Фармацевтическая композиция для лечения онкологических заболеваний

Изобретение относится к области медицины и фармацевтической промышленности и касается средства, предназначенного для лечения различных форм онкологических заболеваний. Средство обладает повышенной эффективностью и содержит в качестве действующих компонентов дихлорацетат натрия и теофиллин при соотношении от 1:1 до 10:1. 9 пр., 4 ил.

 

Изобретение относится к области медицины и касается лекарственного средства, предназначенного для лечения различных форм онкологических заболеваний.

Известно, что ранний канцерогенез происходит в гипоксическом микроокружении, при этом метаболизм клеток при опухолевой трансформации, переключаются на анаэробный гликолиз (1). При этом индуцируется фактор HIF (Hypoxia-inducible factor), который, в свою очередь, вызывает индукцию экспрессии нескольких видов транспортеров глюкозы и большинства ферментов гликолиза (2). HIF индуцирует экспрессию киназы пируватдегидрогеназы (PDK) (3). Лактоацидоз способствует опухолевому росту путем ремоделирования-деструкции внеклеточного матрикса, увеличения метастатического потенциала и подвижности клеток и активации ангиогенеза. Хотя в некоторых случаях опухоли васкуляризуются и перестают быть в значительной степени в гипоксических условиях (с возможным сохранением обедненных кислородом зон из-за недостаточности васкуляризации), выбор клетками аэробного гликолиза сохраняется. Это может свидетельствовать о том, что такое изначальное адаптивное метаболическое приспособление обеспечивает выживаемость и селекцию раковых клеток - трансформация в гликолитический фенотип способствует устойчивости к апоптозу (3, 4, 5). Митохондриальный мембранный потенциал и продукция активных форм кислорода (АФК) зависят от цепи переноса электронов (ЭТЦ), деполяризация и возрастание АФК ассоциированы с открыванием пор МТР (6) и высвобождением проапоптотических факторов, в частности, цитохрома С и апоптоз-индуцирующего фактора.

В ряде клеточных линий показана гиперполяризация митохондрий (7) по сравнению с нормальными клетками (8), в ряде других опухолевых линий, по нашим наблюдениям, возможны флуктуации уровня АФК. Снижение поступления пирувата, по-видимому, приводит к падению продукции АФК и закрытию редокс-зависимых каналов, к митохондриальной гиперполяризации и, как следствие, к устойчивости к апоптозу. Необходимо также учитывать, что апоптоз - энергозависимый активный процесс, требующий аденозин трифосфата (АТФ), в этой связи более эффективное энергообеспечение будет также способствовать апоптозу.

Наиболее близким аналогом (прототип) заявленного лекарственного средства является известный (9, 10), проходящий в настоящее время мультицентровые клинические исследования лекарственный препарат Dicloracetate Sodium (DCA) - он же дихлорацетат натрия (ДХА), который используется в качестве средства для лечения лактоацидоза и различных видов опухолевых заболеваний (11). Его противоопухолевая активность в качестве индуктора апоптоза опухолевых клеток доказана в экспериментальных работах (12, 13). Проведенные исследования (14, 15) доказывают индукцию апоптоза ДХА в глиобластоме, в клеточных культурах рака эндометрия, простаты и немел коклеточного рака легких. Кроме того, убедительно доказана способность ДХА индуцировать апоптоз в культурах клеток рака молочной железы. При этом было показано, что в культуре клеток аденокарциномы молочной железы крысы переключение гликолитического фенотипа при воздействии ДХА коррелировало с ингибированием пролиферации без какого-либо увеличения гибели клеток. Согласно опубликованным данным, положительный эффект от применения препарата у 90 больных отмечается в 67% случаев, причем в исследование включались только пациенты с метатастатическими формами рака, у которых традиционные методы терапии были неэффективны.

Известен также применяемый с 1889 года в качестве спазмолитического, бронхолитического, противоастматического, вазодилатирующего, кардиотонического, диуретического, средства препарат теофиллин (метилксантин), проявляющий эффект по активации окислительного фософорилирования и увеличению содержания АТФ (16), а также индуцирующий апоптоз опухолевых клеток, активируя его р53-зависимый механизм (12, 13).

Задача настоящего изобретения заключается в расширении ассортимента эффективных лекарственных средств для лечения онкологических заболеваний.

Технический результат заключается в повышении эффективности известного лекарственного средства.

