Средство для профилактики и лечения атеросклероза


 


Владельцы патента RU 2468789:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского Сибирского отделения Российской академии наук (ИрИХ СО РАН) (RU)

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, медицине, фармакологии и представляет собой средство для профилактики и лечения атеросклеротического повреждения кровеносных сосудов, а также пред- и тромботических состояний, обладающее гиполипидемическим и антикоагулянтным и антитромботическим действиями, выполненное в дозированной лекарственной форме в виде таблеток, покрытых оболочкой, состоящих из ядра, содержащего активное действующее вещество и вспомогательные вещества, отличающееся тем, что ядро содержит в качестве активного действующего начала субстанцию калиевой соли сульфатированного арабиногалактана, а в качестве вспомогательных веществ лудипресс, аэросил и кальций стеариновокислый, причем компоненты в средстве находятся в определенном соотношении в мас.%. Изобретение обеспечивает эффективное лечение и профилактику атеросклеротического повреждения кровеносных сосудов, а также пред- и тромботических состояний. 3 н. и 1 з.п. ф-лы, 5 табл.

 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, медицине, фармакологии и касается производства средств для профилактики и лечения атеросклероза.

Атеросклеротическое повреждение кровеносных сосудов является наиболее частой причиной смертности и инвалидизации населения в индустриально развитых странах. В его основе лежат нарушения системы гемостаза и ухудшения реологических свойств крови, а также нарушения липидного обмена в организме, приводящие к различной сердечно-сосудистой патологии (инсульты, инфаркты, тромбоэмболии и т.д.).

По данным Всемирной организации здравоохранения число людей, страдающих сердечно-сосудистыми заболеваниями, постоянно растет. В России, в связи с неблагоприятной экологической обстановкой и снижением качества жизни наблюдается всплеск развития сердечно-сосудистой патологии. Все это формирует устойчивый острый спрос на гиполипидемические препараты, который в настоящее время восполняется только импортными дорогостоящими средствами различных по химической структуре групп (статины, производные фиброевой кислоты), которые в свою очередь оказываются не всегда эффективными и имеют большое количество побочных действий.

О высоком спросе на гиполипидемические препараты на мировом рынке говорит тот факт, что объемы продаж этих препаратов в период с 1985 по 2000 годы возросли с 250 млн.$ до 2,64 млрд.$, в 2008 году этот показатель только по одной группе препаратов (статины) составил порядка 50 млрд.$. Это свидетельствует о постоянном росте числа больных, имеющих различные нарушения обмена липидов в организме.

Возможным подходом к решению вопросов профилактики и лечения атеросклероза является использование средств, направленных как на нормализацию гемостаза крови и снижение общего уровня липидов, так и на изменение отдельных составляющих липидного спектра крови.

К этому классу потенциальных гиполипидемических средств относятся гепариноиды - природные, синтетические и полусинтетические вещества, действующие подобно гепарину, но отличающиеся от него по химической структуре, молекулярной массе и некоторым фармакологическим свойствам. Лекарственные средства на основе гепариноидов широко применяются в зарубежной практической медицине, однако в качестве гиполипидемических средств используются единицы. Они не соответствуют главному требованию, предъявляемому к современным гиполипидемическим средствам - их обязательному пероральному применению, так как гепариноиды чрезвычайно легко разрушаются в пищеварительном тракте, вследствие чего нарушается их всасывание и поступление в кровь.

На фармацевтическом рынке России в настоящее время этот класс интереснейших биологически активных веществ представлен только дорогостоящим импортным препаратом «Вессел Дуэ Ф®» (сулодексид) «капсулы 250 ЛЕ (липосемические единицы), раствор для инъекции 600 ЛЕ/2 мл» производства фирмы «Alfa-Wassermann S.p.A.» Италия. Он единственный имеет пероральную лекарственную форму в виде капсул, применяемую, однако, не как гиполипидемическое средство, а только как антикоагулянт прямого действия - для профилактики и лечения ангиопатий различной локализации, хотя его применение в качестве средства для вторичной профилактики коронарного атеросклероза и его осложнений доказано клиническими испытаниями: 6-месячное использование препарата наряду с антитромботическим дает выраженный гиполипидемический эффект. У больных нестабильной стенокардией и тяжелой стабильной стенокардией (III, IV функциональный класс) «Вессел Дуэ Ф®» снижал уровень общего холестерина на 25%, липопротеидов низкой плотности - на 27%, триглицеридов - на 37% [Аронов Д.М. Гиполипидемический эффект низкомолекулярного гепарина - сулодексида (Весел дуэ Ф) у больных ИБС / Д.М.Аронов, М.Г.Бубнова, Н.В.Петрова, В.П.Зыкова, А.С.Одинцова, А.М.Олферьев. // Клин, фармакол. тер. - 1995. - №3. - С.24-26]. По данным крупного многоцентрового плацебо-контролируемого исследования с участием более 4 тыс. больных острым инфарктом миокарда, половина из которых получала в течение 1 года «Вессел Дуэ Ф®» по 1 капсуле 2 раза в день, «Вессел Дуэ Ф®» достоверно снижает частоту летальных исходов, нефатальных инфарктов миокарда и других обострений ишемической болезни сердца, а также частоту тромбозов левого желудочка сердца (IPO-V2-STUDY, JACE) [Аронов Д.М. Современные методы лечения атеросклероза / Д.М.Аронов. // Тер. арх. - 1997. - №11. - С.75-81].

