Хлорпропоксипроизводные 7-окси-кумарина, обладающие транквилизирующим и гепатопротекторным действием
Владельцы патента RU 2452732:
Денисенко Петр Прокофьевич (RU)
Тарасенко Александр Александрович (RU)
Изобретение относится к новым хлорпропоксипроизводным 7-окси-кумарина общей формулы
где
а) 7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо-α-пирон, где R=H и R1 и R2=-CH2-CH2-CH2-;
б) 7-(2'-метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, где R=CH3; R1=R2=H, которые обладают транквилизирующим и гепатопротекторным действием, а также к применению их в качестве транквилизирующих и гепатопротекторных препаратов. Они показали низкую токсичность при высокой биологической активности. 2 н.п. ф-лы, 10 табл.
Изобретение относится к области медицины. Оно касается биологически активных соединений, а именно хлорпропоскипроизводных 7-окси-кумарина, или умбеллиферона (7-окси-5,6-бензо-альфа-пирона).
У этих соединений в молекуле нет атома азота, они обладают транквилизирующим и гепатопротекторным действием при низкой токсичности (LD50 более 1 г/кг).
Известен препарат диазепам, он относится к группе бензодиазепинов, химическое название - 7-хлор-2,3-дигидро-1-метил-5-фенил-1Н-1,4-бензодиазепин-2-он [Машковский М.Д. Лекарственные средства, т.1, 1987, стр.72; «Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России», 1999, стр.Е70]. Препарат обладает транквилизирующим действием, его механизм действия связан с усилением тормозного влияния GABA в ЦНС за счет повышения чувствительности GABA-рецепторов к медиатору в результате стимуляции бензодиазепиновых рецепторов. Ряд его побочных реакций связан именно с механизмом действия, с химической структурой вещества, молекула которого в семичленном цикле содержит два атома азота. Препарат проявляет, в частности, миорелаксирующее действие, что не всегда актуально в процессе лечения. Желательно иметь для лечения препараты с узконаправленным действием.
Препарат с гепатопротекторным действием Розанол взят в качестве препарата сравнения в испытаниях заявляемого изобретения. Розанол - препарат растительного происхождения [Машковский М.Д. Лекарственные средства, т.1, 1987, стр.517]. Он обладает способностью уменьшать спазмы желчевыводящих и мочевыводящих путей, обладает умеренной антибактериальной активностью. Препарат противопоказан при тяжелых поражениях паренхимальных органов, при острых воспалительных процессах в желче- и мочевыводящих путях.
Производные 5,6-бензо-альфа-пирона изучают давно с целью использования в качестве лекарственных препаратов. Так, известно, что циклические аминопроизводные 5,6-бензо-альфа-пирона обладают транквилизирующими и антидепрессивными свойствами [авт.св. №1623152, дата приор. 26.12.88 г.]. Соединения этого ряда имеют формулу
где радикал R2 всегда содержит атом азота.
Индивидуальная чувствительность пациентов к азотсодержащим препаратам ограничивает применение этих веществ.
Цель изобретения - поиск новых производных 7-окси-кумарина (умбеллиферона), обладающих повышенной транквилизирующей активностью и отчетливым гепатопротекторным действием, причем при низкой токсичности, чтобы быть применимыми на практике.
Задача решена с помощью синтетических соединений, содержащих в молекуле атом хлора при отсутствии в молекуле азота, общая формула этих соединений
где
1) 7-(3'-хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо-α-пирон, где R=R2=H; R1=СН3;
2) 7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо-α-пирон, где R=H; R1 и R2=-CH2-CH2-CH2-;
3) 7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, где R=R1=R2=H;
4) 7-(2'-метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, где R=СН3; R1=R2=H.
Поиск среди синтезированных производных 5,6-бензо-α-пирона был нацелен на соединения, молекулы которых не содержат азота.
Были изучены на проявление транквилизирующего и гепатопротекторного действия ранее синтезированные и описанные соединения 7-(3'-хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо-α-пирон и 7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон(№1, №3).
У этих соединений (1, 3), ранее известных как флюоресцентная метка для определения третичных аминосоединений (АС №1149596, дата приор. 07.07.1983) и как вещества с антикальциевой активностью (патент РФ №2242471, дата приор. 31.07.2003), были выявлены искомые биологические активности. Таким образом, эти соединения являются препаратами с повышенной транквилизирующей активностью и заметным гепатопротекторным действием (результаты представлены в таблицах испытаний). Проверка их токсичности показала, что они низкотоксичны и, следовательно, могут быть применимы в практической медицине.
