Препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок
Изобретение относится к области ветеринарии. Препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок, содержащий следующие компоненты, мас.%: флорфеникол - 1,0-3,0, линкомицина гидрохлорид - 1,0-3,0, диметилсульфоксид - 10,0, глицерин - 10,0, 1,2 пропиленгликоль - 10,0, масло подсолнечное рафинированное - 12,5, воск эмульсионный - 1,0, кислота стеариновая - 0,9, вода для инъекций - до 100%. Использование препарата позволяет повысить эффективность лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок. 17 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к препаратам для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок.
Практика эксплуатации свиноводческих комплексов промышленного типа показала, что при круглогодовом безвыгульном содержании животных, концентратном нормированном типе кормления и размещении большого поголовья на ограниченных площадях часто регистрируются послеродовые болезни свиноматок, протекающие в форме синдрома метрит-мастит-агалактии (ММА) и послеродового гнойно-катарального эндометрита, приводящие к снижению или прекращению секреции молока, высокой заболеваемости и гибели новорожденных поросят, достигающей 40-50%, а в отдельных случаях - до 70-80% [Гридяев Е.Л. Роль микробного фактора и резистентности свиней в этиологии послеродовых болезней и средства их профилактики // Автореф. дис.… канд. вет. наук. Воронеж, 1987. - 21 с.; Сартасов Е.Л. Применение дипролипамида для профилактики послеродовых болезней у свиноматок // Автореф. дис.… канд. вет. наук. - Воронеж, 2001.; Klopfenstein С. et. al. Duseasis of the Mammary Glands and Lactation Problems: Diseasis of swine. - Ames, Iowa USA. - 2000. - P.833-861].
Установлено, что факторами, способствующими инфицированию половых органов и развитию в них патологического процесса воспалительного характера, являются эндокринные нарушения у супоросных свиноматок, ослабление сократительной функции матки и снижение ее тонуса до, во время и после опороса, приводящие к первичной слабости родов, послеродовой атонии матки и ее субинволюции. При этом создаются условия для проникновения в полость матки условно-патогенной микрофлоры и развития воспалительного процесса.
В связи с тем, что важное значение в этиологии послеродового эндометрита имеет микробный фактор, для лечения и профилактики данного заболевания рекомендуется использовать препараты антимикробного действия. Однако выбор лечебно-профилактического средства осложняется современными отрицательными эпидемиологическими тенденциями: рост резистентных штаммов, полирезистентность к нескольким действующим веществам [Конина А.А. Послеродовые эндометриты свиноматок (клинический и микробиологический аспекты) // Перспективы развития науки в институте ветеринарной медицины ОмГАУ / Сб. науч. тр. - Омск, 2002. - С.119-120]. Эти тенденции необходимо учитывать при создании новых лекарственных препаратов, а именно, применять субстанции, ранее не использованные при лечении послеродовых заболеваний, предлагать оригинальные лекарственные формы, повышающие эффективность лечения.
Для лечения и профилактики послеродовых болезней у свиноматок применяют препараты антимикробного действия, включающие антибиотики, сульфаниламиды, нитрофурановые, препараты хиноксалинового ряда, фторхинолоны и другие средства. Но не все они дают ожидаемый эффект. Это, прежде всего, объясняется снижением чувствительности микрофлоры матки к препаратам. В связи с чем возникает необходимость создания новых ротационных комплексных препаратов в оригинальной лекарственной форме.
Известно противовоспалительное и ранозаживляющее средство, наносимое в виде пены на поврежденные ткани и представляющее собой комбинированный препарат, в состав которого входят (мас.%) каротинсодержащий препарат - 20,0-40,0, нитазол - 1,0-3,0, метилурацил - 1,0-3,0, твин-80 - 2,0-2,8, спирты синтетические высшие жирные первичные фракции C16-C21 - 4,2-5,0, неводный гидрофильный растворитель - 6,0-10,0, хладон 12 - 10,0-20,0, вода очищенная - до 100,0 [RU 2116784 C1, 10.08.1998].
Для лечения лучевых поражений, химических и термических ожогов используется аэрозоль «Профезоль - пенный» следующего состава: фенольный гидрофобный препарат прополиса - 0,25 г, спирт этиловый 95% - 2,5 г, препарат ОС-20 - 0,625 г (или проксанол 268 - 4,0 г), вода очищенная - 21,0 г, хладон 12 - 5,0 г [А.И.Тихонов, Е.А.Батрак, Л.В.Деримедведь. Экспериментальное изучение радиозащитных свойств препарата с фенольным гидрофобным препаратом прополиса «Профезоль - пенный» // Провизор. - 1999. - №7. - С.45-46].
К причинам, препятствующим в аналогах получению технического результата, достигаемого в заявляемом изобретении, можно отнести то, что хотя в их состав входят антибактериальные вещества, но они предназначены для лечения ран и ожогов в гуманной медицине.
Известно лекарственное средство «Аэрозоль нитазола» [Проспект «Аэрозоль нитазола» - М.: ЦБНТИ, Минмедпром, 1985], применяемое для лечения острого и хронического трихомониаза и включающее нитазол - 1,02 г, масло оливковое - 6,783 г, эмульсионные воски - 2,397 г, глицерин - 2,55 г, спирт 95% - 2,04, вода очищенная - 36,21 г, хладон-12 - 9,0 г.
Однако, во-первых, качественный и количественный состав компонентов данного лекарственного средства не позволяет достигнуть высокого терапевтического уровня при лечении и профилактике послеродового эндометрита и ММА у свиноматок, и, во-вторых, в ветеринарной медицине препарат применяется для лечения коров при остром послеродовом эндометрите [RU 2181044 C1, 04.10.2002].
Йодопен - препарат для профилактики и лечения воспалительных процессов матки, в том числе острого послеродового эндометрита у коров и свиноматок, содержащий (мас.%): активно действующее вещество - комплекс йода с поливинилпирролидоном (10-20) и пенообразующую основу, включающую полиэтиленгликоль (30-36), оксиэтилированные жирные спирты (0,6-1,2), стеарат кальция (0,8-1,2), лимонную кислоту (10-14), бикарбонат натрия (10-20) и лактозу (остальное) [RU 2155046 C1, 27.08.2000].
Главный недостаток йодопена заключается в определенных трудностях при введении в полость матки суппозиториев при лечении острых послеродовых эндометритов у коров и, особенно, у свиноматок, а также невозможностью его внутриматочного введения более двух раз при терапии эндометрита, в связи с чем понижается терапевтическая эффективность.
Прототипом технического решения является лефур - комплексный антибактериальный препарат для лечения и профилактики острых послеродовых эндометритов сельскохозяйственных животных, лечения хронических эндометритов, а также синдрома метрит-мастит-агалактии у свиней, содержащий в 1 мл 10 мг левомицетина и 0,5 мг фурагина [Ветеринарные препараты в России: Справочник в 2 томах. Т.1. / И.Ф.Кленова, К.Л.Мальцев, Н.А.Яременко, И.А.Архипов. - М.: Сельхозиздат, 2004. - С.482].
К причинам, препятствующим в прототипе получению технического результата, достигаемого в заявленном изобретении, можно отнести то, что установленное в последние годы токсическое влияние левомицетина (хлорамфеникола) на гемопоэз и иммунную систему и широкое распространение левомицетинрезистентных микроорганизмов в значительной степени ограничили его применение. В то время, как в заявляемом средстве этот антибактериальный компонент заменен на его аналог - флорфеникол, синтезированный путем химической модификации молекулы хлорамфеникола и представляющий собой низкомолекулярный антибиотик, состоящий из ароматического кольца и короткой боковой цепи [RU 2071468 C1, 10.01.1997]. Флорфеникол - антибиотик широкого спектра действия, который, обладая высокой антибактериальной активностью, характеризуется отсутствием этих побочных эффектов [RU 2397753 C1, 27.08.2010].
