Способ экспресс-прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды

Авторы патента:

 


Владельцы патента RU 2491349:

Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора) (RU)
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Астраханская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО АГМА Минздравсоцразвития России) (RU)

Определяют количества аэрозольных частиц с диаметром 0,3 мкм, 0,5 мкм и 1,0 мкм в единице объема воздуха с использованием счетчика аэрозольных частиц. Рассчитывают прогнозируемую общую микробную обсемененность воздушной среды по формуле: Y=0,0003(n0,5+n1,0)-1,2, по меньшей мере, при одном из условий n0,3≤2,95n0,5 и/или n0,5≤3,99n1,0, где: Y - прогнозируемая общая микробная обсемененность воздушной среды, КОЕ на единицу объема воздуха; n0,3 - количество аэрозольных частиц диаметром 0,3 мкм в единице объема воздуха; n0,5 - количество аэрозольных частиц диаметром 0,5 мкм в единице объема воздуха; n1,0 - количество аэрозольных частиц диаметром 1,0 мкм в единице объема воздуха; 0,0003; 2,95 и 3,99 - коэффициенты; 1,2 - корректирующая безразмерная величина. Изобретение позволяет уменьшить продолжительности анализа при экспресс-прогнозе общей микробной обсемененности воздушной среды до 5 мин. 1 табл., 4 пр.

 

Изобретение относится к способам контроля уровня микробной обсемененности воздушной среды.

Известным способом контроля уровня бактериальной обсемененности воздушной среды является определение общего количества микроорганизмов в 1 м3 воздуха (КОЕ/м3) (СанПиН 2.1.3.2630-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к организациям, осуществляющим медицинскую деятельность»). При этом более расширенным термином является «микробная обсемененность» (МУ 2.1.4.1057-01 «Организация внутреннего контроля качества санитарно-микробиологических исследований воды»).

Согласно известному способу производят забор определенного объема исследуемого воздуха с использованием различных приборов, обеспечивающих равномерное распределение частиц на поверхности питательных сред (авторское свидетельство SU 1303611 от 15.04.87; авторское свидетельство SU 1546481 от 28.02.90; авторское свидетельство SU 1620476 от 15.01.91; МУК 4.2.734-99 «Микробиологический мониторинг производственной среды»; МУ 2.1.4.1057-01; МУК 4.2.1089-02 «Использование установки обеззараживания воздуха УОВ «Поток 150-М-01» и контроль микробной обсемененности воздуха при ее работе»), с последующими выделением, посевом, культивированием, идентификацией и подсчетом в единице объема воздуха количества микроорганизмов.

Основными существенными недостатками известных способов являются сложность большая продолжительность определения уровня микробной обсемененности воздушной среды (не менее двух суток) и непригодность для экспресс-прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды.

Наиболее близким аналогом - прототипом заявляемого технического решения является способ оценки бактериальной контаминации воздуха при микробиологическом мониторинге окружающей среды при производстве медицинских иммунобиологических препаратов (МУК 4.2.734-99). Согласно известному техническому решению производят забор определенного объема исследуемого воздуха с использованием различных приборов, удовлетворяющих по диапазону пробоотбора требованиям, предъявляемым уровню допустимой контаминации к классам чистоты А, В (100), С (10000) и D (100000), с последующими выделением, посевом, культивированием, идентификацией и подсчетом в единице объема воздуха количества микроорганизмов. Для репрезентативной оценки бактериальной нагрузки воздушной среды при использовании известного технического решения необходимо соблюдение целого ряда условий, например: объем пробы воздуха должен быть достаточным как для обнаружения микроорганизмов в заданном объеме воздуха, так и для роста дискретных и пригодных к подсчету колоний и устанавливается опытным путем, с учетом концентрации микроорганизмов в тестируемой зоне; питательная среда должна поддерживать рост широкого спектра микроорганизмов, включая дрожжи и грибы, ее ростовые свойства должны быть проверены соответствующими тест-штаммами; все выявленные в процессе мониторинга микроорганизмы подлежат макроскопической, микроскопической и биохимической идентификации.

Основными недостатками прототипа являются сложность и большая продолжительность (до двух суток) определения общей микробной обсемененности воздушной среды, что не позволяет проводить исследование в режиме реального времени (в виде экспресс-прогноза).

