Способ прогнозирования возникновения рецидивов при немелкоклеточном раке легкого

Авторы патента:

Перельмутер Владимир Михайлович (RU)

G01N33/74 - с использованием гормонов

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2498305:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт онкологии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИ онкологии" СО РАМН) (RU)

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования возникновения рецидивов при немелкоклеточном раке легкого (НМРЛ). Сущность способа состоит в том, что проводят гистологическое исследование фрагментов ткани удаленного легкого с главным, промежуточным или сегментарным бронхами, находящимися на расстоянии 4-5 см от опухоли, в респираторном эпителии бронхов определяют варианты дисрегенераторных изменений: базальноклеточную гиперплазию (БКГ), плоскоклеточную метаплазию (ПМ) и при наличии в смежном с опухолью эпителии бронхов сочетания базальноклеточной гиперплазии с плоскоклеточной метаплазией (БКГ+ПМ+) прогнозируют риск развития рецидива немелкоклеточного рака легкого. Использование заявленного способа позволяет повысить точность и информативность прогнозирования возникновения рецидивов при НМРЛ. 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способов прогнозирования возникновения рецидивов при немелкоклеточном раке легкого.

Рак легкого по-прежнему остается одной из основных причиной смерти среди онкологических больных во всем мире. Даже после радикального лечения у 60-75% больных с немелкоклеточным раком легкого (НМРЛ) происходит прогрессирование опухолевого процесса, которое может быть в виде местного рецидива, лимфогенных метастазов в грудной полости или развитии отдаленных метастазов [1, 6]. От своевременного выявления рецидивов зависят эффективность лечения и продолжительность жизни больных. Поэтому актуальной задачей является не только поиск методов раннего выявления рецидивов, но и прогнозирование их развития.

Известны различные факторы, влияющие на возникновение рецидивов при НМРЛ. Показана зависимость частоты развития рецидивов опухоли от стадии заболевания [7, 17]. Одним из неблагоприятных факторов, связанным с высоким риском возникновения локорегионарных рецидивов при НМРЛ является наличие у пациентов диабета [17]. Большое влияние на частоту рецидивирования оказывают сосудистая инвазия и распространенность опухоли по висцеральной плевре [10].

Большое внимание уделяется изучению прогностической значимости молекулярно-генетических маркеров, определяемых в опухоли. Для этой цели используются методы CIS, ПЦР и иммуногистохимической (ИГХ) диагностики. С помощью ПЦР-метода показана связь между нарушением miRNA-опосредованной регуляцией генов и прогрессией НМРЛ [3, 4, 5, 8, 11, 14, 15, 16, 18]. Следует отметить, что прогностические маркеры, которые могут предсказать рецидив НМРЛ, до сих пор не определены [13].

С большей частотой рецидивирования при НМРЛ связана высокая степень злокачественности [2].

Наиболее близким к предлагаемому является способ описанный Т. Nakagawa (2008), согласно которому к неблагоприятным факторам, способствующим возникновению рецидивов при НМРЛ относят: меньший объем оперативного вмешательства, чем лобэктомия, отсутствие лифодиссекции, размер опухоли больше Т2 [12]. Тем не менее, Jung-Jyh Hung и Yu-Chung Wu (2012) проанализировав публикации, касающиеся факторов прогноза рецидивирования при НМРЛ отметили, что они недостаточны для эффективного прогноза [7].

Таким образом, известные на данный момент клинико-морфологические критерии прогноза рецидивирования НМРЛ относятся исключительно к параметрам первичной опухоли. Практически отсутствуют методы прогнозирования вероятности развития рецидивов при НМРЛ, которые основывались бы на определении особенностей дисрегенерации респираторного эпителия в смежной с опухолью легочной ткани.

Новая техническая задача-повышение точности и информативности способа.

