Способ определения дубильных веществ в растительном сырье

Авторы патента:

G01N33/52 - использование соединений или составов для колориметрического, спектрофотометрического или флуорометрического анализа, например реактивной бумаги

A61K36 - Лекарства и медикаменты для терапевтических, стоматологических или гигиенических целей (изготовление специальных лекарственных форм A61J; химические аспекты или использование материалов для дезодорации воздуха, для дезинфекции или стерилизации или для бандажей, перевязочных средств, впитывающих прокладок или хирургических приспособлений A61L; соединения как таковые C01, C07,C08,C12N; мыла C11D; микроорганизмы как таковые C12N)

Владельцы патента RU 2439568:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздравсоцразвития России) (RU)

Изобретение относится к области фармакологии и может быть использовано для определения дубильных веществ в растительном сырье. Способ определения дубильных веществ в растительном сырье заключается в том, что навеску сырья экстрагируют водой при кипячении, охлаждают, фильтруют, измеряют оптическую плотность аликвотной пробы при длине волны 277 нм и рассчитывают содержание суммы всех дубильных веществ по определенной формуле, далее к аликвотной пробе фильтрата добавляют 1% раствор коллагена в 1% уксусной кислоте, взбалтывают, фильтруют, измеряют оптическую плотность фильтрата при длине волны 277 нм и рассчитывают содержание осаждаемых дубильных веществ по определенной формуле. Способ позволяет повысить точность определения содержания дубильных веществ в растительном сырье и селективно определить осаждаемые и не осаждаемые дубильные вещества в растительном сырье.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, области фармакогнозии и фармацевтической химии и может быть использовано для контроля качества растительного сырья, содержащего дубильные вещества.

Известен способ определения дубильных веществ в лекарственном растительном сырье (ЛРС) методом кулонометрии в пересчете на таннин (С.Г.Абдуллина и др. Кулонометрическое определение дубильных веществ в лекарственном растительном сырье. // Фармация. №4. - 2010. - С.13-15).

Недостатком данного способа является использование дополнительного оборудования (кулонометра), специфичного титранта (гипойодид калия), который по окислительным свойствам приближается к перманганату калия и не дает возможность дифференцировано определить высоко- и низкомолекулярные дубильные вещества.

Известен также способ определения содержания таннина и производных галловой кислоты в чае методом кондуктометрии (Патент №2127878. Способ раздельного определения таннина и катехинов (в пересчете на галловую кислоту) в чае. М.: 1999 г.).

Недостатком данного способа является применение токсичных органических растворителей (изобутиловый спирт), а также использование цветной реакции с Fe (III), продуктом которой является нестабильное по окраске во времени окрашенное соединение.

Известен также способ количественного определения дубильных веществ в пересчете на таннин в листьях скумпии и сумаха методом комплексонометрии после осаждения дубильных веществ солями цинка (ГОСТ 4564-79. Лист скумпии. Технические условия; ГОСТ 4565-79. Лист сумаха. Технические условия).

Недостатком данного способа является длительность проведения анализа и трудность определения точки эквивалентности.

Известен также способ количественного определения дубильных веществ спектрофотометрическим методом после реакции с реактивом Фолина-Чокальтеу в пересчете на галловую кислоту (Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. Руководство. Р 4.1.1672-03. - М. - 2004 г. - с.94-95).

Недостатком данного метода является невозможность раздельного определения низко- и высокомолекулярных дубильных веществ.

Наиболее близким к предлагаемому является способ, заключающийся в том, что дубильные вещества определяют методом спектрофотометрии в пересчете на галловую кислоту (Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. Руководство. Р 4.1.1672-03. - М. - 2004 г. - С.120).

Недостатком данного способа является многократное разведение испытуемого образца, в результате которого концентрация дубильных веществ в растворе плохо определима. Также в этом способе раствором сравнения служит буферный раствор, что затрудняет проведение анализа. Кроме того, данный способ не дает возможность раздельно определить содержание низкомолекулярных и высокомолекулярных дубильных веществ.

Задачей изобретения является повышение точности определения дубильных веществ и возможность раздельного определение осаждаемых и не осаждаемых дубильных веществ в растительном сырье.