Главной задачей изобретения является обеспечение проведения в режиме реального времени экспресс-прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды.

Поставленная задача реализуется за счет того, что при экспресс-прогнозе уровня общей микробной обсемененности воздушной среды определяют количества аэрозольных частиц с диаметром 0,3 мкм, 0,5 мкм и 1,0 мкм в единице объема воздуха с использованием счетчика аэрозольных частиц, а затем рассчитывают прогнозируемую общую микробную обсемененность воздушной среды по формуле:

Y=0,0003(n0,5+n1,0)-1,2,

по меньшей мере, при одном из условий

n0,3≤2,95 n0,5 и/или n0,5≤3,99n1,0,

где: Y - прогнозируемая общая микробная обсемененность воздушной среды, КОЕ в единице объема воздуха;

n0,3 - количество аэрозольных частиц диаметром 0,3 мкм в единице объема воздуха;

n0,5 - количество аэрозольных частиц диаметром 0,5 мкм в единице объема воздуха;

n1,0 - количество аэрозольных частиц диаметром 1,0 мкм в единице объема воздуха;

0,0003; 2,95 и 3,99 - коэффициенты;

1,2 - корректирующая безразмерная величина.

Коэффициенты и корректирующая безразмерная величина, обеспечивающие информативность прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды обследуемого помещения, определены экспериментальным путем.

В основу заявляемого изобретения положена обеспечивающая решение поставленной задачи новая совокупность оригинальных отличительных признаков.

Впервые проводится прогноз уровня общей микробной обсемененности воздушной среды.

Впервые для определения прогнозируемой общей микробной обсемененности воздушной среды используются диаметры аэрозольных частиц и количества аэрозольных частиц определенных диаметров в единице объема воздуха. Использование для прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды определения в единице объема воздуха (1 м3) количества аэрозольных частиц диаметром 0,3 мкм, количества аэрозольных частиц диаметром 0,5 мкм и количества аэрозольных частиц диаметром 1,0 мкм, обусловлено тем, что в соответствии с полученными собственными результатами исследования соотношение количеств этих частиц коррелирует с микробной обсемененностью воздуха, а именно, при наличии микробной обсемененности воздуха количество частиц меньшего диаметра уменьшается, количество частиц большего диаметра увеличивается. Это, в свою очередь, связано с более выраженной адгезией живых микроорганизмов и их большими размерами по сравнению с неживыми в воздушной среде.

Впервые прогнозируемое общее количество микроорганизмов (КОЕ) в единице объема воздуха (прогнозируемая общая микробная обсемененность воздушной среды) рассчитывается по формуле, включающей показатели количества аэрозольных частиц диаметром 0,5 мкм и 1,0 мкм в единице объема воздуха с учетом соотношения количеств аэрозольных частиц диаметром 0,3 мкм, 0,5 мкм и 1,0 мкм в единице объема воздуха.

Из патентно-технической литературы и практики контроля уровня микробной обсемененности воздушной среды неизвестно о способе экспресс-прогноза уровня общей микробной обсемененности воздушной среды, который был бы идентичен заявляемому.

Отсюда правомерен вывод о соответствия заявляемого решения критерию «новизна».

Указанная выше совокупность существенных признаков необходима и достаточна для получения технического результата - обеспечения проведения в режиме реального времени экспресс-прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды. Между существующими признаками и решаемой задачей существует причинно-следственная связь, где каждый признак необходим и влияет на получение технического результата, а вместе взятые признаки достаточны для его получения. Правомерен вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию «изобретательский уровень».

Предлагаемый способ может быть реализован многократно с использованием присущих ему существенных признаков, а значит, заявляемое техническое решение соответствует критерию «промышленная применимость».

Заявляемое изобретение апробировано в условиях производства медицинских иммунобиологических препаратов. Ниже приводятся результаты этой апробации. При этом приведенные примеры экспресс-прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды показывают конкретную реализацию заявляемого изобретения, но не ограничивают объем притязаний формулы заявляемого изобретения.

Пример 1. Проводили экспресс-прогноз уровня общей микробной обсемененности воздушной среды помещения производства медицинских иммунобиологических препаратов класса чистоты «С» в оснащенном состоянии, то есть при неработающем технологическом оборудовании, при включенной вентиляции, но без присутствия обслуживающего персонала.