Для решения поставленной задачи в способе прогнозирования вероятности возникновения рецидивов при немелкоклеточном раке легкого, заключающемся в учете клинических характеристик, проводят гистологическое исследование фрагментов ткани удаленного легкого с главным, промежуточным или сегментарным бронхами, находящимися на расстоянии 4-5 см от опухоли, в респираторном эпителии бронхов определяют варианты дисрегенераторных изменений: базальноклеточную гиперплазию (БКГ), плоскоклеточную метаплазию (ПМ) и при наличии в смежном с опухолью эпителии бронхов сочетания базальноклеточной гиперплазии с плоскоклеточной метаплазией (БКГ+ПМ+) прогнозируют риск развития рецидива немелкоклеточного рака

Способ осуществляют следующим образом.

…Учитывают клинических характеристики, к которым относят: меньший объем оперативного вмешательства, чем лобэктомия, отсутствие лифодиссекции, размер опухоли больше Т2. Материалом для морфологического является опухоль и находящиеся от нее на расстоянии 4-5 см фрагменты ткани удаленного легкого с главным, промежуточным или сегментарным бронхами. Ткань фиксируют в нейтральном формалине, проводят по стандартной методике и заливалают в парафин. Срезы бронхов толщиной 5-6 мкм окрашивают гематоксилином и эозином. Морфологическое исследование осуществляют с помощью светового микроскопа «Axiostar plus» фирмы «K. Zeiss» - Германия и проводят гистологическое исследование фрагментов ткани удаленного легкого с главным, промежуточным или сегментарным бронхами, находящимися на расстоянии 4-5 см от опухоли, в респираторном эпителии бронхов, определяют варианты дисрегенераторных изменений: гиперплазию бокаловидных клеток (ГБК), базальноклеточную гиперплазию (БКГ), плоскоклеточную метаплазию (ПМ) и при наличии в смежном с опухолью эпителии бронхов сочетания базальноклеточной гиперплазии с плоскоклеточной метаплазией (БКГ+ПМ+) прогнозируют риск развития рецидива НМРЛ.

Способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Больной М., 58 лет. Центральный рак правого легкого Прооперирован в объеме пневмонэктомии справа, без предоперационной химиотерапии. При Пример 1. Больной М., 58 лет. Центральный рак правого легкого Прооперирован в объеме пневмонэктомии справа, без предоперационной химиотерапии. При гистологическом исследовании ткани первичной опухоли поставлен диагноз - плоскоклеточный умеренно-дифференцированный неороговевающий рак легкого, стадии T2N1M0. Проведено исследование согласно предлагаемому способу. По результатам микроскопического исследования гистологического материала в респираторном эпителии бронхов, пограничном с опухолью, были выявлены участки эпителия с признаками БКГ и ПМ (БКГ+ПМ+). При динамическом наблюдении за больным, спустя 32 месяца после операции развился рецидив.

Пример 2. Больной Ш., 52 года. Центральный рак левого легкого. Прооперирован в объеме пневмонэктомии слева. В предоперационном периоде проведена неоадъювантная химиотерапия по схеме: паклитаксел 175 мг/м² в/в 1 день + карбоплатин AUC 6 в/в 1 день, 2 курса с интервалом в 3 недели. При гистологическом исследовании ткани первичной опухоли поставлен диагноз - плоскоклеточный умеренно-дифференцированный неороговевающий рак легкого, стадии T3N0M0. Проведено исследование согласно предлагаемому способу. При микроскопическом исследовании гистологического материала в респираторном эпителии бронхов, смежном с опухолью, было выявлено сочетание дисрегенераторных процессов БКГ и ПМ (БКГ+ПМ+). При динамическом наблюдении за больным, спустя 27 месяцев после операции развился рецидив.