Разработанный в конце 90-х годов XX века Всероссийским НИИ мясной промышленности им.В.М.Горбатова РАСХН отечественный аналог современного препарата «Вессел Дуэ Ф®», а также зарегистрированного в те годы в СССР препарата «Ateroid» фирмы «Crynos» Италия [Walenga, J.M. Non heparin glycosaminoglycan derived drugs / J.M. Walenga, D.Hoppensteadt, J.Fareed. // Semin. Thromb. Hemost. - 1991. - Vol.17, №2. - P.137-142] - лекарственное средство «Алиприл» (таблетки, покрытые кишечнорастворимой оболочкой 0,075 г №10), прошедший клинические испытания: 3-месячный курс лечения этим препаратом позволяет снизить уровень общего холестерина на 10-12%, липопротеидов низкой плотности на 16-18%, триглицеридов на 21-35%, повысить уровень липопротеидов высокой плотности на 20-21% [Гаврилов А.С. Препарат для лечения атеросклероза "Алиприл" / А.С.Гаврилов, Р.В.Илюхина, И.В.Исаева, Л.А.Люблинская. // Хим.-фарм. журн. - 2001. - №7. - С.53-56] и разрешенный для применения в качестве препарата для лечения нарушений липидного обмена, гиперлипопротеинемии II типа (в т.ч. с пониженным уровнем ЛПВП) (ВФС 42-2936-99 Таблетки "Алиприл", регистрационный номер 2000/27/4 от 26.01.2000), так и не был внедрен в медицинскую практику.

«Вессел Дуэ Ф®» и «Алиприл» относятся к классу органопрепаратов, получаемых из слизистой оболочки кишечника свиней [Патент 3936351 США, МПК А61К 35/38. Metod for preparing glucoronyl-glucosamino-glycan sulphates exhibiting antilipasaemic activity /Bianchini P.; Opocrin S.r.l., Modena, Italy. - №25371/73; заявл. 14.06.1973; опубл. 13.06.1974; №479036 (Италия); Патент 2167663 Россия, МПК А61К 35/38. Способ получения гепариноида / Лисицын А.Б., Илюхина Р.В., Исаева И.В., Люблинская Л.А.; Всероссийский НИИ мясной промышленности им. В.М.Горбатова. - №2000110706/14; заявл. 28.04.2000; опубл. 27.05.2001].

Существенные недостатки органопрепаратов:

1. наличие в их составе следов белка и гистамино-подобных веществ, приводящих к появлению аллергических реакций при применении;

2. сложный состав действующего вещества или веществ, не всегда являющийся постоянным (как в процессе производства, так и в процессе хранения), приводящий к отсутствию адекватных методов его стандартизации;

3. кроме того, мягкие капсулы препарата «Вессел Дуэ Ф®» являются желудочнорастворимыми, так как в их состав входит только желатин и глицерин, не считая консервантов и красителей (натрия этил-р-оксибензоата, натрия пропил-р- оксибензоата, диоксида титана и красного оксида железа) [НД 42-1421-00. Вессел Дуэ Ф (капсулы 250 ЛЕ). - М., 2000, рег. номер: П №01112490/01-2000], что ведет к частичному разрушению препарата в желудке. В результате эффективность известного лекарственного средства значительно снижается.

В Иркутском институте химии им.А.Е.Фаворского СО РАН впервые методом направленного синтеза с целью создания нового представителя класса полусинтетических гепариноидов разработана оригинальная фармакологически активная субстанция («Агсулар®»), обладающая гиполипидемической и антикоагулянтной активностью [Патент 2319707 Россия, МПК С07Н 3/02, С08В 37/00. Способ получения сульфатированных производных арабиногалактана, обладающих антикоагулянтной и гиполипидемической активностью / Костыро Я.А., Ганенко Т.В., Медведева С.А., Сухов Б.Г., Трофимов Б.А.; Иркутский институт химии им.А.Е.Фаворского СО РАН. - №2007100464/04; заявл. 09.01.2007; опубл. 20.03.2008; Свидетельство на товарный знак «Агсулар®» №398618 от 19.01.2010]. По данным проведенных доклинических исследований по эффективности субстанция «Агсулар®» не уступает препарату «Вессел Дуэ Ф®» (антикоагулянтная и антитромботическая активность) и препарату «Зокор®» (симвастатин) (гиполипидемическая и антиатерогенная активность) [Костыро Я.А. Сульфатированный арабиногалактан - перспективный отечественный аналог сулодексида / Я.А.Костыро, Г.Н.Ковальская. // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. - 2008. - №2, Т.60. - С.117].

Достоинства оригинальной субстанции «Агсулар®» по сравнению с существующими аналогами.

1. «Агсулар®» представляет собой химически чистую биологически активную субстанцию с установленной структурой и разработанными методами стандартизации.

2. В основе технологической схемы получения субстанции «Агсулар®» лежит химическая модификация (сульфатирование) растительного полисахарида - арабиногалактана, получаемого в результате комплексной безотходной переработки древесины лиственницы сибирской (Larix sibirica Ledeb.) [Патент 2256668 Россия, МПК С08В 37/00. Способ получения арабиногалактана / Бабкин В.А., Колзунова Л.Г., Медведева Е.Н., Малков Ю.А., Остроухова Л.А.; Иркутский институт химии им.А.Е.Фаворского СО РАН. - №2003122811/04; заявл. 21.07.2003; опубл. 20.07.2005]. Содержание арабиногалактана в древесине достигает порядка 15%, так из 1 м3 неутилизируемых многотоннажных отходов лесопереработки - комлей лиственницы сибирской с влажностью 52% можно получить до 26-54 кг арабиногалактана.

