспендирования в 10 мл растворителя, а также после разбавления до 150 мл. После разбавления до 150 мл растворами NaCl или декстрозы продукт оказывался в диапазоне изотоничности.

Пример 2. Лиофилизация динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата и выбор наполнителей, объемов заполнения и размера пробирки

Сушку замораживанием выполняли в устройстве для сушки и замораживания Genesis 25EL (Virtis). Пробирки с пробами помещали непосредственно на полке. Оставшееся место на полке заполняли пустыми пробирками. Пространство над пробирками было заполнено воздухом. Tg′ и Tg определяли, используя PYRIS Diamond DSC. Образцы для определения Tg′ готовили, загружая 50 мкл образца в 50 мкл алюминиевую кювету, а затем запечатывая кювету, используя пресс для запечатывания. Программа термообработки, используемая для определения Tg′ (без отжига), была следующей:

1. Линейное изменение от 20°C до -50°C со скоростью 10°C/мин.

2. Удержание при -50°C в течение 4 минут.

3. Линейное изменение от -50°C до 20°C со скоростью 10°C/мин.

Программа термообработки, используемая для определения Tg′ и включавшая этап отжига, была следующей:

1. Линейное изменение от 20°C до -45°C со скоростью 10°C/мин.

2. Удержание при -45°С в течение 10 минут.

3. Линейное изменение от -45°C до -8°C со скоростью 10°C/мин.

4. Удержание при -8°C в течение 1 часа.

5. Линейное изменение от -8°C до -70°C со скоростью 10°C/мин.

6. Удержание при -70°C в течение 5 минут.

7. Линейное изменение от -70°C до 20°C со скоростью 10°C/мин.

Tg′ определяли в средней точке перехода.

Высушенные замораживанием образцы, используемые в определении Tg′, готовили путем навески нескольких миллиграммов образца в 50 мкл алюминиевые кюветы и запечатывая их. Программа термообработки, используемая для определения Tg′, предусматривала линейное изменение температуры от 25°C до 150°С со скоростью 10°C/мин.

Остаточную влажность определяли с помощью Kari Fisher. Высушенные образцы ресуспендировали в метаноле. Пробирки, содержащие образцы, взвешивали. Образец вводили на кулонометр, и измеряли содержание воды. Затем взвешивали пробирку с образцом для определения количества образца, введенного в кулонометр. Теперь можно было определить процентное содержание воды в образце.

ВЭЖХ с обращенной фазой применяли для количественного определения действия и чистоты динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата после сушки замораживанием. Анализ выполняли согласно описанию аналитического метода.

Осмотическую концентрацию композиции, содержащей 55,5 мг/мл динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолат и 11% (мас./об.) маннитол, определяли после ресуспендирования в воде для инъекции (WFI), 0,9% NaCl в WFI или 5% декстрозы в WFI. Osmette XL использовали для определения осмотической концентрации после ресуспендирования в 10 мл растворителя, а также после разбавления до 150 мл. Измерения осмотической концентрации также проводили для растворителей.

Для использования в высушенных замораживанием композициях исследовали такие кристаллические объемные наполнители, как маннитол и глицин. Композиции, содержащие 55,5 мг/мл и имеющие мольные отношения 1:1, 2,5:1, 4:1 или 5:1 маннитол: динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолат или мольные отношения 0,5:1, 1:1 или 2,5:1 глицин: динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолат, использовались в начальных экспериментах по разработке композиции.

Композиции с соотношениями 1:1 и 2,5:1 маннитол: динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолат давали разделение фаз и некоторых коллапс после сушки замораживанием. В это же время композиции с соотношениями 4:1 и 5:1 маннитол: динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолат обеспечивали получение более прочных лепешек, а композиция с соотношением 5:1 давала более "элегантную" с фармацевтической точки зрения лепешку. В этих двух композициях от верхней части лепешки отслаивались очень тонкие хлопья.

В случае содержащих глицин композиций вариант 0,5:1 глицин: динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолат показал значительную усадку и некоторый коллапс. Вариант 2,5:1 глицин: динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолат обеспечивал получение красивых лепешек, но не ресуспендировался полностью. Хотя композиция 1:1 глицин: динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолат превращалась в красивые, на первый взгляд, лепешки, сильная тряска превращала их в порошок.

На основании этих результатов для дальнейших исследований был выбран маннитол. Композиция 5:1 маннитол: динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолат соответствовала 11% (мас./об.) раствора маннитола и 55 мг/мл динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата. Ее использовали в качестве исходной для следующего раунда исследований композиции.

