Способ получения композиции полимерных мицелл, содержащей лекарство, слаборастворимое в воде

Способ получения композиции полимерных мицелл, содержащей лекарство, включает: растворение слаборастворимого в воде лекарства и амфифильного блоксополимера в органическом растворителе и добавление к полученной смеси в органическом растворителе водного раствора с образованием полимерных мицелл. Способ не требует проведения отдельной операции удаления органического растворителя перед образованием мицелл. Способ является простым, сокращает технологическое время и поддается масштабированию. Полимерные мицеллы согласно способу по изобретению сохраняют свою стабильность. 13 з.п. ф-лы, 9 табл., 6 пр.

 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Данное раскрытие относится к способу получения композиции полимерных мицелл, содержащей лекарство.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Субмикронные системы доставки лекарственных средств с использованием биоразлагаемых полимеров исследуются применительно к целям внутривенного введения лекарств. Недавно сообщалось о том, что наноразмерные системы и полимер-мицеллярные системы на основе биоразлагаемых полимеров являются полезными технологическими системами, позволяющими модифицировать распределение in vivo лекарства, вводимого через вену, для снижения нежелательных побочных эффектов и обеспечения улучшенной эффективности. Кроме того, поскольку такие системы позволяют осуществлять направленную доставку лекарственного средства, они обеспечивают контролируемое высвобождение лекарственных средств в орган-мишень, ткань-мишень или клетку-мишень. Фактически известно, что такие системы обладают хорошей совместимостью с жидкими компонентами организма, а также улучшают растворимость слаборастворимых в воде лекарственных средств и биодоступность лекарства.

Недавно сообщалось о способе получения блоксополимерных мицелл путем химического связывания лекарства с блоксополимером, содержащим гидрофильный сегмент и гидрофобный сегмент. Блоксополимер представляет собой диблоксополимер А-В-типа, полимеризованный из гидрофильного сегмента (А) и гидрофобного сегмента (В). Такие лекарства, как адриамицин или индометацин, могут быть физически инкапсулированы внутрь ядер полимерных мицелл, образованных из блоксополимера, в результате чего блоксополимерные мицеллы могут использоваться в качестве систем доставки лекарственных средств. Однако полимерные мицеллы, образованные из блоксополимера, в случае применений in vivo вызывают множество проблем, поскольку не могут быть гидролизованы, а лишь разлагаются под действием ферментов, кроме того, они обладают плохой биосовместимостью, вызывая иммунные реакции или тому подобное.

Вследствие этого было предпринято множество попыток усовершенствования систем доставки лекарственных средств типа ядро-оболочка, обладающих улучшенной биоразлагаемостью и биосовместимостью.

Например, специалистам в данной области техники известно о диблок- или мультиблоксополимерах, содержащих полиалкиленгликоль в качестве гидрофильного полимера и полимолочную кислоту в качестве гидрофобного полимера. В частности, производные акриловой кислоты прикрепляют к концевым группам таких диблок- или мультиблоксополимеров с образованием сополимеров. Образующиеся в результате сополимеры сшивают для стабилизации полимерных мицелл.

Однако способы получения таких диблок- или мультиблоксополимеров осложняются введением сшивающих агентов в гидрофобные сегменты диблок- или триблоксополимеров А-В или А-В-А типа для того, чтобы полимеры приобретали устойчивые структуры через посредство сшивания. Кроме того, невозможно гарантировать безопасность сшивающих агентов, используемых в упомянутых выше способах, для организма человека ввиду отсутствия примеров использования сшивающих агентов в организме человека. Помимо прочего, сшитые полимеры не могут разлагаться in vivo и, следовательно, они не подходят для использования in vivo.

В дополнение к вышесказанному, известные способы приготовления композиции полимерных мицелл включают процесс эмульгирования, процесс диализа и процесс испарения растворителя. Процесс эмульгирования включает растворение полимолочной кислоты в несмешивающемся с водой растворителе, добавление в полимерный раствор лекарственного средства таким образом, чтобы лекарство полностью растворилось в нем, последующее добавление туда поверхностно-активного соединения с образованием эмульсии типа масло-в-воде и постепенное упаривание эмульсии в вакууме. Поскольку процесс эмульгирования требует наличия оборудования для формирования эмульсии, подбор производственных условий является трудной и сложной задачей. Кроме того, поскольку процесс эмульгирования включает упаривание органического растворителя, для его проведения требуется длительное технологическое время. Что касается процесса диализа, то он требует расхода значительного количества воды и нуждается в продолжительном технологическом времени. Кроме того, для процесса испарения растворителя требуется наличия оборудования, такого как роторный вакуумный испаритель, для удаления растворителя, причем для полного удаления растворителя необходим длительный период времени. При этом процесс испарения растворителя по существу включает операцию подвергания реагентов действию высокой температуры в течение длительного времени и, таким образом, может привести к таким проблемам, как разложение фармацевтически активных ингредиентов или снижение фармакологического действия.

РАСКРЫТИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Техническая проблема

Предложен способ получения композиции полимерных мицелл, содержащей лекарство.

Техническое решение

В данном изобретении раскрыт способ получения композиции полимерных мицелл, содержащей лекарство, включающий: растворение лекарства и амфифильного блоксополимера в органическом растворителе и добавление к полученной смеси в органическом растворителе водного раствора с образованием полимерных мицелл, отличающийся тем, что способ не требует проведения отдельной операции удаления органического растворителя перед образованием мицелл.

Полезные эффекты

Способ получения композиции полимерных мицелл, содержащей лекарство, раскрытый здесь, является простым, позволяет сократить технологическое время и поддается масштабированию. Кроме того, способ позволяет получить композицию полимерных мицелл, содержащую лекарство, при низкой температуре либо при комнатной температуре, тем самым улучшая стабильность агента.