В качестве счетчика аэрозольных частиц был использован портативный счетчик частиц аэрозолей Solair 3100 фирмы Lighthouse Worldwide Solutions, США (Портативный счетчик частиц Solair 3100 // Cleanroom Instruments - «Клинрум Инструментс»: [сайт]. - URL: http://clri.ru/ftpgetfile.php?id=21 (дата обращения: 31.07.2011)).

Определяли количества аэрозольных частиц с диаметром 0,3 мкм, 0,5 мкм и 1,0 мкм в единице объема (1 м3) воздуха с использованием счетчика аэрозольных частиц Solair 3100. При этом количество аэрозольных частиц диаметром 0,3 мкм в единице объема воздуха (n0,3) составило 573525, количество аэрозольных частиц диаметром 0,5 мкм в единице объема воздуха (n0,5) составило 179227, а количество аэрозольных частиц диаметром 1,0 мкм в единице объема воздуха (n1,0) составило 43714.

Рассчитывали соотношения количеств аэрозольных частиц:

n0,3=573525≈3,2×179227=3,2n0,5>2,95n0,5;

n0,5=179227≈4,1×43714=4,1n1,0>3,99n1,0.

Учитывая отсутствие обоих условий для расчета прогнозируемой общей микробной обсемененности воздушной среды, расчет прогнозируемой общей микробной обсемененности воздушной среды не проводили, что явилось основанием для продолжения испытаний данного помещения в функционирующем состоянии.

Значение общей микробной обсемененности, полученное по известному методу (МУК 4.2.734-99), составило 7 КОЕ/м3.

Продолжительность экспресс-прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды помещения производства медицинских иммунобиологических препаратов составила 4 минуты.

Пример 2. В соответствии с примером 1 проводили экспресс-прогноз уровня общей микробной обсемененности воздушной среды помещения производства медицинских иммунобиологических препаратов класса чистоты «С» в функционирующем состоянии, то есть при работающем технологическом оборудовании, при включенной вентиляции и в присутствии обслуживающего персонала, одетого в нестерильную одежду.

Определяли количества аэрозольных частиц с диаметром 0,3 мкм, 0,5 мкм и 1,0 мкм в единице объема (1 м3) воздуха с использованием счетчика аэрозольных частиц Solair 3100. При этом количество аэрозольных частиц диаметром 0,3 мкм в единице объема воздуха (n0,3) составило 746850, количество аэрозольных частиц диаметром 0,5 мкм в единице объема воздуха (n0,5) составило 287250, а количество аэрозольных частиц диаметром 1,0 мкм в единице объема воздуха (n1,0) составило 95750.

Рассчитывали соотношения количеств аэрозольных частиц:

n0,3=746850≈2,6×287250-2,6n0,5<2,95n0,5;

n0,5=287250≈3,0×95750-3,0n1,0<3,99n1,0.

Учитывая наличие обоих условий для расчета прогнозируемой общей микробной обсемененности воздушной среды (n0,3≤2,95n0,5 и n0,5≤3,99n1,0), рассчитывали прогнозируемую общую микробную обсемененность воздушной среды по формуле:

Y=0,0003(n0,5+n1,0)-1,2,

где: Y - прогнозируемая общая микробная обсемененность воздушной среды, КОЕ на единицу объема воздуха (1 м3);

n0,3 - количество аэрозольных частиц диаметром 0,3 мкм в единице объема воздуха (1 м3);

n0,5 - количество аэрозольных частиц диаметром 0,5 мкм в единице объема воздуха (1 м3);

n1,0 - количество аэрозольных частиц диаметром 1,0 мкм в единице объема воздуха (1 м3);

0,0003; 2,95 и 3,99 - коэффициенты;

1,2 - корректирующая безразмерная величина.

Y2=0,0003(287250+95750) - 1,2≈114 (КОЕ/м3)

Рассчитанное значение прогнозируемой общей микробной обсемененности воздушной среды помещения производства медицинских иммунобиологических препаратов подтвердилось значением общей микробной обсемененности, полученным по известному методу (МУК 4.2.734-99), которое составило 109 КОЕ/м3.