Используя 11% (мас./об.) раствор маннитола, изменяли концентрацию динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата как 42 мг/мл, 55,5 мг/мл и 83 мг/мл, чтобы проверить влияние концентрации динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата на свойства высушенной замораживанием лепешки. Все композиции давали фармацевтически "красивые" лепешки с тонкими хлопьями, отделявшимися в большинстве случаев от верхней части. Время ресуспендирования композиций 83 мг/мл составляло почти 3 минуты, что является нежелательно долгим промежутком времени. Другие композиции ресуспендировались приблизительно за 20 секунд. Композиция с 67 мг/мл динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата и 11% маннитола также была проверена. Она превратилась в красивую лепешку, которая ресуспендировалась приблизительно за 20 секунд.

После сужения спектра типов и концентраций наполнителей и динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата провели более сфокусированное исследование с изменением концентраций маннитола и динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата в более узком диапазоне. Основная цель этого исследования состояла в том, чтобы определить концентрации маннитола и динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата, которые обеспечивали бы получение наиболее "красивой" с фармацевтической точки зрения лепешки. В этом исследовании также меняли размер пробирки, используя 20 мл и 50 мл пробирки для лиофилизации. Исследованные композиции перечислены в Таблице 2.

Таблица 2
Изученные композиции
Композиция №	Концентрация динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата (мг/мл)	Концентрация маннитола (% мас./об.)	Используемый размер пробирок (мл)
1	67,6	11	20 и 50
2	56,2	11	20 и 50
3	44,8	11	50
4	33,8	11	50
5	27,0	11	50
6	57,1	14	20 и 50
7	45,6	14	50
8	34,8	6	50
9	27,9	6	50
10	67,6	14	20 и 50

Композиции 8 и 9 превращались в порошок при встряхивании. Композиции 4 и 5 не обеспечивали получение твердой лепешки. Другие композиции обеспечивали получение твердой лепешки. Расслоение присутствовало во многих пробирках, но у композиций 1 и 6 оно было меньше, чем у других.

Для минимизации расслоения провели дополнительные исследования, используя композиции 1, 2, 6 и композицию с 67 мг/мл динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата и 14% маннитола (соединение 10) с циклом сушки и замораживания, описанным в Таблице 1. Обе композиции 1 и 2 давали фармацевтически приемлемую лепешку, в которой не наблюдалось расслоение, однако лепешка композиции 2 была более красивой.

Работы по составлению композиций в данном проекте дали в результате оптимальную высушенную замораживанием композицию (см. Таблицу 1) динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата, состоящую из 55,5 мг/мл динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата и 11% (мас./об.) маннитола в воде для инъекции. рН этой композиции -приблизительно 10,9. Эта композиция, наряду с оптимизированным циклом сушки замораживанием, указанным в Таблице 1, обеспечивает получение твердого и фармацевтически предпочтительного продукта. Заполняя 20 мл пробирки 12 мл 55,5 мг/мл динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата, получали требуемую дозу 670 мг динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата в одной пробирке, что также означает экономические преимущества данной композиции.

Пример 3

В стеклянном химическом стакане нагревали 160 г очищенной воды приблизительно до 65°C. В воду медленно добавляли 9,06 г гидроксиэтил крахмал (HES) и перемешивали. Перемешивание продолжали, пока HES не растворялся (менее 10 минут). Раствор охлаждали до комнатной температуры, а затем добавляли 11,70 г динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата. Все перемешивали до полного растворения динатрий 2-(N′-метил-N′-тиобензоил-гидразинокарбонил)-1-(метил-тиобензоил-гидразоно)-этанолата (менее 10 минут). Весь раствор количественно переносили в 200 мл волюметрическую колбу и разбавляли до 200 мл очищенной водой. Конечная композиция представляла собой 55,5 мг/мл STA-4783 натрий и 45 мг/мл HES.

8,0 мл раствора выливали в 20 мл стеклянные пробирки Типа 1. На заполненные пробирки установили пробки для сушки замораживанием и поместили их в устройство для сушки и замораживания. Цикл сушки замораживанием указан в Таблице 3:

Таблица 3
Этап	Установочное значение температуры полки (°С)	Время (часы)
Замораживание	от 5 до -40	1,8
Удержание	-40	3
Линейное изменение	от -40 до -25	0,3
Первичная сушка	-25(100 мТорр)	48
Линейное изменение	от -25 до 25	8
Вторичная сушка	25(100 мТорр)	12

Оценивали внешний вид и время ресуспендирования полученных высушенных замораживанием лепешек.

