Способ диагностики комбинированного воздействия ароматических углеводородов, оксидов олефинов и их смеси на работников нефтехимических и химических производств

Авторы патента:

G01N33/52 - использование соединений или составов для колориметрического, спектрофотометрического или флуорометрического анализа, например реактивной бумаги

Владельцы патента RU 2488827:

Федеральное бюджетное учреждение науки "Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека" (RU)

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к медицине труда, и описывает способ оценки воздействия химических агентов, включающий исследование биологического материала, отличающийся тем, что у работников нефтехимических и химических производств в сыворотке периферической крови спектрофотометрическим методом определяют активность каталазы, аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы и количественное содержание перекисей в липидах, при снижении активности каталазы, увеличении активности аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы и количественного содержания перекисей в липидах диагностируют комбинированное воздействие смеси ароматических углеводородов и оксидов олефинов; при увеличении активности аланинаминотрансферазы и количественного содержания перекисей в липидах диагностируют комбинированное воздействие оксидов олефинов; при увеличении количественного содержания перекисей в липидах диагностируют комбинированное воздействие ароматических углеводородов. Использование изобретения обеспечивает получение критериев диагностики комбинированного воздействия ароматических углеводородов, оксидов олефинов и их смеси на работников нефтехимических и химических производств. 3 пр.

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к медицине труда и может быть использовано для оценки комбинированного воздействия ароматических углеводородов, оксидов олефинов и их смеси на работников нефтехимических производств.

Нефтехимическая промышленность занимает одно из ведущих мест по потенциальной опасности химического воздействия [Профессиональные риски здоровья работающих при переработке нефти / Л.К.Каримова, Г.Г.Гимранова, Т.М.Зотова [и др.] // Медицина труда и промышленная экология. - 2009. - №11. - С.9-12]. В условиях современных нефтехимических производств в воздушной среде могут присутствовать многокомпонентные смеси, содержащие одновременно от 2 ингредиентов [Мирзакаримова, М.А. Гигиеническая оценка комбинированного действия загрязнений в атмосферном воздухе населенных мест / М.А.Мирзакаримова, Ш.Т.Искандарова // Гигиена и санитария. - 2008. - №4. - С.10-13]. При комбинированном воздействии структурно-родственных химических соединений или веществ с близким механизмом действия можно ожидать усиление токсического эффекта химических веществ [Кравченко, Л.В. Оценка комбинированного действия микотоксинов вомитоксина и Т-2 токсина на крыс / Л.В.Кравченко, Л.И.Авреньева, В.А.Тутельян // Токсикологический вестник. - 2000. - №1. - С.2-7].

Во многих технологических процессах нефтехимических и химических производств чаще присутствуют ароматические углеводороды (бензол, этилбензол, стирол), оксиды олефинов (оксид пропилена, оксид этилена), или их смеси [Профессиональная патология: национальное руководство / под. ред. Н.Ф.Измерова. - М.: ГЕОТАР-Медиа, 2011. - 784 с.]. Оксиды олефинов и ароматические углеводороды являются важнейшими продуктами нефтехимического производства и используются для получения синтетических волокон, каучуков, различных пластмасс, синтетической резины, красителей и ряда продуктов органического синтеза. Одновременное присутствие в воздухе рабочей зоны оксидов олефинов и ароматических углеводородов возможно в производствах полиэфирных смол, фенилэтилового спирта, полигликолевых эфиров, некоторых видов полиуретанов и др.

В настоящее время многие авторы особое внимание уделяют влиянию химических веществ на субклеточные структуры, поскольку в основе механизма действия различных химических соединений лежит их взаимодействие с компонентами клеток, молекулами клеточных органелл и мембран [Иванова, Л.А. Лабораторные исследования в клинике профессиональных заболеваний / Л.А.Иванова, М.Н.Горизонтова, Т.Р.Захарова [и др.] // Медицина труда и промышленная экология. - 2003. - №6. - С.20-24; Мышкин, А.В. Окислительный стресс и повреждения печени при химических воздействиях / А.В.Мышкин, А.Б.Бакиров. - Уфа, 2010.- 176 с.].