Осуществление изобретения

Ниже более подробно будут описаны примеры осуществления со ссылкой на таблицы, в которых представлены примеры осуществления. Тем не менее, данное раскрытие может быть воплощено в большом количестве различных форм и его не следует считать ограниченным примерами осуществления, изложенными в данном контексте. Точнее, эти примеры осуществления представлены для того, чтобы данное раскрытие было полным и исчерпывающим, и будут в полной мере отражать объем данного раскрытия для специалистов в данной области техники. При описании детали хорошо известных элементов и операций могут быть опущены во избежание излишнего перегруза представленных вариантов осуществления.

Терминология, использованная в данном контексте, подходит исключительно для описания конкретных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения данного раскрытия. При использовании в данном контексте, формы единственного числа включают также и формы множественного числа, если в контексте не указано иное. Кроме того, использование единственного числа не указывает на ограничение количества, а скорее, означает наличие по меньшей мере одного из упоминаемых элементов. Далее будет подразумеваться, что термины "содержит" и/или "содержащий", или "включает" и/или "включающий", при использовании в данном описании, определяют присутствие установленных особенностей, диапазонов, целых чисел, стадий, операций, элементов и/или компонентов, но не исключают наличия или добавления одного или нескольких других особенностей, диапазонов, целых чисел, стадий, операций, элементов, компонентов и/или групп этого.

Если не оговаривается иное, все термины (включая технические и научные термины), используемые здесь, имеют то же значение, которое обычно подразумевается специалистами в данной области техники. Кроме того, подразумевается, что термины, например термины, определяемые в широко используемых словарях, следует интерпретировать как имеющие значение, соответствующее их значению в контексте соответствующей области техники и настоящего раскрытия и их нежелательно интерпретировать в идеализированном или излишне формальном смысле, если здесь не указано иное.

Согласно одному из аспектов, предложен способ получения композиции полимерных мицелл, содержащей лекарство, включающий:

- растворение слаборастворимого в воде лекарства и амфифильного блоксополимера в органическом растворителе;

- добавление к полученной смеси в органическом растворителе водного раствора с образованием полимерных мицелл,

отличающийся тем, что этот способ не требует проведения отдельной операции удаления органического растворителя перед образованием мицелл.

В частности, согласно способу получения композиции полимерных мицелл, содержащей лекарство, раскрытому здесь, лекарство и полимер растворяют в органическом растворителе, в особенности, в смешивающемся с водой органическом растворителе, и затем добавляют в него водный раствор с образованием полимерных мицелл в смеси органический растворитель/вода. Таким образом, композиция полимерных мицелл, получаемая с помощью способа, раскрытого здесь, включает лекарство и амфифильный блоксополимер. Кроме того, способ не требует проведения отдельной операции удаления органического растворителя, используемого для приготовления полимерных мицелл, перед образованием мицелл.

Присутствие органического растворителя в мицеллярном растворе во время образования мицелл способствует деассоциации мицелл благодаря высокому сродству гидрофобной части мицелл амфифильных полимеров к органическому растворителю, тем самым ускоряя осаждение гидрофобных молекул лекарства. По этой причине способы получения полимерных мицелл, известные на сегодняшний день, включают растворение лекарства и амфифильного полимера в органическом растворителе, удаление органического растворителя и добавление водного раствора для образования мицелл. Однако при таких способах необходимо длительное технологическое время для удаления органического растворителя, а также дополнительное оборудование, такое как вакуумный дистиллятор. Кроме того, органический растворитель может частично оставаться в реакционной системе даже после его удаления. При этом лекарство, будучи подвергнутым длительному воздействию высоких температур во время удаления органического растворителя, может разлагаться.

Согласно одному из вариантов осуществления способа, раскрытого здесь, мицеллы могут образовываться при низкой температуре, вместо удаления органического растворителя при высокой температуре во время образования мицелл. Как правило, при нагревании полимерных мицелл ассоциированные амфифильные полимеры подвергаются деассоциации, так как мономер амфифильного полимера приобретает повышенную кинетическую энергию. В результате гидрофобные молекулы лекарства, находящиеся в гидрофобном ядре мицелл, легко контактируют с водной фазой, тем самым приводя к образованию и осаждению кристаллов лекарства. Напротив, для способа, раскрытого здесь, не требуется проведения отдельной операции испарения растворителя перед образованием мицелл, что упрощает весь процесс в целом и предотвращает разложение лекарственного средства. Более того, способ, раскрытый в данном контексте, осуществляют при низкой температуре, так что образующиеся в результате полимерные мицеллы сохраняют свою стабильность.

Даже притом что органический растворитель не удален, но присутствует в определенной концентрации или выше, как в способе, раскрытом здесь, образование мицелл при поддержании низкой температуры может предотвратить осаждение лекарства. Причина заключается в том, что молекулы амфифильного полимера и органического растворителя при столь низкой температуре обладают уменьшенной динамической энергией и, следовательно, лекарство, присутствующее в гидрофобном сегменте амфифильных полимерных мицелл, не может свободно подвергаться воздействию водной фазы.

Согласно одному из вариантов осуществления, полимерные мицеллы образуют путем добавления водного раствора в смесь лекарство/амфифильный полимер в органическом растворителе при температуре 0-60°С, в особенности 0-50°С, в частности 0-40°С.

Согласно другому варианту осуществления, хотя нет никакого конкретного ограничения в конкретном типе лекарственного средства, инкапсулированного внутрь мицеллярных структур амфифильного блоксополимера, лекарство может быть лекарством, слаборастворимым в воде. Например, лекарство может быть лекарством, слаборастворимым в воде и имеющим растворимость в воде 100 мг/мл или менее. Вследствие этого целью способа, раскрытого здесь, является обеспечение композиции, предназначенной для введения лекарства, слаборастворимого в воде, в организм человека путем инкапсулирования лекарства внутрь мицеллярных структур.

