Способ дифференциальной диагностики морфологических форм рака предстательной железы


 


Владельцы патента RU 2455643:

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "НИЖЕГОРОДСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ (ГОУ ВПО "НижГМА" МИНЗДРАВСОЦРАЗВИТИЯ РОССИИ) (RU)

Настоящее изобретение относится к медицине и описывает способ дифференциальной диагностики морфологических форм рака предстательной железы, включающий исследование образца сыворотки крови, обработку полученных данных и диагностику заболеваний, где перед исследованием в образец сыворотки крови вводят химические реагенты, а именно: фосфатный буфер с рН 7,4-7,5, раствор сульфата железа (FeSO4) и перекись водорода, световой поток, выделяющийся в результате протекания химической реакции, регистрируют и измеряют величину максимальной интенсивности свечения (Imax) и светосумму (S), характеризующую свечение в течение первых 30 секунд, и при значении максимальной интенсивности свечения (Imax) выше 3,2 мВ и светосуммы (S) выше 24,9 мВ диагностируют злокачественную опухоль предстательной железы как опухоль с инфильтративным ростом, а при значении Imax, равном или меньшем 3,2 мВ, и S, равном или меньшем 24,9 мВ, диагностируют злокачественную опухоль предстательной железы без инфильтративного роста. Изобретение позволяет осуществлять дифференциальную диагностику морфологических форм рака предстательной железы с высокой точностью, а именно инфильтративной и неинфильтративной форм рака предстательной железы, кроме того, предлагаемый способ экономичен и прост в исполнении. 1 з.п. ф-лы, 4 пр.

 

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к урологии и лабораторной диагностике, и может быть использовано для дифференциальной диагностики морфологических форм рака предстательной железы (РПЖ).

Злокачественные опухоли предстательной железы в общей структуре онкологической заболеваемости занимают третье-четвертое место, а среди онкоурологической патологии - первое.

При РПЖ, так же как и при других злокачественных новообразованиях, принципиально важно дифференцировать морфологические формы злокачественных новообразований (патологию), так как ответ на данный вопрос позволяет определить дальнейшую лечебную тактику ведения пациента и прогнозирование исхода лечения.

Известно, что опухоли простаты являются гетерогенными, но заключение выносится по преимущественной морфологической картине, получаемой с помощью биопсии, которая может быть взята из участков опухоли, структура которых не доминирует у данного больного. Это снижает ценность данного исследования при РПЖ и заставляет искать более точные и менее травматичные методы диагностики.

Все гистологические классификации выделяют хорошо дифференцированные аденокарциномы, которые медленно прогрессируют, и плохо дифференцированные аденокарциномы, которые прогрессируют быстро, плохо поддаются гормонотерапии, приводя к раннему обширному метастазированию и выраженному местно-деструирующему росту [1]. Таким образом, выявление опухолей с инфильтративным ростом, подлежащих альтернативному (химиолучевому) лечению, имеет большое клиническое и прогностическое значение.

В настоящее время известен способ дифференциальной диагностики рака предстательной железы, который позволяет дифференцировать злокачественную и доброкачественную патологию предстательной железы [2]. Данный способ включает выполнение трансректального ультразвукового исследования и определение уровня сывороточного простатспецифического антигена (ПСА), а также дополнительное определение и плотности свободной фракции простатспецифического антигена в крови больного. Однако по современным представлениям ПСА не может являться основным объективным критерием заболевания по причине большого количества ложноположительных результатов, отмечаемых при инфекционных заболеваниях, и ложноотрицательных, получаемых в ходе лечения. Также уровень ПСА не отражает характер роста опухоли и чувствительность к гормонотерапии [3].

По морфологической картине опухолей выделяют опухоли без инфильтративного роста, которые медленно прогрессируют, и инфильтративно растущие опухоли, которые прогрессируют быстро, плохо поддаются гормонотерапии, приводя к обширному метастазированию и выраженному местно-деструирующему росту. Выявление опухолей с инфильтративным ростом, подлежащих альтернативному (химиолучевому) лечению, имеет большое клиническое и прогностическое значение [4]. Так известен способ диагностики новообразований цитологическим путем для их классификации по признаку злокачественности у онкологических больных и определения результатов их лечения.