Известно, что чрезмерная активация свободнорадикальных и перекисных реакций и внутриклеточных ферментов отражает тонкие сдвиги обменных процессов, которые предшествуют появлению выраженных клинических признаков повреждения, в т.ч. повреждения химическими веществами [Савлуков, А.И. Метаболические процессы в организме при воздействии химических загрязнителей / А.И.Савлуков, Р.Ф.Камилов, В.М.Самсонов [и др.] // Клиническая лабораторная диагностика. - 2010, - №7. - С.33-39].

Прототипом изобретения является способ оценки характера воздействия на клетку различных химических агентов [Патент RU №2089905, 1997 г.], заключающийся в том, что в неокрашенных мазках буккального эпителия при внутриклеточном электрофорезе измеряют напряжения и частоты до и после добавления исследуемого химического препарата. При увеличении амплитуды по сравнению с контролем констатируют биостимулирующий эффект, при уменьшении угнетающий. Недостатком данного метода является отсутствие специфических показателей, которые могут выступать в качестве критериев изменения состояния клетки, внутриклеточных структур и организма в целом при воздействии ароматических углеводородов, оксидов олефинов и их смеси.

Задачей изобретения является разработка способа оценки комбинированного воздействия ароматических углеводородов, оксидов олефинов и их смеси на работников, занятых в условиях нефтехимических и химических производств.

Технический результат при использовании изобретения - получение критериев диагностики комбинированного воздействия ароматических углеводородов, оксидов олефинов и их смеси на работников, занятых в условиях нефтехимических и химических производств.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе оценки воздействия химических агентов, включающем исследование биологического материала, согласно изобретению у работников нефтехимических и химических производств в сыворотке периферической крови спектрофотометрическим методом определяют активность каталазы, аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы и количественное содержание перекисей в липидах, при снижении активности каталазы, увеличении активности аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы и количественного содержания перекисей в липидах диагностируют комбинированное воздействие смеси ароматических углеводородов и оксидов олефинов; при увеличении активности аланинаминотрансферазы и количественного содержания перекисей в липидах диагностируют комбинированное воздействие оксидов олефинов; при увеличении количественного содержания перекисей в липидах диагностируют комбинированное воздействие ароматических углеводородов.

Определение активности каталазы в сыворотке крови

Содержание каталазы в сыворотке периферической крови обследованных лиц определяют спектрофотометрическим методом.

Реактивы и их приготовление: 1.4% раствор молибдата натрия (4 г реактива растворяют в 100 мл воды). 2.0,03%) раствор перекиси водорода (готовят непосредственно перед использованием: берем 1 мл 3% перекиси водорода, доводят до 100 мл).

Кровь из вены отбирают в пробирку. По истечении 20 минут кровь центрифугируют при 1500 оборотов в минуту в течение 15 мин при +4°C для отделения сыворотки крови. Анализ выполняют сразу же после отбора сыворотки крови. Параллельно с опытными образцами ставят контроли для каждого образца В пробирку 1 (опытный образец) вносят 0,1 мл сыворотки крови, добавляют 2 мл перекиси водорода 0,03%, инкубируют 10 минут при комнатной температуре. После инкубации останавливают реакцию добавлением 1 мл молибдата натрия, центрифугируют 15 минут при 3000 оборотах в минуту. Измеряют оптическую плотность образцов при длине волны 410 нм против дистиллированной воды.

В пробирку 2 (контрольный образец) отмеривают 0,1 мл сыворотки крови, добавляют 1 мл молибдата натрия, инкубируют 10 минут при комнатной температуре. По истечению времени инкубации добавляют 2 мл перекиси водорода 0,03%, центрифугируют 15 минут при 3000 оборотов в минуту.

Измеряют оптическую плотность образцов при длине волны 410 нм против дистиллированной воды.

Рассчитывают по формуле:

А=(Ек-Ео)*75;

А - активность фермента в мКат/л

Ек - оптическая плотность контроля, Ео - оптическая плотность пробы.

Референтные значения 10,6-23,0 мКат/л (Королюк М.А. и др. Определение активности каталазы. / Лабораторное дело. - №1, 1988, С.16-19).

Определение перекисей в липидах сыворотки крови

Для оценки интенсивности процессов перекисного окисления определяют количественное содержание продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке периферической крови спектрофотометрическим методом. Кровь из вены отбирают в пробирку. По истечении 20 минут кровь центрифугируют при 1500 оборотов в минуту в течение 15 мин при +4°C для отделения сыворотки крови, которую сразу подвергают анализу.