Технический результат - повышение эффективности профилактики и лечения эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок.
Технический результат достигается использованием препарата, состоящего из следующих компонентов, мас.%:
Флорфеникол - 1,0-3,0
Линкомицина гидрохлорид - 1,0-3,0
Диметилсульфоксид - 10,0
Глицерин - 10,0
1,2 пропиленгликоль - 10,0
Масло подсолнечное рафинированное - 12,5
Воск эмульсионный - 1,0
Кислота стеариновая - 0,9
Вода для инъекций - до 100%
Оптимальным является следующее соотношение компонентов, мас.%:
Флорфеникол - 2,5
Линкомицина гидрохлорид - 1,5
Диметилсульфоксид - 10,0
Глицерин - 10,0
1,2 пропиленгликоль - 10,0
Масло подсолнечное рафинированное - 12,5
Воск эмульсионный - 1,0
Кислота стеариновая - 0,9
Вода для инъекций - до 100%
Обоснованность этой комбинации связана с тем, что в лекарственной форме одновременно сочетаются два бактериостатических агента, которые в высоких концентрациях проявляют бактерицидное действие. Это обеспечивает синергидный эффект за счет того, что два антибиотика блокируют различные стадии белкового синтеза в бактериальной клетке. Флорфеникол, синтезированный путем химической модификации молекулы хлорамфеникола, низкомолекулярный антибиотик, состоящий из ароматического кольца и короткой боковой цепи [RU 2071468 C1, 10.01.1997]. Он обратимо связывается с 50S-субъединицей рибосом в участке, близком, но не идентичном тому, с которым связываются линкозамиды, в частности, линкомицин. Местом действия флорфеникола является А-участок (акцепторный участок) 50S-субчастицы рибосом, где антибиотик конкурирует с аминоацильным концом молекулы аминоацил-тРНК, препятствуя ее вхождению в А-участок, что сопровождается подавлением биосинтеза белка. Местом действия линкомицина является P-участок (донорный участок) 50S-субчастицы рибосом, так называемый пептидил-тРНК-связывающий участок. Линкомицин делает ассоциацию пептидил-тРНК с P-участком рибосом более прочной, что способствует ингибированию сборки белковой молекулы. Такой двунаправленный механизм на разные участки РНК микробной клетки усиливает противомикробный эффект препарата.
[http://medbiol.ru/medbiol/ribosoma/0000ef34.htm; Рациональная антимикробная фармакотерапия: Рук. для практикующих врачей / Под общ. ред. В.П.Яковлева, С.В.Яковлева. - М.: Литтерра, 2003. - 1008 с. - (Рациональная фармакотерапия: Сер. рук. для практикующих врачей; Т.2); С.М.Навашин, И.П.Фомина. Рациональная антибиотикотерапия (справочник). - М.: Медицина, 1982. - 496 с.].
Имеющиеся в заявляемом средстве синергический характер антибактериального действия, а также противовоспалительные и регенеративные свойства обеспечивают высокий профилактический и терапевтический эффект, хороший отток из полости матки воспалительного экссудата и сокращение количества дней бесплодия.
Сочетанное применение флорфеникола и линкомицина обеспечивает повышение эффективности лечения и профилактики эндометрита и синдрома ММА у свиноматок, быстрое выздоровление больных животных, снижение расхода активнодействующих веществ и их побочного действия на организм животных.
Как известно, основа препарата должна обеспечивать равномерную адсорбцию и постепенное высвобождение активнодействующих веществ. Препарат должен быть малотоксичным и безвредным для животных и человека, с достаточно длительным сроком хранения и удобным для применения в ветеринарной практике.
Лекарственная форма в виде пены обеспечивает экономичное дозирование, лучший контакт со слизистой оболочкой матки и придает лекарству пролонгированное действие. Под влиянием температуры тела пена увеличивается в объеме, заполняет все свободные места и каналы в полости матки. Кожа и слизистые не испытывают давления со стороны пены. Поэтому данная лекарственная форма предпочтительна при эндометритах, так как оказывает щадящее действие и снижает болевой синдром при контакте с раневой поверхностью. Пена разносит действующие начала по всей полости матки, способствует проникновению их в глубокие слои эндометрия, механически очищает ее поверхность от остатков плаценты и воспалительного экссудата.
Основной целью сочетанного применения флорфеникола и линкомицина является расширение спектра антибактериального действия, восполнение пробелов в спектре каждого из компонентов комбинации и предупреждение формирования устойчивости микроорганизмов.
Флорфеникол - (D-(трео)-1-п-метилсульфонил-2-дихлор-ацетамидо-3-фтор-1-пропанола) или 2,2-dichloro-N-((1R,2S)-3-fluoro-1-hydroxy-1-(4-(methylsulfonyl)phenyl)propan-2-yl)ethanamide, представляющий собой белый или не совсем белый прозрачный порошок. Флорфеникол является антибиотиком широкого спектра действия; эффективен в отношении многих грамположительных и грамотрицательных бактерий, риккетсий, спирохет, действует на штаммы бактерий, устойчивые к пенициллину, стрептомицину, сульфаниламидам. В обычных дозах действует бактериостатически. Слабо активен в отношении кислотоустойчивых бактерий, синегнойной палочки, клостридий и простейших. Механизм антимикробного действия флорфеникола связан с нарушением синтеза белков микроорганизмов [Антибактериальные лекарственные средства. Методы стандартизации препаратов. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2004. - 944 с.].
Линкомицина гидрохлорид (Lincomycini hydrochloridum) - антибиотик, продуцируемый Streptomyces lincolniensis или другими родственными актиномицетами [Антибактериальные лекарственные средства. Методы стандартизации препаратов. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2004. - 944 с.]. Активен в отношении грамположительных кокков (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., в т.ч. Streptococcus pneumoniae); Haemophilus influenzae; Bacillus anthracis, Mycoplasma spp., Bacteroides spp., Corynebacterium diphtheriae, Clostridium perfringens, Clostridium tetani. Эффективен в отношении Staphylococcus spp., устойчивых к пенициллину, тетрациклинам, хлорамфениколу, стрептомицину, цефалоспоринам (30% Staphylococcus spp., устойчивых к эритромицину, имеют перекрестную устойчивость к линкомицину). Не действует на Enterococcus spp.(в т.ч. Enterococcus faecalis), грамотрицательные микроорганизмы, грибы, вирусы, простейшие; уступает по активности эритромицину в отношении спорообразующих анаэробов, Neisseria spp., Corynebacterium spp. [Клиническая фармакология / под ред. Кукеса В.Г. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. - 944 с.].
Диметилсульфоксид - бесцветная прозрачная жидкость или бесцветные кристаллы (плавящиеся при температуре +18,5°C) со специфическим запахом (чем-то напоминающим запах чеснока). Гигроскопичен. Смешивается во всех соотношениях с водой и спиртом. Используется для местного применения при воспалительных и некоторых других заболеваниях (главным образом при заболеваниях опорно-двигательного аппарата). Препарат обладает способностью проникать через биологические мембраны, в том числе через кожные барьеры. Основанием для применения, при воспалительных заболеваниях опорно-двигательного аппарата является его анальгетическое и противовоспалительное действие. Препарат обладает умеренным антисептическим и фибринолитическим эффектом. Он также усиливает проникновение через кожу ряда лекарственных веществ (пенетрирующий эффект) [М.Д.Машковский. Лекарственные средства. - М.: РИА «Новая волна»: Издатель Умеренков, 2008. - С.180].
