Способ ранней диагностики развивающегося пролапса тазовых органов у женщин репродуктивного возраста при отсутствии клинических признаков



Способ ранней диагностики развивающегося пролапса тазовых органов у женщин репродуктивного возраста при отсутствии клинических признаков
Способ ранней диагностики развивающегося пролапса тазовых органов у женщин репродуктивного возраста при отсутствии клинических признаков

 


Владельцы патента RU 2498308:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздравсоцразвития России) (RU)

Настоящее изобретение относится к медицине и описывает способ ранней диагностики развивающегося пролапса тазовых органов у женщин репродуктивного возраста при отсутствии клинических признаков, заключающийся в отборе материала ткани стенки влагалища, проведении гистохимического анализа, определении количества и состояния эластиновых фибрилл, содержания матриксных белков LOXL1 и FBLN5, в котором развивающийся пролапс тазовых органов диагностируют при снижении количества эластиновых фибрилл и их фрагментации и при одновременном уменьшении содержания матриксных белков LOXL1 и в эпителии, эндотелии сосудов, фибробластах, экстрацеллюлярном матриксе по отношению к одноименным показателям у здоровых женщин. Способ позволяет оценить патофизиологические процессы при начальных доклинических признаках развития пролапса тазовых органов, что позволит наиболее точно интерпретировать причины развития дисфункции тазового дна и разработать основные принципы профилактики развития данной патологии у женщин репродуктивного возраста. 1 ил., 1 табл.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к методам ранней диагностики заболеваний.

Рост заболеваемости пролапсом тазовых органов, наблюдаемый в последние годы во всем мире, приобретает масштаб скрытой эпидемии. Пролапс тазовых органов и дисфункция тазового дна у женщин приводит к их социальной дезадаптации, снижению качества жизни. Эта проблема актуальна для современного здравоохранения в связи с ее широкой распространенностью (до 38%) и высокими материальными затратами на лечение, в том числе и хирургическое, данного заболевания. Наиболее значимыми предрасполагающими факторами этой патологии являются: вагинальные роды и паритет, родовый травматизм, старение, генетические факторы, дисплазия соединительной ткани (Hilton P, Donald L.M., 2004, DeLancey JOL., 2005, Rachel N. Pauls, John A. Occhino, Vicki Dryfhout and Mickey M. Karram, 2008).

В связи с этим чрезвычайно важно определение начальных признаков разрушения соединительной ткани - разрушение эластина, как маркера начальных доклинических признаков развивающегося пролапса тазовых органов, связанного с ослаблением эластичности соединительной ткани. стороны тазового дна особенно у женщин молодого репродуктивного возраста.

Наиболее близким аналогом изобретения является способ прогнозирования релаксации тазового дна, заключающийся в отборе материала ткани стенки влагалища, проведении гистохимического и морфологического анализа по определению содержания коллагена в соединительной ткани (Sharon A.S. et al.. Striae and pelvic relaxation: Two disorders of connective tissue with strong association, J. of Investigative dermatology, 23 March 2006, v.126, p.1745-1748 - прототип). Однако этот способ не отражает в полной мере патогенетические аспекты деградации и синтеза элементов соединительной ткани тазового дна, а именно процессов эластогенеза.

Задачей изобретения явилась разработка объективного и информативного способа, позволяющего оценить патофизиологические процессы при начальных доклинических признаках развития пролапса тазовых органов, что позволит наиболее точно интерпретировать причины развития дисфункции тазового дна и разработать основные принципы профилактики развития данной патологии у женщин репродуктивного возраста.

Патентуемый способ ранней диагностики развивающегося пролапса тазовых органов у женщин репродуктивного возраста при отсутствии клинических признаков заключается в отборе материала ткани стенки влагалища, проведении гистохимического анализа, определении количества и состояния эластиновых фибрилл, содержания матриксных белков LOXL1 и FBLN5. Развивающийся пролапс тазовых органов диагностируют при снижении количества эластиновых фибрилл и их фрагментации и при одновременном уменьшении содержания матриксных белков LOXL1 и в эпителии, эндотелии сосудов, фибробластах, экстрацелюлярном матриксе по отношению к одноименным показателям у здоровых женщин.