Согласно еще одному варианту осуществления, слаборастворимое в воде лекарство может быть выбрано из противоопухолевых агентов. В частности, слаборастворимое в воде лекарство может быть выбрано из противоопухолевых агентов таксановой группы. Частные примеры противоопухолевых агентов таксановой группы могут включать паклитаксел, доцетаксел, 7-эпипаклитаксел, т-ацетилпаклитаксел, 10-дезацетил-паклитаксел, 10-дезацетил-7-эпипаклитаксел, 7-ксилозилпаклитаксел, 10-дезацетил-7-глутарилпаклитаксел, 7-N,N-диметилглицилпаклитаксел, 7-L-аланилпаклитаксел или их смесь. В частности, противоопухолевый агент таксановой группы может быть паклитакселом или доцетакселом.

Согласно одному из вариантов осуществления способа, амфифильный блоксополимер включает диблоксополимер, имеющий гидрофильный блок (А) и гидрофобный блок (В), связанные друг с другом в форме А-В-структуры, и является неионным. Кроме того, амфифильный блоксополимер образует полимерные мицеллы типа ядро-оболочка в водной среде, где гидрофобный блок (В) образует ядро, а гидрофильный блок (А) образует оболочку.

Согласно другому варианту осуществления способа, гидрофильный блок (А) амфифильного блоксополимера представляет собой водорастворимый полимер и включает по меньшей мере один полимер, выбранный из группы, состоящей из полиалкиленгликоля, поливинилового спирта, поливинилпирролидона, полиакриламида и их производных. В особенности, гидрофильный блок (А) может быть по меньшей мере одним блоком, выбранным из группы, состоящей из полиалкиленгликоля, монометоксиполиалкиленгликоля, моноацетоксиполиалкиленгликоля, сополимера полиэтилена и пропиленгликоля и поливинилпирролидона. В частности, гидрофильный блок (А) может быть по меньшей мере одним блоком, выбранным из группы, состоящей из полиэтиленгликоля, монометоксиполиэтиленгликоля, моноацетоксиполиэтиленгликоля и сополимера полиэтилена и пропиленгликоля.

Гидрофильный блок (А) может иметь среднечисленную молекулярную массу 500-50000 дальтон, в особенности 1000-20000 дальтон, в частности 1000-10000 дальтон.

Гидрофобный блок (В) амфифильного блоксополимера нерастворим в воде и может быть биоразлагаемым полимером с высокой биосовместимостью. Например, гидрофобный блок (В) может быть по меньшей мере одним блоком, выбранным из группы, состоящей из полиэфира, полиангидрида, полиаминокислоты, полиортоэфира, полифосфазина и их производных. В частности, гидрофобный блок (В) может быть по меньшей мере одним блоком, выбранным из группы, состоящей из полилактида, полигликолида, полиполикапролактона, полидиоксан-2-она, сополимера полимолочной кислоты и гликолида, сополимера полимолочной кислоты и диоксан-2-она, сополимера полимолочной кислоты и капролактона и сополимера полигликолевой кислоты и капролактона. Кроме того, упомянутые выше полимеры, приведенные в качестве гидрофобного блока (В), могут обеспечиваться в виде их производных, замещенных жирнокислотными группами по концевым гидроксильным группам. Жирнокислотная группа может быть по меньшей мере одной группой, выбранной из бутирата, пропионата, ацетата, стеарата, пальмитата, токоферольной группы и холестерольной группы. При этом гидрофобный блок (В) может иметь среднечисленную молекулярную массу 500-50000 дальтон, в особенности 1000-20000 дальтон, в частности 1000-10000 дальтон.

Согласно еще одному варианту осуществления, для образования стабильных полимерных мицелл в водном растворе амфифильный блоксополимер может включать гидрофильный блок (А) и гидрофобный блок (В) в весовом соотношении от 3:7 до 8:2 (гидрофильный блок (А): гидрофобный блок (В)), в особенности от 4:6 до 7:3. Если доля гидрофильного блока (А) ниже указанного выше диапазона, полимер может не образовывать полимерные мицеллы в водном растворе. С другой стороны, если доля гидрофильного блока (А) будет выше указанного диапазона, полимер может оказаться слишком гидрофильным для того, чтобы сохранять свою стабильность.

Например, органический растворитель, использованный согласно способу, представляет собой смешивающийся с водой органический растворитель и может быть по меньшей мере одним растворителем, выбранным из группы, состоящей из спирта, ацетона, тетрагидрофурана, уксусной кислоты, ацетонитрила и диоксана. В частности, спирт может быть по меньшей мере одним спиртом, выбранным из группы, состоящей из метанола, этанола, пропанола и бутанола.

Согласно еще одному варианту осуществления, хотя органический растворитель требуется для растворения полимера и лекарственного средства, органический растворитель может быть задействован в процессе в небольших количествах, поскольку его присутствие может снизить стабильность мицелл и ускорить осаждение лекарственного средства. Органический растворитель может использоваться в количестве 0,5-30 мас.%, в особенности 0,5-15 мас.%, в частности 1-10 мас.%, от общей массы композиции, из которой не удален органический растворитель. Когда органический растворитель используют в количестве менее 0,5 мас.%, могут возникнуть сложности с растворением лекарственного средства в органическом растворителе. С другой стороны, если органический растворитель используют в количестве, превышающем 30 мас.%, во время восстановления может происходить осаждение лекарства.

Слаборастворимое в воде лекарство может быть растворено в органическом растворителе последовательно или одновременно с полимером.