Глицерин (СН2ОНСНОНСН2ОН) - это трехатомный спирт; сиропообразная бесцветная вязкая жидкость сладкого вкуса, без запаха. Глицерин смешивается во всех отношениях с водой, этиловым или метиловым спиртом, анилином, ацетоном, растворяется в смеси CHCl3 и C2H5OH (1:1), в абсолютных C2H5OH и (С2Н5)2O (2:1) и других. Фармакологическое действие: слабительное, дегидратирующее, дерматопротективное. При ректальном использовании оказывает легкое раздражающее действие на слизистую оболочку прямой кишки и рефлекторно стимулирует сократительную способность кишечника, оказывая слабительное действие. Оказывает смягчающее и дерматопротекторное действие, обладает высокими гигроскопичными и смазывающими свойствами. При нанесении на кожу активирует в ней обменные процессы. Глицерин используют в фармацевтической практике в качестве основы для приготовления мазей и других лекарственных форм [Промышленная технология лекарств: Учебное пособие в 2 томах. Т.2. / Под ред. проф. В.И.Чуешова. - X.: Основа; Издательство УкрФА, 1999. - С.55].
Пропиленгликоль - двухатомный спирт алифатического ряда, вязкая жидкость без цвета и запаха, сладковатая на вкус. Используется как гигроскопическое вещество и как несущий элемент или растворитель в лечебных жидкостях и мазях. Пропиленгликоль, как хороший растворитель природных и синтетических веществ он нашел применение при изготовлении различных тинктур, растворов для инъекций, мазей, протираний и.т.д. Пропиленгликоль входит в противовоспалительные и бактерицидные составы для лечения заболеваний носовой полости, свищей, сенной лихорадки и др., а также в составы для заживления ран после глубоких ожогов или действия химических продуктов. При применении пропиленгликоля в медицинских целях учитываются его консервирующие, стерилизующие, бактерицидные, стабилизирующие, смазочные свойства, нетоксичность, свойства растворителя [Промышленная технология лекарств: Учебное пособие в 2 томах. Т.2. / Под ред. проф. В.И.Чуешова. - X.: Основа; Издательство УкрФА, 1999. - С.56].
Известно использование воска эмульсионного в качестве эмульгатора и стабилизатора косметических кремов, фармацевтических мазей, пластификаторов [Химическая энциклопедия. М.: Изд. «Сов. Энциклопедия», 1989, т.1, С.584-585, RU 2350332 C1, 27.03.2009].
Стеариновая кислота входит в состав глицеридов всех животных и растительных жиров и масел в количестве от 1 до 8%. В свободном виде содержится в секрете сальных желез. В косметических композициях используется при частичной нейтрализации щелочами или триэтаноламином как эмульгирующий, солюбилизирующий и структурообразующий, загущающий компонент. Стеариновую кислоту и ее эфиры используют при получении косметических средств. Она повышает устойчивость кожи к внешним неблагоприятным факторам, улучшает ее эластичность [Химический энциклопедический словарь. М.: Изд. «Сов. Энциклопедия», 1983, С.541].
В качестве жирового компонента используют натуральное подсолнечное масло (можно оливковое, кукурузное).
Воду для инъекций получают дистилляцией или осмосом. Является апирогенной, не содержит антимикробных веществ и других добавок, максимально допустимый уровень содержания бактериальных эндотоксинов 0,25 Едэ/мл [Фармакопейная статья ФС 42-2620-97, Министерство здравоохранения и медицинской промышленности Российской Федерации, Фармакопейный государственный комитет, утверждена 11.03.97 - 4 с.].
Препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок перед применением подогревают при температуре 45±5°C и интенсивно встряхивают. Нажимая на распылительную головку, вводят лекарственный препарат в полость матки с помощью катетера для искусственного осеменения, закрепленного на носике головки. Препарат вводят внутриматочно по 60 г (1 доза) на животное с интервалом 24 часа с лечебной целью в течение 2-3 дней, а с профилактической целью после оказания родовспоможения или оперативного отделения последа - однократно.
Изготавливается препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок следующим образом. В реактор с контактным термометром и контурным отоплением и охлаждением до температуры (40±5°)C роторно-кавитационной установки (РКУ) загружается рецептурное количество воды и диметилсульфоксида. Затем в реактор вносят последовательно, с интервалом в 10 минут, флорфеникол и линкомицина гидрохлорид. Смешивание проводят при температуре 60±5°C до полного растворения компонентов.
В плавильный котел, обогреваемый парами, снабженный высокооборотистой мешалкой, помещают растительное масло, глицерин, пропиленгликоль и вносят тугоплавкие компоненты: воск эмульсионный и стеариновую кислоту. Смесь расплавляют при температуре 65-70°C.
Ввод жировой основы из плавильного котла осуществляется непосредственно в камеру озвучивания в процессе прохождения через нее смеси водного раствора и жировой основы. Из камеры озвучивания готовый препарат подается в бункер для фасовки. Расфасовывается препарат в алюминиевые аэрозольные баллоны, которые обкатываются и заправляются расчетным количеством хладона 12 или 134а.
Сущность технического решения поясняется примерами.
Пример 1. Изучение антимикробных свойств и определение оптимального соотношения компонентов в препарате для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок
Изучены антимикробные свойства препарата. Выявлено оптимальное количественное содержание флорфеникола и линкомицина в опытах in vitro. В модельных опытах установлено, что препарат обладает широким спектром антимикробного действия в отношении испытанных культур микроорганизмов.
1.1. Опыты in vitro
Изучение антимикробной активности и соотношения флорфеникола и линкомицина в препарате для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок проводилось in vitro методом серийных разведений. В качестве тест-культур использовали референтные и полевые (патогенные) штаммы микроорганизмов, типированных по морфологическим, тинкториальным, культуральным, биохимическим и серологическим свойствам. Соотношение флорфеникола и линкомицина в препарате для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок изучали в следующих комбинациях:
Комбинация 1. Состав препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок; компоненты, мас.%:
Флорфеникол - 3,0
Линкомицина гидрохлорид - 1,0
Диметилсульфоксид - 10,0
Глицерин - 10,0
1,2 пропиленгликоль - 10,0
Масло подсолнечное рафинированное - 12,5
Воск эмульсионный - 1,0
Кислота стеариновая - 0,9
Вода для инъекций - до 100%
Комбинация 2. Состав препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок; компоненты, мас.%:
Флорфеникол - 2,5
Линкомицина гидрохлорид - 1,5
Диметилсульфоксид - 10,0
Глицерин - 10,0
1,2 пропиленгликоль - 10,0
Масло подсолнечное рафинированное - 12,5
Воск эмульсионный - 1,0
Кислота стеариновая - 0,9
Вода для инъекций - до 100%
Комбинация 3. Состав препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок; компоненты, мас.%:
Флорфеникол - 2,0
Линкомицина гидрохлорид - 2,0
Диметилсульфоксид - 10,0
Глицерин - 10,0
1,2 пропиленгликоль - 10,0
Масло подсолнечное рафинированное - 12,5
Воск эмульсионный - 1,0
Кислота стеариновая - 0,9
Вода для инъекций - до 100%
Комбинация 4. Состав препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок; компоненты, мас.%:
Флорфеникол - 1,5
Линкомицина гидрохлорид - 2,5
Диметилсульфоксид - 10,0
Глицерин - 10,0
1,2 пропиленгликоль - 10,0
Масло подсолнечное рафинированное - 12,5
Воск эмульсионный - 1,0
Кислота стеариновая - 0,9
Вода для инъекций - до 100%
Комбинация 5. Состав препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок; компоненты, мас.%:
Флорфеникол - 1,0
Линкомицина гидрохлорид - 3,0
Диметилсульфоксид - 10,0
Глицерин - 10,0
1,2 пропиленгликоль - 10,0
Масло подсолнечное рафинированное - 12,5
Воск эмульсионный - 1,0
Кислота стеариновая - 0,9
Вода для инъекций - до 100%
Антимикробную активность различных комбинаций состава препарата сравнивали с антимикробной активностью флорфеникола и линкомицина гидрохлорида.