Пример 3. Больная Т., 62 года. Периферический рак нижней доли правого легкого. Прооперирована в объеме нижней лобэктомии справа, без предоперационной химиотерапии. При гистологическом исследовании ткани первичной опухоли поставлен диагноз - аденокарцинома умеренной степени дифференцировки, стадии T1N0M0. Не метастатическая природа аденокарциномы легкого подтверждена ИГХ исследованием. Проведено исследование согласно предлагаемому способу. При микроскопическом исследовании участков респираторного эпителия бронха, пограничного с опухолью, было выявлено сочетание дисрегенераторных процессов: БКГ и ПМ (БКГ+ПМ+). При динамическом наблюдении за больным, спустя 25 месяцев после операции развился рецидив.

Пример 4. Больной П., 54 года. Центральный рак нижнедолевого бронха справа. Прооперирован в объеме пневмонэктомии справа, без предоперационной химиотерапии. При гистологическом исследовании ткани первичной опухоли поставлен диагноз - плоскоклеточный неороговевающий рак умеренной степени дифференцировки, стадии T3N1M0. Проведено исследование согласно предлагаемому способу. При микроскопическом исследовании участков респираторного эпителия бронха, пограничного с опухолью, была выявлена гиперплазия бокаловидных клеток (БКГ-ПМ-). При динамическом наблюдении за больным в течение 36 месяцев признаков прогрессирования заболевания не отмечено.

Критерии способа были подобраны в результате анализа данных клинических наблюдений.

Изучался операционный материал от 112 больных с немелкоклеточным раком легкого стадии T_1-4N_0-x M₀, в возрасте от 41 до 73 лет. В исследуемой выборке преобладали мужчины - 96 (88,1%), женщин соответственно было 13 (11,9%).

В предоперационном периоде 48 больных (42,8%) получали НАХТ по схеме: паклитаксел 175 мг/м² в/в 1 день + карбоплатин AUC 6 в/в 1 день, 2-3 курса с интервалом в 3 недели. Во время проведения радикальной операции 30 пациентов (27,5%) однократно получали ИОЛТ в дозе 10-15 Гр, из них 18 больным (60%) перед облучением вводили радиосенсибилизатор цисплатин/гемзар.

Морфологический диагноз рака легкого устанавливался согласно «Гистологической классификации опухолей легкого» (ВОЗ, Женева, 2003). Пренеопластические (Д I степени) и неопластические процессы (Д II-III степени) оценивались согласно критериям, изложенным S. Lantue' joul et. al. [9]. У 72 человек (64,3%) был диагностирован плоскоклеточный рак, у 40 (35,7%) - аденокарцинома легкого различной степени дифференцировки. Плоскоклеточный рак чаще встречался у мужчин - 69 человек (61,6%). У всех женщин, вошедших в исследование, была выявлена аденокарцинома различной степени дифференцировки.

Материалом для морфологического исследования были опухоль и находящиеся от нее на расстоянии 4-5 см фрагменты ткани удаленного легкого с главным, промежуточным или сегментарным бронхами. Ткань фиксировалась в нейтральном формалине, проводилась по стандартной методике и заливалась в парафин. Срезы бронхов толщиной 5-6 мкм окрашивались гематоксилином и эозином. Морфологическое исследование осуществлялось с помощью светового микроскопа «Axiostar plus» фирмы «К. Zeiss» - Германия.

Для подтверждения не метастатической природы аденокарцином легкого проводилось иммуногистохимическое исследование. Использовалась панель антител, включающая TTf-1 (clone Dako), СК7 (clone OV-TL 12/30, Novocastra), CK20 (clone K_s 20.08, Novocastra), CEA (clone AMT28, Novocastra), CDX2 (clone AMT28, Novocastra).

Иммуногистохимическое исследование проводилось по общепринятой методике. Демаскировку антигенов осуществляли путем инкубации срезов в микроволновой печи в течение 20 мин в цитратном буфере или ЭДТА-8. В качестве хромогена применяли диаминобензидин (ДАБ). Визуализацию реакции антиген - антитело осуществляли с помощью системы «Super Sensitive Polymer - HRP Detection System)) (Bio Genex, США).