Указанный технический результат достигается за счет того, что фармацевтическая композиция для лечения злокачественных опухолевых заболеваний на основе дихлорацетата натрия дополнительно содержит теофиллин (далее - ТФ), при этом соотношение дихлорацетата натрия к теофиллину составляет от 1:1 до 10:1.

Такие диапазоны соотношений определяются колебаниями оптимальных терапевтических концентраций действующих активных компонентов. (55-110 ммоль/л для ТФ и 50-520 ммоль/л для ДХА)

Заявленное лекарственное средство (торговая марка - Теохлонал (далее - ТХ)) - представляет собой фармацевтическую композицию (гомогенизированная смесь) из двух активных фармацевтических субстанций - дихлорацетата натрия (ДХА) и теофиллина (ТФ) и, при необходимости, фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ).

Вспомогательными веществами при изготовлении лекарственных препаратов на основе заявленной композиции могут быть, например: а) в таблетках: целлюлоза микрокристаллическая, крахмал картофельный, тальк, стеариновая кислота, титана диоксид, лактоза (сахар молочный), эмульсия кэ 10-16, полисорбат-80; б) в капсулах: кукурузный крахмал, полисорбат-80 (пластификатор), краситель пищевой е 133, краситель пищевой е 17, желатин, в) в суспензии для приема внутрь: сахароза, натрия гидроксид, метилпарагидроксибензоат, этанол 96%, натрия цитрат, кислота лимонная моногидрат, ароматы фруктовые (банана, мандарина, апельсина и пр.), ванилиновая отдушка, малиновая отдушка, эфиры полигликостеариловой кислоты, метилгидроксипропилцеллюлоза, карбомер, натрия цикломат, натрия сахарин, г) в растворе для приема внутрь: лимонной кислоты моногидрат, натрия гидрофосфата дигидрат, натрия хлорид, бензалкония хлорид.

Учитывая действие ДХА, выражающееся в индукции апоптоза при увеличении внутриклеточного содержания пирувата, а также эффект теофиллина (ТФ) по активации окислительного фософорилирования и увеличению содержания АТФ, была исследована проапототическая активность Теохлонала (ТХ - комбинация ДХА и ТФ) на клеточных линиях HeLa и Jurkat, при этом особое внимание уделялось функционированию митохондрий и митохондриальному звену.

Исследования доказали, что противоопухолевая активность ДХА, проявляющаяся в индуцировании апоптоза опухолевых клеток, усиливается при добавлении ТФ, то есть совместное биологическое действие известных (ДХА и ТФ) компонентов композиции обеспечивает синергетический эффект.

Эффективность терапевтического действия композиции существенно превышает действие отдельно взятого ДХА. По данным in vitro ТХ индуцирует гибель опухолевых клеток в диапазоне концентрации 10-32 ммоль/л, в 4-1.2 раз меньшей, концентраций ДХА. Таким образом, ТХ обладает большей эффективностью и позволяет значительно уменьшать терапевтическую дозу, что способствует устранению возможных побочных эффектов (периферическая нейропатия и гепатотоксичность), что является дополнительным техническим результатом.

Кроме того, следует отметить, что по сравнению с препаратами цитостатического антиметаболитного действия (винкристином, метатрексатом) при сходной противоопухолевой активности активные субстанции (ДХА и ТФ) по отдельности, а также их композиция (ТХ) обладают значительно (в сотни раз) более низкой токсичностью (9).

Для пояснения сущности изобретения представлены следующие графические материалы:

- фиг.1 - диаграмма цитотоксичности теофиллина (ТФ), дихлорацетат (ДХА), теохлонала (ТХ). Для наглядности результаты (величины оптического поглощения формазаном) представлены в % от контроля с инверсией шкалы;

- фиг.2 - диаграмма индукции апоптоза препаратами ТФ, ДХА и ТХ;

- фиг.3 - диаграмма эффектов препаратов на линии Hela, выраженные в % от контроля. 24 ч инкубация. Ряд «ДХА и ТЕОФ» соответствует простому суммированию независимого действия ДХА и ТФ;

- фиг.4 - таблица, в которой приведена статистическая значимость различий ТХ с ТФ и ДХА.

Ниже приводятся данные исследований, подтверждающие выводы о более высокой эффективности композиции по сравнению с действием отдельных, входящих в ее состав, компонентов.

