Мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера, содержащая таксан, и способ ее получения

Авторы патента:


Мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера, содержащая таксан, и способ ее получения
Мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера, содержащая таксан, и способ ее получения

 


Владельцы патента RU 2449785:

САМЪЯНГ КОРПОРЕЙШН (KR)

Мицеллярная композиция амфифильного блоксополимера содержит таксан, амфифильный блок-сополимер, содержащий гидрофильный блок (А) и гидрофобный блок (В), и агент для регулирования осмоляльности. Амфифильный блок-сополимер является блоксополимером А-В, А-В-А или В-А-В типа. Гидрофильный блок (А) имеет среднечисленную молекулярную массу 500-20000 дальтон, а гидрофобный блок (В) имеет среднечисленную молекулярную массу 500-20000 дальтон. Амфифильный блок-сополимер содержит 40-70 мас.% гидрофильного блока (А) от массы сополимера. Гидроксильные концевые группы гидрофобного блока (В) могут быть защищены жирнокислотными группами. Агент для регулирования осмоляльности представляет собой неорганическую соль. Также описан способ получения данной композиции. Композиция обладает хорошей стабильностью, что позволяет предотвращать быстрое высвобождение лекарственного средства таксана и может улучшить требуемое фармакологическое действие. Способ позволяет осуществлять высоко эффективное получение композиции. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 2 ил., 3 табл., 4 пр.

 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Примеры вариантов осуществления настоящего изобретения относятся к мицеллярной композиции амфифильного блок-сополимера, содержащей таксан, и к способу ее получения.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Подмикронные системы доставки лекарственных средств с использованием биоразлагаемых полимеров изучали применительно к целям внутривенного введения лекарственных средств. Недавно сообщалось о том, что наносистемы и мицеллярно-полимерные системы с использованием биоразлагаемых полимеров являются полезными технологическими системами, позволяющими изменять распределение лекарственного средства in vivo для снижения нежелательных побочных эффектов и обеспечивать улучшенную эффективность. Кроме того, поскольку такие системы позволяют осуществлять адресную доставку лекарственных средств, они могут обеспечивать контролируемое высвобождение лекарственного средства в целевых органах, тканях или клетках. Фактически известно, что такие системы обладают хорошей совместимостью с жидкими компонентами организма, а также улучшают растворимость труднорастворимого лекарственного средства и его биодоступность.

Недавно сообщалось о способе получения блок-сополимерных мицелл путем химического привязывания лекарственного препарата к блок-сополимеру, содержащему гидрофильный и гидрофобный сегменты. Блок-сополимер представляет собой диблок-сополимер A-B типа, полученный реакцией полимеризации из гидрофильного сегмента (A) и гидрофобного сегмента (B). В упомянутом выше блок-сополимере в качестве гидрофильного сегмента (A) используют полиэтиленоксид, а в качестве гидрофобного сегмента (B) - полиаминокислоту или гидрофобную группу, связанную с полиаминокислотой. Внутри сердцевины полимерных мицелл, образованных из блок-сополимера, могут быть физически заключены такие лекарственные препараты, как адриамицин или индометацин, вследствие чего блок-сополимерные мицеллы могут быть использованы в качестве систем доставки лекарственных средств. Однако полимерные мицеллы, образованные из блок-сополимера, являются причиной ряда проблем в случае применений in vivo, поскольку они не могут гидролизоваться in vivo, а разлагаются только под действием ферментов, при этом имеют низкую биосовместимость и вызывают иммунные реакции, или тому подобное.

Вследствие этого было предпринято много попыток усовершенствования систем доставки лекарственных средств типа ядро-оболочка, обладающих улучшенными биоразлагаемостью и биосовместимостью.

Например, специалистам в данной области известны диблок- или мультиблок-сополимеры, содержащие полиалкиленгликоль в качестве гидрофильного полимера и полимолочную кислоту в качестве гидрофобного полимера. В частности, к концевым группам таких диблок- или мультиблок-сополимеров присоединяют производные акриловой кислоты с образованием сополимеров. Полученные в результате полимеры подвергают сшиванию для стабилизации полимерных мицелл. Однако способы получения таких диблок- или мультиблок-сополимеров сталкиваются со сложностями при введении сшивателей в гидрофобные сегменты диблок- или триблок-сополимеров A-B или A-B-A типа для образования стабильных структур через посредство сшивания. Кроме того, сшиватели, используемые в упомянутых выше способах, могут быть небезопасными для организма человека. К тому же сшитые полимеры не могут разлагаться in vivo и вследствие этого не могут использоваться для применений in vivo.

Согласно другому примеру в качестве способа получения мицеллярной композиции полимера известны так называемые процессы с испарением растворителей. Процесс с испарением растворителей может применяться как крупномасштабный процесс, с помощью которого производные таксана, плохо растворимые в воде, могут быть помещены внутрь мицелл амфифильного блок-сополимера. Однако применение процесса с испарением растворителей лимитируется выбором растворителя, поскольку растворитель должен быть органическим растворителем, в котором могут растворяться как таксан, так и полимер, при этом растворитель должен иметь такую низкую точку кипения, чтобы его можно было удалить выпариванием. При этом органический растворитель должен быть фармацевтически приемлемым растворителем, остатки которого не будут оказывать отрицательного воздействия на организм человека. Кроме того, процесс с испарением растворителей также по существу включает в себя стадию подвергания реагентов воздействию высокой температуры в течение длительного времени, что может привести к таким проблемам, как разрушение фармацевтически активных ингредиентов либо снижение фармакологического действия.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Техническая проблема

В силу вышесказанного с целью решения указанных выше проблем, связанных с соответствующей областью техники, предложена мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера, содержащая таксан, обладающая улучшенной стабильностью.