Реактивы и их приготовление. 1. Серная кислота, 0,1 N. 2. Фосфорновольфрамовая кислота (ФВК), 10%. 3. Тиобарбитуровая кислота (ТБК) - 0,67%. Готовят перед применением при нагревании и смешивают с ледяной уксусной кислотой (1:1). 4. Н-бутанол (хч).

1. К 0,25 мл сыворотки крови добавляют 5 мл 0,1 N серной кислоты, 0,5 мл 10% раствора ФВК, перемешивают, выдерживают 5 минут при комнатной температуре, потом центрифугируют при 1500 оборотах в минуту в течение 5 минут. Одновременно с опытными образцами ставят холостую пробу (без сыворотки крови), все остальные этапы проводят параллельно с опытными образцами.

2. Супернатант сливают, к осадку приливают 4 мл дистиллированной воды, добавляют 1,0 мл раствора тиобарбитуровой кислоты, перемешивают и инкубируют на водяной бане в течение 60 мин при 95°C.

3. По истечении времени пробы охлаждают, к пробе добавляют 4 мл н-бутанола и экстрагируют в течение 1 мин на вортексе. Для разделения слоев пробы центрифугируют в течение 5 мин в пробирках с пробками при 1500 оборотах в минуту.

4. Сразу после центрифугирования отбирают 3 мл супернатанта и измеряют оптическую плотность опытной пробы против холостой пробы при двух длинах волн 535 и 570 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Измерение проводят не позднее 1,5 часов после центрифугирования.

5. Расчет содержания продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке крови проводят по формуле:

C=(D₅₃₅-D₅₇₀/0.156)×16, где

С - содержание продуктов перекисного окисления липидов в опытной пробе, мкмоль/л;

D₅₃₅ - оптическая плотность опытной пробы при 535 нм;

D₅₇₀ - оптическая плотность опытной пробы при 570 нм;

0.156 - коэффициент молярной экстинкции комплекса малоновый диальдегид - ТБК в л/мкмоль×см; 16 - коэффициент разведения сыворотки.

Референтные значения 1,43-4,31 мкмоль/л. (Архипова О.Г. Шацкая Н.Н., Семенова Л.С. и др. Методы исследования в профпатологии. М., 1988 - 208 с.).

Определение аланинаминотрансферазы

Определение активности аланинаминотрансферазы (АЛТ) в сыворотке периферической крови проводят спектрофотометрическим кинетическим методом. Для определения активности аланинаминотрансферазы используют реагенты фирмы Human. Реактивы и их приготовление.

1. Субстрат, в котором содержится 2-оксоглутарат (90 ммоль/л) и NADH (0,18 ммоль/л).

2. Буфер, в котором содержится ТРИС буфер (рН 7,5), L-аланин (750 ммоль/л) и лактатдегидрогеназа (≤1,2 кЕд/л). Субстрат из флакона SUB смешивают с содержимым флакона BUF перед применением.

Кровь для определения отбирают из вены. По истечении 20 минут кровь центрифугируют при 1500 оборотов в минуту в течение 15 мин при +4°C для отделения сыворотки крови, которую сразу подвергают анализу.

В пробирку вносят 1 мл готового реагента, прогревают при температуры 37° не менее 30 секунд, добавляют 0,1 мл сыворотки крови, тщательно перемешивают, запускают секундомер. Измеряют оптическую плотность опытной пробы ровно через 1 минуту. Повторяют измерение 3 раза с интервалом 1 минута.

Вычисление: вычисляют среднее изменение оптической плотности за 1 минуту (ΔА/мин). Для расчета активности АЛТ в пробе полученное значение ΔА/мин умножают на фактор 1745.

Референтные значения: мужчины - не более 42 Ед/л, женщины - не более 32 Ед/л (по инструкциям к наборам согласно рекомендациям IFCC - Международной Федерации по Клинической Химии).

Определение аспартатаминотрансферазы

Определение активности аспартатаминотрансферазы (ACT) в сыворотке периферической крови проводят спектрофотометрическим методом. Для определения активности аспартатаминотрансферазы используют реагенты фирмы Human Реактивы и их приготовление.

1. Субстрат, в котором содержится 2-оксоглутарат (65 ммоль/л) и NADH (0,18 ммоль/л).

