Способ определения активности клеток костного мозга



 


Владельцы патента RU 2488826:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической биохимии, цитологии, патоморфологии, и может быть использовано для определения энергетической активности клеток костного мозга (ККМ). Сущность способа: суспензию клеток костного мозга обрабатывают флуоресцентным потенциалчувствительным витальным зондом иодид 2-(п-диметиламиностирил)-1-метилпиридиния в достаточной концентрации, инкубируют в течение 45-90 минут при 37°С. Затем измеряют интенсивность флуоресценции зонда в клетках костного мозга. По величине интенсивности флуоресценции судят об энергетической активности клеток костного мозга. Способ позволяет с высокой степенью достоверности определять энергетическую активность и судить о воздействии различных факторов на ККМ. 5 табл., 5 пр.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической биохимии, цитологии, патоморфологии, и может быть использовано для определения энергетической активности клеток костного мозга (ККМ).

Известен способ определения качества трансплантатов костного мозга, периферической и пуповинной крови, содержащих гемопоэтические стволовые клетки (ГСК), основанный на анализе экспрессии поверхностных антигенов, таких как CD34. Способ позволяет провести количественный учет ГСК CD34. Успех трансплантации во многом зависит от достаточной концентрации CD34 ГСК (Sutherland D.R., Anderson L., Keeney M., et al. The ISHAGE guidelines for CD34+ cell determination by flow cytometry. J. Hematother. 1996, 5; p 213-226). Способ основывается лишь на оценке фенотипа молекул клеточной поверхности. Однако применение этого способа имеет ряд ограничений:

- клеточные поверхностные маркеры могут различаться между собой в образцах из разных источников;

- популяция CD34 гетерогенна по экспрессии данного маркера;

- фенотип трансплантированных стволовых клеток может оставаться неизменным, несмотря на их сниженную функциональную активность.

Известен способ определения активности клеток костного мозга, предложенный в 1995 году и заключающийся в оценке активности внутриклеточного фермента альдегид дегидрогеназы (ALDH) (Jones R.J., Barber J.P. Vala M.S. et al. Assessment of Aldehyde Dehydrogenase in Viable Cells. Blood, 1995, Vol.85, №10, P.2742-2746). Способ основан на регистрации интенсивности свечения отрицательно заряженного продукта реакции в результате взаимодействия субстрата (добавленного к суспензии клеток) и фермента ALDH. Продукт реакции сохраняется внутри клетки только тогда, когда цитоплазматическая мембрана интактна (не повреждена). Таким образом, фактически этот метод дает возможность оценить в суспензии долю клеток с неповрежденными цитоплазматическими мембранами. Недостатком способа является высокая стоимость реактивов.

Общим недостатком приведенных способов является определение одной конкретной характеристики исследуемых клеток. Целесообразно использовать для определения качества популяции клеток интегральную характеристику.

Техническим результатом изобретения является расширение технических средств определения активности клеток костного мозга.

Указанный технический результат достигается в способе определения активности ККМ путем исследования суспензии клеток костного мозга, в котором суспензию клеток костного мозга обрабатывают флуоресцентным потенциалчувствительным витальным зондом иодид 2-(п-диметиламиностирил)-1-метилпиридиния до конечной концентрации зонда в пробе 1·10-5-1·10-4 М, инкубируют в течение 45-90 минут при 37°C, измеряют интенсивность флуоресценции зонда в клетках костного мозга, и по величине интенсивности флуоресценции судят об энергетической активности клеток костного мозга.

В настоящее время установлена прямая связь между энергетическим статусом клеток и их функциональной активностью (Скулачев В.П. Биоэнергетика в системе биологических наук. Молекулярные механизмы и регуляция энергетического обмена. Пущино, 1987, С.4-6; Мусил Я. Основы биохимии патологических процессов., М., 1985, С.284-293), а также корреляция между энергетической активностью клеток и уровнями электрических потенциалов на их плазматической и митохондриальных мембранах (Григорович Н.А., Алекса Т.Ф. Иммунология, 1984, №1, С.10-15; Морозова Г.И., Добрецов Г.Е., Дубур Г.Я. и др. Цитология, 1981, №8, с.916-923), установленная при исследовании живых клеток с помощью потенциалчувствительных зондов.