Химические соединения с аналогичной структурой, но разными радикалами-заместителями могут обладать разными биологическими свойствами.
Были синтезированы и изучены новые производные 7-окси-кумарина, а именно
2) 7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо-α-пирон, где R=H; R1 и R2=-CH2-CH2-CH2-
4) 7-(2'-метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, где R=СН3; R1=R2=H.
Новые синтезированные соединения проявляют транквилизирующие и гепатопротекторные свойства, т.е. задача решена положительно.
Общая методика синтеза
Метод O-алкилирования умбеллиферона и очистки продукта реакции модифицирован и отличается от стандартного способа по изобретению, описанного в авт. св. №1623152, что позволяет повысить выход конечного заданного продукта на 20% и снизить образование побочных соединений.
Реакцию алкилирования и получение 7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирона проводят в спиртовой среде при кипячении и перемешивании, по окончании алкилирования реакционную массу упаривают от спирта. Остаток растворяют в бензоле и экстрагируют непрореагировавший умбеллиферон 2% водным раствором соды. Чистоту полученного продукта реакции определяют с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ на силуфоле, УФ 254, в системе гептан:ацетон (3:2); Rf продукта 0,46). Раствор упаривают в вакууме и необходимые соединения выделяют с помощью разбавления остатка эфиром или гексаном. Получают белое кристаллическое вещество с выходом 70%.
Характеристики полученных соединений.
ЯМР-спектры соответствуют заявляемым структурам.
1. 7-(3'-Хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо-α-пирон, tпл 81-82°С.
ЯМР Н1 (ДМСО d6) δ, м.д.: 2,19-2,25 (М, 2Н, СН2), 2,38 (С, 3Н, СН3), 3,77-3,80 (т, 2Н, CH2), 4,17-4,20 (т, 2Н, СН2), 6,13 (С, СН), 6,90-6,91 (М, 2М, Av), 7,59-7,62 (М, 1М, Av).
2. 7-(3'-Хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо-α-пирон, tпл 129-130°С.
C15H15ClO3. Мол.вес 278,73. В %: С 64.64; Н 5.42; Cl 12.72; О 17.22.
Найдено: С 64.81, Н 5.31.
ЯМР Н1 (хлороформ d6) δ, м.д.: 2,16-2,30 (М, 4Н, CH2, CH2), 2,83-2,90 (М, 2Н, СН2), 2,98-3,06 (М, 2Н, CH2), 3,68-3,73 (М, 2Н, СН2), 4,13-4,20 (М, 2Н, CH2), 6,89-6,93 (М, 2Н, Av), 7,30-7,49 (М, 1Н, Av).
3. 7-(3'-Хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, tпл 54-56°С.
ЯМР Н1 (ДМСО d6) δ, м.д.: 2,19-2,25 (М, 2Н, СН2), 3,77-3,80 (т, 2Н, CH2), 4,19-4,22 (М, 2Н, СН2), 6,23-6,25 (Д, 1Н-СН=), 6,91-6,97 (М, 2H,-CH=, Av), 7,58-7,61 (д, 1Н, Av), 7,93-7,96 (д, 1Н, Av).
4. 7-(2'-Метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, tпл 66-68°С.
C13H13ClO3. Мол.вес 252,69. В %: С 61.79; Н 5.19; Cl 14.03; О 18.99.
Найдено: С 61.32, Н 5.29.
ЯМР Н1 (ДМСО d6) δ, м.д.: 1,05-1,07 (д, 3Н, СН3), 2,29-2,34 (М, 1Н, СН), 3,72-3,73 (М, 2Н, СН2), 3,99-4,01 (М, 2Н, CH2), 6,25-6,27 (д, 1Н, -СН=), 6,92-6,96 (М, 2Н, -СН=, Av), 7,58-7,60 (д, 1Н, Av), 7,93-7,96 (д, 1Н, Av).
Испытания транквилизирующего действия соединений.
Новые соединения (1, 2, 3, 4) в пяти дозах (0,1-20 мг/кг массы животного) внутрибрюшинно вводят белым мышам по 12 особей в каждой группе. Контрольной группе животных вводят равновеликий объем физиологического раствора. Через 30 минут после этого мышам вводят внутривенно тиопентал натрия от пороговой дозы 15 мг/кг и учитывают количество уснувших животных (боковое положение), по которому рассчитывают 50%-ную эффективную дозу (ЭД50). Результаты испытания потенцирующего действия приведены в таблице 2.
