Способ прогнозирования риска нарушений фертильности у мужчин с ожирением



Владельцы патента RU 2498314:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздравсоцразвития России) (RU)

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ прогнозирования риска нарушений фертильности у мужчин с ожирением, включающий отбор венозной крови, проведение аллель-специфичной полимеразной цепной реакции с использованием флуоресцентно-меченного олигонуклеотидного зонда и анализа кривой плавления. При выявлении аллеля А полиморфных вариантов rs2414096 и rs749292 гена ароматазы CYP19A прогнозируют риск нарушения фертильности у мужчин с ожирением. Изобретение обеспечивает новые прогностические критерии для оценки риска нарушений фертильности у мужчин с ожирением. 8 табл.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для прогнозирования нарушения фертильности мужчин с ожирением.

Известен способ определения фертильности мужчин (RU 2052202 C1, Посисеева и др., 10.01.1996). В спермальной жидкости исследуют содержание термостабильного альфа-1-гликопротеина и при уровне последнего выше 16 мкг/мл диагностируют сниженную фертильность спермы. Описан также способ диагностики ранних нарушений репродуктивной функции у мужчин (RU 2413949 C1, Тарасова и др., 10.03.2011). В сыворотке крови методом иммуноферментного анализа определяют концентрации цитокинов IL-8, IL-10 и IL-1RA, затем вычисляют диагностический индекс DI. При DI более 0 диагностируют ранние нарушения репродуктивной функции у мужчин, а при DI менее 0 делают заключение об отсутствии лабораторных признаков нарушений мужской репродуктивной функции. Однако указанные способы не предполагают выявления группы риска развития бесплодия у мужчин с ожирением.

В изобретении (RU 2342660 C2, Семенов, 27.12.2008) описан способ прогнозирования нарушений фертильности у мужчин. Путем проточной цитометрии спермы исследуют соотношение лимфоцитов с фенотипом CD25+ и CD95+. При его значениях менее 0,71 и более 1,20 прогноз фертильности признается неблагоприятным. Однако и этот способ не позволяет выявить группу риска развития бесплодия среди мужчин с ожирением.

Наиболее близким к патентуемому, является способ прогнозирования нарушения фертильности спермы у мужчин в виде астенозооспермии, в котором исследуют периферическую кровь посредством анализа генов (RU 2314530 C1, Фетисова и др., 10.01.2008 - прототип). На выделенной из лимфоцитов ДНК амплифицируют фрагменты генов глутатион-S-трансфераз M1 и Р1. При выявлении одного из генотипов GSTM1 0/0, GSTP1 В/В, GSTP1 В/С и GSTP1 С/С прогнозируют риск развития астенозооспермии. Однако указанный способ дает возможность определить только нарушение подвижности сперматозоидов и не касается морфологии и концентрации.

Вместе с тем известно, что бесплодие развивается не у всех мужчин с ожирением. Одним из возможных факторов, который может объяснить гормональные изменения у мужчин с ожирением, а также различия во влиянии ожирения на конкретного индивидуума, является полиморфизм гена ароматазы, который ответственен за превращение тестостерона в эстрадиол в различных тканях организма, в том числе и жировой ткани (см. обзор литературы в ст. Гамидова С.И и др. в ж. Проблемы репродукции, 2010, N 6, с.79-88). Показано существование полиморфизмов гена ароматазы CYP19A1, который локализуется в хромосоме 15q21.2. Доказано, что у мужчин с большей частотой повторов ТТТА концентрация эстрадиола в сыворотке крови была значительно выше и зависела от веса. Кроме того, показано, что только мужчины с большей частотой повторов ТТТА в гене ароматазы CYP19A1 имеют шанс снижения уровня эстрадиола после похудения (Hammoud A et al. An aromatase polymorphism modulates the relationship between weight and estradiol levels in obese men. Fertil steril; 2009; 10: 37).

M.R. Sowers и соавт. (Sowers M.R. et al. Aromatase gene (CYP 19) polymorphisms and endogenous androgene concentrations in a multiracial/multiethnic, multisite study of women at midlife. Am J Med. 2006 Sep; 119 (9 Suppl 1): S 23-30)) изучали связь полиморфизма гена ароматазы с концентрацией андрогенов у женщин среднего возраста. Проанализированы пять однонуклеотидных полиморфизмов гена ароматазы CYP19A1 (rs2414096, rs936306, rs2446405, rs1008805, rs749292). Три из пяти полиморфизмов были связаны с изменениями концентрации андрогенов. Однако прямая корреляция связи полиморфизмов указанного гена с фертильностью у мужчин с ожирением в литературе не описана.