Минимальную бактериостатическую концентрацию (МБсК) изучаемых препаратов определяли методом серийных разведений в мясопептонном бульоне (МПБ); минимальную бактерицидную концентрацию - путем высева из пробирок с прозрачной средой на плотные питательные среды (МПА), не содержащие препарат.
В качестве жидкой питательной среды применяли мясопептонный бульон. При определении чувствительности стрептококков к среде добавляли 1% глюкозы.
Содержание микробных клеток в одном мл среды составляло 500 тысяч.
Посевы инкубировали при 37°C в течение 18-20 часов. По истечении срока инкубации учитывали результат.
Результаты проведенных исследований представлены в таблице 1.
Исследованиями установлено, что флорфеникол имеет высокую антимикробную активность по отношению к Е. coli 26, Staph. aureus 209P и Enterococcus faecalis - 3,9-7,8 мкг/мл (табл.1).
Минимальная подавляющая концентрация (МПК) линкомицина по отношению к Staph. aureus 209P составляла 62,5 мкг/мл, к Е. coli 26 и Enterococcus faecalis МПК - 125,0 мкг/мл.
МПК композиций 1 и 2 в отношении Е. coli по сравнению с таковой у флорфеникола (7,8 мкг/мл) не изменилась, антимикробная активность композиций 3 и 4 (15,6 мкг/мл) снизилась в 2 раза, а композиции 5 - в 8 раз. По сравнению с активностью линкомицина (125,0 мкг/мл) антимикробная активность возросла в 16 раз у композиций 1 и 2, в 8 раз - у композиций 3 и 4, в 2 раза - у композиции 5. Совместное применение флорфеникола и линкомицина позволило снизить МПК в отношении данной культуры для флорфеникола в композициях 1 и 4 до 5,85 мкг/мл (в 1,3 раза), для композиции 2 - до 4,88 мкг/мл (в 1,6 раза). Для линкомицина снижение МПК было для всех композиций, хотя и в разной степени (в 64-43-16-12,8-2,7 раза).
В отношении Staph. aureus 209P МПК снизилась для композиций 1 и 3 до 1,95 мкг/мл (в 2 раза), для композиции 2 - до 0,98 мкг/мл (в 4 раза), для композиции 4 осталась неизменной, а для композиции 5 - возросла до 7,8 мкг/мл (в 2 раза). По сравнению с активностью линкомицина (62,5 мкг/мл) антимикробная активность возросла в 32 раза у композиций 1 и 3, в 64 раза - у композиции 2, в 16 раз - у композиции 4 и в 8 раз - у композиции 5.
| Таблица 1-3 | |||||
| Антимикробная активность (МБсК) флорфеникола, линкомицина и различных композиций препарата, мкг/мл | |||||
| Композиция | Ф | Л | По ∑ДВ | В пересчете на | |
| Ф | Л | ||||
| Е.coli 26 | |||||
| К1 | 7,8 | 125,0 | 7,8 | 5,85 | 1,95 |
| К2 | 7,8 | 4,88 | 2,92 | ||
| К3 | 15,6 | 7,8 | 7,8 | ||
| К4 | 15,6 | 5,85 | 9,75 | ||
| К5 | 62,5 | 15,6 | 46,9 | ||
| Staph. aureus 209P | |||||
| К1 | 3,9 | 62,5 | 1,95 | 1,46 | 0,49 |
| К2 | 0,98 | 0,61 | 0,37 | ||
| К3 | 1,95 | 0,98 | 0,98 | ||
| К4 | 3,9 | 1,46 | 2,44 | ||
| К5 | 7,8 | 1,95 | 5,85 | ||
| Enterococcus faecalis (п) | |||||
| К1 | 7,8 | 125,0 | 3,9 | 2,93 | 0,97 |
| К2 | 3,9 | 2,44 | 1,46 | ||
| К3 | 7,8 | 3,9 | 3,9 | ||
| К4 | 15,6 | 5,85 | 9,75 | ||
| К5 | 31,25 | 7,81 | 23,44 | ||
| Обозначения: Ф - флорфеникол; Л - линкомицин; К1 - композиция 1 (3:1); К2 - композиция 2 (2,5:1,5); К3 - композиция 3 (2:2); К4 - композиция 4 (1,5:2,5); К5 - композиция 5 (1:3) |
Совместное применение флорфеникола и линкомицина позволило снизить МПК в отношении данной культуры для флорфеникола в композициях 1 и 4 до 1,46 мкг/мл (в 2,7 раза), для композиции 2 - до 0,61 мкг/мл (в 6,4 раза), для композиции 3 - до 0,98 мкг/мл (4 раза) и для композиции 5 - до 1,95 мкг/мл (в 2 раза). Для линкомицина снижение МПК было для всех композиций, хотя и в разной степени (в 128-169-64-26-11 раз).
По отношению с активностью флорфеникола в отношении Enterococcus faecalis МПК снизилась для композиции 1 и 2 до 3,9 мкг/мл (в 2 раза), для композиции 3 не изменилась, для композиции 4 и 5 - возросла соответственно до 15,6 и 31,25 мкг/мл (в 2 и 4 раза). По сравнению с активностью линкомицина (125,0 мкг/мл) антимикробная активность возросла в 32 раза у композиций 1 и 2, в 16 раз - у композиции 3, в 8 раз - у композиции 4 и в 4 раза - у композиции 5.
Совместное применение флорфеникола и линкомицина позволило снизить МПК в отношении данной культуры для флорфеникола в композициях 1-4 соответственно до 2,93 мкг/мл (в 2,7 раза); 2,44 мкг/мл (в 3,2 раза); до 3,9 мкг/мл (в 2 раза); до 5,85 мкг/мл (в 1,3 раза), а для композиции 5 - МПК не изменилась. Для линкомицина усиление антимикробной активности в ряду композиций происходило следующим образом: К5→К4→К3→К2→К1 (23,44→9,75→3,9→1,46→0,97 мкг/мл).
На основании полученных данных установлено, что наиболее выраженным антимикробным действием обладает композиция 2. Совместное применение флорфеникола и линкомицина в различных соотношениях позволило снизить минимальную подавляющую концентрацию в отношении изученных культур, что свидетельствует о синергическом действии составляющих компонентов.
1.2. Антимикробная активность препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок
Согласно данным, представленным в таблице 4, препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Флорфеникол - 2,5
Линкомицина гидрохлорид - 1,5
Диметилсульфоксид - 10,0
Глицерин - 10,0
1,2 пропиленгликоль - 10,0
Масло подсолнечное рафинированное - 12,5
Воск эмульсионный - 1,0
Кислота стеариновая - 0,9
Вода для инъекций - до 100%
обладает выраженными антимикробными свойствами. Бактериостатическая концентрация для кокковой микрофлоры составила 0,98-7,8 мкг/мл. Активность препарата в отношении музейных штаммов эшерихий была достаточно высокой - 7,8 мкг/мл, в отношении полевых снижалась до 7,8-31,2 мкг/мл. Более устойчивыми к препарату оказались Strept. porcinius, МБцК к которым составила 15,6 мкг/мл, при МБсК - 3,9 мкг/мл и Enterococcus faecalis, у которых данные показатели были соответственно 31,2 и 7,8 мкг/мл.