Из данных этой таблицы рассчитывают по методу Личфильда и Уилкоксона ЭД50, которая составила в мг/кг: соединение 1 - 32,0t1,4; соединение 2 - 38,1t1,4; соединение 3 - 40,3t2,3; соединение 4 - 45,4t1,8.
В данных испытаниях вещества дозировались в величинах, составляющих 0,5 ЭД50. Из таблицы 3 видно, что предложенные соединения в большей степени, чем диазепам, восстанавливают вертикальную и горизонтальную составляющие двигательной активности в стрессовых условиях, нормализуют вегетативные проявления стресса, показателями которых являются число дефекаций и грумминг.
Данные о токсичности соединений 1-4 (по параметру средней летальной дозы ЛД50), получены в опытах на белых мышах при внутривенном и пероральном путях введения заявляемых соединений. Данные представлены в таблице 1.
Для оценки взаимосвязи между отдельными паттернами поведения в тесте «открытого поля» результаты испытаний, проведенные как и в предыдущем случае, с некоторым расширением учитываемых паттернов, обрабатывают на ЭВМ с вычислением коэффициента Спирмена между отдельными паттернами поведения индивидуально для каждого животного, затем усредняют их. Коэффициенты Спирмена приводятся при Р=0,05. Результаты испытания приведены в таблице 4. Из таблицы 4 следует, что соединение 1 усиливает корреляционную связь между «побежками» и «вставаниями», снижает корреляционную связь между паттернами «дефекация» и «побежки». Соединение 2 вызывает подобную зависимость между отдельными паттернами, но повышает корреляционную связь между паттернами «дефекация» и «вставание». Соединение 3 усиливает связь между «побежками» и вставанием». Соединение 4 вызывает увеличение связи между «вставанием» и «сидением на месте», уменьшение связи между паттернами «вставание» и «грумминг», что свидетельствует о преимущественно угнетающем действии соединения. Все соединения ослабляют корреляционную связь между паттернами «дефекация» и «сидение на месте», что дополнительно доказывает наличие транквилизирующего действия.
Анксиолитическую активность испытуемых соединений изучают по тесту конфликтной ситуации. В опытах на 12 мышах-самцах и таком же количестве контрольных животных учитывали количество подхода к поилке и наказуемых взятий воды. Для этого животных, лишенных воды, помещали в камеру, состоящую из двух отсеков, в одном из которых имеется электродный пол и поилка. Животное помещали в отсек без электродного пола, при перемещении его в отсек с электродным полом и подходе к поилке на пол подавали электрический ток с заданными параметрами, которые строго выдерживают в течение всего опыта. Результаты испытаний приведены в таблице 5. Соединения обладают более выраженной анксиолитической активностью, чем диазепам.
Миореласирующее действие оценивают по методу вращающегося стержня. В таблице 6 приведены данные об удержании на стержне мышей при введении различных доз испытуемых соединений (испытания в каждой группе проводятся на 12 мышах). Установлено, что новые соединения практически лишены миорелаксирующих свойств.
Гепатозащитное действие соединений.
Гепатозащитное действие хлорпропоксипроизводного 7-окси-кумарина (умбеллиферона) оценивали по
- выживаемости животных;
- изменениям антитоксической функции печени (продолжительность гексеналового сна);
- экскреторной функции печени (бромсульфалеиновая проба);
- активности ферментов (АсАТ, АлАТ, ЩФ, ГГТ) в сыворотке крови;
- по изменениям белкового обмена;
- гистологическим изменениям ткани печени.
Выживаемость животных.
Гепатозащитное действие соединений 1-4 проявилось в том, что выживаемость животных, которым вводили ежедневно по 50 или 250 мг/кг на фоне введения CCl4, была почти в 2 раза выше (90%), чем в контроле (55%), и на 15% выше, чем у животных, получавших Розанол в дозе 30 мг/кг в течение месяца (таблица 8).
Состояние антитоксической функции печени (продолжительность гексеналового сна).