Задачей настоящего изобретения является поиск критериев прогнозирования риска нарушений фертильности у мужчин с ожирением, в чем и состоит технический результат изобретения.

Патентуемый способ прогнозирования риска нарушений фертильности у мужчин с ожирением включает отбор венозной крови, проведение аллель-специфичной полимеразной цепной реакции с использованием флуоресцентно-меченного олигонуклеотидного зонда и анализа кривой плавления, определение генотипов полиморфизмов rs2414096 и rs749292 гена ароматазы CYP19A, выявление аллеля А полиморфизмов rs2414096 и rs749292, при наличии которого прогнозируют риск нарушения фертильности у мужчин с ожирением.

Для определения роли полиморфизмов гена ароматазы CYP19A1 в развитии бесплодия у мужчин с ожирением было обследовано 85 мужчин с ожирением, которым производилось генетическое исследование. Описание полиморфизмов гена ароматазы CYP19A1 приведено в табл.1.

Таблица 1
Полиморфизмы гена ароматазы CYP19A1
Полиморфизм Замена Позиция в хромосоме Локализация в гене
rs2414096 A>G 15q21.1: 51529779 Интрон
rs749292 A>G 15q21.1: 51558731 Интрон
rs936306 C>Т 15q21.1: 51579598 3'UTR

Обследованные мужчины с ожирением были разделены на две группы. В основную группу (группа 1) были включены 50 мужчин с ИМТ более 30 кг/м2 и идиопатической патозооспермией; в контрольную группу (группа 2) были включены 35 фертильных пациентов с ИМТ более 30 кг/м2.

Сравнительный анализ пациентов двух групп не выявил статистически достоверных различий в антропометрических показателях, наличии или отсутствии вредных привычек.

Данные, представленные в табл.2, обосновывают наличие связи бесплодия у мужчин с ожирением и присутствием аллеля А полиморфизма rs2414096. У мужчин с ожирением и бесплодием почти в 2 раза чаще, чем у фертильных мужчин, выявляется носительство гомозиготного генотипа АА. Встречаемость аллеля А у бесплодных мужчин составила 60% по сравнению с 42,9% в контрольной группе (p=0,027). Риск развития бесплодия (OR) у мужчин с ожирением при наличии у них аллеля А в геторо- или гомозиготной форме составил 2,0 (95% ДИ: 1,1-3,7).

Таблица 2
Частота полиморфизма rs2414096 гена ароматазы CYP19A1
Генотип Фертильные Бесплодные
количество % количество %
АА 7 20,00 19 38,00
AG 16 45,70 22 44,00
GG 12 34,30 9 18,00
Частота аллелей        
А 30 42,90 60 60,00*
G 40 57,10 40 40,00
Примечание: * - достоверность различия p=0,027.

Аналогичная ассоциация была обнаружена также и для полиморфизма rs749292. У бесплодных мужчин с ожирением гомозиготный генотип АА встречался в 1,7 раз чаще, чем у мужчин контрольной группы (38,0% и 22,9%, соответственно). Риск развития бесплодия при наличии аллеля А полиморфизма rs749292 составил 1,92 (95% ДИ: 1,04-3,55). Данные о частоте полиморфизма rs749292 в группах представлены в табл.3.

Таблица 3
Частота полиморфизма rs749292 гена ароматазы CYP19A1
Генотип Фертильные Бесплодные
количество % количество %
АА 8 22,9 19 38
AG 14 40 21 42
GG 13 31,1 10 20
Частота аллелей        
А 30 42,9 59 59,0*
G 40 57,1 41 41,0
Примечание: * - достоверность различия p=0,038.

Частота аллелей С и Т полиморфизма rs936306 у бесплодных и фертильных мужчин с ожирением была практически одинаковой: 81,4 и 18,6% у фертильных пациентов и 83,0 и 17,3% у пациентов с идиопатическим бесплодием. Данные о частоте полиморфизма rs936306 в группах представлены в табл.4.

