Способ прогнозирования развития репродуктивных нарушений



Способ прогнозирования развития репродуктивных нарушений

 


Владельцы патента RU 2495431:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Оренбургская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО ОрГМА Минздравсоцразвития России) (RU)

Изобретение относится к медицине, в частности к способу прогнозирования развития репродуктивных нарушений. Сущность способа состоит в том, что у мужчин исследуют эякулят, а у женщин - цервикальное отделяемое на десятый день менструального цикла, в качестве параметров определяют уровни интерлейкина 1 бета и интерферона гамма одновременно. При содержании интерлейкина 1 бета больше 38,8±3,8 пг/мл и одновременном содержании интерферона гамма больше 8,1±0,5 пг/мл прогнозируют формирование репродуктивных нарушений. Использование заявленного способа позволяет заблаговременно выявить развивающуюся инфертильность и осуществлять скрининговые обследования. 2 табл., 5 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно, к урологии, дерматовенерологии, акушерству и гинекологии и может применяться для раннего прогнозирования бесплодия.

Актуальность прогнозирования репродуктивных нарушений при урогенитальных микробных воспалениях обусловлена тревожной ситуацией, связанной с увеличением частоты бесплодных браков во всем мире, достигшей 15%. В равной мере распространено как женское, так и мужское бесплодие, составляющее по (30-60) % (Лопаткин Н.А. 2009). Известно, что снижение качества спермы обусловливает вторичное, то есть вызванное приобретенными заболеваниями, мужское бесплодие. В последние 50 лет в большинстве развитых стран мира отмечено снижение качества спермы у мужчин фертильного возраста. Подобная статистика является следствием воздействия экологических, в том числе антропогенных (вредное производство, курение, алкоголь), факторов, гормональных дисфункций, травм. Женское вторичное бесплодие обусловлено, в основном, теми же причинами.

Наряду с указанными, одной из частых причин ухудшения состояния репродуктивной системы мужчин и женщин, являются воспалительные заболевания урогенитального тракта микробной этиологии, распространенные среди населения репродуктивного возраста (Семенов А.В. с соавт., 2009). Это в полной мере относится к микробным уретритам, простатитам, эндоцервицитам и аднекситам (Божедомов В.А. с соавт., 2005; Battaglia С. et all., 2000).

Современной особенностью течения воспалительных урогенитальных микробных заболеваний является доминирование латентных рецидивирующих вялотекущих форм, при которых, несмотря на наличие слабого болевого синдрома, умеренной дизурии и расстройства сексуальной функции, сохраняется относительное субъективное благополучие. Вместе с тем, отсутствие клинических симптомов не исключает, а иногда и способствует (из-за отсутствия явной необходимости обращения к врачу) прогрессированию заболевания и развитию осложнений, в частности, бесплодия.

Следует отметить, что этиологическими агентами урогенитальной патологии могут являться как облигатные патогены (такие, как возбудители гонореи, трихомоноза, урогенитального хламидиоза, генитального герпеса, аногенитальных бородавок), так и другие инфекционные агенты, которые также могут передаваться при половых контактах (микоплазмы, уреаплазмы, представители семейств Enterobacteriaceae, грибы рода Candida и т.д.). В последние годы появились новые данные о патогенности микробных агентов, вследствие чего к возбудителям инфекций, передаваемых преимущественно половым путем (ИППП) стали относить микроорганизмы, которые ранее рассматривались как условно-патогенные. Многими современными исследователями отмечается, что в настоящее время патологические состояния мочеполового тракта чаще всего носят полимикробный характер и связаны с участием в воспалительном процессе ассоциаций патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, что влияет на характер и тяжесть течения воспалительного процесса. Поэтому, даже после проведения стандартного курса антимикробной терапии, сохраняется условно-патогенная микрофлора с измененными свойствами, которая участвует в поддержании воспаления, например, постгонорейного негонококкового уретрита.

В алгоритме обследования для установления диагноза «бесплодие» отсутствие микробиологически подтвержденного инфекционного процесса является основанием для исключения микробной этиологии инфертильности у пациентов. Это способствует тому, что ранние этапы формирования нарушений репродуктивной функции вследствие инфекционного агента остаются незамеченными, а применяемые методики фиксируют наличие уже имеющихся нарушений репродуктивной способности у пар, не имеющих успешного зачатия в течение 12 месяцев и более, при условии отсутствия контрацепции (Тиктинский О.Л., 1990).

Уровень техники

Известен традиционный способ диагностики мужского бесплодия путем макро- и микроскопической оценки качества спермы с определением количества сперматозоидов в 1 мл эякулята, с учетом подвижности сперматозоидов, доли морфологически измененных форм и концентрации лейкоцитов (SU 1330567, 15.08.1987).

Недостатком способа является то, что количественные и функциональные изменения в составе спермы являются достаточно поздним критерием сформировавшегося, зачастую малообратимого, бесплодия, что делает невозможным его применение для прогнозирования и ухудшает эффективность проводимой коррекции.