Соединения 1-4 в указанных дозах способствовали восстановлению антитоксической и секреторной функций печени: продолжительность гексеналового сна сократилась с 88±5 мин в контроле до 59±4 мин в опыте. Секреция бромсульфалеина у подопытных животных возросла в два раза по сравнению с контролем.
Состояние активности ферментообразовательной функции печени.
Соединения 1-4 в дозе 10 мг/кг и особенно 50 мг/кг достоверно проявили защитное действие, что сказалось на активности АсАТ, АлАТ, ЩФ и ГГТ. В этих опытах эффект соединений 1-4 в дозе 10 мг/кг был сопоставим с эффектом препарата сравнения Розанола в дозе 30 мг/кг (таблица 9).
О благоприятном влиянии соединений 1-4 на белковообразовательную функцию печени при длительном его применении можно судить по данным, представленным в таблице 10: соединения 1-4 при затравке CCl4 способны поддерживать белковообразовательную функцию печени практически на уровне интактных животных, предупреждать снижение концентрации альбуминов в крови и сохранять соотношение альбуминов и глобулинов на уровне, близком к таковому у интактных животных (таблица 10).
Морфологические показатели состояния печени.
Морфологические исследования печени крыс после введения CCl4 и лечения соединениями 1-4 показали отчетливые различия. Введение CCl4 у контрольных животных вызывал тяжелые дистрофические изменения в печени, выраженность которых начинала убывать с 15 суток, но не достигала полного восстановления даже к концу месяца, в то время как при лечении соединениями 1-4 параллельно с процессами повреждения уже на 7-9-й день отмечались компенсаторно-приспособительные процессы. Интенсивность их усиливалась и намного опережала картину восстановления у контрольных животных. У животных, получавших соединения 1-4, были отмечены более ранние сроки обратного развития процессов повреждения, которые сочетались с ядерными изменениями, отражающими интенсивность процессов компенсации.
Контрольная группа
7 дней. Тотальное поражение печени, выраженное с различной интенсивностью в пределах одного наблюдения. Повреждения преимущественно центральных отделов долек, реже - практически всей территории долек, исключая перипортальную зону. Гепатоциты - в состоянии мелко- и крупнокапельной жировой дистрофии, встречаются участки гидропической дистрофии. На этом фоне группы и отдельные гепатоциты в состоянии некробиоза, некроза, баллонной дистрофии. Клеточная реакция на некроз и дистрофию минимальна, в основном вокруг центральных вен. Портальные тракты - без особенностей. Кровенаполнение неравномерное, единичные диапедезные кровоизлияния. В некоторых участках периферических долек - гипертрофия ядер гепатоцитов и единичные митозы.
Подопытная группа - лечебное введение соединений 1-4
7 дней. Во всех наблюдениях преобладает мелко- и крупнокапельная жировая дистрофия, четко ограниченная центральными отделами долек. Некроз гепатоцитов отсутствует. В ряде случаев наряду с жировой имеется гидропическая дистрофия.
Контрольная группа
15 дней. Масштаб и интенсивность жировой дистрофии значительно снижены, имеет место очаговое распространение, четко ограниченное центром долек. Преобладает зернистая и очаговая гидропическая дистрофия. Встречаются очаговые внутридольковые лимфомакрофагальные инфильтраты. Отчетливо видно набухание и умеренная гиперплазия ретикулоэндотелия.
Подопытная группа - лечебное введение соединений 1-4
15 дней. Жировая дистрофия отсутствует или она носила мелкоочаговый характер в отдельных участках срезов. Преобладает очаговая гидропическая дистрофия. Значительно возрастает в сравнении с 7 днем исследования число клеток с гипертрофированными ядрами, которые расположены на протяжении всей дольки, но преобладают в периферических отделах. В портальных трактах небольшие лимфоидные инфильтраты.
Контрольная группа
21 день. Во всех наблюдениях на небольшом протяжении очаговая гидропическая дистрофия гепатоцитов. В большинстве участков сохранено радиальное расположение балок, лишь местами их дискомплексация. В периферических отделах долек значительное число гепатоцитов с гипертрофированными ядрами, встречаются группы двуядерных клеток. Портальные тракты несколько утолщены, подчеркивают границы долек, в них слабо выраженная лимфоидная инфильтрация.