В связи с превышением значения общей микробной обсемененности воздушной среды максимально допустимого количества живых микроорганизмов в помещении класса чистоты «С» (МУ-44-116 департамента ГСЭН Минздрава России) эксплуатация данного помещения производства медицинских иммунобиологических препаратов прекращена.

Продолжительность экспресс-прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды помещения производства медицинских иммунобиологических препаратов составила 5 минут.

Пример 3. В соответствии с примером 1 проводили экспресс-прогноз уровня общей микробной обсемененности воздушной среды помещения производства медицинских иммунобиологических препаратов класса чистоты «С» в функционирующем состоянии, то есть при работающем технологическом оборудовании, при включенной вентиляции и в присутствии обслуживающего персонала, одетого в стерильную одежду.

Определяли количества аэрозольных частиц с диаметром 0,3 мкм, 0,5 мкм и 1,0 мкм в единице объема (1 м3) воздуха с использованием счетчика аэрозольных частиц Solair 3100. При этом количество аэрозольных частиц диаметром 0,3 мкм в единице объема воздуха (n0,3) составило 685125, количество аэрозольных частиц диаметром 0,5 мкм в единице объема воздуха (n0,5) составило 228375, а количество аэрозольных частиц диаметром 1,0 мкм в единице объема воздуха (n1,0) составило 78750.

Рассчитывали соотношения количеств аэрозольных частиц:

n0,3=685125=3,0×228375=3,0n0,5>2,95n0,5;

n0,5=228375=2,9×78750=2,9n1,0<3,99n1,0.

Учитывая наличие одного из условий для расчета прогнозируемой общей микробной обсемененности воздушной среды (n0,5≤3,99n1,0), рассчитывали прогнозируемую общую микробную обсемененность воздушной среды по формуле:

Y=0,0003(n0,5+n1,0)-1,2,

где: Y - прогнозируемая общая микробная обсемененность воздушной среды, КОЕ на единицу объема воздуха (1 м3);

n0,3 - количество аэрозольных частиц диаметром 0,3 мкм в единице объема воздуха (1 м3);

n0,5 - количество аэрозольных частиц диаметром 0,5 мкм в единице объема воздуха (1 м3);

n1,0 - количество аэрозольных частиц диаметром 1,0 мкм в единице объема воздуха (1 м3);

0,0003; 2,95 и 3,99 - коэффициенты;

1,2 - корректирующая безразмерная величина.

Y2=0,0003(228375+78750) - 1,2≈91 (КОЕ/м3)

Рассчитанное значение прогнозируемой общей микробной обсемененности воздушной среды помещения производства медицинских иммунобиологических препаратов подтвердилось значением общей микробной обсемененности, полученным по известному методу (МУК 4.2.734-99), которое составило 83 КОЕ/м3.

В связи с отсутствием превышения значения общей микробной обсемененности воздушной среды максимально допустимого количества живых микроорганизмов в помещении класса чистоты «С» (МУ-44-116 департамента ГСЭН Минздрава России) эксплуатация данного помещения производства медицинских иммунобиологических препаратов разрешена.

Продолжительность экспресс-прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды помещения производства медицинских иммунобиологических препаратов составила 5 минут.

Пример 4. Неоднократное сопоставление результатов экспресс-прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды помещений по заявляемому способу и по известному методу (МУК 4.2.734-99) показало достаточную информативность экспресс-прогноза при использовании заявляемого способа. Часть данных исследований приведена в таблице.