Известен способ диагностики нарушения репродуктивной функции у мужчин, включающий исследование биологической жидкости путем проведения иммуноферментного анализа, определения концентрации антител, специфических к компонентам мужских репродуктивных тканей, выраженной в единицах оптической плотности (ОП), при котором в качестве биологической жидкости исследуют сыворотку крови пациента, в качестве компонентов мужских репродуктивных тканей используют ядерный антиген пахитенных сперматоцитов грызунов и при значении ОП, равной или превышающей 0,37, диагностируют наличие нарушения репродуктивной функции у мужчин (RU 2419097, 20.05.2011).

Однако описанный способ позволяет поставить диагноз только при аутоиммунном бесплодии, что является его недостатком. Недостатком способа также является невозможность ранней диагностики бесплодия.

Известен способ диагностики патологии женской репродуктивной функции, включающий отбор и исследование околоплодных вод на провоспалительные цитокины ("Актуальные проблемы невынашивания беременности /Цикл клинических лекций под редакцией д.м.н., профессора, заслуженного деятеля науки РФ Сидельниковой В.М.", М, // Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН, отделение терапии и профилактики невынашивания беременности, 2001, с.61).

Недостатками этого способа являются его длительность, опасность для развивающегося плода, применение для диагностики только у женщин уже имеющих беременность (невозможность применения для прогнозирования бесплодия).

В диагностике женского бесплодия известен способ диагностики генеративной потенции яичников, заключающийся в приготовлении гистологических срезов ткани яичников и определении доли половых клеток каждой стадии от числа всех подсчитанных гамет и сравнении с контрольными индексами (RU 2367949, 20.09.2009).

Недостатками данного способа являются травматичность (взятие биопсии), трудоемкость и необходимость операционной для выполнения метода. Недостатком способа является и то, что диагностируется уже сформировавшаяся патология ткани яичников, то есть этим способом невозможно осуществить прогнозирование репродуктивных нарушений..

Известен способ прогнозирования невынашивания беременности при урогенитальной инфекции (RU 2341799, 20.12.2008) путем определения в биологической жидкости уровня интерлейкина двенадцать (ИЛ-12), отличающийся тем, что в слизи цервикального канала определяют уровень ИЛ-12 и при его значениях 102,0 пг/мл и выше прогнозируют высокий риск невынашивания беременности в 1 и 2 триместре.

Недостатком способа является то, что он разработан для прогнозирования нарушения репродуктивной функции уже у беременных женщин и не позволяет оценить риск раннего нарушения репродукции (зачатия).

Наиболее близким по совокупности признаков и достигаемому эффекту к предлагаемому способу является способ диагностики мужского бесплодия по уровню лизоцима (SU 1601576, 23.10.1990). Способ заключается в том, что в эякуляте определяют уровень лизоцима и при содержании лизоцима в сперме 2,4 мкг/мл и менее диагностируют мужское бесплодие. Данный способ взят в качестве прототипа

В указанном способе также оценивается биологическая жидкость, в которой определяют концентрацию фактора местного иммунитета. Однако этот метод имеет ряд существенных недостатков. Этот способ позволяет выявить только значительные изменения в составе эякулята, не регистрируя предикторов нарушения качества семенной жидкости, что является его недостатком. Лизоцим является бактерицидным фактором секрета слизистой оболочки и может служить показателем уже развившегося воспаления. Между тем, абсолютно необходимой является ранняя диагностика развивающихся репродуктивных нарушений, так как от этого напрямую зависит тактика и успешность лечения. Другим недостатком данного способа является то, что он не предназначен для оценки фертильной способности женщин.

Задача изобретения

Задача изобретения - обеспечение возможности прогнозирования развития вторичного бесплодия, как у мужчин, так и у женщин при урогенитальных заболеваниях микробной этиологии.

Новизной предлагаемого способа является то, что раннее прогнозирование достигается за счет одновременного оценивания содержания в биологической жидкости интерлейкина 1 бета (ИЛ-1β) и интерферона гамма (IFN-γ), поскольку они являются информативными критериями формирования инфертильности.

Предлагаемый способ неизвестен из уровня техники, следовательно, является новым.

Раскрытие изобретения

Существенным отличием предлагаемого изобретения является то, что в качестве биологической жидкости у мужчин исследуют эякулят, а у женщин - цервикальное отделяемое на десятый день менструального цикла, в качестве параметров местного иммунитета определяют уровни интерлейкина 1 бета и интерферона гамма и при содержании интерлейкина 1 бета больше 38,8±3,8 пг/мл и одновременном содержании интерферона гамма больше 8,1±0,5 пг/мл прогнозируют формирование репродуктивных нарушений.

Технический результат

Технический результат, достигаемый при решении поставленной задачи, выражается в раннем выявлении мужчин и женщин, относящихся к группе риска по формированию вторичного, инфекционно обусловленного, бесплодия при отсутствии выраженных клинических симптомов воспаления. С его помощью возможно прогнозирование нарушений репродуктивной функции, а не констатация уже развившегося бесплодия, а так же то, что прогнозирование нарушений репродуктивной функции возможно не только у мужчин, но и у женщин, при этом оценивается не один, а два диагностических маркера, причем оценивается не бактерицидный фактор, а регуляторы (ИЛ-1β и IFN-γ) развития воспалительного процесса, при котором возможно принятие превентивных мер по обеспечению возможности успешной реализации репродуктивной функции. Этот способ позволяет заблаговременно выявить развивающуюся инфертильность, пока еще нарушения репродуктивной функции легче поддаются коррекции. Так же предложенный способ обеспечивает возможность скринингового обследования большого количества пациентов обоего пола, а именно раннее прогнозирование нарушений фертильности позволяет предпринять определенные мероприятия по предупреждению развития осложнений, запущенных форм заболевания и, следовательно, улучшить качество и своевременность лечения, уменьшив материальные затраты на терапию.