Подопытная группа - лечебное введение соединений 1-4
21 день. Очаговая гидропическая и зернистая дистрофия, преимущественно в центральных отделах долек, там же слабо выраженные проявления дискомплексации гепатоцитов. По периферии долек большинство клеток с выраженной гипертрофией и гиперхромностью ядер, встречается значительное число двуядерных клеток. Портальные тракты со слабо выраженным склерозом, слабо выраженной лимфоидной инфильтрацией.
Контрольная группа
28 день. Преобладают дольки с радиальным расположением балок, в которых имеется слабо и умеренно выраженная зернистая дистрофия. В отдельных дольках - очаговая гидропическая дистрофия гепатоцитов. В периферических отделах долек - значительное число гепатоцитов с гипертрофией ядер, встречаются группы двуядерных клеток. Портальные тракты несколько утолщены, подчеркивают границы долек со слабо выраженной лимфоидной инфильтрацией. Признаки нарушения дольковой архитектоники и внутридолького склероза отсутствуют.
Подопытная группа - лечебное введение соединений 1-4
28 день. Явления дистрофии, в основном гидропической и зернистой, нерегулярны, слабо выражены. Еще более возрастает полиморфизм ядер периферических отделов долек за счет гипертрофии и гиперхроматоза ядер большинства гепатоцитов. Портальные тракты подчеркивают границы долек, благодаря тенденции к склерозу и лимфоидной инфильтрации.
Таким образом, при сравнительном изучении ткани печени животных контрольных и опытных групп в указанные сроки после введения четыреххлористого углерода и лечения соединениями 1-4 выяснились следующие особенности характера и течения патологических процессов:
- четыреххлористый углерод в использованной дозировке и сроках воздействия вызывал в паренхиме печени повреждения, которые проявлялись в виде дистрофических, некробиотических и в меньшей степени некротических изменений. Преобладающим и интенсивно выраженным видом дистрофии в контрольной группе была жировая дистрофия с поражением центральных отделов долек. При лечебном введении соединений 1-4 и, особенно при введении этого вещества с профилактической и лечебной целью, преобладающим типом дистрофии были зернистая и гидропическая;
- наиболее интенсивными дистрофические изменения были на 7-й день исследования; на 15-й день их выраженность была значительно снижена, даже в контрольной группе;
- наименее выраженными дистрофические изменения были в группе животных с профилактическим и лечебным применением соединений 1-4, к 15 дню они были уже слабо выраженными и непостоянными;
- в сроки 21, 28 дней во всех группах опыта и в контроле проявления повреждения практически отсутствовали или имели мелкоочаговый характер;
- параллельно с процессами повреждения в ткани печени развивались компенсаторно-приспособительные процессы. Однако в контрольной группе они возникали только на 15 день, а в опытных - уже на 7 сутки. В опытных группах, особенно при введении соединений 1-4 с профилактической и лечебной целью, интенсивность их значительно нарастала и ядерные изменения в виде гипертрофии, гиперхроматиз ма, двуядерности имели распространенный характер;
- стромальные и клеточные реакции были выражены незначительно как в контроле, так и в опытных группах. В контрольной группе, в отличие от опытных, на 15 сутки возникала активность ретикулоэндотелия, и был выражен склероз портальных трактов с их лимфоидной инфильтрацией.
Таким образом, степень повреждения и динамика течения патологических процессов в сравниваемых группах свидетельствовали о более интенсивных и тяжелых формах повреждения ткани печени CCl4 в контрольной группе, более поздних сроках обратного их развития, менее выраженных ядерных изменениях гепатоцитов, характерных для компенсаторно-приспособительных реакций в ответ на повреждение. При сравнении опытных групп характерным являются менее тяжелые, обратимые формы повреждения гепатоцитов, меньшая степень их распространения, отсутствие некроза, более ранние сроки обратного развития процессов повреждения и постоянное сочетание повреждения с ядерными изменениями, отражающими интенсивность процессов компенсации. Наиболее отчетливо эти явления наблюдались в серии опытов с введением соединений 1-4 в качестве профилактического и лечебного средства.
Вариабельность количественных и качественных характеристик описанных процессов позволяет говорить об определенных тенденциях и существенных различиях их течения в контрольных и опытных группах.
Из приведенных примеров видно, что алифатические производные проявляют незначительное миорелаксирующее действие и значительно отличаются от наиболее активного транквилизатора диазепама, что свидетельствует об их пониженном побочном эффекте.