Объекты исследования: клеточные линии Т-лимфобластной лейкемии Jurkat (лимфобластоподобная), эпителиоидной карциномы шейки матки HeLa.

Режим воздействия: инкубации в течение 24 часов с дихлорацетатом (отдельно), теофилином (отдельно), теохлоналом (комбинация), индуктором апоптоза (положительным контролем).

Действующие вещества и диапазоны концентраций: теофиллин (ТФ) (0,05-13,42 мМ/л); дихлорацетат (ДХА) (0,25-64 мМ/л); теохлонал (ТХ) (соотношение ДХА и ТФ по массе 4:1).

Оценка цитотоксичности, метаболической активности производилась с использованием МТТ-теста, основанного на способности митохондриальных дегидрогеназ конвертировать водорастворимый 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолиум бромид (МТТ) в окрашенный формазан, который кристаллизуется внутри клетки. Растворение формазана с помощью диметилсульфоксида (ДМСО) позволяет осуществить фотометрию и фиксировать изменение оптического поглощения раствора, коррелирующее с метаболической активностью клеточной линии. МТТ-тест является индикатором функции митохондрий в жизнеспособных клетках, нарушение метаболической функции клеток, как правило, сопряжено с последующим снижением их жизнеспособности. В соответствии с этим МТТ-тест может применяться для оценки цитотоксичности какого-либо воздействия на клетки, а также для определения пролиферативной активности.

Полученные данные (фиг.1) подтверждают наличие цитотоксических дозозависимых эффектов у каждого из трех препаратов. При этом, IС35 (индекс концентрации, при которой цитотоксичность составляет 35%) 0,5 мМ/л ТХ составляет около 16 мМ/л, что в 4 раза меньше IС35 (64 мМ/л) для ДХА.

Далее был проведен анализ механизма цитотоксичности - исследование индукции апоптоза указанными препаратами. Для этого клетки инкубировали с препаратами в указанном концентрационном диапазоне, отмывали и инкубировали с зондами пропидий йодид и аннексин V, после чего анализировали на проточном цитометре FACS CALIBUR.

Из полученных данных (фиг.2) следует, что:

1) В диапазонах концентраций 10-32 ммоль/л (что соответствует суточной дозе с учетом биодоступности) ТХ достоверно эффективнее индуцирует апоптоз, чем ДХА в 1,74 раза при 16 мМ/л и в 1,2 при 32 мМ/л;

2) ТХ достоверно эффективнее индуцирует апоптоз чем ТФ в 1,72 раза при 16 мМ/л и в 2,14 при 64 мМ/л.

Выводы на основании проведенных исследований:

- IС35 Теохлонала в ~4 раза меньше соответствующих пороговых концентраций дихлорацетата и теофиллина.

- основным механизмом индукции клеточной гибели ТХ и ДХА следует считать индукцию апоптоза, при этом в диапазоне концентраций 10-32 мМ/л ТХ достоверно эффективнее ДХА и ТФ.

Полученные данные позволяют утверждать о наличии цитотоксического эффекта для всех трех препаратов, статистически значимыми являются действие ДХА в диапазоне концентраций 0,5-64 мМ/л (р<0,05); ТФ 0,42-13,42 мМ/л (р<0,05); ТХ 10-32 мМ/л (р<0,05). Теохлонал обладает минимальной их всех веществ IC75 0,5 мМ/л, превосходя по своему действию ДХА (IC75 около 4 мМ/л) и теофиллин (IC75 в диапазоне 1,68-3,35 мМ/л).

Кроме того, эффект теохлонала превосходит простое суммирование действия ДХА и теофиллина (см. фиг.3) различия рядов «ДХА и ТФ» и «ТХ»), т.е. компоненты теохлонала обладают синергетическим эффектом при одновременном действии. В таблице (фиг.4) приведена статистическая достоверность различия ДХА, ТФ и ТХ: различия достоверны для концентрации ДХА 0,5-16 мМ/л (р<0,05) и ТФ 0,1-1,68 мМ/л (р<0,05).

Таким образом, Теохлонал обладает специфичным механизмом индукции клеточной гибели, имеет большую эффективность по сравнению с ДХА и ТФ и позволяет значительно уменьшать терапевтическую дозу, что способствует устранению возможных побочных эффектов.

Ниже приведены конкретные примеры заявленной фармацевтической композиции, подтверждающие возможность осуществления изобретения с получением вышеуказанного технического результата, и описаны способы их получения.