Среди прижизненных флуорохромов широко применяются акридиновый оранжевый и этидий (Кирьянова Е.А., Зеленин А.В. Некоторые закономерности накопления инородных для клеток веществ в лизосомах. ДАН СССР, 1970, 190, №2, С.451-454). Однако указанные флуорохромы не позволяют изучать энергетическое состояние митохондрий и, кроме того, сами влияют на энергетическое состояние живых клеток (Фадеева М.Ф., Браун А.Д. Повреждение интеркалирующими агентами. В кн.: Общие механизмы клеточных реакций на повреждающие воздействия. Л., Наука, 1977, с.149-151).

Использование флуоресцентных зондов позволяет исследовать состояние мембранных систем в клетках, в том числе митохондрий. К ним относятся флуоресцирующие соединения, нековалентно взаимодействующие с мембранными системами (Владимиров Ю.А., Добрецов Г.Н. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран, М., Наука, 1980). Наличие трансмембранного потенциала на энергизированных мембранах митохондрий приводит к аккумуляции внутри митохондрий положительно заряженных ионов (Скулачев В.П., Трансформация энергии в биомембранах, М., Наука, 1972).

Для исследования авторами был выбран флуоресцентный потенциалчувствительный витальный зонд иодид 2-(п-диметиламиностирил)-1-метилпиридиния катионного типа (2-DI-1-ASP) (Molecular Probes. Hand Book of Fluorescent Probes and Research Products). Он способен электродиффузно проникать через клеточные мембраны и накапливаться в цитоплазматическом матриксе, митохондриях и ядре в зависимости от величины и знака градиента электрического поля на соответствующих мембранах.

Нами обнаружена способность 2-DI-1-ASP проникать в живые ККМ и флуоресцировать в них. Экспериментально было подтверждено, что флуоресценция 2-DI-1-ASP чувствительна к изменению энергетического потенциала этих клеток при различных условиях их хранения.

Способ может быть осуществлен, например, следующим образом.

К суспензии ККМ добавляют флуоресцентный витальный потенциалчувствительный зонд 2-DI-1-ASP (конечная концентрация зонда в пробе 1·10-5-1·10-4 М), инкубируют при 37°C в течение 45-90 минут, готовят препараты клеток и исследуют на люминесцентном микроскопе, например, Люмам-И2 (ЛОМО, Россия). Флуоресценцию зонда возбуждают ртутной лампой ДРШ-250-2 с длиной волны 405-436 нм. Для регистрации флуоресценции используют фотометрическую насадку ФМЭЛ-1 и интерференционный фильтр с максимумом пропускания 585 нм. Длина волны возбуждения 470 нм, интенсивность флуоресценции регистрируют при длине волны 560 нм. В каждом препарате определяют флуоресценцию массива из 70-100 клеток. Полученные данные статистически обрабатывают.

Рабочая концентрация зонда была подобрана опытным путем с таким расчетом, чтобы можно было регистрировать энергетическую активность клеток как в исходной суспензии (когда они максимально активны), так и после хранения (когда энергетическая активность клеток значительно снижена). При концентрации зонда ниже 1·10-5 М клетки плохо видны, интенсивность их свечения мало отличается от свечения фона. При концентрации зонда выше 1·10-4 М появляется избыточное диффузное окрашивание цитоплазмы и клеточные структуры невозможно дифференцировать. Время инкубации с зондом от 45 до 90 минут. При времени инкубации менее 45 минут интенсивность флуоресценции 2-DI-1-ASP достоверно снижена (для 8 пар наблюдений Р=0,05, критерий Вилкоксона-Манна-Уитни), далее F ˜ возрастает до максимальной величины и сохраняется постоянной до 90-100 минут инкубации.