Хотя настоящее изобретение изложено и проиллюстрировано со ссылками на предпочтительные варианты его осуществления, специалисту в данной области техники будет понятно, что в формы и детали можно внести различные изменения, не выходя за пределы объема изобретения, определенного формулой изобретения.

1. Композиция, предназначенная для изготовления средств для лечения рака, включающая соединение, представленное формулой (I):

где М+ является фармацевтически приемлемым моновалентным катионом, а
М2+ - фармацевтически приемлемый двухвалентный катион и фармацевтически приемлемый кристаллический объемный наполнитель при соотношении соединения формулы (I) к наполнителю от 1:20 до 1:1, причем композиция представляет собой лиофилизат.

2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что 2 г композиции ресуспендируется в 10 мл воды менее чем за 10 мин.

3. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что фармацевтически приемлемый катион - Na+ или K+.

4. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она ресуспендируется в воде менее чем за 2 мин.

5. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она ресуспендируется в воде менее чем за 1 мин.

6. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что кристаллический объемный наполнитель выбран из группы, состоящей из маннитола, сорбитола, ксилита, глюцитола, дуцитола, инозитиола, арабинитола, арабитола, галактитола, идитола, аллитола, мальтитола, фруктозы, сорбозы, глюкозы, ксилозы, трегалозы, аллозы, декстрозы, альтрозы, лактозы, гулозы, идозы, галактозы, талозы, рибозы, арабинозы, ликсозы, сахарозы, мальтозы, лактулозы, фукозы, рамнозы, мелецитозы, мальтотриозы, раффинозы, альтритола, лактата кальция, глюконата кальция, глицерилфосфата кальция, цитрата кальция, фосфата кальция одноосновного и двухосновного, сукцината кальция, сульфата кальция, тартрата кальция, лактата алюминия, глюконата алюминия, глицерилфосфата алюминия, цитрата алюминия, фосфата алюминия одноосновного и двухосновного, сукцината алюминия, сульфата алюминия, тартрата алюминия, лактата магния, глюконата магния, глицерилфосфата магния, цитрата магния, фосфата магния одноосновного и двухосновного, сукцината магния, сульфата магния и тартрата магния.

7. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что кристаллический объемный наполнитель выбран из группы, состоящей из глицина, маннитола, декстрана, декстрозы, лактозы, сахарозы, поливинилпирролидона, трегалозы, глюкозы и их сочетаний.

8. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что мольное отношение соединения к наполнителю составляет от 1:10 до 1:1.

9. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что мольное отношение соединения к наполнителю составляет от 1:5,5 до 1:2.

10. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что кристаллический объемный наполнитель является глицином.

11. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что кристаллический объемный наполнитель является маннитолом.

12. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она является отожженной композицией.

13. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она ресуспендируется в воде менее чем за 30 с.

14. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что соединение представлено структурной формулой:

15. Способ получения композиции по любому из пп.1-14, включающий этапы:
а) приготовления водного раствора соединения и наполнителя, в котором мольное отношение соединения к наполнителю составляет от 1:20 до 1:1;
b) замораживания раствора, полученного на этапе а), при температуре ниже температуры стеклования соединения с образованием замороженного концентрата;
c) отжига замороженного концентрата при температуре выше температуры стеклования соединения, но ниже температуры плавления замороженного раствора, включающего замороженный концентрат, с образованием отожженной композиции;
d) замораживания отожженной композиции при температуре ниже температуры стеклования соединения; и
e) высушивания отожженной композиции из этапа е) с получением лиофилизата с содержанием влаги менее 10%.

16. Способ по п.15, отличающийся тем, что этапы с) и d) повторяют последовательно один или несколько раз перед выполнением этапа е).

17. Способ по п.15, отличающийся тем, что отожженную композицию сушат на этапе е) сублимацией при температуре от 20°С до -20°С в условиях вакуума при давлении от 200 мторр до 20 мторр.

18. Способ по п.17, отличающийся тем, что отожженную композицию сушат на этапе е) десорбцией при температуре от 20°С до 80°С в условиях вакуума при давлении от 200 мторр до 20 мторр.

19. Способ по п.15, отличающийся тем, что влажность лиофилизата составляет менее 5%.

20. Способ по п.15, отличающийся тем, что влажность лиофилизата составляет менее 2%.

21. Способ по п.15, отличающийся тем, что влажность лиофилизата составляет менее 1%.

22. Способ по п.15, отличающийся тем, что смесь замораживают на этапе b) при температуре от -44,7°С до -80°С в течение периода времени от 10 мин до 10 ч.

23. Способ по п.15, отличающийся тем, что замороженный концентрат отжигают на этапе с) при температуре от 0°С до -44,7°С в течение периода времени от 10 мин до 10 ч.