Новыми признаками заявляемого способа являются:

- прогнозируют развитие репродуктивных нарушений в ранние сроки;

- прогнозирование репродуктивных нарушений возможно как у мужчин, так и у женщин;

- оценивают регуляторы развития воспалительного процесса ИЛ-1β и IFN-γ;

- определяют одновременное содержание ИЛ-1β и содержание IFN-γ в биологической жидкости;

- в качестве биологической жидкости используют не только эякулят у мужчин, но и цервикальное отделяемое на 10-й день менструального цикла у женщин;

- прогнозируют развитие репродуктивных нарушений у пациента при одновременном содержании ИЛ-1β больше 38,8±3,8 пг/мл и содержании IFN-γ больше 8,1±0,5 пг/мл.

Наличие первого признака в заявляемом способе позволяет осуществить раннее прогнозирование развития репродуктивных нарушений, что затем позволяет своевременно осуществить коррекцию нарушений, пока они не приобрели необратимый характер. Практика ведения пациентов показала, что раннее лечение патологии репродуктивной функции является более эффективным и позволяет избежать социальных и экономических потерь.

Второй новый признак позволяет использовать предлагаемый способ для прогнозирования репродуктивных нарушений у лиц обоего пола, расширяя, таким образом, область применения способа по сравнению со способом-прототипом.

Третий новый признак позволяет оценивать самые ранние из диагностических маркеров - регуляторы воспалительной реакции, что так же обеспечивает прогнозирование бесплодия в ранние сроки.

Четвертый новый признак в заявляемом способе позволяет выявить новые более информативные признаки для прогнозирования формирования бесплодия, что в итоге позволяет осуществить ранний прогноз. Наблюдения показали, что интерлейкин 1 бета и интерферон гамма коррелируют с развитием инфертильности.

Пятый новый признак в заявляемом способе позволяет осуществить второй новый признак.

Шестой новый признак позволяет уточнить третий и четвертый новые признаки, за счет установления одновременного наличия двух граничных значений: уровня интерлейкина 1 бета и уровня интерферона гамма. Каждый из этих факторов косвенно отражает формирование бесплодия у пациента, а вместе эти факторы в итоге позволяют при простой реализации осуществить ранний и точный прогноз.

Новая совокупность признаков позволяет при осуществлении заявляемого изобретения получить новый технический результат, который состоит в том что, выявив ранние прогностические признаки развивающегося бесплодия, можно осуществить адекватный индивидуальный подход к курации пациентов и вовремя провести полноценное лечение.

Осуществление изобретения

В основу предлагаемого способа положено новое знание, полученное в результате лабораторного исследования изменения содержания факторов местного иммунитета, а именно интерлейкина 1 бета и уровня интерферона гамма в секрете урогенитального тракта мужчин и женщин при воспалительных заболеваниях гениталий, вызывающих бесплодие.

Авторы впервые обнаружили, что у пациентов перенесших урогенитальную инфекцию или имеющих латентную урогенитальную инфекцию с формирующимся вторичным микробно обусловленным бесплодием, но не имеющих первичного, эндокринного, аутоиммунного или травматического-бесплодия, в секретах урогенитального тракта повышается уровень интерлейкина 1 бета и одновременно в секретах урогенитального тракта повышается уровень интерферона гамма по сравнению со здоровыми фертильными обследуемыми.

Исследования проведены у 86 пациентов перенесших урогенитальную инфекцию (контроль излеченности) или имеющих латентную урогенитальную инфекцию (46 мужчин и 40 женщин), проходивших обследование в Оренбургском областном центре планирования семьи, областном кожно-венерологическом диспансере и областном перинатальном центре. В исследование были включены женщины с ненарушенным 28-30 дневным менструальным циклом, цервикальное отделяемое забирали для исследования в первую фазу менструального цикла, а именно, на десятый день, чтобы избежать контаминации мукозы компонентами крови или тканей эндометрия, поскольку нормальное менструальное кровотечение может продолжаться до 7 суток. Забор материала во второй фазе менструального цикла не проводился так, как по данным литературы во второй фазе менструального цикла наблюдается закономерное повышение концентрации ИЛ-1β, IFN-γ и фактора некроза опухоли альфа (TNF α) связанное с физиологическим прорывом фолликула и не отражающего патологического процесса.

У пациентов в эякуляте или цервикальном отделяемом были зарегистрированы повышенные уровни интерлейкина 1 бета и интерферона гамма. В последующем у 37 мужчин и 31 женщины развилось вторичное, инфекционно обусловленное бесплодие.

На момент обследования пациентов не беспокоило отсутствие зачатия, но имелись жалобы на дискомфорт в половых органах, сухость слизистых оболочек, слабые непостоянные боли в паховой области и промежности.

