Способ оценки агрегационной способности эритроцитов
Владельцы патента RU 2452958:
Федеральное государственное учреждение "Нижегородский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (RU)
Изобретение относится к медицине и описывает способ оценки агрегационной способности эритроцитов, включающий выделение эритроцитов из крови и регистрацию их агрегационной способности, где в качестве индуктора агрегации используют хлористый цинк, при этом эритроциты помещают в кювету агрегометра, добавляют хлористый цинк до конечной концентрации 3-10 мМ и регистрируют степень агрегации фотометрическим методом. Способ дает возможность использовать новый индуктор агрегации эритроцитов с известным механизмом действия на мембраны клеток. 1 пр.
Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к исследованию биологической жидкости, в частности крови, и может быть использовано при лабораторных исследованиях.
Известны способы оценки агрегационной способности эритроцитов с помощью высокомолекулярного декстрана (Rampling M.W. et al. Biorheology. - 2004. - Vol.41. - P.91-112), полилизина (Danon D. Bibl. Anat. - 1973. - Vol.11. - P.289-295).
Известен также способ оценки агрегационной способности эритроцитов путем их выделения из крови, регистрации агрегационной способности и использования в качестве индуктора агрегации катионного красителя акридинового оранжевого (см. патент РФ №2390778, 2010 г.).
Однако механизм действия на эритроциты остается до настоящего времени неизученным.
Поэтому задача создания способов оценки агрегационной способности с использованием новых агрегантов с известным механизмом действия на эритроциты является актуальной.
По данным ряда авторов, хлористый цинк ингибирует транспорт анионов эритроцитов (Tu Y.P., Xu Н. Bioski Rep. - 1994. - Vol.14. - P.159-169), вызывает кластеризацию белка 3 (Turini F. et al. Blood. - Vol.81. - P.3146-3152), изменяет структурное состояние мембран (Suwalsky M. et al. J.Inorg. Biochemistry - 2009. - V.103. - Р.797-804.), нарушает асимметричное расположение фосфолипидов в эритроцитах (Kiedaisch V. et al. Am. J.Clin. Nutr. - 2008. - Vol.87. - P.1530-1534).
Нами показано, что хлористый цинк в концентрациях 3-10 мМ стимулирует выраженную агрегацию эритроцитов.
Задачей предлагаемого изобретения является использование нового индуктора агрегации эритроцитов с известным механизмом действия на мембраны клеток.
Поставленная задача решается тем, что предлагаемый способ оценки агрегационной способности эритроцитов включает выделение эритроцитов из крови и регистрацию их агрегации, при этом хлористый цинк добавляют до конечной концентрации 3-10 мМ.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом. Эритроциты трижды отмывают от плазмы и белых клеток центрифугированием в 10-кратном объеме физиологического раствора. Отмытые эритроциты ресуспендируют в соотношении 1:200 в забуференном физиологическом растворе (10 мМ трис-HCI, 146 мМ NaCl, pH 7,4), после чего суспензию клеток помещают в кювету для изучения агрегационной способности и добавляют хлористый цинк до конечной концентрации 3-10 мМ.
Регистрацию агрегационной способности осуществляют фотометрическим методом (Шереметьев Ю.А. и др. Биофизика - 2000. Т.45. №1. с.79-82).
Способ оценки агрегационной способности эритроцитов, включающий выделение эритроцитов из крови и регистрацию их агрегационной способности, отличающийся тем, что в качестве индуктора агрегации используют хлористый цинк, при этом эритроциты помещают в кювету агрегометра, добавляют хлористый цинк до конечной концентрации 3-10 мМ и регистрируют степень агрегации фотометрическим методом.