Технический результат - выявление критериев прогноза развития заболевания у женщин репродуктивного возраста, не имеющих клинических признаков.

В основе патентуемого способа лежат следующие предпосылки. Целостность и функциональность тазового дна сохраняется и обеспечивается посредством сложных процессов взаимодействия между мышцами и соединительной тканью мочеиспускательного канала, прямой кишки и влагалища. Установлено, что ответственны за эти процессы матриксные белки LOXL1 (лизилоксидазаподобный белок-1) и (фибулин-5), FBLN5 принимающие непосредственное и ведущее участие в формировании и соединении эластинового волокна.

В связи с поставленной задачей сравнили содержание белков LOXL1 и FBLN5 у женщин репродуктивного возраста с нормальным состоянием тазового дна (без пролапса) и с пролапсом ≥1 ст. (POPQ). Биопсийный материал в области передней и задней стенок влагалища в объеме 1 см3 забирается во время гинекологической манипуляции (у больных без пролапса) и/или во время хирургической операции (2 фрагмента ткани). Биопсийный материал фиксировали в 10% нейтральном формалине с фосфатным буфером, обрабатывали в аппарате гистологической проводки тканей фирмы «Pool Scientific Instruments» (Швейцария) и заливали в парафин. Готовились серийные парафиновые срезы (не менее 12 серийных срезов), толщиной 4-5 микрон. Срезы фиксировали на предметные стекла, покрытые адгезивом (полилизин, APES) и инкубировали в термостате при 37°С в течение 12 часов. Далее срезы депарафинировали и обезвоживали в батарее из 3-х ксилолов, 2-х абсолютных спиртов, 2-х 95% спиртов, 80% и 70% спирта и дистилированной воды. По стеклу от каждого случая окрашивали гематоксилин-эозином. В ходе морфологического исследования установлено отсутствие различий в строении передней и задней стенки влагалища.

Иммуногистохимические реакции проводились на депарафинированных срезах толщиной 4-5 мкм, расположенных на стеклах, покрытых APES-слоем (Janice A., 1983). Неокрашенные срезы от каждого случая обрабатывались с помощью стандартного микроволнового метода иммуногистохимии. Демаскировка антигенов для ИГХ проводилась в микроволновой печи. Стекла погружались в цитратный буфер (рН 6,0) и нагревались в микроволновой печи в течение 15 минут при мощности 600 Вт. Далее стекла остывали 20 минут при комнатной температуре. Остывшие стекла помещали во влажные камеры (для предотвращения высыхания срезов) и инкубировали 15 минут с 3% раствором H2O2. После обработки перекисью стекла ополаскивали в фосфатном буфере (рН 7,0-7,6). Далее стекла инкубировали с 1% раствором альбумина во влажных камерах в течение 30 минут. По окончании инкубации излишки альбумина аккуратно стряхивали со стекол и наносили первичные антитела при помощи микропипетки. В качестве первичных антител использовались моноклональные антитела к FBLN5 (Abbiotec, 1:100) и LOXL1 (Abbiotec, 1:100). Срезы инкубировали с первичными антителами от 30 минут до 1 часа, в зависимости от времени воздействия, предусмотренного в спецификации к антителу от фирмы производителя. Далее срезы отмывали в фосфатном буфере (рН 7,0-7,6) от первичных антител, не связавшихся с эпитопами, и обрабатывали вторичными антителами. Срезы инкубировали с вторичными антителами во влажных камерах в течение 1 часа, затем ополаскивались в фосфатном буфере (рН 7,0-7,6). Для метки вторичных антител использовался стрептовидин-биотиновый комплекс (SBK KIT, DAKO). Для визуализации места связывания антитела с антигеном использовали метку - фермент, пероксидазу хрена, в присутствии субстрата - перекиси водорода - и колориметрического реактива с 3,3-диаминобензидином (ДАБ), (LSAB, Dako Cytomation). В результате образовывался нерастворимый в органических растворителях конечный продукт реакции, который визуализировался в виде коричневого окрашивания структур клеток. Далее стекла ополаскивали в дистиллированной воде и подкрашивали ядра гематоксилином. Затем стекла проводили по батарее из дистиллированной воды, 70% спирта, 80% спирта, 2-х 95% спиртов, 2-х абсолютных спиртов и 3-х ксилолов. После чего срезы заключали в синтетическую среду, используя покровные стекла.