Исследование эякулята и цервикального отделяемого на десятый день менструального цикла у пациентов включало определение ИЛ-1β, IFN-γ, определялся также уровень лизоцима по способу-прототипу и спермограмма.

С целью установления информативности показателей развития бесплодия была изучена корреляционная зависимость (Гланц С, 1998) между частотой развития в последующем бесплодия и некоторыми иммуноморфологическими показателей на момент первичного обследования (см. таблицу 1).

Приведенные в таблице 1 данные свидетельствуют о высокой информативности одновременно повышения концентрации ИЛ-1β и IFN-γ в эякуляте и цервикальном отделяемом для прогнозирования развития репродуктивных нарушений, так как другие рекомендуемые для диагностики бесплодия показатели достоверно не изменялись в столь ранние сроки обследования.

Таблица 1
Корреляция некоторых иммуноморфологических показателей с частотой развития вторичного бесплодия
Иммуноморфологические показатели Коэффициент ранговой корреляции Спирмена
Лизоцим 0,39*
ИЛ-1β 0,52**
IFN-γ 0,48**
ИЛ-1β и IFN-γ 0,72***
Спермограмма 0,30*
*** - сильная корреляционная связь
** - корреляционная связь средней силы
* - слабая корреляционная связь

Были определены граничные значения интерлейкина 1 бета и интерферона гамма.

Таблица 2
Соответствие уровней исследуемых показателей в биологических жидкостях мужчин и женщин частоте развития бесплодия.
Показатели местного иммунитета К о л и ч е с т в о п а ц и е н т о в , у к о т о р ы х р а з в и л о с ь б е с п л о д и е ( ч а с т о т а р а з в и т и я б е с п л о д и я ) О б щ е е к о л и ч е с т в о о б с л е д о в а н н ы х
Уровень ИЛ-1β, пг/мл Уровень IFN-γ, пг/мл
>38,8±3,8 >8,1±0,5 6 3 ( 9 2 , 6 5 % ) 6 8
≤38,8±3,8 >8,1±0,5 2 ( 2 , 9 4 % ) 6 8
≤38,8±3,8 ≤8,1±0,5 0 ( 0 % ) 6 8
>38,8±3,8 ≤8,1±0,5 3 ( 4 , 4 1 % ) 6 8

Из таблицы 2 видно, что точность прогнозирования при содержании ИЛ-1β больше 38,8±3,8 пг/мл и одновременном содержании IFN-γ больше 8,1±0,5 пг/мл составляет 92,65%. Изменение прогностического порога выше или ниже указанных величин нецелесообразно, ввиду снижения доли подтвержденных прогнозов.

Предлагаемый способ осуществляется следующим образом. Для проведения раннего прогнозирования развития репродуктивных нарушений проводится забор исследуемого материала (эякулята у мужчин, отделяемого цервикального канала у женщин). Пробы центрифугируют при 6000 об/мин в течение 15 мин, отбирают супернатант (надосадочную жидкость) и проводят необходимые разведения образцов с использованием растворов для разведения проб из комплектов наборов для проведения иммуноферментного анализа (ИФА-набор), с получением рабочего разведения анализируемого образца. Для определения уровня интерлейкина 1 бета выполняют разведение 1/1000, а для определения уровня интерферона гамма - 1/50. В соответствующие лунки планшетов с иммобилизированныим на внутренней стороне поверхности моноклональными антителами к интерлейкину 1 бета или интерферону гамма вносят в дубликатах по 100 мкл каждой калибровочной пробы (стандартные, прилагаются к ИФА-набору, используются для построения калибровочного графика), по 100 мкл контрольного образца и по 100 мкл анализируемых образцов в рабочем разведении. Планшеты инкубируют в течение 30 мин при температуре (37±1)°С. По окончании инкубации содержимое лунок удаляют и промывают рабочим промывочным раствором из ИФА-набора, после чего в каждую лунку вносят по 100 мкл рабочего раствора конъюгата из того же набора и инкубируют в течение 30 мин при температуре (37±1)°С. Затем содержимое лунок удаляют и промывают рабочим промывочным раствором из ИФА-набора. Во все лунки вносят по 100 мкл рабочего раствора тетраметилбензидина и инкубируют в темноте в течение 10-15 мин при температуре 18-25°С. Во все лунки вносят по 100 мкл стоп-реагента при этом содержимое лунок окрашивается в желтый цвет. Затем проводят измерение величины оптической плотности растворов на фотометре вертикального сканирования на длине волны 450 нм. В соответствии с калибровочной зависимостью определяют массовую концентрацию интерлейкина 1 бета в пг/мл и массовую концентрацию интерферона гамма в пг/мл.

При содержании ИЛ-1β больше 38,8±3,8 пг/мл и одновременном содержании IFN-γ больше 8,1±0,5 пг/мл прогнозируют формирование репродуктивных нарушений.

Примеры конкретного выполнения:

Пример 1. Больной А., 31 год, амбулаторная карта №3105 (2008 г.). Состоит в браке 3 месяца.