Данный способ осуществляют путем забора цитологической пробы в месте новообразования однопросветной иглой, снабженной на конце датчиком сопротивления R и емкости С, подключенных к регистрирующему прибору, фиксирующему в динамике диаграмму кривых R и С во время введения иглы, под контролем ультразвукового исследования по глубине прохождения иглы. По диаграмме R и С определяют активную зону роста опухоли. Способ позволяет получать экспресс-информацию о структуре тела опухоли [5].

Однако данный способ диагностики не учитывает гетерогенности опухоли предстательной железы, что снижает точность диагностики. Наиболее близким по совокупности существенных признаков является известный способ диагностики заболеваний предстательной железы, который принят авторами в качестве прототипа [6].

Предлагаемый способ осуществляется следующим образом: у больного производят забор венозной крови, отделяют сыворотку и готовят образец для ИК-спектроскопии, для этого ее высушивают и суспензируют с вазелиновым маслом, спектроскопический анализ полученного образца выполняют в области 1200-1000 см-1, затем производят определение высот пиков полос поглощения с максимумами при 1160 см-1 к 1140 см-1; 1165 см-1 к 1150 см-1; 1040 см-1 к 1025 см-1; полученное трехмерное распределение этой группы проецируют во фронтальную плоскость для получения двумерных координат и соотносят с границами плоских эталонных диагностических "образов" патологий предстательной железы и "образом" состояния нормы, данные "образы" представляются в виде плоских многогранников, границы которых составляют следующие значения: норма - X (-1,15; -0,9; 0,45; 0,0; -0,65), соответственно У (0,99; 4,2; 4,2; 0,9; 0,46); патология - X (-1,15; -1,15; 0,35; 0,0; -0,65), соответственно У (0,99; -0,03; 0,48; 0,09; 0,46). Далее производят дифференцировку нормы и патологии в зависимости от расположения полученной точки в системе координат. Затем для ИК-спектров образцов сыворотки крови пациентов, соответствующих по параметрам "образу патологии", производят дополнительную математическую обработку. Сначала вычисляют трехмерное распределение, а именно отношение высоты пика с максимумом 1060 см-1 к высоте пика с максимумом при 1050 см-1; 1170 см-1 к 1160 см-1; 1160 см-1 к 1025 см-1, а затем проецируют его на фронтальную плоскость и соотносят с эталонными диагностическими "образами" аденомы предстательной железы и рака предстательной железы. Значения координат "образов" для соотношений второй группы составляют: онкология - X (0,28; 0,77; 1,24; 0,96); соответственно У (0,75; 0,46; -0,13; -0,02); аденома - X (0,28; 1,24; 2,21; 1,24; 0,77); У (0,75; 1,24; -0,12; -0,13; 0,46); дифференциальную диагностику патологии проводят в зависимости от расположения точки внутри «образа» конкретной патологии.

Данный способ обладает высокой точностью определения злокачественной и не злокачественной патологии предстательной железы. Однако при этом данный способ не позволяет дифференцировать морфологические формы рака предстательной железы.

Кроме того, при реализации данного способа требуется многоэтапное исследование и сложная математическая обработка результатов, требующая использования специальной компьютерной программы, что увеличивает затраты времени и средств.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа дифференциальной диагностики морфологических форм рака предстательной железы, обладающего высокой точностью и не требующего значительных материальных затрат и простого в исполнении.

Поставленная задача решается предлагаемым способом дифференциальной диагностики морфологических форм рака предстательной железы, включающим исследование образца сыворотки крови, обработку полученных данных и диагностику заболеваний, согласно изобретению, перед исследованием в образец сыворотки крови вводят химические реагенты, а именно фосфатный буфер с pH 7,4-7,5, раствор сульфата железа (FeSO4) и перекись водорода, световой поток, выделяющийся в результате протекания химической реакции-хемилюминесценции, регистрируют с использованием фотоэлектронного умножителя и измеряют величину максимальной интенсивности свечения (Imax) и светосумму (S), характеризующую свечение в течение первых 30 секунд, и при значении максимальной интенсивности свечения (Imax) выше 3,2 мВ и светосуммы (S) выше 24,9 мВ диагностируют злокачественную опухоль предстательной железы как опухоль с инфильтративным ростом, а при значении (Imax), равном или меньшем 3,2 мВ, и светосуммы (S), равном или меньшем 24,9 мВ, диагностируют злокачественную опухоль предстательной железы без инфильтративного роста. Предпочтительно, что для исследования берут образец как свежеприготовленной сыворотки крови, так и образец сыворотки крови, подвергнутый предварительному замораживанию.