2. Буфер, в котором содержится ТРИС буфер (рН 7,8), L-аспартат (290 ммоль/л), лактатдегидрогеназа (≥10 кЕд/л), малатдегидрогеназа (≥0,5 кЕд/л). Субстрат из флакона SUB смешивают с содержимым флакона BUF перед применением, готовый реагент прогревают до температуры 37°. Субстрат из флакона SUB смешивают с содержимым флакона BUF перед применением, готовый реагент прогревают до температуры 37°.

В пробирку вносят 1 мл готового реагента, прогревают при температуре 37° не менее 30 секунд, добавляют 0,1 мл сыворотки крови, тщательно перемешивают, запускают секундомер. Измеряют оптическую плотность опытной пробы ровно через 1 минуту. Повторяют измерение 3 раза с интервалом 1 минута.

Вычисление: вычисляют среднее изменение оптической плотности за 1 минуту (ΔА/мин). Для расчета активности ACT в пробе полученное значение ΔА/мин умножают на фактор 1745.

Референтные значения: у мужчин не более 37 Ед/л, у женщин не более 31 Ед/л (по инструкциям к наборам согласно рекомендациям IFCC - Международной Федерации по Клинической Химии).

При снижении активности каталазы, увеличении активности аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы и количественного содержания перекисей в липидах диагностируют комбинированное воздействие смеси ароматических углеводородов и оксидов олефинов.

При увеличении активности аланинаминотрансферазы и количественного содержания перекисей в липидах диагностируют комбинированное воздействие оксидов олефинов.

При увеличении количественного содержания перекисей в липидах диагностируют комбинированное воздействие ароматических углеводородов.

Нами были обследованы работники (n=549) нефтехимического производства (ОАО «Нижнекамскнефтехим», республика Татарстан). Все обследованные работники были мужского пола, возраст которых составлял от 20 до 55 лет.

Контрольную группу составили 168 работников нефтехимического производства, не подвергающихся воздействию химических веществ. Группы обследованных работников и контроля были сопоставимы по возрасту, полу. Средний возраст обследованных работников составил 37,4±1,3 лет при стаже работы 13,7±1,6 лет, средний возраст работников контрольной группы - 38,8±0,7 лет при стаже работы 14,6±0,7 лет.

Установлено, что при воздействии на работников (n=315) смеси оксидов олефинов и ароматических углеводородов в сыворотке крови у них наблюдается увеличение содержания продуктов ПОЛ, увеличение активности АЛТ, ACT и каталазы крови (р<0,05); при воздействии на работников (n=86) оксидов олефинов увеличение активности АЛТ и увеличение содержания продуктов ПОЛ (р<0,05); при воздействии на работников (n=148) ароматических углеводородов в сыворотке крови выявлено только увеличение содержания продуктов ПОЛ (р<0,05).

Предлагаемый способ легко воспроизводим в условиях клинической лаборатории и при его использовании достигается указанный технический результат. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию «промышленная применимость».

Определение маркеров воздействия на работников указанных химических веществ имеет большое практическое значение, поскольку выявление начальных обратимых форм, профессиональных заболеваний от химического фактора, является одним из приоритетных направлений профилактических заболеваний.

Предлагаемый способ диагностики иллюстрируется следующим клиническим материалом:

Пример 1. Работник А., занятый в условиях производства простых полиэфиров. Содержание продуктов ПОЛ = 6,35 мкмоль/л, активность каталазы = 19,05 мКат/л, активность АСТ = 31,3 Ед/л, активность АЛТ = 51,9 Ед/л. Имеет место комбинированное воздействие на работников оксидов олефинов.

Пример 2. Работник В., занятый в условиях производства стирола. Содержание продуктов ПОЛ = 8,71 мкмоль/л, активность каталазы = 15,97 мКат/л, активность АСТ = 24,1 Ед/л, активность АЛТ = 26,0 Ед/л. Имеет место комбинированное воздействие на работников ароматических углеводородов.

Пример 3. Работник В., занятый в условиях производства полиэфирных смол. Содержание продуктов ПОЛ = 6,05 мкмоль/л, активность каталазы = 9,5 мКат/л, активность АСТ = 41,6 Ед/л, активность АЛТ = 46,5 Ед/л. Имеет место комбинированное воздействие на работников смеси ароматических углеводородов и оксидов олефинов.