Также предложен способ получения мицеллярной композиции амфифильного блок-сополимера, содержащей таксан, с помощью упрощенных стадий в течение короткого промежутка времени.

Техническое решение

Согласно одному из аспектов предложена мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера, содержащая таксан, включающая в себя таксан, амфифильный блок-сополимер, содержащий гидрофильный блок и гидрофобный блок, и агент для регулирования осмоляльности.

Согласно другому аспекту предложен способ получения мицеллярной композиции амфифильного блок-сополимера, содержащей таксан, включающий в себя: (a) растворение таксана и амфифильного блок-сополимера в органическом растворителе и (b) добавление туда водного раствора, содержащего агент для регулирования осмоляльности, с образованием полимерных мицелл.

ПОЛЕЗНЫЕ ЭФФЕКТЫ

Мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера, содержащая таксан, согласно одному из вариантов осуществления, раскрытому здесь, обладает хорошей стабильностью, вследствие чего может препятствовать быстрому высвобождению лекарственного средства. Кроме того, способ получения композиции согласно другому варианту осуществления, раскрытому здесь, отменяет необходимость использования отдельной стадии удаления органического растворителя, тем самым максимально увеличивая требуемое фармакологическое действие и уменьшая количество стадий и время получения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Далее следует подробное описание со ссылкой на некоторые примеры осуществления мицеллярной композиции амфифильного блок-сополимера, содержащей таксан, и способа ее получения, проиллюстрированные прилагаемыми графическими материалами, приведенными ниже исключительно в качестве иллюстрации и, следовательно, не являющимися ограничительными, где:

Фиг.1 представляет собой спектр ЯМР 1Н диблок-сополимера [mPEG-PLA], полученного в соответствии с Подготовительным примером 1; и

Фиг.2 представляет собой спектр ЯМР 1Н диблок-сополимера [mPEG-PLGA], полученного в соответствии с Подготовительным примером 2.

ОСУЩЕСТВЛЕНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Далее будет сделана подробная ссылка на различные варианты осуществления, примеры которых проиллюстрированы прилагаемыми графическими материалами и описаны ниже. Поскольку изобретение будет описано в отношении примеров вариантов осуществления, следует понимать, что настоящее описание не предназначено для того, чтобы быть ограничительным.

Мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера, содержащая таксан, согласно одному из вариантов осуществления, раскрытому здесь, может включать в себя таксан, амфифильный блок-сополимер, содержащий гидрофильный блок и гидрофобный блок, и агент для регулирования осмоляльности. Мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера, содержащая таксан, обладает хорошими биоразлагаемостью и биосовместимостью и обеспечивает полимерно-мицеллярную структуру, имеющую относительно улучшенную стабильность.

В композиции согласно одному из вариантов осуществления, раскрытому здесь, таксан может присутствовать в количестве 0,1-30 мас.%, а амфифильный блок-сополимер, содержащий гидрофильный блок и гидрофобный блок, может присутствовать в количестве 20-98 мас.% от общей массы сухой мицеллярной композиции. Кроме того, агент для регулирования осмоляльности может присутствовать в количестве 0,1-50 мас.% от общей массы сухой композиции.

Таксан может быть в безводной или гидратированной форме, либо в аморфном или кристаллическом состоянии. Кроме того, таксан может быть растительного происхождения либо получен с помощью полусинтеза или культивирования растительной клетки. Согласно одному из вариантов осуществления таксан может присутствовать в композиции в количестве 0,1-30 мас.%, предпочтительно 0,5-15 мас.% и более предпочтительно 1-7 мас.% от общей массы сухой композиции.

Согласно одному из вариантов осуществления, таксан включает в себя паклитаксел, доцетаксел, 7-эпипаклитаксел, t-ацетилпаклитаксел, 10-дезацетилпаклитакселил, 10-дезацетил-7-эпипаклитаксел, 7-ксилозилпаклитаксел, 10-дезацетил-7-глутарилпаклитаксел, 7-N,N-диметилглицилпаклитаксел, 7-L-аланилпаклитаксел или их смесь. В частности, могут быть использованы паклитаксел или доцетаксел.

Согласно одному из вариантов осуществления амфифильный блок-сополимер может содержать гидрофильный блок (A) и гидрофобный блок (B), связанные друг с другом в форме A-B, A-B-A или B-A-B структуры. Кроме того, амфифильный блок-сополимер в водном растворе может образовывать полимерные мицеллы типа ядро-оболочка, где гидрофобный блок образует ядро, а гидрофильный блок - оболочку.

Согласно одному из вариантов осуществления, гидрофильный блок (A) амфифильного блок-сополимера может быть полиэтиленгликолем (PEG) или монометоксиполиэтиленгликолем (mPEG). В частности, он может быть mPEG. Гидрофильный блок (A) может иметь среднечисленную молекулярную массу 500-20000 дальтон, предпочтительно 1000-5000 дальтон и более предпочтительно 1000-2500 дальтон.

Гидрофобный блок (B) амфифильного блок-сополимера может быть нерастворимым в воде биоразлагаемым полимером. Согласно одному из вариантов осуществления гидрофобный блок (B) может быть полимолочной кислотой (PLA) или сополимером молочной и гликолевой кислот (PLGA). Согласно другому варианту осуществления гидрофобный блок (B) может иметь среднечисленную молекулярную массу 500-20000 дальтон, предпочтительно 1000-5000 дальтон и более предпочтительно 1000-2500 дальтон. Гидроксильные концевые группы гидрофобного блока (B) могут быть защищены жирнокислотными группами, частные примеры жирнокислотных групп включают ацетаты, пропионаты, бутираты, стеараты, пальмитаты и тому подобное. Амфифильный блок-сополимер, содержащий гидрофильный блок (A) и гидрофобный блок (B), может присутствовать в композиции в количестве 20-98 мас.%, предпочтительно, 65-98 мас.%, и более предпочтительно, 80-98 мас.% от общей массы сухой композиции.

