Бензоиламиногетероциклильные соединения в качестве активаторов глюкокиназы (glk)

Настоящее изобретение относится к соединению 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)-пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)-карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамид или к его фармацевтически приемлемой соли. Изобретение также относится к фармацевтической композиции, а также к применению соединения по п.1. Технический результат - получение нового биологически активного соединения, обладающего активностью активатора GLK (глюкокиназа). 4 н. и 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 ил.

 

Настоящее изобретение относится к группе бензоиламиногетероциклильных соединений, полезных в лечении или профилактике заболевания или болезненного состояния, опосредованного глюкокиназой (GLK или GK), приводящего к уменьшению глюкозного порога для секреции инсулина. Дополнительно предполагают, что соединения будут уменьшать уровень глюкозы в крови путем увеличения поглощения глюкозы в печени. Такие соединения могут быть полезны при лечении сахарного диабета 2 типа и ожирения. Изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения, и к способам лечения заболеваний, опосредованных GLK, с использованием указанных соединений.

В β-клетках поджелудочной железы и клетках паренхимы печени основным переносчиком глюкозы через цитоплазматическую мембрану является GLUT2. При физиологических концентрациях глюкозы скорость, с которой GLUT2 переносит глюкозу через мембрану, не ограничивает общую скорость поглощения глюкозы этими клетками. Скорость поглощения глюкозы ограничивается скоростью фосфорилирования глюкозы до глюкозо-6-фосфата (G6P), которое катализируется глюкокиназой (GLK) [1]. GLK имеет высокую (6-10 мМ) Km (константу Михаэлиса) в отношении глюкозы и не ингибируется физиологическими концентрациями G-6-P [1]. Экспрессия GLK ограничивается некоторыми тканями и типами клеток, в частности β-клетками поджелудочной железы и клетками печени (гепатоцитами) [1]. В этих клетках активность GLK ограничивает скорость утилизации глюкозы и таким образом регулирует степень индуцированной глюкозой секреции инсулина и синтеза гликогена в печени. Эти процессы являются критическими для поддержания гомеостаза глюкозы во всем организме и оба нарушаются при диабете [2].

При одном из подтипов диабета, «диабете зрелого типа у молодых» второго типа (MODY-2), диабет вызван мутациями, приводящими к утрате функции GLK [3, 4]. Гипергликемия у пациентов, страдающих от MODY-2, возникает в результате нарушения утилизации глюкозы в поджелудочной железе и печени [5]. Нарушение утилизации глюкозы в поджелудочной железе пациентов, страдающих от MODY-2, приводит к увеличению порога, вызванного глюкозой секреции инсулина. Наоборот, редкие вызывающие активацию мутации GLK уменьшают порог, приводя в результате к семейной гиперинсулинемии [6, 6а, 7]. Дополнительно к уменьшенной активности GLK, обнаруженной у диабетиков, страдающих от MODY-2, активность печеночной глюкокиназы также уменьшена у диабетиков, страдающих диабетом 2 типа [8]. Важно, что общая или избирательная для печени сверхэкспрессия GLK предотвращает или обращает развитие диабетического фенотипа в пищевой и генетической моделях болезни [9-12]. Кроме того, срочное лечение диабетиков, страдающих диабетом 2 типа, фруктозой улучшает толерантность к глюкозе путем стимуляции утилизации глюкозы в печени [13]. Полагают, что это действие опосредовано вызванным фруктозой увеличением активности GLK в цитозоле гепатоцита при помощи механизма, описанного ниже [13].

Активность печеночной GLK ингибируется путем ассоциации с регуляторным белком GLK (GLKRP). Комплекс GLK/GLKRP стабилизирован связыванием фруктозо-6-фосфата (F6P) с GLKRP и дестабилизируется путем замещения этого фосфата сахара на фруктозо-1-фосфат (F1P). F1P образуется путем опосредованного фруктокиназой фосфорилирования поступающей с пищей фруктозы. Следовательно, целостность комплекса GLK/GLKRP и активность печеночной GLK регулируется в зависимости от приема пищи, поскольку F6P превалирует на стадии после абсорбции, тогда как F1P преобладает в состоянии после приема пищи. В противоположность гепатоцитам β-клетка поджелудочной железы экспрессирует GLK при отсутствии GLKRP. Таким образом, активность GLK β-клеток широко регулируется доступностью ее субстрата, представляющего собой глюкозу. Небольшие молекулы могут активировать GLK непосредственно или путем дестабилизации комплекса GLK/GLKRP. Предполагают, что первый класс соединений стимулирует утилизацию глюкозы в печени и поджелудочной железе, тогда как последний действует избирательно в печени. Тем не менее предполагают, что соединения, обладающие любым из профилей, терапевтически полезны при лечении сахарного диабета 2 типа, поскольку это заболевание характеризуется нарушенной утилизацией глюкозы в обеих тканях.

GLK, GLKRP и канал К_АТР экспрессируются в нейронах гипоталамуса, представляющего собой область мозга, которая важна для регуляции энергетического баланса и контроля приема пищи [14-18]. Продемонстрировано, что эти нейроны экспрессируют оректические и аноректические нейропептиды [15, 19, 20], и предполагают, что они представляют собой чувствительные к глюкозе нейроны в гипоталамусе, которые ингибируются или возбуждаются изменениями концентраций глюкозы в их окружении [17, 19, 21, 22]. Способность этих нейронов чувствовать изменения уровней глюкозы нарушена во множестве генетических и экспериментально вызванных моделях ожирения [23-28]. Интрацеребровентрикулярная (icv) инфузия аналогов глюкозы, представляющих собой конкурентные ингибиторы глюкокиназы, стимулирует прием корма голодными крысами [29, 30]. Наоборот, icv инфузия глюкозы подавляет питание [31]. Таким образом, небольшие молекулярные активаторы GLK могут уменьшить потребление пищи и рост массы организма благодаря централизованным действиям на GLK. Таким образом, активаторы GLK могут применяться терапевтически при лечении дополнительно к сахарному диабету расстройств пищевого поведения, включающих ожирение. Гипоталамические действия являются дополнительными или синергическими к действиям тех же самых соединений, действующих в печени и/или поджелудочной железе при нормализации гомеостаза глюкозы, для лечения диабета 2 типа. Таким образом, система GLK/GLKRP может быть описана как потенциальная мишень для "диажирения" (полезно при сахарном диабете и ожирении).

GLK также экспрессируется в специфических энтеро-эндокринных клетках, где, как полагают, контролирует чувствительную к глюкозе секрецию инкретиновых пептидов GIP (глюкозозависимый инсулинотропный полипептид) и GLP-1 (глюкагоноподобный пептид-1) соответственно К-клетками и L-клетками кишечника (32, 33, 34). Таким образом, небольшие молекулярные активаторы GLK могут обладать дополнительными благоприятными действиями на секрецию инсулина, функцию и выживание β-клеток и массу организма вследствие стимуляции секреции GIP и GLP-1 этими энтеро-эндокринными клетками.

В WO 00/58293 и WO 01/44216 (Roche) описаны серии бензилкарбамоильных соединений в качестве активаторов глюкокиназы. Механизм, при помощи которого такие соединения активируют GLK, оценивают путем измерения непосредственного действия таких соединений в анализе, в котором активность GLK связана с продукцией NADH (восстановленной формы никотинамидаденина), которую, в свою очередь, измеряют оптически (смотри подробную информацию об описанном далее анализе in vitro). Соединения по настоящему изобретению могут активировать GLK непосредственно или могут актвировать GLK путем ингибирования взаимодействия GLKRP с GLK.

Дополнительные активаторы GLK описаны в WO 03/095438 (замещенные фенилацетамиды, Roche), WO 03/055482 (карбоксамидные и сульфонамидные производные, Novo Nordisk), WO 2004/002481 (арилкарбонильные производные, Novo Nordisk) и в WO 03/080585 (аминозамещенные бензоиламиногетероциклы, Banyu).

В международной заявке на патент авторов данного изобретения № WO 03/000267 описана группа бензоиламинопиридильных карбоновых кислот, представляющих собой активаторы фермента глюкокиназы (GLK).

В международной заявке на патент авторов данного изобретения № WO 03/015774 описаны соединения формулы (А):

где R³ представляет собой фенил или замещенный гетероцикл, отличный от замещенного карбоновой кислотой пиридила.

В международной заявке на патент WO 2004/076420 (Banyu) описаны соединения, которые в общем представляют собой подгруппу соединений, описанных в WO 03/015774, где, например, R¹ представляет собой (замещенный) алкиловый эфир и R² представляет собой (замещенный) фенокси.

Авторы изобретения неожиданно обнаружили небольшую группу соединений, в общем подгруппу соединений, описанных в WO 03/015774, которая обладает превосходной эффективностью в отношении фермента GLK и более благоприятными физическими свойствами, включая, например, большую растворимость в воде, большую проникающую способность и/или меньшее связывание с белками плазмы крови. Соответственно, можно ожидать, что такие соединения, обладающие балансом этих свойств, будут демонстрировать более высокие уровни свободного лекарственного средства в плазме крови и превосходящую эффективность in vivo после приема пероральной дозы, что определяют, например, по активности в тестах толерантности к перорально введенной глюкозе (OGTT). Таким образом, можно ожидать, что эта группа соединений обеспечит превосходящее воздействие при пероральном введении меньшей дозы и что она будет особенно подходящей для применения при лечении или профилактике заболевания или болезненного состояния, опосредованного GLK. Соединения по изобретению также могут обладать превосходящей силой и/или благоприятными физическими свойствами (как описано выше), и/или благоприятными профилями токсичности, и/или благоприятными метаболическими профилями по сравнению с другими активаторами GLK, известными в области техники, а также описанными в WO 03/015774.

Таким образом, в соответствии с первым аспектом изобретения предложено соединение формулы (I):

где R¹ выбран из фторметоксиметила, дифторметоксиметила и трифторметоксиметила;

R² представляет собой заместитель на атоме углерода кольца А и выбран из -C(O)NR⁴R⁵, -SO₂NR⁴R⁵, -S(O)_pR⁴ и НЕТ-2;

НЕТ-1 представляет собой 5- или 6-членное присоединенное по атому С гетероарильное кольцо, содержащее атом азота в положении 2 относительно атома азота амида, к которому присоединено это кольцо, и возможно 1 или 2 дополнительных кольцевых гетероатома, независимо выбранных из О, N и S, где это кольцо возможно замещено по доступному атому углерода или по атому азота кольца при условии, что он таким образом не кватернизирован, 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из R⁶;

НЕТ-2 представляет собой 4-, 5- или 6-членное присоединенное по атому С или атому N гетероциклильное кольцо, содержащее 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из О, N и S, где группа -CH₂- может быть возможно заменена группой -С(O)- и где атом серы в гетероциклическом кольце возможно может быть окислен до группы S(O) или S(O)₂, где это кольцо возможно замещено по доступному атому углерода или азота 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из R⁷;

R³ представляет собой заместитель по атому углерода кольца А и выбран из галогено;

R⁴ выбран из водорода, (1-4С)алкила [возможно замещенного 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из НЕТ-2, -OR⁵, -SO₂R⁵, (3-6С)циклоалкила (возможно замещенного 1 группой, выбранной из R⁷) и -C(O)NR⁵R⁵], (3-6С)циклоалкила (возможно замещенного 1 группой, выбранной из R⁷) и НЕТ-2;

R⁵ представляет собой атом водорода или (1-4С)алкил;

R⁶ независимо выбран из (1-4С)алкила, гидрокси(1-4С)алкила, (1-4С)алкокси(1-4С)алкила, (1-4С)алкил S(O)_р(1-4С)алкила, амино(1-4С)алкила, (1-4С)алкиламино(1-4С)алкила, ди(1-4С)алкиламино(1-4С)алкила и/или (для R⁶ в качестве заместителя по атому углерода) галогено;

R⁷ выбран из (1-4С)алкила, групп -С(O)(1-4С)алкил, -C(O)NR⁴R⁵, (1-4С)алкокси(1-4С)алкил, гидрокси(1-4С)алкил, -S(O)_pR⁵ и/или (для R⁷ в качестве заместителя по атому углерода) гидрокси и (1-4С)алкокси;

кольцо А представляет собой 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1, 2 или 3 кольцевых гетероатома, независимо выбранных из О, S и N, где кольцо возможно дополнительно замещено по доступному атому азота (при условии что он таким образом не кватернизирован) заместителем, выбранным из R⁸;

R⁸ выбран из (1-4С)алкила, (3-6С) циклоалкила, гидрокси(1-4С)алкила, (1-4С) алкокси (1-4С) алкила, группы -С(O)(1-4С) алкил, бензила и (1-4С)алкилсульфонила;

р равен (независимо в каждом случае) 0, 1 или 2;

n равен 0, 1 или 2;

или его соль.

Понятно, что когда R⁴ представляет собой (1-4С)алкил, замещенный -C(O)NR⁵R⁵, каждый R⁵ независимо выбран из водорода и (1-4С)алкила, и таким образом это определение R⁴ включает (но не ограничивается ими) (1-4С)алкил, замещенный -CONH₂, -CONHMe, -CONMe₂ или -CONMeEt.

Понятно, что когда соединение формулы (I) содержит более чем одно кольцо НЕТ-2, они могут быть одинаковыми или разными.

Понятно, что когда соединение формулы (I) содержит более чем одну группу R⁴, они могут быть одинаковыми или разными.

Понятно, что когда соединение формулы (I) содержит более чем одну группу R⁵, они могут быть одинаковыми или разными.

Понятно, что когда соединение формулы (I) содержит более чем одну группу R³, они могут быть одинаковыми или разными.

Похожее правило применяется ко всем другим группам и заместителям соединения формулы (I), как определено ранее.

Соединения формулы (I) могут образовывать соли, находящиеся в объеме изобретения. Фармацевтически приемлемые соли предпочтительны, хотя другие соли могут быть полезны, например, при выделении или очистке соединений.

В еще одном аспекте изобретение относится к соединениям формулы (I), определенным ранее, или к фармацевтически приемлемой соли.

В еще одном аспекте изобретение относится к соединениям формулы (I), определенным ранее, или к их пролекарству. Подходящие примеры пролекарств соединений формулы (I) представляют собой гидролизуемые in vivo сложные эфиры соединений формулы (I). Таким образом, в еще одном аспекте изобретение относится к соединениям формулы (I), определенным ранее, или к их гидролизуемому in vivo сложному эфиру.

В этом описании общий термин "алкил" включает алкильные группы с прямой и разветвленной цепью. Тем не менее ссылки на индивидуальные алкильные группы, такие как "пропил", являются специфическими только для прямоцепочечного варианта и ссылки на индивидуальные алкильные группы с разветвленной цепью, такие как трет-бутил, являются специфическими только для варианта с разветвленной цепью. Например "(1-4С)алкил" включает метил, этил, пропил, изопропил и трет-бутил. Аналогичное правило применяется к другим общим терминам.

Для того, чтобы избежать неопределенности, ссылка на группу НЕТ-1, содержащую атом азота в положении 2, относится к положению 2 относительно атома азота амида, к которому присоединена эта группа. Например, определение формулы (I) охватывает (но не ограничивается ими) следующие структуры:

Подходящие примеры НЕТ-1 как 5- или 6-членного присоединенного по С гетероарильного кольца, определенного ранее, включают тиазолил, изотиазолил, тиадиазолил, пиридил, пиразинил, пиридазинил, пиразолил, имидазолил, пиримидинил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил и триазолил.

Понятно, что НЕТ-2 может представлять собой насыщенное либо частично или полностью ненасыщенное кольцо.

Подходящие примеры НЕТ-2 включают азетидинил, фурил, тиенил, тиазолил, изотиазолил, тиадиазолил, пиридил, пиразинил, пиридазинил, пиразолил, имидазолил, пиримидинил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, морфолино, морфолинил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, тиоморфолинил, пирролил, пирролидинил, пирролидонил, 2,5-диоксопирролидинил, 1,1-диоксотетрагидротиенил, 2-оксоимидазолидинил, 2,4-диоксоимидазолидинил, 2-оксо-1,3,4-(4-триазолинил), 2-оксазолидинонил, 2-оксотетрагидрофуранил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, 1,1-диоксотиоморфолино, 1,3-диоксоланил, 1,2,4-триазолил, 1,2,3-триазолил, пиранил и 4-пиридонил.

Понятно, что НЕТ-2 может быть присоединен по любому подходящему доступному атому С или N, таким образом, например, НЕТ-2 как "имидазолил" включает 1-, 2-, 4- и 5-имидазолил.

Подходящие примеры кольца А, определенного ранее, включают тиенил, фурил, тиазолил, изотиазолил, тиадиазолил, пиридил, пиразинил, пиридазинил, пиразолил, имидазолил, пиримидинил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил и триазолил. Дополнительные подходящие примеры кольца А включают ароматические гетероциклы, где атом азота или серы кольца окислен, но ароматичность сохраняется, например пиридина N-оксид. Другие подходящие примеры кольца А включают тиазолил, пиридил, пиразинил, пиридазинил и пиримидинил.

Понятно, что приведенные выше подходящие значения для НЕТ-1, НЕТ-2 и кольца А могут быть возможно замещены, как определено ранее.

Понятно, что, когда определения гетероциклильных групп НЕТ-1, НЕТ-2 и кольца А охватывает гетероарильные или гетероциклильные кольца, которые могут быть замещены по атому азота, такое замещение может не приводить в результате к заряженным кватернизированным атомам азота или нестабильным структурам (таким как соединения N-галогено). Понятно, что определения НЕТ-1, НЕТ-2 и кольца А, как предполагают, не включают любые из связей O-O, O-S или S-S. Понятно, что определения НЕТ-1, НЕТ-2 и кольца А не включают нестабильные структуры.