Для ИГХ реакций ставили положительные и отрицательные контроли. В качестве отрицательных контролей брали образцы исследуемых срезов, которые подвергались стандартной процедуре иммуногистохимии, но без добавления первичных антител. Положительные контроли для каждого антитела выбирали в соответствии со спецификациями от фирмы производителя.

Проводилась полуколичественная и количественная оценка результатов реакций. Результаты ИГХ реакции для исследуемых антител оценивались полуколичественным методом в баллах по количеству позитивно окрашенных клеток, причем отдельно оценивались эпителиальные клетки, фибробласты, эндотелий сосудов и строма, если продукт реакции выявлялся в указанных выше структурах. Оценка интенсивности реакции проводилась по 6-бальной системе: 2 балла - до 20% окрашенных клеток; 4 балла - от 20 до 40% окрашенных клеток; 6 баллов - более 40% окрашенных клеток. Статистическая обработка полученных результатов проведена при помощи программного пакета "SPSS 13 for Windows". Для выбора статистических методов первоначально определялось, к какой статистической шкале (номинальной, порядковой или интервальной) относятся переменные. Для переменных, относящихся к интервальной шкале (результаты ИГХ исследований) при помощи построения гистограмм с расчетом среднего значения и стандартного отклонения, проверялось, подчиняются ли их значения нормальному распределению. Поскольку полученное распределение значительно отклонялось от нормального, при анализе применялись непараметрические методы, так же как и для анализа переменных, относящихся к порядковой шкале. Для сравнения средних величин использовались следующие непараметрические тесты: (1) Тест Уайта для малых выборок (обработка результатов ИГХ анализа с малыми выборками была проведена вручную при помощи калькулятора и таблиц значений F); (2) U тест по методу Манна-Уитни при сравнении 2-х независимых выборок.

От каждой пациентки в ходе операции был взят материал ткани влагалища с передней и задней его стенки. В ходе морфологического исследования установлено отсутствие различий в строении передней и задней стенки влагалища.

В морфологической структуре стенки влагалища женщин репродуктивного возраста пациенток определялись различия. Так, стенка влагалища женщин из группы репродуктивного возраста была покрыта многослойным плоским неороговевающим эпителием, в подлежащей строме определялись сосуды, а также компактные соединительнотканные волокна, фибробласты, единичные гистиоциты. Особенностью женщин с пролапсом гениталий было наличие в подлежащей строме более фиброзированной соединительной ткани, причем в группе с пролапсом гениталий также выявлялось венозное полнокровие и лимфостаз.

Для определения состояния эластического компонента стенки влагалища проведены гистохимические реакции на определение эластических волокон (окрашивание по Вейгерту). В контрольной группе (без пролапса) количество эластиновых волокон в эндотелии сосудов и в строме стенки влагалища значительно. В группе с пролапсом гениталий количество эластиновых волокон снижено и большинство из них фрагментировано.

На фигуре 1 показаны гистограммы результатов иммуногистохимического исследования матриксных белков FBLN5 и LOXL-1 в стенке влагалища. Белок FBLN5 выявлялся в виде коричневого окрашивания цитоплазмы фибробластов, эндотелия сосудов, в экстрацеллюлярном матриксе и в эпителиальных клетках многослойного плоского эпителия. Белок LOXL-1 локализовался в фибробластах, эндотелии сосудов, экстрацеллюлярном матриксе, а также в клетках многослойного плоского эпителия в виде цитоплазматического окрашивания. В группе женщин с пролапсом гениталий окрашивание антителом к лизилоксидазе ниже, чем в группе контроля (р<0,05).