В анамнезе перенесенные заболевания: уреаплазмоз, хламидиоз. Проходил контроль излеченности. Уреаплазмы, хламидии не обнаружены. Уровень лизоцима в эякуляте - 4,7 мкг/мл. Спермограмма: объем эякулята -3,5 мл, серовато-белый, срок разжижения 25 минут, рН - 7,4, количество сперматозоидов в 1 мл эякулята - 105-106, общее количество сперматозоидов 402-106, активноподвижных - 75%, живые сперматозоиды - 91%, нормальные сперматозоиды - 94%, патологические формы - 4%, клетки сперматогенеза 1,0, лейкоциты 0,4-106.

ИЛ-1β - 40,1±2,9 пг/мл, INF-γ - 9,4±0,8 пг/мл.

Заключение: У пациента при отрицательных посевах на патогенную микрофлору, отсутствии отклонений от нормы в содержании лизоцима и в спермо-грамме обнаружено одновременное повышение уровней ИЛ-1β и INF-γ в эякуляте, превосходящее пороговые величины, указанные в предлагаемом способе прогнозирования развития репродуктивных нарушений. Больной оставался на курации. В 2009 году проходил обследование с жалобами на бесплодие - полтора гола. Женский фактор бесплодия исключен. У пациента обнаружено снижение уровня лизоцима до 2,1 мкг/мл, отклонения в сперматограмме-астенозооспермия.

Пример 2. Больной С, 36 лет, амбулаторная карта №3112 (2008 г.). Состоит в браке 8 лет. Дети: 1 ребенок 5 лет.

В анамнезе - перенесенный трихомониаз, гонорея. Проходил контроль излеченности. Микробиологическое обследование дало отрицательный результат, спермограмма-нормоспермия, уровень лизоцима - 5,3±0,9 мкг/мл, ИЛ-1β -39,7±2,5 пг/мл, INF-γ - 8,9±0,7 пг/мл.

Заключение: у пациента отмечено одновременное повышение ИЛ-β и INF-γ, превосходящее пороговые значения. Больной оставался на курации. В 2011 году пациент проходил обследование с жалобами на бесплодие в течение 3,5 лет. Женский фактор бесплодия исключен. У пациента в спермоплазме обнаружены антиспермальные антитела (АСАТ) и снижение уровня лизоцима до 1,7±0,2 мг/мл.

Пример 3. Больная Я., 27 лет, амбулаторная карта №3207 (2008 г.). Разведена. Дети: 1 ребенок. В анамнезе перенесенные урогенитальные инфекции - урогенитальный хламидиоз, гонорея. На контроле излеченности микробиологическое обследование дало отрицательный результат. Уровень ИЛ-1β - 40,3±3,0 пг/мл, INF-γ - 9,2±0,2 пг/мл. Больная оставалась на курации.

С 2011 года состоит в браке. Во втором браке - жалобы на бесплодие в течение 2 лет.Мужской фактор бесплодия исключен.

Пример 4. Больной Ж. 42, лет, амбулаторная карта №3121 (2008 г.). Состоит в браке 14 лет. Дети: 2 ребенка.

В анамнезе - перенесенный трихомониаз, гонорея, уреаплазмоз. Вызван для контроля излеченности. Микробиологическое обследование дало отрицательный результат, спермограмма - нормоспермия, уровень лизоцима 5,5±0,7 мкг/мл, ИЛ-1β - 37,2±2,8 пг/мл, INF-γ - 9,6±0,6 пг/мл. У пациента отмечено повышение INF-γ превосходящее пороговое значение, указанное в заявляемом способе, ИЛ-1β не был повышен. Больной находился на курации. В 2010 году в семье родился 3-й ребенок, т.е. фертильность мужчины не нарушена.

Пример 5. Больной В. 34 года, амбулаторная карта №3119 (2008 г.). Состоит в браке 2 года.

В анамнезе перенесенный хламидиоз. Проходил контроль излеченности. Хламидии не обнаружены. Спермограмма - нормоспермия. ИЛ-1р 30,8±0,4 пг/мл, INF-γ 5,6±0,8 пг/мл, т.е. уровни ИЛ-1β и INF-γ не повышены. Больной находился на курации. В браке в течение 4 лет появилось двое своих детей.

Данный способ раннего прогнозирования развития репродуктивных нарушений является современным, объективным, легко воспроизводимым. При обследовании больных, перенесших урогенитальную инфекцию, явившихся на контроль излеченности, или имеющих латентную урогенитальную инфекцию, можно своевременно и правильно определить вероятность развития репродуктивных нарушений у пациентов обоего пола и произвести коррекцию дальнейшего ведения пациента, повысив качество лечения и улучшив его результаты.

Литература, принятая во внимание

1. Лопаткин Н.А. Урология. Национальное руководство. // ГЭОТРАР-Медиа.-2009.-1024 с.

2. Семенов А.В., Иванов А.В., Пацановская Т.М. Пути преодоления неэффективности антибактериальной терапии хронического простатита. // Врач. - 2009. - №6. - С.63-65.

3. Божедомов В.А., Теодорович О.В. Эпидемиология и причины аутоиммунного мужского бесплодия. // Урология - 2005. - №1. - С.35-44.

4. Battaglia С.et al., Seminal plasma nitrite/nitrate and intratesticular Doppler flow in fertile and infertile subjects. Hum. Reprod., 2000. - vol. 15, №12. - P. 2554-2558.

