Способ прогнозирования развития бактериального осложнения стафилококковой этиологии после гриппа



Способ прогнозирования развития бактериального осложнения стафилококковой этиологии после гриппа
Способ прогнозирования развития бактериального осложнения стафилококковой этиологии после гриппа

 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2452960:

Учреждение Российской академии наук Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения Российской академии наук (RU)
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Оренбургская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской микробиологии, и может быть использовано в клинической практике для прогнозирования развития бактериального осложнения стафилококковой этиологии после гриппа. Для прогнозирования развития бактериального осложнения стафилококковой этиологии после гриппа из микрофлоры слизистой оболочки носоглотки больного гриппом выделяют чистую культуру S.aureus, у выделенных штаммов S.aureus определяют гемолитическую активность (ГА) и антилизоцимную активность (АЛА), затем соинкубируют in vitro S.aureus с вирусом гриппа В, повторно определяют у S.aureus гемолитическую и антилизоцимную активность и при повышении у S.aureus после соинкубирования ГА на 1 мм и более и/или АЛА на 1 мкг/мл и более прогнозируют развитие бактериального осложнения. Изобретение позволяет прогнозировать развитие бактериального осложнения стафилококковой этиологии у больных гриппом, что дает возможность планировать и реализовывать целенаправленные превентивные лечебные мероприятия, сокращающие сроки пребывания больного в стационаре. 5 пр., 1 табл., 2 ил.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской микробиологии, и может быть использовано в клинической практике для прогнозирования развития бактериального осложнения стафилококковой этиологии после гриппа.

В настоящее время проблеме бактериальных осложнений после гриппозной инфекции уделяют большое внимание. Патогенез постгриппозных осложнений недостаточно выяснен [Александрова М.А., Яковлев С.В. Пневмония как осложнение гриппа. // Русский медицинский журнал. - 2006. - №2. - с.90-94; Колобухина Л.В. Клиника и лечение гриппа. // Русский медицинский журнал. - 2001. - №9. - с.16-17].

Рядом исследователей установлено, что существует тесная патогенетическая взаимосвязь между вирусами и бактериями [Кондратенко Г.П., Гриценко Л.З., Гнилицкая В.Б., Иваницкий С.М. Значение ассоциаций микроорганизмов в развитии острых пневмоний. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1989. - №6. - с.8-11; Кондрашев П.А. Роль вирусобактериальных ассоциаций в этиологии острых синуситов. // Новости оториноларингологии и логопатологии. - 2002. - №1. - с.74-76].

Многие авторы отмечают, что микрофлора верхних дыхательных путей играет важную роль в этиологии осложнений при гриппе [Ермолина Г.Б., Беляева Е.В., Деглева Г.К. и др. Особенности микрофлоры дыхательных путей при различных респираторных заболеваниях. // Нижегородский медицинский журнал. - 2004. - №1. - с.8-12; Миронов А.Ю., Савицкая К.И., Воробьев А.А. Условно-патогенные микроорганизмы при заболеваниях дыхательных путей у больных региона Московской области. // Журнал микробиологии. - 2000. - №1. - с.81-84].

Ряд исследователей указывают, что гриппозная инфекция активирует размножение микрофлоры верхних дыхательных путей, которая, в свою очередь, может отягощать течение гриппа даже в отсутствие явных осложнений, увеличивая длительность лихорадочного периода [Смородинцев А.А. Грипп и его профилактика. // Руководство для врачей. - Л., 1984; Учайкин В.Ф. Диагностика, лечение и профилактика гриппа и острых респираторных заболеваний у детей. // Пособие для врачей. - М., 2001; Шаханина К.Л. Грипп и острые респираторные заболевания - приоритетная социально-экономическая проблема здравоохранения. // Здравоохранение. - 1998. - №9 - с.169].

Известно, что гриппозная инфекция вызывает изменения микрофлоры верхних дыхательных путей в сторону увеличения количества стафилококков и грамотрицательных палочек и уменьшения количества стрептококков [Степанец В.И., Строгановская Н.В., Патратий В.К., Соболь М.А. Изучение влияния гриппозной инфекции на нормальную микрофлору верхних дыхательных путей. // Вирусы и вирусные заболевания. Республиканский межведомственный сборник. - «Здоров'я». - Киев. - 1972. - №1. - с.103-107].