Таблица 4
Частота полиморфизма rs936306 в группах
Генотип Фертильные Бесплодные
количество % количество %
СС 23 65,7 35 70
СТ 11 31,4 13 26
ТТ 1 2,9 2 4
Частота аллелей        
С 57 81,4 83 83,0
Т 13 18,6 17 17,0

После определения частоты встречаемости полиморфизмов гена ароматазы и их связи с развитием бесплодия у мужчин с ожирением нами проведено сравнение показателей спермограммы и уровня гормонов у пациентов основной группы в зависимости от генотипа полиморфизма гена ароматазы rs2414096 и rs749292, т.е. тех полиморфизмов, для которых была выявлена связь с развитием бесплодия у мужчин с ожирением.

При обследовании пациенты с полиморфизмом rs749292 гена ароматазы CYP19A1 были разделены нами в зависимости от генотипа: генотип АА (19 мужчин), генотип AG (21 мужчина) и генотип GG (10 мужчин).

При математической обработке данных у пациентов с генотипом АА уровни ЛГ, ФСГ и тестостерона были достоверно ниже, чем аналогичные показатели гормонов у пациентов с генотипами AG и GG. Средний уровень эстрадиола оказался выше у пациентов с генотипом АА (p<0,05). Вышеописанные данные представлены в табл.5.

Таблица 5
Уровни гормонов в зависимости от генотипа полиморфизма rs749292 гена ароматазы CYP19A1
Гормон Генотип АА (N=19) Генотип AG (N=21) Генотип GG (N=10)
ЛГ, мЕд/мл 2,8±0,2* 4,0±0,3 4,9±0,5
ФСГ, мЕд/мл 3,1±0,3* 6,1±0,5 6,0±0,7
ТТГ, мЕд/л 2,4±0,2 2,0±0,2 1,9±0,3
Тироксин, нмоль/л 96,1±4,8 103,8±4,3 93,8±6,8
Эстрадиол, пмоль/л 134,9±3,7* 97,2±4,4 86,8±5,2
Прогестерон, нмоль/л 1,4±0,1 1,3±0,1 1,2±0,2
Пролактин, мЕд/л 253,4±25,9 244,7±21,9 222,6±26,5
Тестостерон, нмоль/л 11,1±0,7* 17,2±0,9 20,1±1,0
Кортизол, нмоль/л 305,6±28,2 352,0±30,0 388,5±37,3
Лептин, нг/мл 13,6±1,3 12,6±1,0 10,5±1,2
Примечание: * - p<0,05 при сравнении показателей гормонов у пациентов в зависимости от генотипа полиморфизма rs749292 гена ароматазы CYP19A1.

При анализе особенностей показателей спермограммы у мужчин с ожирением и идиопатической патозооспермией в зависимости от генотипа полиморфизма rs749292 гена ароматазы CYP19A1 были обнаружены следующие особенности. Все три группы были сопоставимы по объему эякулята и подвижности сперматозоидов (p>0,05). В то же время, концентрация сперматозоидов у мужчин с генотипом АА была достоверно ниже, чем у мужчин с генотипом GG, а показатели концентрации сперматозоидов у мужчин с генотипом AG являлись промежуточными. Аналогичная ситуация была отмечена при анализе количества нормальных форм сперматозоидов - 14,1±1,3% и 20,8±2,5% соответственно (p<0,05) (см. табл.6).

Таблица 6
Показатели спермограммы в зависимости от генотипа полиморфизма гена ароматазы rs749292
Показатели спермограммы Генотип АА (N=19) Генотип AG (N=21) Генотип GG (N=10)
Объем эякулята, мл 3,2±0,2 2,9±0,2 2,6±0,2
Концентрация сперматозоидов, млн/мл 34,8±7,9 42,3±8,3 46,8±9,1*
Подвижность категория А, % 11,2±1,1 12,7±1,2 13,5±1,5
Подвижность категория А+В, % 26,7±2,0 30,1±2,1 31,5±3,2
Морфология, % 14,1±1,3 18,3±2,1 20,8±2,5*
Примечание: * - p<0,05 при сравнении генотипов АА и GG полиморфизма rs749292 гена ароматазы CYP19A1.

При оценке гормонального профиля у мужчин с идиопатической патозооспермией и ожирением, в зависимости от генотипа полиморфизма rs2414096 гена ароматазы CYP19A1, получены результаты, которые представлены в табл.7.