Согласно другому варианту осуществления гидрофильный блок (A) и гидрофобный блок (B) могут присутствовать в амфифильном блок-сополимере в таком соотношении, что сополимер будет содержать 40-70 мас.%, предпочтительно 50-60 мас.% гидрофильного блока (A) от массы сополимера. Если доля гидрофильного блока (A) составляет менее 40%, полимер будет иметь нежелательно низкую растворимость в воде, что приведет к сложностям с образованием мицелл. С другой стороны, если доля гидрофильного блока (A) составляет более 70%, полимер становится слишком гидрофильным для образования стабильных полимерных мицелл, и вследствие этого композицию нельзя будет использовать в качестве композиции для растворения таксана.

Агент для регулирования осмоляльности действует для улучшения стабильности мицеллярной композиции амфифильного блок-сополимера, содержащей таксан. В частности, агент для регулирования осмоляльности существенно улучшает стабильность композиции в виде водного раствора. Один из возможных механизмов действия агента для регулирования осмоляльности такой, как указано далее.

Степень капсулирования лекарства внутри полимерной мицеллярной структуры пропорциональна доле ядер, образующихся из гидрофобного блока полимера в водном растворе. Кроме того, стабильность полимерных мицелл зависит от динамического равновесного состояния, образуемого мицеллами в водном растворе, то есть от константы равновесия между мицеллярным и одномерным состояниями полимера, растворенными в воде.

Хотя внутри полимерной мицеллярной структуры может быть заключено значительное количество труднорастворимого лекарственного средства, при капсулировании лекарственного средства гидрофильные блоки полимерных мицелл могут быть окружены большим количеством молекул воды, и, таким образом, взаимодействие между молекулами воды и гидрофильными блоками может ослаблять гидрофобное взаимодействие между гидрофобными блоками мицелл, тем самым дестабилизируя динамическое равновесное состояние мицелл. Добавление агента для регулирования осмоляльности приводит к возникновению силы электростатического притяжения между агентом для регулирования осмоляльности и водой, приводя к отрыву молекул воды от гидрофильных блоков полимерных мицелл. В результате гидрофобное взаимодействие между гидрофобными блоками, которые в противном случае могут слабо взаимодействовать, несколько возрастает, вследствие чего могут образовываться стабильные мицеллярные структуры. При этом агент для регулирования осмоляльности не удаляется во время получения композиции согласно одному из вариантов осуществления, раскрытому здесь, а остается в готовой композиции. Благодаря стабилизирующему эффекту, полученному с помощью агента для регулирования осмоляльности, мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера, содержащая таксан, обладает хорошей стабильностью.

Агент для регулирования осмоляльности является фармацевтически приемлемым и может быть выбран из любых агентов для регулирования осмоляльности, при условии, что он не вызывает гемолиза при контакте с кровью. Согласно одному из вариантов осуществления агент для регулирования осмоляльности может быть электролитом, предпочтительно неорганической солью. Агент для регулирования осмоляльности предпочтительно может быть по меньшей мере одним агентом, выбранным из группы, состоящей из хлорида натрия, хлорида кальция, сульфата натрия и хлорида магния. В частности, агент для регулирования осмоляльности может быть хлоридом натрия или хлоридом кальция. В особенности, он может быть хлоридом натрия. Согласно другому варианту осуществления агент для регулирования осмоляльности может присутствовать в композиции в количестве 0,1-50 мас.%, предпочтительно 0,5-20 мас.% и более предпочтительно 1-10 мас.% от общей массы сухой композиции.

Согласно другому аспекту предложена лиофилизированная композиция, включающая в себя мицеллярную композицию амфифильного блок-сополимера, содержащую таксан.

Лиофилизированная композиция может также включать в себя добавку для облегчения лиофилизации. Согласно одному из вариантов осуществления добавка для облегчения лиофилизации может быть по меньшей мере одной добавкой, выбранной из группы, состоящей из лактозы, маннита, сорбита и сахарозы. Добавку для облегчения лиофилизации добавляют для сохранения лиофилизированной композиции формы. Кроме того, добавка для облегчения лиофилизации служит для облегчения гомогенизации мицеллярной композиции амфифильного блок-сополимера в течение короткого времени при восстановлении влагосодержания лиофилизированной композиция. Согласно другому варианту осуществления добавка для облегчения лиофилизации может быть использована в количестве 1-90 мас.% и, в частности, 10-60 мас.% от общей массы сухой лиофилизированной композиции.

Согласно одному из вариантов осуществления при восстановлении влагосодержания в водном растворе лиофилизированная композиция может содержать 0,1-15 мас.% таксана от общей массы сухой композиции. Кроме того, при восстановлении влагосодержания амфифильный блок-сополимер может присутствовать в концентрации 10-150 мг/мл, агент для регулирования осмоляльности может присутствовать в концентрации 5-30 мг/мл (в особенности 10-20 мг/мл), а добавка для облегчения лиофилизации может присутствовать в концентрации 1-100 мг/мл. Согласно другому варианту осуществления в водном растворе лиофилизированная композиция может иметь контролируемую степень дисперсности мицелл в диапазоне 1-400 нм и, в частности, 5-200 нм, в зависимости от молекулярной массы сополимера.