Определению факторов патогенности бактерий при гриппе посвящено ряд исследований [Шендерович С.Ф., Токарь Р.Г., Закстельская Л.Я. Смешанная бактериально-вирусная инфекция в культуре ткани почек эмбриона человека, вызванная вирусом гриппа и стафилококком. // Вопросы вирусологии. - 1973. - №2. - с.207-209; Нуромская О.А., Бойченко Т.Л., Семенихина Г.С., Потулова Е.К., Кириллина А.И. Экспериментальное изучение ассоциированной стафилококковой, стрептококковой и аденовирусной инфекции в культуре ткани. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - №1. - 1978. - с.30-34; Tashiro М., Ciborowski P., Reinacher М., Pulverer G., Klenk H.D., Rott R. Synergistic role of staphylococcal proteases in the induction of influenza vims pathogenicity. // Virology. - 1987. - Vol.157. - P.421-430].

Однако механизм симбиотических взаимоотношений бактерий и вируса гриппа, а также патогенез постгриппозных осложнений исследованы недостаточно.

Актуальным является разработка способа прогнозирования развития бактериальных осложнений стафилококковой этиологии после гриппа, который позволит прогнозировать течение заболевания, а следовательно, подобрать оптимальные схемы лечения, сокращающие сроки пребывания больного в стационаре.

Аналогов изобретения в патентной и научно-технической литературе не обнаружено.

Технический результат, на достижение которого направлено изобретение, заключается в создании способа прогнозирования развития бактериального осложнения стафилококковой этиологии после гриппа.

Для достижения указанного технического результата в заявляемом способе прогнозирования развития бактериального осложнения стафилококковой этиологии после гриппа из микрофлоры слизистой оболочки носоглотки больного гриппом выделяют чистую культуру S.aureus, у выделенных штаммов S.aureus определяют гемолитическую активность (ГА) и антилизоцимную активность (АЛА), затем соинкубируют in vitro S.aureus с вирусом гриппа B, повторно определяют у S.aureus гемолитическую и антилизоцимную активность и при повышении у S.aureus после соинкубирования ГА на 1 мм и более и/или АЛА на 1 мкг/мл и более прогнозируют развитие бактериального осложнения.

Технический результат от реализации изобретения выражается в возможности прогнозирования развития у больных гриппом бактериального осложнения стафилококковой этиологии, что позволяет планировать и реализовывать целенаправленные превентивные лечебные мероприятия, сокращающие сроки пребывания больного в стационаре.

Известно, что взаимодействие между бактерией и вирусом может проявляться через модификацию факторов патогенности. Одним из основных факторов патогенности стафилококка является гемолитическая активность [Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Карташова О.Л. Биология патогенных кокков. - М.: Медицина; Екатеринбург: УрО РАН, 2002, с.35], а фактором персистенции - антилизоцимная активность [Бухарин О.В. Антилизоцимный признак бактерий и перспективы его практического использования. // Персистенция микроорганизмов. / Под ред. О.В.Бухарина. Куйбышев, 1987, с.4-10].

Авторами экспериментально установлена информативность определения гемолитической и антилизоцимной активностей Staphylococcus aureus для прогнозирования развития у больных гриппом бактериальных осложнений стафилококковой этиологии.

Было обследовано 278 человек больных гриппом. У каждого больного помимо клинико-лабораторных методов диагностики проводилось бактериологическое исследование носа и миндалин с выделением чистых культур S.aureus и определением у них ГА и АЛА.

В эксперименте использовали штамм S.aureus, так как он является наиболее частым возбудителем постгриппозных пневмоний и бронхитов (до 30%) [Treanorr J.J. Influenza virus. In: Principles and Practice of Infectious Diseases, 6 th ed. Mandell G.L., Bennett J.E., Dolin R. // Churchill Livingstone, Philadelphia. - 2005. - P.2060].

Известно взаимное влияние вируса гриппа и S. aureus, что приводит к повышению риска инфекций, вызванных стафилококками [Nickerson C.L., Jakab GJ. Pulmonary antibacterial defenses during mild and severe influenza virus infection. // Infect Immun. - 1990. - Vol.58. - P.2809-2814].

