N-(2-бензотиазолил)амид 3-бром-2,4-диоксо-4-(4-метоксифенил)бутановой кислоты, обладающий гипогликемической активностью
Владельцы патента RU 2455293:
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО ПГФА Росздрава) (RU)
Изобретение относится к N-(2-бензотиазолил)амиду 3-бром-2,4-диоксо-4-(4-метоксифенил)бутановой кислоты формулы 1. Технический результат - N-(2-бензотиазолил)амид 3-бром-2,4-диоксо-4-(4-метоксифенил)бутановой кислоты, обладающий высокой гипогликемической активностью и низкой токсичностью. 1 табл., 1 пр.
Изобретение относится к области органической химии, к новым биологически активным веществам класса N-гетериламидов 4-арил-2,4-диоксобутановых кислот, а именно к N-(2-бензотиазолил)амиду 3-бром-2,4-диоксо-4-(4-метоксифенил)бутановой кислоты (1) формулы:
обладающему гипогликемической активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве гипогликемического средства.
Ближайшим аналогом по структуре заявляемому соединению является N-(2-бензотиазолил)амид 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-метоксифенил)-2-бутеновой кислоты (2) [Гипогликемическая активность производных ароилпировиноградных кислот / Пулина Н.А., Юшкова Т.А., Краснова А.И. [и др.] // Фармация. - 2009. - №7. - С.36-38.] формулы:
Структурный аналог 2 не обладает гипогликемической активностью.
Эталоном сравнения выбран метформин (3), который широко применяется в лечебной практике и является аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - Т.2. - С.562-563].
Задачей изобретения является поиск в ряду N-гетериламидов 4-арил-2,4-диоксобутановых кислот веществ с выраженной гипогликемической активностью и низкой токсичностью.
Поставленная задача достигается получением N-(2-бензотиазолил)амида 3-бром-2,4-диоксо-4-(4-метоксифенил)бутановой кислоты (1), обладающего гипогликемической активностью.
Заявляемое соединение 1 синтезируют взаимодействием N-(2-бензотиазолил)амида 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-метоксифенил)-2-бутеновой кислоты (2) с бромом в безводном хлороформе при эквимолярном соотношении реагентов, при температуре 20-25°C с последующим выделением целевого продукта известными методами по схеме:
Пример 1 получения соединения 1. К суспензии 3.54 г (0.01 моль) N-(2-бензотиазолил)амида 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-метоксифенил)-2-бутеновой кислоты в 50 мл безводного хлороформа прикапывают 1.60 г (0.01 моль) брома. Реакционную смесь перемешивают при температуре 20-25°C до полного растворения реагента и раствор выдерживают 12 ч. Реакционную смесь охлаждают до 0°C, выпавший осадок отфильтровывают, перекристаллизовывают из четыреххлористого углерода. Выход 3.22 г (74%). Т.пл. 123-125°C. Найдено, %: C 49.82; H 3.42; Br 18.29; N 6.40. C18H13BrN2O4S. Вычислено, %: C 49.67; H 3.47; Br 18.36; N 6.44.
ИК спектр (Specord M80, вазелиновое масло, v, см-1): 3290 ш (NHCO), 1750, 1720, 1680 (NHCO, C2=O, C4=O). Спектр ЯМР 1H (BS-567A (100 МГц), ДМСО-d6, ГМДС, δ, м.д.): 3.76 с (3H, СН3О), 7.06 с (1H, C3H), 7.12-7.97 м (8H, 2 C6H4), 9.73 с (1H, NH).
Заявляемое соединение 1 представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в диоксане, диметилсульфоксиде, умеренно растворимое в четыреххлористом углероде, нерастворимое в воде.