В способе, раскрытом здесь, лекарство и полимер могут добавляться в органический растворитель и растворяться в нем одновременно. В других случаях в органическом растворителе сначала может быть растворен полимер, а затем лекарство или наоборот. Лекарство и полимер могут быть растворены в органическом растворителе при любой температуре, при которой не происходит разложения лекарства. Температура может составлять 0-60°С, в особенности 0-50°С, в частности 0-40°С.

Частный случай осуществления способа получения композиции полимерных мицелл, содержащей лекарство, включает:

- растворение амфифильного блоксополимера в органическом растворителе;

- растворение слаборастворимого в воде лекарства в полученном полимерном растворе;

- добавление водного раствора к полученной смеси лекарства с полимером с образованием мицелл, где способ получения композиции полимерных мицелл, содержащей лекарство, не требует выполнения отдельной операции удаления органического растворителя перед образованием мицелл.

Водный раствор, использованный в способе, может включать воду, дистиллированную воду, дистиллированную воду для инъекций, физиологический раствор, 5% раствор глюкозы, буферный раствор и тому подобное.

Образование полимерных мицелл может осуществляться с помощью добавления водного раствора при температуре 0-60°С, в особенности 0-50°С, в частности 0-40°С.

Согласно еще одному варианту осуществления, в мицеллярную композицию может быть добавлена вспомогательная лиофилизирующая добавка для проведения лиофилизации после образования полимерных мицелл. Вспомогательная лиофилизирующая добавка может быть введена для того, чтобы позволить лиофилизированной композиции сохранять свою блинчатую форму. Согласно одному из вариантов лиофилизированной композиции, вспомогательная лиофилизирующая добавка может быть по меньшей мере одной добавкой, выбранной из группы, состоящей из сахара и сахарного спирта, а также их смесей. Сахар может быть по меньшей мере одним сахаром, выбранным из лактозы, мальтозы, сукрозы, трегалозы и комбинации этого. Сахарный спирт может быть по меньшей мере одним сахарным спиртом, выбранным из маннита, сорбита, мальтита, ксилита, лактита и комбинации этого.

Кроме того, вспомогательная лиофилизирующая добавка служит для того, чтобы помочь композиции полимерных мицелл гомогенно растворяться в течение короткого времени при восстановлении лиофилизированной композиции. В данном контексте вспомогательная лиофилизирующая добавка может быть использована в количестве 1-99,8 мас.%, в частности 10-60 мас.% от общей массы лиофилизированной композиции.

Согласно одному из вариантов осуществления, композиция полимерных мицелл может включать 0,1-30,0 мас.% лекарственного средства в сочетании с 70-99,9 мас.% амфифильного блоксополимера, имеющего гидрофильный блок и гидрофобный блок, от общей сухой массы композиции. Указанный выше диапазон установлен с учетом коэффициента инкапсулирования лекарства и стабильности полимерных мицелл.

Способ, раскрытый в данном контексте, является простым, сокращает технологическое время и поддается масштабированию, поскольку устранена необходимость в использовании отдельной операции удаления органического растворителя. Кроме того, способ позволяет получать композицию полимерных мицелл, содержащую лекарство, при низкой или комнатной температуре и тем самым улучшает стабильность агента.

Согласно еще одному варианту осуществления, композиция полимерных мицелл, содержащая лекарство, может также включать фармацевтические наполнители, такие как консервант, стабилизатор, гидратирующий агент или ускоритель эмульгирования, соль для регулирования осмотического давления и/или буферный раствор, а также другие терапевтически приемлемые материалы. Композиция может быть оформлена в виде композиций различного типа для перорального или парэнтерального применения с помощью способа, хорошо известного специалистам в данной области техники.

Композиции, предназначенные для парэнтерального введения, могут вводиться ректально, локально, трансдермально (чрескожно), внутривенно, внутримышечно, внутрибрюшинно, подкожно и так далее. Типичные примеры композиций для парэнтерального введения включают инъекционные композиции в форме изотонического водного раствора или суспензии. Согласно одному из примеров осуществления, композиция может быть представлена в лиофилизированной форме, подлежащей разбавлению дистиллированной водой для инъекций, 5% раствором глюкозы, физиологическим раствором и так далее, для того чтобы ее можно было вводить с помощью внутрисосудистой инъекции.

Композиции, предназначенные для перорального применения, включают таблетки, пилюли, твердые и мягкие капсулы, жидкость, суспензию, эмульсию, сироп и так далее. Такие композиции помимо активных ингредиентов могут включать разбавитель (например, лактозу, декстрозу, сукрозу, маннит, сорбит, целлюлозу и глицин), глидант (например, диоксид кремния, тальк, стеариновую кислоту и ее соли с кальцием или магнием, полиэтиленгликоль) и тому подобное. Таблетки могут включать связующие вещества, такие как алюмосиликат магния, крахмальная паста, желатин, трагакант, метилцеллюлоза, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы и поливинилпирролидон. Таблетки необязательно могут содержать фармацевтически приемлемые добавки, включающие вещества для улучшения распадаемости таблеток, такие как крахмал, агар, альгинат или его натриевая соль, абсорбенты, красители, ароматические и вкусовые добавки и подсластители. Таблетки могут быть получены с помощью традиционного способа путем смешения, гранулирования или нанесения покрытия. Кроме того, типичные примеры композиций для парэнтерального введения включают композиции для инъекций, такие как изотонические водные растворы или суспензии.

Далее будут описаны примеры и опытные исследования. Следующие примеры и опытные исследования приведены исключительно в иллюстративных целях и не предназначены для ограничения объема данного раскрытия.

Амфифильный блоксополимер, используемый в способе, раскрытом здесь, был получен в соответствии со способом, описанным в Международной патентной публикации WO 03/33592.

