Способ прогнозирования общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом



Способ прогнозирования общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом
Способ прогнозирования общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом
Способ прогнозирования общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом

 


Владельцы патента RU 2498313:

Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (RU)

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ прогнозирования общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом. Осуществляют выделение ДНК из периферической венозной крови, анализ полиморфизма -590С/Т гена интерлейкина 4, -174G/C гена интерлейкина 6 и выявление наличия цитопенических осложнений. В случае выявления аллеля -590Т IL-4, аллеля -174G IL-6 и наличия цитопенических осложнений прогнозируют снижение общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом. Изобретение обеспечивает получение новых критериев оценки выживаемости, необходимых для подбора индивидуальной тактики ведения пациентов, больных хроническим лимфолейкозом. 2 ил., 2 табл., 1 пр.

 

Изобретение относится к области медицинской диагностики, может быть использовано для прогнозирования общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом.

Хронический лимфолейкоз (ХЛЛ) - опухолевое заболевание лимфатической ткани, в основе развития которого лежит моноклоновая пролиферация патологических лимфоидных элементов. Болезнь проявляется лимфатическим лейкоцитозом, диффузной лимфоцитарной пролиферацией в костном мозге, увеличением лимфатических узлов, селезенки и печени [1]. Среди всех лейкозов хронический лимфолейкоз занимает особое место. Хронический лимфолейкоз - наиболее распространенный вид лейкоза в странах Европы. На его долю приходится около 30% среди всех лейкозов. Ежегодная заболеваемость ХЛЛ составляет 3-3.5 на 100000 населения, а среди лиц старше 65 лет - до 20 на 100000 [2]. В России ХЛЛ заболевают около 4500 человек в год и 2300 умирают от этой болезни. Не менее 40-50% пациентов имеют короткую выживаемость, свободную от лечения, и требуют неотложного назначения лечебных мероприятий. В данной группе больных болезнь быстро прогрессирует и проходит всего 2-4 года с момента установления диагноза до смерти больного, несмотря на интенсивную терапию. У других больных болезнь характеризуется вялотекущим течением, необходимость в терапии возникает в ближайшие 3-5 лет от момента постановки диагноза [3]. Таким образом, разработка способа прогнозирования общей выживаемости больных ХЛЛ является актуальной для гематологии.

Анализ литературных данных по патогенезу хронического лимфолейкоза позволяет заключить, что до настоящего времени имеются разные взгляды на природу этого заболевания и в основе развития хронического лимфолейкоза лежат сложные многоэтапные иммунопатологические механизмы. Одним из ключевых звеньев в реализации каскада этих механизмов являются процессы взаимодействия цитокинов [4]. При этом центральное место в данных взаимодействиях занимают интерлейкины, в частности, интерлейкин 4 и интерлейкин 6 [5, 6].

Согласно данным литературы, интерлейкин-4 или IL-4 - полипептид, продуцируемый Т-хелперами 2-го класса (Th2), а также тучными клетками. Основными клетками мишенями IL-4 служат В-лимфоциты. IL-4 усиливает пролиферацию В-лимфоцитов и, действуя в синергизме с IL-6, является самым сильным ростовым и дифференцировочным фактором для этих клеток. Ген IL-4 картирован в 5-й хромосоме (5q31.1). Функционально значимым полиморфным вариантом гена IL-4 является полиморфизм 590С/Т в промоторной области, который представляет собой замену С на Т в 590-м положении [7]. Согласно некоторым исследованиям полиморфизм -590С/Т гена IL-4 ассоциирован с повышенной промоторной активностью гена и повышенным уровнем общего IgE в сыворотке крови. Также показана роль полиморфизма -590С/Т гена IL-4 в патогенезе бронхиальной астмы, герпетической инфекции, рака молочной железы и др. [8].

Интерлейкин 6 или IL-6 - полипептид, состоящий из 212 аминокислотных остатков с молекулярной массой 19-34 kDa, который является фактором дифференцировки В-клеток, способствуя созреванию В-лимфоцитов в антителопродуцирующие клетки. Ген IL-6 локализован на коротком плече 7-й хромосомы и состоит из 5 экзонов и 4 интронов Распространенный G/C полиморфизм в нуклеотидной позиции -174 промотора гена интерлейкина-6 влияет на уровень экспрессии данного гена, определяя таким образом склонность к развитию ряда заболеваний, включая опухолеобразование [9].