Наименьшее количество белков FBLN5 и LOXL1 выявляется у молодых женщин с доклиническими признаками пролапса тазовых органов в ЭЦМ (экстрацеллюлярный матрикс) стенки влагалища.

При сравнении средних уровней экспрессии белков FBLN5 и LOXL-1 выявлены различия по окрашиванию эпителиальных (ЭП), эндотелиальных клеток (ЭНД), фибробластов (Ф) и экстрацеллюлярному матриксу (ЭЦМ):

Пациентки репродукт. возраста Белок FBLN5 Белок LOXL-1
ЭП ЭНД Ф ЭЦМ ЭП ЭНД Ф ЭЦМ
Пролапс 3,5 3,5 3,5 2,5 3 4 2,5 2,0
Контроль 5,33 5,33 5,33 5,33 4 4,67 4 3

Исследования показали, что уже в репродуктивном возрасте у пациенток с доклиническими признаками пролапса тазовых органов начинается деградация соединительной ткани: она становится более рыхлой, легко разрушаемой вследствие происходящих процессов фрагментации эластинового волокна. Также происходит уменьшение и количества самого эластинового волокна в стенке влагалища, что является доклиническим признаком развивающегося пролапса тазовых органов.

Таким образом, у пациенток с доклиническими признаками пролапса тазовых органов в репродуктивном возрасте отмечается достоверное нарушение эластогенеза, которое характеризуется изменением эластического каркаса стенки влагалища. Отмечается снижение количества эластинового волокна, а также нарушение структуры, что проявляется его фрагментацией. Выявлено снижение экспрессии ферментов - белков LOXL-1 и FBLN5, необходимых для синтеза и объединения эластиновых волокон.

Патентуемый способ позволяет обеспечить выявление пациенток с высокой вероятностью развития пролапса тазовых органов для формирования групп высокого риска по данной патологии и провести своевременные и целенаправленные мероприятий по профилактике патологии.

Способ ранней диагностики развивающегося пролапса тазовых органов у женщин репродуктивного возраста при отсутствии клинических признаков, заключающийся в отборе материала ткани стенки влагалища, проведении гистохимического анализа, определении количества и состояния эластиновых фибрилл, содержания матриксных белков LOXL1 и FBLN5, в котором развивающийся пролапс тазовых органов диагностируют при снижении количества эластиновых фибрилл и их фрагментации и при одновременном уменьшении содержания матриксных белков LOXL1 и в эпителии, эндотелии сосудов, фибробластах, экстрацеллюлярном матриксе по отношению к одноименным показателям у здоровых женщин.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, в частности к кардиологии, иммунологии, и может быть применено для определения степени риска формирования клинических осложнений атеросклероза.
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики синдрома Сезари от эритродермий. Для этого проводят гистологическое исследование биоптатов пораженной кожи путем световой микроскопии, иммунофенотипирование клеток инфильтрата.

Способ одновременного определения двух аналитов биолюминесцентным молекулярным микроанализом относится к биохимии, а именно к способам проведения иммуноферментного и ДНК гибридизационного анализа.
Настоящее изобретение относится к медицине и описывает способ выявления наличия гиперкоагуляции и активации внутрисосудистого свертывания у больных с впервые выявленным острым лимфобластным лейкозом путем лабораторного исследования антигена фактора Виллебранда, тромбомодулина, D-димеров, где без исследования целого ряда показателей плазменного гемостаза, таких как протромбиновый индекс, концентрация фибриногена и РФМК, время ХIIа-ЗЭЛ, активность антитромбина III, протеина С, плазминогена и ф.VIII, отклонения которых характеризуют состояние гиперкоагуляции, при уровне указанных маркеров нарушения функции эндотелия, превышающих 152% (ФB:Ag) и 3,99 нг/мл (ТМ), и увеличении D-димеров до 2001-2500 нг/мл и более с высокой долей вероятности устанавливают наличие гиперкоагуляции и активации внутрисосудистого свертывания.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу снижения предела обнаружения иммунохроматографических методов контроля содержания низкомолекулярных соединений.
Изобретение относится к медицине, а именно к психиатрии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности лечения непсихотических вариантов психоорганического синдрома.