Пример 1.

Таблетки 0,5 (покрытые оболочкой) при следующих соотношениях компонентов, вес.%:

- дихлорацетат натрия 49,0
- теофиллин 49,0
- вспомогательные вещества
(целлюлоза микрокристаллическая,
крахмал картофельный, тальк, стеариновая
кислота, титана диоксид, лактоза, эмульсия
кэ 10-16, полисорбат-80) остальное

Пример 2.

Таблетки 0,5 (покрытые оболочкой) при следующих соотношениях компонентов, вес.%:

- дихлорацетат натрия 78,4
- теофиллин 19,6
- вспомогательные вещества
(целлюлоза микрокристаллическая,
крахмал картофельный, тальк;
стеариновая кислота, титана диоксид,
лактоза, эмульсия кэ 10-16, полисорбат-80) остальное

Пример 3.

Капсулы 0.5 при следующих соотношениях компонентов, вес.%:

- дихлорацетат натрия 89,0
- теофиллин 9,0
- вспомогательные вещества
(кукурузный крахмал, полисорбат-80
(пластификатор), краситель пищевой е
133, краситель пищевой е 17, желатин) остальное

Пример 4.

Водный раствор Теохлонала для перорального применения содержит Теохлонал в виде сухого вещества в количестве от 0,001 г/мл до 0,5 г/мл (включая лекарственную форму для детей), при этом сухое вещество содержит дихлорацетат натрия и теофиллин при следующих соотношениях компонентов, вес.%:

- дихлорацетат натрия 65,4
- теофиллин 32,6
- вспомогательные вещества
(лимонной кислоты моногидрат,
натрия гидрофосфата дигидрат,
натрия хлорид, бензалкония хлорид) остальное

Пример 5.

Суспензия Теохлонала для перорального применения содержит Теохлонал в виде сухого вещества в количестве от 0,001 г/мл до 0,5 г /мл (включая лекарственную форму для детей), при этом сухое вещество содержит дихлорацетат натрия и теофиллин при следующих соотношениях компонентов, вес.%:

- дихлорацетат натрия 78,4
- теофиллин 19,6
- вспомогательные вещества
(эфиры полигликостеариловой кислоты,
метилгидроксипропилцеллюлоза, карбомер,
натрия цитрат, кислота лимонная моногидрат,
ванилиновая отдушка, малиновая отдушка,
натрия цикломат, натрия сахарин,
консерванты: кислота сорбиновая, натрия бензоат) остальное

Пример 6.

Суспензия Теохлонала для перорального применения содержит Теохлонал в виде сухого вещества в количестве от 0,001 г/мл до 0,5 г/мл (включая лекарственную форму для детей), при этом сухое вещество содержит дихлорацетат натрия и теофиллин при следующих соотношениях компонентов, вес.%:

- дихлорацетат натрия 89.1
- теофиллин 8,9
- вспомогательные вещества (сахароза,
натрия гидроксид,
метилпарагидроксибензоат, этанол 96%,
карбомер, лимонная кислота, аромат банана) остальное

Пример 7.

Раствор Теохлонала для внутримышечных и внутривенных инъекций: 1-3 мл раствора содержит 0,05 г/мл-0.25 г/мл Теохлонала в виде сухого вещества, при этом сухое вещество Теохлонала содержит дихлорацетат натрия и теофиллин при следующих соотношениях компонентов, вес.%:

- дихлорацетат натрия 50,0
- теофиллин 50,0

Пример 8.

Раствор Теохлонала для внутримышечных и внутривенных инъекций: 1-3 мл раствора содержит 0,05 г/мл-0.25 г/мл Теохлонала в виде сухого вещества, при этом сухое вещество Теохлонала содержит дихлорацетат натрия и теофиллин при следующих соотношениях компонентов, вес.%:

- дихлорацетат натрия 75,0
- теофиллин 25,0

Пример 9.

Раствор Теохлонала для внутримышечных и внутривенных инъекций:

1-3 мл раствора содержит 0,05 г/мл-0.25 г/мл Теохлонала в виде сухого вещества, при этом сухое вещество Теохлонала содержит дихлорацетат натрия и теофиллин при следующих соотношениях компонентов, вес.%:

- дихлорацетат натрия 90,9
- теофиллин 9,1

Использованная литература.