5. Руководство по андрологии / под ред. О.Л.Тиктинского. - Л.: Медицина. - 1990.-416 с.

6. (19)SU (11)1330567, 15.08.1987 Способ диагностики мужского бесплодия

7. (19)RU (11)2419097, 20.05.2011 Способ диагностики нарушений репродуктивной функции у мужчин

8. Актуальные проблемы невынашивания беременности / Цикл клинических лекций под редакцией д.м.н., проф. Сидельниковой В.М. // Москва. -2001. -170 с.

9. (19)RU (11)2367949 20.09.2009 Способ диагностики генеративной потенции яичников

10. (19)RU (11)2341799 20.12.2008 Способ прогнозирования невынашивания беременности при урогенитальной инфекции

11. Прототип (19)SU (11)1601576 23.10.1990 Способ диагностики мужского бесплодия

12. Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. М.: Практика. -1998. -459 с.

Способ прогнозирования развития репродуктивных нарушений путем определения в биологических жидкостях параметров местного иммунитета, отличающийся тем, что в качестве биологической жидкости у мужчин исследуют эякулят, а у женщин - цервикальное отделяемое на десятый день менструального цикла, в качестве параметров местного иммунитета определяют уровни интерлейкина 1 бета и интерферона гамма и при одновременном содержании интерлейкина 1 бета больше (38,8±3,8) пг/мл и содержании интерферона гамма больше (8,1±0,5) пг/мл прогнозируют формирование репродуктивных нарушений.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки эффективности лечения ингибитором тирозинкиназ первого поколения иматинибом мезилатом (гливеком) хронического миелолейкоза.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано при прогнозировании развития внутриутробного инфицирования плода при гриппе A(H3N2) у женщин во втором триместре гестации с угрозой невынашивания беременности.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу динамической оценки состояния реципиента после трансплантации трупной печени. Сущность способа состоит в том, что проводят одновременное определение в периферической крови пациента процентного содержания циркулирующих стволовых гемопоэтических клеток CD34+ (СГК) и объемного содержания лимфоцитов (Лф, млн/мл), находят их индивидуальное отношение R по формуле R=ЛФ/СГК и строят кривую степенной зависимости R (ось ординат) от СГК (ось абсцисс), используя ее затем в качестве калибровочной кривой в системе двойных логарифмических координат, а для оценки состояния реципиента в текущий момент в его периферической крови определяют ЛФ и СГК, находят их отношение Rp, положение его в калибровочной системе координат.

Настоящее изобретение относится к области медицины и фармации, а именно к биохимии клеточных мембран человека, и описывает способ оценки влияния лекарственных веществ на проницаемость мембран эритроцитов по натрию с использованием определения скорости Na+-Li+-противотранспорта в мембране эритроцита, при котором измеряют скорость обмена внутриклеточного лития в загруженных этим ионом клетках на внеклеточный натрий из среды инкубации, причем исследуемое вещество вносят в среду 1-часовой инкубации, содержащую в мМ: 150 - NaCl; 10 - глюкозы; 10 - Hepes-Tris; 0,1 - уабаина, и по изменению величины скорости Na+-Li+-противотранспорта в мембране эритроцита судят о влиянии вещества на проницаемость клеточной мембраны по натрию.
Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, патологической анатомии, и может быть использовано для прогнозирования воспалительных осложнений после операций по поводу колоректального рака.
Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к получению эритроцитарного антительного диагностикума для индикации бруцелл в патматериале. Сущность изобретения включает способ получения эритроцитарного антительного диагностикума для реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) с целью индикации бруцелл в патматериале, посредством изготовления формалинизированных эритроцитов, с последующей сенсибилизацией позитивной бруцеллезной сывороткой, при этом для изготовления эритроцитарного антительного диагностикума позитивную бруцеллезную сыворотку для сенсибилизации формалинизированных эритроцитов разводят 1:50-1:100, инактивируют при 60°C в течение 30 минут, сенсибилизируют формалинизированные эритроциты, из расчета: осадок от 2 объемов 40%-ной взвеси эритроцитов барана, 1 объем 0,43-0,44% раствора свежеприготовленного амидола, 1,0-1,5 объем позитивной сыворотки, разведенной 1:50-1:100, и выдерживают в течение 28-32 минут при 55-56°C.

Изобретение относится к ветеринарии. Способ диагностики лептоспироза сельскохозяйственных животных, включающий определение наличия антител к антигенам семи серогрупп L.hebdomadis, L.pomona, L.tarassovi, L.grippotyphosa, L.canicola, L.sejroe и L.icterohaemorrhagiae в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа, отличающийся тем, что в качестве антигена применяют смешанные в равных количествах антигенные белки из лептоспир трех серогрупп - L.tarassovi, L.grippotyphosa и L.hebdomadis.

Изобретение относится к ветеринарии. Способ диагностики лептоспироза сельскохозяйственных животных, включающий определение наличия антител к антигенам семи серогрупп L.hebdomadis, L.pomona, L.tarassovi, L.grippotyphosa, L.canicola, L.sejroe и L.icterohaemorrhagiae в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа, отличающийся тем, что в качестве антигена применяют смешанные в равных количествах антигенные белки из лептоспир трех серогрупп - L.tarassovi, L.grippotyphosa и L.hebdomadis.