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к клинической иммунологии, и может быть использовано для подбора иммунотропных препаратов у пациентов с ургентной хирургической патологией органов брюшной полости.
Настоящее изобретение относится к области аналитической химии и описывает способ высокочувствительного определения хлорамфеникола с помощью пьезокварцевого иммуносенсора, основанный на регистрации изменения частоты колебания сенсора в связи с изменением массы покрытия, включающий регенерацию рецепторного покрытия для проведения последующих определений, обеспечивая многократное использование сенсора, где на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора наносят рецепторное покрытие на основе хлорамфеникол-белкового конъюгата (соевый трипсиновый ингибитор), к пробе добавляют фиксированное количество антител к хлорамфениколу и выдерживают в течение 5-10 мин при 20°С до образования иммунокомплекса, вводят в проточно-инжекторную ячейку и регистрируют изменение частоты колебания сенсора при взаимодействии хлорамфеникол-белкового конъюгата с несвязавшимися антителами к хлорамфениколу, аналитический отклик сенсора обратно пропорционален концентрации хлорамфеникола в анализируемом растворе, концентрацию определяют по градуировочному графику, регенерацию рецепторного покрытия осуществляют пропусканием 0,04 mM раствора тиоционата калия над поверхностью электрода сенсора.
Изобретение относится к области медицины, в частности гастроэнтерологии, а именно к способу прогнозирования развития избыточного бактериального роста в кишечнике у пациентов, перенесших холецистэктомию.
Настоящее изобретение относится к клинической биохимии и описывает способ определения модифицированных липопротеинов низкой плотности (мЛПНП) в сыворотке (плазме) крови человека путем обработки буфером, содержащим поливинилпирролидон (ПВП) с последующей турбидиметрической регистрацией смеси, где обработку сыворотки или плазмы крови человека ведут 10% раствором ПВП-35000±5000 в 0,01 М Трис-HCl-буфере, рН 7,4, содержащем 0,15 М NaCl, при объемном соотношении сыворотка(плазма) : ПВП от (1:2) до (1:10), инкубируют 10 мин при комнатной температуре, измеряют светопоглощение в опытной и контрольной пробах, вычисляют разность между ними и при величине разности более 15 Е констатируют повышенный уровень атерогенных мЛПНП в крови и наличие атеросклеротического процесса у обследуемого человека.

Заявленная группа изобретений относится к области медицины и предназначена для выявления пациентов с повреждением сердца и оценки эффективности проводимой терапии. У пациентов определяют внутриклеточные уровни кардиального белка тропонина Т (cTnT) или кардиального белка тропонина I (cTnl) в сердечной ткани. Уменьшение этих показателей по меньшей мере на 50% относительно контрольных или нормальных является показателем повреждения сердца у пациента. Способ лечения включает выявление пациентов с повреждением сердца заявленным способом и введение терапевтически эффективного количества GGF2 и ингибитора протеасом. Увеличение внутриклеточных уровней белка cTnT или cTnl в сердечной ткани пациента после введения GGF2 является позитивным индикатором эффективности введения GGF2 для лечения пациента с повреждением сердца. Использование заявленной группы изобретений позволяет быстро и точно диагностировать повреждения сердца у пациента, а также быстро и точно оценить эффективность проводимого лечения. 4 н. и 15 з.п. ф-лы, 26 ил., 1 пр., 1 табл.