Таблица 7
Уровни гормонов в зависимости от генотипа полиморфизма rs2414096 гена ароматазы CYP19A1
Гормон Генотип АА (N=19) Генотип AG (N=22) Генотип GG (N=9)
ЛГ, мЕд/мл 2,5±0,2* 4,3±0,2 4,7±0,6
ФСГ, мЕд/мл 2,5±0,2* 6,4±0,4 6,1±0,8
ТТГ, мЕд/л 2,3±0,2 2,2±0,2 1,8±0,3
Тироксин, нмоль/л 98,9±4,8 99,6±4,4 96,9±7,0
Эстрадиол, пмоль/л 137,9±2,8* 96,9±3,7 84,8±6,4
Прогестерон, нмоль/л 1,4±0,1 1,4±0,1 1,2±0,2
Пролактин, мЕд/л 255,4±27,5 242,4±20,5 223,3±27,3
Тестостерон, нмоль/л 11,2±0,8* 17,0±0,9 20,1±1,3
Кортизол, нмоль/л 318,5±30,0 342,8±27,3 386,7±42,9
Лептин, нг/мл 14,5±1,3 11,4±0,9 11,7±1,3
Примечание: * - p<0,05 при сравнении генотипов АА с генотипами AG и GG полиморфизма rs2414096 гена ароматазы CYP19A1

При математической обработке данных у пациентов с генотипом АА уровни ЛГ, ФСГ и тестостерона были достоверно ниже, чем аналогичные показатели гормонов у пациентов с генотипами AG и GG. Средний уровень эстрадиола оказался выше у пациентов с генотипом АА (р<0,05).

Данные спермиологического исследования при анализе влияния генотипа полиморфизма rs2414096 гена ароматазы CYP19A1 представлены в табл.8.

Таблица 8
Показатели спермограммы в зависимости от генотипа полиморфизма rs2414096 гена ароматазы CYP19A1
Показатели спермограммы Генотип АА (N=19) Генотип AG (N=22) Генотип GG (N=9)
Объем эякулята, мл 3,2±0,2 2,8±0,2 2,8±0,3
Концентрация сперматозоидов, млн/мл 38,3±6,7 42,9±8,4 52,5±12,6*
Подвижность сперматозоидов (категория А), % 11,0±1,0 12,1±1,5 14,3±1,1
Подвижность сперматозоидов (категория А+В), % 25,0±1,9 27,1±2,3 33,3±2,2*
Морфология, % 13,0±1,2 18,0±1,2 23,2±4,2 **
Примечание: * - p<0,05 при сравнении генотипов АА и GG полиморфизма rs2414096 гена ароматазы CYP19A1;
** - p<0,05 при сравнении генотипа АА с генотипами AG и GG полиморфизма rs2414096 гена ароматазы CYP19A1.

У пациентов с генотипом АА этих полиморфизмов уровни ЛГ, ФСГ и тестостерона достоверно выше, чем у мужчин с генотипами AG и GG. Одновременно с этим, у мужчин с генотипом АА отмечаются более высокие показатели эстрадиола.

При оценке показателей спермограммы у пациентов с гомозиготной формой полиморфизмов гена ароматазы rs2414096 и rs749292 отмечается снижение концентрации сперматозоидов и количества сперматозоидов с активной подвижностью (категория А и А+В) в эякуляте. Кроме этого, у пациентов с генотипом АА полиморфизма гена ароматазы rs2414096 достоверно ниже содержание в эякуляте количества сперматозоидов с нормальным строением (морфология).

При наличии генотипа АА полиморфизмов rs2414096 и rs749292 гена ароматазы CYP19A1 происходит более активная ароматизация тестостерона в эстрадиол, что приводит к относительному снижению концентрации тестостерона и соответствующему повышению уровня эстрадиола, что в свою очередь приводит к снижению ФСГ и ЛГ, при этом замыкается порочный круг, так как снижение концентрации ЛГ уменьшает выработку тестостерона клетками Лейдига. Эти гормональные сдвиги и приводят к снижению сперматогенеза, особенности изменения которого описаны выше.

Таким образом, представленные экспериментальные данные доказывают достижение технического результата: выявлена связь бесплодия у мужчин с ожирением с присутствием аллеля А полиморфизмов rs749292 и rs2414096, которая может использоваться в качестве прогностического критерия риска нарушений фертильности у мужчин с ожирением.