3. Субстанция «Агсулар®» наследует структурную организацию исходного биополимера арабиногалактана, что является принципиально важным для осуществления мембранотропного действия посредством рецептор-опосредованного эндоцитоза клетками организма [Патент 5478576 США, МПК А61К 38/14, С07К 17/00. Arabinogalactan derivatives and uses thereof / Jung C., Enriquez P., Palmacci S., Josephson L., Lewis J.M.; Advanced Magnetics, Inc. - №900686; заявл. 17.06.1992; опубл. 26.12.1995]. Прежде всего, клетками печени, наиболее богатыми асиалогликопротеиновыми рецепторами, где субстанция «Агсулар®» может регулировать синтез факторов свертывания крови, а также синтез и метаболизм холестерина, желчных кислот и триглицеридов, позволяя таким образом осуществлять профилактику и лечение атеросклеротического повреждения кровеносных сосудов с максимумом эффективности при минимуме побочного действия.

4. Субстанция «Агсулар®» представляет собой калиевую соль сульфатированного арабиногалактана и является слабой кислотой (рКа=3,16; рН водных растворов=5,1), вследствие чего обладает хорошей всасываемостью в желудке [Муравьев И.А. Биофармацевтические основы технологии лекарств и их использование в деятельности аптечных учреждений ГАПУ МЗ РСФСР: Методические указания / И.А.Муравьев, В.Д.Козьмин, Н.Ф.Кононихина. - Пятигорск:, 1983. - 44 с., ил.]. К тому же все сульфатные группировки в макромолекуле биополимера являются эфирносвязанными, что затрудняет кислотное расщепление, в результате чего возрастает устойчивость субстанции «Агсулар®» к кислотному гидролизу под действием желудочного сока. Эти данные подтверждает высокий показатель величины относительной биологической доступности субстанции «Агсулар®» при пероральном приеме равный 54,4%, свидетельствующий об устойчивости исследуемого соединения в желудочно-кишечном тракте экспериментальных животных [Костыро, Я.А. Экспериментальная фармакокинетика сульфатированного арабиногалактана при различных путях введения / Я.А.Костыро, Г.Н.Ковальская, О.А.Силизерцева, О.П.Ильина. // Фармация. - 2008. - №1. - С.45-46].

Учитывая физико-химические свойства и специфическую фармакологическую активность (гиполипидемическая и антикоагулянтная) субстанции «Агсулар®», ее наиболее рациональной пероральной лекарственной формой являются таблетки или капсулы.

Ранее нами была предпринята попытка создания таблетированной лекарственной формы препарата «Агсулар®» (прототип: Костыро Я.Л. Разработка технологии получения, исследование свойств сулъфатированного арабиногалактана и создание таблетированной лекарственной формы препарата антикоагулянтного и гиполипидемического действия: автореф. дис: канд. фарм. наук: 15.00.01; 15.00.02 / Я.А.Костыро. - М., 2008. - 23 с.], таблетки были получены прямым прессованием основного действующего вещества -препарата «Агсулар®» со вспомогательными веществами. В качестве вспомогательных веществ были взяты микрокристаллическая целлюлоза или поливинилпирролидон, диоксид кремния и лактоза. Срок хранения таких таблеток - не более двух с половиной лет ввиду гигроскопичности калиевой соли сульфатированного арабиногалактана, а таблетки не были защищены оболочкой от воздействия атмосферной влаги.

Целью предлагаемого изобретения является создание лекарственного средства на базе субстанции «Агсулар®» в виде твердых дозированных лекарственных форм для перорального применения, что позволит расширить ассортимент гиполипидемических препаратов и антикоагулянтов прямого действия отечественного производства и обеспечить национальную безопасность страны в области лекарственного обеспечения населения.

Техническим результатом данного изобретения является разработка эффективных пероральных лекарственных форм на основе субстанции «Агсулар®» для профилактики и лечения атеросклероза.

Технический результат достигается тем, что лекарственная форма, обладающая гиполипидемическим, антикоагулянтным и антитромботическим действием, состоит из ядра (капсульной массы), содержащего в качестве активного действующего начала субстанцию «Агсулар®» и вспомогательных веществ. Растворяющаяся в желудке оболочка таблетки или желатиновая капсула используются только для защиты лекарственной формы от воздействия влаги атмосферного воздуха, так как субстанция «Агсулар®» является высоко гигроскопичным (20,07%) веществом. В качестве вспомогательных веществ ядра (капсульной смеси) используются лудипресс, аэросил, кальций стеариновокислый, при следующем содержании компонентов в мас.%:

«Агсулар®» 47,0-62,0
Лудипресс 30,0-47,5
Аэросил 4,0-6,2
Кальций стеариновокислый 1,0;

а оболочка содержит следующие компоненты в мас.%:

Этилцеллюлоза 24,5-29
Лаурилсульфат 0,9-1,7
Цетиловый спирт 1,7-3,3

Защитная оболочка, включающая этилцеллюлозу, лаурилсульфат и цетиловый спирт, наносится в количестве 1-2% от массы таблетки.