Бактерицидное действие препарата в отношении изученных культур превышало бактериостатическое соответственно в 2-4 раза.
| Таблица 4 | ||
| Антимикробная активность препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок | ||
| Культура микроорганизмов | МБсК, мкг/мл | МБцК, мкг/мл |
| Escherichia coli 26 | 7,8 | 15,6 |
| Escherichia coli 113-3 | 7,8 | 15,6 |
| Escherichia coli IV(049) (п) | 31,2 | 62,5 |
| Escherichia coli К 88 (п) | 15,6 | 31,2 |
| Escherichia coli A20 (п) | 7,8 | 15,6 |
| Staph. aureus 209P | 0,98 | 3,9 |
| Staph. aureus (п) | 7,8 | 15,6 |
| Staph. cowan-I | 1,56 | 6,25 |
| Enterococcus faecalis (п) | 7,8 | 31,2 |
| Strept. Porcinius (п) | 3,9 | 15,6 |
Таким образом, исследования показали, что препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок обладает широким спектром антимикробного действия, бактерицидная активность которого составляет от 3,9 до 62,5 мкг/мл.
Пример 2. Изучение эффективности лечения гнойно-катарального эндометрита у свиноматок.
Изучение эффективности применения препарата для лечения гнойно-катарального эндометрита у свиноматок проведены в двух сериях опытов.
Диагноз на острый послеродовый гнойно-катаральный эндометрит устанавливали на основании данных анамнеза, результатов клинического и акушерско-гинекологического исследований.
Первый опыт проведен в ООО «Возрождение» Таловского района Воронежской области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 185-210 кг. Второй опыт проведен ООО «Инвест АПК» спецхоза «Октябрь» Бутурлиновского района Воронежской области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 170-230 кг.
Свиноматки, имевшие послеродовые осложнения, протекающие в форме острого послеродового гнойно-катарального эндометрита, после постановки диагноза (1-2 сутки после опороса) были разделены по принципу аналогов с учетом общего состояния и находящихся в одинаковых условиях содержания и кормления на две группы.
Животным первой группы (контроль) с терапевтической целью внутриматочно с помощью шприца Жанэ и катетера или ПОС-5 вводили энроцид в соответствии с инструкцией по применению.
Второй группе свиноматок (опытная группа) вводили препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок в дозе 60 г/животное при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Флорфеникол - 2,5
Линкомицина гидрохлорид - 1,5
Диметилсульфоксид - 10,0
Глицерин - 10,0
1,2 пропиленгликоль - 10,0
Масло подсолнечное рафинированное - 12,5
Воск эмульсионный - 1,0
Кислота стеариновая - 0,9
Вода для инъекций - до 100%
У всех свиноматок через одни, двое, трое суток и последующие дни (до выздоровления) после введения препаратов учитывали общее состояние животных, поведение, прием корма и воды, температуру тела, частоту пульса и дыхания, состояние половых органов, характер и количество экссудата, выделяемого из половых органов.
При отсутствии терапевтического эффекта после однократного применения внутриматочное введение препаратов повторяли 1-2 раза с интервалом 24 часа.
Критерием признаков клинического выздоровления считали: улучшение общего состояния свиноматок, понижение температуры тела до физиологической нормы, восстановление аппетита, отсутствие воспалительного процесса наружных половых органов и прекращение выделений из гениталий.
Результаты опытов представлены в таблицах 5-6.
Терапевтический эффект препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок в первом опыте после однократного внутриматочного введения составил 61,3%, после двукратного - 93,5%, после трехкратного введения - 100%, что в сравнении с контролем выше соответственно на 23,8, 39,3 и 25,0% (табл.5). При этом кратность введения заявленного препарата составила 1,45±0,11 против 1,78±0,21 (контроль).
| Таблица 5 | ||||||
| Эффективность препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок при остром гнойно-катаральном эндометрите в ООО «Возрождение» Таловского района Воронежской обл. | ||||||
| Препарат, группа животных | Терапевтический эффект, кратность введения | |||||
| однократное | двукратное | трехкратное | ||||
| гол. | % | гол. | % | гол. | % | |
| Энроцид (n=24) | 9 | 37,5 | 13 | 54,2 | 18 | 75,0 |
| Заявленный препарат (n=31) | 19 | 61,3 | 29 | 93,5 | 31 | 100,0 |
Во втором опыте терапевтическая эффективность препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок составила 96,8% при кратности введения 1,23±0,09 раза (табл.6). При использовании базового варианта (энроцид) терапевтический эффект составил 88,0% при кратности введения 1,41±0,14, при этом по опытной группе кратность введения препарата была ниже в сравнении с контрольной группой на 12,8%, а терапевтическая эффективность была выше на 8,8%.
| Таблица 6 | |||
| Эффективность заявленного препарата при остром гнойно-катаральном. эндометрите у свиноматок в ООО «Инвест АПК» спецхоза «Октябрь» Бутурлиновского района Воронежской области | |||
| Препарат | Количество обработанных животных, гол. | Кратность введения препарата | Терапевтическая эффективность, % |
| Заявленный препарат | 25 | 1,23±0,09 | 96,8 |
| Энроцид | 31 | 1,41±0,14 | 88,0 |
Следует отметить, что терапевтический эффект после однократного внутриматочного введения заявленного препарата свиноматкам в дозе 60 г/животное при остром послеродовом гнойно-катаральном эндометрите составил 77,4%, после двукратного - 93,5%, после трехкратного - 96,8%, что в сравнении с применением энроцида (60,0, 80,0 и 88,0%) оказалось выше на 17,4-13,5-8,8%.
Пример 2. Изучение эффективности лечения синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок.
Изучение эффективности применения препарата для лечения метрит-мастит-агалактии у свиноматок проведены в двух сериях опытов.
Диагноз на метрит-мастит-агалактию устанавливали на основании данных анамнеза, результатов клинического и акушерско-гинекологического исследований.
Первый опыт проведен в ЗАО «Шацкий свинокомплекс» Шацкого района Рязанской области на свиноматках крупной белой породы, по 3-5 опоросам с массой тела 190-220 кг. Второй опыт - в ООО «Племенное» Воловского района Липецкой области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 180-200 кг.
Свиноматки, имевшие послеродовые осложнения, протекающие в форме метрит-мастит-агалактии (ММА), после постановки диагноза (1-2 сутки после опороса) были разделены по принципу аналогов с учетом общего состояния и находящихся в одинаковых условиях содержания и кормления на две группы.
Животным первой группы (контроль) с терапевтической целью внутриматочно с помощью шприца Жанэ и катетера или ПОС-5 вводили энроцид в соответствии с инструкцией по применению.
Второй группе свиноматок (опытная группа) вводили препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок в дозе 60 г/животное при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Флорфеникол - 2,5
Линкомицина гидрохлорид - 1,5
Диметилсульфоксид - 10,0
Глицерин - 10,0
1,2 пропиленгликоль - 10,0
Масло подсолнечное рафинированное - 12,5
Воск эмульсионный - 1,0
Кислота стеариновая - 0,9
Вода для инъекций - до 100%
У всех свиноматок через одни, двое, трое суток и последующие дни (до выздоровления) после введения препаратов учитывали общее состояние животных, поведение, прием корма и воды, температуру тела, частоту пульса и дыхания, состояние половых органов, характер и количество экссудата, выделяемого из половых органов.
При отсутствии терапевтического эффекта после однократного применения внутриматочное введение препаратов повторяли 1-2 раза с интервалом 24 часа.
Критерием признаков клинического выздоровления считали: улучшение общего состояния свиноматок, понижение температуры тела до физиологической нормы, восстановление аппетита, отсутствие воспалительного процесса наружных половых органов и прекращение выделений из гениталий.
Результаты опытов представлены в таблицах 7-8.