Примеры (1-4С)алкила включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил и трет-бутил; примеры (1-4С)алкокси включают метокси, этокси, пропокси, изопропокси и трет-бутокси; примеры (3-6С)циклоалкила включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил; примеры галогено включают фторо, хлоро, бромо и йодо; примеры гидрокси(1-4С)алкила включают гидроксиметил, 1-гидроксиэтил, 2-гидроксиэтил, 2-гидроксипропил, 3-гидроксипропил, 1-гидроксиизопропил и 4-гидроксибутил; примеры группы (1-4С)алкокси (1-4С) алкил включают метоксиметил, этоксиметил, трет-бутоксиметил, 2-метоксиэтил, 2-этоксиэтил, метоксипропил, 2-метоксипролил и метоксибутил; примеры группы (1-4С)алкилS(O)_р(1-4С)алкил включают метилсульфинилметил, этилсульфинилметил, этилсульфинилэтил, метилсульфинилпропил, метилсульфинилбутил, метилсульфонилметил, этилсульфонилметил, этилсульфонилэтил, метилсульфонилпропил, метилсульфонилбутил, метилтиометил, этилтиометил, этилтиоэтил, метилтиопропил и метилтиобутил; примеры группы амино(1-4С)алкил включают аминометил, аминоэтил, 2-аминопролил, 3-аминопропил, 1-аминоизопропил и 4-аминобутил; примеры группы (1-4С)алкиламино(1-4С)алкил включают (N-метил)аминометил, (N-этил)аминометил, 1-((N-метил)амино)этил, 2-((N-метил)амино)этил, (N-этил)аминоэтил, (N-метил)аминопропил, и 4-((N-метил)амино)бутил, примеры группы ди(1-4С)алкиламино(1-4С)алкил включают диметиламинометил, метил(этил)аминометил, метил(этил)аминоэтил, (N,N-диэтил)аминоэтил, (N,N-диметил)аминопропил и (N,N-диметил)аминобутил; примеры группы (1-4С)алкиламин включают метиламино, этиламино, пропиламино, изопропиламино, бутиламино и трет-бутиламино; примеры группы ди(1-4С)алкиламино включают диметиламино, метил(этил)амино, диэтиламино, дипропиламино, диизопропиламино и дибутиламино; примеры группы -С(O)(1-4С) алкил включают метилкарбонил, этилкарбонил, пропилкарбонил и трет-бутилкарбонил; примеры группы (1-4С) алкилсульфонил включают метилсульфонил, этилсульфонил, изопропилсульфонил и трет-бутилсульфонил.

Понятно, что в той степени, в которой некоторые из соединений формулы (I), определенных выше, могут существовать в оптически активной или рацемической формах за счет одного или более чем одного асимметрического атома углерода, изобретение включает в своем определении любую такую оптически активную или рацемическую форму, обладающую свойством стимулировать GLK непосредственно или ингибировать взаимодействие GLK/GLKRP. Синтез оптически активных форм может быть осуществлен при помощи стандартных способов органической химии, хорошо известных в области техники, например путем синтеза из оптически активных исходных веществ или путем разделения рацемической формы. Кроме того, понятно, что некоторые соединения могут существовать в таутомерных формах, и что изобретение также относится к любой и каждой таутомерным формам соединений по изобретению, которые активируют GLK.

Кроме того, понятно, что некоторые соединения формулы (I) и их соли могут существовать в сольватированных, а также несольватированных формах, таких как, например, гидратированные формы. Понятно, что изобретение охватывает все такие сольватированные формы, активирующие GLK.

В одном из воплощений по изобретению предложены соединения формулы (I), в альтернативном воплощении предложены фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I), в еще одном альтернативном воплощении предложены гидролизуемые in vivo сложные эфиры соединений формулы (I) и в еще одном альтернативном воплощении предложены фармацевтически приемлемые соли гидролизуемых in vivo сложных эфиров соединений формулы (I).

Предпочтительные значения каждой вариабельной группы представляют собой следующие. Такие значения могут быть использованы, когда подходит, с любым из значений, определений, пунктов формулы изобретения, аспектов или воплощений, определенных ранее или далее. В частности, каждый может быть использован как индивидуальное ограничение самого широкого определения формулы (I). Кроме того, каждое из следующих значений может быть использовано в комбинации с одним или более чем одним из других следующих значений для ограничения самого широкого определения формулы (I).

(1) R¹ представляет собой фторметоксиметил или дифторметоксиметил.

(2) R¹ представляет собой фторметоксиметил, и конфигурация предпочтительно представляет собой (S), то есть боковая цепь представляет собой:

(3) R¹ представляет собой дифторметоксиметил, и конфигурация предпочтительно представляет собой (S), то есть боковая цепь представляет собой:

(4) R² представляет собой -C(O)NR⁴R⁵.

(5) R² представляет собой -SO₂NR⁴R⁵.

(6) R² представляет собой -S(O)_pR⁴.

(7) R² представляет собой НЕТ-2.

(8) R² представляет собой -C(O)NR⁴R⁵ или -SO₂NR⁴R⁵.

(9) R² находится в пара-положении относительно простой эфирной связи.

(10) n равен 0 или 1.

(11) n равен 0.

(12) n равен 1, R² находится в пара-положении относительно простой эфирной связи, R² находится в орто-положении относительно простой эфирной связи.

(13) n равен 1, R² находится в пара-положении относительно простой эфирной связи, R³ находится в мета-положении относительно простой эфирной связи.

(14) n равен 1.

(15) n равен 2.

(16) n равен 2, и оба R³ представляют собой галогено.

(17) n равен 2, и каждый R³ независимо представляет собой фторо или хлоро.

(18) n равен 2, R² находится в пара-положении относительно простой эфирной связи, R³ находится в орто-положении относительно простой эфирной связи.

(19) n равен 2, оба R³ представляют собой галогено, R² находится в пара-положении относительно простой эфирной связи, R³ находится в орто-положении относительно простой эфирной связи.

(20) n равен 2, оба R³ представляют собой галогено, R² находится в пара-положении относительно простой эфирной связи и один R³ находится в орто-положении относительно простой эфирной связи, а другой R³ находится в мета-положении относительно простой эфирной связи.

(21) R³ представляет собой хлоро или фторо.

(22) R³ представляет собой фторо.

(23) R³ представляет собой хлоро.

(24) n равен 2, и оба R³ представляют собой фторо.

(25) n равен 2, и один R³ представляет собой фторо, а другой представляет собой хлоро.

(26) р равен 0.

(27) р равен 1.

(28) р равен 2.

(29) НЕТ-1 представляет собой 5-членное гетероарильное кольцо.

(30) НЕТ-1 представляет собой 6-членное гетероарильное кольцо.

(31) НЕТ-1 замещен 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из R⁶.

(32) НЕТ-1 замещен 1 заместителем, выбранным из R⁶.

(33) НЕТ-1 не замещен.

(34) НЕТ-1 выбран из тиазолила, изотиазолила, тиадиазолила, пиридила, пиразинила, пиридазинила, пиразолила, имидазолила, пиримидинила, оксазолила, изоксазолила, оксадиазолила и триазолила.

(35) НЕТ-1 выбран из тиазолила, изотиазолила, тиадиазолила, пиразолила, имидазолила, оксазолила, изоксазолила и оксадиазолила.

(36) НЕТ-1 выбран из пиридила, пиразинила, пиридазинила и пиримидинила.

(37) НЕТ-1 представляет собой возможно замещенный пиразолил, например пиразолил или N-метилпиразолил.

(38) НЕТ-1 представляет собой пиридил или пиразинил.

(39) НЕТ-1 представляет собой пиразинил.

(40) НЕТ-1 выбран из пиразолила, N-метилпиразолила и метилпиразинила (такого как 5-метилпиразин-2-ил).

(41) НЕТ-1 представляет собой пиразолил (возможно замещенный этилом, изопропилом или 1 или 2 группами метил), тиазолил (возможно замещенный метилом), пиразинил (возможно замещенный метилом), пиридил (возможно замещенный фторо), изоксазолил (возможно замещенный метилом) и тиадиазолил (возможно замещенный метилом).

(42) НЕТ-1 представляет собой пиразолил (возможно замещенный этилом, изопропилом, дифторметилом или 1 или 2 группами метила), тиазолил (возможно замещенный метилом), пиразинил (возможно замещенный метилом), пиридил (возможно замещенный фторо), изоксазолил (возможно замещенный метилом) и тиадиазолил (возможно замещенный метилом).

(43) НЕТ-1 выбран из пиразинила (возможно замещенного метилом), пиразолила (возможно замещенного по атому углерода метилом), метилтиадиазолила (в частности, 1,2,4-тиадиазол-5-ила, конкретней 3-метил-1,2,4-тиадиазол-5-ила), тиазолила (возможно замещенного метилом), пиридила (возможно замещенного фторо) и изоксазолила.

(44) R⁶ выбран из (1-4С)алкила, галогено, гидрокси(1-4С)алкила, ди(1-4С)алкиламино(1-4С)алкила.

(45) R⁶ выбран из метила, этила, хлоро, фторо, гидроксиметила, метоксиметила, аминометила, N-метиламинометила, диметиламинометила.

(46) R⁶ выбран из метила, этила, хлоро, фторо, гидроксиметила и метоксиметила.

(47) R⁶ выбран из метила или этила.

(48) R⁶ представляет собой метил.

(49) R⁶ выбран из (1-4С)алкила и (1-4С)алкокси(1-4С)алкила.

(50) R⁶ выбран из метила, этила, изопропила и метоксиметила.

(51) когда присутствуют 2 заместителя R⁶, оба они выбраны из метила, этила, бромо, хлоро и фторо; предпочтительно оба представляют собой метил и по меньшей мере один находится по имеющемуся атому азота.

(52) R⁴ представляет собой атом водорода.

(53) R⁴ представляет собой (1-4С)алкил [замещенный 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из НЕТ-2, -OR⁵, -SO₂R⁵, (3-6С)циклоалкила (возможно замещенного 1 группой, выбранной из R⁷) и -C(O)NR⁵R⁵].

(54) R⁴ представляет собой (1-4С)алкил [замещенный 1 заместителем, выбранным из НЕТ-2, -OR⁵, -SO₂R⁵, (3-6С) циклоалкила и -C(O)NR⁵R⁵].

(55) R⁴ представляет собой (1-4С)алкил.

(56)R⁴ представляет собой (1-4С)алкил, замещенный -OR⁵.

(57) R⁴ представляет собой (1-4С)алкил, замещенный НЕТ-2.

(58) R⁴ представляет собой (3-6С)циклоалкил, в частности циклопропил или циклобутил.

(59) R⁴ представляет собой (3-6С)циклоалкил, замещенный группой, выбранной из R⁷.

(60) R⁴ представляет собой (3-6С)циклоалкил, замещенный группой, выбранной из -OR⁵ и (1-4С)алкила.

(61) R⁴ выбран из (1-4С)алкила и (3-6С)циклоалкила.

(62) R⁴ выбран из метила, этила, циклопропила и циклобутила.

(63) R⁴ представляет собой НЕТ-2.

(64) R⁴ выбран из водорода, (1-4С)алкила и (1-4С)алкила, замещенного -OR⁵.

(65) НЕТ-2 не замещен.

(66) НЕТ-2 замещен 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из (1-4С)алкила, гидрокси и (1-4С)алкокси.

(67) НЕТ-2 представляет собой полностью насыщенную кольцевую систему.

(68) НЕТ-2 представляет собой полностью ненасыщенную кольцевую систему.

(69) НЕТ-2 выбран из азетидинила, морфолино, морфолинила, пиперидинила, пиперазинила, 3-оксопиперазинила, тиоморфолинила, пирролидинила, пирролидонила, 2,5-диоксопирролидинила, 1,1-диоксотетрагидротиенила, 2-оксазолидинонила, 2-оксотетрагидрофуранила, тетрагидрофуранила, тетрагидропиранила, 1,1-диоксотиоморфолино, 1,3-диоксоланила, 2-оксоимидазолидинила, 2,4-диоксоимидазолидинила, пиранила и 4-пиридонила.

(70) НЕТ-2 выбран из азетидинила, морфолино, морфолинила, пиперидинила, пиперазинила, пирролидинила, тиоморфолинила, тетрагидрофуранила и тетрагидропиранила.

(71) НЕТ-2 выбран из фурила, тиенила, тиазолила, изотиазолила, тиадиазолила, пиридила, пиразинила, пиридазинила, пиразолила, имидазолила, пиримидинила, оксазолила, изоксазолила, оксадиазолила, пирролила, 1,2,4-триазолила и 1,2,3-триазолила.

(72) НЕТ-2 выбран из фурила, тиенила, тиазолила, изотиазолила, тиадиазолила, пиридила, имидазолила, пиримидинила, оксазолила, изоксазолила, оксадиазолила, пиперидинила, пиперазинила, 3-оксопиперазинила, пирролидинила, пирролидонила, 2-оксазолидинонила, тетрагидрофуранила, тетрагидропиранила, 1,1-диоксотетрагидротиенила и 2-оксоимидазолидинила.

(73) НЕТ-2 выбран из морфолино, фурила, имидазолила, оксазолила, изоксазолила, оксадиазолила, пиперидинила, пиперазинила, 3-оксопиперазинила, пирролидинила, 2-пирролидонила, 2-оксазолидинонила, тетрагидрофуранила, тетрагидропиранила, 1,1-диоксотетрагидротиенила и 2-оксоимидазолидинила.

(74) НЕТ-2 выбран из морфолино, фурила, имидазолила, изоксазолила, оксадиазолила, пиперидинила, пиперазинила, 3-оксопиперазинила, пирролидинила, 2-пирролидонила, тетрагидропиранила, 1,1-диоксотетрагидротиенила и 2-оксоимидазолидинила.

(75) НЕТ-2 представляет собой оксадиазолил или пиразолил.

(76) R⁵ представляет собой водород.

(77) R⁵ представляет собой (1-4)алкил, предпочтительно метил.

(78) R³ представляет собой водород или метил.

(79) R⁷ представляет собой заместитель по атому углерода и выбран из гидрокси, (1-4С)алкокси, (1-4С)алкил, групп -С(O)(1-4С)алкил, -C(O)NR⁴R⁵, (1-4С)алкокси(1-4С)алкил и гидрокси(1-4С)алкил.

(80) R⁷ представляет собой заместитель по атому углерода и выбран из гидрокси, (1-4С)алкокси, (1-4С)алкила, групп -С(O)(1-4С)алкил, -C(O)NR⁴R⁵ и гидрокси(1-4С)алкил.

(81) R⁷ представляет собой заместитель по атому углерода и выбран из гидрокси, метокси, -СОМе, -CONH₂, -CONHMe, -CONMe₂ и гидроксиметила.

(82) R⁷ представляет собой заместитель по атому углерода и выбран из (1-4С)алкила, гидрокси и (1-4С)алкокси.

(83) R⁷ представляет собой заместитель по атому углерода и выбран из метила, этила, метокси и гидрокси.

(84) R⁷ представляет собой заместитель по атому азота и выбран из (1-4С)алкила, групп -С(O)(1-4С)алкил, -C(O)NR⁴R⁵, (1-4С)алкокси(1-4С)алкил и гидрокси(1-4С)алкил.

(85) R⁷ представляет собой заместитель по атому азота и выбран из (1-4С)алкила, гидрокси и (1-4С)алкокси.

(86) R⁷ представляет собой метил.

(87) R⁸ выбран из метила, гидрокси, метокси, -CONH₂, -CONHMe, -CONMe₂, гидроксиметила, гидроксиэтила, -NHMe и -NMe₂.

(88) R⁸ выбран из метила, -CONH₂, гидроксиэтила и гидрокси.

(89) R⁸ выбран из (1-4С)алкила и (1-4С)алкокси.

(90) R⁸ выбран из метила, метокси и изопропокси.

(91) R⁸ представляет собой метил.

(92) R⁹ выбран из метила, гидрокси, метокси, -CONH₂, -CONHMe, -CONMe₂, гидроксиметила, гидроксиэтила, -NHMe и -NMe₂.

(93) R⁹ представляет собой метил.

(94) НЕТ-2 представляет собой 5-членное кольцо.

(95) НЕТ-2 представляет собой 6-членное кольцо.

(96) НЕТ-2 выбран из тиенила, фурила, тиазолила, изотиазолила, тиадиазотила, пиридила, пиразинила, пиридазинила, пиразолила, имидазолила, пиримидинила, оксазолила, изоксазолила и оксадиазолила.

(97) НЕТ-2 выбран из тиенила, фурила, тиадиазолила, пиридила, пиразинила, пиридазинила, пиразолила, имидазолила, пиримидинила и оксадиазолила.

(98) НЕТ-2 выбран из пиридила, пиразинила, тиазолила и тиенила.

(99) НЕТ-2 выбран из пиридила, пиразинила и тиазолила.

(101) НЕТ-2 выбран из пиридила, пиразинила, пиридазинила и тиазолила.

(102) НЕТ-2 выбран из пиридила и пиразинила.

(103) НЕТ-2 представляет собой пиразинил.

(104) НЕТ-2 не замещен по атому азота.

(105) НЕТ-2 имеет один заместитель по атому азота, выбранный из R⁸.

(106) R⁸ представляет собой (1-4С)алкил.

(107) R⁸ представляет собой (3-6С)циклоалкил.

(108) R⁸ представляет собой гидрокси(1-4С)алкил или (1-4С)алкокси(1-4С)алкил.

(109) R⁸ представляет собой -С(O)(1-4С)алкил.

(110) R⁸ представляет собой бензил.

(111) R⁸ представляет собой (1-4С)алкилсульфонил.

(112) R⁸ представляет собой (1-4С)алкил или бензил.

В соответствии с еще одним воплощением изобретения предложены следующие предпочтительные группы соединений по изобретению.

