Интерферониндуцирующее средство для лечения острых респираторных вирусных инфекций (орви)

Изобретение относится к медицине и к фармакологии, а именно к лекарственному средству, индуцирующему альфа- и бета-интерферон, и может быть использовано для лечения острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ). Средство представляет собой гидрохлорид 5-гидрокси-4-диметиламинометил-1-циклогексил-2-метил-3-этилоксикарбонилиндол. Изобретение обеспечивает расширение его противовирусного действия. 13 табл.

 

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии и созданию лекарственных средств, обладающих интерфероногенным действием, и может быть использовано для лечения острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ).

ОРВИ является самым распространенным инфекционным заболеванием в развитых странах. Взрослый болеет ОРВИ не реже 2-3 раз в год, в дошкольном возрасте дети болеют ОРВИ 6-12 раз в год (Г.З.Пискунов, С.З. Пискунов, Клиническая ринология, М., 2006, стр.181). В России на ОРВИ, включая грипп, ежегодно приходится до 90% от всей регистрируемой инфекционной заболеваемости. По данным Минздравсоцразвития РФ в 2004 г. экономические потери от этой группы заболеваний составили 86% от всего ущерба, наносимого инфекционными болезнями. ОРВИ вызывается большим числом возбудителей, среди которых не менее 7 различных групп вирусов. Наиболее частыми возбудителями ОРВИ является вирус гриппа, парагриппа, аденовирусы, респираторно-синцитиальный вирус, риновирусы, реовирусы, пикорнавирусы. Против большинства возбудителей ОРВИ в настоящее время не разработаны химиопрепараты. Большое количество вирусных агентов, вызывающих ОРВИ, и достаточно высокая к ним восприимчивость способствуют возникновению смешанной инфекции. Поскольку дифференциальная диагностика вирусной инфекции хотя и возможна, но затруднена, для лечения ОРВИ рекомендуют использовать в первые часы заболевания препараты интерферона, которые эффективны в отношении всех вирусов-возбудителей ОРВИ, не зависимо от вида. Профилактическая эффективность интраназального применения интерферона достаточно убедительно доказана и подтверждена результатами мета-анализа (Jefferson Т.О., Tyrrell D., Antivirals for the common cold. The Cochrane Database of Systematic Reviews, 2005, Issue 3. Available at: http://www.cochrane.org/reviews/en/pkl67000032810144047.html). Однако применение экзогенного интерферона с лечебной целью имеет низкую эффективность действия, возможно, вследствие низкой его концентрации в растворе (Г.З.Пискунов, С.З.Пискунов, Клиническая ринология, М., 2006, стр.218). Поскольку в патогенезе ОРВИ самым важным звеном являются изменения в месте входных ворот инфекции (слизистая оболочка носа), то вполне оправдано местное интраназальное применение препарата. Недостатком интраназально вводимых препаратов человеческого лейкоцитарного интерферона является высокая частота нежелательных реакции: кровянистые выделения из носа, гриппоподобные симптомы, сонливость, аллергические реакции и другие. Перспективным направлением в терапии больных гриппом является использование препаратов, которые стимулируют продукцию собственных эндогенных интерферонов, т.е. индукторов интерферонов. Применение индукторов интерферонов не требует многократного введения, они не обладают антигенностью, у них отсутствуют побочные эффекты, свойственные препаратам интерферонов (В.П.Малый, М.Г.Романцов, Ю.В.Сологуб, Грипп, Пособие для врачей, с.61, Санкт-Петербург-Харьков, 2007 г.). Кроме того, с помощью индукторов интерферонов можно добиться стимулирования образования собственных интерферонов в организме человека в таких концентрациях, которые обладают высокой противовирусной активностью.