Технический результат достигается использованием в отличие от ближайших аналогов более современных вспомогательных веществ, улучшающих сыпучесть и прессуемость действующего вещества, таких как лудипресс и кальций стеариновокислый. Кроме того, технический результат изобретения также достигается ранее не используемым способом изготовления пероральной лекарственной формы, в соответствии с которым смешивают субстанцию «Агсулар®», лудипресс, аэросил, кальций стеариновокислый. Полученную смесь подвергают сухой грануляции, включающей в себя получение из смеси действующего и вспомогательных веществ брикетов диаметром не менее 25 мм, их размол на вальцовой мельнице, фракционирование полученных гранул на ситах, далее для получения таблеток, покрытых оболочкой, проводят опудривание фракции гранул размером не менее 1 мм кальцием стеариновокислым с последующим таблетированием и нанесением защитной оболочки в виде 30% водной суспензии, содержащей состав оболочки, в количестве 1-2% от массы таблетки, а для получения капсул - гранулятом (фракция гранул размером не менее 1 мм) наполняют твердые желатиновые капсулы с крышечкой размером №1 - 00.

Сущность заявленного изобретения состоит в следующем.

Оригинальная фармакологически активная субстанция «Агсулар®» - это полусинтетический гепариноид, представляющий собой сульфатированный арабиногалактан в виде калиевой соли и обладающий гиполипидемической, антикоагулянтной и антитромботической активностью.

Использование в качестве вспомогательных веществ лудипресса (состав: лактоза 91,0-95,0%, коллидон 30 3,0-4,0% и коллидон CL 3,0-4,0%), аэросила, кальция стеариновокислого в заявляемых количествах позволяет получить стабильные при хранении лекарственные формы (таблетки и капсулы) и обеспечивает высвобождение (не менее 75%) субстанции «Агсулар®» в течение 45 минут, что полностью соответствует требованиям ОФС 42-0003-04 "Растворение".

Использование для покрытия таблетки комбинации веществ, включающей этилцеллюлозу, лаурилсульфат и цетиловый спирт, позволяет получить высокопрочную, стабильную, легко растворимую в желудке защитную оболочку, придающую таблетке приятный внешний вид и обеспечивающую защиту действующего вещества от атмосферной влаги.

Использование сухой грануляции позволяет получать таблетки высокой прочности при небольшом усилии прессования, полностью соответствующих требованиям ГФ XI, вып.2, ОФС "Таблетки" по всем показателям.

В случае отсутствия возможности произвести нанесение на таблетки защитной оболочки, гранулят помещают в твердые желатиновые капсулы с крышечкой размером №1 - 00, в результате чего получают лекарственную форму (капсулы), которые по своим характеристикам полностью соответствуют ГФ XI, вып.2, ОФС "Капсулы".

Технологический процесс для промышленного воспроизводства определялся по результатам экспериментальных работ, сводные данные по которым представлены в таблице 1.

Таблица 1
Технологические характеристики таблеточных смесей
Наименование компонентов Таблеточные смеси, мас.%
№1 №2 №3 №4
Субстанция «Агсулар®» 47,15 61,88 73,33 82.92
Лудипресс 47,15 30,94 18,34 13,27
Аэросил 4,70 6,18 7,33 3,31
Кальций стеариновокислый 1,00 1,00 1,00 0,50
Сыпучесть смеси до сухой грануляции, г/с 5,5 2,6 2,0 1,5
Сыпучесть смеси после сухой грануляции, г/с 10,7 6,4 4,6 3,1
Прессуемость (прочность на излом), Н 44,5 15,0 11,2 9,7
Насыпная масса, кг/м3 1349,69 1269,94 1214,72 497,00
Размер твердых желатиновых капсул 1 0 00

Как видно из представленных в таблице данных, только таблеточные смеси №1 и 2 удовлетворяют технологическим требованиям процесса таблетирования и капсулирования [Борзунов Е.Е. Исследования в области физико-химической механики таблетирования лекарственных порошкообразных веществ: автореф. дис: д-ра, фармац. наук: 15.00.01 / Е.Е.Борзунов. - Львов, 1972. - 41 с.; Вальтер М.Б. Постадийный контроль в производстве таблеток / М.Б.Вальтер, О.Л.Тютенков, Н.А.Филиппин. - М.: Медицина, 1982. - 208 с.].

Пригодность пероральных лекарственных форм (капсулы, таблетки, покрытые оболочкой), созданных на основе субстанции «Агсулар®», в качестве средств для профилактики и лечения атеросклеротического повреждения кровеносных сосудов и различных тромботических состояний, доказана результатами проведенных доклинических исследований.

Доклиническое изучение субстанции «Агсулар®» и разработанных на ее основе пероральных лекарственных форм проводилось в соответствии с Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред. В.П.Фисенко. - М.: ЗАО ИИА "Ремедиум", 2000. Результаты оформлены в виде соответствующих отчетов.

ИССЛЕДОВАНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ

Для определения показателей острой токсичности препарат (в виде свежеприготовленной водной взвеси растертых таблеток или содержимого капсул) вводили белым мышам и крысам обоего пола внутрижелудочно через атравматичный металлический зонд по Литчфилду-Уилкоксону. Расчеты средних летальных доз проводили по В.Б.Прозоровскому [Прозоровский В.Б. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки / В.Б.Прозоровский, М.П.Прозоровская, В.М.Демченко. // Фармакол. и токсикол. - 1978. - №4. - С.497-502]. Для достижения больших доз препарата введение осуществляли повторно с интервалом 20-30 минут в течение 4 часов. Контрольные животные получали аналогичные по объемам количества дистиллированной воды. Дозирование осуществляли в пересчете на содержание активного компонента в лекарственных формах.