В одном из аспектов изобретения предложено соединение формулы (I) или его соль, где

R¹ выбран из фторметоксиметила и дифторметоксиметила (в частности, дифторметоксиметила);

R² выбран из -C(O)NR⁴R⁵, -SO₂NR⁴R⁵ и -SO_pR⁴;

кольцо А представляет собой пиридил или пиразинил;

R³ выбран из фторо и хлоро;

n равен 0 или 1;

НЕТ-1 выбран из пиразолила (возможно замещенного этилом, изопропилом, дифторметилом или 1 или 2 метилами), тиазолила (возможно замещено метилом), пиразинила (возможно замещенного метилом), пиридила (возможно замещенного фторо), изоксазолила (возможно замещенного метилом) и тиадиазолила (возможно замещенного метилом);

R⁴ представляет собой водород или (1-4С)алкил;

R³ представляет собой водород или (1-4С)алкил;

р равен 0,1 или 2, в частности 2.

В еще одном аспекте избретения предложено соединение формулы (I) или его соль, где

R¹ выбран из фторметоксиметила и дифторметоксиметила (в частности, дифторметоксиметила);

R² выбран из -C(O)NR⁴R⁵ и -SO_pR⁴;

кольцо А представляет собой пиридил или пиразинил;

R³ выбран из фторо и хлоро;

n равен 0 или 1;

НЕТ-1 выбран из пиразолила (возможно замещенного метилом) и пиразинила (возможно замещенного метилом);

R⁴ представляет собой (1-4С)алкил;

R⁵ представляет собой водород или (1-4С)алкил;

р равен 0,1 или 2, в частности 2.

В еще одном аспекте избретения предложено соединение формулы (I) или его соль, где

R¹ выбран из фторметоксиметила и дифторметоксиметила (в частности, дифторметоксиметила);

R² выбран из -C(O)NR⁴R⁵ и -SO_pR⁴;

кольцо А представляет собой пиридил или пиразинил;

R³ выбран из фторо и хлоро;

n равен 0 или 1;

НЕТ-1 выбран из пиразолила (возможно замещенного метилом) и пиразинила (возможно замещенного метилом);

R⁴ представляет собой метил;

R⁵ представляет собой водород или метил;

р равен 0,1 или 2, в частности 2.

Дополнительные предпочтительные соединения по изобретению представляют собой каждое из соединений из Примеров, каждый из которых представляет еще один независимый аспект изобретения. В других аспектах настоящее изобретение также включает любые два или более чем два соединения из Примеров.

Конкретные соединения по изобретению включают любое одно или более чем одно из:

3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-N-(5-метилпиразин-2-ил)-5-(6-метилсульфонилпиридин-3-ил)оксибензамида;

5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида;

5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-(1Н-пиразол-3-илкарба-моил)фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида;

3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-(6-метилсульфонилпиридин -3-ил)окси-N-(1Н-пиразол-3-ил)бензамида;

5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(1-метилпиразол-3-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида;

3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-N-(1-метилпиразол-3-ил)-5-(6-метилсульфонилпиридин-3-ил)оксибензамида:

или его соль.

Соединения по изобретению могут быть введены в форме пролекарства. Пролекарство представляет собой биопредшественник или фармацевтически приемлемое соединение, разрушаемое в организме с образованием соединения по изобретению (такое как сложный эфир или амид соединения по изобретению, в частности гидролизуемый in vivo сложный эфир). Различные формы пролекарств известны в области техники. Примеры таких производных пролекарств смотри в:

a) Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard, (Elsevier, 1985) и Methods in Enzymology, Vol.42, p.309-396, edited by K. WIdder et al. (Academic Press, 1985);

б) A Textbook of Drug Design and Development, edited by Krogsgaard-Larsen;

в) H.Bundgaard, Chapter 5 "Design and Application of Prodrugs", by H.Bundgaard p.113-191 (1991);

г) H.Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8,1-38 (1992);

д) H.Bundgaard et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988); и

е) N.Kakeya et al., Chem Pharm Bull, 32, 692 (1984).

Содержание цитированных выше документов включено здесь путем ссылки.

Примеры пролекарств представляют собой следующие. Гидролизуемый in vivo сложный эфир соединения по изобретению, содержащий карбокси- или гидрокси-группу, представляет собой, например, фармацевтически приемлемый сложный эфир, который гидролизуется в организме человека или животного с получением родительской кислоты или спирта. Подходящие фармацевтически приемлемые сложные эфиры для карбокси включают C₁-С₆ алкоксиметильные эфиры, например метоксиметильный, C₁-С₆ алканоилоксиметильные эфиры, например пивалоилоксиметильный, фталидильные эфиры, С₃-С₈ циклоалкоксикарбонилокси С₁-С₆ алкильные эфиры, например 1-циклогексилкарбонилоксиэтильный; 1,3-диоксолен-2-онилметильные эфиры, например 5-метил-1,3-диоксолен-2-онилметильный; и C₁-С₆ алкоксикарбонилоксиэтильные эфиры.

Гидролиэуемый in vivo сложный эфир соединения по изобретению, содержащий гидроксигруппу, включают неорганические эфиры, такие как фосфатные эфиры (включая фосфорамидные циклические эфиры) и α-ацилоксиалкильные простые эфиры и родственные соединения, которые в результате гидролиза in vivo сложного эфира расщепляются с образованием родительской(их) гидроксильной(ых) группы(групп). Примеры α-ацилоксиалкильных простых эфиров включают ацетоксиметокси и 2,2-диметилпропионилоксиметокси. Выбор групп, образующих гидролизуемый in vivo сложный эфир для гидрокси включают алканоил, бензоил, фенилацетил и замещенный бензоил и фенилацетил, алкоксикарбонил (с получением алкилкарбонатных сложных эфиров), диалкилкарбамоил и N-(диалкиламиноэтил)-N-алкилкарбамоил (с получением карбаматов), диалкиламиноацетил и карбоксиацетил.

В определенных условиях соединения формулы (I) могут образовывать фармацевтически приемлемые соли. Подходящая фармацевтически приемлемая соль соединения по изобретению представляет собой, например, соль присоединения кислоты соединения по изобретению, которое является достаточно основным, например соль присоединения кислоты, например, с неорганической или органической кислотой, например соляной, бромистоводородной, серной, фосфорной, трифторуксусной, лимонной или малеиновой кислотой. Понятно, что соль присоединения кислоты может быть образована с любой достаточно основной группой, которая, например, может находиться в НЕТ-1 или может, например, представлять собой заместитель R². Дополнительно подходящая фармацевтически приемлемая соль соединения по изобретению, которое является достаточно кислотным, представляет собой соль щелочного металла, например соль натрия или калия, соль щелочноземельного металла, например соль кальция или магния, соль аммония или соль с органическим основанием, которое обеспечивает физиологически-приемлемый катион, например соль с метиламином, диметиламином, триметиламином, пиперидином, морфолином или трис-(2-гидроксиэтил)амином.

Еще одним аспектом изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая определенное выше соединение формулы (I) или его фармацевтически-приемлемую соль вместе с фармацевтически-приемлемым разбавителем или носителем.

В соответствии с еще одним аспектом изобретения предложено определенное выше соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве лекарственного средства.

В соответствии с еще одним аспектом изобретения предложено определенное выше соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве лекарственного средства для лечения заболевания, опосредованного GLK, в частности диабета 2 типа.

Кроме того, в соответствии с изобретением предложено применение соединения Формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для лечения заболевания, опосредованного GLK, в частности диабета 2 типа.

Соединение подходящим образом приготовлено в виде фармацевтической композиции для применения таким образом.

В соответствии с еще одним аспектом настоящего изобретения предложен способ лечения заболеваний, опосредованных GLK, в частности диабета, путем введения эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении.

В соответствии с еще одним аспектом настоящего изобретения предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, для лечения заболевания, опосредованного GLK.

В соответствии с еще одним аспектом настоящего изобретения предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для лечения диабета 2 типа.

Конкретные заболевания, которые можно лечить при помощи соединения или композиции по изобретению, включают снижение уровня глюкозы в крови при диабете 2 типа без серьезного риска гипогликемии (и потенциально для лечения типа 1), дислипидемию, ожирение, инсулинорезистентность, метаболический синдром X, нарушение толерантности к глюкозе.

Как обсуждалось выше, таким образом, система GLK/GLKRP может быть описана как потенциальная мишень для "диажирения" (благоприятно при сахарном диабете и ожирении). Таким образом, в соответствии с еще одним аспектом изобретения предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для использования в комбинированном лечении или профилактике, в частности лечении диабета и ожирения.

В соответствии с еще одним аспектом изобретения предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для использования в лечении или профилактике ожирения.

В соответствии с еще одним аспектом изобретения предложен способ комбинированного лечения ожирения и диабета путем введения эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении.

В соответствии с еще одним аспектом изобретения предложено определенное выше соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве лекарственного средства для лечения или профилактики, в частности лечения ожирения.

В соответствии с еще одним аспектом изобретения предложен способ лечения ожирения путем введения эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении.

Соединения по изобретению могут быть особенно подходящими для применения в качестве фармацевтических средств, например, в силу благоприятных физических и/или фармакокинетических свойств и/или профиля токсичности.

Композиции по изобретению могут находиться в форме, подходящей для перорального применения (например, в виде таблеток, лепешек, твердых или мягких капсул, водных или масляных суспензий, эмульсий, диспергируемых порошков или гранул, сиропов или эликсиров), для местного применения (например в виде кремов, мазей, гелей или водных, или масляных растворов, или суспензий), для введения путем ингаляции (например, в виде тонкоизмельченного порошка или жидкого аэрозоля), для введения путем вдувания (например, в виде тонкоизмельченного порошка) или для парентерального введения (например, в виде стерильного водного или масляного раствора для внутривенного, подкожного, внутримышечного введения дозы или в виде суппозитория для ректального введения дозы). Предпочтительны лекарственные формы, подходящие для перорального применения.

Композиции по изобретению могут быть приготовлены при помощи обычных способов с использованием обычных фармацевтических эксципиентов, хорошо известных в области техники. Таким образом, композиции, предназначенные для перорального применения, могут содержать, например, один или более чем один краситель, подсластитель, корригент и/или консервант.

Подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты для приготовления таблеток включают, например, инертные разбавители, такие как лактоза, карбонат натрия, фосфат кальция или карбонат кальция, гранулирующие агенты и разрыхлители, такие как кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связывающие агенты, такие как крахмал; смазывающие агенты, такие как стеарат магния, стеариновая кислота или тальк: консерванты, такие как этил- или пропил-пара-гидроксибензоат, и антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота. Препараты в виде таблеток могут быть непокрытыми или покрытыми для модификации их распадаемости и последующей абсорбции активного ингредиента в желудочно-кишечном тракте, или для улучшения их стабильности, и/или проявления, в любом случае, с использованием обычных покрывающих агентов и способов, хорошо известных в области техники.

Композиции для перорального применения могут находиться в форме твердых желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем, например карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином, или в форме мягких желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с водой или маслом, таким как арахисовое масло, жидкий парафин или оливковое масло.

Водные суспензии, как правило, содержат активный ингредиент в форме высокодисперсного порошка вместе с одним или более чем одним суспендирующим агентом, таким как карбоксиметилцеллюлоза натрия, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и аравийская камедь; диспергирующим агентом или увлажнителем, таким как лецитин или продукты конденсации алкиленоксида с жирными кислотами (например, полиоксиэтиленстеарат), или продукты конденсации этиленоксида с длинноцепочечными алифатическими спиртами, например гептадекаэтиленоксицетанолом, или продукты конденсации этиленоксида с неполными сложными эфирами, полученными из жирных кислот и гексита, такие как полиоксиэтилена сорбита моноолеат, или продукты конденсации этиленоксида с длинноцепочечными алифатическими спиртами, например гептадекаэтиленоксицетанол, или продукты конденсации этиленоксида с неполными сложными эфирами, полученными из жирных кислот и гексита, такие как полиоксиэтилена сорбита моноолеат, или продукты конденсации этиленоксида с неполными сложными эфирами, полученными из жирных кислот, и ангидридов гексита, например полиэтилена сорбитана моноолеат. Водные суспензии также могут содержать один или более чем один консервант (такой как этил- или пропил-пара-гидроксибензоат, антиоксиданты (такие как аскорбиновая кислота), красители, корригенты и/или подсластители (такие как сахароза, сахарин или аспартам).

Масляные суспензии могут быть приготовлены путем суспендирования активного ингредиента в растительном масле (таком как арахисовое масло, оливковое масло, кунжутное масло или кокосовое масло) или в минеральном масле (таком как жидкий парафин). Масляные суспензии также могут содержать загуститель, такой как пчелиный воск, твердый парафин или цетиловый спирт. Могут быть добавлены подсластители, такие как изложенные выше, и корригенты с получением приятного для перорального введения препарата. Эти композиции могут быть консервированы путем добавления антиоксиданта, такого как аскорбиновая кислота.

Диспергируемые порошки и гранулы, подходящие для приготовления водной суспензии путем добавления воды, как правило, содержат активный ингредиент вместе с диспергирующим агентом или увлажнителем, суспендирующим агентом и одним или более чем одним консервантом. Примеры подходящих диспергирующих агентов или увлажнителей и суспендирующих агентов упомянуты выше. Также могут присутствовать дополнительные эксципиенты, такие как подсластители, корригенты и красители.

Фармацевтические композиции по изобретению также могут находиться в форме эмульсий масло в воде. Масляная фаза может представлять собой растительное масло, такое как оливковое масло или арахисовое масло, или минеральное масло, такое как, например, жидкий парафин или их смесь. Подходящие эмульгаторы могут представлять собой, например, смолы природного происхождения, такие как аравийская камедь или трагакантовая камедь, фосфатиды природного происхождения, такие как соевые бобы, лецитин, сложные эфиры или неполные сложные эфиры, полученные из жирных кислот и ангидридов гексита (например, сорбитана моноолеат) и продукты конденсации указанных неполных сложных эфиров с этиленоксидом, такие как полиоксиэтилена сорбита моноолеат. Эмульсии также могут содержать подсластители, корригенты и консерванты.

Сиропы и эликсиры могут быть приготовлены с подсластителями, такими как глицерин, пропиленгликоль, сорбит, аспартам или сахароза, и также могут содержать уменьшающее раздражение средство, консервант, корригент и/или краситель.

Фармацевтические композиции также могут находиться в форме стерильной инъецируемой водной или масляной суспензии, которая может быть приготовлена в соответствии с известными способами с использованием одного или более чем одного подходящего диспергирующего агента или увлажнителя и суспендирующего агента, которые упомянуты выше. Стерильный инъецируемый препарат также может представлять собой стерильный инъецируемый раствор или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например раствор в 1,3-бутандиоле.

Композиции для введения путем ингаляции могут находиться в форме обычного аэрозоля под давлением, предназначенного для распыления активного ингредиента в виде аэрозоля, содержащего тонкоизмельченное твердое вещество или жидкие капли. Могут быть использованы обычные аэрозольные пропелленты, такие как летучие фторированные углеводороды или углеводороды, а аэрозольное устройство для удобства предназначено для распыления отмеренного количества активного ингредиента.

Дополнительную информацию относительно препарата читатель может найти в главе 25.2 в томе 5 в Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press, 1990.

Количество активного ингредиента, которое комбинируют с одним или более чем одним эксципиентом с получением единичной лекарственной формы, варьирует в зависимости от объекта, который лечат, и конкретного пути введения. Например, препарат, предназначенный для перорального введения людям, как правило, содержит, например от 0,5 мг до 2 г активного агента, приготовленного с подходящим и удобным количеством эксципиентов, которое может варьировать от приблизительно 5 до приблизительно 98 мас.% от массы всей композиции. Стандартные лекарственные формы, как правило, содержат от приблизительно 1 мг до приблизительно 500 мг активного ингредиента. Дополнительную информацию о путях введения и схемах приема лекарственного средства читатель может найти в главе 25.3 в томе 5 в Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990.

Величина дозы соединения формулы (I) для терапевтических или профилактических задач, как правило, варьирует в соответствии с природой и тяжестью состояний, возраста и пола животного или пациента и пути введения в соответствии с хорошо известными принципами медицины.

При использовании соединения формулы (I) для терапевтических или профилактических задач его, как правило, вводят таким образом, что суточная доза находится в диапазоне, например от 0,5 мг до 75 мг на 1 кг массы организма, при необходимости она может быть введена дробными дозами. Как правило, меньшие дозы вводят при использовании парентерального пути. Таким образом, например, для внутривенного введения, как правило, используют дозу, находящуюся в диапазоне, например от 0,5 мг до 30 мг 1 на кг массы тела. Аналогично для введения путем ингаляции используют дозу, находящуюся в диапазоне, например от 0,5 мг до 25 мг 1 на кг массы тела. Тем не менее, предпочтительно пероральное введение.