№ п/п Показатели для расчета прогнозируемой общей микробной обсемененности воздушной среды Прогнозируемая общая микробная обсемененность воздушной среды, КОЕ/м3 (Y) Общая микробная обсемененность, полученная по МУК 4.2.734-99, КОЕ/м3
Количество частиц 0,3 мкм в 1 м3 воздуха (n0,3) Количество частиц 0,5 мкм в 1 м3 воздуха(n0,5) Количество частиц 1,0 мкм в 1 м3 воздуха(n1,0) Соответствие условиям n0,3≤2,95n0,5 и/или n0,5<3,99n1,0
1. 573525 179227 43714 Нет Не рассчитывалась 7
2. 746850 287250 95750 Да 114 109
3. 685125 228375 78750 Да 91 83
4. 802345 323491 94264 Да 124 127
5. 665411 229452 58833 Да 85 83
6. 667516 230178 59021 Да 86 82
7. 952735 398703 107619 Да 151 146
8. 536415 166723 39641 Нет Не рассчитывалась 8
9. 663711 228566 58684 Да 84 80
10. 667346 230119 59005 Да 85 81
11. 665689 229548 58858 Да 85 81
12. 663474 228784 58663 Да 85 80
13. 667258 230089 58997 Да 86 82
14. 665486 229478 58841 Да 85 81
15. 664051 228983 58714 Да 85 80
Примечания:
1) номера пунктов соответствуют номерам экспериментов;
2) строки 1, 2 и 3 соответствуют примерам 1, 2 и 3;
3) количества аэрозольных частиц диаметром 0,3 мкм, 0,5 мкм и 1,0 мкм определялись с использованием счетчика аэрозольных частиц Solair 3100;
4) забор проб для определения общей микробной обсемененности по МУК 4.2.734-99 производился с использованием пробоотборника биологически активных частиц ActivCjunt 90C.

Таким образом, в примерах показаны преимущества заявляемого технического решения по сравнению с прототипом, заключающиеся в обеспечении проведения в режиме реального времени экспресс-прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды на основе приборного контроля при упрощении и уменьшении продолжительности анализа при использовании заявляемого способа.

Способ экспресс-прогноза общей микробной обсемененности воздушной среды, характеризующийся тем, что определяют количества аэрозольных частиц с диаметром 0,3 мкм, 0,5 мкм и 1,0 мкм в единице объема воздуха с использованием счетчика аэрозольных частиц, а затем производят расчет прогнозируемой общей микробной обсемененности воздушной среды по формуле:
Y=0,0003(n0,5+n1,0)-1,2,
по меньшей мере, при одном из условий
n0,3≤2,95n0,5 и/или n0,5≤3,99n1,0,
где Y - прогнозируемая общая микробная обсемененность воздушной среды, КОЕ на единицу объема воздуха;
n0,3 - количество аэрозольных частиц диаметром 0,3 мкм в единице объема воздуха;
n0,5 - количество аэрозольных частиц диаметром 0,5 мкм в единице объема воздуха;
n1,0 - количество аэрозольных частиц диаметром 1,0 мкм в единице объема воздуха;
0,0003; 2,95 и 3,99 - коэффициенты;
1,2 - корректирующая безразмерная величина.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в производстве биопрепаратов. .

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, в частности к применению метода электрофоретического анализа для технологического контроля полноты инактивации убитых вакцин при использовании в качестве инактиватора сернокислой меди и предназначен для использования при производстве убитых вакцин в биологической промышленности и ветеринарии.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу изменения иммуномодулирующих свойств липополисахаридов чумного микроба в условиях in vitro, который включает получение препаратов липополисахаридов (ЛПС) и «мышиного» токсина (МТ) Yersinia pestis с последующим образованием их комплекса ЛПС-МТ.

Изобретение относится к способу обнаружения и подсчета жизнеспособных микроорганизмов вида Legionella pneumophila в образце. .
Изобретение относится к области биохимии. .
Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и предназначено для обнаружения нейтрофильных внеклеточных ловушек экспресс-методом с количественной оценкой данного явления.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу измерения длины теломер в клетках. .

Изобретение относится к области токсикологии и санитарно-гигиенических измерительных технологий, а именно к способам измерения и испытания с использованием жизнеспособных микроорганизмов.
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для проведения экологического мониторинга жилых и производственных помещений с целью одновременного количественного определения общей бактериальной обсемененности и получения культуральных, морфологических, тинкториальных и гемолитических характеристик микробного сообщества образцов пыли помещений.

Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии, пищевой и промышленной биотехнологии. .