Статистическая обработка результатов выполнялась с помощью пакета программ «Statistica 6.0 for Windows». Для оценки различий между группами по частоте встречаемости признака, использовался критерии χ².

Определяли спектр дисрегенераторных изменений, встречающихся в участках респираторного эпителия, смежного с опухолью. По результатам микроскопического исследования гистологического материала в респираторном эпителии бронхов, пограничном с опухолью, наблюдались разные варианты дисрегенераторных изменений - ГБК, БКГ, ПМ и дисплазия различной степени выраженности. Данные дисрегенераторные изменения встречались как самостоятельные процессы, так и в различных сочетаниях в пределах исследуемого фрагмента ткани.

Все больные были разделены на группы-с базальноклеточной гиперплазией в респираторном эпителии в сочетании с плоскоклеточной метаплазией и без таковой. Из 112 больных НМРЛ, у 81 (72,3%) в смежном с опухолью бронхиальном эпителии отмечалась БКГ. При этом у 29 больных (35,8%) БКГ сочеталась с плоскоклеточной метаплазией (БКГ+ПМ+).

Оценивалась взаимосвязь характера дисрегенерационных изменений, наблюдаемых в смежных с опухолью участках слизистой бронха, с частотой возникновения рецидивов. Обнаружено, что при плоскоклеточном раке легкого рецидивы в 26,1% случаев возникали, когда в смежных с опухолью участках бронхиального эпителия встречался тип дисрегенерации БКГ+ПМ+ и только в 3,3% при изолированной БКГ ((БКГ+ПМ-); χ²=4,39; р=0,03). В случаях аденокарциномы легкого, если в пограничных с опухолью участках бронхиального эпителия наблюдалось сочетание БКГ+ПМ+, рецидивы возникали в 50% случаев.

При анализе частоты возникновения рецидивов при НМРЛ в зависимости от характера дисрегенерации, отмечено, что она находится в опосредованной связи с сочетанием БКГ+ПМ+(χ²=23,5; р=0,0000; табл.1). Динамическое наблюдение за больными в течение 36-42 месяцев показало, что в тех случаях, когда в пограничном с опухолью эпителии бронхов определялись другие типы дисрегенераторных изменений, риск развития рецидивов значительно ниже. Чувствительность - 90%; специфичность - 80%.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет с большей точностью прогнозировать возникновение рецидивов при НМРЛ, что позволит оптимизировать тактику ведения больных.

Источники информации

Таблица 1
Частота возникновения рецидивов в зависимости от характера дисрегенерации при НМРЛ
	Рецидив НМРЛ
Тип дисрегенерации	есть	нет	итого
БКГ+ПМ+	9	20	29
Другие типы дисрегенерации	1	82	83
итого	10	82	112
χ²=23,5 р=0,0000

Способ прогнозирования вероятности возникновения рецидивов при немелкоклеточном раке легкого, заключающийся в учете клинических характеристик, отличающийся тем, что проводят гистологическое исследование фрагментов ткани удаленного легкого с главным, промежуточным или сегментарным бронхами, находящимися на расстоянии 4-5 см от опухоли, в респираторном эпителии бронхов определяют варианты дисрегенераторных изменений: базальноклеточную гиперплазию (БКГ), плоскоклеточную метаплазию (ПМ) и при наличии в смежном с опухолью эпителии бронхов сочетания базальноклеточной гиперплазии с плоскоклеточной метаплазией (БКГ+ПМ+) прогнозируют риск развития рецидива немелкоклеточного рака легкого.

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимическим исследованиям в онкологии, и описывает способ прогнозирования возникновения рецидивов рака шейки матки, включающий биохимическое исследование суточной мочи больной, при котором в суточной моче определяют андростерон и этиохоланолон, вычисляют отношение между ними и при величине отношения 0,75 мг/сут и ниже прогнозируют рецидив болезни в первые 2 года, а при величине, превышающей 0,75 мг/сут, - длительный безрецидивный период до 10 лет и более.