Описанное здесь увеличение активности GLK может быть применено в виде самостоятельной терапии или в комбинации с одним или более чем одним другим веществом и/или способом лечения для состояния, которое лечат. Такое совместное лечение может быть достигнуто при помощи одновременного, последовательного или раздельного введения индивидуальных компонентов лечения. Одновременное лечение может быть осуществлено посредством единой таблетки или в отдельных таблетках. Например, при лечении сахарного диабета химиотерапия может включать следующие основные категории лечения:

1) инсулин и инсулиновые аналоги;

2) вещества, усиливающие секрецию инсулина, включающие сульфонилмочевины (например, глибенкламид, глипизид), регуляторы уровня глюкозы после еды (например, репаглинид, натеглинид);

3) агенты, улучшающие действие инкретина (например, ингибиторы дипептидилпептидазы IV и агонисты GLP-1);

4) агенты, увеличивающие чувствительность к инсулину, включая агонистов PPAR (рецепторы активации пролиферации пероксисом)-гамма (например, пиоглитазон и розиглитазон), и агенты, обладающие комбинированной PPAR-альфа и -гамма активностью;

5) агенты, которые модулируют баланс глюкозы в печени (например, метформин, ингибиторы фруктозо-1,6-бисфосфатазы, ингибиторы гликогенфосфорилазы, ингибиторы киназы гликогенсинтазы);

6) агенты, разработанные для уменьшения абсорбции глюкозы из кишечника (например, акарбоза);

7) агенты, предотвращающие реабсорбцию глюкозы почкой (ингибиторы SGLT (натрий-зависимый переносчик глюкозы));

8) агенты, разработанные для лечения осложнений пролонгированной гипергликемии (например, ингибиторы редуктазы альдозы);

9) агенты против ожирения (например, сибутрамин и орлистат);

10) агенты против дислипидемии, такие как ингибиторы HMG (3-гидрокси-3-метил-глутарил)-СоА-редуктазы (например, статины); агонисты PPARα (фибраты, например гемфиброзил); вещества, усиливающие экскрецию желчных кислот (холестирамин); ингибиторы абсорбции холестерина (растительные станолы, синтетические ингибиторы); ингибиторы абсорбции желчных кислот (IBATi) и никотиновая кислота и аналоги (ниацин и препараты с замедленным высвобождением);

11) антигипертензивные агенты, такие как β-блокаторы (например, атенолол, индерал); ингибиторы АСЕ (ацетилхолинэстеразы) (например, лизиноприл); антагонисты кальция (например, нифедипин); антагонисты рецептора ангиотензина (например, кандесартан), α антагонисты и диуретические агенты (например, фуросемид, бензотиазид);

12) модуляторы гемостаза, такие как антитромботические агенты, активаторы фибринолиза и противотромбоцитарные агенты; тромбиновые антагонисты; ингибиторы фактора Ха; ингибиторы фактора VIIa); противотромбоцитарные агенты (например, аспирин, клопидогрел); антикоагулянты (гепарин и низкомолекулярные аналоги, гирудин) и варфарин;

13) агенты, оказывающие антагонистическое действие в отношении глюкагона, и

14) противовоспалительные агенты, такие как нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (например, аспирин) и стероидные противовоспалительные средства (например, кортизон).

В соответствии с еще одним аспектом настоящего изобретения предложены индивидуальные соединения, получаемые в качестве конечных продуктов в Примерах, изложенных ниже, и их соли.

Соединение по изобретению или его соль могут быть получены при помощи любого из способов, известных как применимые для получения таких соединений или структурно родственных соединений. Функциональные группы могут быть защищены, и защита может быть удалена с использованием обычных способов. Примеры защитных групп, таких как защитные группы амино и карбоновой кислоты (а также средства для образования и возможного удаления защиты) смотри в T.W.Greene and P.G.M. Wins, "Protective Groups in Organic Synthesis", Second Edition, John Wiley & Sons, New York, 1991.

Способы синтеза соединений формулы (I) предложены в качестве еще одного аспекта изобретения. Таким образом, в соответствии с еще одним аспектом изобретения предложен способ получения соединения формулы (I), включающий способ (а)-(е) (где, если не определено иное, переменные являются такими, как определено ранее для соединений формулы (I)):

(а) взаимодействие кислоты формулы (III) или ее активированного производного с соединением формулы (IV), где R¹ является таким, как определено для формулы (I), или представляет собой предшественник;

или (b) взаимодействие соединения формулы (V) с соединением формулы (VI)

где Х¹ представляет собой уходящую группу, а Х² представляет собой гидроксильную группу либо Х¹ представляет собой гидроксильную группу, а Х² представляет собой уходящую группу, и где R¹ является таким, как определено для формулы (I), или представляет собой предшественник;

способ (b) также может быть осуществлен с использованием промежуточного сложного эфира формулы (VII), где Р¹ представляет собой защитную группу, описанную ниже, с последующим гидролизом сложного эфира и образованием амида посредством способов, описанных в других источниках и хорошо известных специалистам в данной области техники;

или (с) взаимодействие соединения формулы (VIII) с соединением формулы (IX)

где Х³ представляет собой уходящую группу или металлоорганический реагент, а Х⁴ представляет собой гидроксильную группу либо Х³ представляет собой гидроксильную группу и X⁴ представляет собой уходящую группу или металлоорганический реагент, и где R¹ является таким, как определено для формулы (I), или представляет собой предшественник;

способ (с) также может быть осуществлен с использованием промежуточного сложного эфира формулы (X) с последующим гидролизом сложного эфира и образованием амида посредством способов, описанных в других источниках и хорошо известных специалистам в данной области техники;

или

(d) взаимодействие соединения формулы (XI) с соединением формулы (XII)

где Х⁵ представляет собой уходящую группу и где R¹ является таким, как определено для формулы (I), или представляет собой предшественник; или

e) взаимодействие соединения формулы (XIII)

где R^2a представляет собой предшественник для R², представляющего собой -CONR⁴R⁵ или -SO₂R⁴R⁵, такой как карбоновая кислота, сложный эфир или ангидрид (для R²=-CONR⁴R³), либо эквиваленты сульфоновой кислоты (для R², представляющего собой -SO²NR⁴R⁵); с амином формулы -NR⁴R⁵;

и затем, если необходимо:

1) превращение соединения формулы (I) в другое соединение формулы (I);

2) превращение предшественника R¹ в R¹;

3) удаление любых защитных групп и/или

4) образование его соли.

Подходящие уходящие группы Х¹-Х³ для способов (b)-(d) представляют собой любую уходящую группу, известную в области техники для этих типов взаимодействий, например галогено, алкокси, трифторметансульфонилокси, метансульфонилокси или пара-толуолсульфонилокси, или группу (такую как гидроксильная группа), которая может быть превращена в уходящую группу (такую как окситрифенилфосфониевая группа) in situ.

Подходящие предшественники для R¹ включают гидроксильную группу или защищенную гидроксильную группу, такую как любая подходящим образом защищенная гидроксильная группа, известная в области техники, например простые эфиры, такие как метиловый эфир, или силиловые эфиры, такие как -OSi[(1-4С)алкил]₃ (где каждая (1-4С)алкильная группа независимо выбрана из метила, этила, пропила, иэопропила и трет-бутила). Примеры таких триалкилсилильных групп представляют собой триметилсилил, триэтилсилил, триизопропилсилил и трет-бутилдиметилсилил. Дополнительные подходящие силильные простые эфиры представляют собой эфиры, содержащие фенильные и замещенные фенильные группы, такие как -Si(PhMe₂) и -Si(ToIMe₂) (где ToI = метилбензол). Дополнительные подходящие значения защитных групп для гидрокси приведены далее. Сам R¹ затем может быть получен путем удаления защитной группы для гидрокси, если она присутствует, и затем путем взаимодействия с, например, 2-(фторсульфонил)дифторуксусной кислотой в присутствии йодида меди (I) с получением соединения, где R¹ представляет собой дифторметоксиметил. Это взаимодействие проиллюстрировано на Схеме 1. Другие значения R¹ могут быть получены по аналогии или при помощи способов, хорошо известных в области техники, смотри, например Bull. Chem. Soc. Japan, 73 (2000), 471-484, 471-484, международную заявку на патент WO 2002/050003 и Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, (2001), 11, 407.

Соединения формул (III)-(XII) имеются в продаже или известны в области техники, или могут быть получены при помощи способов, известных в области техники, например представленных в сопутствующих Примерах. Дополнительную информацию о способах получения таких соединений можно найти в публикациях заявок РСТ авторов изобретения WO 03/000267, WO 03/015774, WO 03/000262, WO 2004/076420, WO 2005/054200, WO 2005/054233, WO 2005/044801 и WO 2005/056530 и приведенных в них ссылках. В общем понятно, что любая связь арил-O или алкил-O может быть образована путем нуклеофильного замещения или при помощи катализируемых металлами способов, возможно в присутствии подходящего основания.

Соединения формулы (XIII) могут быть получены при помощи таких способов, как представленные в способах (a)-(d), и/или при помощи способов, упомянутых выше для соединений формул (III)-(XII).

Соединения формул (III), (IX), (X), (XI) и (XIII) могут быть получены путем взаимодействия подходящих предшественников с соединениями формулы (V) или их производными в зависимости от природы группы R¹ или ее предшественника, например, путем нуклеофильного замещения уходящей группы Х¹ в соединении формулы (V). Соединения формулы (V), как правило, имеются в продаже или могут быть получены путем простых взаимопревращений функциональных групп из имеющихся в продаже соединений, или при помощи описанных в литературе способов. Когда соединение формулы (V) содержит предшественник R¹, группа R¹ может быть превращена в соединение формулы (III), (IX), (X), (XI) или (XIII) соответствующим образом с использованием таких взаимодействий, как взаимодействия, проиллюстрированные на Схемах 1 и 2 ниже. Иллюстративные примеры изображены на Схемах 1 и 2 ниже, и/или в сопутствующих примерах.

где PG представляет собой защитную группу и R², R³, A, n и НЕТ-1 являются такими, как определено для формулы (I).

где R², R³, А и n являются такими, как определено для формулы (I), Р¹ и Р² представляют собой подходящие защитные группы, например (1-4С)алкил, и Х³ представляет собой уходящую группу, например хлоро. Подходящие условия взаимодействия для Стадий (i)-(v) на Схеме 2 являются следующими.

Стадия (i) включает взаимодействие соединения формулы (XIV) с соединением формулы (VIII), например 5-хлор-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамидом, в присутствии подходящего основания, например карбоната цезия, в подходящем растворителе, например DMSO, и при подходящей температуре, например от 0 до 60°С, более подходящим образом приблизительно при 50°С.

Стадия (ii) включает взаимодействие соединения формулы (VII) с R-спиртом, например (2R)-1-[(2-метилпропан-2-ил)окси]пропан-2-олом, в присутствии подходящего фосфина, например трифенилфосфина, и азодикарбоксилата, например диэтилазодикарбоксилата, в подходящем растворителе, например THF, и при подходящей температуре, например от 0 до 10°С, более подходящим образом приблизительно 0°С.

Стадия (iii) включает нагревание раствора соединения формулы (XV) в подходящей кислоте, например муравьиной кислоте, при подходящей температуре, например от 0 до 50, до 100°С, предпочтительно при приблизительно 90°С.

Стадия (iv) включает взаимодействие соединения формулы (XVI) с 2,2-дифтор-2-фторсульфонилуксусной кислотой в присутствии подходящего катализатора, например йодида меди (I), в подходящем растворителе, например ацетонитриле, и при подходящей температуре, например от 0 до 100°С, более предпочтительно при приблизительно 55°С.

Стадия (v) включает взаимодействие соединения формулы (XVIIa) с подходящим основанием, например NaOH, в подходящем растворителе, например NMP и воде, и при подходящей температуре, например от 0 до 25°С, предпочтительно при приблизительно 0°С.

Альтернативно соединения формулы (IIIa), где R¹ представляет собой дифторметоксиметил, могут быть получены в соответствии со Схемой 3, как изображено ниже.

где R², R³, А и n являются такими, как определено для формулы (I), Р¹ и Р² представляют собой подходящие защитные группы, например (1-4С)алкил и TIPS соответственно, и Х³ представляет собой уходящую группу, например хлоро. Подходящие условия реакции для Стадий (i)-(v) на Схеме 2 представляют собой следующие.

Стадия (i) включает взаимодействие соединения формулы (XVIII) с водородом в присутствии подходящего катализатора, например 10% палладия на активированном углероде, и при подходящей температуре, например от 0 до 25°С, более предпочтительно при приблизительно 21°С.

Стадия (ii) включает взаимодействие соединения формулы (XIX) с соединением Формулы (VIII), например 5-хлор-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамидом, в присутствии подходящего основания, например карбоната калия, в подходящем растворителе, например ацетонитриле, и при подходящей температуре, например от 0 до 200°С, более предпочтительно приблизительно при температуре дефлегмации.

Стадия (iii) включает взаимодействие соединения формулы (XV) с фторидом водорода в подходящем растворителе, например THF, и при подходящей температуре, например от 0 до 25°С, более предпочтительно при приблизительно 21°С.

Стадия (iv) включает взаимодействие соединения формулы (XVI) с 2,2-дифтор-2-фторсульфонилуксусной кислотой в присутствии подходящего катализатора, например йодида меди (I), в подходящем растворителе, например ацетонитриле, и при подходящей температуре, например от 0 до 100°С, более предпочтительно при приблизительно 55°С.

Стадия (v) включает взаимодействие соединения формулы (XVIIa) с подходящим основанием, например LiOH, в подходящем растворителе, например THF и метаноле, и при подходящей температуре, например от 0 до 25°С, более предпочтительно при приблизительно 21°С.

Примеры превращений соединения формулы (I) в другое соединение Формулы (I), хорошо известные специалистам в данной области техники, включают взаимопревращения функциональных групп, такие как гидролиз, гидрирование, гидрогенолиз, окисление или восстановление, и/или другую функционализацию при помощи стандартных взаимодействий, таких как амидное или катализируемое металлом сочетание, или реакций нуклеофильного замещения. Пример может представлять собой удаление заместителя R³ = хлоро, например, путем взаимодействия с водородом при атмосферном или повышенном давлении в подходящем растворителе, таком как THF/метанол или этанол.

Понятно, что заместители R², R³ и/или R⁶ могут быть введены в молекулу в любом удобном месте в последовательности синтеза или могут присутствовать в исходных веществах. Предшественник для одного из этих заместителей может присутствовать в молекуле в ходе осуществления способа на стадиях (а)-(е) выше, и затем трансформирован в желаемый заместитель на конечной стадии с образованием соединения формулы (I) с последующим, при необходимости,

1) превращением соединения формулы (I) в другое соединение формулы (I);

2) превращением предшественника R¹ в R¹;

3) удалением любых защитных групп и/или

4) образованием его соли.

Конкретные реакционные условия для вышеприведенных взаимодействий представляют собой следующие: когда Р¹ представляет собой защитную группу, Р¹ предпочтительно представляет собой (1-4С)алкил, например метил или этил.

Способ (a) - реакции сочетания аминогруппы с карбоновыми кислотами с образованием амида хорошо известны в области техники. Например,

(i) с использованием подходящей реакции сочетания, такой как реакция карбодиимидного сочетания, осуществляемая с EDAC (1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлоридом) в присутствии диметиламинопиридина (DMAP) в подходящем растворителе, таком как дихлорметан (DCM), хлороформ или диметилформамид (ДМФ), при комнатной температуре или

(ii) посредством взаимодействия, при котором карбоксильная группа активирована до хлорангидрида кислоты посредством реакции с оксалилхлоридом или 1-хлор-N,N,2-триметил-1-пропениламином в присутствии подходящего растворителя, такого как DCM или ДМФ. Хлорангидрид кислоты затем может быть подвергнут взаимодействию с соединением формулы (IV) в присутствии основания, такого как триэтиламин или пиридин, в подходящем растворителе, таком как хлороформ или DCM, при температуре от 0°С до 80°С.

Способ (b) - соединения формул (V) и (VI) могут взаимодействовать друг с другом в подходящем растворителе, таком как ДМФ или тетрагидрофуран (THF), с основанием, таким как гидрид натрия или трет-бутоксид калия, при температуре, находящейся в диапазоне от 0 до 200°С, возможно с использованием нагревания в микроволновой печи или катализатора на основе металла, такого как ацетат палладия (II), палладий на углероде, ацетат меди (II) или йодид меди (I); альтернативно, соединения формул (V) и (VI) могут взаимодействовать друг с другом в подходящем растворителе, таком как THF или DCM, с подходящим фосфином, таким как трифенилфосфин, и азодикарбоксилатом, таким как диэтилазодикарбоксилат; способ (b) также может быть осуществлен с использованием предшественника сложного эфира формулы (VII), такого как арилнитрильное или трифторметильное производное, с последующим превращением в карбоновую кислоту и образованием амида, как описано ранее;

Способ (с) - соединения формул (VIII) и (IX) могут взаимодействовать друг с другом в подходящем растворителе, таком как ДМФ или THF, с основанием, таким как гидрид натрия или трет-бутоксид калия, при температуре, находящейся в диапазоне от 0 до 200°С, возможно с использованием нагревания в микроволновой печи или катализатора на основе металла, такого как ацетат палладия (II), палладий на углероде, ацетат меди (II), йодид меди (I) или бромтрис(трифенилфосфин)меди (I); способ (с) также может быть осуществлен с использованием предшественника сложного эфира формулы (X), такого как арилнитрильное или трифторметильное производное, с последующим превращением в карбоновую кислоту и образованием амида, как описано ранее;

Способ (d) - взаимодействие соединения формулы (XI) с соединением формулы (XII) может быть осуществлено в полярном растворителе, таком как ДМФ, или неполярном растворителе, таком как THF, с сильным основанием, таким как гидрид натрия или трет-бутоксид калия, при температуре от 0 до 200°С, возможно с использованием нагревания в микроволновой печи или катализатора на основе металла, такого как ацетат палладия (II), палладий на углероде, ацетат меди (II) или йодид меди (I);

Способ (е) - реакции сочетания аминогрупп с карбоновыми или сульфоновыми кислотами или производными кислот с образованием амида хорошо известны в области техники и описаны выше для Способа (а).

Полагают, что некоторые промежуточные соединения Формул (III), (VI), (VII), (IX) и/или (XI) являются новыми и составляют независимый аспект изобретения.

Полагают, что некоторые промежуточные соединения Формулы (III), (IX) и/или (XI), где R¹ является таким, как здесь определено, являются новыми и составляют независимый аспект изобретения.

Полагают, что некоторые промежуточные соединения Формулы (XIII) являются новыми и составляют независимый аспект изобретения.

В процессе получения может быть благоприятно использовать защитную группу для функциональной группы в молекуле. Защитные группы могут быть удалены при помощи любого удобного способа, описанного в литературе или известного специалистам-химикам как подходящего для удаления интересующей защитной группы, такого как способы, выбранные таким образом, чтобы осуществлять удаление защитной группы с минимальным нарушением других групп в молекуле.

Конкретные примеры защитных групп для удобства приведены ниже, где "низший" обозначает, что группа, к которой он применяется, предпочтительно имеет 1-4 атома углерода. Понятно, что эти примеры не являются исчерпывающими. Когда ниже приведены конкретные примеры способов удаления защитных групп, они аналогично не являются исчерпывающими. Применение защитных групп и способов удаления защиты, конкретно не упомянутых, безусловно находится в объеме изобретения.