Способ прогнозирования риска нарушений фертильности у мужчин с ожирением, включающий отбор венозной крови, проведение аллель-специфичной полимеразной цепной реакции с использованием флуоресцентно-меченного олигонуклеотидного зонда и анализа кривой плавления, определение генотипов полиморфизмов rs2414096 и rs749292 гена ароматазы CYP19A, выявление аллеля А полиморфизмов rs2414096 и rs749292, при наличии которого прогнозируют риск нарушения фертильности у мужчин с ожирением.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ прогнозирования общей выживаемости больных хроническим лимфолейкозом.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования распространенного гнойного перитонита (РГП). Сущность способа состоит в том, что с помощью биолюминесцентного метода определяют активность лактатдегидрогеназы (ЛДГ), малатдегидрогеназы (МДГ), НАДФ-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДФГДГ) и глутатионредуктазы (ГР) в лимфоцитах периферической крови больных РГП.
Изобретение относится к медицине и касается способа лабораторной диагностики развития инфекции у больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ) в состоянии индуцированной нейтропении.
Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и неонатологии, и может быть использовано для доклинической диагностики респираторного дистресс-синдрома различной степени тяжести у недоношенных новорожденных при внутриутробном гриппе A(H3N2).
Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и неонатологии, и может быть использовано при прогнозировании летального исхода у новорожденных при церебральной ишемии тяжелой степени.

Изобретение относится к области:- медицины, а именно к диагностике нарушений функции гематоэнцефалического барьера (ГЭБ) и мониторингу эффективности проводимой терапии; - иммуно-диагностики, а именно к определению уровня содержания натуральных антител в сыворотке крови; - пептидной химии, а именно к конструированию и модификации синтетических пептидных фрагментов для использования в качестве антигена для определения натуральных антител к природным белкам человеческого организма, в частности для определения натуральных антител к белку S100 человека.
Изобретение относится к медицине, в частности к неврологии и нейрохирургии, а именно к способам оценки функционального состояния спинальных мотонейронов при электростимуляции спинного мозга у больных с осложненной травмой верхне-шейного отдела позвоночника.
Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, а именно к способу прогнозирования развития нарушений витальных функций при синдроме Гийена-Барре (СГБ).