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ прогнозирования гематогенного метастазирования при диффузном типе рака желудка путем иммуногистохимического исследования препаратов первичной опухоли.
Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантологии и может быть использовано для прогнозирования развития необратимой дисфункции трансплантата у реципиентов после трансплантации сердца.

Группа изобретений относится к медицинской иммунологии, а именно к способу определения функциональной активности компонентов комплемента в сыворотке крови человека при диагностике ряда заболеваний и в биологических препаратах и набору для ее определения. Сущность способа в том, что в лунках микропанели сорбируют тромбин, как активатор компонента С4, затем вносят пробу, содержащую компонент С4 комплемента человека с неизвестной активностью, проводят инкубацию в присутствии ЭДТА, а затем вносят конъюгат фермента с антителами против компонента С4 человека и субстрат этого фермента, расчет активности компонента С4 проводят по количеству образовавшегося продукта ферментативной реакции. Набор для определения функциональной активности компонента С4 комплемента человека содержит плоскодонную микропанель с сорбированным тромбином, конъюгат фермента с антителами к компоненту С4 комплемента человека, субстратный буфер и донорскую сыворотку крови с известной активностью С4 в качестве стандарта. Группа изобретений позволяет определять функциональную активность компонента С4 системы комплемента человека и обладает хорошей воспроизводимостью результатов и отсутствием необходимости активации всей системы комплемента. 2 н.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к области медицины. Предложен набор реагентов для иммуноферментного определения антител к эндогенным биорегуляторам в сыворотке крови для выявления заболеваний зависимости методом двухстадийного иммуноферментного анализа в сыворотке крови человека in vitro. Набор включает 96-луночный разборный стрипованный планшет с нанесенными на его поверхность последовательно всеми конъюгатами из ряда: β-эндорфин, серотонин, дофамин, гистамин, орфанин и ангиотензин; а также емкости, содержащие положительные и отрицательные контрольные образцы, антивидовые антитела против иммуноглобулинов человека, меченные пероксидазой из корня хрена, фосфатно-солевой буферный раствор, содержащий твин-20, субстратный буферный раствор, раствор субстрата тетраметилбензидина и стоп-реагент. Изобретение обеспечивает повышение точности определения заболеваний зависимости, в том числе алкоголизма, наркомании, токсикомании, пищевой зависимости и гэмблинга (игромания), за счет использования набора из шести маркеров. 3 табл., 9 пр.

Изобретение относится к области медицины. Предложен набор для многопрофильного иммунологического анализа антител в препаратах крови. Набор включает подложку, которая представляет собой пластину в виде гребня, на поверхности каждого зубца которого дискретно нанесены антигены возбудителей вирусных инфекций и положительный контроль в виде иммуноглобулинов человека, в качестве отрицательного контроля один из сегментов зубца подложки оставлен свободным от специфических белков для оценки фоновых явлений, причем подложка дополнительно блокирована неспецифическими природными или синтетическими полимерами. В состав набора также входит емкость для проведения анализа, выполненная в виде многоячеистой аналитической ванны с возможностью введения каждого зубца подложки в отдельную ячейку ванны, растворы для отмывок, разведения образца и конъюгата, конъюгат и систему проявления. Изобретение обеспечивает усовершенствованную тест-систему для диагностики инфекционных заболеваний, в том числе для оценки у детей гуморального иммунитета к вакциноуправляемым вирусным инфекциям: кори, краснухе, эпидемическому паротиту и полиомиелиту. 6 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 2 пр.
Настоящее изобретение относится к клинической биохимии и описывает способ определения модифицированных липопротеинов низкой плотности (мЛПНП) в сыворотке (плазме) крови человека путем обработки буфером, содержащим поливинилпирролидон (ПВП) с последующей турбидиметрической регистрацией смеси, где обработку сыворотки или плазмы крови человека ведут 10% раствором ПВП-35000±5000 в 0,01 М Трис-HCl-буфере, рН 7,4, содержащем 0,15 М NaCl, при объемном соотношении сыворотка(плазма) : ПВП от (1:2) до (1:10), инкубируют 10 мин при комнатной температуре, измеряют светопоглощение в опытной и контрольной пробах, вычисляют разность между ними и при величине разности более 15 Е констатируют повышенный уровень атерогенных мЛПНП в крови и наличие атеросклеротического процесса у обследуемого человека. Использование простого, доступного и быстрого в осуществлении способа определения мЛПНП в крови человека позволяет проводить скрининговые обследования с целью выявления наличия атеросклеротического процесса на доклинической стадии и диспансеризацию населения. 5 пр., 5 табл.
Изобретение относится к области медицины, в частности гастроэнтерологии, а именно к способу прогнозирования развития избыточного бактериального роста в кишечнике у пациентов, перенесших холецистэктомию. Сущность способа состоит в том, что у пациентов, перенесших холецистэктомию, в сыворотке крови определяют уровень антител к миелопероксидазе. При уровне антител к миелопероксидазе свыше 200,0 Ед/мл прогноз развития избыточного бактериального роста в кишечнике считают положительным. Использование заявленного способа позволяет повысить точность и чувствительность прогнозирования развития бактериального роста в кишечнике у пациента, перенесшего холецистэктомию. 1 табл., 3 пр.
Настоящее изобретение относится к области аналитической химии и описывает способ высокочувствительного определения хлорамфеникола с помощью пьезокварцевого иммуносенсора, основанный на регистрации изменения частоты колебания сенсора в связи с изменением массы покрытия, включающий регенерацию рецепторного покрытия для проведения последующих определений, обеспечивая многократное использование сенсора, где на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора наносят рецепторное покрытие на основе хлорамфеникол-белкового конъюгата (соевый трипсиновый ингибитор), к пробе добавляют фиксированное количество антител к хлорамфениколу и выдерживают в течение 5-10 мин при 20°С до образования иммунокомплекса, вводят в проточно-инжекторную ячейку и регистрируют изменение частоты колебания сенсора при взаимодействии хлорамфеникол-белкового конъюгата с несвязавшимися антителами к хлорамфениколу, аналитический отклик сенсора обратно пропорционален концентрации хлорамфеникола в анализируемом растворе, концентрацию определяют по градуировочному графику, регенерацию рецепторного покрытия осуществляют пропусканием 0,04 mM раствора тиоционата калия над поверхностью электрода сенсора. Способ позволяет проводить определение содержания хлорамфеникола в пищевой продукции в диапазоне концентраций 0,5-100,0 нг/мл. 9 пр., 1 табл.