Защитная группа для карбокси может представлять собой остаток образующего сложный эфир алифатического или аралифатического спирта или образующего сложный эфир силанола (указанный спирт или силанол предпочтительно содержит 1-20 атомов углерода). Примеры защитных групп для карбокси включают прямоцепочечные или имеющие разветвленную цепь (1-12С)алкильные группы (например, изопропил, трет-бутил); группы низший алкокси-низший алкил (например, метоксиметил, этоксиметил, изобутоксиметил; группы (низший алифатический ацилокси)-(низший алкил) (например, ацетоксиметил, пропионилоксиметил, бутирилоксиметил, пивалоилоксиметил); группы (низший алкоксикарбонилокси)-(низший алкил) (например 1-метоксикарбонилоксиэтил, 1-этоксикарбонилоксиэтил); группы арил-(низший алкил) (например пара-метоксибензил, орто-нитробензил, пара-нитробензил, бензгидрил и фталидил); группы три(низший алкил)силил (например, триметилсилил и трет-бутилдиметилсилил); группы три(низший алкил)силил-(низший алкил) (например, триметилсилилэтил); и (2-6С)алкенильные группы (например, аллил и винилэтил).

Способы, особенно подходящие для удаления карбоксильных защитных групп, включают, например, гидролиз, катализируемый кислотами, металлами или ферментатми.

Примеры защитных групп для гидрокси включают метил, трет-бутил, низшие алкенильные группы (например, аллил); низшие алканоильные группы (например, ацетил); низшие алкоксикарбонильные группы (например трет-бутоксикарбонил); низшие алкенилоксикарбонильные группы (например, аллилоксикарбонил); группы арил-(низший алкоксикарбонил) (например, бензоилоксикарбонил, пара-метоксибензилоксикарбонил, орто-нитробензилоксикарбонил, пара-нитробензилоксикарбонил); группы три(низший алкил/арил)силил (например, триметилсилил, трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил); тетрагидропиран-2-ил; группы арил-(низший алкил) (например, бензил); и группы триарил-(низший алкил) (например, трифенилметил).

Примеры защитных групп для амино включают формильные, аралкильные группы (например, бензил и замещенный бензил, например пара-метоксибензил, нитробензил и 2,4-диметоксибензил и трифенилметил); ди-пара-анизилметильные и фурилметил группы; низший алкоксикарбонил (например, трет-бутоксикарбонил); низший алкенилоксикарбонил (например, аллилоксикарбонил); группы арил-(низший алкоксикарбонил) (например, бензилоксикарбонил, пара-метоксибензилоксикарбонил, орто-нитробензилоксикарбонил, пара-нитробензилоксикарбонил); триалкилсилил (например, триметилсилил и трет-бутилдиметилсилил); алкилиден (например, метилиден); бензилиден и замещенные бензилиденовые группы.

Способы, подходящие для удаления защитных групп для гидрокси и амино включают, например, нуклеофильное замещение, гидролиз, катализируемый кислотой, основанием, металлом или ферментом, каталитический гидрогенолиз/гидрирование или фотолитическое удаление для групп, таких как орто-нитробензилоксикарбонил, или с фторид-ионами для силильных групп. Например, метилэфирные защитные группы для гидроксильных групп могут быть удалены при помощи триметилсилилйодида, трет-бутилэфирная защитная группа для гидроксильной группы может быть удалена путем гидролиза, например путем применения соляной кислоты в метаноле.

Примеры защитных групп для амидных групп включают аралкоксиметил (например, бензилоксиметил и замещенный бензилоксиметил); алкоксиметил (например, метоксиметил и триметилсилилэтоксиметил); три(алкил/арил)силил (например, триметилсилил, трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил); три(алкил/арил)силилоксиметил (например, трет-бутилдиметилсилилоксиметил, трет-бутилдифенилсилилоксиметил); 4-алкоксифенил (например, 4-метоксифенил); 2,4-ди(алкокси)фенил (например, 2,4-диметоксифенил); 4-алкоксибензил (например, 4-метоксибензил); 2,4-ди(алкокси)бензил (например 2,4-ди(метокси)бензил) и алк-1-енил (например, аллил, бут-1-енил и замещенный винил, например 2-фенилвинил).

Аралкоксиметильные группы могут быть введены по амидной группе путем взаимодействия последней группы с соответствующим аралкоксиметилхлоридом, и удалены при помощи каталитического гидрирования. Алкоксиметильные, три(алкил/арил)силильные и триалкил/силилоксиметильные группы могут быть введены путем взаимодействия амида с соответствующим хлоридом и удалены при помощи кислоты или в случае групп, содержащих силил, фторид-ионов. Алкоксифенильные и алкоксибензильные группы обычно вводят путем арилирования или алкилирования соответствующим галогенидом и удаляют путем окисления аммония-церия нитратом. Наконец, алк-1-енильные группы могут быть введены путем взаимодействия амида с соответствующим альдегидом и удалены кислотой.

В приведенном выше также применяют и другие фармацевтическую композицию, способ, метод, применение и особенности изготовления лекарственного средства, альтернативные и предпочтительные аспекты и воплощения описанных здесь соединений по изобретению.

Следующие примеры приведены для иллюстративных целей, и не предполагается, что они ограничивают объем данной заявки на изобретение. Каждое приведененное в примерах соединение представляет конкретный и независимый аспект изобретения. В следующих не ограничивающих объем изобретения Примерах, если не указано иное:

(1) упаривание осуществляли при помощи роторного испарителя при пониженном давлении, а процедуры обработки осуществляли после удаления остаточных твердых веществ, таких как осушающие агенты, путем фильтрации;

(2) процедуры осуществляли при комнатной температуре, то есть в диапазоне 18-25°С и в атмосфере инертного газа, такого как аргон или азот;

(3) выходы приведены только для иллюстрации и не обязательно являются маскимально достижимыми;

(4) структуры конечных продуктов формулы (I) подтверждали при помощи ядерного (как правило протонного) магнитного резонанса (ЯМР) и масс-спектральных методов; значения химических сдвигов протонного магнитного резонанса измеряли по шкале дельта и множестенность пиков представлена в соответствии со следующим: s - синглет; d - дублет; t - триплет; m - мультиплет; br - широкий; q - квартет; quin - квинтет; секстет;

(5) промежуточные соединения, как правило, не полностью охарактеризовывали и чистоту оценивали при помощи тонкослойной хроматографии (ТСХ), высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), инфракрасного анализа (ИК) или ЯМР;

(6) флэш-хроматографию, если не указано иное, осуществляли на диоксиде кремния.

Сокращения
DCM	дихлорметан;
DEAD	диэтилазодикарбоксилат;
DIAD	диизопропилазодикарбоксилат;
DIPEA	N,N-диизопропилэтиламин;
DMA	диметилацетамид;
DMSO	диметилсульфоксид;
DMF	диметилформамид;
EDAC	1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид;
HATU	O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония гексафторфосфат;
ЖХВД	жидкостная хроматография высокого давления;
НРМС	гидроксипропилметилцеллюлоза;
ЖХ/МС	жидкостная хроматография/масс-спектроскопия;
NMIP	N-метил-2-пирролидон;
ЯМР	ядерная магнитно-резонансная спектроскопия;
КТ	комнатная температура;
THF	тетрагидрофуран;
TFA	трифторуксусная кислота;
CDCl3	дейтерийхлороформ;
MgSO4	сульфат магния;
PTFE	политетрафторэтилен;
TIPS	триизопропилсилил.

Пример 1: -[(2S)-1-(дифторметокси)поропан-2-ил]окси-N-(5-метилпиразин-2-ил)-5-(6-метилсульфонилпиридин-3-ил)оксибензамид

Смесь 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-гидрокси-N-(5-метилпиразин-2-ил)бензамида (190 мг, 0,54 ммоль), 5-бром-2-метилсульфонилпиридина (CAS №.98626-95-0) (140 мг, 0,59 ммоль), карбоната цезия (350 мг, 1,08 ммоль) и бромтрис(трифенилфосфин) меди (I) (101 мг, 0,11 ммоль) в DMA (5 мл) перемешивали в микроволновом реакторе при 160°С в течение 6 часов. Добавляли этилацетат (50 мл) и смесь промывали водой (50 мл), рассолом (50 мл), сушили (MgSO₄) и упаривали в вакууме.

Неочищенный остаток подвергали хроматографии на диоксиде кремния, элюируя 10-100% этилацетата в изогексане, с получением желаемого соединения (19 мг).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.40 (d, 3Н), 2.56 (s, 3Н), 3.23 (s, 3Н), 3.96-4.05 (m, 2H), 4.65-4.72 (m, 1H), 6.26 (t, 1H), 6.86 (t, 1H), 7.21 (t, 1H), 7.36 (t, 1H), 7.46-7.49 (m, 1H), 8.08 (d, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.49 (d, 1H), 9.52 (d, 1H); m/z 509 (M+H)⁺.

Получение 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-гидрокси-N-(5-метилпиразин-2-ил)бензамида описано ниже.

3-[(2S)-1-(Дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-гидрокси-N-(5-метилпиразин-2-ил)бензамид

3-[(2S)-1-(Дифторметокси)пропан-2-ил]окси-N-(5-метилпиразин-2-ил)-5-фенилметоксибензамид (0,48 г, 1,08 ммоль) растворяли в этаноле (10 мл) и THF (10 мл) и колбу вакуумировали и продували аргоном (3 раза). Добавляли 10% палладия на углероде (48 мг) и колбу дополнительно вакуумировали и наконец продували газообразным водородом. Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 20 часов. Реакционную смесь удаляли и продували аргоном (3 раза) и катализатор удаляли путем фильтрации через celite®. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением желаемого соединения (0,38 г).

¹Н ЯМР δ (d₆-DMSO): 1.19 (d, 3H), 2.39 (s, 3H), 3.85-3.95 (m, 2H), 4.65-4.72 (m, 1H), 6.46 (s, 1H), 6.65 (t, 1H), 6.93 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 9.74 (s, 1H), 10.82 (s, 1H); m/z 354 (M+H)⁺.

3-[(2S)-1-(Дифторметокси)пропан-2-ил]окси-N-(5-метилпиразин-2-ил)-5-фенилметоксибензамид

1-Хлор-N,N,2-триметилпроп-1-ен-1-амин (0,26 мл, 2,0 ммоль) добавляли к раствору 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-фенилметоксибензойной кислоты (0,54 г, 1,5 ммоль) в DCM (20 мл) и перемешивали в течение 1 часа. Добавляли 5-метилпиразин-2-амин (CAS №. 5521-58-4) (335 мг, 3,1 ммоль), затем пиридин (0,25 мл, 3,1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение еще 30 минут, после чего упаривали в вакууме и распределяли между этилацетатом (50 мл) и водой (50 мл). Водный слой дополнительно экстрагировали в этилацетат (50 мл) и объединенные органические вещества промывали водой (50 мл), рассолом (50 мл), сушили (MgSO₄) и упаривали в вакууме. Неочищенный остаток подвергали хроматографии на диоксиде кремния, элюируя 40-100% этилацетата в изогексане с получением желаемого соединения (0,48 г).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.39 (d, 3Н), 2.58 (s, 3Н), 3.96-4.05 (m, 2H), 4.63-4.70 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 6.30 (t, 1H), 6.78 (t, 1H), 7.09 (t, 1H), 7.16 (t, 1H), 7.35-7.48 (m, 5H), 8.17 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 9.58 (d, 1H); m/z 444 (M+H)⁺.

3-[(2S)-1-Дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-фенилметоксибензойная кислота

Моногидрат гидроксида лития (19 мг, 0,45 ммоль) в воде (2 мл) добавляли к метил-3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-фенилметоксибензоату (0,11 г, 0,3 ммоль) в THF (4 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 20 часов. THF удаляли в вакууме и водный слой доводили до рН 3 лимонной кислотой, затем экстрагировали в этилацетат (2×30 мл). Органические вещества промывали водой (30 мл), рассолом (30 мл), сушили (MgSO₄), фильтровали и растворитель удаляли в вакууме с получением желаемого соединения (0,1 г).

¹Н ЯМР δ (d₆-DMSO): 1.27 (d, 3Н), 4.00 (m, 2H), 4.75 (секстет, 1H), 5.15 (s, 2H), 6.72 (t, 1H), 6.87 (t, 1H), 7.08 (t, 1H), 7.16 (t, 1H), 7.41 (m, 5H), 12.95 (s, 1H); m/z 351 (M+H)⁺.

Метил-3-[2S)-1-(дифторметокси)поропан-2-ил]окси-5-(фенилметоксибензоат

2,2-Дифтор-2-фторсульфонилуксусную кислоту (GAS №.1717-59-5) (0,239 мл, 2,31 ммоль) по каплям добавляли при перемешивании к дегазированной смеси метил-3-[(2S)-1-гидроксипропан-2-ил]окси-5-фенилметоксибензоата (0,73 г, 2,31 ммоль) и йодида меди (I) (88 мг, 0,46 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) при 45°С. Реакционную смесь перемешивали при 45°С в течение 24 часов. Растворитель удаляли в вакууме и добавляли этилацетат (30 мл). Органические вещества промывали водой (30 мл), рассолом (30 мл), сушили (MgSO₄), фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. Остаток подвергали хроматографии на диоксиде кремния, элюируя градиентом 0-30% этилацетата в изогексане, с получением желаемого соединения (0,11 г).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.37 (d, 3Н), 3.93 (s, 3Н), 4.00 (m, 2H), 4.63 (секстет, 1Н), 5.10 (s, 2H), 6.28 (t, 1Н), 6.77 (t, 1Н), 7.28 (t, 1Н), 7.41 (m, 6H); m/z 367 (М+Н)⁺.

Метил-3-[(2S)-1-гидроксипропан-2-ил]окси-5-(фенилметоксибензоат

Бромметилбензол (1,89 г, 7,20 ммоль) добавляли к смеси метил-3-гидрокси-5-[(2S)-1-гидроксипропан-2-ил]оксибензоата (1,55 г, 6,86 ммоль) и карбоната калия (1,89 г, 0,014 моль) в DMF (16 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 20 часов. Добавляли этилацетат (40 мл) и смесь промывали водой (40 мл), насыщенным раствором бикарбоната натрия (40 мл), рассолом (40 мл), сушили (MgSO₄), фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. Остаток подвергали хроматографии на диоксиде кремния, элюируя градиентом 0-100% этилацетата в изогексане, с получением желаемого соединения (1,7 г).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.30 (d, 3Н), 1.95 (m, 1Н), 3.76 (m, 2H), 3.92 (s, 3Н), 4.53 (m, 1Н), 5.11 (s, 2H), 6.78 (t, 1Н), 7.25 (m, 1Н), 7.32 (m, 1Н), 7.45 (m, 5H); m/z 317 (М+Н)⁺.

Метил-3-гидрокси-5-[(2S)-1-гидроксипропан-2-ил]оксибензоат

Йодтриметилсилан (GAS №.16029-98-4) (115 мл, 0,79 моль) добавляли к раствору метил-3-гидрокси-5-[(2S)-1-метоксипропан-2-ил]оксибензоата (CAS №.863504-77-2) (38,01 г, 0,158 моль) в ацетонитриле (500 мл) и перемешивали в течение 24 часов. Добавляли метанол (300 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 10 минут. К смеси добавляли 10% мас./об. водный пентагидрат тиосульфата натрия (100 мл) и перемешивали в течение 20 минут. Реакционную смесь нейтрализовали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, органические растворители удаляли в вакууме и продукт экстрагировали в этилацетат (4×100 мл). Объединенные органические слои сушили (MgSO₄), фильтровали и растворители удаляли в вакууме. Неочищенное вещество перекристаллизовывали из этилацетата с получением желаемого соединения (16,8 г).

¹Н ЯМР δ (d₆-DMSO): 1.18 (d, 3H), 3.40-3.55 (m, 2H), 3.80 (8, 3Н), 4.35 (секстет, 1Н), 4.80 (t, 1H), 6.57 (m, 1H), 6.90 (m, 2H), 9.75 (s, 1H); m/z 304 (M+H)⁺.

Метил-3-гидрокси-5-[(2S)-1-метоксипропан-2-ил]оксибензоат

Метил-3-[(2S)-1-метоксипропан-2-ил]окси-5-фенилметоксибензоат (CAS №.851885-42-2) (50,0 г, 0,152 ммоль) растворяли в смеси ТНР : этанол (600 мл) и колбу вакуумировали и продували азотом (3 раза). Добавляли 10% палладий на углероде (5,0 г), колбу дополнительно вакуумировали и в заключение продували газообразным водородом. Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 часов до завершения реакции. Реакционную смесь удаляли и продували азотом (3 раза). Катализатор отфильтровывали и фильтрат концентрировали в вакууме с получением желаемого соединения (36,7 г).

¹Н ЯМР δ (d₆-DMSO): 1.2 (d, 3Н), 3.25 (s, 3Н), 3.44 (m, 2H), 3.82 (s, 3Н), 4.55 (m, 1H), 6.6 (s, 1H), 6.9 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 9.8 (s, 1H).

Пример 2: 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамид

Смесь 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-гидрокси-N-(5-метилпиразин-2-ил)бензамида (0,19 г, 0,54 ммоль), 5-хлор-N,N-диметил-пиразин-2-карбоксамида (100 мг, 0,54 ммоль) и карбоната калия (149 мг, 1,08 ммоль) в ацетонитриле (5 мл) перемешивали в микроволновом реакторе при 140°С в течение 5 часов и смесь упаривали в вакууме. Добавляли этилацетат (50 мл) и смесь промывали водой (50 мл), рассолом (50 мл), сушили (MgSO₄) и упаривали в вакууме. Неочищенный остаток подвергали хроматографии на диоксиде кремния, элюируя 0-5% метанола в DCM с получением желаемого соединения (150 мг).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.40 (d. 3Н), 2.55 (s, 3Н). 3.15 (s. 311), 3.18 (s, 3Н), 3.95-4.05 (m, 2H), 4.64-4.71 (m, 1H), 6.26 (t, 1H), 6.97 (t, 1H), 7.32 (t, 1H), 7.40 (t, 1H). 8.13 (s. 1H), 8.38 (d, 1H). 8.41 (s, 1 Н), 8.53 (d, 1H), 9.53 (d, 1H); m/z 503 (М+Н)⁺.