Период наблюдения составлял 14 дней. Регистрируемые показатели: летальность, время гибели, симптоматика отравления, ежедневное наблюдение общего состояния и поведения, взвешивание до введения, на 7 и 14 дни наблюдения, объемы потребления корма и воды (для этого животные помещались в обменные клетки итальянской фирмы «Texnoplast»), вскрытие и макроскопическое исследование всех погибавших и выживших животных в конце исследования (эвтаназия у грызунов осуществлялась передозировкой эфира), определение массовых коэффициентов внутренних органов.

Зависимые от дозы пероральных лекарственных форм препарата «Агсулар®» летальные эффекты представлены в таблице 2.

Таблица 2
Токсичность пероральных лекарственных форм препарата «Агсулар®» при внутрижелудочном способе введения
Вид животного Пол LD50 (мг/кг)
мыши самки 5950±225
самцы 5320±500
крысы самки 10000±600
самцы 10400±700

Гибель животных при внутрижелудочном введении смертельных доз пероральных лекарственных форм препарата (более 6 г/кг) наблюдалась в течение 1.5-5 часов от момента введения при явлениях возбуждения, последующей вялости, заторможенности, оглушения, бокового положения, резкого поверхностного дыхания, судорог в атональной стадии и паралича.

Вскрытие погибших животных при внутрижелудочном введении выявило, помимо признаков венозного полнокровия внутренних органов, субплевральные, субдуральные кровоизлияния, а также мелкие кровоизлияния в продолговатом мозге и больших полушариях коры. У остальных экспериментальных животных, получавших дозы менее 6 г/кг, в первые сутки отмечались атаксия, заторможенность, вялость, снижение потребления корма и воды. В остальные дни общее состояние и поведение животных, получивших исследуемый препарат, не отличалось от таковых у животных контрольной группы, получавших воду. Достоверных половых различий в течение интоксикации и токсикометрических показателях не отмечалось.

По данным вскрытия и макроскопического исследования внутренних органов острое внутрижелудочное введение пероральных лекарственных форм препарата «Агсулар®» в исследуемых дозах белым мышам и крысам обоих полов не вызывает макроскопических изменений внутренних и эндокринных органов, головного мозга, а также слизистой желудка и кишечника.

Таким образом, результаты токсикометрии, данные некропсии и наблюдений за экспериментальными животными в постинтоксикационном периоде острого отравления позволяют отнести пероральные лекарственные формы препарата «Агсулар®» к V классу практически нетоксичных лекарственных веществ [Hodge, H. Clinical Toxicology of Commercial Products / H.Hodge et al. - Acute Poisoning. Ed. IV, Baltimor, 1975. - 427 p.].

Состояние переживших острую интоксикацию животных свидетельствует о хорошей переносимости и безвредности пероральных лекарственных форм препарата в дозах, превышающих терапевтические в десятки раз. Терапевтический индекс препарата составляет порядка 1000 (разовая доза для человека - 10-15 мг/кг, а ЛД50 для крыс при внутрижелудочном введении - порядка 10000 мг/кг).

ИССЛЕДОВАНИЕ ПОДОСТРОЙ И ХРОНИЧЕСКОЙ ТОКСИЧНОСТИ Учитывая малую токсичность препарата, показанную в остром эксперименте, рекомендации нормативных документов МЗСР РФ и правил GLP, а также исходя из длительности применения препарата у человека и величины максимальной эффективной терапевтической дозы (10-15 мг/кг для человека в сутки или 2 таблетки (капсулы) лекарственной формы с содержанием активного компонента 500 мг), для оценки подострой токсичности был выбран срок 1 месяц, а хроническое введение осуществляли на протяжении 3 месяцев.

В опытах на грызунах (крысы обоего пола) пероральные лекарственные формы препарата вводились внутрижелудочно через зонд ежедневно на протяжении 90 дней в 3 дозах: терапевтической - 15 мг/кг; предполагаемой максимальной - 1500 мг/кг (в 100 раз большей терапевтической, не вызывает гибели крыс при однократном введении) и промежуточной - 500 мг/кг.

Следует отметить, что в ходе эксперимента не наблюдалось гибели подопытных животных, что свидетельствует о низкой материальной кумуляции исследуемых пероральных лекарственных форм препарата и тенденции к развитию привыкания.

Таким образом, применение пероральных лекарственных форм препарата «Агсулар®» у крыс обоих полов внутрижелудочно один раз в сутки в течение 90 дней в дозах 15, 500 и 1500 мг/кг не влияет на внешний вид, общее состояние и поведение животных, не оказывает негативного влияния на биохимические параметры крови и основные физиологические функции организма, не вызывает патоморфологических изменений, что свидетельствует о хорошей переносимости и относительной безвредности препарата.

На основании результатов подострого эксперимента рассчитан индекс безопасности (ИБ) нового препарата, составляющий 16.9. Расчетный безопасный курс (РБК) препарата в днях равен 1525.

В соответствии с классификацией опасности лекарственных препаратов для клинического применения (ИБ больше 5) «Агсулар®» относится к III классу малотоксичных (малоопасных) лекарственных препаратов.

ИССЛЕДОВАНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОГО ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ

Для оценки гиполипидемической активности заявляемых твердых дозированных лекарственных форм препарата «Агсулар®» (таблетки, покрытые оболочкой, и капсулы) для профилактики и лечения атеросклероза было изучено их влияние на основные показатели липидного обмена у крыс на модели экспериментальной гиперлипидемии, индуцированной применением гиперхолестеринной диеты, перенасыщенной жирами [Воспроизведение заболеваний у животных для экспериментально-терапевтических исследований / Под ред. Н.В.Лазарева. - М.: МедГИЗ, 1954].