Согласно одному из вариантов осуществления мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера, содержащая таксан, может быть приготовлена в форме водного раствора, порошка или таблеток. Согласно другому варианту осуществления композиция может быть композицией в виде раствора для инъекций. Например, композиция может быть восстановлена дистиллированной водой для инъекции, 0,9% физиологическим раствором, 5% водным раствором декстрозы и тому подобным. В восстановленной композиции по меньшей мере 95% таксана стабильно в течение 12 часов или более без осаждения.

Согласно еще одному аспекту предложен способ получения мицеллярной композиции амфифильного блок-сополимера, содержащей таксан.

Согласно еще одному варианту осуществления, раскрытому здесь, способ получения мицеллярной композиции амфифильного блок-сополимера, содержащей таксан, может включать в себя:

(a) растворение таксана и амфифильного блок-сополимера в органическом растворителе и

(b) добавление водного раствора, содержащего агент для регулирования осмоляльности, с образованием полимерных мицелл.

Согласно другому варианту осуществления после стадии (b) способ может также включать:

(c) введение в полимерные мицеллы добавки для облегчения лиофилизации и

(d) осуществление лиофилизации.

Если таксан инкапсулирован с помощью мицеллярной композиции с использованием органического растворителя с использованием процесса с испарением растворителей, в мицеллярной композиции, содержащей таксан, может происходить быстрое осаждение лекарственного средства после восстановления композиции в воде для инъекций и оставления ее при комнатной температуре. Это связано с тем, что в композиции остается органический растворитель, использовавшийся в процессе с испарением растворителей.

Вследствие этого согласно одному из вариантов осуществления способа, раскрытому здесь, осаждение лекарственного средства может быть предотвращено за счет использования агента для регулирования осмоляльности и сведения к минимуму количества органического растворителя. Для того чтобы свести к минимуму количество органического растворителя, остающегося в конечной композиции, композицию следует сушить при высокой температуре, 60°С или выше, при пониженном давлении в течение 12 часов. Однако такие условия сушки - пониженное давление, высокая температура - могут привести к разрушению лекарственного средства. Вследствие этого в способе получения мицеллярной композиции амфифильного блок-сополимера, содержащей таксан, согласно еще одному варианту осуществления, раскрытому здесь, используется минимальное количество органического растворителя для того, чтобы конечная композиция могла быть напрямую подвергнута лиофилизации, что в то же время позволяет избежать необходимости проведения отдельной стадии удаления органического растворителя.

Мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера, содержащая таксан, включающая в себя агент для регулирования осмоляльности и использующая минимальное количество органического растворителя, согласно еще одному варианту осуществления, раскрытому здесь, может обеспечить лиофилизированную композицию, в которой не происходит осаждения таксана в течение 12 часов или более при восстановлении композиции в раствор для инъекций.

Согласно одному из вариантов осуществления органический растворитель на стадии (a) может включать в себя по меньшей мере один растворитель, выбранный из группы, состоящей из ацетона, этанола, метанола, этилацетата, ацетонитрила, метиленхлорида, хлороформа, уксусной кислоты и диоксана. Органический растворитель может быть использован в количестве 0,5-30 мас.%, предпочтительно 0,5-15 мас.% и более предпочтительно 1-10 мас.% от массы получающейся мицеллярной композиции. Если органический растворитель используют в количестве менее 0,5 мас.%, могут возникнуть сложности с растворением лекарственного средства. С другой стороны, когда органический растворитель используют в количестве, превышающем 30 мас.%, при восстановлении влагосодержания лиофилизированной композиции может происходить осаждение лекарственного средства.

На стадии (b) осмоляльность водного раствора, содержащего агент для регулирования осмоляльности, может быть доведена до 30-15000 мосмоль/кг, предпочтительно 100-5000 мосмоль/кг и более предпочтительно 200-2500 мосмоль/кг. Если осмоляльность водного раствора составляет менее 30 мосмоль/кг, в процессе получения композиции может происходить осаждение лекарственного средства. С другой стороны, когда осмоляльность превышает 15000 мосмоль/кг, в полимере может происходить разделение фаз. Согласно одному из примеров осуществления агент для регулирования осмоляльности может быть по меньшей мере одним агентом, выбранным из группы, состоящей из хлорида натрия, хлорида кальция, сульфата натрия и хлорида магния. Кроме того, агент для регулирования осмоляльности может быть использован в количестве 0,1-50 мас.% от общей массы сухой мицеллярной композиции. Стадия (b) может проводиться при температуре 25°C или ниже.

Согласно одному из вариантов осуществления способ получения мицеллярной композиции амфифильного блок-сополимера, содержащей таксан, может также включать в себя стерилизацию водного мицеллярного раствора полимера, полученного со стадии (c), с помощью стерилизующего фильтра перед проведением стадии (d) лиофилизации.

Согласно еще одному варианту осуществления, раскрытому здесь, мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера, содержащая таксан, может вводиться перорально или парентерально в форме водного раствора или порошка. Парентеральное введение включает в себя внутрисосудистое, внутримышечное, подкожное, внутрибрюшинное, назальное, ректальное, офтальмологическое, пульмональное или другое введение. Пероральное введение включает в себя введение в форме таблеток или капсул либо в виде водного раствора как такового.

Кроме того, лиофилизированная композиция согласно еще одному варианту осуществления, раскрытому здесь, приводит к незначительному изменению концентрации доцетаксела в восстановленной композиции с течением времени. Однако, если не добавлен агент для регулирования осмоляльности, концентрация доцетаксела снижается по истечении часа.

Следующие примеры не следует рассматривать как ограничительные.