Получение 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-гидрокси-N-(5-метилпиразин-2-ил)бензамида описано ранее.

Получение 5-хлор-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида описано ниже.

5-Хлор-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамид

Оксалилхлорид (1,7 мл, 19 ммоль) добавляли к суспензии 5-хлорпиразин-2-карбоновой кислоты (GAS №.36070-80-1) (2,53 г, 16,0 ммоль) в дихлорметане (25 мл) и DMF (4 капли) при КТ и в атмосфере аргона. Смеси давали возможность перемешиваться в течение 1,5 ч, концентрировали в вакууме и остаток перерастворяли в дихлорметане (25 мл). Затем по каплям добавляли диметиламин (2 М в THF, 8,77 мл, 17,6 ммоль), затем триэтиламин (4,9 мл, 35 ммоль) и давали возможность перемешиваться в течение еще 5,5 часов. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и остаток перерастворяли в дихлорметане и фильтровали. Фильтрат подвергали хроматографии на диоксиде кремния, элюируя градиентом 50-100% этилацетата в изогексанах с получением желаемого соединения (1,88 г).

¹Н ЯМР δ (CD₃OD): 3.34 (s, 3Н), 3.38 (s, 3Н), 8.90 (s, 1H), 8.92 (s, 1H); m/z 186 (М+Н)⁺.

Альтернативный способ получения 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида приведен ниже.

1-Хлор-N,N,2-триметил-1-пропениламин (6,9 мл, 52,3 ммоль) добавляли к раствору 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[5-(диметилкарбамоил)-пиразин-2-ил]оксибензойной кислоты (17,2 г, 41,8 ммоль) в DCM (250 мл) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 30 минут. Добавляли 5-метилпиразин-2-амин (9,1 г, 83,6 ммоль) и пиридин (6,8 мл, 83,6 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате (200 мл), промывали водой (2×100 мл), лимонной кислотой (1 н., 100 мл), насыщенным раствором бикарбоната натрия (2×100 мл) и насыщенным рассолом (10 мл), сушили (NgSO₄), фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали путем флэш-хроматографии на диоксиде кремния, элюируя градиентом 25-100% этилацетата в изогексане с получением продукта в виде бесцветной пены (11,2 г). К 200 мг образца этого вещества добавляли диэтиловый эфир (1 мл) и получающуюся в результате суспензию суспендировали в течение ночи при интенсивном перемешивании. Получающееся в результате белое твердое вещество выделяли путем фильтрации и сушили в вакууме. Дифракция рентгеновских лучей на порошке подтвердила, что это вещество содержит значительную степень кристалличности. Оставшееся вещество (9,2 г) делили на две партии (3,5 г и 5,7 г). К меньшей партии (3,5 г) добавляли диэтиловый эфир (12,5 мл) и к большей партии (5,7 г) добавляли диэтиловый эфир (20 мл). В большую партию вводили затравку полученного ранее кристаллического вещества (50 мг). Обе партии перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. Получающиеся в результате бесцветные твердые вещества выделяли путем фильтрации, объединяли и сушили в вакууме. Получающееся в результате вещество (6,1 г, 29%) имело картину дифракции рентгеновских лучей на порошке, согласующуюся с ранее полученным кристаллическим веществом и с описанной для Формы А 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)-карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, описанной ниже.

Данные ¹Н ЯМР и масс-спектрометрии согласовывались с полученными с использованием ранее описанного способа.

Форма А 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида охарактеризована путем получения по меньшей мере одного из следующих значений 2θ, измеренных с использованием излучения CuKa: 20,3 и 15,6. Форма А 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида охарактеризована как дающая картину дифракции рентгеновских лучей на порошке, по существу как изображено на Фиг.А. Десять наиболее заметных пиков представлены в Таблице А.

Таблица А
Десять наиболее заметных пиков дифракции ренгеновских лучей на порошке для Формы А 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида
Угол 2-Тета (2θ)	Интенсивность, %	Относительная интенсивность
20,325	100	ос
15,646	94,3	ос
23,15	46,2	ос
22,424	43,8	ос
9,266	39,1	ос
25,707	34,8	ос
26,21	32,9	ос
18,72	28,5	ос
26,485	28,5	ос
8,425	28,5	ос

ос = очень сильная.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1 -(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с одним специфическим пиком приблизительно при 2-тета = 20,3°.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с одним специфическим пиком приблизительно при 2-тета = 15,6°.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с двумя специфическими пиками приблизительно при 2-тета = 20,3° и 15,6°.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке со специфическими пиками приблизительно при 2-тета=20,3, 15,6, 23,2, 22,4, 9,3, 25,7, 26,2, 18,7, 26,5 и 8,4°.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по существу такую же, как картина дифракции рентгеновских лучей на порошке, представленная на Фиг.А.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с одним специфическим пиком при 2-тета = 20,3° плюс или минус 0,5° 2-тета.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1 -(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с одним специфическим пиком при 2-тета = 15,6° плюс или минус 0,5° 2-тета.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с двумя специфическими пиками при 2-тета = 20,3° и 15,6°, где указанные значения могут быть плюс или минус 0,5° 2-тета.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке со специфическими пиками при 2-тета = 20,3, 15,6, 23,2, 22,4, 9,3, 25,7, 26,2, 18,7, 26,5 и 8,4°, где указанные значения могут быть плюс или минус 0,5° 2-тета.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с одним специфическим пиком при 2-тета = 20,3°.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с одним специфическим пиком при 2-тета = 15,6°.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с двумя специфическими пиками при 2-тета = 20,3° и 15,6°.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке со специфическими пиками при 2-тета = 20,3, 15,6, 23,2, 22,4, 9,3, 25,7, 26,2, 18,7, 26,5 и 8,4°.

В соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке, представленную на Фиг.А.

Анализ путем ДСК (дифференциальная сканирующая калориметрия) продемонстрировал, что Форма А 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]-окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида представляет собой легкоплавкое твердое вещество с началом плавления при 75,0°С и максимумом при 83,1°С (Фиг.Б).

Таким образом, в соответствии с настоящим изобретением предложена кристаллическая форма 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]-окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамои]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форма А, с началом плавления приблизительно при 75,0°С и максимумом приблизительно при 83,1°С.

Таким образом, в соответствии с настоящим изобретением предложен способ получения кристаллической формы 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, включающий кристаллизацию 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида из раствора 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пролан-2-ил]-окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил|фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида в диэтиловом эфире.

Когда утверждается, что настоящее изобретение относится к кристаллической форме 5-[3-[(2S)-1 -(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида, Форме А, степень кристалличности для удобства составляет больше чем приблизительно 60%, еще удобней, более чем приблизительно 80%, предпочтительно более чем приблизительно 90% и еще более предпочтительно больше чем приблизительно, 95%.

Форма А 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида дает картины дифракции рентгеновских лучей на порошке по существу такие же, как картины дифракции рентгеновских лучей на порошке, представленные на Фиг.А, и имеют по существу десять наиболее заметных пиков (значения угла 2-тета), представленные в Таблице А. Понятно, что значения 2-тета в картине дифракции рентгеновских лучей на порошке могут слегка отличаться в зависимости от аппарата или образца и, таким образом, приведенные значения не следует рассматривать как абсолютные.

Известно, что может быть получена картина дифракции рентгеновских лучей на порошке, которая имеет одну или более чем одну ошибку измерений в зависимости от условий измерений (таких как оборудование или используемый аппарат). В частности, как правило, известно, что интенсивности в картине дифракции рентгеновских лучей на порошке могут колебаться в зависимости от условий измерений. Таким образом, понятно, что Форма А 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида по настоящему изобретению не ограничивается кристаллами, дающими картины дифракции рентгеновских лучей на порошке, идентичные картине дифракции рентгеновских лучей на порошке, представленной на Фиг.А, и любые кристаллы, дающие картины дифракции рентгеновских лучей на порошке по существу такие же, как изображенные на Фиг.А, находятся в объеме настоящего изобретения. Специалист в области дифракции рентгеновских лучей на порошке способен судить о значительной идентичности картин дифракции рентгеновских лучей на порошке.

Специалист в области дифракции рентгеновских лучей на порошке понимает, что на относительную интенсивность пиков могут влиять, например, зерна с размером больше 30 микрон и неунитарные отношения сторон изображения, которые могут влиять на анализ образцов. Специалисту в данной области техники также понятно, что на положение отражений могут влиять точная высота, на которой образец закреплен в дифрактометре, и нулевая калибровка дифрактометра. Планарность поверхности образца также может оказывать незначительное действие. Следовательно, представленные данные картины дифракции не следует понимать как абсолютные значения. (Jenkins. R & Snyder. R.L. 'Introduction to X-Ray Powder Diffractometry' John Wiley & Sons 1996; Bunn, C.W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, London; Klug, H.P. & Alexander, L.E. (1974), X-Ray Diffraction Procedures).

Как правило, ошибка измерения дифракционного угла на рентгеновской порошковой дифрактограмме составляет приблизительно 5% или меньше, в частности плюс или минус 0,5° 2-тета, и такую степень ошибки измерений следует принимать во внимание при рассмотрении картины дифракции рентгеновских лучей на порошке на Фиг.А и при чтении Таблицы А. Кроме того, понятно, что интенсивности могут колебаться в зависимости от условий эксперимента и приготовления образца (предпочтительная ориентация).

Подробная информация об использованных методах

Дифракция ренгеновских лучей на порошке

Таблица Б
Относительная интенсивность, %*	Определение
25-100	ос (очень сильная)
10-25	с (сильная)
3-10	ср (средняя)
1-3	сл (слабая)
* Относительные интенсивности получены из дифрактограмм, измеренных с использованием аналитического оборудования с фиксированными щелями: Siemens D5000.

Спектры дифракции рентгеновских лучей на порошке определяли путем наблюдения за образцом кристаллического вещества на подложке единичного кремниевого кристалла Siemens (SSC) и раскатывания образца в тонкий слой при помощи предметного стекла микроскопа. Образец вращали со скоростью 30 оборотов в минуту (для улучшения статистики подсчета) и облучали рентгеновскими лучами, генерируемыми медной длинной остросфокусированной трубкой, функционирующей при 40 кВ и 40 мА с длиной волны 1,5406 ангстрем. Коллимированный источник рентгеновских лучей пропускали через автоматическую решетку с различной дивергенцией, установленную на V20, и отраженное излучение направляли через 2 мм неотражающую щель и 0,2 мм щель детекора. Образец подвергали воздействию в течение 1 секунды с увеличением на 0,02 угла 2-тета (длительный режим сканирования) в диапазоне от 2 градусов до 40 градусов 2-тета в режиме тета-тета. Время анализа составило 31 минуту и 41 секунду. Прибор оборудовали сцинтилляционным счетчиком в качестве детектора. Регистрацию контрольных значений и данных осуществляли при помощи рабочей станции Dell Optiplex 686 NT 4.0, функционирующей с программным обеспечением Diffract+. Специалистам в области дифракции рентгеновских лучей на порошке понятно, что на относительную интенсивность пиков могут влиять, например, зерна с размером больше 30 микрон и неунитарные отношения сторон изображения, которые могут влиять на анализ образцов. Специалисту в данной области техники также понятно, что на положение отражений могут влиять точная высота, на которой образец закреплен в дифрактометре, и нулевая калибровка дифрактометра. Планарность поверхности образца также может оказывать незначительное действие. Следовательно, представленные данные картины дифракции не следует понимать как абсолютные значения.

Дифференциальная сканирующая калориметрия

Прибор для анализа: Mettler DSC820e.

Как правило, меньше чем 5 мг вещества, содержащегося в алюминиевом сосуде объемом 40 мкл, оборудованном крышкой с отверстием, нагревали в диапазоне температур от 25°С до 325°С при постоянной скорости нагревания 10°С в минуту. Газ для продувки - азот - использовали при скорости потока 100 мл в минуту.

Суспендирование 5-(3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил)-окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси)-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида

Спектры дифракции рентгеновских лучей на порошке (ДРЛП) для 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида показали, что исходное вещество было аморфным. Для получения кристаллической формы, Формы А, приблизительно 500 мг вещества помещали в сосуд с магнитной мешалкой и добавляли приблизительно 2 мл диэтилового эфира, сосуд затем плотно закрывали крышкой. Суспензию затем оставляли перемешиваться на магнитной мешалке при температуре окружающей среды (25°С). Через 2 суток образец удаляли с мешалки, крышку снимали и суспензию оставляли высыхать в условиях окружающей среды до ее анализа при помощи ДРЛП и ДСК. При помощи ДРЛП определяли, что получающееся в результате вещество (Форма А) является кристаллическим и отличается от исходного аморфного вещества. Это вещество (Форма А) имело температуру плавления 75,0°С (начало).

3[(2S)-1-(Дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[5-(диметилкаобамоил)пиразин-2-ил]оксибензойная кислота

Метил-3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]оксибензоат (19,8 г, 46,6 ммоль) растворяли в THF (300 мл) и метаноле (100 мл) и добавляли LiOH (1 н., 51,3 мл), а затем воду по каплям до помутнения. Получающийся в результате раствор перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. Органические вещества удаляли путем упаривания при пониженном давлении. Водную суспензию разбавляли водой (100 мл), промывали этилацетатом (200 мл), затем подкисляли путем добавления соляной кислоты (2 н.) до осаждения твердого вещества. Получающуюся в результате суспензию экстрагировали этилацетатом (2×200 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (200 мл) и рассолом (200 мл), сушили (MgSO₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением продукта (17,2 г, 90%).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.39 (d, 3Н), 3.17 (s, 3Н), 3.19 (s, 3Н), 3.93-4.05 (m, 2H), 4.60-4.69 (m, 1H), 6.26 (t, 1H), 6.99 (t, 1H), 7.50-7.55 (m, 2H), 6.38 (d, 1H), 8.55 (d, 1H), 10.17 (s, 1H); m/z 412 (M+H)⁺.

Метил-3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[5-(диметил-карбамоил)пиразин-2-ил]оксибензоат

2,2-Дифтор-2-фторсульфонилуксусную кислоту (CAS №.1717-59-5) (0,84 мл, 8,05 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) добавляли при помощи шприцевого насоса по каплям в течение 90 минут к дегазированной перемешиваемой смеси метил-3-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]окси-5-[(2S)-1-гидроксипропан-2-ил]окси-бензоата (1,5 г, 22,0 ммоль) и йодида меди (I) (154 мг, 4,55 ммоль) в ацетонитриле (300 мл) при 55°С. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении и остаток переносили в DCM. Смесь фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали путем флэш-хроматографии на диоксиде кремния, элюируя градиентом 25%-100% этилацетата в изогексане с получением продукта (16,5 г, 62%).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.38 (3Н, d), 3.15 (3Н, s), 3.16 (3Н, s), 3.91 (3Н, s), 3.93-4.05 (2H, m), 4.62-4.68 (1H, m), 6.27 (1H, t), 6.95 (1H, t), 7.44-7.45 (1H. m), 7.49-7.51 (1H, m), 8.36 (1H, 8), 8.53 (1H, s); m/z 404 (M+H⁺).

Метил-3-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]окси-5-[(2S)-1-гидроксипропан-2-ил]оксибензоат

Раствор фтористого водорода (70% в пиридине, 3,25 мл) добавляли к метил-3[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2ил]окси-5-[(2S)-1-трипропан-2-илсилилоксипропан-2-ил]оксибензоату в THF (300 мл) в сосуде из ПТФЭ (политетрафторэтилен) и получающийся в результате раствор перемешивали в течение 18 часов при комнатной температуре. Добавляли дополнительное количество раствора фтористого водорода (70% в пиридине, 3,25 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение еще 66 часов. Реакцию гасили путем очень осторожного добавления насыщенного водного раствора бикарбоната натрия до достижения раствором рН 8. Водный слой экстрагировали этилацетатом (2×500 мл) и объединенные органические вещества сушили (MgSO₄). Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали путем колоночной флэш-хроматографии на диоксиде кремния, элюируя 25-100% этилацетатом в изогексане с получением продукта (13,2 г, 98%).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃) 1.32 (3Н, d), 1.93 (1Н, d), 3.17 (6H, d), 3.74-3.79 (1H, m), 3.91 (3Н, s), 4.54-4.60 (1H, m), 6.96 (1H, t), 7.43 (1H, d), 7.51 (1H, d), 8.36 (1H, d), 8.53 (1H, d); m/z 376 (M+H⁺).

Метил-3-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]окси-5-[(2S)-1-трипропан-2-илсилилоксипропан-2-ил]оксибензоат

Смесь метил-3-гидрокси-5-[(2S)-1-трипропан-2-илсилилоксипропан-2-ил]-оксибензоата (40,2 г, 105 ммоль), 5-хлор-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида (20,5 г, 110 ммоль) и карбоната калия (36,3 г, 263 ммоль) в ацетонитриле (500 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 6 часов. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении и добавляли этилацетат (500 мл) и воду (500 мл). Органический слой отделяли, водный слой повторно экстрагировали в этилацетат (250 мл) и объединенные органические вещества промывали водой (500 мл), рассолом (500 мл), сушили (MgSO₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением продукта (55,6 г, 100%).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃) 1.01-1.07 (21Н, m), 1.34 (3Н, d), 3.14-3.16 (3Н, s), 3.17(3Н, s), 3.72-3.77 (1Н, m), 3.87-3.92 (4Н, m), 4.51 (1Н, m), 6.95 (1Н, t), 7.39-7.40 (1H, m), 7.50-7.51 (1Н, m), 8.34 (1Н, d), 8.53 (1H, d); m/z 532 (M+H⁺)

Получение 5-хлор-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида описано ранее.