При изучении уровня техники и проведении патентного исследования по направлению «Способ прогнозирования общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом» аналогов не найдено.

Задачей настоящего технического решения является расширение арсенала способов диагностики, а именно создание способа прогнозирования общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом по данным о генетических полиморфизмах -590С/Т гена интерлейкина 4, -174G/C гена интерлейкина 6 и наличия цитопенических осложнений в течении заболевания.

Технический результат использования изобретения - получение критериев оценки выживаемости больных хроническим лимфолейкозом.

В соответствии с поставленной задачей был разработан способ прогнозирования общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом, включающий:

- выделение ДНК из периферической венозной крови;

- анализ полиморфизмов -590С/Т гена интерлейкина 4 и -174G/C гена интерлейкина 6;

- выявление наличия цитопенических осложнений;

- прогнозирование снижения общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом в случае выявления аллеля -590Т гена интерлейкина 4, аллеля -174G гена интерлейкина 6 и наличия цитопенических осложнений в течении заболевания.

Новизна и изобретательский уровень заключается в том, что из уровня техники не известна возможность прогноза общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом по наличию аллеля -590Т гена интерлейкина 4, аллеля -174G гена интерлейкина 6 и цитопенических осложнений в течении заболевания. Способ осуществляют следующим образом:

ДНК выделяют из образцов периферической венозной крови больных хроническим лимфолейкозом в 2 этапа. На первом этапе к 4 мл крови добавляют 25 мл лизирующего буфера, содержащего 320 мМ сахарозы, 1% тритон Х-100, 5 мМ MgCl2, 10 мМ трис-HCl (рН=7,6). Полученную смесь перемешивают и центрифугируют при 4°С, 4000 об./мин. в течение 20 минут. После центрифугирования надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют 4 мл раствора, содержащего 25 мМ ЭДТА (рН=8,0) и 75 мМ NaCl, ресуспензируют. Затем прибавляют 0,4 мл 10% SDS, 35 мкл протеиназы К (10 мг/мл) и инкубируют образец при 37°С в течение 16 часов.

На втором этапе из полученного лизата последовательно проводят экстракцию ДНК равными объемами фенола, фенол-хлороформа (1:1) и хлороформа с центрифугированием при 4000 об./мин. в течение 10 минут. После каждого центрифугирования производят отбор водной фазы. ДНК осаждают из раствора двумя объемами охлажденного 96% этанола. Сформированную ДНК растворяют в бидистиллированной, деионизованной воде и хранят при -20°С.

Выделенную ДНК затем подвергают полимеразной цепной реакции с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров (таблица 1).

Изучение полиморфных локусов интерлейкина 4 (-590С/Т IL-4) и интерлейкина 6 (-174G/C IL-6) проводили методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК на амплификаторе IQ5 (Bio-Rad) с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров и зондов (таблица 1) с последующим анализом полиморфизма методом дискриминации аллелей.

Реакционная смесь объемом 25 мкл включает: 67 мМ трис-HCl (рН=8,8), 2,5 мМ MgCl2, 0,1 мкг геномной ДНК, по 10 пМ каждого праймера, по 5 пкмоль каждого зонда, по 200 мкМ dATP, dGTP, dCTP, dTTP и 1 единицу активной Taq-полимеразы. После денатурации (4 мин при 95°С) выполняли 40 циклов амплификации по схеме: отжиг праймеров - 1 мин. при 59°С; денатурация - 15 сек при 95°С.

Изобретение характеризуется на фиг.1. и фиг.2.

На фиг.1 представлена дискриминация аллелей по локусу -590С/Т IL-4 (где • - гомозиготы по аллелю -590С, - гомозиготы по аллелю -590Т, ▲ - гетерозиготы -590СТ, - отрицательный контроль), которая осуществляется методом Tag Man зондов по данным величин RFU, где RFU это уровень относительной флуоресценции (УОФ) каждого зонда. Зонд с флуоресцентным красителем ROX соответствует аллелю Т, зонд с красителем FAM - аллелю С.