Новым техническим результатом предлагаемого способа является то, что он позволяет с высокой точностью осуществлять дифференциальную диагностику морфологических форм рака предстательной железы, при его экономичности и простоте.

Данный технический результат обусловлен тем, что перед исследованием в образец сыворотки крови вводят химические реагенты, а именно: фосфатный буфер с pH 7,4-7,5, раствор сульфата железа (FeSO4) и перекись водорода, затем световой поток, выделяющийся в результате протекания химической реакции, регистрируют с использованием фотоэлектронного умножителя величину максимальной интенсивности свечения (Imax) и светосумму (S), характеризующую свечение в течение первых 30 секунд, и при значении максимальной интенсивности свечения (Imax) выше 3,2 мВ и светосуммы (S) выше 24,9 мВ, диагностируют злокачественную опухоль предстательной железы как опухоль с инфильтративным ростом, а при значении (Imax), равном или меньшем 3,2 мВ, и светосуммы (S), равном или меньшем 24,9 мВ, диагностируют злокачественную опухоль предстательной железы без инфильтративного роста.

При этом для исследования используют образец, как свежеприготовленной сыворотки крови, так и образец сыворотки крови, подвергнутый предварительному замораживанию.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

Берут образец сыворотки крови пациента, свежеприготовленной или подвергнутой предварительному замораживанию, перед его исследованием в образец сыворотки крови вводят химические реагенты, а именно: фосфатный буфер с pH 7,4-7,5, раствор сульфата железа (FeSO4) и перекись водорода, затем световой поток, выделяющийся в результате протекания химической реакции - хемилюминесценции, регистрируют, в частности на приборе БХЛ-06М, с помощью фотоэлектронного умножителя и на основании полученных данных определяют величину максимальной интенсивности свечения (Imax) и светосумму (S), характеризующую свечение в течение первых 30 секунд, и при значении максимальной интенсивности свечения (Imax) выше 3,2 мВ и светосуммы (S) выше 24,9 мВ диагностируют злокачественную опухоль предстательной железы как опухоль с инфильтративным ростом, а при значении (Imax), равном или меньшем 3,2 мВ, и S, равном или меньшем 24,9 мВ, диагностируют злокачественную опухоль предстательной железы без инфильтративного роста.

Реализация предлагаемого способа занимает ~1 мин.

При этом выбор определяемых параметров светового потока соответствует общепризнанной методике, разработанной на основе инструкции к прибору в работе [7].

Предлагаемым способом на базе Нижегородской областной больницы им. Н.А.Семашко было проведено диагностирование 76 больных раком предстательной железы.

Примеры конкретного использования предлагаемого способа

Пример 1

Больной К., 40 лет.

Клинически установлен диагноз РПЖ.

В образец свежеприготовленной сыворотки крови больного перед исследованием ввели химические реагенты: фосфатный буфер с pH 7,5. раствор сульфата железа (FeSO4) и перекись водорода, затем световой поток, выделяющийся в результате протекания химической реакции, регистрировали с использованием прибора БХЛ-06М и определили величину максимальной интенсивности свечения (Imax) мВ и светосумму (S) мВ, характеризующую свечение в течение первых 30 секунд, при этом значение максимальной интенсивности свечения (Imax) составило - 4,599 мВ и светосуммы (S) - 37,99 мВ.

На основании полученных данных был поставлен диагноз: злокачественная опухоль предстательной железы с инфильтративным ростом. При биопсии выявлен рак предстательной железы с инфильтративным ростом темноклеточной карциномы (гистология №13083/7).

Пример 2

Больной В., 79 лет.

Клинически установлен диагноз РПЖ.

Способ осуществляли, как в примере 1, только для исследования был взят образец сыворотки крови больного, подвергнутый предварительному замораживанию, а фосфатный буфер с pH 7,4.

При этом значение максимальной интенсивности свечения (Imax) составило - 3,98 мВ и светосуммы (S) - 29,92 мВ.

На основании полученных данных поставлен диагноз: злокачественная опухоль предстательной железы с инфильтративным ростом.

При биопсии выявлен рак предстательной железы с инфильтративным ростом - карцинома преимущественно темноклеточная (гистология №78657/63).