Для этого экспериментальные животные потребляли гомогенный корм следующего состава:

казеин - 5%;

подсолнечное масло в смеси со свиным жиром - 40%;

глюкоза - 45%;

агар - 2%;

соли, витамины - 4%;

холиевая кислота- 1%;

тиоурацил- 1%;

холестерин - 4%.

Кроме этого крысам дополнительно внутрижелудочно вводили 10% масляный раствор холестерина в дозе 100 мг/кг.

Твердые дозированные лекарственные формы препарата «Агсулар®» и препараты сравнения «Вессел Дуэ Ф® капсулы 250 ЛЕ» производства фирмы Alfa-Wassermann S.p.A., Италия и «Зокор® таблетки, покрытые оболочкой, 10 мг» производства фирмы «Merck Sharp & Dohme», Нидерланды, вводили внутрижелудочно в дозе 100 мг/кг (108 ЛЕ/кг) за час до введения холестерина на протяжении 1.5 месяцев на фоне указанной выше диеты.

Интактная группа крыс получала обычную виварную диету.

Забор крови осуществляли в конце исследования, через 18 часов после последнего введения препаратов. При этом животные в этот период были лишены пищи.

Все лабораторные тесты проводились по стандартным методикам [Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследований в клинике: справочник / В.В.Меньшиков, Л.Н.Дилекторская, Р.П.Золотницкая. - М.: Медицина, 1987; и Колб В.Г. Клиническая биохимия / В.Г.Колб, B.C.Камышников. - М.: Минск, Беларусь, 1976. - С.150-171].

Забитые декапитацией животные подвергались патологоанатомическому вскрытию, а аорта - гистологическому исследованию.

Статистическую обработку результатов экспериментов проводили по Стьюденту и Фишеру.

Результаты экспериментов представлены в таблицах 3 и 4.

Таблица 3
Влияние капсул препарата «Агсулар®» на развитие экспериментальной гиперлипидемии у крыс, индуцированной применением атерогенной диеты
Группа животных Показатели липидного обмена, ммоль/л ИА
ХС общ. ХС-ЛПВП ХС-ЛПНП ХС-ЛПОНП ТГ
Интактные животные, n=6 1,44±0,19 0,99±0,05 0,16±0,12 0,27±0,15 0,74±0,11 0,45
ГХС-диета, n=6 2,53±0,18* 0,98±0,12 0,99±0,30* 0,56±0,24** 1,34±0,38* 1,58
ГХС-диета+капсулы препарата «Агсулар®», n=6 1,59±0,08* 0,98±0,06 0,27±0,07* 0,34±0,07 0,37±0,04* 0,62
ГХС-диета + капсулы препарата «Вессел Дуэ Ф®», n=6 2,06±0,18* 1,08±0,15 0,57±0,13** 0,42±0,05 0,73±0,13* 0,94
Примечание - *р≤0,01; **р≤0.05; сравнения даны: второй группы с первой, остальных групп со второй

Капсулы препарата «Агсулар®» и капсулы препарата «Вессел Дуэ Ф®» при пероральном применении в дозах 100 мг/кг и 108 ЛЕ/кг соответственно в пересчете на действующее вещество положительно влияют на течение индуцированной атерогенной диетой гиперлипидемии у крыс, задерживая ее развитие и значимо снижая содержание общего холестерина (ХС общ.) на 37,2% и на 18,6% (р≤0,01), уровень холестерина липопротеидов низкой плотности (ХС-ЛПНП) на 72,7% и 42,4% (р≤0,05) соответственно. Кроме того, в опытной группе животных, получавших капсулы препарата «Агсулар®», наблюдается выраженный гипотриглицеридемический эффект, при котором уровень триглицеридов (ТГ) значимо (р≤0,01) снижается на 72,4% по сравнению с модельной группой животных и превосходит данный показатель в опытной группе животных, получавших капсулы препарата «Вессел Дуэ Ф®» на 26,9%.

Таблица 4
Влияние таблеток препарата «Агсулар®» на развитие экспериментальной гиперлипидемии у крыс, индуцированной применением атерогенной диеты
Группа животных Показатели липидного обмена Коэффициент атерогенности, ХС общ./ФЛ
ммоль/л г/л
ХС общ. ТГ ФЛ β-ЛП
Интактные животные, n=6 1,60±0,10 2,80±0,10 2,90±0,20 1,90±0,10 0,55±0,06
ГХС-диета, n=6 3,10±0,30* 5,00±0,40* 2,00±0,20* 4,40±0,50* 1,55±0,11*
ГХС-диета + таблетки препарата «Агсулар®», n=6 1,50±0,20* 2,30±0,20* 2,70±0,20 1,80±0,20* 0,56±0,08*
ГХС-диета + таблетки препарата «Зокор », n=6 1,30±0,20* 2,10±0,20* 3,20±0,20* 1,50±0,10* 0,41±0,03*
Примечание - * р≤0.05; сравнения даны: второй группы с первой, остальных групп со второй

Таблетки препарата «Агсулар®» и таблетки препарата «Зокор®» при пероральном применении в дозах 100 мг/кг в пересчете на действующее вещество также положительно влияют на течение индуцированной атерогенной диетой гиперлипидемии у крыс, задерживая ее развитие и значимо снижая содержание общего холестерина (ХС общ.) на 51,6% и на 58,1% (р≤0,05), уровень атерогенных липопротеидов (β-ЛП) на 40,9% и 65,9% (р≤0,05) соответственно. Также как и при применении капсул препарата «Агсулар®» в опытной группе животных, получавших таблетки препарата «Агсулар®», наблюдается выраженный гипотриглицеридемический эффект, при котором уровень триглицеридов (ТГ) значимо (р≤0,05) снижается на 54,0% по сравнению с модельной группой животных и не уступает значению данного показателя в опытной группе животных, получавших таблетки препарата «Зокор®» (58,0%).

