Антитела к il-22 человека и их применение

Изобретение относится к биохимии и представляет собой варианты антител, связывающих IL-22 человека. Антитела охарактеризованы аминокислотными последовательностями вариабельных доменов VH и VL. Также предложены: фармацевтическая композиция, содержащая антитело; изолированная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело; вектор экспрессии антитела; клетка-хозяин, трансформированная вектором; а также способ получения антитела. Изобретение можно эффективно использовать для лечения опосредованных IL-22 нарушений. 8 н. и 17 з.п. ф-лы, 10 ил., 13 табл., 13 пр.

 

Текст описания приведен в факсимильном виде.

1. Изолированное антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела, связывающее IL-22 человека, причем указанное антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела включает:
(a) домен V_H, содержащий последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 90% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO:5, и домен V_L, содержащий последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 90% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO:6;
(b) домен V_H, содержащий последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 90% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO:23, и домен V_L, содержащий последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 90% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO:24;
(c) домен V_H, содержащий последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 90% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO:59, и домен V_L, содержащий последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 90% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NО:60;
(d) домен V_H, содержащий последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 90% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO:77, и домен V_L, содержащий последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 90% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO:78; или
(е) домен V_H, содержащий последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 90% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO:95, и домен V_L, содержащий последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 90% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO:96.

2. Антитело по п.1, отличающееся тем, что домен V_H содержит последовательность аминокислот SEQ ID NO:113, а домен V_L содержит последовательность аминокислот SEQ ID NO:114.

3. Антитело по п.1, отличающееся тем, что
a) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:473 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:474; или
b) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:131 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:132; или
c) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:149 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:150.

4. Антитело по п.1, отличающееся тем, что
a) домен V_Н включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:617 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:618;
b) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:491 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:492;
c) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:167 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:168;
d) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:185 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:186; или
е) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:203 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:204.

5. Антитело по п.1, отличающееся тем, что
a) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:509 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:510;
b) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:527 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:528;
c) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:221 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:222;
d) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:239 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:240;
e) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:257 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:258; или
f) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:275 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:276.

6. Антитело по п.1, отличающееся тем, что
a) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:347 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:348;
b) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:311 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:312;
c) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:329 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:330; или
d) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:293 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:294.

7. Антитело по п.1, отличающееся тем, что
а) домен V_Н включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:599 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:600;
b) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:581 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:582;
c) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:563 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:564; или
d) домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:545 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:546.

8. Антитело по п.4, отличающееся тем, что домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:617 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:618.

9. Антитело по п.7, отличающееся тем, что домен V_H включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:599 и домен V_L включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:600.

10. Изолированное антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела, связывающее IL-22 человека, причем указанное антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела включает домен Fv, включающий последовательность аминокислот, по меньшей мере, на 95% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:97, SEQ ID NO:115, SEQ ID NO:133, SEQ ID NO:151, SEQ ID NO:169, SEQ ID NO:187, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:223, SEQ ID NO:241, SEQ ID NO:259, SEQ ID NO:277, SEQ ID NO:295, SEQ ID NO:313, SEQ ID NO:331 или SEQ ID NO:349, SEQ ID NO:367, SEQ ID NO:385, SEQ ID NO:403, SEQ ID NO:421, SEQ ID NO:439, SEQ ID NO:457, SEQ ID NO:475, SEQ ID NO:493, SEQ ID NO:511, SEQ ID NO:529, SEQ ID NO:547, SEQ ID NO:565, SEQ ID NO:583, SEQ ID NO:601 или SEQ ID NO:619.

11. Антитело по п.10, отличающееся тем, что домен Fv включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:97, SEQ ID NO:115, SEQ ID NO:133, SEQ ID NO:151, SEQ ID NO:169, SEQ ID NO:187, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:223, SEQ ID NO:241, SEQ ID NO:259, SEQ ID NO:277, SEQ ID NO:295, SEQ ID NO:313, SEQ ID NO:331 или SEQ ID NO:349, SEQ ID NO:367, SEQ ID NO:385, SEQ ID NO:403, SEQ ID NO:421, SEQ ID NO:439, SEQ ID NO:457, SEQ ID NO:475, SEQ ID NO:493, SEQ ID NO:511, SEQ ID NO:529, SEQ ID NO:547, SEQ ID NO:565, SEQ ID NO:583, SEQ ID NO:601 или SEQ ID NO:619.

12. Антитело по п.11, отличающееся тем, что домен Fv включает последовательность аминокислот SEQ ID NO:151, SEQ ID NO:187, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:259, SEQ ID NO:277, SEQ ID NO:313, SEQ ID NO:331 или SEQ ID NO:349.

13. Изолированное антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела, связывающее IL-22 человека и включающее:
(a) домен V_H, содержащий три гипервариабельных участка (CDR), содержащих последовательности аминокислот SEQ ID NO:602, SEQ ID NO:603 и SEQ ID NO:604, и домен V_L, содержащий три гипервариабельных участка (CDR), содержащих последовательности аминокислот SEQ ID NO:605, SEQ ID NO:606 и SEQ ID NO:607; или
(b) домен V_H, содержащий три гипервариабельных участка (CDR), содержащих последовательности аминокислот SEQ ID NO:620, SEQ ID NO:621 и SEQ ID NO:622, и домен V_L, содержащий три гипервариабельных участка (CDR), содержащих последовательности аминокислот SEQ ID NO:623, SEQ ID NO:624 и SEQ ID NO:625.

14. Антитело по любому из пп.1-13, отличающееся тем, что константа ассоциации указанного антитела с IL-22 человека составляет не менее 10¹⁰ M^-1.

15. Антитело по любому из пп.1-13, отличающееся тем, что указанное антитело блокирует опосредуемую IL-22 пролиферацию клеток BaF3 с IC₅₀, равной 150 пМ или менее, причем указанные клетки BaF3 содержат рецептор к IL-22 человека.

16. Антитело по любому из пп.1-13, отличающееся тем, что указанное антитело блокирует опосредуемую IL-22 секрецию GROa клетками НТ29 с IС₅₀, равной 150 пМ или менее.

17. Антитело по любому из пп.1-13, которое ингибирует связывание IL-22 с IL-22R или с рецепторным комплексом, включающим IL-22R и IL-10R2.

18. Антитело по любому из пп.1-13, отличающееся тем, что указанное антитело является антителом человека.

19. Антитело по любому из пп.1-13, отличающееся тем, что указанное антитело представляет собой lgG1 или lgG4.

20. Фармацевтическая композиция для лечения связанных с IL-22 нарушений, содержащая эффективное количество антитела по любому из пп.1-19.

21. Изолированная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело по любому из пп.1-19.

22. Вектор экспрессии, включающий нуклеиновую кислоту по п.21.

23. Клетка-хозяин, трансформированная вектором по п.22.

24. Клетка-хозяин по п.23, которая представляет собой бактерию, клетку млекопитающего, клетку дрожжей, клетку растения или клетку насекомого.

25. Способ получения антитела, связывающего IL-22, включающий культивирование клетки-хозяина по п.23 в условиях, обеспечивающих экспрессию антитела, и выделение антитела из культуры клеток.