На фиг.2 представлена дискриминация аллелей по локусу -174G/C IL-6 (где • - гомозиготы по аллелю -174С, - гомозиготы по аллелю -174G, ▲ - гетерозиготы -174GC, - отрицательный контроль), которая также осуществляется методом Tag Man зондов по данным величин RFU, где RFU это уровень относительной флуоресценции (УОФ) каждого зонда. Зонд с флуоресцентным красителем ROX соответствует аллелю G, зонд с красителем FAM - аллелю С.

На фиг.1 и 2 две полосы, вертикальная и горизонтальная, делят график на четыре секции: одна для каждого гомозиготного состояния, одна для гетерозиготного состояния и секция без реакции. Присвоение генотипов неизвестным образцам определяется вычерчиванием RFU для одного флуорофора (на оси х) относительно RFU для другого флуорофора (на оси у) на диаграмме дискриминации аллелей.

- Если значения RFU неизвестного образца находятся выше горизонтальной полосы и правее вертикальной полосы, генотип гетерозиготен (-590СТ IL-4, -174GC IL-6, соответственно).

- Если значения RFU неизвестного образца находятся выше горизонтальной полосы и левее вертикальной полосы, генотип гомозиготен по аллелю -590Т IL-4 и аллелю -174GIL-6, соответственно (RFU для данных аллелей отложены по оси у).

- Если значения RFU неизвестного образца находятся ниже горизонтальной полосы и правее вертикальной, генотип гомозиготен по аллелю -590С IL-4 и аллелю -174С IL-6, соответственно (RFU для данных аллелей отложены по оси х).

- Если значения RFU неизвестного образца находятся ниже горизонтальной полосы и левее вертикальной, определение генотипа невозможно (в данном случае неопределенный образец - отрицательный контроль).

Формирование базы данных и статистические расчеты осуществлялись с использованием программы «STATISTICA 6.0». Влияние генетических и паратипических факторов на общую выживаемость больных хроническим лимфолейкозом изучали с применением регрессионной модели Кокса [11].

Возможность использования предложенного способа для оценки риска снижения общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом подтверждает анализ результатов наблюдений 206 больных хроническим лимфолейкозом и 307 человек популяционного контроля. Пациенты включались в соответствующую группу больных только после установления диагноза заболевания, подтвержденного с помощью клинических и лабораторно-инструментальных методов обследования.

В исследуемую группу включались индивидуумы русской национальности, являющиеся уроженцами Центрального Черноземья России и не имеющие родства между собой.

С помощью монофакторного анализа общей выживаемости пациентов с хроническим лимфолейкозом (регрессионная модель Кокса) были выделены факторы, имеющие неблагоприятное прогностическое значение. Установлено, что наличие аллеля -590Т гена IL-4, аллеля -174G гена IL-6 и развитие цитопенических осложнений в течении хронического лимфолейкоза ухудшают общую выживаемость (табл.2).

Предполагая, что возможна взаимосвязь факторов, влияющих на общую выживаемость пациентов с хроническим лимфолейкозом, был проведен многофакторный регрессионный анализ, который показал аналогичные данным монофакторного анализа результаты: неблагоприятными прогностическими факторами являются носительство аллелей -590Т IL-4, -174G IL-6 и наличие цитопенических осложнений в течении ХЛЛ (р=0,05).

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о взаимосвязи двух полиморфизмов генов -590С/Т IL-4 и -174G/C IL-6 с общей выживаемостью больных хроническим лимфолейкозом. С помощью регрессионного анализа выделены факторы, снижающие общую выживаемость: факторами риска являются носительство аллеля -590Т гена IL-4 и аллеля -174G гена IL-6, а также наличие цитопенических осложнений в течении хронического лимфолейкоза.

Применение данного способа позволит спрогнозировать выживаемость пациентов с хроническим лимфолейкозом и подобрать индивидуальную тактику ведения больного хроническим лимфолейкозом.