Способ подтверждается примерами, в которых получение и заготовку ККМ проводили по опубликованной методике (Фрегатова Л.М., Зубаровская Л.С., Эстрина М.А., Головачева А.А., Бабенко Е.В., Платонова Г.Г., Зуева Е.Е., Афанасьев Б.В. Методы получения стволовых клеток у больных и доноров для их последующей трансплантации. СПб, Изд. СПбГМУ, кафедра гематологии, трансфузиологии, трансплантологии ФПО, 2004). Криоконсервацию и размораживание ККМ проводили по методу, описанному ранее (Kessinger A., Armitage J., Landmark J., Weisenburger D. Reconstitution of Human Hematopoietic Function with Autologous Cryopreserved Circulating Stem Cells. Exp.Hemat. Vol.14, 1986, P.192-196). Отмывание клеток от стандартного раствора стабилизатора, а также от криопротектора диметилсульфоксида (ДМСО) после размораживания проводили физиологическим раствором или раствором Хенкса в разведении 1:10. Состав среды Хенкса: 0,13 М хлорида натрия, 5,5 М хлорида калия, 1,2 мМ фосфата натрия, 1,0 мМ хлорида кальция, 1,0 мМ хлорида магния, 10,0 мМ глюкозы; рН 7,4. Состав стандартного раствора стабилизатора: в 100 мл содержится 2,63 г цитрата натрия, 0,327 г лимонной кислоты, 0,251 г дигидрофосфата натрия, 2,9 г декстрозы безводной, 0,0275 г аденина. Подготовку ККМ для флуориметрических измерений проводили по следующей схеме: суспензию клеток после размораживания переносили из пробирок типа Эппендорф в центрифужные пробирки емкостью 10-12 мл, сразу же добавляли физиологический раствор или раствор Хенкса в десятикратном избытке по отношению к объему суспензии клеток, хорошо перемешивали и центрифугировали при 8000-10000 об/мин, в течение 8-12 минут при комнатной температуре, надосадочную жидкость удаляли, осадок ресуспендировали в физиологическом растворе или в растворе Хенкса и далее полученную суспензию клеток использовали для флуориметрических исследований. Центрифугирование при меньшей скорости чем 8000 об/мин, менее 8 минут не дает возможности полностью осадить клетки (надосадочная жидкость мутная, осадок неплотный). При центрифугировании со скоростью более 10000 об/мин, и более 10 минут осадок получается слишком плотный, плохо ресуспендируется, часть клеток остается на стенках центрифужной пробирки.

Пример 1. Донор, ж., 39 л. Для исследования были взяты криоконсервированные ККМ, разморожены, отмыты физиологическим раствором, хранились при 37°C в термостате. Через определенные временные интервалы отбирали пробы клеток, инкубировали их с 2-DI-1-ASP и определяли F ˜ , усл.ед. Результаты исследования представлены в таблице 1.

Таблица 1
Параметр Время хранения, час
Исх. 1 2 3
F ˜ , усл.ед. 71,5±4,1 55,4±3,8* 49,3±2,9** 31,6±2,4***
*Р=0,05, **Р=0,01, ***Р=0,001 (критерий Вилкоксона-Манна-Уитни).

Полученные данные показывают, что при хранении ККМ в физиологическом растворе (0,9 М раствор хлорида натрия) уже через 3 часа суммарная интенсивность флуоресценции 2-DI-l-ASP (F) снижается с 71,5±4,1 до 31,6±2,4 усл.ед.

Пример 2. Донор, ж., 36 л. Криоконсервированные ККМ разморожены, не отмыты от криопротектора (7% ДМСО), хранились в термостате при 37°C. Через определенные временные интервалы отбирали пробы клеток, инкубировали их с 2-DI-1-ASP и определяли F ˜ , усл.ед. Результаты исследования представлены в таблице 2.

Таблица 2
Параметр Время хранения, час
Исх. 0,5 1 1,5
F ˜ , усл.ед. 65,3±2,1 53,3±1,4 40,6±1,5 30,3±1,2
PQ=0,01 (критерий Розенбаума).

При хранении ККМ после их размораживания без отмывания от криопротектора ДМСО уже через 1,5 часа F ˜ снижается с 65,3±2,1 до 30,3±1,2 усл.ед.

В примерах 3, 4, 5 продемонстрировано воздействие стандартного стабилизатора и среды Хенкса, а также криоконсервации и размораживания при различных сроках хранения на ККМ одного и того же донора, м., 43 года.