Группа изобретений относится к лабораторной диагностике и может быть использована для проведения анализов, основанных на реакции агглютинации частиц. Аналитический наконечник (100), предназначенный для выполнения визуально детектируемой реакции агглютинации после всасывания в него реактивов и образца, включает: первое отверстие (110) для приложения отрицательного или положительного давления к внутреннему объему аналитического наконечника; камеру для образца (120); по меньшей мере, одну боковую камеру (130), которая расположена по периметру камеры для образца; камеру детектирования (150), находящуюся в жидкостной связи с камерой для образца; переходную зону (140) между камерой детектирования и камерой для образца для вращательного перемешивания образца; второе отверстие (160) для всасывания реактивов и образца во внутренний объем аналитического наконечника или для удаления их оттуда. Группа изобретений относится также к способу выполнения реакции агглютинации в указанном аналитическом наконечнике и к набору для выполнения визуально детектируемых реакций агглютинации, включающему указанный аналитический наконечник и реактивы для агглютинации. Группа изобретений обеспечивает возможность автоматизации анализов по типу реакции агглютинации, позволяя тем самым повысить безопасность и надежность их проведения. 3 н. и 15 з.п. ф-лы, 10 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, может быть использовано для диагностики скрытой активности туберкулеза у детей и подростков. Для этого проводят оценку состояния специфического клеточного иммунитета с помощью модифицированной реакции бластной трансформации лимфоцитов (мРБТЛ) с туберкулином (ППД-Л) и определение уровня интерферона-гамма (ИФН-γ) с ППД-Л с использованием малого объема (200 мкл) цельной крови и 4-х разведении антигена ППД-Л. При показателях индекса стимуляции клеточного ответа более 3,2 и ИФН-γ с ППД-Л более 7,0 диагностируют активный туберкулезный процесс, а при показателе мРБТЛ с ППД-Л более 3,2 и ИФН-γ с ППД-Л менее 7,0 - не активную туберкулезную инфекцию. Использование данного способа позволяет повысить специфичность диагностики туберкулезной инфекции, а также оценить эффективность проводимого лечения. 2 табл., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано у больных гемобластозами для прогноза развития рецидива заболевания после проведения аутологичной трансплантации стволовых кроветворных клеток (АТСКК). Для этого определяют относительное содержание CD4+FOXP3+Т-клеток в периферической крови больных гемобластозами после проведения АТСКК в период восстановления лимфоцитов до уровня >500 клеток/мкл. При увеличении количества CD4+FOXP3+T-клеток более 9,1% прогнозируют развитие раннего рецидива в посттрансплантационном периоде. Использование данного способа позволяет выделить больных гемобластозами в группу высокого риска развития раннего рецидива основного заболевания после АТСКК и при необходимости проводить дополнительные курсы лучевой и/или химиотерапии с целью повышения эффективности АТСКК. 4 пр.

Настоящее изобретение относится к иммунологии и биотехнологии. Предложены варианты антитела или его фрагмента, специфичных в отношении β-амилоидного белка. Каждый из вариантов характеризуется тем, что включает Н и L-цепи, или области VH и VL, каждая из которых содержит по три соответствующих CDR. Описаны: полипептид VL, полипептид VH, a также кодирующая нуклеиновая кислота, экспрессионный вектор, ее содержащий, и клетка, несущая вектор, используемые для получения антитела или его функционального фрагмента. Предложены: тест-набор, варианты фармацевтической композиции, смесь для применения в качестве лекарственного средства на основе антитела или его функционального фрагмента. Раскрыты варианты способа получения антитела: с использованием клетки, НК или вектора. Описан способ приготовления композиции, а также способ диагностирования амилоидоза in vitro, способ определения степени загрузки амилоидогенными бляшками in vitro, способ лечения или облегчения воздействий амилоидоза, использующие антитело или его функциональный фрагмент. Предложенное изобретение обеспечивает новые антитела, которые связывают эпитоп, находящийся в области 12-23 белка Aβ1-42, причем остатки 15-20 имеют решающее значение. Изобретение может найти применение в терапии и диагностике болезни Альцгеймера и других перечисленных амилоидозах. 19 н. и 25 з.п. ф-лы, 18 ил., 9 табл., 16 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу определения антител к Mycobacterium leprae. Способ включает выявление в сыворотках крови антител к Mycobacterium leprae с помощью иммуноферментного метода. В качестве тест-антигена в иммуноферментном анализе используют водную суспензию из культивируемых в условиях термостата на среде Левенштейна-Йенсена в течение 7 суток при температуре 37°C Mycobacterium lufu, прогретую при 100°C в течение 1,5 часов на водяной бане. Предложенное изобретение позволяет упростить способ определения антител к Mycobacterium leprae. 1 табл.