Способ оценки ароматазной активности // 2481587

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии репродукции, и может быть использовано для оценки ароматазной активности. .

Способ определения направленности патологического процесса при перстневидноклеточном раке желудка // 2480771

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для своевременного определения времени до прогрессии рака желудка и назначения адекватного лечения.

Способ прогнозирования рецидивов полипов эндометрия у женщин в постменопаузе // 2478959

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть применено для прогнозирования рецидива заболевания у пациенток с полипами эндометрия в постменопаузе после оперативного удаления полипа путем учета метаболических, гормональных нарушений, гинекологического статуса и профилактики рецидивов путем дополнительного назначения гормональных и метаболических препаратов в послеоперационный период.

Способ диагностики внекишечных проявлений целиакии // 2476892

Изобретение относится к медицине и может быть применено при диагностике внекишечных проявлений целиакии. .

Способ определения стероидного профиля при допинговом контроле спортсменов // 2467331

Изобретение относится к области медицины, а именно к спортивной медицине, и может быть использовано для определения стероидного профиля при допинговом контроле спортсменов.

Способ определения эффективности лечения рака шейки матки // 2464576

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано при лечении больных раком шейки матки. .

Способ определения характера задержки полового развития у мальчиков пубертатного возраста с задержкой роста // 2462720

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии, неврологии и физиотерапии, и может быть использовано для определения характера задержки полового развития у мальчиков пубертатного возраста с задержкой роста.

Способ диагностики идиопатического нарушения носового дыхания у беременных // 2456604

Изобретение относится к медицине и касается способа диагностики идиопатического нарушения носового дыхания у беременных. .

Способ прогнозирования степени эффективности снижения тяжести проявлений атопического дерматита // 2453851

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и касается способа прогнозирования степени эффективности снижения тяжести проявлений атопического дерматита согласно индексу СКОРАД.

Способ определения содержания титана, алюминия в тканях сердечно-сосудистой системы // 2498304

Настоящее изобретение относится к медицине и описывает способ определения содержания в тканях сердечно-сосудистой системы Ti, Al, включающий помещение образца ткани в емкость с добавлением азотной кислоты и выдержкой в течение 3 час при 75°С, последующее приливание перекиси водорода с выдержкой в течение 2 часов при той же температуре, добавление новой порции азотной кислоты с выдержкой 2 часа при температуре 110°С, добавление плавиковой кислоты и выдерживание в течение 18 часов при 20°С с последующим нагревом в течение 6 часов при 75°С и помещением в микроволновую печь, выпариванием и выполнением измерений методикой масс-спектроскопии с индуктивно связанной плазмой, при следующем соотношении компонентов, мас.%: НNО3 35, Н2О2 5, HF 13,3, деионизированная вода - остальное.

Способ выявления инфекционных осложнений у больных острым лимфобластным лейкозом при нейтропении // 2497129

Изобретение относится к медицине и касается способа лабораторной диагностики развития инфекции у больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ) в состоянии индуцированной нейтропении.

Способ прогнозирования популяционных нарушений биотрансформации чужеродных веществ, обусловленных воздействием техногенных химических факторов среды обитания // 2497120

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ прогнозирования популяционных нарушений биотрансформации чужеродных веществ, обусловленных воздействием техногенных химических факторов среды обитания.

Способ выбора тактики лечения больных острым деструктивным панкреатитом // 2497119

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для выбора тактики лечения деструктивной формы острого панкреатита. В сыворотке крови определяют концентрацию прокальцитонина (ПКТ) с помощью количественного иммуноферментного анализа.

Быстрый способ обработки гладкомышечных клеток кишечника гемолизином ii bacillus cereus // 2497118

Изобретение относится к медицине и предназначено для повышения проницаемости мембран гладкомышечных клеток тонкого кишечника. Проводят обработку клеток в одной пробе пороформирующим гемолизином HlyII из Bacillus cereus в концентрации 3-5 мкг/мл.