Поставленная задача решается тем, что навеску сырья экстрагируют водой при кипячении, охлаждают, фильтруют, измеряют оптическую плотность аликвотной пробы при длине волны 277 нм и рассчитывают содержание суммы всех дубильных веществ по формуле

где Х_А - содержание суммы дубильных веществ в пересчете на галловую кислоту, %,

D₁ - оптическая плотность раствора 1,

m_нав - масса навески сырья, г,

V_a - объем аликвотной пробы, мл,

250 - общий объем извлечения, мл,

50 - объем колбы, мл,

508 - удельный показатель поглощения галловой кислоты (оптическая плотность 1% раствора галловой кислоты 1 мг/мл),

W - влажность сырья, %,

к аликвотной пробе фильтрата добавляют 1% раствор коллагена в 1% уксусной кислоте, взбалтывают, фильтруют, измеряют оптическую плотность фильтрата при длине волны 277 нм и рассчитывают содержание осаждаемых дубильных веществ по формуле

где X - содержание осаждаемых дубильных веществ в пересчете на галловую кислоту, %,

D₁ - оптическая плотность раствора 1,

D₂ - оптическая плотность раствора 2,

m_нав - масса навески сырья, г,

V_a - объем аликвотной пробы, мл,

250 - общий объем извлечения, мл,

50 - объем колбы, мл,

W - влажность сырья, %.

Практически способ осуществляется следующим образом. Около 2,0 (точная навеска) измельченного сырья, просеянного сквозь сито с диаметром отверстий 3 мм, помещают в колбу вместимостью 500 мл, заливают 250 мл нагретой до кипения воды и кипятят 30 мин с обратным холодильником при периодическом помешивании. Охлаждают до комнатной температуры, доводят водой до 250 мл, процеживают через вату так, чтобы частицы сырья не попали в водное извлечение. Первые 50 мл фильтрата отбрасывают.

1-4 мл водного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят водой до метки (раствор 1). Измеряют оптическую плотность раствора 1 при длине волны 277 нм. В качестве сравнения используют воду.

30 мл водного извлечения помещают в мерную емкость вместимостью 50 мл, добавляют 2-10 мл реактива осаждения, взбалтывают 30-60 мин, отстаивают, фильтруют. 1-4 мл полученного фильтрата переносят в колбу вместимостью 50 мл, доводят водой до метки (раствор 2). Измеряют оптическую плотность раствора 2 при длине волны 277 нм. В качестве сравнения используют воду.

Суммарное содержание дубильных веществ в пересчете на галловую кислоту в растительном сырье определяется как содержание дубильных веществ в растворе 1. Содержание дубильных веществ, осаждаемых раствором осаждения, определяется как разница между содержанием дубильных веществ в растворах 1 и 2.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Для анализа взято растительное сырье - кора дуба.

Около 2,0 (точная навеска) измельченного сырья коры дуба, просеянного сквозь сито с диаметром отверстий 3 мм, помещают в колбу вместимостью 500 мл, заливают 250 мл нагретой до кипения воды и кипятят 30 мин с обратным холодильником при периодическом помешивании. Охлаждают до комнатной температуры, доводят водой до 250 мл, процеживают через вату так, чтобы частицы сырья не попали в водное извлечение. Первые 50 мл фильтрата отбрасывают.

2 мл водного извлечения из коры дуба помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят водой до метки (раствор 1). Измеряют оптическую плотность раствора 1 при длине волны 277 нм. В качестве сравнения используют воду. D₁ для коры дуба равно 0,595.

30 мл водного извлечения помещают в мерную емкость вместимостью 50 мл, добавляют 2 мл реактива осаждения, взбалтывают 30 мин, отстаивают, фильтруют. 2 мл полученного фильтрата переносят в колбу вместимостью 50 мл, доводят водой до метки (раствор 2). Измеряют оптическую плотность раствора 2 при длине волны 277 нм. В качестве сравнения используют воду. D₂ для коры дуба равно 0,276.

Суммарное содержание дубильных веществ в пересчете на галловую кислоту в коре дуба определяется как содержание дубильных веществ в растворе 1.

Содержание дубильных веществ, осаждаемых раствором осаждения, в пересчете на галловую кислоту в коре дуба определяется как разница между содержание дубильных веществ в растворах 1 и 2.