При лечении свиноматок заявленным препаратом в первом опыте кратность введения составила 1,55±0,20 раза и терапевтическая эффективность - 90,5% (табл.7).
| Таблица 7 | |||
| Эффективность заявленного препарата при метрит-мастит-агалактии у свиноматок в ЗАО «Шацкий свинокомплекс» Шацкого района Рязанской области | |||
| Препарат | Количество обработанных животных, гол. | Кратность введения препарата | Терапевтическая эффективность, % |
| Заявленный препарат | 63 | 1,55±0,20 | 90,5 |
| Энроцид | 49 | 2,00±0,30 | 81,6 |
При использовании базового варианта (энроцид) кратность введения составила 2,00±0,30, а терапевтический эффект - 81,6%, при этом по опытной группе кратность введения препарата была ниже в сравнении с контрольной группой на 22,5%, а терапевтическая эффективность была выше на 8,9%.
В дополнение следует сказать, что терапевтический эффект после однократного внутриматочного введения заявленного препарата свиноматкам в дозе 60 г/животное при ММА составил 68,3%, после двукратного - 82,5%, после трехкратного - 90,5%, что в сравнении с применением энроцида (51,0, 63,3 и 81,6%) оказалось выше на 17,3-19,2-8,9%.
Во втором опыте лечебный эффект заявленного препарата при метрит-мастит-агалактии после однократного внутриматочного введения свиноматкам составил 63,4%, после двукратного - 88,9% (табл.8). Эффективность заявленного препарата в сравнении с базовым препаратом была выше на 32,4% при однократном введении, при двукратном - на 26,8%.
| Таблица 8 | ||||||
| Эффективность применения препарата для лечения метрит-мастит-агалактии у свиноматок в ООО «Племенное» Воловского района Липецкой области | ||||||
| Группа животных | Терапевтический эффект, кратность введения | |||||
| однократно | двукратно | трехкратно. | ||||
| гол. | % | гол. | % | гол. | % | |
| Энроцид (n=29) | 9 | 31,0 | 18 | 62,1 | 22 | 75,9 |
| Заявленный препарат (n=36) | 23 | 63,4 | 32 | 88,9 | 34 | 94,4 |
Трехкратное введение препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок (третий раз препарат введен двум свиноматкам) способствовало выздоровлению 94,4% опытных животных, в то время как в контрольной группе - 75,9% (третий раз энроцид был введен четырем свиноматкам).
Таким образом, из полученных результатов исследования следует, что лучший терапевтический эффект при ММА достигнут при применении препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок (90,5-94,4%). Приведенные данные свидетельствуют о том, что заявленный препарат является эффективным терапевтическим средством при лечении послеродовых болезней у свиноматок.
Пример 4. Изучение эффективности профилактики гнойно-катарального эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок
Изучение эффективности применения препарата для профилактики послеродового эндометрита и метрит-мастит-агалактии у свиноматок проведены в четырех сериях опытов.
Первый опыт проведен в ООО «Возрождение» Таловского района Воронежской области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 185-210 кг. Второй опыт проведен в ЗАО «Шацкий свинокомплекс» Шацкого района Рязанской области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 190-220 кг. Третий опыт - в ООО «Инвест АПК» спецхоза «Октябрь» Бутурлиновского района Воронежской области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 170-230 кг. Четвертый - в ООО «Племенное» Воловского района Липецкой области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 180-200 кг.
Опыты проведены на 407 свиноматках, которые в первые сутки после опороса (через 6-10 часов после завершения родов) были распределены по принципу аналогов на 3 группы.
Животным первой группы (положительный контроль) с терапевтической целью внутриматочно с помощью щприца Жанэ и катетера или ПОС-5 вводили энроцид в соответствии с инструкцией по применению.
Второй группе свиноматок (опытная группа) вводили препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок в дозе 60 г/животное при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Флорфеникол - 2,5
Линкомицина гидрохлорид - 1,5
Диметилсульфоксид - 10,0
Глицерин - 10,0
1,2 пропиленгликоль - 10,0
Масло подсолнечное рафинированное - 12,5
Воск эмульсионный - 1,0
Кислота стеариновая - 0,9
Вода для инъекций - до 100%
Животные третьей группы служили отрицательным контролем, им с профилактической целью препараты не применяли.
За животными вели наблюдение, учитывая общее состояние, прием корма и воды, температуру тела и заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями: острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом и ММА.
Показатели профилактической эффективности препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок представлены в таблицах 9-12.
| Таблица 9 | ||||||
| Эффективность применения препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок для профилактики послеродовых болезней в ООО «Возрождение» Таловского района Воронежской области | ||||||
| Препарат, группа животных | Заболело свиноматок послеродовыми болезнями | |||||
| всего | в том числе | |||||
| эндометритом | ММА | |||||
| голов | % | голов | % | голов | % | |
| Положительный контроль (n=26) | 14 | 53,8 | 12 | 46,1 | 2 | 7,7 |
| Заявленный препарат (n=26) | 7 | 26,9 | 6 | 23,1 | 1 | 3,8 |
| Отрицательный контроль (n=17) | 11 | 64,7 | 9 | 52,9 | 2 | 11,8 |
| Таблица 10 | ||||||
| Эффективность применения препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок для профилактики послеродовых болезней в ЗАО «Шацкий свинокомплекс» Шацкого района Рязанской области | ||||||
| Группа свиноматок | Заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями | |||||
| Всего | В том числе | |||||
| Эндометритом | ММА | |||||
| гол. | % | гол. | % | гол. | % | |
| Энроцид (n=42) | 12 | 28,6 | 8 | 19,1 | 4 | 9,5- |
| Заявленный препарат (n=47) | 10 | 21,3 | 9 | 19,2 | 1 | 2,1 |
| Контроль (n=38) | 24 | 63,2 | 11 | 29,0 | 13 | 34,2 |
| Таблица 11 | ||||||
| Эффективность применения препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок для профилактики послеродовых болезней в ООО «Инвест АПК» спецхоза «Октябрь» Бутурлиновского района Воронежской области | ||||||
| Группа свиноматок | Заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями | |||||
| Всего | В том числе | |||||
| Эндометритом | ММА | |||||
| гол. | % | гол. | % | гол. | % | |
| Энроцид (n=28) | 9 | 32,1 | 6 | 21,4 | 3 | 10,7 |
| Заявленный препарат (n=43) | 10 | 23,3 | 10 | 23,3 | - | - |
| Контроль (n=18) | 12 | 66,7 | 7 | 38,9 | 5 | 27,8 |
Заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями в группе отрицательного контроля в среднем по 4 опытам составила 64,7%, в том числе эндометритом - 40,2% и ММА - 24,5%.
Заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями в группе положительного контроля (по результатам 4 опытов) сократилась на 28,2%, в том числе эндометритом - на 12,8% и ММА - в 2,7 раза.
| Таблица 12 | ||||||
| Эффективность применения препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок для профилактики послеродовых болезней в ООО «Племенное» Воловского района Липецкой области | ||||||
| Группа свиноматок | Заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями | |||||
| Всего | В том числе | |||||
| Эндометритом | ММА | |||||
| гол. | % | гол. | % | гол. | % | |
| Энроцид (n=48) | 15 | 31,3 | 11 | 23,0 | 4 | 8,3 |
| Заявленный препарат (n=49) | 10 | 20,4 | 7 | 14,3 | 3 | 6,1 |
| Контроль (n=25) | 16 | 64,0 | 10 | 40,0 | 6 | 24,0 |
Наименьшая заболеваемость послеродовыми болезнями установлена в группе животных, которым применяли препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок. В этой группе свиноматок послеродовые болезни уменьшились на 41,7%, в том числе эндометритом в 2,0 раза и ММА - в 8,2 раза в сравнении с отрицательным контролем.