Это связано с тем, что вирус гриппа повышает специфическую адгезию S.aureus к эпителию дыхательных путей, а протеазы стафилококка могут усиливать репликацию вируса гриппа [Sanford B.A., Ramsay M.A. Bacterial adherence to the upper respiratory tract of ferrets infected with influenza A vims. // Proc Soc Exp. Biol. Med. 1987. - Vol.185. - P.120-128; Tashiro М., Ciborowski P. et al. Synergistic role of staphylococcal proteases in the induction of influenza virus pathogenicity. // Virology. - 1987. - Vol.157. - P.421-430; Davison V.E., Sanford B.A. Adherence of Staphylococcus aureus to influenza A vims-infected Madin-Darby canine kidney cell cultures. // Infect Immun. - 1981. - Vol 32. - P.118-126]. Этот механизм может способствовать синергидному взаимодействию вирусов и стафилококков и быть причиной более тяжелого течения сочетанной инфекции. Штаммы вируса гриппа снижают фагоцитарный киллинг S.aureus, приводя к повышенной чувствительности к его суперантигенам [Abramson J.S., Lewis J.C., Lyies D.S. et al. Inhibition of neutrophil lysosome-phagosome fusion associated with influenza virus infection in vitro. Role in depressed bactericidal activity. // J. Clin. Invest. - 1982. - Vol.69. - P.1393-1397].

В эксперименте был использован вирус гриппа В, так как, во-первых,он более стабилен в эксперименте, чем вирус гриппа А, а во-вторых, за последние 3 года в городе Оренбурге эпидемический подъем заболевания был обусловлен именно этим типом вируса гриппа. Вирус гриппа B выделяется в период эпидемического сезона. Выделенные изоляты вируса гриппа B хранятся в вирусологической лаборатории в замороженном состоянии при - 20°C в течение 1 года (до начала следующего эпидемического сезона) и общедоступны для различных исследований [Методические рекомендации «Выделение вируса гриппа в клеточных культурах и куриных эмбрионах и их идентификация». - СПб., 2006, - С.14].

Было изучено 40 штаммов S.aureus, выделенных со слизистой оболочки носоглотки больных гриппом людей, из них 18 штаммов S.aureus от больных гриппом с бактериальными осложнениями, а 22 штамма S.aureus от больных гриппом без бактериальных осложнений.

Выделение и идентификацию S.aureus проводили по общепринятым схемам, используя тест-системы фирмы «Lachema» (Чехия) [Методические рекомендации по выделению и идентификации бактерий рода Staphylococcus - Москва, 1990]. У выделенных микроорганизмов были определены по известным методикам гемолитическая [Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. - М.: Медицина, 1982. - С.168] и антилизоцимная активность [Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Малышкин А.П., Немцева Н.В. Метод определения антилизоцимной активности микроорганизмов. // Журнал микробиология. - 1984. - №2. - С.27-28].

Модель ассоциации вируса гриппа В и S.aureus воспроизводили на культуре клеток MDCK. На первом этапе формировали монослой клеток MDCK.

Ростовая среда готовилась по общепринятой методике [Методические рекомендации «Выделение вируса гриппа в клеточных культурах и куриных эмбрионах и их идентификация». - СПб., 2006. - 24 с.]: к 19 мл среды DMEM (без сыворотки) добавлялось 0,5 мл бычьего альбумина (V фракция), 0,5 мл 1 М HEPES-буфера, 0,4 мл ТРСК-трипсина (до конечной концентрации 2,0 мкг/мл). ТРСК-трипсин из 1 ампулы предварительно регидратировали в 2 мл стерильной дистиллированной воды и добавляли в среду в указанном выше количестве. В подготовленную среду добавляли 30 мкл концентрированного раствора пенициллина и стрептомицина. Затем к 1 мл взвеси клеток MDCK (в концентрации 400 тыс. клеток/мл) добавляли 2 мл ростовой среды.

Для формирования монослоя клеток MDCK пробы инкубировали в термостате 48 часов при 37°C. Затем ростовую среду сливали и 2-3 раза отмывали средой DMEM, после чего среду DMEM удаляли.

Параллельно готовили опытную и контрольные пробы - контроль 1 и контроль 2.

В опытной пробе и контроле 2 в монослой клеток MDCK вносили 0,1 мл вируса гриппа B в концентрации 4 агглютинирующие единицы (АЕ) на 1 мл 1% суспензии эритроцитов. Для адсорбции вируса на культуре клеток MDCK пробы инкубировали в термостате 60 минут при 37°C.