Пример 3

Больной К., 69 лет.

Клинически установлен диагноз РПЖ.

Способ осуществляли, как в примере 1, только для исследования был взят фосфатный буфер с pH 7,4.

При этом значение максимальной интенсивности свечения (Imax) составило - 2,52 мВ и светосуммы (S) - 20,87 мВ.

На основании полученных данных поставлен диагноз: злокачественная опухоль предстательной железы без инфильтративного роста.

При биопсии выявлен рак предстательной железы, светлоклеточная карцинома (гистология №93003/7).

Пример 4.

Больной Б., 73 года.

Клинически установлен диагноз РПЖ.

Способ осуществляли, как в примере 1, только для исследования был взят образец сыворотки крови больного, подвергнутый предварительному замораживанию.

При исследовании образца плазмы методом биохемилюминисценции определены значения Imax - 2,75 мВ и S - 24,02 мВ.

На основании полученных данных поставлен диагноз: злокачественная опухоль предстательной железы без инфильтративного роста. При биопсии выявлен рак предстательной железы, светлоклеточный вариант РПЖ (гистология №69605/8).

Как видно из полученных результатов, предлагаемый способ позволяет осуществлять дифференциальную диагностику морфологических форм рака предстательной железы с высокой точностью, а именно инфильтративной и неинфильтративной форм рака предстательной железы, результаты которой необходимы для отбора больных для проведения наиболее адекватного лечения заболевания.

Кроме того, предлагаемый способ не требует больших материальных затрат и прост в исполнении.

Источники информации

1. Под ред. Н.Е.Кушлинского, Ю.Н.Соловьева, М.Ф.Трапезниковой. Рак предстательной железы. М.: Изд. РАМН, 2002, с.432.

2. Патент РФ №2259163, заявка №2004105286/14, от 24.02.2004 на «Способ дифференциальной диагностики рака предстательной железы».

3. D.Connolly [et al.]. Repeating an Abnormal Prostate-specific Antigen (PSA) Level: How Relevant Is a Decrease in PSA? Prostate Cancer Prostatic Dis. 2009, 12 (1), p.47.

4. Кочетов M.B. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная система в хирургическом лечении больных доброкачественной гиперплазией предстательной железы в до- и послеоперационном периодах. Ж. Системный анализ и управление в биомедицинских системах. 2007, том 6, №4, с.979.

5. Патент РФ №2148947, заявка №99105857 от 23.03.1999 на «Способ диагностики новообразований цитологическим путем для их классификации по признаку злокачественности у онкологических больных и определение результатов их лечения».

6. Патент РФ №2246898, заявка №2003112710/14 от 06.05.2003 на «Способ диагностики рака предстательной железы».

7. Кузьмина Е.И., Нелюбин А.С., Щенникова М.К. Применение индуцированной хемилюминисценции для оценки свободнорадикальных реакций в биологических субстратах. Межвузовский сборник биохимии и биофизики микроорганизмов. Горький, 1983, с.179.