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано в челюстно-лицевой хирургии и стоматологии. .
Изобретение относится к медицине, а именно к способу дифференциальной диагностки первой и второй групп здоровья у детей коренного населения Крайнего Севера. .
Изобретение относится к области медицины. Предложен способ прогнозирования течения заболевания у больных саркомой мягких тканей, включающий биохимическое исследование. Каждые три месяца больным саркомой мягких тканей проводят контрольные осмотры и определяют в сыворотке крови содержание С-реактивного белка (С-РБ). При содержании С-РБ от 1,94 до 3,25 мг/л, в среднем 2,56 мг/л, прогнозируют стабилизацию процесса, при содержании С-РБ от 5,18 до 45,45 мг/л, в среднем 14,24 мг/л, прогнозируют появление отдаленных метастазов через 3-6 месяцев, при содержании С-РБ от 6,17 до 95,00 мг/л, в среднем 29,66 мг/л, прогнозируют наличие отдаленных метастазов, генерализацию процесса. Изобретение обеспечивает эффективное прогнозирование течения заболевания у больных саркомой мягких тканей за счет выявления биохимических различий в динамике С-РБ. 1 табл., 5 пр.
Метод масс-спектрометрического секвенирования пептидов и определения их аминокислотных последовательностей основан на фрагментировании в ионном источнике масс-спектрометра между соплом и скиммером молекулярных ионов пептидов под воздействием электрического поля управляемой величины и на последующем анализе масс-спектров фрагментов. Пептид поступает в источник ионов, электрогазодинамическая система транспортировки которого позволяет управлять степенью фрагментации молекулярного иона при помощи изменения электрического поля. Далее ионы разделяют в масс-анализаторе и направляют в детектор, где осуществляют регистрацию масс-спектра пептида и его фрагментов с различной глубиной фрагментации одновременно в одном спектре. Масс-спектры фрагментов пептида, полученные при разных значениях напряженности электрического поля, обрабатывают системой регистрации, анализируют, в результате чего определяют аминокислотную последовательность исходного пептида. Управляемая степень фрагментации в источнике ионов под воздействием варьируемого электрического поля в диапазоне 122-104 В/м и давлениях остаточного газа в диапазоне 100-2000 Па позволяет определять аминокислотную последовательность пептидов, содержащих до 10-15 аминокислотных остатков, что соответствует средней длине пептидов - продуктов ферментативного гидролиза белков. Технический результат - упрощение и ускорение способа.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, в частности к способу прогнозирования тяжести течения эпилепсии. Сущность способа состоит в том, что определяют спектр молекул средней массы в сыворотке крови пациента до начала терапии. При значениях фракции молекул средней массы, определяемых как оптическое поглощение Е при длине волны 230 нм, ниже 0,118 усл.ед. и значении нуклеарно-пептидарного коэффициента, определяемого как отношение оптического поглощения Е при длине волны 230 нм к оптическому поглощению Е при длине волны 254 нм ниже 0,4 прогнозируют тяжелое течение эпилепсии. Использование заявленного способа позволяет повысить точность прогнозирования течения эпилепсии. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу получения терапевтического агента для лечения клещевого энцефалита людей. Способ включает получение аптамеров, которые способны образовывать комплекс с третичной структурой поверхностного белка вируса. Используют фрагмент поверхностного белка Е вируса клещевого энцефалита, с 50 по 250 аминокислоту от N-конца белка, ген которого амплифицируют и клонируют в плазмидном векторе. Клонированный рекомбинантный белок экспрессируют. Полученный белок очищают и иммобилизуют на планшете. Из первоначального пула вырожденных олигонуклеотидов состава 5'-CTCCTCTGACTGTAACCACG-(N40)-GGCTTCTGGCTACCTATGC-3', где N - любой из нуклеотидов (G, A, T, C), взятых в эквивалентном количестве при синтезе 40-звенных олигонуклеотидов, содержащих на 5'- конце флуоресцентный краситель FAM с помощью 15 циклов экспоненциального обогащения, SELEX, проводят отбор специфично связывающихся с вирусным белком аптамеров. На каждом этапе сорбции проводят денатурацию 25 рМ одноцепочечного олигонуклеотида. Наносят денатурированный пул аптамеров в лунку с иммобилизованным белком, инкубируют и отмывают от несвязавшихся олигонуклеотидов. Связанные с белком аптамеры снимают с поверхности буфером с низкой ионной силой и высоким pH. Пул аптамеров, после каждого этапа сорбции, амплифицируют. Полученные ампликоны двуцепочечной библиотеки аптамеров очищают и проводят реакцию ассиметричной полимеразной цепной реакции (ПЦР). Продукт очищают с помощью сорбции с получением целевого продукта в виде аптамеров. Предложенное изобретение позволяет получить аптамеры, которые используют для предотвращения заболевания клещевым энцефалитом. 4 з.п. ф-лы, 1 пр.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии, конкретно к новым аллергенам, и может быть использовано в диагностике аллергии. Новые аллергены используют в способе диагностики IgE-опосредованной аллергии in vitro на пшеницу, включающем контактирование образца жидкости организма из млекопитающего, у которого предполагается наличие IgE-опосредованной аллергии на пшеницу, по меньшей мере, с одним полипептидом с SEQ ID NO: 2 или 8, или с его фрагментом или вариантом, имеющим общие эпитопы для антител с указанным полипептидом и имеющим последовательность, идентичную SEQ ID NO: 2 или 8 по крайней мере на 95%; и выявление присутствия в образце IgE-антител, специфично связывающихся с указанным полипептидом или полипептидами. Присутствие в образце таких антител является показателем IgE-опосредованной аллергии на пшеницу. Диагностический набор включает указанные полипептиды и средства для выявления связывания IgE с указанным полипептидом, такие как твердая подложка, например нитроцеллюлозная мембрана или микроматрица, содержащая связанный с ней полипептид. Изобретение позволяет эффективно диагностировать IgE-опосредованную аллергию на пшеницу. 5 н. и 3 з.п. ф-лы, 13 ил., 9 табл., 4 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии и ортопедии, и может быть использовано для диагностики остеохондроза поясничного отдела позвоночника и для дифференциальной диагностики между поясничным остеохондрозом и другими спондилогенными заболеваниями поясничного отдела. Сущность способа: у больных с заболеваниями позвоночника в сыворотке крови определяют концентрацию провоспалительных цитокинов фактора некроза опухоли-α (ФНО-α), интерлейкина-1 (ИЛ-1) и интерлейкина-2 (ИЛ-2). При значениях ФНО-α более 3,6±0,6 пг/мл, ИЛ-1 более 53,2±8,2 пкг/мл, ИЛ-2 менее 319,2±11,03 пкг/мл диагностируют остеохондроз поясничного отдела позвоночника. 1 пр., 1 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии и офтальмологии, и может быть использовано для отбора пациентов с активной фазой эндокринной офтальмопатии, нуждающихся в системной пульс-терапии метилпреднизолоном. Для осуществления способа индивидуального назначения системной пульс-терапии глюкокортикостероидами пациентам с эндокринной офтальмопатией оценивают по шкале CAS активность заболевания и определяют в сыворотке крови пациента содержание белка теплового шока 90. При активности заболевания 3 балла и более в сочетании с содержанием белка теплового шока 90 менее 38 нг/мл назначают проведение системной пульс-терапии глюкокортикостероидами. Использование способа позволяет объективно подобрать соответствующее лечение. 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии и нефрологии, и может быть использовано для диагностики мочекаменной болезни (уролитиаза). Сущность способа: исходную пробу мочи разделяют на два одинаковых образца, получают гистограммы распределения частиц по размерам, по которой определяют процентное содержание олигомерной формы Т&НЕ(7) белка Тамма-Хорсфалла и сравнивают гистограммы образцов. В качестве реагента для идентификации белка Тамма-Хорсфалла используют моноклональные антитела, вступающие с белком Тамма-Хорсфалла в имунно-афинную реакцию. Из второго образца извлекают белок Тамма-Хорсфалла Т&НЕ(28) и в обоих образцах мочи определяют содержание олигомерной формы Т&НЕ(28) белка Тамма-Хорсфалла в свободном состоянии и в агрегатах с микрокристаллами оксалатов (в %). Затем рассчитывают соотношение выявленных олигомерных форм по формулам: С1=Т&НЕ(28)А/Т&НЕ(7) и C2=T&HE(28)F/T&HE(7). При соотношении С1>1.5 и любом значении соотношения С2 диагностируют уролитиаз, при соотношениях С1<0.1 и С2<1.81 диагностируют отсутствие заболевания, а при соотношениях С<1,5 и С2>1.81 пациента относят к группе риска развития уролитиаза. Способ позволяет проводить разграничение обследуемых не только на группы больных уролитиазом и здоровых, но и выделить группу риска развития уролитиаза. Способ обладает высокой точностью, специфичностью и чувствительностью, не требует больших трудозатрат и времени исследования. 3 ил., 4 табл.