В контроле 1 в монослой клеток MDCK вместо вируса добавляли 0,1 мл физиологического раствора и также инкубировали 60 минут в термостате при 37°C.

Затем в опытную пробу и контроль 1 добавляли 0,1 мл 106 взвеси S.aureus и 1 мл среды DMEM, поддерживающей рост культуры клеток. При добавлении к 0,1 мл 106 КОЕ/мл взвеси S.aureus 1 мл среды DMEM получается конечная концентрация стафилококка 1×105 КОЕ/мл.

В контроль 2 добавляли только 1 мл среды DMEM.

Опытную и контрольные пробы инкубировали 48 часов при 37°C.

Затем из опытной пробы и контроля 2 брали 0,1 мл содержимого и помещали в новый монослой клеток MDCK и в течение 6 суток ежедневно определяли цитопатическое действие (ЦПД).

Для изучения свойств стафилококка после инкубации 0,1 мл содержимого из опытной пробы и контроля 1 переносили на чашки Петри с 5% кровяным агаром и растирали равномерно стеклянным шпателем.

Инкубировали в термостате 24 часа при 37°C и подсчитывали число колоний для выявления интенсивности роста стафилококков и определяли у них ГА и АЛА.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием программы «Biostat», «Statistica 6,0», «SPSS 11.0».

Результаты исследования представлены на диаграммах (фиг.1 и фиг.2) и таблице.

Нам фиг.1 отображено влияние вируса гриппа B на гемолитическую активность S.aureus при их соинкубировании. По вертикали обозначена выраженность гемолитической активности в мм. Столбец черного цвета обозначает уровень гемолитической активности S.aureus, выделенных от больных с бактериальными осложнениями после гриппа, после соинкубирования с вирусом гриппа B. Столбец с косой штриховкой обозначает уровень гемолитической активности S.aureus, выделенных от больных без бактериальных осложнений, после соинкубирования с вирусом гриппа B. Столбец белого цвета обозначает уровень гемолитической активности S.aureus, выделенных от больных с бактериальными осложнениями после гриппа, до соинкубирования с вирусом гриппа В. Столбец белого цвета в черную точку обозначает уровень гемолитической активности S.aureus, выделенных от больных без бактериальных осложнений после гриппа, до соинкубирования с вирусом гриппа В.

Как видно из представленной диаграммы (фиг.1), гемолитическая активность у S.aureus после соинкубирования с вирусом гриппа B при бактериальных осложнениях в среднем увеличивается в 13,5 раз (на 2,5 мм), а при гриппе без бактериальных осложнений уровень гемолитической активности у S.aureus не увеличился.

Нам фиг.2 отображено влияние вируса гриппа B на антилизоцимную активность S.aureus при их соинкубировании. По вертикали обозначена выраженность гемолитической активности в мкг/мл. Столбец черного цвета обозначает уровень антилизоцимной активности S.aureus, выделенных от больных с бактериальными осложнениями после гриппа, после соинкубирования с вирусом гриппа B. Столбец с косой штриховкой обозначает уровень антилизоцимной активности S.aureus, выделенных от больных без бактериальных осложнений, после соинкубирования с вирусом гриппа B. Столбец белого цвета обозначает уровень антилизоцимной активности S.aureus, выделенных от больных с бактериальными осложнениями после гриппа, до соинкубирования с вирусом гриппа B. Столбец белого цвета в черную точку обозначает уровень антилизоцимной активности S.aureus, выделенных от больных без бактериальных осложнений после гриппа, до соинкубирования с вирусом гриппа В.

Как видно из представленной диаграммы (фиг.2), антилизоцимная активность у S.aureus после соинкубирования с вирусом гриппа B при бактериальных осложнениях в среднем увеличивается в 20 раз (на 3,9 мкг/мл), а при гриппе без бактериальных осложнений уровень антилизоцимной активности не увеличился.

В таблице показано повышение значений ГА и АЛА у S.aureus, выделенных от больных с различным характером течения заболевания, после соинкубирования с вирусом гриппа В.

Как видно из таблицы, после соинкубирования с вирусом гриппа B у S.aureus при бактериальных осложнениях отмечается повышение ГА на 1 мм и выше, а при гриппе без бактериальных осложнений повышение ГА меньше 1 мм.

Повышение АЛА у S.aureus после соинкубирования с вирусом гриппа B при бактериальных осложнениях гриппа регистрировался от 1 мкг/мл и более, а при гриппе без бактериальных осложнений повышение АЛА было меньше 1 мкг/мл.