В сравнении с группой свиноматок, которым применяли базовый препарат, эффективность профилактики послеродовых болезней у свиноматок заявленным препаратом оказалась выше на 13,5%, в том числе метрит-мастит-агалактии - в 3,0 раза, а эндометрита - на 7,4%.
Таким образом, проведенные исследования показали высокую эффективность применения заявленного препарата для профилактики послеродовых болезней у свиноматок.
Пример 5. Токсикологическая безопасность препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок
Согласно существующего положения о лекарственных средствах, предназначенных для лечения животных, проведено экспериментальное доклиническое изучение общей фармакологической активности и токсикологических свойств препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Флорфеникол - 2,5
Линкомицина гидрохлорид - 1,5
Диметилсульфоксид - 10,0
Глицерин - 10,0
1,2 пропиленгликоль - 10,0
Масло подсолнечное рафинированное - 12,5
Воск эмульсионный - 1,0
Кислота стеариновая - 0,9
Вода для инъекций - до 100%
При проведении исследований использовали фармакологические, токсикологические, биохимические, патоморфологические методы исследования, применяемые для изучения лекарственных средств, получившие апробацию в научно-исследовательской практике.
Препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок не токсичен для лабораторных животных при однократном пероральном введении. При однократном внутрижелудочном введении LD50 для белых мышей и белых крыс составляет более 21000,0 мг/кг массы тела. По показателям острой токсичности он относится к веществам малоопасным - 4 класс опасности по ГОСТ 12.01.007-76. При однократном парентеральном (подкожном) введении в дозах от 2250,0 до 15750,0 мг/кг массы тела LD50 для лабораторных животных установить не удалось, так как гибели животных в период опыта не было отмечено. Выраженной видовой и половой чувствительности к препарату не выявлено. Во всех испытанных дозах препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок не оказывает существенного влияния на поведение и общее состояние животных, интенсивность роста и вегетативные функции.
При хроническом подкожном введении препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок в дозах: 1-я группа - контроль; 2-я группа - (1/50 от дозы 15750,0 мг/кг) - 315,0 мг/кг; 3-я группа - (1/20 от дозы 15750,0 мг/кг) - 788,0 мг/кг и 4-я группа - (1/10 от дозы 15750,0 мг/кг) - 1575,0 мг/кг не вызывает существенных изменений в клиническом состоянии животных: поведение, аппетит, частота дыхания у всех животных опытных групп, как в период применения препарата, так и в течение 10 дней после окончания его применения оставались в пределах нормы. За период наблюдения у животных опытных групп не было отмечено нарушений функций пищеварения и мочеотделения. Гибели животных в ходе опыта не было.
Существенной разницы в привесах крыс контрольной и опытных групп (в дозах 315,0 и 788,0 мг/кг) в течение опыта не было отмечено. В четвертой группе (1575,0 мг/кг) наблюдалось снижение среднесуточных привесов животных по сравнению с крысами контрольной группы в среднем на 14,7% с 7-го по 14 день опыта, в следующие 7 дней (с 14-го по 21-й) - на 35,2%. После отмены препарата - с 21-го по 31-й день (восстановительный период) - статистически достоверных различий по этому показателю не было обнаружено.
Относительные массы внутренних органов крыс, которым применяли препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок подкожно в изученных дозах в течение 21 дня, существенно не отличались от контроля (табл.13).
| Таблица 13 | ||||
| Относительные массы внутренних органов крыс при многократном подкожном применении препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок | ||||
| Внутренний орган | Контроль | Доза препарата, мг/кг | ||
| 315,0 | 788,0 | 1575,0 | ||
| Легкие | 5,28±0,15 | 5,32±0,32 | 5,11±0,28 | 4,91±0,36 |
| Сердце | 3,55±0,15 | 3,48±0,18 | 3,78±0,13 | 3,94±0,20 |
| Печень | 30,1±1,51 | 31,1±1,64 | 29,9±1,07 | 30,6±1,62 |
| Селезенка | 4,00±0,33 | 3,96±0,10 | 3,83±0,14 | 3,80±0,17 |
| Почки | 5,62±0,16 | 5,48±0,13 | 5,55±0,21 | 5,58±0,27 |
| Надпочечники | 0,21±0,02 | 0,20±0,004 | 0,20±0,015 | 0,20±0,019 |
| Тимус | 1,01±0,04 | 1,22±0,13 | 1,05±0,08 | 1,10±0,16 |
При исследовании крови животных, которым вводили препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок в дозах 315,0 и 788,0 мг/кг массы тела, не отмечено достоверных изменений в морфологическом составе крови и биохимических показателях по сравнению с показателями в крови животных контрольной группы на 21 день опыта (табл.14-15).
При применении препарата в дозе 1575,0 мг/кг массы тела в течение 21 дня также не оказывал существенного влияния на большинство гематологических и биохимических показателей крови больных крыс (табл.14 и 15). Отмечена лишь тенденция увеличения лейкоцитов (на 16,8%), снижения гемоглобина (на 6,4%). Но колебания значений данных показателей находились в пределах физиологической нормы для данного вида животных и через 10 дней после последнего введения препарата, данные показатели у опытных животных восстанавливались до физиологических значений (табл.16).
| Таблица 14 | ||||
| Гематологические показатели крови белых крыс при длительном подкожном применении препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок на 21 день опыта | ||||
| Показатели | Контроль | Доза препарата, мг/кг | ||
| 315,0 | 788,0 | 1575,0 | ||
| Эритроциты, 1012/л | 7,2±0,7 | 7,4±0,5 | 7,2±0,3 | 7,3±0,6 |
| Лейкоциты, 109/л | 11,9±1,3 | 11,0±3,0 | 12,1±2,4 | 13,9±0,9 |
| Гемоглобин, г/л | 120,7±6,9 | 124,4±9,1 | 123,2±6,1 | 113,0±8,5 |
| Гематокрит, % | 41,1±1,19 | 42,6±2,13 | 42,4±2,9 | 42,0±3,7 |
| Нейтрофиды, % | ||||
| Палочкоядерные | 2,53±0,30 | 2,48±0,18 | 2,72±0,20 | 1,88±0,23 |
| Сегментоядерные | 26,9±1,19 | 27,7±3,20 | 25,0±0,16 | 27,1±1,26 |
| Эозинофилы, % | 4,38±0,32 | 4,12±0,40 | 3,78±0,29 | 4,22±0,30 |
| Базофилы, % | - | - | - | - |
| Лимфоциты, % | 65,4±4,11 | 64,7±1,94 | 67,9±0,90 | 65,8±1,36 |
| Моноциты, % | 1,00±0,44 | 1,00±0,47 | 1,00±0,60 | 1,00±0,50 |
Также была отмечена тенденция к более напряженному функционированию выделительной системы и печени (табл.15). При 21-дневном подкожном введении препарата в дозе 1575,0 мг/кг массы тела у крыс опытной группы достоверно возрастало содержание в сыворотке крови креатинина - на 18,3%, мочевины - на 26,2%, активности АсАТ и АлАТ - соответственно на 19,1 и 24,6%. Колебания значений данных показателей находились в пределах физиологической нормы для данного вида животных. Через 10 дней после последнего введения препарата, данные показатели у опытных животных восстанавливались до физиологических значений (табл.17).