Таким образом, алифатические хлорпропоксипроизводные 5,6-бензо-α-пирона оказывают выраженное транквилизирующее действие и по анксиолитической активности превосходят таковую у диазепама. Кроме того, они проявляют гепатопротекторное действие без побочных эффектов (таблицы 8, 9, 10).
| Таблица 1 | |||
| Токсичность новых соединений | |||
| Соединение № | Химическое название | ЛД90, мг/кг, Р=0,05 | |
| Внутрибрюшинно | Перорально | ||
| 1 | 7-(3'-хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо-α-пирон | 185,0 | 522,0 |
| 2 | 7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6- бензо-α-пирон |
220,0 | 610,0 |
| 3 | 7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон | 250,0 | 690,0 |
| 4 | 7-(2'-метил-3-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон | 100,0 | 302,0 |
| Таблица 2 | ||||||
| Потенцирование действия гексенала (15 мг/кг) соединениями 1-4 | ||||||
| Доза соединения 1, мг/кг (соединение 1) | 0, шт. (контроль) | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 |
| Заснуло мышей | 0, шт. | 0 | 0 | 2 | 6 | 8 |
| 0, % | 0 | 0 | 17,0 | 50,0 | 67,8 | |
| Доза соединения 1, мг/кг (соединение 2) | 0, шт. (контроль) | 0,025 | 0,05 | 0,1 | 0,25 | 2,0 |
| Заснуло мышей | 0, шт. | 0 | 5 | 6 | 8 | 12 |
| 0, % | 0 | 42,0 | 50,0 | 67,0 | 100,0 | |
| Доза соединения 1, мг/кг | 0, шт. (контроль) | 0,1 | 0,25 | 0,5 | 1,0 | 2,0 |
| (соединение 3) | ||||||
| Заснуло мышей | 0, шт. | 1 | 3 | 5 | 10 | 12 |
| 0, % | 8,0 | 25,0 | 41,0 | 83,0 | 100,0 | |
| Доза соединения 1, мг/кг (соединение 4) | 0, шт. (контроль) | 0,025 | 0,75 | 1,0 | 1,5 | 2,0 |
| Заснуло мышей | 0, шт. | 0 | 10 | 11 | 12 | 12 |
| 0, % | 0 | 83,3 | 92,0 | 100,0 | 100,0 |
| Таблица 3 | ||||
| Результаты сравнительных испытаний транквилизирующего действия | ||||
| Вещество | К контролю, % | |||
| побежки | вставания | дефекации | грумминг | |
| Физиологический раствор | 28,2±4,4 | 6,1+1,1 | 280,2+12,3 | 2,2+0,4 |
| Диазепам | 71,6±9,2 | 82,4±9,7 | 46,5±6,9 | 105,7±11,5 |
| Соединение 1 | 90,3±9,6 | 102,4±6,9 | 82,1±5,4 | 126,4±2,6 |
| Соединение 2 | 95,5±8,9 | 108,5±8,2 | 50,2±5,1 | 117,1±12,8 |
| Соединение 3 | 100,1±0,7 | 100,2±1,0 | 46,5±7,2 | 104,6±10,9 |
| Соединение 4 | 119,3±0,1 | 106,8±9,7 | 40,4±6,7 | 100±9,2 |
| Таблица 5 | |||
| Сравнительные испытания анксиолитической активности соединений (I) и диазепама (прототипа) | |||
| Испытуемое соединение | Доза, мг/кг | Количество | |
| Подход | Наказуемое взятие воды | ||
| Контроль | - | 16 | 4 |
| Соединение 1 | 1,0 | 19 | 15 |
| 5,0 | 29 | 16 | |
| 10,0 | 36 | 20 | |
| Соединение 2 | 0,5 | 16 | 14 |
| 1,0 | 32 | 17 | |
| Соединение 3 | 0,5 | 24 | 10 |
| 1,0 | 30 | 18 | |
| Соединение 4 | 0,5 | 36 | 12 |
| 1,0 | 28 | 15 | |
| Диазепам | 1,0 | 32 | 18 |
| Таблица 6 | |||
| Испытания стимулирующих центральную нервную систему (антидепресивных) свойств соединений 1-3 и соединения-аналога | |||
| Вещество | Доза, мг/кг | Общее время иммобилизации, М+м | Т, Р=0,05 |
| Бидистиллированная вода (контроль) | 350,0±19,9 | ||
| Соединение 1 | 0,5 | 302,6±20,2 | 1,4 |
| 1,0 | 252,0±15,6 | 3,9 | |
| Соединение 2 | 0,5 | 324,6±16,8 | 0,1 |