Таблица 2
Монофакторный анализ влияния генетических и паратипических факторов на общую выживаемость у больных хроническим лимфолейкозом
Факторы, снижающие общую выживаемость пациентов Уровень значимости фактора, р
Наличие мужского пола 0,10
Наличие септических осложнений в дебюте заболевания 0,34
Наличие симптомов интоксикации в дебюте заболевания 0,34
Наличие цитопенических осложнений в дебюте заболевания 0,41
Наличие септических осложнений на момент обследования 0,33
Наличие симптомов интоксикации на момент обследования 0,42
Наличие цитопенических осложнений на момент обследования 0,04
Наличие аллеля -889С L-1A 0,45
Наличие аллеля -511С IL-1B 0,42
Наличие аллеля -590Т IL-4 0,05
Наличие аллеля -703 С IL-5 0,31
Наличие аллеля -174G IL-6 0,05
Наличие аллеля -251A IL-8 0,67
Наличие аллеля 113Т IL-9 0,15
Наличие аллеля -592C IL-10 0,33

Литература.

1. Клиническая онкогематология. / Под ред. М.А. Волковой. - М.: Медицина, 2001 - С.376-394.

2. Воробьев А.И., Кременецкая А.М., Харазишвили Д.В. Опухоли лимфатической системы. // Гематол. и трансфузиология. - 2000. - №3. - С.3-14.

3. Волкова М.А. Биологические особенности хронического лимфолейкоза и современные подходы к его терапии. // Материалы V Российской онкологической конференции, Москва - 2001. - 240 с.

4. Геном человека и гены «предрасположенности»: введ. в предиктив. медицину / В.С. Баранов, Е.В. Баранова, Т.Э. Иващенко [и др.]. - СПб.: Интермедика, 2000. - 271 с.

5. Chronic lymphocytic leukemia cell CD38 expression and inducible nitric oxide synthase expression are associated with serum IL-4 levels / M. C. Levesque, Y. Chen, В. E. Beasley [et al.] // Leuk. Res. - 2006. - Vol.30, №1. - P.24-28.

6. Калимуллина, Д. X. Полиморфизм промоторной области (-174 G/C) гена IL-6 и выживаемость при множественной миеломе / Д.X. Калимуллина, А.Б. Бакиров, Т.В. Викторова // Российский биотерапевтический журнал. - 2004. - Т.3, №3. - С.32-36.

7. Популяционные особенности полиморфизма генов цитокинов (IL-4, IL-10) у коренных жителей республики Хакасия, больных аллергической бронхиальной астмой / Е.А. Андрейчикова, Ю.А. Сенникова, А.А. Пискунов [и др.] // Цитокины и воспаление. - 2009. - Т.8, №4. - С.37-40.

8. Полиморфизм промоторного региона генов IL-4, IL-6 и IL-10 у пациенток с раком молочной железы / А.В. Шевченко, О.В. Голованова, М.Ю. Коломейчук [и др.] // Медицинская иммунология. - 2009. - Т.11, №1. - С.21-28.

9. Ассоциация полиморфных маркеров генов цитокинов (IL1B, IL1RN, TNFA, LTA, IL6, IL8, IL10) с развитием хронической обструктивной болезни легких / К.В. Данилко, Г.Ф. Корытина, Л.З. Ахмадишина [и др.] // Молекулярная биология. - 2007. - Т.41, №1. - С.26-36.

10. Analysis of inflammation- and atherosclerosis-related gene polymorphisms in branch retinal vein occlusion / I. Steinbrugger, A. Haas, R. Maier [et al] // Mol. Vis. - 2009. - Vol.15. - P.609-618.

11. Боровиков, В. Statistica: искусство анализа данных на компьютере / В. Боровиков. - 2-е изд. - СПб.: Питер, 2003. - 688 с.: ил. - (Для профессионалов).