Вскрытие экспериментальных животных, не получавших лечения, выявило жировые полоски и пятна бледно-желтого цвета на аортах. При этом гистологически определялись атеросклеротические бляшки с ксантомными клетками. В группах животных, получавших таблетки, покрытые оболочкой, и капсулы препарата «Агсулар®» морфологически аорта не отличалась от аорты интактных животных. При этом эффективность заявляемых твердых дозированных лекарственных форм не уступала эффективности препаратов сравнения.

Таким образом, таблетки, покрытые оболочкой, и капсулы препарата «Агсулар®» обладают не только гиполипидемической активностью, проявляющуюся в гипохолестеринемическом и гипотриглицеридемическом действии, но и оказывают антиатеросклеротический эффект.

В клинической практике препарат «Вессел Дуэ Ф®» применяется в качестве антикоагулянта прямого действия с антитромботическим эффектом [Казакова И.А. Применение сулодексида в терапии хронического гломерулонефрита / И.А.Казакова. // Фармация. - 2003. - №4. - С.29-32]. Как известно, гиперлипидемические состояния сопровождаются нарушением системы гемостаза крови, что приводит к тромбообразованию. Поэтому на модели экспериментальной гиперлипидемии, индуцированной применением атерогенной диеты у крыс, была изучена антикоагулянтная и антитромботическая активность твердой дозированной лекарственной формы препарата «Агсулар®» в виде капсул в сравнении с препаратом «Вессел Дуэ Ф®». Результаты исследования представлены в таблице 5.

Таблица 5
Влияние капсул препарата «Агсулар®» на коагулометрические показатели крови крыс при развитии экспериментальной гиперлипидемии, индуцированной применением атерогенной диеты
Группа животных АПТВ, с Показатели тромбоцитарного гемостаза
Er 1012 Tr 109 Агрескрин-тест, с
Интактные животные, n=6 20,67±3,49 3,50±0,56 168,67±64,16 15,83±1,68
ГХС-диета, n=6 17,83±2,92 3,37±0,47 260,50±62,93** 20,50±2,91*
ГХС-диета+капсулы препарата «Агсулар®», n=6 27,58±3,19* 3,12±0,62 219,33±41,36 29,00±12,82
ГХС-диета + капсулы препарата «Вессел Дуэ Ф®», n=6 26,83±2,14* 3,40±0,46 180,83±45,40** 38,17±14,86**
Примечание - * р≤0,01; ** р≤0,05; сравнения даны: второй группы с первой, остальных групп со второй

Достоверное увеличение времени агрегации тромбоцитов под воздействием универсального индуктора агрегации (агрескрин-тест) у животных модельной группы на 29,5% (р≤0,01) по сравнению с контролем (интактные животные) сопровождается также и достоверным увеличением общего количества тромбоцитов (Tr) на 54,4% (р≤0,05), что свидетельствует о риске развития предтромботического состояния, сопровождающегося дисфункцией тромбоцитов.

Обе исследуемые пероральные формы в виде капсул препаратов «Агсулар®» и «Вессел Дуэ Ф®» оказывают антиагрегантное действие: удлиняется время развития агрегации тромбоцитов на 83,2% и 141,1% по сравнению с контролем (интактные животные) соответственно. При этом наблюдается снижение уровня тромбоцитов на 15,9% (капсулы препарата «Агсулар®») и на 30,6% (капсулы препарата «Вессел Дуэ Ф®») по сравнению с уровнем тромбоцитов в гиперлипидемической крови животных модельной группы.

При этом капсулы препарата «Агсулар®» оказывают выраженное антикоагулянтное действие при пероральном применении, так снижение свертываемости крови по тесту АПТВ (активированное парциальное тромбопластиновое время) достигает 54,68% (р≤0,01) по сравнению с этим показателем в модельной группе животных, то есть вызывает "терапевтическую" гипокоагуляцию плазмы крови (увеличение показателя АПТВ в 1,5 раза). Аналогичный эффект наблюдали и при применении капсул препарата «Вессел Дуэ Ф®»: снижение свертываемости крови по тесту АПТВ достигает 50,48% (р≤0,01) по сравнению с этим показателем в модельной группе животных, то есть вызывает "терапевтическую" гипокоагуляции плазмы крови (увеличение показателя АПТВ в 1,5 раза).

Таким образом, в результате проведенного эксперимента было выявлено положительное влияние капсул препарата «Агсулар®» для перорального применения на показатели гемостаза крови при индуцированной гиперлипидемии у крыс, сопоставимое с влиянием капсул препарата «Вессел Дуэ Ф®», проявляющееся в виде антикоагулянтного действия с антитромботическим эффектом.