Фармацевтическая композиция для лечения злокачественных опухолевых заболеваний на основе дихлорацетата натрия, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит теофиллин, при этом отношение дихлорацетата натрия к теофиллину составляет от 1:1 до 10:1.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к ингибиторам протеинтирозинфосфатазы 1В формулы, пригодным для лечения диабета 2 типа и рака или его фармацевтически приемлемым солям, в которых X выбирают из СН и N; R1 выбирают из С1-3алкила, необязательно замещенного 1-3 галогенами или одной группой -ОН, -CN, -С(=О)Н, -С(=О)С1-3алкилом, -HC=NOH, -(CH3)C=NOH,-НС=NОС 1-3алкилом, -(СН3)С=NOC1-3алкила, -С(=О)ОС1-3алкила, -C(=O)NHR6 , -СН=СН-фенила, в котором фенил замещен -С(=О)ОН; R3 - галоген; R6 выбран из Н, С1-3алкила, фенила, и СН2-фенила, где фенил в обоих случаях необязательно замещен галогеном.

Изобретение относится к соединению формулы или к его фармацевтически приемлемой соли, в которой R1 означает водород или С1-6лкил; R2 означает изооксазолильная группа, замещенная С 1-6алкилом; RB означает -CF3, -CHF 2, -CH2F, или C1-6алкил.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при проведении регионарной инфузионной химиотерапии метастазов печени. .

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой стабильную фармацевтическую композицию для лечения рака, содержащую водорастворимую соль дитартрата винфлунина и по меньшей мере один разбавитель, одно связующее вещество, один разрыхлитель и один смазывающий агент, где композиция представлена в твердой форме, предназначенной для перорального введения, где: содержание водорастворимой соли дитартрата винфлунина составляет от 5 до 80 мас.%, содержание разбавителя составляет от 20 до 80 мас.% от суммарной массы композиции, содержание связующего вещества составляет от 1 до 10 мас.% от суммарной массы композиции, содержание смазывающего агента составляет от 0,5 до 10 мас.% от суммарной массы композиции, содержание разрыхлителя составляет от 1 до 10 мас.% от суммарной массы композиции.

Изобретение относится к биохимии и представляет собой варианты антител, которые специфично связываются с внеклеточным доменом CD43 человека или СЕА человека, экспрессируемом негематопоэтическими злокачественными клетками.
Изобретение относится к медицине, конкретно к онкологии, и касается способа комбинированного лечения местно-распространенного рака желудка. .

Изобретение относится к циклогексиламмониевой соли [3-метил-1-н-пропил-7-(1-оксотиетанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты формулы Технический результат - получено и описано новое соединение, которое может найти применение в медицине в качестве антиагрегационного и антикоагуляционного средства.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармацевтической химии и фармакологии, и может быть использовано для создания новых лекарственных средств, обладающих проагрегантной активностью.
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой фармацевтическую композицию, обладающую противовирусной активностью, содержащую терапевтически эффективное количество ацикловира (или его соли, или эфира), в качестве вспомогательных веществ гидрофобный компонент, пропиленгликоль, эмульгатор и воду, отличающуюся тем, что дополнительно содержит УФ-фильтр Escalol 567, кремнийорганический эластомер DC 9045, циклометикон DC 345, кератолитик мочевину, трометамол, консервант.

Изобретение относится к области органической химии, к производным 4-хинолонов, а именно к неизвестным ранее 1H-пирроло[3,4-b]хинолин-3,9(2H, 4H)-дионам общей формулы 1, которые могут найти применение в медицине в качестве противотуберкулезных средств, а также к способу их получения.
Изобретение относится к медицине, кардиологии, и может быть использовано для прогнозирования спазма коронарных артерий у больных ишемической болезнью сердца во время чрескожного коронарного вмешательства.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения лекарственного средства, содержащего восковые матричные гранулы, в том числе содержащие лекарственное средство восковые матричные гранулы, имеющие средний диаметр частицы гранул в интервале от 40 до 200 мкм.
Изобретение относится к медицине, а именно к анестезиологии, и может быть использовано в качестве анестезиологического пособия во время хирургической коррекции тяжелых сколиотических деформаций позвоночника с высоким риском развития неврологических осложнений.

Изобретение относится к области медицины и фармацевтической промышленности и касается средства, предназначенного для лечения различных форм онкологических заболеваний

Наверх