Пример 2. Для анализа взято растительное сырье корневища змеевика.

Около 2,0 (точная навеска) измельченного сырья корневища змеевика, просеянного сквозь сито с диаметром отверстий 3 мм, помещают в колбу вместимостью 500 мл, заливают 250 мл нагретой до кипения воды и кипятят 30 мин с обратным холодильником при периодическом помешивании. Охлаждают до комнатной температуры, доводят водой до 250 мл, процеживают через вату так, чтобы частицы сырья не попали в водное извлечение. Первые 50 мл фильтрата отбрасывают.

1 мл водного извлечения из корневища змеевика помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят водой до метки (раствор 1). Измеряют оптическую плотность раствора 1 при длине волны 277 нм. В качестве сравнения используют воду.

30 мл водного извлечения помещают в мерную емкость вместимостью 50 мл, добавляют 7 мл реактива осаждения, взбалтывают 60 мин, отстаивают, фильтруют. 1 мл полученного фильтрата переносят в колбу вместимостью 50 мл, доводят водой до метки (раствор 2). Измеряют оптическую плотность раствора 2 при длине волны 277 нм. В качестве сравнения используют воду.

Суммарное содержание дубильных веществ в пересчете на галловую кислоту в корневищах змеевика определяется как содержание дубильных веществ в растворе 1.

Содержание дубильных веществ, осаждаемых раствором осаждения, в пересчете на галловую кислоту в корневищах змеевика определяется как разница между содержанием дубильных веществ в растворах 1 и 2.

Предлагаемый способ позволяет повысить точность определения содержания дубильных веществ в растительном сырье и селективно определить осаждаемые и не осаждаемые дубильные вещества в растительном сырье.

Способ определения дубильных веществ в растительном сырье в пересчете на галловую кислоту, заключающийся в том, что навеску сырья экстрагируют водой при кипячении, охлаждают, фильтруют, измеряют оптическую плотность аликвотной пробы при длине волны 277 нм и рассчитывают содержание суммы всех дубильных веществ по формуле:

где x_a - содержание суммы дубильных веществ в пересчете на галловую кислоту, %;
D₁ - оптическая плотность раствора 1;
m_нав - масса навески сырья, г;
V_a - объем аликвотной пробы, мл;
250 - общий объем извлечения, мл;
50 - объем колбы, мл;
508 - удельный показатель поглощения галловой кислоты (оптическая плотность 1% раствора галловой кислоты 1 мг/мл);
W - влажность сырья, %,
к аликвотной пробе фильтрата добавляют 1%-ный раствор коллагена в 1%-ной уксусной кислоте, взбалтывают, фильтруют, измеряют оптическую плотность фильтрата при длине волны 277 нм и рассчитывают содержание осаждаемых дубильных веществ по формуле:

где X - содержание осаждаемых дубильных веществ в пересчете на галловую кислоту, %;
D₁ - оптическая плотность раствора 1;
D₂ - оптическая плотность раствора 2;
m_нав - масса навески сырья, г;
V_a - объем аликвотной пробы, мл;
250 - общий объем извлечения, мл;
50 - объем колбы, мл;
508 - удельный показатель поглощения галловой кислоты (оптическая плотность 1%-ного раствора галловой кислоты 1 мг/мл);
W - влажность сырья, %.

Изобретение относится к медицине, в частности к оториноларингологии и иммунологии. .

Способ диагностики аномалий упаковки хроматина сперматозоидов при мужском бесплодии // 2437100

Изобретение относится к области медицины и ветеринарии. .

Способ прогнозирования восстановления неврологических функций у больных в остром периоде ишемического инсульта // 2437099

Изобретение относится к медицине, а именно к психоневрологии, и описывает способ прогнозирования восстановления неврологических функций у больных в остром периоде ишемического инсульта путем проведения клинических и биохимических исследований общей концентрации альбумина (ОКА) в сыворотке крови в г/л, где дополнительно на 5-7 день заболевания определяют эффективную концентрацию альбумина (ЭКА), рассчитывают резерв связывания альбумина (РСА) и при величине этого показателя менее единицы прогнозируют отрицательный результат восстановления неврологических функций у больных в остром периоде ишемического инсульта.