24. Способ по п.15, отличающийся тем, что отожженную композицию сушат на этапе е) сублимацией при температуре от 10°С до -10°С в условиях вакуума при давлении от 200 мторр до 100 мторр.

25. Способ по п.24, отличающийся тем, что отожженную композицию сушат на этапе f) десорбцией при температуре от 30°С до 60°С в условиях вакуума при давлении от 200 мторр до 100 мторр.

26. Способ по п.15, отличающийся тем, что смесь замораживают на этапе b) при температуре от -44,7°С до -60°С в течение периода времени от 30 мин до 3 ч.

27. Способ по п.15, отличающийся тем, что замороженный концентрат отжигают на этапе с) при температуре от 0°С до -40°С в течение периода времени от 2 ч до 6 ч.

28. Лиофилизат, предназначенный для изготовления средств для лечения рака, включающий соединение, представленное следующей структурной формулой:

где М+ является фармацевтически приемлемым моновалентным катионом, а М2+ - фармацевтически приемлемый двухвалентный катион и фармацевтически приемлемый кристаллический объемный наполнитель, при соотношении соединения формулы (I) к наполнителю от 1:20 до 1:1, причем лиофилизат получают способом, который включает этапы:
a) приготовления водного раствора соединения и наполнителя, в котором мольное отношение соединения к наполнителю составляет от 1:20 до 1:1;
b) замораживания раствора, полученного на этапе а), при температуре ниже температуры стеклования соединения с образованием замороженного концентрата;
c) отжига замороженного концентрата при температуре выше температуры стеклования соединения, но ниже температуры плавления замороженного раствора, включающего замороженный концентрат, с образованием отожженной композиции;
d) замораживания отожженной композиции при температуре ниже температуры стеклования соединения; и
e) высушивания отожженной композиции из этапа е) с получением лиофилизата с содержанием влаги менее 10%.

29. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что этапы с) и d) повторяют последовательно один или несколько раз перед выполнением этапа е).

30. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что отожженную композицию сушат на этапе е) сублимацией при температуре от 20°С до -20°С в условиях вакуума при давлении от 200 мторр до 20 мторр.

31. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что отожженную композицию сушат на этапе е) десорбцией при температуре от 20°С до 80°С в условиях вакуума при давлении от 200 мторр до 20 мторр.

32. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что влажность лиофилизата составляет менее 5%.

33. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что влажность лиофилизата составляет менее 2%.

34. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что влажность лиофилизата составляет менее 1%.

35. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что смесь замораживают на этапе b) при температуре от -44,7°С до -80°С в течение периода времени от 10 мин до 10 ч.

36. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что замороженный концентрат отжигают на этапе с) при температуре от 0°С до -44,7°С в течение периода времени от 10 мин до 10 ч.

37. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что отожженную композицию сушат на этапе е) сублимацией при температуре от 10°С до -10°С в условиях вакуума при давлении от 200 мторр до 100 мторр.

38. Лиофилизат по п.37, отличающийся тем, что отожженную композицию сушат на этапе f) десорбцией при температуре от 30°С до 60°С в условиях вакуума при давлении от 200 мторр до 100 мторр.

39. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что фармацевтически приемлемый катион - Na+ или K+.

40. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что этапы с) и d) повторяют последовательно один раз перед выполнением этапа е).

41. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что смесь замораживают на этапе b) при температуре от -44,7°С до -60°С в течение периода времени от 30 мин до 3 ч.

42. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что замороженный концентрат отжигают на этапе с) при температуре от 0°С до -40°С в течение периода времени от 2 ч до 6 ч.

43. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что соединение представлено структурной формулой:
.

44. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что смесь замораживают на этапе d) при температуре от -44,7°С до -60°С в течение периода времени от 30 мин до 3 ч.

45. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что смесь этапа а) предварительно охлаждают при температуре от 10°С до -10°С в течение периода времени от 5 мин до 5 ч перед замораживанием раствора на этапе b).

46. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что кристаллический объемный наполнитель выбран из группы, состоящей из глицина, маннитола, декстрана, декстрозы, лактозы, сахарозы, поливинилпирролидона, трегалозы, глюкозы и их сочетаний.

47. Лиофилизат по п.28, отличающийся тем, что мольное отношение соединения к наполнителю составляет от 1:10 до 1:1.

48. Лиофилизат по п.28, отличающаяся тем, что мольное отношение соединения к наполнителю составляет от 1:5,5 до 1:2,0.

49. Лиофилизат по п.28, отличающаяся тем, что кристаллический объемный наполнитель является глицином или маннитолом.

50. Лиофилизат по п.49, отличающаяся тем, что кристаллический объемный наполнитель является маннитолом.