ОПИСАНИЕ ПРИМЕРОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Пример 1

Подготовительный пример 1: Синтез блок-сополимера монометоксиполиэтиленгликоля-полилактида (mPEG-PLA) (A-B типа)

Сначала 5,0 г монометоксиполиэтиленгликоля (среднечисленная молекулярная масса: 2000 дальтон) помещали в двугорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл и нагревали при температуре 130°C при пониженном давлении (1 мм рт.ст.) в течение 3-4 часов для удаления из него воды. Затем колбу продували газообразным азотом и с помощью шприца добавляли октоат олова (Sn(Oct)2) в качестве катализатора реакции в количестве 0,1 мас.% (10,13 мг, 25 ммоль) от массы D- и L-лактидов. После перемешивания реакционной массы в течение 30 минут ее выдерживали при пониженном давлении (1 мм рт.ст.) при температуре 130°C в течение 1 часа для удаления растворителя (толуола), в котором был растворен катализатор. Затем добавляли 10,13 г очищенного лактида и полученную смесь нагревали при температуре 130°C в течение 18 часов. После нагревания полученный полимер растворяли в хлористом метилене и выливали в диэтиловый эфир для осаждения полимера. Полученный полимер сушили в вакуум-сушильном шкафу в течение 48 часов.

Сополимер монометоксилполиэтиленгликоля-полилактида (mPEG-PLA) имеет среднечисленную молекулярную массу 2000-1765 дальтон. Анализ сополимера методом ЯМР 1H показал, что сополимер является диблок-сополимером A-B типа (см. Фиг.1).

Пример 2

Подготовительный пример 2: Синтез блок-сополимера монометоксиполиэтиленгликоля-сополимера молочной и гликолевой кислот (mPEG-PLGA) (A-B типа)

Блок-сополимер получали реакцией монометоксиполиэтиленгликоля (среднечисленная молекулярная масса: 5000 дальтон), лактида и гликолида в присутствии октоата олова в качестве катализатора при температуре 120°C в течение 12 часов так же, как в случае Подготовительного примера 1.

Сополимер, монометоксиполиэтиленгликоль-сополимер молочной и гликолевой кислот (mPEG-PLGA), имел среднечисленную молекулярную массу 5000-4000 дальтон и являлся сополимером А-В типа. Анализ сополимера методом ЯМР 1Н показал, что сополимер является диблок-сополимером A-B типа (см. Фиг.2).

Пример 1

Пример 1: Получение мицеллярной композиции блок-сополимера mPEG-PLA, содержащей хлорид натрия и доцетаксел

Сначала 760 мг амфифильного блок-сополимера, mPEG-PLA (среднечисленная молекулярная масса: 2000-1765 дальтон), полученного в соответствии с Подготовительным примером 1, полностью растворяли в 0,2 мл этанола при температуре 60°C и получали прозрачный этанольный раствор, содержащий сополимер. Этанольный раствор охлаждали до температуры 25°C и добавляли в него 20 мг доцетаксела, полученный раствор перемешивали до полного растворения доцетаксела.

Затем в отдельных емкостях готовили водные растворы, содержащие 0,9 мас.% и 1,8 мас.% хлорида натрия и имеющие осмоляльность 300 мосмоль/кг и 600 мосмоль/кг. Осмоляльность измеряли с помощью коммерчески доступного осмометра (Gonotech GmbH, OSMOMAT030). Каждый из водных растворов добавляли в этанольный раствор, содержащий сополимер, в количестве 4 мл и полученную смесь перемешивали при температуре 40°C в течение 10 минут с образованием водного мицеллярного раствора полимера.

Затем в каждом растворе растворяли 100 мг D-маннита и полученный раствор фильтровали через фильтр с размером пор 200 нм для удаления нерастворившегося доцетаксела, после чего лиофилизировали.

Лиофилизированную композицию подвергали жидкостной хроматографии, как описано ниже, для определения содержания доцетаксела. Кроме того, методом динамического рассеяния света (DLS) измеряли размер частиц. Результаты 5 представлены в следующей Таблице 1.

Таблица 1
mPEG-PLA (мг) Доцетаксел (мг) NaCl (мг) (осмоляльность (мосмоль/кг)) Содержание доцетаксела (мас.%) Размер частиц (нм)
760 20 36 (300) 99,9 18
760 20 72 (600) 99,8 19

Жидкостная хроматография

1) Колонка: колонка из нержавеющей стали длиной 250 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, набитая частицами с пентафторфенильным покрытием, имеющими диаметр частицы 5 мкм и диаметр пор 300 Ǻ.

2) Подвижная фаза: ацетонитрил: метанол: вода = 26:32:420.

3) Расход газа: 1,5 мл/мин.

4) Нагрузка: 20 мкл.

5) Детектор: абсорбционный УФ спектрометр (длина волны измерения: 232 нм).

Пример 2

Пример 2: Получение мицеллярной композиции блок-сополимера mPEG-PLA, содержащей хлорид кальция и паклитаксел

Сначала 100 мг амфифильного блок-сополимера, mPEG-PLA (среднечисленная молекулярная масса: 2000-1765 дальтон), полученного в соответствии с Подготовительным примером 1, полностью растворяли в 0,1 мл этанола при температуре 60°C и получали прозрачный этанольный раствор, содержащий сополимер. Этанольный раствор охлаждали до температуры 25°C и добавляли в него 20 мг паклитаксела, полученный раствор перемешивали до полного растворения паклитаксела.

Далее в отдельных емкостях готовили водные растворы, содержащие 0,9 мас.% и 1,8 мас.% хлорида кальция и имеющие осмоляльность 230 мосмоль/кг и 460 мосмоль/кг. Каждый из водных растворов добавляли в этанольный раствор, содержащий сополимер, в количестве 4 мл и полученную смесь перемешивали при температуре 40°C в течение 10 минут с образованием водного мицеллярного раствора полимера.