Примеры 1-3

Получение композиций полимерных мицелл, содержащих доцетаксел

В качестве амфифильного блоксополимера получали монометоксиполиэтиленгликоль-полилактид, имеющий среднечисленную молекулярную массу 2000-1766 дальтон. Амфифильный блоксополимер полностью растворяли при температуре 60°С в количестве, как описано в Таблице 1, и добавляли в него 0,08 мл этанола, после чего интенсивно перемешивали. Далее полученную смесь охлаждали до температуры 30°С, добавляли в нее доцетаксел и смесь перемешивали до получения прозрачного раствора, содержащего полностью растворенный в нем доцетаксел. Затем раствор охлаждали до температуры 25°С и добавляли в него 4,0 мл очищенной воды при комнатной температуре, после чего реакционную массу оставляли реагировать до образования голубоватого прозрачного раствора, получая таким образом полимерные мицеллы. Затем 100 мг D-маннита в качестве лиофилизирующего агента полностью растворяли в растворе и полученный раствор фильтровали через фильтр с размером пор 200 нм, после чего лиофилизировали и получали порошкообразную композицию полимерных мицелл, содержащую доцетаксел.

Таблица 1
Количество (мг)
Доцетаксел Амфифильный блоксополимер
Пример 1 20,0 380,0
Пример 2 20,0 265,0
Пример 3 20,0 180,0

Примеры 4-6

Получение композиций полимерных мицелл, содержащих паклитаксел

В качестве амфифильного блоксополимера получали монометоксиполиэтиленгликоль-полилактид, имеющий среднечисленную молекулярную массу 2000-1766 дальтон. Амфифильный блоксополимер полностью растворяли при температуре 80°С в количестве, как указано в Таблице 2, и добавляли в него этанол, после чего интенсивно перемешивали. Далее в смесь добавляли паклитаксел и полученную реакционную массу перемешивали до образования прозрачного раствора, содержащего полностью растворенный в нем паклитаксел. Затем раствор охлаждали до температуры 50°С и добавляли в него 5,0 мл очищенной воды при комнатной температуре и оставляли реакционную массу реагировать до образования голубоватого прозрачного раствора, получая таким образом полимерные мицеллы. Затем 100 мг безводной лактозы в качестве лиофилизирующего агента полностью растворяли в растворе и полученный раствор фильтровали через фильтр с размером пор 200 нм, после чего лиофилизировали и получали порошкообразную композицию полимерных мицелл, содержащую паклитаксел.

Таблица 2
Количество (мг)
Паклитаксел Амфифильный блоксополимер Этанол
Пример 4 30,0 570,0 95,5 (0,121 мл)
Пример 5 30,0 270,0 45,0 (0,057 мл)
Пример 6 30,0 170,0 28,4 (0,036 мл)

Сравнительный пример 1

Получение полимерных мицелл, содержащих доцетаксел, с использованием процесса испарения растворителя

Сначала обеспечивали доцетаксел и амфифильный блоксополимер в таких количествах, как описано в Примере 3. Затем к доцетакселу и амфифильному блоксополимеру прибавляли 5 мл этанола и полученную смесь перемешивали при температуре 60°С до полного растворения вещества и получения прозрачного раствора. После этого при пониженном давлении отгоняли этанол при температуре 60°С в течение 3 часов на роторном вакуумном испарителе, оборудованном круглодонной колбой. Реакционную массу охлаждали до температуры 25°С, добавляли в нее 4 мл очищенной воды при комнатной температуре и оставляли реакционную смесь реагировать до образования голубоватого прозрачного раствора, получая таким образом полимерные мицеллы. Затем к полимерным мицеллам добавляли 100 мг D-маннита в качестве лиофилизирующего агента, чтобы полностью растворить полимерные мицеллы, и полученную смесь фильтровали через фильтр с размером пор 200 нм, после чего лиофилизировали и получали порошкообразную композицию полимерных мицелл, содержащую доцетаксел.

Сравнительный пример 2

Получение полимерных мицелл, содержащих паклитаксел, с использованием процесса испарения растворителя

Сначала обеспечивали паклитаксел и амфифильный блоксополимер в количествах, как описано в Примере 6. Затем к паклитакселу и амфифильному блоксополимеру прибавляли 5 мл этанола и полученную смесь перемешивали при температуре 60°С до полного растворения вещества и получения прозрачного раствора. Затем отгоняли этанол при пониженном давлении и температуре 60°С в течение 3 часов на роторном вакуумном испарителе, оборудованном круглодонной колбой. Реакционную массу охлаждали до температуры 50°С, добавляли в нее 5 мл очищенной воды при комнатной температуре и реакционную смесь оставляли реагировать до образования голубоватого прозрачного раствора, получая таким образом полимерные мицеллы. Затем в полимерные мицеллы добавляли 100 мг безводной лактозы в качестве лиофилизирующего агента, чтобы полностью растворить полимерные мицеллы, и полученную смесь фильтровали через фильтр с размером пор 200 нм, после чего лиофилизировали и получали порошкообразную композицию полимерных мицелл, содержащую паклитаксел.