1. Средство для профилактики и лечения атеросклеротического повреждения кровеносных сосудов, а также пред- и тромботических состояний, обладающее гиполипидемическим и антикоагулянтным и антитромботическим действиями, выполненное в дозированной лекарственной форме в виде таблеток, покрытых оболочкой, состоящих из ядра, содержащего активное действующее вещество и вспомогательные вещества, отличающееся тем, что ядро содержит в качестве активного действующего начала субстанцию калиевой соли сульфатированного арабиногалактана, а в качестве вспомогательных веществ лудипресс, аэросил и кальций стеариновокислый при следующем содержании компонентов, мас.%:

Калиевая соль сульфатированного арабиногалактана 47,0-62,0
Лудипресс 30,0-47,5
Аэросил 4,0-6,2
Кальций стеариновокислый 1,0;

и покрыто защитной оболочкой, включающей этилцеллюлозу, лаурилсульфат и цетиловый спирт, предохраняющей действующую субстанцию, входящую в состав таблетки от влажности, массовая доля защитной оболочки составляет 1-2% от массы таблетки.

2. Средство по п.1, отличающееся тем, что защитная оболочка растворяется в желудке и содержит этилцеллюлозу, лаурилсульфат и цетиловый спирт при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Этилцеллюлоза 24,5-29
Лаурилсульфат 0,9-1,7
Цетиловый спирт 1,7-3,3

3. Средство для профилактики и лечения атеросклеротического повреждения кровеносных сосудов, а также пред- и тромботических состояний, обладающее гиполипидемическим и антикоагулянтным и антитромботическим действиями, выполненное в дозированной лекарственной форме в виде капсул, капсульная смесь в которых содержит активное действующее вещество и вспомогательные вещества, отличающееся тем, что в качестве активного действующего начала используется субстанция калиевой соли сульфатированного арабиногалактана, а в качестве вспомогательных веществ - лудипресс, аэросил и кальций стеариновокислый при следующем содержании компонентов, мас.%:

Калиевая соль сульфатированного арабиногалактана 47,0-83,0
Лудипресс 13,0-47,5
Аэросил 3,0-7,5
Кальций стеариновокислый 0,5-1,0,

и капсульная смесь помещена в твердые желатиновые капсулы №1-00.

4. Применение средств по п.1 или п.3, содержащих субстанцию калиевой соли сульфатированного арабиногалактана, для получения лекарственных средств для профилактики и лечения атеросклеротического повреждения кровеносных сосудов, а также пред- и тромботических состояний, где унифицированная доза субстанции калиевой соли сульфатированного арабиногалактана составляет от 250-500 мг и суточная доза составляет от 500 до 1000 мг.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а конкретнее к фармацевтической промышленности, производящей лекарственные средства, и может быть использовано для восстановления функций головного мозга.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для изучения возможности коррекции ишемии. .
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и может быть использовано для лечения вертебрально-базилярной недостаточности. .
Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и касается лечения хронической обструктивной болезни легких с бронхоэктазами. .

Изобретение относится к ветеринарии и биологии, а именно к гематологии и ангиологии. .

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, и касается иммунокоррекции у больных эссенциальной артериальной гипертензией. .

Изобретение относится к медицине и фармацевтической промышленности, а именно к комбинации Клопидогреля и Этилметилгидроксипиридина. .

Изобретение относится к соединениям формулы 1, обладающим свойствами ингибитора фактора Ха, их фармацевтически приемлемым солям и фармацевтическим композициям на их основе.
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в кардиохирургии, а именно при лечении больных с патологией трикуспидального клапана. .

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для введения противосвертывающей системы субъекту, где система включает аптамер, который связывает фактор IX/IXa, и антидот, который связывает аптамер.

Изобретение относится к области органической химии, к новым биологически активным веществам класса 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноатов гетериламмония, а именно к 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-хлорфенил)-2-бутеноату тиазолинаммония (1) формулы обладающему антикоагулянтной активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве антикоагулянтного средства.

Изобретение относится к медицине и фармацевтической промышленности, а именно к комбинации Клопидогреля и Этилметилгидроксипиридина. .

Изобретение относится к циклогексиламмониевой соли [3-метил-1-н-пропил-7-(1-оксотиетанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты формулы Технический результат - получено и описано новое соединение, которое может найти применение в медицине в качестве антиагрегационного и антикоагуляционного средства.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармацевтической химии и фармакологии, и может быть использовано для создания новых лекарственных средств, обладающих проагрегантной активностью.

Изобретение относится к области фармацевтики и органической химии и касается применения соединений формулы (I) для получения лекарственных средств для профилактики, вторичного предупреждения и лечения одного или нескольких заболеваний, которые сопровождаются тромбозами, эмболией, гиперсвертываемостью или фиброзными изменениями, а также новых соединений формулы (I).
Изобретение относится к области медицины и фармации и представляет собой фармацевтическую композицию, обладающую венотонизирующим, ранозаживляющим, противовоспалительным действием, содержащую терапевтически эффективное количество гепарина натрия в сочетании с троксерутином и декспантенолом, в качестве вспомогательных веществ пропиленгликоль, трометамол, консервант и воду очищенную, отличающаяся тем, что дополнительно содержит УФ-фильтр Escalol 567, кремнийорганический эластомер DC 9045, кремнийорганический эмульгатор DC 5329, Циклометикон DC 345, антиоксидант Tinogard NOA, акрилатную эмульсию сополимера Salcare SC80, а в качестве консерванта используется Sharomix MC,I, причем компоненты в композиции находятся в определенном соотношении в мас.%.

Изобретение относится к 5-(4 -гидроксифенил)- и 5-(2 ,5 -дигидроксифенил)-6Н-1,3,4-тиадиазин-2-аминам, гидрогалогенидам общей формул (I) и (II), ингибирующим агрегацию тромбоцитов при внутривенном введении NR1R1=морфолино-; тиоморфолино-; пирролидино-; пиперидино-; гексаметиленимино-, HHal-HCl; HBr.
Наверх