Таким образом, если у S.aureus, выделенного от больного гриппом, после соинкубирования с вирусом гриппа B, ГА повышается на 1 мм и более и/или АЛА на 1 мкг/мл и более можно прогнозировать развитие бактериального осложнения стафилококковой этиологии.

Способ осуществляется следующим образом:

1. Тампон с исследуемым материалом (слизистый секрет из носоглотки больного гриппом) засевают на чашки Петри с 5% кровяным агаром методом секторов по Gould, выделяют чистую культуру S.aureus [Методические рекомендациями по выделению и идентификации бактерий рода Staphylococcus. - Москва, 1990. - 28 с.].

2. У выделенных S.aureus определяют по известным методикам гемолитическую активность (ГА) [Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. - М.: Медицина, 1982. - С.168] и антилизоцимную активность (АЛА) [Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Малышкин А.П., Немцева Н.В. Метод определения антилизоцимной активности микроорганизмов. // Журнал микробиология. 1984. - №2. - С.27-28].

3. Затем соинкубируют in vitro S.aureus с вирусом гриппа B по описанной выше методике. Вирус гриппа B выделяется в период эпидемического сезона. Выделенные изоляты вируса гриппа B хранятся в вирусологической лаборатории в замороженном состоянии при - 20°C в течение 1 года (до начала следующего эпидемического сезона) и общедоступны для различных исследований [Методические рекомендации «Выделение вируса гриппа в клеточных культурах и куриных эмбрионах и их идентификация». - СПб., 2006, - С.14].

4. После соинкубирования повторно определяют у S.aureus гемолитическую и антилизоцимную активность и при повышении у S.aureus ГА на 1 мм и более и/или АЛА на 1 мкг/мл и более прогнозируют развитие бактериального осложнения.

Примеры конкретного выполнения способа

Пример 1. Больной Б. был госпитализирован в муниципальную городскую клиническую инфекционную больницу г.Оренбурга с диагнозом "Грипп". Диагноз подтвержден вирусологически и методом ПЦР.

В первый день поступления из микрофлоры слизистой оболочки носоглотки больного были выделен и идентифицирован с использованием биохимических тестов фирмы «Lachema» (Чехия) стафилококк S.aureus. У выделенного возбудителя определяли гемолитическую активность (ГА) и антилизоцимную активность (АЛА):

ГА=1 мм, АЛА=1 мкг/мл.

Затем соинкубировали in vitro S.aureus с вирусом гриппа B (хранившимся в вирусологической лаборатории) и повторно определяли у S.aureus гемолитическую и антилизоцимную активность:

ГА=2 мм, АЛА=5 мкг/мл.

В результате исследования отмечено, что после соинкубирования выделенного S.aureus с вирусом гриппа B произошло повышение уровня ГА на 1 мм, а АЛА на 4 мкг/мл, что позволило сделать прогноз о возможном развитии бактериального осложнения.

Дальнейшее течение заболевания подтвердило правильность прогностического заключения, сделанного с использованием заявляемого способа. У больного развилось бактериальное осложнение - правосторонняя нижнедолевая пневмония.

Пример 2. Больной П. был госпитализирован в муниципальную городскую клиническую инфекционную больницу г.Оренбурга с диагнозом "Грипп". Диагноз подтвержден вирусологически и методом ПЦР.

В первый день поступления из микрофлоры слизистой оболочки носоглотки больного были выделен и идентифицирован с использованием биохимических тестов фирмы «Lachema» (Чехия) стафилококк S.aureus. У выделенного возбудителя определяли гемолитическую активность (ГА) и антилизоцимную активность (АЛА):

ГА=2 мм, АЛА=3 мкг/мл.

Затем соинкубировали in vitro S.aureus с вирусом гриппа В и повторно определяли у S.aureus гемолитическую и антилизоцимную активность:

ГА=4 мм, АЛА=5 мкг/мл.

В результате исследования отмечено, что после соинкубирования выделенного S.aureus с вирусом гриппа B произошло повышение уровня ГА на 2 мм, а АЛА на 2 мкг/мл, что позволило сделать прогноз о возможном развитии бактериального осложнения.

Дальнейшее течение заболевания подтвердило правильность прогностического заключения, сделанного с использованием заявляемого способа. У больного развилось бактериальное осложнение - острый бронхит.