Пример 3. ККМ в среде стандартного стабилизатора хранились в термостате при 37°C. Через определенные временные интервалы отбирали пробы клеток, инкубировали их с 2-DI-1-ASP и определяли F ˜ , усл.ед.

Результаты исследования представлены в таблице 3.

Таблица 3
Параметр Время хранения, час
Исх. 2 5 24 48 72
F ˜ , усл.ед 124,2±6,3 110,0±6,5* 74,4±5,1** 82,8±3,8** 56,1±2,5*** 48,7±1,6***
*Р=0,05, **0,01<Р<0,05, ***0,005<Р<0,01 (критерий Вилкоксона-Манна-Уитни).

Пример 4. ККМ отмывали от среды стабилизатора, хранили в термостате при 37°C в среде Хенкса. Через определенные временные интервалы отбирали пробы клеток, инкубировали их с 2-DI-1-ASP и определяли F ˜ , усл.ед.

Результаты исследования представлены в таблице 4.

Таблица 4
Параметр Время хранения, час
Исх. 2 5 24 48 72
F ˜ , усл.ед 124,2±6,3 95,3±4,7* 69,5±4,3* 60,0±2,7* 44,8±2,7* 34,2±2,2**
*0,01<Р<0,05, **0,005<Р<0,01 (критерий Вилкоксона-Манна-Уитни).

Из примеров 3 и 4 следует, что хранение ККМ в стандартном растворе стабилизатора по сравнению с раствором Хенкса является оптимальным.

Пример 5. ККМ криоконсервированы в одних и тех же условиях в пробирках типа Эппендорф с криопротектором ДМСО. Три параллельных опыта ставили на трех отдельных образцах (в трех пробирках). После размораживания ККМ отмывали и хранили в термостате при 37°C в среде Хенкса. Через определенные временные интервалы отбирали пробы клеток, инкубировали их с 2-DI-1-ASP, определяли F ˜ , усл.ед. Результаты исследования представлены в таблице 5.

Таблица 5
Образец Параметр Время хранения, час
Исх. 2 24
1 F ˜ , усл.ед. 90,1±4,5 74,4±6,1* 33,0±1,3***
2 F ˜ , усл.ед. 104,7±6,1 93,2±5,7* 54,6±1,9***
3 F ˜ , усл.ед. 93,9±4,0 80,0±3,0* 42,3±2,0***
*Р=0,05, ***0,005<Р<0,01 (критерий Вилкоксона-Манна-Уитни).

Усредненные величины по трем образцам приведены в таблице 6.

Таблица 6
Параметр Время хранения, час
Исх. 2 24
Δ F ˜ , усл.ед. 96,2±4,8 82,5±4,9* 43,3±1,7***
*Р=0,05, ***0,005<Р<0,01 (критерий Вилкоксона-Манна-Уитни).

Из примера 5 видно, что Δ F ˜ ККМ уже через 24 часа хранения после размораживания снизилась с 96,2±4,8 до 43,3±1,7, таким образом, криоконсервация и размораживание являются дополнительными стрессовыми факторами для ККМ.

Способ позволяет с высокой степенью достоверности определять энергетическую активность и судить о воздействии различных факторов на ККМ.

Способ определения активности клеток костного мозга путем исследования суспензии клеток костного мозга, отличающийся тем, что суспензию клеток костного мозга обрабатывают флуоресцентным потенциалчувствительным витальным зондом иодид 2-(п-диметиламиностирил)-1-метилпиридиния до конечной концентрации зонда в пробе 1·10-5-1·10-4 М, инкубируют в течение 45-90 мин при 37°C, измеряют интенсивность флуоресценции зонда в клетках костного мозга и по величине интенсивности флуоресценции судят об энергетической активности клеток костного мозга.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной и клинической офтальмологии, аналитической химии и может быть использовано для экспресс-диагностики проникающих и непроникающих травм роговицы при отсутствии клинических данных.
Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для определения антибактериального потенциала хитозана в отношении стафилококков путем оценки активации хитозановым полимером ферментативного разрушения клеток бактерий.
Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования повышенного риска формирования у ребенка 3-7 лет хронической оториноларингологической патологии.
Изобретение относится к области медицины, а точнее к клинической химии и, в частности, к способам определения наличия экзогенных стероидов в организме. .