Способ оценки воздействия химических агентов, включающий исследование биологического материала, отличающийся тем, что у работников нефтехимических и химических производств в сыворотке периферической крови спектрофотометрическим методом определяют активность каталазы, аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы и количественное содержание перекисей в липидах, при снижении активности каталазы, увеличении активности аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы и количественного содержания перекисей в липидах диагностируют комбинированное воздействие смеси ароматических углеводородов и оксидов олефинов; при увеличении активности аланинаминотрансферазы и количественного содержания перекисей в липидах диагностируют комбинированное воздействие оксидов олефинов; при увеличении количественного содержания перекисей в липидах диагностируют комбинированное воздействие ароматических углеводородов.

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической биохимии, цитологии, патоморфологии, и может быть использовано для определения энергетической активности клеток костного мозга (ККМ).

Способ диагностики травм глаза // 2488825

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной и клинической офтальмологии, аналитической химии и может быть использовано для экспресс-диагностики проникающих и непроникающих травм роговицы при отсутствии клинических данных.

Способ экспресс-определения антибактериального потенциала хитозана в отношении стафилококков // 2488116

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для определения антибактериального потенциала хитозана в отношении стафилококков путем оценки активации хитозановым полимером ферментативного разрушения клеток бактерий.

Способ прогнозирования повышенного риска формирования у детей 3-7 лет хронической отоларингологической патологии // 2483310

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования повышенного риска формирования у ребенка 3-7 лет хронической оториноларингологической патологии.

Способ обнаружения экзогенных стероидов в биологической жидкости человека // 2483309

Изобретение относится к области медицины, а точнее к клинической химии и, в частности, к способам определения наличия экзогенных стероидов в организме. .

Способ определения концентрации селена в крови // 2482492

Изобретение относится к аналитической химии, а также может быть использовано в медицине для определения содержания селена в крови и контроля состояний селеновой недостаточности человека и животных.

Способ диагностики эндометриоидных кист яичников // 2480761

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и найдет широкое применение для объективной диагностики эндометриоидных кист яичников (ЭКЯ). .

Способ индивидуального подбора иммуноактивных препаратов при лечении инфекционно-воспалительных заболеваний // 2480760

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической иммунологии, и может быть использовано при лечении инфекционно-воспалительных заболеваний. .

Способ диагностики различных форм острого пиелонефрита // 2478968

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для дифференциальной диагностики острого пиелонефрита. .

Способ прогнозирования исхода травматических внутричерепных гематом на нейрореанимационном этапе // 2478208

Изобретение относится к медицине, в частности к неврологии, и может быть использовано для прогнозирования исхода у пациентов с травматическими внутричерепными гематомами в течение первых 10 суток нейрореанимационного периода.

Способ определения допинга у лошадей // 2489719

Изобретение относится к области исследования или анализа материалов, в том числе ксенобиотиков, путем разделения образцов материалов на составные части с использованием хроматографии и масс-спектрометрии, а точнее к способам идентификации и определения в живом организме веществ, запрещенных к применению, и может быть использовано например в допинговом контроле лошадей

Способ оценки развития сингенного перевивного миелобластного лейкоза у мышей линии akr/jy // 2490637

Изобретение относится к медицине, в частности, к экспериментальной гематологии, а именно к способу оценки развития сингенного перевивного миелобластного лейкоза у мышей линии AKR/JY

Способ оценки сорбционной способности клетки // 2492486

Способ диагностики нарушения иммунного статуса у детей в условиях химической контаминации // 2494401

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и аллергологии, и может быть использовано для диагностики реактивного изменения специфического иммунитета у детей в условиях химической контаминации. Для этого производят отбор пробы крови у детей, проживающих в условиях химической контаминации. Затем выполняют клинико-лабораторные исследования крови на содержание вредных химических соединений. Далее у детей проводят ультразвуковое исследование селезенки для оценки ее эхоструктуры с использованием датчика частотой не менее 10 МГц. При наличии в ультразвуковом срезе селезенки гипоэхогенных однородных округлых включений размером 0,3-1,0 мм, расположенных на расстоянии 1,5-2 мм друг от друга, а также при одновременном превышении концентрации вредного химического соединения в крови по сравнению с его референтным значением диагностируют реактивные изменения специфического иммунитета у детей. Изобретение обеспечивает создание информативного, безопасного и точного способа ультразвуковой диагностики при одновременной простоте и доступности для широкого практического применения. 3 пр., 3 табл., 5 ил.