Гипогликемическая активность соединения 1 изучена на модели аллоксанового диабета. Опыты выполнены на белых беспородных крысах обоего пола массой 180-200 г. В каждой серии использовались 6 животных. Экспериментальную гипергликемию моделировали подкожным введением аллоксана в дозе 170 мг/кг. Соединение 1 вводили перорально крысам с аллоксановым диабетом в дозе 50 мг/кг в виде взвеси в 2% крахмальном растворе. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество 2% крахмального раствора. Концентрацию глюкозы в крови животных определяли глюкозооксидазным методом до введения исследуемого соединения 1 (контроль), а также через 120 мин после его введения (опыт) [Волчегорский И.А., Рассохина Л.М., Мирошниченко И.Ю. Антиоксиданты при экспериментальном сахарном диабете // Проблемы эндокринологии, 2008. - Т.54. - №5. - С.43-50]. Крыс лишали пищи за 16 часов до опыта и на время его проведения. Степень гипогликемической активности изучаемого соединения 1 через 120 минут после его введения сравнивали с активностью метформина в дозе 50 мг/кг. Результаты обработаны статистически с определением критерия Стьюдента с помощью статистических программ Windows XP (Excel).
Острую токсичность заявляемого соединения 1 при пероральном введении изучали на белых мышах обоего пола массой 18-20 г с определением ЛД50 [Методические указания по изучению общетоксического действия фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией член-корр. РАМН, проф. Р.У.Хабриева. - 2-изд., перераб. и доп. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - С.41-54]. В каждой серии использовались 6 животных. Наблюдение вели ежечасно в течение суток после введения соединения 1 в виде взвеси в 2% крахмальном растворе. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество 2% крахмального раствора. Результаты обрабатывали по Прозоровскому с вычислением средней смертельной дозы (ЛД50) при P=0,05 [Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.И. // Фармакология и токсикология. - 1978. - №4. - С.497-502].
Установлено, что ЛД50 соединения 1 составляет 3800 мг/кг. Согласно классификации токсичности препаратов, соединение 1 относится к классу малотоксичных веществ [Измеров И.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов. М.: Медицина, 1977, с.196-197].
| Таблица | |||||
| Гипогликемическое действие при аллоксановом диабете и острая токсичность соединения 1 | |||||
| Серии опытов | ЛД50, мг/кг | Доза, мг/кг | Уровень глюкозы, ммоль/л | % торможения гипергликемии | |
| Контроль | Через 120 мин | ||||
| Соедине ние 1 |
3800 | 50 | 17,3±1,0 | 7,2±0,3*** | 58,4*** |
| Метфор мин |
1266 (1050-1485) | 50 | 16,6±0,8 | 8,2±0,9*** | 50,6*** |
| Примечание: *** = р<0,001 |
Как видно из таблицы, соединение 1 проявило гипогликемическую активность на модели аллоксанового диабета, превышающую действие метформина. При этом заявляемое вещество 1 в 3 раза менее токсично, чем препарат сравнения.
Таким образом, N-(2-бензотиазолил)амид 3-бром-2,4-диоксо-4-(4-метоксифенил)бутановой кислоты (1) проявляет высокую гипогликемическую активность и обладает значительно меньшей токсичностью в сравнении с метформином, что делает возможным его использование в медицине для создания новых лекарственных препаратов, обладающих гипогликемической активностью.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гипогликемическая активность производных ароилпировиноградных кислот / Пулина Н.А., Юшкова Т.А., Краснова А.И. [и др.] // Фармация. - 2009. - №7. - С.36-38.
2. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - Т.2. - С.562-563.
3. Волчегорский И.А., Рассохина Л.М., Мирошниченко И.Ю. Антиоксиданты при экспериментальном сахарном диабете // Проблемы эндокринологии, 2008. - Т.54. - №5. - С.43-50.
4. Методические указания по изучению общетоксического действия фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией член-корр. РАМН, проф. Р.У.Хабриева. - 2-изд., перераб., и доп.. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - С.41-54.
5. Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.И. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки // Фармакология и токсикология. - 1978. - №4. - С.497-502.
6. Измеров И.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов. М.: Медицина, 1977. - С.196-197.
N-(2-бензотиазолил)амид 3-бром-2,4-диоксо-4-(4-метоксифенил)бутановой кислоты формулы:
обладающий гипогликемической активностью.