Настоящее изобретение относится к области микробиологии и касается способа быстрого выращивания, детекции и идентификации или подсчета микроколоний микроорганизмов ранней стадии. Описанный способ включает стадии: получение контейнера со средой с пористым элементом, расположенным сверху или под верхней поверхностью среды, причем среда имеет питательные вещества для быстрого роста микроколоний микроорганизмов, и причем пористый элемент имеет поры от 1000 до 107 Да; вливание жидкого образца, не подвергнутого серийным разведениям, в контейнер в область выше пористого элемента; улавливание микроорганизмов в пористом элементе или на среде выше пористого элемента; инкубация контейнера на время, достаточное для быстрого роста микроколонии ранней стадии; перенос пористого элемента и любой среды выше него из контейнера во вторичную среду для оценки, детекции и идентификации микроорганизмов; и исследование микроколоний в отношении роста, детекции, идентификации или подсчета микроорганизмов, причем указанный способ выращивания, детекции и идентификации или подсчета микроорганизмов занимает не более чем приблизительно шесть часов. Представленное изобретение позволяет более быстро, эффективно и менее дорого идентифицировать общее количество жизнеспособных микроколоний микроорганизмов, их идентифицировать и дифференцировать, а также может быть использовано для идентификации антибиотикоустойчивых микроорганизмов. 6 з.п. ф-лы, 10 ил.
Изобретение относится к санитарной и клинической микробиологии и может быть использовано для обнаружения и учета Е.coli и колиформных бактерий в воде, пищевых продуктах, клиническом материале и т.д. Питательная среда содержит панкреатический гидролизат рыбной муки, высушенный с тергитолом 7 из расчета 0,1 г тергитола 7 на 6 г сухого панкреатического гидролизата рыбной муки, дрожжевой экстракт, Д (+) лактозу, 1- водную, бромтимоловый синий, натрий додецилсульфат, 2,3,5-трифенилтетразолия хлорид, натрий углекислый и микробиологический агар в заданном соотношении. Изобретение позволяет сохранить стерильность питательной среды в течение 10 суток, повысить точность дифференциации колиформных бактерий и Е.coli и упростить способ приготовления питательной среды. 2 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицинской микробиологии и микробиологической промышленности и может быть использовано для обнаружения колиформных бактерий и Е.coli в образцах пищевых продуктов и воды при проведении бактериологических исследований. Питательная среда содержит в качестве источника азота мясной пептон или панкреатический гидролизат рыбной муки, натрий хлористый, натрий фосфорнокислый двузамещенный, калий фосфорнокислый однозамещенный, натрий пировинограднокислый, L-триптофан, натрий додецилсульфат, 6-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозид (Salmon - GAL), 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид (X-GLUC), изопропил- β-D1-тиогалактопиранозид и микробиологический агар в заданном соотношении. Изобретения позволяет сократить время идентификации, повысить точность дифференциации колиформных бактерий и Е.coli и упростить способ приготовления питательной среды.2 н.з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к биохимии и молекулярной биологии. Проводят консервацию клеток Escherichia coli в присутствии забуференного 80-90% глицерина. Снимают клеточные оболочки 3% тритоном Х-100. Последовательно экстрагируют клеточные супрамолекулярные структуры возрастающими концентрациями солей: 0,14 М (бактериоплазма), 0,35 М (непрочно связанные с клеточным остатком), 2 М NaCl (прочно связанные с клеточным остатком), 6 М гуанидин гидрохлоридом с 0,1% β-меркаптоэтанолом (клеточный остаток). Проводят кислотный гидролиз в вышеперечисленных фракциях. Проводят антроновый метод, предварительно очистив препарат антрон. Строят калибровочный график и определяют количество гексоз с помощью расчетной формулы. Изобретение позволяет определить количество гексоз в супрамолекулярных структурах бактериальной клетки Escherichia coli. 3 ил., 3 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа количественного определения фиксированного вируса бешенства штамма «Москва 3253». Способ предусматривает обеззараживание и выделение РНК из вируссодержащего материала, постановку реакции обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентным учетом результатов в режиме «реального времени» с использованием специфичных праймеров RV5-5'-GTTGGGCACTGAAACTGCTA-3', RV6-5'-GAATCTCCGGGTTCAAGAGT-3' и зонда RV7-5'-ROX-AATCCTCCTTGAACTCCATGCGACAGA-BHQ2. Количественную оценку вируса определяют на основании регистрации сигнала флуоресценции исследуемого образца и сравнения его с сигналом флуоресценции ПЦР-стандартов, содержащих различные количества ДНК-мишеней. Предложенный способ позволяет определить количественное содержание вируса в рабическом антигене органо-тканевого и культурального происхождения. Использование изобретения способствует стандартизации этапа приготовления рабического антигена в производстве гетерологичного антирабического иммуноглобулина. 2 табл., 3 ил., 2 пр.
Наверх