Метил-3-гидрокси-5-[(2S)-1-трипропан-2-илсилилоксипропан-2-ил]оксибензоат

К раствору метил-3-фенилметокси-5-[(2S)-1-трипропан-2-илсилилоксилропан-2-ил]оксибензоата (CAS №.871657-71-5) (47,3 г, 0,1 моль) в этаноле (500 мл) добавляли 10% палладий на активированном угле (5 г) под азотом. Реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода в течение 16 часов. После этого катализатор отфильтровывали и растворитель упаривали при пониженном давлении с получением продукта (38,1 г, 100%).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃) 1.01-1.12 (22Н, m), 1.32 (3Н, d), 3.69-3.77 (2H, m), 3.89 (3H, 8), 4.48 (1Н, q), 6.62 (1Н, t), 7.10 (1Н, d). 7.18 (1Н, t): m/z 381 (M-H^-).

Еще один альтернативный способ получения 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида приведен ниже.

К 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]оксибензойной кислоты (74,2 г, 180 ммоль) добавляли ДМФ (1,4 мл, 18 ммоль). Загружали дихлорметан (810 мл) и оксалилхлорид (25,2 мл, 289 ммоль) и реакционной смеси давали возможность перемешиваться при температуре окружающей среды в течение 2 часов. Растворитель упаривали при пониженном давлении, подвергали азеотропной перегонке с толуолом (2×600 мл) и получающееся в результате масло растворяли в пиридине (392 мл) и дихлорметане (500 мл).

По каплям к перемешиваемому раствору добавляли раствор 5-метилпиразин-2-амина (GAS №.5521-58-4) (29,7 г, 272 ммоль) в пиридине (549 мл) и реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 часов. Растворитель упаривали при пониженном давлении и остаток переносили в этилацетат (1200 мл), промывали водой (1200 мл), 1 М лимонной кислотой (2×780 мл), насыщенным водным гидрокарбонатом натрия (2×780 мл), насыщенным водным рассолом (780 мл), объединенные органические экстракты сушили (MgSO₄) и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали путем флэш-хроматографии с получением указанного в заголовке соединения (66 г).

К образцу этого вещества (64 г, 127 ммоль) добавляли диэтиловый эфир (640 мл) и получающуюся в результате суспензию перемешивали в течение ночи.

Твердое вещество фильтровали, промывали диэтиловым эфиром (320 мл) и сушили в вакууме при температуре окружающей среды в течение ночи с получением белого кристаллического твердого вещества (56 г).

Это вещество имело картину дифракции рентгеновских лучей на порошке, согласующуюся с описанной для описанной ранее Формы А 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида.

Данные ¹Н ЯМР и масс-спектрометрии согласовывались с описанными ранее.

Получение 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]-окси-5-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]оксибензойной кислоты описано ниже.

3-[(2S)-1-Дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]оксибензойная кислота

К метил-3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]оксибензоату (76,3 г, 179 ммоль) добавляли NMP (534 мл), воду (305 мл) и раствор перемешивали при 0°С. По каплям добавляли 2 н. гидроксид натрия (152 мл, 305 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 4 часов. По каплям добавляли уксусную кислоту (41 мл, 718 ммоль), затем воду (1068 мл), а 1 н. HCl (400 мл) добавляли до достижения рН 3 и некоторое количество вещества вымасливали. Водный слой экстрагировали толуолом (3×988 мл) и объединяли с вымасленным веществом, которое растворяли в этилацетате (988 мл), и объединенные органические слои промывали водой (988 мл), насыщенным водным рассолом (988 мл), сушили (MgSO₄) и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали путем флэш-хроматографии, элюируя 5% МеОН в дихлорметане с получением указанного в заголовке соединения (64 г).

¹Н ЯМР δ (DMSO-d₆) 1.27 (3H, d), 3.03 (6H, 8), 3.99-4.04 (2Н, m), 4.76-4.80 (1H, m), 6.52-6.91 (1H, t), 7.21 (1H, t), 7.34-7.38 (2Н, m), 8.42 (1H, d), 8.56 (1H, d).

Метил-3-[(2S)-1-дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[5-диметилкарбамо-ил)пиразин-2-ил]оксибензоат

Раствор метил-3-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]окси-5-[(2S)-1-гидроксипропан-2-ил]оксибензоата (94 г, 250 ммоль) в ацетонитриле (1130 мл) дегазировали азотом, затем загружали йодид меди (I) (9,54 г, 50 ммоль) и раствор нагревали до 55°С. По каплям добавляли раствор 2,2-дифтор-2-фторсульфонил-уксусной кислоты (CAS №.1717-59-5) (46,6 мл, 450 ммоль) в ацетонитриле (188 мл). Через 3 часа растворитель выпаривали при пониженном давлении при 25°С. Остаток переносили в дихлорметан (500 мл) и фильтровали. Твердое вещество дополнительно промывали дихлорметаном до тех пор, пока промывки не становились прозрачными. Растворитель выпаривали при пониженном давлении при 25°С и остаток очищали путем флэш-хроматографии, элюируя 100%-ным этилацетатом с получением указанного в заголовке соединения (54 г).

¹Н ЯМР δ (DMSO-d₆) 1.28 (3Н, d), 2.99-3.08 (6H, m), 3.86 (3Н, s), 3.98-4.07 (2H, m), 4.78-4.82 (1H, m), 8.50-6.90 (1H, t), 7.25 (1H, t), 7.38-7.40 (2H, m), 8.42 (1H, d), 8.55 (1H, d)/

Метил-3-[5-(диметилкарбамоил)пираpин-2-ил]окси-5-[(2S)-1-гидроксипропан-2-ил]оксибензоат

Раствор метил-3-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]окси-5-[(2S)-1-[(2-метилпропан-2-ил)окси]пропан-2-ил]оксибензоата (170 г, 0,39 моль) в муравьиной кислоте (850 мл) нагревали до 90°С в течение 3 часов. Добавляли этилацетат (1700 мл), воду (1700 мл) и насыщенный водный рассол (850 мл), водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (850 мл) и объединенные органические слои промывали насыщенным водным рассолом (850 мл), сушили (MgSO₄) и упаривали при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате (1500 мл), воде (1500 мл) и метаноле (150 мл). Добавляли карбонат натрия (170 г) и двухфазный раствор нагревали до температуры дефлегмации в течение 2 часов. Водный слой отделяли и органический слой промывали водой (1700 мл). Объединенные водные фазы экстрагировали этилацетатом (850 мл) и объединенные органические слои сушили (MgSO₄) и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали путем флэш-хроматографии, элюируя 100%-ным этилацетатом, с получением указанного в заголовке соединения (148 г).

¹Н ЯМР δ (DMSO-d₆) 1.23 (3H, d), 3.04 (6H, s), 3.47-3.56 (2H, m), 3.86 (3H, s), 4.49-4.53 (1H, m), 4.86 (1H, t), 7.19 (1H, t), 7.34-7.35 (1H, m), 7.38-7.39 (1H, m), 8.42 (1H, d), 8.55 (1H, d).

Метил-3-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]окси-5-[(2S)-1-[(2-метилпропан-2-ил)окси]пропан-2-ил]оксибензоат

К метил-3-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]окси-5-гидроксибензоату (10 г, 32 ммоль) добавляли трифенилфосфин (10,3 г, 39,4 ммоль), THF (100 мл) и (2R)-1-[(2-метилпропан-2-ил)окси]пропан-2-ол (CAS №.136656-73-0) (5,21 г, 39,4 ммоль). Получающуюся в результате суспензию охлаждали до 0°С и по каплям добавляли диэтилазодикарбоксилат (50% мас./об. в толуоле, 13,7 мл, 39,4 ммоль), поддерживая температуру ниже 10°С. Через 2 часа растворитель выпаривали при пониженном давлении и переносили в этилацетат (23 мл). Отфильтрованное твердое вещество отделяли, а маточные растворы упаривали при пониженном давлении, переносили в этилацетат (23 мл) и изогексан (53 мл), получающееся в результате твердое вещество отфильтровывали, маточные растворы упаривали при пониженном давлении и получающийся в результате остаток очищали путем флэш-хроматографии, элюируя смесью 80% этилацетат/20% изогексан с получением продукта (13,5 г).

¹Н ЯМР δ (DMSO-d₆) 1.12 (9Н, s), 1.25 (3H, d), 3.03 (6H, s), 3.41-3.45 (1H, m), 3.47-3.51 (1H, m), 3.85 (3H, 8), 4.55-4.57 (1H, в), 7.20 (1H, t), 7.34-7.35 (1H, m), 7.40-7.41 (1H, m), 8.41 (1H, d), 8.54 (1H, d).

Метил-3-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]окси-5-гидроксибензоат

К метил-3,5-дигидроксибензоату (GAS №.2150-44-9) (85 г, 0,49 моль) добавляли 5-хлор-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамид (88,9 г, 0,48 моль), DMSO (1000 мл) и карбонат цезия (418 г, 1,2 моль) и смесь нагревали до 50°С в течение 3 часов. Добавляли воду (1577 мл), затем диэтиловый эфир (540 мл). К водному слою добавляли 5 М раствор соляной кислоты (395 мл, 1,97 моль) и получающееся в результате белое твердое вещество отфильтровывали, промывали водой (2×311 мл) и сушили в вакууме при 40°С над P₂O₅ в течение ночи с получением желаемого соединения (143 г).

¹Н ЯМР δ (DMSO-d₆) 3.03 (6Н, s), 3.84 (3Н, s), 6.92 (1 H, t), 7.21-7.22 (1H, m), 7.28-7.29 (1H, m), 8.41 (1H, d), 8.53 (1H, d), 10.20 (1H, s).

Получение 5-хлор-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида описано ранее.

Пример 3: 5-[3-[(2S)-1-дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-(1Н-пиразол-3-ил-карбамоил)фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамид

Трифторуксусную кислоту (2 мл) добавляли к раствору трет-бутил-3-[[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]оксибензоил]амино]пиразол-1-карбоксилата (150 мг, 0,26 ммоль) в DCM (16 мл) и перемешивали при КТ в течение 2 часов. Растворитель удаляли в вакууме, добавляли DCM (20 мл) и смесь промывали водой (20 мл), насыщенным раствором бикарбоната натрия (20 мл), рассолом (20 мл), сушили (MgSO₄) и упаривали в вакууме с получением желаемого соединения (94 мг).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.38 (d, 3Н), 3.15 (s, 3Н), 3.18 (s, 3Н), 3.95-4.03 (m, 2H), 4.62-4.69 (m, 1H), 6.25 (t, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.92 (t, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.44 (d, 1H), 8.39 (d, 1H), 8.49 (d, 1H), 9.71 (s, 1H), 10.04 (s, 1H); m/z 477 (М+Н)⁺.

Пример 4: 3-[(2S)-1-дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-6-метилсульфонилпиридин-3-ил)окси-N-(1H-пиразол-3-ил)бензамид

Следующее соединение получали по аналогии с примером 3 из трет-бутил-3-[[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-(6-метилсульфонилпиридин-3-ил)окси-бензоил]амино]пиразол-1-карбоксилата.

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.39 (d, 3H), 3.23 (s, 3H), 3.95-4.04 (m, 2H), 4.64-4.71 (m, 1H), 6.26 (t, 1H), 6.83-6.86 (m, 2H), 7.19 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.45-7.48 (m, 1H), 7.52 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 8.48 (d, 1H), 8.65 (s, 1H); m/z 483 (M+H)⁺.

трет-Бутил-3-[[3-[2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-(6-метилсульфонилпиридин-3-ил)оксибензоил]амино]пиразол-1-карбоксилат

1-Хлор-N,N,2-триметилпроп-1-ен-1-амин (0,11 мл, 0,80 ммоль) добавляли к раствору 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]оксибензойной кислоты (0,22 г, 0,53 ммоль) в DCM (5 мл) и перемешивали в течение 1 часа. Добавляли трет-бутил-3-аминопиразол-1-карбоксилат (CAS №.863504-94-1) (147 мг, 0,80 ммоль), затем пиридин (0,09 мл, 1,07 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение еще 45 минут, после чего упаривали в вакууме и распределяли между этилацетатом (50 мл) и водой (50 мл). Водный слой дополнительно экстрагировали в этилацетате (50 мл) и объединенные органические вещества промывали водой (50 мл), рассолом (50 мл), сушили (MgSO₄) и упаривали в вакууме. Неочищенный остаток подвергали хроматографии на диоксиде кремния, элюируя 20-50% этилацетата в изогексане с получением желаемого соединения (0,15 г).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.38 (d, 3H), 1.60 (s, 9H), 3.16 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 3.93-4.04 (m, 2H), 4.60-4.64 (m, 1 Н), 6.26 (t, 1Н), 6.95 (t, 1Н), 7.09 (d, 1Н), 7.27-7.28 (m, 1Н), 7.34 (t, 1H), 8.01 (d, 1H), 8.37 (d, 1H), 8.53 (d, 1H), 8.97 (8,1H); m/z 577 (M+H)⁺.

трет-Бутил-3-[[3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-(6-метилсульфонилпиридин-3-ил)оксибензоил]амино]пиразол-1-карбоксилат, ипользуемый в получении согласно Примеру 4, получали аналогичным образом из 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-(6-метилсульфонилпиридин-3-ил)оксибензойной кислоты.

Структура	m/z	ЯМР
	583 (М+Н)+	1Н ЯМР δ (CDCl3): 1.39 (d, 3Н), 1.64 (s, 9Н), 3.24 (s, 3Н), 3.95-4.04 (m, 2Н), 4.64-4.68 (m, 1Н), 6.26 (t, 1H), 6.85 (t, 1H), 7.07 (d, 1H), 7.14 (t, 1H), 7.30 (t, 1H), 7.46-7.48 (m, 1H), 8.01 (d, 1H), 8.09 (d, 1H), 8.48 (d, 1H), 8.67 (s, 1H)

3-[(2S)-1-(Дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]оксибензойная кислота

Моногидрат гидроксида лития (45 мг, 1,06 моль) в воде (5 мл) добавляли к раствору метил-3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]оксибензоата (0,3 г, 0,71 ммоль) в THF (10 мл) и перемешивали при КТ в течение 20 часов. THF удаляли в вакууме и водный слой промывали этилацетатом (50 мл) для удаления любых примесей. Водный слой подкисляли и экстрагировали этилацетатом (2×50 мл), затем объединенные органические фазы промывали рассолом (50 мл), сушили (MgSO₄) и растворитель удаляли в вакууме с получением желаемого соединения (0,22 г).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.39 (d, 3Н), 3.17 (s, 3Н), 3.19 (s. 3Н), 3.93-4.05 (m, 2Н), 4.60-4.69 (m, 1H), 6.26 (t, 1H), 6.99 (t, 1H), 7.50-7.55 (m, 2Н), 8.38 (d, 1H),8.55 (d, 1H), 10.17 (s, 1H); m/z 412 (M+H)⁺.

Метил-3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[5-(диметилкарбамоил)пиразин-2-ил]оксибензоат

Смесь метил-3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-гидроксибензоата (0,25 г, 0,91 ммоль), 5-хлор-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида (168 мг, 0,91 ммоль) и карбоната калия (250 мг, 1,81 ммоль) в ацетонитриле (5 мл) перемешивали в микроволновом реакторе при 140°С в течение 5 часов. Смесь упаривали в вакууме и добавляли этилацетат (50 мл). Смесь промывали водой (50 мл), рассолом (50 мл), сушили (MgSO₄) и упаривали в вакууме. Остаток подвергали хроматографии на диоксиде кремния, элюируя от 20 до 70% этилацетатом в изогексане с получением желаемого соединения (0,3 г).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.38 (d, 3H), 3.15 (s, 3Н), 3.18 (s, 3H), 3.91 (s, 3Н), 3.93-4.04 (m, 2H), 4.61-4.69 (в, 1Н), 6.26 (t, 1H), 6.96 (t, 1H), 7.44-7.45 (m, 1H), 7.50-7.51 (m, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.53 (d, 1H); m/z 426 (M+H)⁺.

Получение 5-хлор-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида описано ранее.

Метил-3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-гидроксибензоат

Метил-3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-фенилметоксибензоат (0,48 г, 1,1 ммоль) растворяли в этаноле (10 мл) и THF (10 мл) и колбу вакуумировали и продували аргоном (3 раза). 10% палладий на углероде (140 мг) добавляли, колбу дополнительно вакуумировали и наконец продували газообразным водородом. Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 20 часов до завершения взаимодействия. Реакционную смесь вакуумировали и продували аргоном (3 раза), затем катализатор удаляли путем фильтрации через celite®. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением желаемого соединения (1,05 г).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.35 (d, 3Н), 3.90 (s, 3Н), 3.90-4.02 (m, 2H), 4.57-4.64 (m, 1Н), 5.20 (s, 1Н), 6.26 (t, 1H), 6.63 (t, 1H), 7.14-7.15 (m, 1H), 7.17-7.18 (m, 1H); m/z 275 (M-H)^-.

Получение метил-3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-фенилметоксибензоата описано ранее.

Получение 3-[(2S)-1 -(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-(6-метилсульфонилпиридин-3-ил)оксибензойной кислоты описано ниже.

3-(2S)-1-(Дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-(6-метилсульфонилпиридин-3-ил)оксибензойная кислота

Смесь метил-3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-гидроксибензоата (233 мг, 0,84 ммоль), 5-бром-2-метилсульфонилпиридина (GAS №.98626-95-0) (200 мг, 0,84 ммоль), карбоната цезия (549 мг, 1,69 ммоль) и бромтрис(трифенилфосфин)меди (I) (157 мг, 0,17 ммоль) в DMA (5 мл) перемешивали в микроволновом реакторе при 160°С в течение 6 часов. Добавляли этилацетат (50 мл) и воду и водный слой подкисляли и экстрагировали этилацетатом (2×50 мл). Объединенные органические вещества промывали рассолом, сушили (MgSO₄) и концентрировали в вакууме с получением желаемого соединения (0,16 г).