Далее в каждом растворе растворяли 39 мг D-маннита и полученный раствор фильтровали через фильтр с размером пор 200 нм для удаления нерастворившегося паклитаксела и сушили лиофилизацией.

Лиофилизированную композицию подвергали жидкостной хроматографии, как описано в Примере 1, для определения содержания паклитаксела. Кроме того, методом DLS определяли размер частиц. Результаты представлены в следующей Таблице 2.

Таблица 2
mPEG-PLA (мг) Паклитаксел (мг) CaCl2 (мг) (осмоляльность (мосмоль/кг)) Содержание паклитаксела (мас.%) Размер частиц (нм)
100 20 36(300) 99,5 24
100 20 72(460) 99,8 24

Пример 3

Пример 3: Получение мицеллярной композиции блок-сополимера mPEG-PLGA, содержащей хлорид натрия и доцетаксел

Сначала 760 мг амфифильного блок-сополимера, mPEG-PLGA (среднечисленная молекулярная масса: 5,000-4,000 дальтон), полученного в соответствии с Подготовительным примером 2, полностью растворяли в 0,2 мл ацетона при температуре 50°C и получали прозрачный ацетоновый раствор, содержащий сополимер. Ацетоновый раствор охлаждали до температуры 25°C и добавляли в него 40 мг доцетаксела, полученный раствор перемешивали до полного растворения доцетаксела.

Далее в ацетоновый раствор, содержащий сополимер, а также содержащий лекарственное средство, добавляли 8 мл водного раствора, содержащего 0,9 мас.% хлорида натрия и имеющего осмоляльность 300 мосмоль/кг, и полученную смесь перемешивали при температуре 25°C в течение 20 минут до образования гомогенного раствора. После образования гомогенного раствора в нем растворяли 200 мг D-маннита и получали прозрачный водный мицеллярный раствор полимера. И, наконец, водный мицеллярный раствор полимера фильтровали через фильтр с размером пор 200 нм для удаления нерастворившегося доцетаксела, после чего лиофилизировали.

Лиофилизированную композицию подвергали жидкостной хроматографии, как описано в Примере 1, для определения содержания доцетаксела. Кроме того, методом DLS определяли размер частиц.

Содержание доцетаксела: 101,3 мас.%.

Размер частиц: 35 нм.

Пример 4

Пример 4: Получение мицеллярной композиции блок-сополимера mPEG-PLGA, содержащей хлорид кальция и паклитаксел

Сначала 100 мг амфифильного блок-сополимера, mPEG-PLGA (среднечисленная молекулярная масса: 5,000-4,000 дальтон), полученного в соответствии с Подготовительным примером 2, полностью растворяли в 0,2 мл ацетона при температуре 50°C и получали прозрачный ацетоновый раствор, содержащий сополимер. Ацетоновый раствор охлаждали до температуры 25°C и добавляли в него 40 мг паклитаксела, полученный раствор перемешивали до полного растворения паклитаксела.

Затем в ацетоновый раствор, содержащий сополимер, а также содержащий лекарственное средство, добавляли 8 мл водного раствора, содержащего 0,9 мас.% хлорида кальция и имеющего осмоляльность 230 мосмоль/кг, и полученную смесь перемешивали при температуре 25°C в течение 20 минут до образования гомогенного раствора. После образования гомогенного раствора в нем растворяли 53 мг D-маннита и получали прозрачный водный мицеллярный раствор полимера. И, наконец, водный мицеллярный раствор полимера фильтровали через фильтр с размером пор 200 нм для удаления нерастворившегося паклитаксела и сушили лиофилизацией.

Лиофилизированную композицию подвергали анализу методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) для определения содержания доцетаксела. Кроме того, методом DLS определяли размер частиц.

Содержание доцетаксела: 101,1 мас.%.

Размер частиц: 35 нм.

Сравнительный пример 1

Получение мицеллярной композиции блок-сополимера mPEG-PLA, не содержащей неорганической соли

Сначала 760 мг амфифильного блок-сополимера, mPEG-PLA (среднечисленная молекулярная масса: 2,000-1,765 дальтон), полученного в соответствии с Подготовительным примером 1, полностью растворяли в 0,2 мл этанола при температуре 60°C и получали прозрачный этанольный раствор, содержащий сополимер. Этанольный раствор охлаждали до температуры 25°C и добавляли в него 20 мг доцетаксела, полученный раствор перемешивали до полного растворения доцетаксела.

Затем в этанольный раствор, содержащий сополимер, добавляли 4 мл дистиллированной воды для инъекций (осмоляльность: 0 мосмоль/кг) и полученную смесь перемешивали при температуре 40°C в течение 10 минут до образования гомогенного раствора. После образования гомогенного раствора в нем растворяли 100 мг D-маннита и получали прозрачный водный мицеллярный раствор полимера. И, наконец, водный мицеллярный раствор полимера фильтровали через фильтр с размером пор 200 нм для удаления нерастворившегося доцетаксела, после чего лиофилизировали.

Лиофилизированную композицию подвергали анализу методом HPLC для определения содержания доцетаксела. Кроме того, методом DLS определяли размер частиц.

Содержание доцетаксела: 100,3 мас.%.

Размер частиц: 18 нм.

Экспериментальный пример 1

Испытание на стабильность

Мицеллярные композиции полимера, содержащие хлорид натрия, в соответствии с Примером 1 сравнивали с мицеллярной композицией полимера, не содержащей неорганической соли, в соответствии со Сравнительным примером 1 в отношении стабильности водного раствора при температуре 37°C.