Пример 3. Больная П. была госпитализирована в муниципальную городскую клиническую инфекционную больницу г.Оренбурга с диагнозом "Грипп". Диагноз подтвержден вирусологически и методом ПЦР.

В первый день поступления из микрофлоры слизистой оболочки носоглотки больного были выделен и идентифицирован с использованием биохимических тестов фирмы «Lachema» (Чехия) стафилококк S.aureus. У выделенного возбудителя определяли гемолитическую активность (ГА) и антилизоцимную активность (АЛА):

ГА=1 мм, АЛА=2 мкг/мл.

Затем соинкубировали in vitro S.aureus с вирусом гриппа B и повторно определяли у S.aureus гемолитическую и антилизоцимную активность:

ГА=1 мм, АЛА=4 мкг/мл.

В результате исследования отмечено, что после соинкубирования выделенного S.aureus с вирусом гриппа B уровень выраженности ГА у S.aureus остался неизменным, а значение АЛА повысилось на 2 мкг/мл, что позволило сделать прогноз о возможном развитии бактериального осложнения.

Дальнейшее течение заболевания подтвердило правильность прогностического заключения, сделанного с использованием заявляемого способа. У больной развилось бактериальное осложнение - правосторонняя нижнедолевая пневмония.

Пример 4. Больной Н. был госпитализирован в муниципальную городскую клиническую инфекционную больницу г.Оренбурга с диагнозом "Грипп". Диагноз подтвержден вирусологически и методом ПЦР.

В первый день поступления из микрофлоры слизистой оболочки носоглотки больного были выделен и идентифицирован с использованием биохимических тестов фирмы «Lachema» (Чехия) стафилококк S.aureus. У выделенного возбудителя определяли гемолитическую активность (ГА) и антилизоцимную активность (АЛА):

ГА=2 мм, АЛА=3 мкг/мл.

Затем соинкубировали in vitro S.aureus с вирусом гриппа B и повторно определяли у S.aureus гемолитическую и антилизоцимную активность:

ГА=4 мм, АЛА=3 мкг/мл.

В результате исследования отмечено, что после соинкубирования выделенного S.aureus с вирусом гриппа B произошло повышение уровня ГА на 2 мм, а значение АЛА не изменилось, что позволило сделать прогноз о возможном развитии бактериального осложнения.

Дальнейшее течение заболевания подтвердило правильность прогностического заключения, сделанного с использованием заявляемого способа. У больного развилось бактериальное осложнение - острый бронхит.

Пример 5. Больной С. был госпитализирован в муниципальную городскую клиническую инфекционную больницу г.Оренбурга с диагнозом "Грипп". Диагноз подтвержден вирусологически и методом ПЦР.

В первый день поступления из микрофлоры слизистой оболочки носоглотки больного был выделен и идентифицирован с использованием биохимических тестов фирмы «Lachema» (Чехия) стафилококк S.aureus. У выделенного возбудителя определяли гемолитическую активность (ГА) и антилизоцимную активность (АЛА):

ГА=2 мм, АЛА=4 мкг/мл.

Затем соинкубировали in vitro S.aureus с вирусом гриппа В и повторно определяли у S.aureus гемолитическую и антилизоцимную активность:

ГА=2 мм, АЛА=4 мкг/мл.

В результате исследования отмечено, что после соинкубирования выделенного S.aureus с вирусом гриппа B уровень выраженности ГА и АЛА у S.aureus остался неизменным, что позволило сделать положительный прогноз.

Дальнейшее течение заболевания подтвердило правильность прогностического заключения, сделанного с использованием заявляемого способа. Бактериального осложнения после гриппа у больного не наблюдалось.

Таким образом, заявляемый способ позволяет прогнозировать развитие бактериального осложнения стафилококковой этиологии у больных гриппом, что дает возможность планировать и реализовывать целенаправленные превентивные лечебные мероприятия, сокращающие сроки пребывания больного в стационаре.