Изобретение относится к области биохимии. Используют липосомы в качестве матрицы для активированного фермента - пероксидазы хрена. К 5 мг окисленной перйодатным методом пероксидазы хрена добавляют 1 мл суспензии липосом в 0,01 М растворе карбонатно-бикарбонатного буфера при рН 9,5. Подвергают ультразвуковой обработке в течение 1 мин. Инкубируют 1 ч. Иммобилизуют с иммуноглобулинами в концентрации 5 мг в течение 2 ч при температуре 22±4°С. Стабилизируют 5 мг боргидрида натрия с последующей гель-хроматографической очисткой. Изобретение позволяет получить липосомально-иммунопероксидазный конъюгат для индикации возбудителей инфекционных заболеваний в иммуноферментном анализе и увеличить срок годности препарата до 6 лет. 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии и иммунологии, и предназначено для прогнозирования неэффективности консервативной терапии тяжелой формы язвенного колита при тотальном поражении толстой кишки. Сущность способа состоит в определении в сыворотке крови больных антител к эпителиальной базальной мембране. Для этого выполняют иммуногистологическое исследование с использованием метода непрямой иммунофлюоресценции. На первом этапе сыворотку больного инкубируют на срезах ткани почек обезьян, на втором этапе проводят инкубацию с антивидовой козлиной флюоресцирующей сывороткой. Реакцию регистрируют методом люминесцентной микроскопии, определяя количество почечных канальцев с флюоресцирующей базальной мембраной и выражая результат в процентах. При показателе выше 15% прогнозируют значительное увеличение вероятности неэффективности консервативной терапии. Способ прост в исполнении, выполняется в течение 2 часов и не требует затрат дорогостоящих реактивов. 4 пр.
Изобретение относится к клинической биохимии, и может быть использовано в лабораторной диагностике для определения атерогенности крови по уровню содержания минимально модифицированных липопротеинов низкой плотности (ММ-ЛПНП) в сыворотке или плазме крови человека. ММ-ЛПНП агрегируют из сыворотки или плазмы крови путем обработки буфером, содержащим поливинилпирролидон (ПВП) с мол.массой 12600±2700, при конечной концентрации ПВП от 11,3% до 14,2% в пробе. После инкубации в течение 10 мин измеряют светопоглощение в опытной и контрольной пробах, вычисляют разность и при величине разности более 10 ЕД констатируют атерогенность крови у обследуемого человека за счет повышенного уровня ММ-ЛПНП. Использование простого, доступного и быстрого в осуществлении способа определения ММ-ЛПНП в крови человека позволяет проводить скрининговые обследования с целью выявления наличия атеросклеротического процесса на доклинической стадии и диспансеризации населения. 3 табл., 3 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования невынашивания беременности в ранние сроки. Сущность изобретения состоит в том, что у беременных женщин с выявленной урогенитальной инфекцией в 1 триместре проводят определение в слизи цервикального канала уровня MIP-1α. При значении уровня MIP-1α в цервикальной слизи выше 36,9 пг/мл прогнозируют высокий риск невынашивания беременности в 1 триместре. Использование заявленного изобретения позволяет повысить точность прогнозирования угрозы невынашивания беременности в 1 триместре при урогенитальной инфекции для назначения современных лечебных мероприятий. 3 пр.
Наверх