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к клинической иммунологии, и может быть использовано для подбора иммунотропных препаратов у пациентов с ургентной хирургической патологией органов брюшной полости. Задачей предлагаемого способа является подбор наиболее эффективных иммунотропных препаратов или их комбинаций для иммунокоррекции у пациентов с ургентной хирургической патологией органов брюшной полости. Поставленную задачу решают за счет того, что рассчитывают значения пятнадцати главных компонент, определяющих организацию показателей иммунного статуса, затем определяют принадлежность показателей пациента к кластеру главных компонент, рассчитывают дистанцию показателей пациента от центра кластера главных компонент, затем вычисляют эффективность каждого из препаратов, затем рассчитывают значения de TCmax с различным количеством наиболее эффективных препаратов, после чего определяют наибольшее из полученных значений de TCmax, которому соответствует наиболее эффективный препарат или сочетание препаратов для иммунотропной терапии. Способ позволяет осуществлять подбор оптимального состава иммунотропной терапии с использованием как одного, так и нескольких препаратов в оптимальных сочетаниях. 14 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к психиатрии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности лечения непсихотических вариантов психоорганического синдрома. Для этого больному до и через 10 дней после начала лечения определяют количественное содержание моноцитов периферической крови с экспрессией рецепторов HLA-DR+. При его увеличении более 10% по сравнению с исходным прогнозируют положительный эффект лечения непсихотических вариантов психоорганического синдрома. Использование данного способа расширяет арсенал маркеров прогнозирования эффективности лечения непсихотических вариантов психоорганического синдрома, что способствует повышению точности прогноза и подбору адекватной терапии, а также сокращению сроков лечения. 1 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу снижения предела обнаружения иммунохроматографических методов контроля содержания низкомолекулярных соединений. Способ включает проведение в ходе движения реагентов вдоль иммунохроматографической тест-полоски конкурентного взаимодействия специфических антител с определяемым соединением (антигеном) в пробе и конъюгатом антиген-белок, иммобилизованным на поверхности рабочей мембраны тест-полоски. Выявляют окрашенные комплексы в результате иммобилизации коллоидного маркера в составе комплекса с конъюгатом антиген-белок. При этом первая стадия представляет собой конкурентное взаимодействие свободных специфических антител с антигеном в пробе и с иммобилизованным на поверхности рабочей мембраны конъюгатом антиген-белок. Вторая стадия представляет собой взаимодействие образовавшихся комплексов специфических антител и конъюгата антиген-белок с антивидовыми антителами, меченными коллоидным маркером. Предложенное изобретение позволяет уменьшить количество специфических антител на стадии конкурентного взаимодействия и благодаря этому снизить предел обнаружения. 5 ил., 1 пр.
Настоящее изобретение относится к медицине и описывает способ выявления наличия гиперкоагуляции и активации внутрисосудистого свертывания у больных с впервые выявленным острым лимфобластным лейкозом путем лабораторного исследования антигена фактора Виллебранда, тромбомодулина, D-димеров, где без исследования целого ряда показателей плазменного гемостаза, таких как протромбиновый индекс, концентрация фибриногена и РФМК, время ХIIа-ЗЭЛ, активность антитромбина III, протеина С, плазминогена и ф.VIII, отклонения которых характеризуют состояние гиперкоагуляции, при уровне указанных маркеров нарушения функции эндотелия, превышающих 152% (ФB:Ag) и 3,99 нг/мл (ТМ), и увеличении D-димеров до 2001-2500 нг/мл и более с высокой долей вероятности устанавливают наличие гиперкоагуляции и активации внутрисосудистого свертывания. Способ обеспечивает определение наличия гиперкоагуляции и активации внутрисосудистого свертывания у больных острым лимфобластным лейкозом без инфекционных осложнений при диагностике заболевания. 1 табл., 1 пр.
Наверх