Изобретение относится к медицине и описывает способ определения in vitro типа воспалительного ревматического заболевания, а именно дифференциации ревматоидного артрита от реактивного артрита и артрита при кожных заболеваниях, где определяют присутствие или отсутствие белка Hdj2 в синовиальной жидкости на ранней стадии заболевания, т.е. в течение времени, составляющего вплоть до двух лет от появления первых симптомов воспалительного ревматоидного артрита. Также описано применение моноклональных антител к белку Hdj2 для осуществления дифференциальной диагностики in vitro воспалительного ревматического заболевания. Изобретение обеспечивает возможность ранней диагностики ревматоидного артрита. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 4 пр., 3 табл.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для комплексного определения генетической предрасположенности к развитию зависимости от психоактивных веществ. В биологических объектах пациента методом полимеразной цепной реакции определяют аллель G в локусе rs1042173 гена SLC6A4 серотониновой системы нейромедиаторного обмена и аллель, выбранный из группы генов дофаминовой системы нейромедиаторного обмена: G в локусе rs4680 гена СОМТ, G в локусе rs17851478 и/или С в локусе rs1611115 гена DBH, С в локусе rs6275 гена DRD2. При выявлении по меньшей мере одного аллеля риска в той и в другой системе определяют генетическую предрасположенность к развитию зависимости от психоактивных веществ. Изобретение обеспечивает повышение точности оценки риска возникновения зависимости от психоактивных веществ за счет выбора оптимальной системы маркеров нейромедиаторного обмена. 6 пр.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2013-11-10 2013-11-09T00:40:07
Наверх