| 1,0 | 250,2±12,4 | 4,2 | |
| Соединение 3 | 0,5 | 312,4±13,0 | 1,6 |
| 1,0 | 201,0±12,6 | 6,2 | |
| Соединение-аналог | 0,5 | 344,6±11,4 | 0,2 |
| 1,0 | 286,0±18,2 | 2,0 |
| Таблица 7 | ||||||
| Миорелаксирующее действие соединений I, II, III и аналога | ||||||
| Вещество | Количество мышей, удержавшихся на стержне, при введении соединений в дозе, мг/кг | |||||
| 1 | 5 | 10 | 100 | 125 | 150 | |
| Соединение 1 | 12 | 11 | 8 | 6 | 6 | 2 |
| Соединение 2 | 12 | 8 | 6 | 2 | 0 | 0 |
| Соединение 3 | 12 | 8 | 7 | 1 | 0 | 0 |
| Соединение 4 | 12 | 7 | 5 | 1 | 0 | 0 |
| Диазепам | 6 | 1 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| Таблица 8 | |||
| Выживаемость крыс с подострым токсическим поражением печени, леченных соединениями 1-4 и Розанолом | |||
| Серия опытов и дозы | Число крыс в серии, принятое за 100% | Из них выжило | |
| Число, абс. | В процентах | ||
| Интактные | 20 | 20 | 100 |
| CCl4, 2 мл/кг через день в течение месяца | 20 | 11 | 55 |
| CCl4, 2 мл/кг, по схеме + соединения 1-4 20 мг/кг ежедневно в течение месяца | 20 | 15 | 75 |
| CCl4 2 мл/кг по схеме + соединения 1-4 50 мг/кг ежедневно в течение месяца | 20 | 18 | 90 |
| CCl4 2 мл/кг по схеме Розанол 30 мг/кг ежедневно в течение месяца | 20 | 15 | 75 |
| Таблица 9 | ||||
| Влияние соединений 1-4 и Розанола на активность ферментов сыворотки крови у крыс с подострым токсическим поражением печени (среднее из 15 в каждой серии) | ||||
| Серия опытов и дозы | АсАТ, мкмоль/л | АлАТ, мкмоль/л | ЩФ, нмоль/с.л | ГГТ, нмоль/с.л |
| Интактные | 0,42±0,06 | 0,36±0,02 | 581,48±0,2 | 548,2±0,1 |
| CCl4, 2 мл/кг через день в течение месяца | 2,33±0,03* | 2,16±0,01* | 1695,48±0,2* | 1839,12±0,8* |
| CCl4, 2 мл/кг по схеме + | 1,48±0,05*аб | 1,88±0,02*аб | 1048,31±0,3*аб | 826,12±0,5*аб |
| соединения 1-4, 10 мг/кг ежедневно в течение месяца | ||||
| CCl4, 2 мл/кг по схеме + соединения 1-4 50 мг/кг ежедневно в течение месяца | 1,18±0,02*аб | 0,98±0,02*аб | 933,15±0,6*аб | 483,41±0,2аб |
| CCl4 2 мл/кг по схеме Розанол 30 мг/кг ежедневно в течение месяца | 1,33±0,02*a | 1,13±0,01*a | 1008,10±0,3*а | 516,16±0,4a |
| Примечание: * - р≤0,05 по отношению к интактным животным; | ||||
| а - р≤0,05 по отношению к контрольной группе животных; | ||||
| б - р≤0,05 по отношению к группе животных, получавшим Розанол. |
1. Хлорпропоксипроизводные 7-окси-кумарина общей формулы
,
где а) 7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо-α-пирон, где R=H; R1 и R2=-CH2-CH2-CH2-,
б) 7-(2'-метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, где R=CH3; R1=R2=H, обладающие транквилизирующим и гепатопротекторным действием.
2. Применение хлорпропоксипроизводных 7-окси-кумарина общей формулы
,
где а) 7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо-α-пирон, где R=H; R1 и R2=-CH2-CH2-CH2-,
б) 7-(2'-метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, где R=CH3; R1=R2=H,
с) 7-(3'-хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо-α-пирон, где R1=CH3, R1=R2=H,
в) 7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, где R=R1=R2=H, в качестве транквилизирующих и гепатопротекторных препаратов.
