Способ коррекции эндотелиальной дисфункции смесью гелия с кислородом при l-name индуцированном дефиците оксида азота

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии, и касается разработки способов коррекции эндотелиальной дисфункции. В эксперименте белым крысам самцам линии Wistar моделируют эндотелиальную дисфункцию внутрибрюшинным введением ингибитора эндотелиальной синтазы L-нитро-аргинин-метилового эфира в дозе 25 мг/кг ежедневно, в течение 7 суток. Оценивают степень развития дисфункции по отношению показателей эндотелий-зависимой и эндотелий-независимой вазодилатации. Для коррекции дисфункции крысам обеспечивают вдыхание смеси гелия с кислородом ежедневно в объеме 150 мл и 50 мл соответственно, в течение 7 суток. Способ приводит к выраженной коррекции эндотелиальной дисфункции. 1 пр., 2 табл.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии.

Наиболее близким к заявленному решению является способ коррекции эндотелиальной дисфункции с помощью эналаприла, относящегося к ингибиторам АПФ, описанный Агеевым Ф.Т., Овчинниковым А.Г. Ингибиторы ангиотензин-превращающего фермента в лечении сердечно-сосудистых заболеваний (Квинаприл и эндотелиальная дисфункция). Глава II. Дисфункция эндотелия. Часть V. ИАПФ при эндотелиальной дисфункции: экспериментальные данные. Москва, 2001 г. Изд-во компании «Пфайзер», http://www.viagra.nnov.ru/info/10911-ingibitors4.html, который заключается в пероральном приеме этих препаратов у больных для коррекции эндотелиальной дисфункции.

Основным недостатком способа является узкая патогенетическая направленность и опосредовательность действия эналаприла при эндотелиальной дисфункции, связанная с его низкой афинностью (сродством) к тканевой (эндотелиальной) ренинангтотензинальдостероновой системе (РААС), в то время как основная причина развития данного патофизиологического состояния - снижение активности клеток сосудистого эндотелия в образовании оксида азота (NO), - остается некомпенсированной. Поэтому результаты коррекции эндотелиальной дисфункции при недостаточности NO-синтаз с помощью эналаприла неудовлетворительны.

Техническим результатом изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции при L-name индуцированном дефиците оксида азота, включающий использование смеси гелия с кислородом, относящихся к веществам, обладающим эффектами прекондиционирования.

Технический результат достигается тем, что на фоне моделирования эндотелиальной дисфункции в эксперименте внутрибрюшинным введением лабораторному животному в течение 7 суток блокатора синтеза NO L-нитро-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг проводится ее коррекция путем ежедневного вдыхания смеси гелия с кислородом в дозе 150 мл и 50 мл соответственно.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Опыты проводят на белых крысах самцах линии Wistar массой 250-300 г. L-нитро-аргинин-метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут. На 7 день от начала эксперимента под наркозом (этаминал натрия 50 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену.

Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика и компьютерной программы «Bioshell». Функциональные пробы: эндотелий зависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелий независимая вазодилатация (ЭНВ) - внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.

При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при p<0,05.

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛННИЯ

Болюсное введение АХ в течение 3-5 с приводило к резкому падению артериального давления, достигающего пика у интактных животных для систолического (САД) 84,3±4,4, для диастолического давления (ДАД) - 38,7±2,8, и для среднего артериального давления (СрАД) 53,9±2,7 мм рт. ст., при этом в течение первых 2-3 секунд развивалась резкая брадикардия до 130-150 ударов в минуту. Восстановление АД происходило в среднем за 42,2±0,8 с после нормализации сердечного ритма. ЭНЗВ также характеризовалась снижением САД до 83,0±3,7, ДАД до 42±4,4 и СрАД до 55,7±3,5 мм рт.ст. с последующим полным восстановлением в среднем в течение 45,1±1,0 с. Блокада NO-синтазы с помощью длительного, ежедневного, в течение 7 суток внутрибрюшинного введения L-NAME (L-нитро-аргинин-метилового эфира в дозе 25 мг/кг) вызывало артериальную гипертензию (САД - 190,3±6,7, ДАД - 145,0±3,9, СрАД - 160,1±4,6 мм рт.ст.) и приводило к меньшему снижению показателей АД после введения АХ (САД до 110,6±5,2, ДАД до 82,8±6,6, СрАД до 92,1±6,1 мм рт.ст.) и НП (САД до 88,7±4,7, ДАД до 50,8±4,2 и СрАД до 63,4±4,1 мм рт.ст.) по сравнению с интактными животными.