Авторами настоящего изобретения установлено, что соединение гидрохлорид 5-гидрокси-4-диметиламинометил-1-циклогексил-2-метил-3-этилоксикарбонилиндол (далее препарат) обладает противовирусной активностью в отношении вирусов гриппа А. Указанный препарат имеет следующую структуру:

Целью настоящего изобретения является расширение применимости препарата путем распространения его противовирусного действия на другие вирусы - возбудители ОРВИ. Поставленная цель достигается тем, что обнаруженная у препарата способность индуцировать интерфероны ά и β, позволяет его использовать для лечения ОРВИ не зависимо от вируса, вызвавшего данное заболевание. При этом имея в виду, что вирус гриппа является наиболее частой причиной ОРВИ, в большинстве случаев заболевания препарат будет оказывать двойное лечебное действие: как химиотерапевтический препарат и как индуктор интерферона. В тех случаях, когда причиной ОРВИ будут другие вирусы, лечебный эффект будет достигаться за счет эндогеннообразующегося интерферона.

Для доказательства интерферониндуцирующей активности препарата были проведены эксперименты по определению уровней γ-, ά- и β-интерферонов в крови мышей, которым вводили препарат в двух дозах. В качестве препарата сравнения был использован арбидол, который, как было установлено ранее, обладает противовирусной и интерферониндуцирующей активностью (патент №2033157. Опубликовано 20.04.1995. «Средство, обладающее интерферониндуцирующей и иммуномодулирующей (иммуностимулирующей) активностью»). Определение различных типов интерферонов проведено с помощью метода ИФА.

Пример 1. Определение γ-интерферона

Все эксперименты в данном исследовании выполнены на мышах-самцах F1(CBAxC57BL)6 массой 22-24 г. Животные были разделены на 13 групп (12 опытных и 1 контрольную). В качестве контроля использованы интактные мыши. Препаратом сравнения служил арбидол. Препарат изучали в двух дозах (90 и 180 мг/кг). На каждую точку наблюдения использовано по 10 мышей. Препараты, приготовленные на 1%-ном крахмальном геле, вводили однократно по 0,2 мл, внутрижелудочно. Уровень γ-интерферона в сыворотке крови изучали в сроки через 16, 24 и 48 ч после введения препаратов. Кровь забирали под нембуталовым наркозом (60 мг/кг) из сердца, полученные образцы крови оставляли на 2 ч при комнатной температуре для свертывания. Сыворотку крови отделяли центрифугированием, замораживали и хранили при -20°С вплоть до проведения иммуноферментной реакции. Для определения концентрации интерферона использован коммерческий набор реагентов производства фирмы «R&D» Иммуноферментную реакцию проводили в пулированной сыворотке (две мыши/пул). Разведенный стандарт и испытуемые образцы вносили на планшеты в дубликатах. Оценка содержания γ-интерферона проводилась в соответствии с инструкцией фирмы-производителя набора. Использованный набор ИФА имел предел чувствительности 2 пг/мл.

Показатели концентрации интерферона в сыворотке крови анализировали статистически: рассчитывали М±m. Различия между сравниваемыми группами оценивали с помощью t-критерия Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. Как показало проведенное исследование, препарат не обладает γ-интерферониндуцирующей активностью. Незначительные концентрации γ-интерферона, близкие к уровню минимально выявляемой концентрации, в данной тест-системе зафиксированы во все сроки исследования в тестируемых образцах сывороток от животных, получавших препарат в двух дозах (Табл. 1, 2). Статистически значимых различий по концентрации γ-интерферона в этих группах не выявлено. Во всех остальных обследованных образцах сывороток (с введением препарата сравнения арбидола и группы биоконтроля) уровень γ-интерферона был ниже возможности их выявления. Концентрация γ-интерферона оставалась ниже предала чувствительности используемого набора ИФА (Табл. 3, 4).