Способ определения рода возбудителей бактериемий // 2495939

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу определения рода возбудителей бактериемий. Изобретение может быть использовано в бактериологических лабораториях клиник для идентификации рода возбудителей бактериемии. Способ включает инкубацию пробы крови в питательной среде с последующим выявлением роста микроорганизмов в первичной гемокультуре. Проводят пробоподготовку исследуемого образца центрифугированием. Осуществляют количественный хромато-масс-спектрометрический анализ исследуемой пробы с определением маркерных молекул, в качестве которых используют молекулы свободных и замещенных высших жирных кислот из клеточных липидов микроорганизмов. Идентифицируют свободные и замещенные высшие жирные кислоты путем сравнения полученных данных с базой данных NIST хромато-масс-спектрометра. Определяют род возбудителей бактериемий с помощью таблицы. Предложенное изобретение позволяет обеспечить раннюю диагностику бактериемии. 5 ил., 1 табл., 5 пр.

Способ оценки содержания пероксида водорода в опухолевых клетках при воздействии на них противоопухолевого препарата // 2497121

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть применено для определения содержания пероксида водорода (H2O2) в опухолевых клетках при воздействии на них противоопухолевого препарата, в частности цисплатина. Способ осуществляют следующим образом: на опухолевые клетки, которые представляют собой клеточную линию аденокарциномы шейки матки человека HeLa Kyoto, воздействуют цисплатином при его концентрации 1,85-3,85 мкг/мл. Измеряют внутриклеточное содержания H2O2 методом лазерной сканирующей микроскопии, определяя интенсивность сигнала флуоресценции при возбуждении сенсора на длинах волн 458 нм и 488 нм. Рассчитывают величину отношения между интенсивностью сигнала флуоресценции на длине волны 488 нм к интенсивности сигнала флуоресценции на длине волны 458 нм (F488/F458), по которой и судят о внутриклеточном содержании пероксида водорода. Для оценки содержания пероксида водорода в динамике осуществляют определение интенсивности сигнала флуоресценции при возбуждении сенсора на длинах волн 458 нм и 488 нм и расчет величины отношения между интенсивностью сигнала флуоресценции на длине волны 488 нм к интенсивности сигнала флуоресценции на длине волны 458 нм, по которой и судят о внутриклеточном содержании пероксида водорода, каждые 60 секунд в течение 30 минут. Способ позволяет выявлять место образования пероксида водорода в клетке, и на основе этого судить о механизмах токсического действия цисплатина на молекулярном уровне, а также позволяет исключить возможную погрешность оценки содержания пероксида водорода, обусловленную неспецифическим накоплением сенсора. 2 з.п. ф-лы, 3 пр., 1 ил.

Способ снижения предела обнаружения иммунохроматографических методов контроля содержания низкомолекулярных соединений // 2497126

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу снижения предела обнаружения иммунохроматографических методов контроля содержания низкомолекулярных соединений. Способ включает проведение в ходе движения реагентов вдоль иммунохроматографической тест-полоски конкурентного взаимодействия специфических антител с определяемым соединением (антигеном) в пробе и конъюгатом антиген-белок, иммобилизованным на поверхности рабочей мембраны тест-полоски. Выявляют окрашенные комплексы в результате иммобилизации коллоидного маркера в составе комплекса с конъюгатом антиген-белок. При этом первая стадия представляет собой конкурентное взаимодействие свободных специфических антител с антигеном в пробе и с иммобилизованным на поверхности рабочей мембраны конъюгатом антиген-белок. Вторая стадия представляет собой взаимодействие образовавшихся комплексов специфических антител и конъюгата антиген-белок с антивидовыми антителами, меченными коллоидным маркером. Предложенное изобретение позволяет уменьшить количество специфических антител на стадии конкурентного взаимодействия и благодаря этому снизить предел обнаружения. 5 ил., 1 пр.

Способ прогнозирования тяжести течения эпилепсии // 2499262

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, в частности к способу прогнозирования тяжести течения эпилепсии. Сущность способа состоит в том, что определяют спектр молекул средней массы в сыворотке крови пациента до начала терапии. При значениях фракции молекул средней массы, определяемых как оптическое поглощение Е при длине волны 230 нм, ниже 0,118 усл.ед. и значении нуклеарно-пептидарного коэффициента, определяемого как отношение оптического поглощения Е при длине волны 230 нм к оптическому поглощению Е при длине волны 254 нм ниже 0,4 прогнозируют тяжелое течение эпилепсии. Использование заявленного способа позволяет повысить точность прогнозирования течения эпилепсии. 1 табл., 2 пр.