Повышение значений ГА и АЛА у S.aureus, выделенных от больных с различным характером течения заболевания, после соинкубирования с вирусом гриппа B
Повышение значений ГА у S.aureus после соинкубирования с вирусом гриппа B (мм) Число штаммов S. aureus с повышением значений ГА(%) Частота развития осложнений (%)
<1 45,0 0
1 20,0 15,3
2 10,0 20,6
3 20,0 28,4
4 5,0 35,7
Повышение значений АЛА у S.aureus после соинкубирования с вирусом гриппа B (мкг/мл) Число штаммов S. aureus с повышением значений АЛА (%) Частота развития осложнений (%)
<1 38,8 0
1 5,6 11,1
2 5,6 15,3
3 11,1 21,2
4 22,2 24,7
5 16,7 27,7

Способ прогнозирования развития бактериального осложнения стафилококковой этиологии после гриппа, заключающийся в том, что из микрофлоры слизистой оболочки носоглотки больного гриппом выделяют чистую культуру S.aureus, у выделенных штаммов S.aureus определяют гемолитическую активность (ГА) и антилизоцимную активность (АЛА), затем соинкубируют in vitro S.aureus с вирусом гриппа В, повторно определяют у S.aureus гемолитическую и антилизоцимную активность и при повышении у S.aureus после соинкубирования ГА на 1 мм и более и/или АЛА на 1 мкг/мл и более прогнозируют развитие бактериального осложнения.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины. .

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования риска снижения уровня резистентности организма к острым респираторным заболеваниям у детей в возрасте 3-7 лет.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования риска снижения уровня резистентности организма к острым респираторным заболеваниям у детей в возрасте 3-7 лет по степени гемолиза эритроцитов капиллярной крови.
Изобретение относится к области медицины, а именно иммунологии, хирургии, реаниматологии. .

Изобретение относится к медицине и описывает способ латеральной проточной иммунохроматографии для определения наркотических средств в ротовой жидкости человека, при этом способ включает сбор ротовой жидкости коллектором с последующим нанесением ее на тест-полоску, содержащую последовательно расположенные зоны: конъюгат Ат-метки, содержащий специфические антитела к наркотику, меченные золотом; тестовую, содержащую иммобилизованные конъюгаты аналит: овальбумин; и контрольную, содержащую антивидовые антитела; с последующим определением действительности теста путем наблюдения присутствия окрашенной полосы в контрольной зоне, и определение присутствия наркотика в ротовой жидкости путем наблюдения появления окрашенной полосы в тестовой зоне, причем в качестве конъюгата использют аналит: белок, полученный карбодиимидным методом из макромолекулярного носителя овальбумина, в качестве аналита используют гаптены, являющиеся производными наркотических веществ (морфина, амфетамина, кокаина и тетрагидроканнабинола), содержащие спейсер с карбоксильной группой при соотношении количества молей гаптена на молекулу белка, равному 12-15, а в качестве конъюгата Ат-метка используют моноклональные антитела к исследуемым антигенам наркотических веществ, полученные гибридомной технологией на основе конъюгированных антигенов, полученных из макромолекулярного носителя бычьего сывороточного альбумина и указанных выше гаптенов, производных наркотических веществ.
Изобретение относится к области медицины, в частности паразитологии, и может быть использовано для диагностики описторхоза у больных циррозом печени. .

Изобретение относится к медицине, в частности к биохимии, и может быть использовано для оценки функционального состояния почек. .

Изобретение относится к области фармакологии и может быть использовано для определения дубильных веществ в растительном сырье. .

Изобретение относится к области медицины, онкологии и молекулярной биологии и может быть использовано для диагностики рака молочной железы. .
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной микробиологической диагностике при лечении больных с термической травмой. .

Изобретение относится к медицине и касается способа детектирования апоптоза в клетке млекопитающего, где апоптоз инициирован рецептором "гибели" 4, рецептором "гибели" 5 или Fas.
Изобретение относится к области медицины. .

Изобретение относится к медицине и описывает способ определения количества конъюгированного таксана в конъюгате полиглутаминовая кислота-таксан, где одна или более молекул таксана связаны через 2'-гидрокси-положение с -карбоксильной группой -поли-L-глутаминовой кислоты, включающий стадии: а) взаимодействия конъюгата полиглутаминовая кислота-таксан с соединением формулы R1R2N-NH2 (I) с получением несвязанного таксана и гидразида полиглутаминовой кислоты и b) определения количества несвязанного таксана.
Изобретение относится к медицине и касается способа выбора метода детоксикации при острой хирургической патологии органов брюшной полости. .

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, эндокринологии и лучевой диагностике. .
Изобретение относится к области медицины, а именно клинической микробиологии. .
Наверх