Способ дифференциальной диагностики тяжелой бронхиальной астмы // 2497117

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ дифференциальной диагностики тяжелой бронхиальной астмы, включающий определение вентиляционной функции легких и исследование мононуклеаров, выделенных из венозной крови больного, с последующим расчетом индекса, характеризующего воспалительный процесс.

Способ прогнозирования развития периваскулярных нарушений у больных гриппом // 2496111

Изобретение относится к медицине, а именно к инфектологии, и может быть использовано для прогнозирования развития периваскулярных нарушений у больных гриппом. Сущность способа: у больных гриппом определяют возрастную группу, срок наблюдения и значение ристомицин-агрегации тромбоцитов в сыворотке крови в секундах.

Способ прогнозирования "тлеющей" формы хронического лимфолейкоза // 2496110

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, может быть использовано для прогнозирования развития «тлеющей» формы хронического лимфолейкоза. Сущность способа: проводят генотипирование полиморфного локуса - 248G>A гена Bcl-2 ассоциированного X белка (ВАХ - 248G>A).

Способ подготовки пробы для газохроматографического определения тиодигликолевой кислоты в моче // 2496109

Настоящее изобретение относится к медицине, в частности к медицинским, химико-токсикологическим исследованиям, и описывает способ подготовки пробы для газохроматографического определения тиодигликолевой кислоты в моче, включающий дериватизацию, извлечение тиодигликолевой кислоты из пробы этилацетатом, где дериватизацию тиодигликолевой кислоты проводят метанолом в присутствии концентрированной серной кислоты при температуре 80°C в течение 15 минут, а извлечение тиодигликолевой кислоты из пробы проводят этилацетатом путем жидкостно-жидкостной микроэкстракции в течение 5 минут, при этом все операции выполняют в одной емкости.

Способ определения инфицированности пациента вирусом клещевого энцефалита // 2495428

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ определения инфицированности пациента вирусом клещевого энцефалита, основанный на обнаружении РНК вируса методом РТ - ПЦР.

Способ раннего выявления высокого риска развития нарушения толерантности к глюкозе на фоне приема метопролола у больных стабильной стенокардией напряжения // 2498306

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для выявления высокого риска развития нарушения толерантности к глюкозе на фоне приема метопролола у больных стабильной стенокардией напряжения. Для этого до начала лечения метопрололом больному в один и тот же день проводят 2 теста с физической нагрузкой до достижения пороговой мощности нагрузки по одинаковому протоколу, исходно и через 2 часа после приема разовой дозы метопролола 50 мг. Если при выявлении при 2-й нагрузке по сравнению с 1-й нагрузкой увеличения на 120 секунд и более интервала времени от начала нагрузки до появления приступа стенокардии и/или снижения на электрокардиограмме сегмента ST ишемического типа глубиной не менее 1 мм, риск развития нарушения толерантности к глюкозе считают высоким. В таком случае через 4-5 недель регулярного приема метопролола проводят тест на толерантность к глюкозе. При выявлении нарушения толерантности к глюкозе лечение метопрололом прекращают. Если при 2-й нагрузке по сравнению с 1-й нагрузкой интервал времени до появления приступа стенокардии и/или снижения на электрокардиограмме сегмента ST ишемического типа глубиной не менее 1 мм увеличивается менее чем на 120 секунд, риск развития нарушения толерантности к глюкозе считают незначительным. В таком случае лечение метопрололом продолжают без дополнительного проведения теста на толерантность к глюкозе. Способ обеспечивает профилактику нарушений углеводного обмена у заявленной группы больных на фоне приема метопролола и возможность своевременной коррекции терапии за счет выявления компенсаторного увеличения использования глюкозы в условиях инсулинорезистентности и сниженной доступности свободных жирных кислот для обеспечения энергетических потребностей миокарда. 4 пр.