Каждую из лиофилизированных композиций в соответствии с Примером 1 и Сравнительным примером 1 разбавляли дистиллированной водой для инъекции до получения концентрации доцетаксела 1 мг/мл. Каждый из разбавленных растворов оставляли при температуре 37°C и измеряли концентрацию доцетаксела, содержащегося в каждой мицеллярной структуре, с течением времени. Результаты представлены в следующей Таблице 3.

Таблица 3
mPEG-PLA (мг) Доцетаксел (мг) NaCl (мг) (осмоляльность (мосмоль/кг)) Исходная концентрация доцетаксела (мг/мл) Концентрация доцетаксела через 12 часов (мг/мл)
Сравнит, пример 1 760 20 0 (0) 1,0 0,41
Пример 1 760 20 36 (300) 1.0 0,95
760 20 72 (600) 1,0 0,99

Как можно видеть из результатов Таблицы 3, композиции в соответствии с Примером 1 не приводят к осаждению доцетаксела даже спустя 12 часов, тогда как композиция в соответствии со Сравнительным примером 1 по истечении 12 часов имела содержание осадившегося доцетаксела 59%. Из приведенных выше результатов можно видеть, что добавление хлорида натрия может увеличить удерживание доцетаксела в мицеллярной композиции по меньшей мере в два раза. Кроме того, также можно видеть, что более высокое соотношение количества неорганической соли и количества амфифильного блок-сополимера обеспечивает мицеллярную композицию с более высокой стабильностью.

Приведено подробное описание со ссылкой на примерные варианты осуществления. Однако специалистам очевидно, что в этих вариантах осуществления могут быть сделаны изменения без отклонения от принципов и сущности мицеллярной композиции амфифильного блок-сополимера, содержащей таксан, и способа ее получения, объем которых определен в прилагаемой формуле изобретения и ее эквивалентах.

1. Мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера, содержащая таксан, включающая в себя таксан, амфифильный блок-сополимер, содержащий гидрофильный блок (А) и гидрофобный блок (В) и агент для регулирования осмоляльности, где содержание таксана составляет 0,1-30 мас.%, амфифильного блок-сополимера - 20-98 мас.% и агента для регулирования осмоляльности - 0,1-50 мас.% от общей массы сухой композиции, где
амфифильный блок-сополимер, содержащий гидрофильный блок (А) и гидрофобный блок (В), является блок-сополимером А-В, А-В-А или В-А-В типа,
гидрофильный блок (А) имеет среднечисленную молекулярную массу 500-20000 дальтон, а гидрофобный блок (В) имеет среднечисленную молекулярную массу 500-20000 дальтон,
амфифильный блок-сополимер содержит 40-70 мас.% гидрофильного блока (А) от массы сополимера,
гидроксильные концевые группы гидрофобного блока (В) могут быть защищены жирнокислотными группами, и
агент для регулирования осмоляльности представляет собой неорганическую соль.

2. Композиция по п.1, где таксан представляет собой паклитаксел, доцетаксел, 7-эпипаклитаксел, t-ацетилпаклитаксел, 10-дезацетилпаклитаксел, 10-дезацетил-7-эпипаклитаксел, 7-ксилозилпаклитаксел, 10-дезацетил-7-глутарилпаклитаксел, 7-N,N-диметилглицилпаклитаксел, 7-L-аланилпаклитаксел или их смесь.

3. Композиция по п.1, где гидрофильный блок (А) представляет собой полиэтиленгликоль или монометоксиполиэтиленгликоль, а гидрофобный блок (В) представляет собой полимолочную кислоту или сополимер полимолочной кислоты и гликолевой кислоты.

4. Композиция по п.1, где неорганическая соль является одной или несколькими солями, выбранными из группы, состоящей из хлорида натрия, хлорида кальция, сульфата натрия и хлорида магния.

5. Композиция по п.1, где мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера является лиофилизированной композицией, также содержащей добавку для облегчения лиофилизации.

6. Композиция по п.5, где лиофилизированная композиция характеризуется тем, что по меньшей мере 95% таксана стабильно в течение 12 ч без осаждения при восстановлении композиции дистиллированной водой для инъекций, 0,9%-ным физиологическим раствором или 5%-ным водным раствором декстрозы.

7. Композиция по п.5, где добавка для облегчения лиофилизации содержится в количестве 1-90 мас.% от общей массы сухой лиофилизированной композиции.

8. Композиция по п.5, где добавка для облегчения лиофилизации является одной или несколькими добавками, выбранными из группы, состоящей из лактозы, маннита, сорбита и сахарозы.

9. Способ получения мицеллярной композиции амфифильного блок-сополимера, содержащей таксан, включающий:
- растворение таксана и амфифильного блок-сополимера в органическом растворителе с получением раствора полимера; и
- добавление водного раствора, содержащего агент для регулирования осмоляльности, в раствор полимера с образованием полимерных мицелл, причем мицеллярная композиция амфифильного блок-сополимера содержит таксан в количестве 0,1-30 мас.%, амфифильный блок-сополимер, содержащий гидрофильный блок (А) и гидрофобный блок (В) - в количестве 20-98 мас.% и агент для регулирования осмоляльности
- в количестве 0,1-50 мас.% от общей массы сухой композиции, где амфифильный блок-сополимер, содержащий гидрофильный блок (А) и гидрофобный блок (В), является блок-сополимером А-В, А-В-А или В-А-В типа,
гидрофильный блок (А) имеет среднечисленную молекулярную массу 500-20000 дальтон, а гидрофобный блок (В) имеет среднечисленную молекулярную массу 500-20000 дальтон,
амфифильный блок-сополимер содержит 40-70 мас.% гидрофильного блока (А) от массы сополимера,
- осуществление лиофилизации.