Одновременное введение L-NAME и вдыхание смеси гелия с кислородом приводило к снижению показателей исходных значений АД (таблица 1).

Таблица 1
Динамика показателей АД и ЧСС при моделировании дефицита оксида азота и коррекции эндотелиальной дисфункции гелием.
Группы животных	Функциональные пробы	САД, мм рт.ст.	ДАД, мм рт.ст.
Интактные	Исходные	137,7±±3,7	101,9±4,3
	ЭЗВ с АХ	84,3±4,5	38,7±2,8
ЭНЗВ с НП	83,0±3,7	42,1±4,4
Получавшие L-NAME (25 мг/кг)	Исходные	190,3±6,7*	145,0±3,9*
	ЭЗВ с АХ	110,6±5,2*	82,8±6,6*
ЭНЗВ с НП	88,7±4,7*	50,8±4,2*
L-NAME (25 мг/кг) + гелий (150 мл) + кислород (50 мл)	Исходные	134,7±4,0**	100,1±4,9**
	ЭЗВ с АХ	88,3±4,8**	43,8±4,0**
ЭНЗВ с НП	86,6±2,4	48,8±2,3
* - р<0,05 в сравнении с группой интактных; ** в сравнении с группой L-NAME

Принципиальная разница в ЭЗВ и ЭНЗВ у интактных животных и животных с введением ингибитора NO-синтазы L-NAME закономерно привело нас к необходимости выведения специального показателя, характеризующего степень эндотелиальной дисфункции, являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение НП к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение АХ.

Мы рассчитывали это отношение у каждого животного интактной группы и крыс после моделирования блокады NO-синтазы и получили разницу данного показателя в 5 раз - соответственно 1,1 у интактных и 5,4 у животных, получавших L-NAME.

Таким образом, для дальнейшей оценки влияния АХ и НП при ЭЗВ и ЭНЗВ нами использовано это отношение как показатель коррекции эндотелиальной дисфункции. Так, в группе, где на фоне введения ингибитора NO-синтазы L-NAME вдыхалась смесь гелия с кислородом, это отношение соответствовало значению 2,57±0,21 (таблица 2).

Таблица 2
Показатели, отражающие коррекцию эндотелиальной дисфункции на фоне введения L-NAME гелием
Группы животных	Функциональные пробы	Прирост падения сосудистой реакции по СрАД (мм рт. ст.)	Время сосудистой реакции (с)	Площадь сосудистой реакции (усл. ед.)	Отношение площадей сосудистой реакции АХ к НП
Интактные	АХ	59,9±2,9	42,2±0,8	1268,0±74,8	1,1±0,1
НП	61,0±3,0	45,1±1,0	1375,3±93,7
L-NAME	АХ	68,0±4,1*	20,0±1,4*	695,3±87,6*	5,4±0,6*
НП	98,0±2,0*	67,4±1,4*	3322,7±116,7*
L-NAME + гелий (150 мл) + кислород (50 мл)	АХ	53,0±4,5**	28,3±1,4**	734,8±51,6**	2,57±0,21**
НП	49,0±3,0**	75,6±2,9**	1835,6±131,7**
* - р<0,05 в сравнении с группой интактных; ** в сравнении с группой L-NAME

Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать коррекцию эндотелиальной дисфункции смесью гелия с кислородом, возникающую при L-NAME-индуцированном дефиците оксида азота.

Способ коррекции эндотелиальной дисфункции, отличающийся тем, что в эксперименте белым крысам самцам линии Wistar с эндотелиальной дисфункцией на фоне ее моделирования внутрибрюшинным введением ингибитора эндотелиальной синтазы L-нитро-аргинин-метилового эфира в дозе 25 мг/кг ежедневно, в течение 7 суток, оценивая степень развития дисфункции по отношению показателей эндотелий зависимой и эндотелий независимой вазодилатации, обеспечивают вдыхание смеси гелия с кислородом ежедневно в объеме 150 мл и 50 мл соответственно, в течение 7 суток.