Табл.1
Концентрация γ-интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата в дозе 90 мг/кг
ЧЕРЕЗ
16 час 24 час 48 час
Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m
1,46±0,198 1,24±0,211 1,07±0,179
Табл.2
Концентрация γ-интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата в дозе 180 мг/кг
ЧЕРЕЗ
16 час 24 час 48 час
Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m
1,94±0,261 1,66±0,146 1,84±0,336
Табл.3
Концентрация γ-интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата арбидола в дозе 90 мг/кг
ЧЕРЕЗ
16 час 24 час 48 час
Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m
0,352 1,346 0
Табл.4
Концентрация γ-интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата арбидола в дозе 180 мг/кг
ЧЕРЕЗ
16 час 24 час 48 час
Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m
0 0 0

В сыворотках интактных мышей γ-интерферон не определяется.

Таким образом, на основании полученных результатов можно заключить, что препарат обладает крайне низкой γ-интерферониндуцирующей способностью. Препарат сравнения арбидол также не является индуктором γ-интерферона.

Пример 2. Определение ά-интерферона. Условия эксперимента описаны в примере 1.

Результаты исследования ά-интерферона в сыворотке мышей, получавших препарат

Результаты определения ά-интерферона в сыворотках мышей после введения им препарата и Арбидола в различные сроки после введения препарата приведены в Таблицах 5-8.

Как показало проведенное исследование, препарат индуцирует образование ά-интерферона в количествах, сопоставимых с продукцией ά-интерферона препаратом сравнения Арбидолом.

Табл.5
Концентрация ά-интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата в дозе 90 мг/кг
ЧЕРЕЗ
16 час 24 час 48 час
Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m
35,13±3,01 41,52±2,89 17,86±1,45
Табл.6
Концентрация ά-интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата в дозе 180 мг/кг
ЧЕРЕЗ
16 час 24 час 48 час
Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m
36,39±2,79 41,88±2,74 24,45±2,03
Табл.7
Концентрация ά-интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата арбидола в дозе 90 мг/кг
ЧЕРЕЗ
16 час 24 час 48 час
Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, M±m
38,41±2,87 45,54±3,25 26,13±2,44
Табл.8
Концентрация ά-интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата арбидола в дозе 180 мг/кг
ЧЕРЕЗ
16 час 24 час 48 час
Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m
39,21±3,20 47,14±3,71 21,13±2,11

Таким образом, представленные результаты свидетельствуют о том, что препарат, введенный per os, индуцирует образование ά-интерферона в организме мышей. Эффект характеризуется некоторой дозной зависимостью.

Пример 3. Определение β-интерферона. Условия эксперимента описаны в примере 1.

Результаты исследования β-интерферона в сыворотках мышей, получавших препарат

Как свидетельствуют результаты, представленные в Табл.9-12, препарат является эффективным индуктором β-интерферона, который по своей интерферониндуцирующей активности сопоставим с активностью препарата сравнения Арбидолом.

Табл.9
Концентрация β-интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата в дозе 90 мг/кг
ЧЕРЕЗ
16 час 24 час 48 час
Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m
28,25±2,54 40,60±2,52 16,89±0,98
Табл.10
Концентрация β-интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата в дозе 180 мг/кг
ЧЕРЕЗ
16 час 24 час 48 час
Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m
20,91±2,77 33,05±3,59 5,65±1,23
Taбл.11
Концентрация β-интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата арбидола в дозе 90 мг/кг
ЧЕРЕЗ
16 час 24 час 48 час
Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m Кол-во, пг/мл, М±m
27,75±2,70 44,82±3,02 18,31±2,12
Табл.12
Концентрация β-интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата арбидола в дозе 180 мг/кг
ЧЕРЕЗ
16 час 24 час 48 час
Кол-во Кол-во Кол-во
пг/мл пг/мл пг/мл
М±m М±m М±m
0 0 0
Табл.13
Противовирусная активность арбидола и заявляемого препарата в культуре клеток Нер-2 в отношении респираторно-синцитиального вируса штамма Long
Концентрация, мкг/мл Процент защиты (%) клеток от вирусной инфекции
арбидол заявляемый препарат
5 66 0,48
7,5 100 0,94
10 100 100
20 Токсическое действие на клетки 100

Таким образом, результаты представленных экспериментов свидетельствуют о том, что препарат не индуцирует образование γ-интерферона, но является эффективным индуктором ά- и β-интерферонов. По интерферониндуцирующей способности препарат не уступает препарату сравнения Арбидолу.