¹Н ЯМР δ (d₆-DMSO): 1.28 (d, 3H), 3.27 (s, 3Н), 3.95-4.04 (m, 2H), 4.78-4.85 (m, 1 Н), 6.71 (t, 1 Н), 7.14-7.16 (m, 1 Н), 7.22-7.23 (m, 1 Н), 7.37-7.40 (m, 1H), 7.66-7.70 (m, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.61 (d, 1H), 12.85 (s, 1H); m/z 418 (М+Н)⁺.

Получение метил-3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-гидроксибензоата описано ранее.

Пример 5: 5-[3-[2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-[(1-метилпиразол-3-ил)карбамоил]фенокси]-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамид

Смесь 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-гидрокси-N-(1-метилпиразол-3-ил)бензамида (0,1 г, 0,29 ммоль), 5-хлор-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида (66 мг, 0,35 ммоль) и карбоната калия (81 мг, 0,59 ммоль) в ацетонитриле (5 мл) перемешивали в микроволновом реакторе при 160°С в течение 6 часов. Получающуюся в результате смесь концентрировали в вакууме и добавляли этилацетат (50 мл). Органические вещества промывали водой (50 мл), рассолом (50 мл), сушили (MgSO₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток подвергали хроматографии на диоксиде кремния, элюируя 10-100% этилацетата в изогексане, с получением желаемого соединения (52 мг).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.30 (d, 3Н), 3.08 (s, 3Н), 3.11 (s, 3Н), 3.69 (s, 3Н), 3.85-3.97 (m, 2Н), 4.56 (секстет, 1Н), 6.18 (t, 1H), 6.73 (d, 1H), 6.85 (t, 1H), 7.19-7.21 (m, 2H), 7.27-7.29 (m, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.45 (d, 1H), 8.76 (s, 1H): m/z 491 (M+H)⁺.

Синтез 5-хлор-N,N-диметилпиразин-2-карбоксамида описан ранее.

3-[(2S)-1-(Дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-гидрокси-N-(1-метилпиразол-3-ил)бензамид

3[(2S)-1-(Дифторметокси)пропан-2-ил]окси-N-(1-метилпиразол-3-ил)-5-фенилметоксибензамид (0,1 г, 0,23 ммоль) растворяли в этаноле (3 мл) и THF (3 мл) и колбу вакуумировали и продували аргоном (3 раза). Добавляли 10% палладий на углероде (0,01 г), колбу дополнительно вакуумировали и наконец продували газообразным водородом. Реакционную смесь перемешивали при КГ в течение 20 часов до завершения взаимодействия. Реакционную смесь вакуумировали, продували азотом (3 раза). Катализатор отфильтровывали через целит и фильтрат концентрировали в вакууме с получением желаемого соединения (70 мг).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.28 (d, 3Н), 3.71 (s, 3Н), 3.80-3.96 (m, 2H), 4.51 (секстет, 1Н), 5.96-6.38 (t, 1H), 6.53 (s, 1Н), 6.73 (s, 1Н), 6.91 (s, 1Н), 6.96 (s, 1Н), 7.22 (s, 1Н), 8.83(s, 1Н); m/z 342 (M+Н)⁺.

3-[(2S)-1-(Дифторметокси)пропан-2-ил]окси-N-(1-метилпиразол-3-ил)-5-фенилметоксибензамид

DIPEA (0,198 мл, 1,14 ммоль) добавляли к смеси 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-фенилметоксибензойной кислоты (0,10 г, 0,28 ммоль), 1-метилпиразол-3-амина (CAS №. 1904-31-0) (39 мг, 0,4 ммоль) и HATU (0,227 г, 0,6 ммоль) в ДМФ (3 мл) и перемешивали при КТ в течение 20 часов. Добавляли этилацетат (30 мл) и смесь промывали водой (30 мл), рассолом (30 мл), сушили (MgSO₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток подвергали хроматографии на диоксиде кремния, элюируя градиентом 0-100% этилацетата в изогексане с получением желаемого соединения (0,1 г).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃): 1.36 (d, 3Н), 3.68 (s, 3Н), 3.82-3.95 (m, 2H), 4.48 (секстет, 1Н), 5.00(s, 2H), 6.19 (t, 1Н), 6.63 (s, 1Н), 6.73 (s, 1Н), 6.93 (s, 1Н), 7.03 (s, 1Н), 7.28 (m, 1Н), 7.35 (m, 5H), 8.59 (s, 1Н); m/z 432 (M+H)⁺.

Синтез 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-фенилметоксибензойной кислоты описан ранее.

Пример 6: 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-N-(1-метилпиразол-3-ил)-5-(6-метилсульфонилпиридин-3-ил)оксибензамид

Смесь 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-гидрокси-N-(1-метилпиразол-3-ил)бензамида (100 мг, 0,29 ммоль), 5-бром-2-метилсульфонилпиридина (CAS №. 98626-95-0) (77 мг, 0,32 ммоль), карбоната цезия (191 мг, 0,59 ммоль) и бромтрис(трифенилфосфин)меди(1) (55 мг, 0,06 ммоль) в DMA (5 мл) перемешивали в микроволновом реакторе при 160°С в течение 6 часов. Добавляли этилацетат (50 мл) и промывали водой (50 мл), рассолом (50 мл), сушили (MgSO₄), фильтровали и упаривали в вакууме. Остаток подвергали хроматографии на диоксиде кремния, элюируя 10-80% этилацетата в изогексане с получением желаемого соединения (31 мг).

¹Н ЯМР δ (CDCl₃):1.30 (d, 3Н), 3.16 (s, 3Н), 3.72 (s, 3Н), 3.85-3.95 (m, 2H), 4.53-4.59 (m, 1H), 6.18 (t, 1H), 6.71 (d, 1H), 6.75 (t, 1H), 7.09 (t, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.37-7.39 (m, 1Н), 7.99 (d, 1Н), 8.39 (d, 1Н), 8.62 (s, 1H): m/z 495 (M-H)^-.

Синтез 3-[(2S)-1-(дифторметокси)пропан-2-ил]окси-5-гидрокси-N-(1-метилпиразол-3-ил)бензамида описан ранее.

Биологические тесты

Биологические эффекты соединений формулы (I) могут быть протестированы следующим образом.

(1) Ферментативная активность

Ферментативная активность рекомбинантной человеческой панкреатической GLK может быть измерена путем инкубации GLK, АТФ и глюкозы. Скорость образования продукта может быть определена путем сопряжения анализа с глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназой, системой NADP (никотинамидадениндинуклеотидфосфат окисленный)/NADPH (никотинамидадениндинуклеотидфосфат восстановленный), и измерения линейного увеличения по времени оптической плотности при 340 нм согласно Brocklehurst et al. (Diabetes 2004, 53, 535-541). Активация GLK соединениями может быть оценена с использованием этого анализа в присутствии или отсутствии GLKRP, как описано в Brocklehurst et al. (Diabetes 2004, 53, 535-541).

Соединения по изобретению оценивали в отсутствие GLKRP, как описано Brocklehurst et al. и активированной глюкокиназы со значениями EC₅₀, показанными ниже.

Таблица В
Пример №	Значение ЕС50 (мкМ)
1	0,069
2	0,056
3	0,065
4	0,033
5	0,079
6	0,077

Продукция рекомбинантных GLK и GLKRP

кДНК человеческих GLK и GLKRP получена при помощи ПЦР (полимеразной цепной реакции) из человеческой мРНК поджелудочной железы и печени соответственно, с использованием общепринятых способов, описанных в Sambrook J, Fritsch EF & Maniatis Т, 1989. Праймеры для ПЦР сконструированы в соответствии с последовательностями кДНК GLK и GLKRP, представленными в Tanizawa et al., Proc NatlAcad Sci 1991 Aug 15:88(16):7294-7, и Warner et al., Mamm Genome. 1995 Aug; 6(8):532-6.

Клонирование в векторы Bluescript II

кДНК GLK и GLKRP клонировали в Е colic использованием pBluescript II

Трансформации

Трансформации Е.coli, как правило, осуществляли путем электропорации. 400 мл культур штаммов DH5a или BL21(DE3) выращивали в L-бульоне до OD (оптической плотности) при 600 нм 0,5 и собирали путем центрифугирования при 2000 g. Клетки дважды промывали в ледяной деионизированной воде, ресуспендировали в 1 мл 10%-ного глицерина и хранили аликвотами при -70°С. Лигирующие смеси обессоливали с использованием мембран Millipore V series™ (размер пор 0,0025 мм). 40 мл клеток инкубировали с 1 мл лигирующей смеси или плазмидной ДНК на льду в течение 10 минут в кюветах для электропорации 0,2 см и затем подвергали импульсному воздействию с использованием аппарата Gene Pulser™ (BioRad) при 0,5 кВ/см, 250 мФ. Трансформанты отбирали на L-агаре, дополненном тетрациклином в концентрации 10 мг/мл или ампициллином при 100 мг/мл.

Экспрессия

GLK экспрессировали из вектора pTB375NBSE в клетках Е.coli BL21, продуцирующих рекомбинантный белок, содержащий 6-His метку непосредственно по соседству с N-концевым метионином. Альтернативно еще один подходящий вектор представляет собой pET21(+)DNA, Novagen, кат. №697703. 6-His метку использовали для обеспечения возможности очистки рекомбинаниного белка на колонке, упакованной с агарозой никель-нитрилотриуксусная кислота, приобретенной в Qiagen (кат. №30250).

GLKRP экспрессировали из вектора pFLAG CTC (IBI Kodak) в клетках E.coli BL21, продуцирующих рекомбинантный белок, содержащий С-концевую метку FLAG. Белок очищали сначала при помощи ионообменной хроматографии на DEAE сефарозе с последующим использованием метки FLAG для окончательной очистки на иммуноаффинной колонке M2 с антителами против FLAG, приобретенной в Sigma-Aldrich (кат. №A1205).

(2) Тест на толерантность к перорально вводимой глюкозе (OGTI)

Тесты на толерантность к перорально вводимой глюкозе (G.J Coope et al., British Journal of Pharmacology, (2006) 149, 328-335) могут быть осуществлены на находящихся в сознании страдающих от ожирения крысах Zucker fa/fa (возраст 12-13 недель или старше), получающих диету с высоким содержанием жиров (45% ккал жира) в течение по меньшей мере двух недель перед экспериментом. Животных не кормили в течение 2 часов перед использованием в экспериментах. Тестируемое соединение или носитель вводят перорально за 120 минут перед пероральным введением раствора глюкозы в дозе 2 г/кг массы тела. Уровни глюкозы в крови измеряют с использованием глюкометра Accucheck в образцах, взятых из хвостовой вены в различные моменты времени до и после введения глюкозы (промежуток времени 60 минут). Строят график зависимости уровней глюкозы от времени и расчитывают площадь под кривой (AUC) в течение 120 минут (время введения глюкозы принимается как нулевое). Процентное уменьшение сдвига уровня глюкозы определяют с использованием AUC для группы с носителем в качестве контроля как нулевого процентного уменьшения.

Источники информации

1. Printz, R.L., Magnuson, M.A. and Granner, D.K. (1993) Annual Review of Nutrition 13, 463-96

2. DeFronzo, R.A. (1988) Diabetes 37, 667-87

3. Froguel, P., Zouali, H., Vionnet, N.. Velho, G., Vaxillaire, M., Sun, F., Lesage, S., Stoffel, M., Takeda, J. and Passa, P. (1993) New England Journal of Medicine 328, 697-702

4. Bell, G.I., Pilkls. S.J., Weber, I.T. and Polonsky, K.S. (1996) Annual Review of Physiology 58, 171-86

5. Velho, G., Petersen, K.F., Perseghin, G., Hwang, J.H., Rothman, D.L., Pueyo, M.E., Cline, G.W., Froguel, P. and Shulman, G.I. (1996) Journal of Clinical Investigation 98, 1755-61

6. Christesen, H.В., Jacobsen, В.В., Odili. S., Buettger, C., Cuesta-Munoz. A., Hansen, Т., Brusgaard, K., Massa, O., Magnuson, M. A., Shiota, C., Matschinsky, F.M. and Barbetti, F. (2002) Diabetes 61, 1240-6

6a. Gloyn, A.L., Noordam, K., Willemsen, M.A.A.P., Ellard, S., Lam, W.W.K., Campbell, I.W., Midgley, P., Shiota, C., Buettger, C., Magnuson, M.A., Matschinsky, P.M., and Hattersley, A.T.; Diabetes 62: 2433-2440

7. Glaser, В., Kesavan, P., Heyman, M., Davis, E., Cuesta, A., Buchs, A., Stanley, C.A., Thornton, P.S., Permutt, M.A., Matschinsky, F.M. and Herold, K.C. (1998) New England Journal of Medicine 338,226-30

8. Саго, J.F., Triester, S., Patel, V.K., Tapscott, E.В., Frazler, N.L. and Dohm, G.L. (1995) Hormone & Metabolic Research 27, 19-22

9. Desai, U.J., Slosberg, E.D., Boettcher, B.R., Caplan, S.L, Fanelli, В., Stephan, Z., Gunther, V.J., Kaleko, M. and Connelly, S. (2001) Diabetes 60, 2287-95

10. Shiota, M., Postic, C, Fujimoto, Y., Jetton, T.L., Dixon, K., Pan, D., Grimsby, J., Grippo, J.F., Magnuson, M.A. and Cherrington, A.D. (2001) Diabetes 60, 622-9

11. Ferre, Т., Pujol, A., Riu, E., Bosch, F. and Valera, A. (1996) Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 93, 7225-30

12. Seoane, J., Barbera, A., Telemaque-Potts, S., Newgard, C. B. and Guinovart, J.J. (1999) Journal of Biological Chemistry 274, 31833-8

13. Moore, M.C, Davis, S.N., Mann, S.L. and Cherrington, A.D. (2001) Diabetes Care 24, 1882-7

14. Alvarez, E., Roncero, I., Chowen, J.A., Vazquez, P. and Blazquez, E. (2002) Journal of Neurochemlstry 80, 45-53

15. Lynch, R.M., Tompkins, L.S., Brooks, H.L., Dunn-Meynell, A.A. and Levin, B.E. (2000) Diabetes 49, 693-700

16. Roncero, I., Alvarez, E., Vazquez, P. and Blazquez, E. (2000) Journal of Neurochemistry 74, 1848-57

17. Yang, X.J., Kow, L.M., Funabashi, Т. and Mobbs, C.V. (1999) Diabetes 48, 1763-1772

18. Schuit, F.С, Huypens, P., Heimberg, H. and Pipeleers, D.G. (2001) Diabetes 50, 1-11

19. Levin, В.E. (2001) International Journal of Obesity 25, supplement 5, S68-S72.

20. Alvarez. E., Roncero, I., Chowen, J.A., Thorens. B. and Blazquez, E. (1996) Journal of Neurochemistry 66, 920-7

21. Mobbs, С.V., Kow, L,M. and Yang, X. J. (2001) American Journal of Physiology - Endocrinology & Metabolism 281, E649-54

22. Levin, B.E., Dunn-Meynell, A.A. and Routh, V.H. (1999) American Journal of Physiology 276, R1223-31

23. Spanswick, D., Smith, M.A., Groppi, V.E., Logan, S.D. and Ashford, M.L. (1997) Nature 390, 521-5

24. Spanswick, D., Smith, M.A., Mirshamsi, S., Routh, V.H. and Ashford, M.L. (2000) Nature Neuroscience 3, 757-8

25. Levin, В.E. and Dunn-Meynell, A.A. (1997) Brain Research 776, 146-53

26. Levin, B.E., Govek, E.K. and Dunn-Meynell, A.A. (1998) Brain Research 808, 317-9

27. Levin, B.E., Brown, K.L. and Dunn-Meynell, A.A. (1996) Brain Research 739, 293-300

28 Rowe, I.C., Boden, P.R. and Ashford, M.L. (1996) Journal of Physiology 497, 365-77

29. Fujimoto, K., Sakata, Т., Arase, K., Kurata, K., Okabe, Y. and Shiraishi, T. (1985) Life Sciences 37, 2475-82

30. Kurata, K., Fujimoto, K. and Sakata, T. (1989) Metabolism: Clinical & Experimental 38, 46-51

31. Kurata, K., Fujimoto, K., Sakata, Т., Etou, H. and Fukagawa, K. (1986) Physiology & Behavior 37,615-20

32. Jetton T.L., Liang Y., Pettepher C.C., Zimmerman E.G., Cox F.G., Horvath K., Matschinsky P.M., and Magnuson M.A., J. Biol. Chem., Feb 1994; 269: 3641-3654

33. Reimann F. and Gribble F.M., Diabetes 2002 51:2757-2763

34. Cheung А.Т., Dayanandan В., Lewis J. Т., Korbutt G.S., Rajotte R.V., Bryer-Ash M., Boylan M.O., Wolfe M.M., Kleffer T.J., Sconce, Vol 290, Issue 5498, 1959-1962, 8 December 2000.

1. Соединение 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)-пропан-2-ил]-окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)-карбамоил]фенокси]-N,N-диметил-пиразин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью активатора GLK (глюкокиназа), содержащая эффективное количество соединения 5-[3-[(2S)-1-(дифторметокси)-пропан-2-ил]-окси-5-[(5-метилпиразин-2-ил)-карбамоил]фенокси]-N,N-диметил-пиразин-2-карбоксамид или его фармацевтически-приемлемой соли вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.

3. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве лекарственного средства, обладающего активностью активатора GLK.

4. Применение соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения заболевания, опосредованного GLK.

5. Применение соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения диабета 2 типа.