11. Способ по п.9, отличающийся тем, что органический растворитель является одним или несколькими растворителями, выбранными из группы, состоящей из ацетона, этанола, метанола, этилацетата, ацетонитрила, метиленхлорида, хлороформа, уксусной кислоты и диоксана.

12. Способ по п.9, отличающийся тем, что органический растворитель используют в количестве 0,5-30 мас.% от массы мицеллярной композиции.

13. Способ по п.9, отличающийся тем, что водный раствор имеет осмоляльность 30-15000 мосмоль/кг.

14. Способ по п.9, отличающийся тем, что агент для регулирования осмоляльности является одним или несколькими агентами, выбранными из группы, состоящей из хлорида натрия, хлорида кальция, сульфата натрия и хлорида магния.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к биохимии и представляет собой варианты моноклональных анти-ТАТ226 антител, их иммуноконъюгаты и фармацевтические композиции. .

Изобретение относится к бензамидным соединениям формулы (IA), где R2, R3 и R5 каждый независимо выбран из водорода или метила, или их фармацевтически приемлемым солям. .

Изобретение относится к медицине, онкоурологии, и может быть использовано для лечения поверхностного рака мочевого пузыря. .

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении опухолей позвоночника. .

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины и касается терапевтического средства против, по меньшей мере, одного заболевания, выбранного из группы, состоящей из рака щитовидной эжелезы, множественной эндокринной неоплазии типа IIA, множественной эндокринной неоплазии типа IIB, семейной медуллярной карциномы щитовидной железы, папиллярной карциномы щитовидной железы, спорадической медуллярной карциномы щитовидной железы, болезни Гиршспрунга, феохромоцитомы, гиперплазии паращитовидной железы и невром слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, включающего 4-(3-хлор-4-(циклопропиламинокарбонил)аминофенокси)-7-метокси-6-хинолинкарбоксамид или его аналоги, фармацевтической композиции, включающей указанное средство, способа лечения указанных заболеваний, применения 4-(3-хлор-4-(циклопропиламинокарбонил)аминофенокси)-7-метокси-6-хинолинкарбоксамида или его аналогов для лечения указанных заболеваний.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается фармацевтической композиции в виде капсул, содержащей в качестве действующих веществ 3,31 -дииндолилметан и эпикатехин-3-галлат, и способа получения этой композиции.

Изобретение относится к новому ряду химических соединений, а именно к гидрированной бетулоновой кислоте формулы (1) и ее амидам формулы (2-8): NR1R2= которые могут быть использованы в медицине в качестве лекарственных средств, обладающих противоопухолевым действием.

Изобретение относится к фармацевтической композиции для инъекций, отличающейся тем, что она состоит из смеси комплекса платины общей формулы I: в которой:A и A' независимо друг от друга представляют NH3-группу или амино- или диаминогруппу, содержащую от 1 до 18 атомов углерода; B и B' независимо друг от друга представляют атом галогена или гидрокси-группу, или являются группами -O-C(O)-R или -O-C(O)-R', где R и R' независимо друг от друга представляют атом водорода, алкильную, алкенильную, арильную, аралкильную, алкиламино или алкокси группу, где указанные группы содержат от 1 до 10 атомов углерода, или функциональные производные этих групп;X и X' независимо друг от друга представляют атом галогена или монокарбоксилатную группу, включающую от 1 до 20 атомов углерода, или X и X' вместе образуют дикарбоксилатную группу, включающую от 2 до 20 атомов углерода, и по меньшей мере одного циклодекстрина и/или по меньшей мере одного производного циклодекстрина, и, необязательно, по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого эксципиента.

Изобретение относится к области медицины и фармацевтики и касается композиции для лечения рака, включающей соединение, представленное структурной формулой (I), и фармацевтически приемлемый кристаллический объемный наполнитель, где мольное соотношение соединения (1) к указанному наполнителю составляет от 1:20 до 1:1, а также способа ее получения.

Изобретение относится к способу получения композиции, в том числе лиофилизированной, содержащей эпопростенол, который включает получение раствора эпопростенола или его соли и аргинина и доведение рН раствора до более 12 путем добавления гидроксида калия или гидроксида натрия.

Изобретение относится к композиции для лечения злокачественного новообразования у пациента, которая содержит эпотилон - (1S, 3S, 7S, 10R, 11S, 12S, 16R)-7,11-дигидрокси-3-(2-метил-бензотиазол-5-ил)-10-(проп-2-ен-1-ил)-8,8,12,16-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0] гептадекан-5,9-дион, гидроксипропил- -циклодекстрин или простой сульфобутиловый эфир -циклодекстрина и наполнители, выбранные из маннита и трометамола.

Изобретение относится к области медицины и касается иммуногенной композиции. .
Изобретение относится к области дерматологии и представляет собой коллоидный раствор, пригодный для дермальной и/или местной аппликации на коже, в качестве основы для составов для распыляемой пены, содержащий, по меньшей мере, один активный ингредиент, по меньшей мере, одну формирующую мембрану молекулу, по меньшей мере, один пенообразующий компонент и, по меньшей мере, один растворитель, причем активный ингредиент представляет собой декспантенол, формирующая мембрану молекула представляет собой фосфатидилхолин и пенообразующий компонент выбирается из группы, состоящей из олеата, кокоамфоацетата, каприл/капрамидопропил бетаина, смеси ПЭГ-5 лаурилцитрат/сульфосукцинат/лауретсульфат, смеси лаурил глюкоза карбоксилат/лаурилглюкозид или их смеси.
Наверх