Реагент датчиков-анализаторов с целлюлозными полимерами // 2499996

Группа изобретений относится к составу реагента датчика-анализатора, адаптированного для содействия определению концентрации анализируемого вещества в жидкой пробе, к способам определения концентрации анализируемого вещества в жидкой пробе и к способу нанесения состава реагента датчика анализатора на подложку способом трафаретной печати. Состав реагента датчика-анализатора содержит от 1 мас.% до 4,0 мас.% энзима глюкозоксидазы, от 15 мас.% до 20 мас.% феррицианидного медиатора, от 3,6 мас.% до 6,0 мас.% полимера гидроксиэтилцеллюлозы и от 0,2 мас.% до 1,6 мас.% смектитовой глины. Способ определения концентрации анализируемого вещества в жидкой пробе включает создание электрохимического датчика-анализатора, который состоит из противоэлектрода и рабочего электрода, области приема жидкости и указанного выше реагента датчика-анализатора, и определение концентрации анализируемого вещества за время менее 35 секунд. Другой способ определения концентрации анализируемого вещества в жидкой пробе включает прокол пальца у испытуемого человека с целью забора пробы жидкости, размещение пробы жидкости, содержащей одно анализируемое вещество, в датчике-анализаторе, контактирование пробы жидкости с реагентом датчика-анализатора и определение концентрации анализируемого вещества в пробе жидкости. Способ нанесения указанного выше состава реагента датчика-анализатора на подложку способом трафаретной печати включает создание сетчатого трафарета, состоящего из первой части со светочувствительной эмульсией и второй части, выполненной без светочувствительной эмульсии; подачу реагента датчика-анализатора на сетчатый трафарет и контактирование реагента с подложкой через вторую часть сетчатого трафарета. Заявленная группа изобретений обеспечивает повышение стабильности датчика, простое нанесение реагента, сокращение общего времени анализа и повышение сцепления реагента с подложкой. 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 11 ил., 5 пр.

Способ определения показаний к проведению лучевой терапии у опухоленосителей путем предикции ее эффективности // 2506591

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и радиологии, и может найти применение при лечении больных злокачественными опухолями головного мозга. В способе определения показаний к проведению лучевой терапии у опухоленосителей путем предикции ее эффективности, включающем взятие пробы крови, гамма-облучение части этой пробы in vitro, инкубацию облученной и необлученной частей пробы крови, окрашивание ДНК-компонентов обеих частей крови ДНК-специфичным флуоресцентным красителем, определение количества лейкоцитов в облученной части пробы крови, количества лейкоцитов в необлученной части пробы крови, окрашивание всех ДНК-содержащих компонентов крови, определение ИДо - количества ДНК во всех ДНК-содержащих компонентах крови в расчете на один лейкоцит облученной части пробы и ИДн - количества ДНК во всех ДНК-содержащих компонентах крови в расчете на один лейкоцит необлученной части пробы, вычисление ИДн/ИДо, берут дополнительную пробу крови, в которую вводят водный раствор, содержащий ионы двухвалентного железа в концентрации 50-75 мг/л в объеме 8-14% от объема пробы крови, затем инкубируют дополнительную пробу крови в течение 15-30 минут, после чего осуществляют гамма-облучение части дополнительной пробы, далее инкубируют облученную и необлученную части дополнительной пробы в течение 2,5-3,5 часов, определяют количество лейкоцитов в облученной и необлученной частях дополнительной пробы, окрашивают все ДНК-содержащие компоненты частей дополнительной пробы и определяют ИДо доп - количество ДНК во всех ДНК-содержащих компонентах дополнительной пробы в расчете на один лейкоцит облученной части пробы и ИДн доп - количество ДНК во всех ДНК-содержащих компонентах в расчете на один лейкоцит необлученной части дополнительной пробы, после чего вычисляют соотношение ИДн доп/ИДо доп и при ИДн доп/ИДо доп>ИДн/ИДо на 20-35% и ИДН/ИД0>1 считают показанным проведение лучевой терапии. Изобретение обеспечивает повышение эффективности способа при определении показаний к проведению ЛТ у опухоленосителей глиобластом. 2 пр.