Способ прогнозирования общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом, включающий выделение ДНК из периферической венозной крови, анализ полиморфизма -590С/Т гена интерлейкина 4, -174G/C гена интерлейкина 6, выявление наличия цитопенических осложнений, и в случае выявления аллеля -590Т IL-4, аллеля -174G IL-6 и наличия цитопенических осложнений в течении заболевания прогнозируют снижение общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования распространенного гнойного перитонита (РГП). Сущность способа состоит в том, что с помощью биолюминесцентного метода определяют активность лактатдегидрогеназы (ЛДГ), малатдегидрогеназы (МДГ), НАДФ-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДФГДГ) и глутатионредуктазы (ГР) в лимфоцитах периферической крови больных РГП.
Изобретение относится к медицине и касается способа лабораторной диагностики развития инфекции у больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ) в состоянии индуцированной нейтропении.
Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и неонатологии, и может быть использовано для доклинической диагностики респираторного дистресс-синдрома различной степени тяжести у недоношенных новорожденных при внутриутробном гриппе A(H3N2).
Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и неонатологии, и может быть использовано при прогнозировании летального исхода у новорожденных при церебральной ишемии тяжелой степени.

Изобретение относится к области:- медицины, а именно к диагностике нарушений функции гематоэнцефалического барьера (ГЭБ) и мониторингу эффективности проводимой терапии; - иммуно-диагностики, а именно к определению уровня содержания натуральных антител в сыворотке крови; - пептидной химии, а именно к конструированию и модификации синтетических пептидных фрагментов для использования в качестве антигена для определения натуральных антител к природным белкам человеческого организма, в частности для определения натуральных антител к белку S100 человека.
Изобретение относится к медицине, в частности к неврологии и нейрохирургии, а именно к способам оценки функционального состояния спинальных мотонейронов при электростимуляции спинного мозга у больных с осложненной травмой верхне-шейного отдела позвоночника.
Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, а именно к способу прогнозирования развития нарушений витальных функций при синдроме Гийена-Барре (СГБ).