Сравнительный пример 3

Получение полимерных мицелл, содержащих доцетаксел, с использованием процесса испарения растворителя

Сначала обеспечивали доцетаксел и амфифильный блоксополимер в таких количествах, как описано в Примере 3. Затем амфифильный блоксополимер полностью растворяли при температуре 60°С и добавляли в него 5 мл зтанола, после чего интенсивно перемешивали. Полученную смесь охлаждали до температуры 30°С, добавляли в нее доцетаксел и смесь дополнительно перемешивали до получения прозрачного раствора, содержащего полностью растворенный в нем доцетаксел. Затем отгоняли этанол при пониженном давлении на роторном вакуумном испарителе, оборудованном круглодонной колбой. Реакционную массу охлаждали до температуры 25°С, добавляли в нее 4 мл очищенной воды при комнатной температуре и реакционную смесь оставляли реагировать до образования голубоватого прозрачного раствора, получая таким образом полимерные мицеллы. Затем к полимерным мицеллам добавляли 100 мг D-маннита в качестве лиофилизирующего агента, чтобы полностью растворить полимерные мицеллы, и полученную смесь фильтровали через фильтр с размером пор 200 нм, после чего лиофилизировали и получали порошкообразную композицию полимерных мицелл, содержащую доцетаксел.

Сравнительный пример 4

Получение полимерных мицелл, содержащих паклитаксел, с использованием процесса испарения растворителя

Сначала обеспечивали паклитаксел и амфифильный блоксополимер в таких количествах, как описано в Примере 6. Затем амфифильный блоксополимер полностью растворяли при температуре 80°С и добавляли в него 5 мл этанола, после чего интенсивно перемешивали. После этого в смесь добавляли паклитаксел и реакционную массу дополнительно перемешивали до образования прозрачного раствора, содержащего паклитаксел, полностью растворенный в нем. Затем отгоняли этанол при пониженном давлении на роторном вакуумном испарителе, оборудованном круглодонной колбой. Реакционную массу охлаждали до температуры 50°С, добавляли в нее 5 мл очищенной воды при комнатной температуре и оставляли реакционную смесь реагировать до образования голубоватого прозрачного раствора, получая таким образом полимерные мицеллы. Далее к полимерным мицеллам прибавляли 100 мг безводной лактозы в качестве лиофилизирующего агента, чтобы полностью растворить полимерные мицеллы, и полученную смесь фильтровали через фильтр с размером пор 200 нм, после чего лиофилизировали и получали порошкообразную композицию полимерных мицелл, содержащую паклитаксел.

Сравнительный пример 5

Получение мицелл при высокой температуре

Композицию полимерных мицелл, содержащую доцетаксел, получали, как описано в Примере 1, за исключением того, что полимерные мицеллы образовывались при поддержании температуры 70°С после добавления этанольного раствора. После этого мицеллы лиофилизировали, как описано в Примере 1, и получали лиофилизированную мицеллярную композицию.

Сравнительный пример 6

Получение мицелл при высокой температуре

Композицию полимерных мицелл, содержащую паклитаксел, получали, как описано в Примере 6, за исключением того, что полимерные мицеллы образовывались при поддержании температуры 70°С после добавления этанольного раствора. После этого мицеллы лиофилизировали, как описано в Примере 6, и получали лиофилизированную мицеллярную композицию.

Тестовый пример 1

Измерение количества инкапсулированного лекарства

Композиции полимерных мицелл, содержащие доцетаксел, в соответствии с Примерами 1-3 и Сравнительными примерами 1 и 3 подвергали ВЭЖХ, как описано в Таблице 3, для измерения концентрации доцетаксела в каждой композиции. Затем содержание лекарства (инкапсулированное количество) рассчитывали в соответствии с математической формулой 1. Результаты представлены в Таблице 4.

Таблица 3
Условие
Подвижная фаза 45% ацетонитрила/55% воды
Колонка С18, 300А внутренний диаметр 4,6 мм, длина 25 см (Phenomenex, США)
Детектируемая длина волны 227 нм
Расход 1,5 мл/мин
Температура Комнатная температура
Объем вводимой пробы 10 мкл
Таблица 4
Содержание доцетаксела (%)
Пример 1 98,7
Пример 2 101,0
Пример 3 99,6
Сравнительный пример 1 57,9
Сравнительный пример 3 99,1

Как можно видеть из приведенных выше результатов, композиции, полученные после лиофилизации без удаления органического растворителя в соответствии с Примерами 1-3, показали содержание доцетаксела приблизительно 100%. С другой стороны, лиофилизированная композиция, полученная после удаления органического растворителя при температуре 60°С в соответствии со Сравнительным примером 1, показывает содержание доцетаксела приблизительно 60%. Это свидетельствует о том, что доцетаксел разлагается в полимерных мицеллах, полученных при использовании процесса испарения растворителя в соответствии со Сравнительным примером 1, во время упаривания органического растворителя при высокой температуре.

При этом лиофилизированная композиция, полученная после удаления органического растворителя при температуре 30°С в соответствии со Сравнительным примером 3, показывает такое же содержание доцетаксела. Таким образом, можно видеть, что способ, раскрытый здесь, при сравнении со стандартным процессом с отгонкой растворителя обеспечивает такое же количество инкапсулированного лекарства, в то же время упрощая процесс в целом за счет устранения необходимости в отдельной операции удаления органического растворителя.

Тестовый пример 2

Измерение размера частиц

Композиции полимерных мицелл, содержащие паклитаксел, в соответствии с Примерами 4-6 и Сравнительными примерами 2 и 4 восстанавливали 5 мл физиологического раствора и измеряли размер частиц в каждой восстановленной композиции в водном растворе, используя анализатор размера частиц (DLS). Результаты представлены в Таблице 5.

Таблица 5
Размер частиц (нм)
Пример 4 29,9
Пример 5 30,5
Пример 6 34,3
Сравнительный пример 2 32,3
Сравнительный пример 3 32,4

Как можно видеть из приведенных выше результатов, нет существенного различия в размере частиц в водном растворе между лиофилизированными композициями, полученными без использования удаления органического растворителя в соответствии с Примерами 4-6, и лиофилизированными композициями, полученными после удаления органического растворителя в соответствии со Сравнительными примерами 2 и 4.