Изобретение относится к аналитической химии, а также может быть использовано в медицине для определения содержания селена в крови и контроля состояний селеновой недостаточности человека и животных.
Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и найдет широкое применение для объективной диагностики эндометриоидных кист яичников (ЭКЯ). .

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической иммунологии, и может быть использовано при лечении инфекционно-воспалительных заболеваний. .
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для дифференциальной диагностики острого пиелонефрита. .
Изобретение относится к медицине, в частности к неврологии, и может быть использовано для прогнозирования исхода у пациентов с травматическими внутричерепными гематомами в течение первых 10 суток нейрореанимационного периода.
Изобретение относится к медицине, а именно к неонатологии, и может быть использовано для прогнозирования манифестации внутриутробной инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа, у новорожденных детей, рожденных от матерей с персистирующей герпесвирусной инфекцией во время беременности.

Изобретение относится к области исследования или анализа материалов, в том числе ксенобиотиков, путем разделения образцов материалов на составные части с использованием хроматографии и масс-спектрометрии, а точнее к способам идентификации и определения в живом организме веществ, запрещенных к применению, и может быть использовано например в допинговом контроле лошадей
Изобретение относится к медицине, в частности, к экспериментальной гематологии, а именно к способу оценки развития сингенного перевивного миелобластного лейкоза у мышей линии AKR/JY

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и аллергологии, и может быть использовано для диагностики реактивного изменения специфического иммунитета у детей в условиях химической контаминации. Для этого производят отбор пробы крови у детей, проживающих в условиях химической контаминации. Затем выполняют клинико-лабораторные исследования крови на содержание вредных химических соединений. Далее у детей проводят ультразвуковое исследование селезенки для оценки ее эхоструктуры с использованием датчика частотой не менее 10 МГц. При наличии в ультразвуковом срезе селезенки гипоэхогенных однородных округлых включений размером 0,3-1,0 мм, расположенных на расстоянии 1,5-2 мм друг от друга, а также при одновременном превышении концентрации вредного химического соединения в крови по сравнению с его референтным значением диагностируют реактивные изменения специфического иммунитета у детей. Изобретение обеспечивает создание информативного, безопасного и точного способа ультразвуковой диагностики при одновременной простоте и доступности для широкого практического применения. 3 пр., 3 табл., 5 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу определения рода возбудителей бактериемий. Изобретение может быть использовано в бактериологических лабораториях клиник для идентификации рода возбудителей бактериемии. Способ включает инкубацию пробы крови в питательной среде с последующим выявлением роста микроорганизмов в первичной гемокультуре. Проводят пробоподготовку исследуемого образца центрифугированием. Осуществляют количественный хромато-масс-спектрометрический анализ исследуемой пробы с определением маркерных молекул, в качестве которых используют молекулы свободных и замещенных высших жирных кислот из клеточных липидов микроорганизмов. Идентифицируют свободные и замещенные высшие жирные кислоты путем сравнения полученных данных с базой данных NIST хромато-масс-спектрометра. Определяют род возбудителей бактериемий с помощью таблицы. Предложенное изобретение позволяет обеспечить раннюю диагностику бактериемии. 5 ил., 1 табл., 5 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть применено для определения содержания пероксида водорода (H2O2) в опухолевых клетках при воздействии на них противоопухолевого препарата, в частности цисплатина. Способ осуществляют следующим образом: на опухолевые клетки, которые представляют собой клеточную линию аденокарциномы шейки матки человека HeLa Kyoto, воздействуют цисплатином при его концентрации 1,85-3,85 мкг/мл. Измеряют внутриклеточное содержания H2O2 методом лазерной сканирующей микроскопии, определяя интенсивность сигнала флуоресценции при возбуждении сенсора на длинах волн 458 нм и 488 нм. Рассчитывают величину отношения между интенсивностью сигнала флуоресценции на длине волны 488 нм к интенсивности сигнала флуоресценции на длине волны 458 нм (F488/F458), по которой и судят о внутриклеточном содержании пероксида водорода. Для оценки содержания пероксида водорода в динамике осуществляют определение интенсивности сигнала флуоресценции при возбуждении сенсора на длинах волн 458 нм и 488 нм и расчет величины отношения между интенсивностью сигнала флуоресценции на длине волны 488 нм к интенсивности сигнала флуоресценции на длине волны 458 нм, по которой и судят о внутриклеточном содержании пероксида водорода, каждые 60 секунд в течение 30 минут. Способ позволяет выявлять место образования пероксида водорода в клетке, и на основе этого судить о механизмах токсического действия цисплатина на молекулярном уровне, а также позволяет исключить возможную погрешность оценки содержания пероксида водорода, обусловленную неспецифическим накоплением сенсора. 2 з.п. ф-лы, 3 пр., 1 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу снижения предела обнаружения иммунохроматографических методов контроля содержания низкомолекулярных соединений. Способ включает проведение в ходе движения реагентов вдоль иммунохроматографической тест-полоски конкурентного взаимодействия специфических антител с определяемым соединением (антигеном) в пробе и конъюгатом антиген-белок, иммобилизованным на поверхности рабочей мембраны тест-полоски. Выявляют окрашенные комплексы в результате иммобилизации коллоидного маркера в составе комплекса с конъюгатом антиген-белок. При этом первая стадия представляет собой конкурентное взаимодействие свободных специфических антител с антигеном в пробе и с иммобилизованным на поверхности рабочей мембраны конъюгатом антиген-белок. Вторая стадия представляет собой взаимодействие образовавшихся комплексов специфических антител и конъюгата антиген-белок с антивидовыми антителами, меченными коллоидным маркером. Предложенное изобретение позволяет уменьшить количество специфических антител на стадии конкурентного взаимодействия и благодаря этому снизить предел обнаружения. 5 ил., 1 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, в частности к способу прогнозирования тяжести течения эпилепсии. Сущность способа состоит в том, что определяют спектр молекул средней массы в сыворотке крови пациента до начала терапии. При значениях фракции молекул средней массы, определяемых как оптическое поглощение Е при длине волны 230 нм, ниже 0,118 усл.ед. и значении нуклеарно-пептидарного коэффициента, определяемого как отношение оптического поглощения Е при длине волны 230 нм к оптическому поглощению Е при длине волны 254 нм ниже 0,4 прогнозируют тяжелое течение эпилепсии. Использование заявленного способа позволяет повысить точность прогнозирования течения эпилепсии. 1 табл., 2 пр.