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано в челюстно-лицевой хирургии и стоматологии. .
Изобретение относится к медицине, а именно к способу дифференциальной диагностки первой и второй групп здоровья у детей коренного населения Крайнего Севера. .
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологическим заболеваниям, и может быть использовано для диагностики перенесенного ишемического инсульта у пациентов с гемодинамически значимыми стенозами и окклюзиями магистральных артерий головы.
Изобретение относится к области медицины. Предложен способ прогнозирования риска нарушений фертильности у мужчин с ожирением, включающий отбор венозной крови, проведение аллель-специфичной полимеразной цепной реакции с использованием флуоресцентно-меченного олигонуклеотидного зонда и анализа кривой плавления. При выявлении аллеля А полиморфных вариантов rs2414096 и rs749292 гена ароматазы CYP19A прогнозируют риск нарушения фертильности у мужчин с ожирением. Изобретение обеспечивает новые прогностические критерии для оценки риска нарушений фертильности у мужчин с ожирением. 8 табл.
Изобретение относится к области медицины. Предложен способ прогнозирования течения заболевания у больных саркомой мягких тканей, включающий биохимическое исследование. Каждые три месяца больным саркомой мягких тканей проводят контрольные осмотры и определяют в сыворотке крови содержание С-реактивного белка (С-РБ). При содержании С-РБ от 1,94 до 3,25 мг/л, в среднем 2,56 мг/л, прогнозируют стабилизацию процесса, при содержании С-РБ от 5,18 до 45,45 мг/л, в среднем 14,24 мг/л, прогнозируют появление отдаленных метастазов через 3-6 месяцев, при содержании С-РБ от 6,17 до 95,00 мг/л, в среднем 29,66 мг/л, прогнозируют наличие отдаленных метастазов, генерализацию процесса. Изобретение обеспечивает эффективное прогнозирование течения заболевания у больных саркомой мягких тканей за счет выявления биохимических различий в динамике С-РБ. 1 табл., 5 пр.
Метод масс-спектрометрического секвенирования пептидов и определения их аминокислотных последовательностей основан на фрагментировании в ионном источнике масс-спектрометра между соплом и скиммером молекулярных ионов пептидов под воздействием электрического поля управляемой величины и на последующем анализе масс-спектров фрагментов. Пептид поступает в источник ионов, электрогазодинамическая система транспортировки которого позволяет управлять степенью фрагментации молекулярного иона при помощи изменения электрического поля. Далее ионы разделяют в масс-анализаторе и направляют в детектор, где осуществляют регистрацию масс-спектра пептида и его фрагментов с различной глубиной фрагментации одновременно в одном спектре. Масс-спектры фрагментов пептида, полученные при разных значениях напряженности электрического поля, обрабатывают системой регистрации, анализируют, в результате чего определяют аминокислотную последовательность исходного пептида. Управляемая степень фрагментации в источнике ионов под воздействием варьируемого электрического поля в диапазоне 122-104 В/м и давлениях остаточного газа в диапазоне 100-2000 Па позволяет определять аминокислотную последовательность пептидов, содержащих до 10-15 аминокислотных остатков, что соответствует средней длине пептидов - продуктов ферментативного гидролиза белков. Технический результат - упрощение и ускорение способа.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, в частности к способу прогнозирования тяжести течения эпилепсии. Сущность способа состоит в том, что определяют спектр молекул средней массы в сыворотке крови пациента до начала терапии. При значениях фракции молекул средней массы, определяемых как оптическое поглощение Е при длине волны 230 нм, ниже 0,118 усл.ед. и значении нуклеарно-пептидарного коэффициента, определяемого как отношение оптического поглощения Е при длине волны 230 нм к оптическому поглощению Е при длине волны 254 нм ниже 0,4 прогнозируют тяжелое течение эпилепсии. Использование заявленного способа позволяет повысить точность прогнозирования течения эпилепсии. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу получения терапевтического агента для лечения клещевого энцефалита людей. Способ включает получение аптамеров, которые способны образовывать комплекс с третичной структурой поверхностного белка вируса. Используют фрагмент поверхностного белка Е вируса клещевого энцефалита, с 50 по 250 аминокислоту от N-конца белка, ген которого амплифицируют и клонируют в плазмидном векторе. Клонированный рекомбинантный белок экспрессируют. Полученный белок очищают и иммобилизуют на планшете. Из первоначального пула вырожденных олигонуклеотидов состава 5'-CTCCTCTGACTGTAACCACG-(N40)-GGCTTCTGGCTACCTATGC-3', где N - любой из нуклеотидов (G, A, T, C), взятых в эквивалентном количестве при синтезе 40-звенных олигонуклеотидов, содержащих на 5'- конце флуоресцентный краситель FAM с помощью 15 циклов экспоненциального обогащения, SELEX, проводят отбор специфично связывающихся с вирусным белком аптамеров. На каждом этапе сорбции проводят денатурацию 25 рМ одноцепочечного олигонуклеотида. Наносят денатурированный пул аптамеров в лунку с иммобилизованным белком, инкубируют и отмывают от несвязавшихся олигонуклеотидов. Связанные с белком аптамеры снимают с поверхности буфером с низкой ионной силой и высоким pH. Пул аптамеров, после каждого этапа сорбции, амплифицируют. Полученные ампликоны двуцепочечной библиотеки аптамеров очищают и проводят реакцию ассиметричной полимеразной цепной реакции (ПЦР). Продукт очищают с помощью сорбции с получением целевого продукта в виде аптамеров. Предложенное изобретение позволяет получить аптамеры, которые используют для предотвращения заболевания клещевым энцефалитом. 