Способ прогнозирования развития направленности патологического процесса у больных с опухолями головного мозга // 2433410

Изобретение относится к медицине, к биологическим исследованиям в онкологии, и может быть использовано для определения развития злокачественного процесса при опухолях головного мозга после оперативного лечения.

Способ оценки эффективности неоадъювантной химиотерапии рака мочевого пузыря // 2430374

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и описывает способ оценки эффективности неоадъювантной химиотерапии рака мочевого пузыря путем исследования пациента, при котором производят регистрацию максимальной интенсивности аутофлюоресценции опухолевых тканей в зеленой области спектра на этапе первичной диагностики и через 1 месяц после проведения предоперационной химиотерапии и при увеличении у пациента значений максимальной интенсивности аутофлюоресценции опухолевой ткани на 15% от исходных и более эффективность лечения оценивают как частичную регрессию опухолевого процесса, при отсутствии изменений показателей интенсивности аутофлюоресценции опухолевой ткани от исходных определяют стабилизацию процесса, при уменьшении показателей интенсивности аутофлюоресценции опухолевой ткани на 15% и более от исходных отмечают прогрессирование опухолевого процесса.

Микроэмульсия для количественного определения флюмеквина в биологических объектах // 2427840

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для определения концентрации фторхинолоновых антибиотиков, конкретно флюмеквина, в мышечных тканях, сыворотке крови и пищевых продуктах флуориметрическим методом, позволяющее понизить предел обнаружения с целью регулирования введения оптимальных доз антибиотиков при лечении различных инфекционных заболеваний, исследовании фармакокинетики и фармакодинамики.

Способ диагностики аномалий упаковки хроматина сперматозоидов при мужском бесплодии // 2426993

Изобретение относится к области медицины и ветеринарии и может быть использовано при лечении бесплодия в программах экстракорпорального оплодотворения и гомологичной инсеминации.

Способ прогнозирования развития аллергических заболеваний у детей раннего возраста // 2424528

Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии и аллергологии и касается способа прогнозирования риска развития аллергических заболеваний у детей раннего возраста.

Способ лабораторной диагностики сепсиса // 2423704

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике. .

Способ прогнозирования течения иерсиниозов у детей // 2422828

Изобретение относится к области медицины и касается способа прогноза течения иерсиниозной инфекции у детей Сущность способа заключается в том, что наряду с оценкой клинических симптомов болезни (лихорадки и экзантемы) в начальный период заболевания (с 3 по 12 день), дополнительно определяют в сыворотке крови С-реактивный белок (СРБ), скорость оседания эритроцитов (СОЭ) и специфические антитела (AT) и при:- лихорадочной реакции менее 2 суток, длительности экзантемы менее 1,5 суток, СРБ менее 7,5 мг/л, показателе СОЭ менее 15 мм/час уровне ИФН- менее 75 пг/мл, ЦИК не выше 0,115 ед.опт.пл.

Комплексный противовирусный препарат для наружного применения при лечении герпесвирусных инфекций // 2438697

Изобретение относится к медицине, а именно к вирусологии, фармации, и предназначено для лечения герпетических инфекций. .

Способы лечения и предупреждения мукозита производными антоцианидина // 2438693

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к комбинации для изготовления лекарственного средства для лечения мукозита. .

Способы лечения и предупреждения мукозита производными антоцианидина // 2438693

Растительный экстракт и его терапевтическое применение // 2438692

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к композиции для лечения пролиферативного и/или воспалительного состояния. .

Растительный экстракт и его терапевтическое применение // 2438692

Средство, обладающее гемостимулирующим, антимутагенным, противоопухолевым, церебропротекторным, антигипоксическим, ноотропным, анксиолитическим и противоневротическим действием // 2438691

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству, обладающему гемостимулирующим, антимутагенным. .

Гипотензивное средство для лечения подростков с эссенциальной артериальной гипертензией // 2438690

Изобретение относится к области медицины, а именно к фармакологии в кардиологии, и может быть использовано для создания гипотензивного средства из растительного сырья для лечения подростков с эссенциальной артериальной гипертензией.

Гипотензивное средство для лечения подростков с эссенциальной артериальной гипертензией // 2438690

Применение карнозола и/или розманола для повышения активности нейрорецепторов // 2440012