1. Способ дифференциальной диагностики морфологических форм рака предстательной железы, включающий исследование образца сыворотки крови, обработку полученных данных и диагностику заболеваний, отличающийся тем, что перед исследованием в образец сыворотки крови вводят химические реагенты, а именно: фосфатный буфер с рН 7,4-7,5, раствор сульфата железа (FeSO4) и перекись водорода, световой поток, выделяющийся в результате протекания химической реакции, регистрируют и измеряют величину максимальной интенсивности свечения (Imax) и светосумму (S), характеризующую свечение в течение первых 30 с, и при значении максимальной интенсивности свечения (Imax) выше 3,2 мВ и светосуммы (S) выше 24,9 мВ диагностируют злокачественную опухоль предстательной железы как опухоль с инфильтративным ростом, а при значении Imax, равном или меньшем 3,2 мВ, и S, равном или меньшем 24,9 мВ, диагностируют злокачественную опухоль предстательной железы без инфильтративного роста.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что для исследования берут образец как свежеприготовленной сыворотки крови, так и образец сыворотки крови, подвергнутый предварительному замораживанию.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической лабораторной диагностике, и описывает способ диагностики вялотекущего гнойно-воспалительного процесса при эндопротезировании, включающий определение числа фагоцитов до операции, отличающийся тем, что расчет фагоцитарной активности нейтрофилов производят у пациентов через 12-24 месяцев после имплантации и если: ФП (фагоцитарный показатель) составляет 81,0-92,0%, ПЗФ (показатель завершенности фагоцитоза) - 65-77%, КАФ (количество активных фагоцитов) - 2,6-3,1 (109/л), то полученные данные оценивают как нестабильность эндопротеза без признаков гнойно-воспалительного процесса; ФП составляет 92,0-94,5%, ПЗФ - 60-64%, КАФ - 3,3-3,6 (109/л), то полученные данные оценивают как нестабильность эндопротеза с признаками вялотекущего гнойно-воспалительного процесса.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, неврологии, терапии, лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки эффективности сосудистой терапии по содержанию аннексин-V позитивных и негативных эндотелиальных клеток в крови.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной гематологии. .
Изобретение относится к медицине и описывает способ приготовления суспензии эритроцитов для определения деформируемости эритроцитарных мембран, включающий забор венозной крови, проведение отмывки эритроцитов и ресуспензирование, отличающийся тем, что производят 3-кратную отмывку эритроцитов, каждую отмывку осуществляют в рефрижераторной центрифуге при скорости 2700 об/мин в течение 8 минут, при температуре 36,6°C в растворе низкой ионной силы Liss с pH 7,4, при этом в процессе второй отмывки эритроцитов в отличающийся раствор Liss добавляют трипсин в концентрации 2 мг/мл, при третьей отмывке эритроцитов происходит удаление трипсина, причем после каждой проведенной отмывки эритроцитов удаляют надосадочную жидкость и вновь добавляют на каждые 1,0 мл суспензии эритроцитов 5,0 мл раствора Liss, a после третьей отмывки 0,1 мл отмытых эритроцитов ресуспензируют в 1,9 мл раствора Liss.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования вирусологического ответа у больных хронической сочетанной HBV/HCV-инфекцией при проведении противовирусной терапии хронического гепатита В.
Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и может быть использовано при диагностике опухолей костной системы. .

Изобретение относится к области медицины и касается способа прогнозирования эффективности иммуносупрессивной терапии хронического гломерулонефрита с нефротическим синдромом.
Изобретение относится к медицине и может и касается способа определения динамики тяжести состояния больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом. .
Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития и скорости прогрессирования фиброза капсулы хрусталика после удаления врожденной катаракты у детей раннего возраста.

Изобретение относится к области медицины. .
Изобретение относится к медицине и касается способа прогнозирования развития рецидива стенокардии после реваскуляризации миокарда
Изобретение относится к медицине, точнее к профилактической медицине и лабораторной диагностике, и описывает способ скриннинговой оценки функционального состояния организма человека, включающий сбор конденсата выдыхаемой влаги (экспирата), подготовку биосенсора - люминесцентных лифилизированных бактерий «Эколюм», добавление к 0,5 см3 биосенсора 0,5 см3 экспирата, 15-минутную экспозицию, измерение интенсивности люминесценции смеси суспензии бактерий и конденсата в течение 1000 сек, фиксирование ее максимального уровня (Иоп, имп/сек.), сопоставление этого значения с аналогичным параметром Ик, имп/сек, полученным при внесении в кювету биолюминометра вместо конденсата дистиллированной воды в равном объеме, установление коэффициента К как отношения Иоп/Ик, при значениях которого К=1 констатируют оптимальный окислительный статус, при К>1 - преобладание прооксидантных процессов (высокий уровень образования кислородных радикалов, недостаточный уровень защиты от их повреждающего действия), при К<1 - активные антиоксидантные процессы, достаточные резервы защитных механизмов

Изобретение относится к биологии, а именно к иммунологии, и может быть использовано для хемилюминесцентного анализа в ветеринарии

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и касается способа прогнозирования развития остеопенического синдрома в послеродовом периоде

Изобретение относится к медицине, а именно кардиологии, и может быть использовано для индивидуального прогнозирования фатального сердечно-сосудистого события

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической биохимии и хирургии, и может быть использовано для диагностики течения раневого процесса при синдроме диабетической стопы
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и касается способа прогнозирования развития смешанной клещевой энцефалит-боррелиозной инфекции
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и касается способа прогнозирования развития смешанной клещевой энцефалит-боррелиозной инфекции

Изобретение относится к медицине и касается способа диагностики идиопатического нарушения носового дыхания у беременных
Наверх