4 з.п. ф-лы, 1 пр.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии, конкретно к новым аллергенам, и может быть использовано в диагностике аллергии. Новые аллергены используют в способе диагностики IgE-опосредованной аллергии in vitro на пшеницу, включающем контактирование образца жидкости организма из млекопитающего, у которого предполагается наличие IgE-опосредованной аллергии на пшеницу, по меньшей мере, с одним полипептидом с SEQ ID NO: 2 или 8, или с его фрагментом или вариантом, имеющим общие эпитопы для антител с указанным полипептидом и имеющим последовательность, идентичную SEQ ID NO: 2 или 8 по крайней мере на 95%; и выявление присутствия в образце IgE-антител, специфично связывающихся с указанным полипептидом или полипептидами. Присутствие в образце таких антител является показателем IgE-опосредованной аллергии на пшеницу. Диагностический набор включает указанные полипептиды и средства для выявления связывания IgE с указанным полипептидом, такие как твердая подложка, например нитроцеллюлозная мембрана или микроматрица, содержащая связанный с ней полипептид. Изобретение позволяет эффективно диагностировать IgE-опосредованную аллергию на пшеницу. 5 н. и 3 з.п. ф-лы, 13 ил., 9 табл., 4 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии и ортопедии, и может быть использовано для диагностики остеохондроза поясничного отдела позвоночника и для дифференциальной диагностики между поясничным остеохондрозом и другими спондилогенными заболеваниями поясничного отдела. Сущность способа: у больных с заболеваниями позвоночника в сыворотке крови определяют концентрацию провоспалительных цитокинов фактора некроза опухоли-α (ФНО-α), интерлейкина-1 (ИЛ-1) и интерлейкина-2 (ИЛ-2). При значениях ФНО-α более 3,6±0,6 пг/мл, ИЛ-1 более 53,2±8,2 пкг/мл, ИЛ-2 менее 319,2±11,03 пкг/мл диагностируют остеохондроз поясничного отдела позвоночника. 1 пр., 1 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии и офтальмологии, и может быть использовано для отбора пациентов с активной фазой эндокринной офтальмопатии, нуждающихся в системной пульс-терапии метилпреднизолоном. Для осуществления способа индивидуального назначения системной пульс-терапии глюкокортикостероидами пациентам с эндокринной офтальмопатией оценивают по шкале CAS активность заболевания и определяют в сыворотке крови пациента содержание белка теплового шока 90. При активности заболевания 3 балла и более в сочетании с содержанием белка теплового шока 90 менее 38 нг/мл назначают проведение системной пульс-терапии глюкокортикостероидами. Использование способа позволяет объективно подобрать соответствующее лечение. 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии и нефрологии, и может быть использовано для диагностики мочекаменной болезни (уролитиаза). Сущность способа: исходную пробу мочи разделяют на два одинаковых образца, получают гистограммы распределения частиц по размерам, по которой определяют процентное содержание олигомерной формы Т&НЕ(7) белка Тамма-Хорсфалла и сравнивают гистограммы образцов. В качестве реагента для идентификации белка Тамма-Хорсфалла используют моноклональные антитела, вступающие с белком Тамма-Хорсфалла в имунно-афинную реакцию. Из второго образца извлекают белок Тамма-Хорсфалла Т&НЕ(28) и в обоих образцах мочи определяют содержание олигомерной формы Т&НЕ(28) белка Тамма-Хорсфалла в свободном состоянии и в агрегатах с микрокристаллами оксалатов (в %). Затем рассчитывают соотношение выявленных олигомерных форм по формулам: С1=Т&НЕ(28)А/Т&НЕ(7) и C2=T&HE(28)F/T&HE(7). При соотношении С1>1.5 и любом значении соотношения С2 диагностируют уролитиаз, при соотношениях С1<0.1 и С2<1.81 диагностируют отсутствие заболевания, а при соотношениях С<1,5 и С2>1.81 пациента относят к группе риска развития уролитиаза. Способ позволяет проводить разграничение обследуемых не только на группы больных уролитиазом и здоровых, но и выделить группу риска развития уролитиаза. Способ обладает высокой точностью, специфичностью и чувствительностью, не требует больших трудозатрат и времени исследования. 3 ил., 4 табл.

Изобретение относится к медицине и описывает способ определения in vitro типа воспалительного ревматического заболевания, а именно дифференциации ревматоидного артрита от реактивного артрита и артрита при кожных заболеваниях, где определяют присутствие или отсутствие белка Hdj2 в синовиальной жидкости на ранней стадии заболевания, т.е. в течение времени, составляющего вплоть до двух лет от появления первых симптомов воспалительного ревматоидного артрита. Также описано применение моноклональных антител к белку Hdj2 для осуществления дифференциальной диагностики in vitro воспалительного ревматического заболевания. Изобретение обеспечивает возможность ранней диагностики ревматоидного артрита. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 4 пр., 3 табл.
Наверх