| Таблица 15 | ||||
| Биохимические показатели крови белых крыс при длительном подкожном применении препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок на 21 день опыта | ||||
| Показатели | Контроль | Доза препарата, мг/кг | ||
| 315,0 | 788,0 | 1575,0 | ||
| Общий белок, г/л | 70,1±3,24 | 71,5±2,11 | 70,3±4,68 | 69,5±5,12 |
| Альбумины, г/л | 34,8±1,45 | 35,1±3,19 | 33,7±2,11 | 33,1±1,53 |
| α-глобулины, г/л | 5,17±0,14 | 4,99±0,29 | 5,11±0,30 | 5,83±0,43 |
| β-глобулины, г/л | 11,37±1,12 | 12,14±0,80 | 11,05±2,17 | 13,00±2,3,0 |
| γ-глобулины, г/л | 18,76±1,15 | 18,67±2,08 | 20,44±1,70 | 17,57±2,05 |
| Мочевина, мМ/л | 4,16±0,32 | 4,21±0,16 | 4,00±0,22 | 5,25±0,20* |
| Креатинин, мкМ/л | 40,4±1,10 | 46,9±3,10 | 41,5±4,51 | 47,8±1,54* |
| Липиды, г/л | 1,78±0,09 | 1,84±0,15 | 1,68±0,03 | 1,71±0,02 |
| Холестерин, мМ/л | 1,36±0,14 | 1,25±0,09 | 1,20±0,11 | 1,30±0,15 |
| Триглицериды, мМ/л | 0,70±0,01 | 0,75±0,03 | 0,70±0,06 | 0,71±0,01 |
| Глюкоза, мМ/л | 7,13±0,43 | 7,00±0,34 | 7,18±0,29 | 7,36±0,61 |
| ЩФ, мМ/л×ч | 5,32±0,27 | 5,12±0,19 | 5,52±0,21 | 5,06±0,11 |
| АсАТ, мМ/л×ч | 1,31±0,19 | 1,34±0,09 | 1,21±0,07 | 1,56±0,07 |
| АлАТ, мМ/л×ч | 0,65±0,05 | 0,68±0,11 | 0,60±0,04 | 0,81±0,11 |
| Билирубин, мкМ/л | 2,92±0,30 | 2,90±0,17 | 3,10±0,16 | 3,04±0,13 |
| Фосфор, мМ/л | 1,70±0,11 | 1,73±0,05 | 1,66±0,03 | 1,72±0,04 |
| Кальций, мМ/л | 2,33±0,02 | 2,28±0,04 | 2,31±0,02 | 2,25±0,03 |
| * - Р<0,01-0,001 по сравнению с контролем |
Анализируя данные, полученные по гематологическим и биохимическим показателям крови белых крыс при длительном подкожном применении заявленного препарата в течение 21 дня, установлено, что препарат в дозах 315,0 мг/кг и 788,0 мг/кг не оказывает отрицательного воздействия на гематологические и биохимические показатели крови животных. Те изменения, которые вызваны дозой 1575,0 мг/кг, имеют обратимый характер, так как в течение 10 дней после отмены препарата гематологические и биохимические показатели у опытных животных восстанавливались до физиологических значений.
| Таблица 16 | ||||
| Гематологические показатели крови белых крыс через 10 дней после отмены препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок | ||||
| Показатели | Контроль | Доза препарата, мг/кг | ||
| 315,0 | 788,0 | 1575,0 | ||
| Эритроциты, 1012/л | 8,4±0,4 | 8,4±0,2 | 8,1±0,2 | 8,4±0,3 |
| Лейкоциты, 109/л | 13,4±0,6 | 12,9±1,1 | 13,1±1,7 | 13,5±1,6 |
| Гемоглобин, г/л | 124,1±10,1 | 133,1±7,9 | 133,2±4,4 | 132,8±4,5 |
| Гематокрит, % | 40,5±3,56 | 44,1±±1,27 | 45,0±5,6 | 45,4±3,7 |
| Нейтрофилы, % | ||||
| Палочкоядерные | 1,32±0,40 | 1,78±0,35 | 1,40±0,32 | 1,56±0,45 |
| Сегментоядерные | 27,1±0,71 | 26,9±2,19 | 25,3±3,25 | 26,8±2,75 |
| Эозинофилы, % | 2,18±0,10 | 2,35±0,26 | 2,10±0,50 | 2,54±1,11 |
| Базофилы, % | - | - | - | - |
| Лимфоциты, % | 68,4±6,13 | 67,7±4,10 | 70,2±5,17 | 67,6±2,13 |
| Моноциты, % | 1,00±0,50 | 1,27±0,30 | 1,00±0,66 | 1,50±1,00 |
Препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок не оказывает местнораздражающего действия на слизистые оболочки и кожные покровы. Препарат в исследованных дозах не обладает аллергизирующими свойствами.
| Таблица 17 | ||||
| Биохимические показатели крови белых крыс через 10 дней после отмены препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок | ||||
| Показатели | Контроль | Доза препарата, мг/кг | ||
| 315,0 | 788,0 | 1575,0 | ||
| Общий белок, г/л | 66,04±2,56 | 68,94±1,98 | 67,20±2,13 | 68,36±3,74 |
| Альбумины, г/л | 35,2±1,69 | 37,6±3,77 | 34,2±2,12 | 35,4±1,01 |
| α-глобулины, г/л | 6,28±0,67 | 6,91±1,02 | 5,86±0,88 | 6,34±1,12 |
| β-глобулины, г/л | 12,21±0,72 | 11,13±0,90 | 14,18±0,70 | 12,57±0,36 |
| γ-глобулины, г/л | 12,35±0,16 | 13,30±1,18 | 12,96±0,52 | 14,05±0,28 |
| Мочевина, мМ/л | 3,95±0,60 | 3,28±0,25 | 3,62±0,16 | 3,96±0,43 |
| Креатинин, мкМ/л | 47,3±2,5 | 48,2±2,9 | 46,7±1,5 | 47,0±1,7 |
| Холестерин, мМ/л | 1,42±0,20 | 1,36±0,10 | 1,44±0,14 | 1,41±0,12 |
| Липиды, г/л | 2,10±0,10 | 2,04±0,11 | 1,89±0,06 | 1,89±0,06 |
| Триглицериды, мМ/л | 0,76±0,01 | 0,83±0,02 | 0,76±0,02 | 0,74±0,03 |
| Глюкоза, мМ/л | 7,74±0,51 | 7,62±0,23 | 7,80±0,17 | 7,53±0,48 |
| АЛТ, мМ/л×ч | 0,75±0,09 | 0,77±0,10 | 0,71±0,08 | 0,69±0,11 |
| ACT, мМ/л×ч | 1,25±0,12 | 1,23±0,09 | 1,03±0,04 | 1,15±0,02 |
| ЩФ, мМ/л×ч | 5,00±0,15 | 4,67±0,10 | 4,52±0,14 | 4,67±0,05 |
| Билирубин, мкМ/л | 3,25±0,24 | 3,25±0,11 | 3,30±0,20 | 3,44±0,60 |
| Кальций, мМ/л | 2,36±0,03 | 2,31±0,02 | 2,38±0,04 | 2,36±0,07 |
| Фосфор, мМ/л | 1,70±0,12 | 1,73±0,05 | 1,66±0,13 | 1,72±0,04 |
Таким образом, проведенные испытания препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок показали, что он обладает широким спектром антимикробного действия, выраженным лечебным действием и эффективнее прототипа, является малотоксичным. Применение препарата технологично и экономически выгодно.
Препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок, содержащий два антибиотика, один из которых относится к группе амфениколов, отличающийся тем, что в качестве антибиотиков используются флорфеникол и линкомицина гидрохлорид, и он дополнительно содержит основу в форме пенного аэрозоля при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| Флорфеникол | 1,0-3,0 |
| Линкомицина гидрохлорид | 1,0-3,0 |
| Диметилсульфоксид | 10,0 |
| Глицерин | 10,0 |
| 1,2 Пропиленгликоль | 10,0 |
| Масло подсолнечное рафинированное | 12,5 |
| Воск эмульсионный | 1,0 |
| Кислота стеариновая | 0,9 |
| Вода для инъекций | До 100% |