Тестовый пример 3

Испытание на стабильность

Композицию полимерных мицелл, содержащую паклитаксел, в соответствии с Примером 6 сравнивали с композицией полимерных мицелл, содержащей паклитаксел, в соответствии со Сравнительным примером 2 в отношении стабильности в водном растворе при температуре 37°С.

Каждую из композиций в соответствии с Примером 6 и Сравнительным примером 2 разбавляли физиологическим раствором до концентрации паклитаксела 1 мг/мл. Пока каждый из разбавленных растворов выстаивали при температуре 37°С, определяли изменение концентрации паклитаксела, содержащегося в каждой мицеллярной структуре, с течением времени методом ВЭЖХ. ВЭЖХ выполняли в условиях, описанных в Таблице 3. Результаты представлены в Таблице 6.

Таблица 6
Время (ч) Концентрация паклитаксела (мг/мл)
Пример 6 Сравнительный пример 2
0 1,00 1,00
2 1,01 0,99
4 0,99 0,99
8 0,98 0,99
12 1,00 0,98
24 0,99 0,99

Как можно видеть из приведенных выше результатов, нет существенного различия в стабильности в водном растворе в течение 24 часов между лиофилизированной композицией, полученной без использования удаления органического растворителя в соответствии с Примером 6, и лиофилизированной композицией, полученной после удаления органического растворителя в соответствии со Сравнительным примером 2.

Тестовый пример 4

Композиции полимерных мицелл, содержащие доцетаксел, в соответствии с Примером 1 и Сравнительным примером 5 сравнивали друг с другом в плане содержания доцетаксела и содержания сопутствующих примесей. Содержание доцетаксела и содержание сопутствующих примесей определяли методом ВЭЖХ в тех же условиях, что описаны в Таблицах 3 и 7, соответственно. Результаты представлены в Таблице 8.

Таблица 7
Условия
Подвижная фаза Время (мин) вода:ацетонитрил
1-15 65:35→35:65
15-25 35:65→25:75
25-30 25:75→5:95
30-35 5:95→0:100
35-39 0:100
39-40 0:100→65:35
40-45 65:35
Колонка С18, 300А внутренний диаметр 4,6 мм, длина 25 см (Phenomenex, США)
Детектируемая длина волны 230 нм
Расход 1,0 мл/мин
Температура Комнатная температура
Объем вводимой пробы 10 мкл
Таблица 8
Содержание (%)
Доцетаксел Общее содержание сопутствующих примесей
Пример 1 98,7 0,97
Сравнительный пример 3 88,9 5,44

Как можно видеть из приведенных выше результатов, высокотемпературный способ получения влечет за собой увеличение количества сопутствующих доцетакселу примесей в пять раз по сравнению с количеством тех же примесей в случае низкотемпературного способа получения, приводя к снижению содержания доцетаксела. Это означает, что высокотемпературные условия обработки вызывают разложение лекарства.

Тестовый пример 5

Композицию полимерных мицелл, содержащую паклитаксел, в соответствии с Примером 6 сравнивали с композицией полимерных мицелл, содержащей паклитаксел, в соответствии со Сравнительным примером 6 в плане содержания паклитаксела. Содержание паклитаксела определяли методом ВЭЖХ в тех же условиях, что описаны в Таблице 3. Затем содержание лекарства (инкапсулированное количество) рассчитывали в соответствии с математической формулой 2. Результаты представлены в Таблице 9.

Таблица 9
Содержание паклитаксела (%)
Пример 6 99,6
Сравнительный пример 6 59,9

Композиция полимерных мицелл, полученная путем добавления воды с образованием мицелл в присутствии органического растворителя при поддержании высокой температуры 70°С в соответствии со Сравнительным примером 6, вызывает осаждение лекарства, паклитаксела. В частности, содержание паклитаксела в Сравнительном примере 6 снижено по сравнению с содержанием паклитаксела в Примере 6 на 40% или больше.

Несмотря на показанные и описанные примеры осуществления, специалистам в данной области техники будет понятно, что различные изменения формы и деталей могут быть сделаны без отклонения от объема и сущности данного раскрытия, как определено в прилагаемой формуле изобретения.

Кроме того, может быть сделано множество изменений для применения конкретной ситуации или материала к идеям данного раскрытия без отклонения от его сущности. В связи с этим предполагается, что данное раскрытие не ограничивается частными примерами осуществления, раскрытыми в качестве наилучшего способа, предусматриваемого для осуществления данного раскрытия, но что это раскрытие будет включать все варианты осуществления, подпадающие под действие прилагаемой формулы изобретения.

1. Способ получения композиции полимерных мицелл, содержащей лекарство, включающий:
- растворение слаборастворимого в воде лекарства и амфифильного блоксополимера в органическом растворителе; и
- добавление к полученной смеси в органическом растворителе водного раствора с образованием полимерных мицелл, отличающийся тем, что способ не требует проведения отдельной операции удаления органического растворителя перед образованием мицелл.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что растворение слаборастворимого в воде лекарства и амфифильного блоксополимера в органическом растворителе включает:
- растворение амфифильного блоксополимера в органическом растворителе; и
- растворение слаборастворимого в воде лекарства в полученном полимерном растворе.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что добавление к полученной смеси в органическом растворителе водного раствора с образованием мицелл осуществляют при температуре от 0°С до 60°С.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что лекарство имеет растворимость в воде 100 мг/мл или менее.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что лекарство представляет собой противоопухолевый агент таксановой группы.

6. Способ по п.5, отличающийся тем, что противоопухолевый агент таксановой группы представляет собой по меньшей мере один агент, выбранный из группы, состоящей из паклитаксела, доцетаксела, 7-эпипаклитаксела, т-ацетилпаклитаксела, 10-дезацетилпаклитаксела, 10-дезацетил-7-эпипаклитаксела, 7-ксилозилпаклитаксела, 10-дезацетил-7-глутарилпаклитаксела, 7-N,N-диметилглицилпаклитаксела, 7-L-аланилпаклитаксела и их смеси.