Средство, индуцирующее альфа и бета интерферон, для лечения острых респираторных вирусных инфекций, представляющее собой гидрохлорид 5-гидрокси-4-диметиламинометил-1-циклогексил-2-метил-3-этилоксикарбонилиндол следующей структурной формулы:



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к биологически активным пептидным комплексам с иммуномодулирующей и противовирусной активностью. .

Изобретение относится к новым химическим соединениям класса А-секотритерпеноидов. .

Изобретение относится к соединению, представляющему собой ковалентный конъюгат интерферона с производным N-оксида политриэтилендиамина, и может использоваться для приготовления препаратов противовирусного действия, обладающих противовирусной и иммунотропной активностью.

Изобретение относится к обогащенному дейтерием -кетоамидосоединению формулы(I) где D означает атом дейтерия; значения R1-R5 представлены в п.1 формулы, и к фармацевтической композиции на его основе.

Изобретение относится к новому клатратному комплексу (соединению включения) -циклодекстрина с производным 5-гидрокси-4-аминометил-1-циклогексил(или циклогептил)-3-алкоксикарбонилиндола: -циклодекстрин от 1:1 до 1:5, предпочтительно, при соотношения от 1:1 до 1:3.
Изобретение относится к области биотехнологии и касается изготовления и применения вакцины для специфической профилактики трансмиссивного гастроэнтерита свиней.

Изобретение относится к медицине и предназначено для лечения миелопролиферативных заболеваний. .

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной биологии, экологии и токсикологии, и может быть использовано при исследовании методов профилактики хронического токсического действия тяжелых металлов, в частности кобальта, на функциональное состояние печени.
Изобретение относится к медицине, а именно к анестезиологии и интенсивной терапии, и может быть использовано у пациентов, в том числе находящихся на искусственной вентиляции легких.

Изобретение относится к медицине, а именно к защитным композициям от ишемии/реперфузии, содержащим по меньшей мере одно кетоновое тело, выбранное из -гидроксибутирата, ацетоацетата и их фармацевтически приемлемых солей и мелатонина.
Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии и кардиологии, и касается лечения метаболического синдрома. .

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для профилактики и лечения последствий ишемического воздействия на печень в условиях временного ее выключения из кровообращения.

Изобретение относится к медицине, а именно к токсикологии и кардиологии, и касается профилактики хронической токсической артериальной гипертонии и кардиопатии у экспериментальных животных.
Изобретение относится к области медицины и касается новой фармацевтической композиции для лечения язвенной болезни желудка (ЯБЖ) и 12-перстной кишки (ЯБДК). .
Изобретение относится к области медицины и касается новой фармацевтической композиции для лечения и/или профилактики артериальной гипертензии. .

Изобретение относится к новым соединениям формулы (VI): или его фармацевтически приемлемым солям; где n равно 0, 1, 2 или 3; R1 означает-ОН, Н; R2a означает ОН, -СН3, при условии, что по меньшей мере один из R1 и R2a является -OH; R3 означает Cl, Br, циклопропил, разветвленный C3-5алкил; R4a означает Н; R8 означает Н; где фрагмент: может быть одной из групп В8, В35, В36, В37, В38, В39, В40, В41, В42, В43, В45, В46, В48, В54, В56, В58, В59, В61, В62, В71, В72, В74, В75, В76, В77, В78, В79, В80, В81, В82, В84, В86, В87, В88, В89, В90, В91, В93, В94, В95, В96, В97, В98, В99, В100 и В101, где значения раскрыты в пункте 1 формулы.

Изобретение относится к медицине и к фармакологии, а именно к лекарственному средству, индуцирующему альфа- и бета-интерферон, и может быть использовано для лечения острых респираторных вирусных инфекций

Наверх