Группа изобретений относится к составу реагента датчика-анализатора, адаптированного для содействия определению концентрации анализируемого вещества в жидкой пробе, к способам определения концентрации анализируемого вещества в жидкой пробе и к способу нанесения состава реагента датчика анализатора на подложку способом трафаретной печати. Состав реагента датчика-анализатора содержит от 1 мас.% до 4,0 мас.% энзима глюкозоксидазы, от 15 мас.% до 20 мас.% феррицианидного медиатора, от 3,6 мас.% до 6,0 мас.% полимера гидроксиэтилцеллюлозы и от 0,2 мас.% до 1,6 мас.% смектитовой глины. Способ определения концентрации анализируемого вещества в жидкой пробе включает создание электрохимического датчика-анализатора, который состоит из противоэлектрода и рабочего электрода, области приема жидкости и указанного выше реагента датчика-анализатора, и определение концентрации анализируемого вещества за время менее 35 секунд. Другой способ определения концентрации анализируемого вещества в жидкой пробе включает прокол пальца у испытуемого человека с целью забора пробы жидкости, размещение пробы жидкости, содержащей одно анализируемое вещество, в датчике-анализаторе, контактирование пробы жидкости с реагентом датчика-анализатора и определение концентрации анализируемого вещества в пробе жидкости. Способ нанесения указанного выше состава реагента датчика-анализатора на подложку способом трафаретной печати включает создание сетчатого трафарета, состоящего из первой части со светочувствительной эмульсией и второй части, выполненной без светочувствительной эмульсии; подачу реагента датчика-анализатора на сетчатый трафарет и контактирование реагента с подложкой через вторую часть сетчатого трафарета. Заявленная группа изобретений обеспечивает повышение стабильности датчика, простое нанесение реагента, сокращение общего времени анализа и повышение сцепления реагента с подложкой. 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 11 ил., 5 пр.
Наверх