7. Способ по п.1, отличающийся тем, что амфифильный блоксополимер представляет собой диблоксополимер, имеющий гидрофильный блок (А) и гидрофобный блок (В), где
гидрофильный блок (А) представляет собой по меньшей мере один блок, выбранный из группы, состоящей из полиалкиленгликоля, поливинилового спирта, поливинилпирролидона, полиакриламида и их производных, гидрофобный блок (В) представляет собой по меньшей мере один блок, выбранный из группы, состоящей из полиэфира, полиангидрида, полиаминокислоты, полиортоэфира, полифосфазина и их производных.

8. Способ по п.7, отличающийся тем, что гидрофильный блок (А) имеет среднечисленную молекулярную массу 500-50000 дальтон, а гидрофобный блок (В) имеет среднечисленную молекулярную массу 500-50000 дальтон.

9. Способ по п.7, отличающийся тем, что амфифильный блоксополимер содержит гидрофильный блок (А) и гидрофобный блок (В) в массовом соотношении (А:В) от 3:7 до 8:2.

10. Способ по п.1, отличающийся тем, что органический растворитель является по меньшей мере одним растворителем, выбранным из группы, состоящей из спирта, ацетона, тетрагидрофурана, уксусной кислоты, ацетонитрила и диоксана.

11. Способ по п.10, отличающийся тем, что спирт является по меньшей мере одним спиртом, выбранным из группы, состоящей из метанола, этанола, пропанола и бутанола.

12. Способ по п.1, отличающийся тем, что органический растворитель используют в количестве 0,5-30 мас.% от общей массы композиции.

13. Способ по п.1, дополнительно включающий проведение лиофилизации мицеллярной композиции с добавлением вспомогательной лиофилизирующей добавки в мицеллярную композицию после образования мицелл.

14. Способ по п.1, отличающийся тем, что полимерные мицеллы, содержащие лекарство, включают 0,1-30,0 мас.% лекарства и 70-99,9 мас.% амфифильного блоксополимера, имеющего гидрофильный блок и гидрофобный блок, от общей сухой массы композиции.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к химической, электронной и оптической отраслям промышленности, а именно к одностадийному способу получения стабильных наночастиц сульфида кадмия (CdS) непосредственно в среде акриловых мономеров.

Изобретение относится к нанотехнологии и может быть использовано для нанесения ультратонких люминесцентных покрытий и для получения маркеров. .

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой композицию эмульсии «масло в воде», содержащую: (А) полиоксиэтиленфитостерин, (Б) диэфир глицерина и жирной кислоты, (В) статистический сополимер полиоксиэтилен-полиоксипропилен диалкиловый эфир, (Г) жирорастворимое лекарство, (Д) масло и (Е) воду; где в эмульсионной частице эмульсионной композиции присутствует слоистая гелеобразная структура, состоящая из компонентов (А) и (Б).

Изобретение относится к области химии. .

Изобретение относится к способу получения содержащих наногель соли металла водных дисперсий. .

Изобретение относится к способу получения концентратов нанодисперсий нульвалентных металлов, таких как серебро, золото, медь, палладий, платина и ртуть, которые обладают антисептическими свойствами.

Изобретение относится к новым производным пиримидина или их фармацевтически приемлемым солям, обладающим свойствами ингибитора PLK1 киназы. .

Изобретение относится к соединениям формулы (I), где m равен 0, 1, 2; n равен 0, 1, 2, 3; каждый p, s, t равен 0 или 1; X представляет собой CHR8, где R8 представляет собой водород; представляет собой -CR9=C<, и тогда пунктирная линия представляет собой связь, R9 представляет собой независимо водород или C1-6-алкил, или где R9 вместе с одним из R2 или R20 образует прямую связь; R1 представляет собой водород; R 2 и R20 выбирают из: галогена, циано, полигалоген-С 1-6-алкила, C1-6-алкила, морфолинила, C 1-6-алкилокси, причем любая из указанных групп необязательно и независимо замещена гидрокси, NR21R22 , где R21 и R22 выбирают, каждый независимо, из водорода, C1-6-алкилкарбонила; или R2 и R20 вместе с фенильным циклом, к которому они присоединены, образуют нафталинильную группу; или один из R2 или R20 имеет значения, указанные выше, а другой из R 2 или R20 вместе с R9 образует прямую связь; R3 представляет собой водород; R4 и R5 представляют собой, каждый независимо, водород, C1-6-алкил, гидрокси-C1-6-алкил, С 2-6-алкенил или C1-6-алкилокси; или R6 представляет собой водород; когда p равен 1, тогда R7 представляет собой водород; Z представляет собой один из радикалов, представленных в формуле изобретения.

Изобретение относится к соединениям формулы (I) и (II), обладающих свойством ингибитора протеинкиназ, их фармацевтически приемлемым солям, сольватам и гидратам, а также к их применению и фармацевтической композиции на их основе.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и хирургии, и может быть использовано для лечения рака прямой кишки. .
Изобретение относится к области органической химии, а именно к области получения производных стерола, и может быть использовано при получении 4-hydroxy-17R-methylincisterol из эргостерола с использованием фотоизомеризации.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к 12-имидазолил-1-додеканолу или к его фармацевтически приемлемой соли. .

Изобретение относится к гидрогелю карбоксиалкиламида хитозана и может быть использовано для косметического и дерматологического лечения кожных ожогов. .

Способ получения композиции полимерных мицелл, содержащей лекарство, слаборастворимое в воде

Наверх