Способ прогнозирования невынашивания беременности в ранние сроки


 


Владельцы патента RU 2501017:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования невынашивания беременности в ранние сроки. Сущность изобретения состоит в том, что у беременных женщин с выявленной урогенитальной инфекцией в 1 триместре проводят определение в слизи цервикального канала уровня MIP-1α. При значении уровня MIP-1α в цервикальной слизи выше 36,9 пг/мл прогнозируют высокий риск невынашивания беременности в 1 триместре. Использование заявленного изобретения позволяет повысить точность прогнозирования угрозы невынашивания беременности в 1 триместре при урогенитальной инфекции для назначения современных лечебных мероприятий. 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования невынашивания беременности в ранние сроки.

Одной из наиболее важных проблем в современном акушерстве, ведущей не только к снижению рождаемости, но и оказывающей отрицательное воздействие на репродуктивное здоровье женщины, является невынашивание беременности (Сидельникова В.М. Преждевременные роды - тактика ведения с учетом сроков гестации. // Журнал акушерства и женских болезней. - 2002. - Т. LI, Вып.2. - С.13; Сидельникова В.М. Преждевременные роды. Недоношенный ребенок. - М.: ГЕОТАР - Медиа, 2006. - С.126). По данным многих авторов, частота невынашивания беременности, не имеющая тенденции к снижению на протяжении последних 20 лет, составляет 10-25% от всех беременностей (Тетруашвили Н.К. Ранние потери беременности (иммунологические аспекты, пути профилактики и терапии): автореф. дис. докт. мед. наук. - М., 2008. - 28 с.).

На протяжении последних десятилетий лидирующими факторами приводящими к осложненному угрозой прерывания течению беременности являются персистирующая урогенитальная инфекция. В условиях этиологической значимости факторов репродуктивных нарушений особое значение имеет состояние иммунного гомеостаза. При угрозе прерывания беременности в репродуктивном тракте женщины происходит активация клеток иммунной системы, что приводит к индукции иммунного ответа, следствием чего является изменение уровня соотношения про и противовоспалительных цитокинов, опасных для состояния беременности (Сухих Г.Т., Ванько Л.В. Иммунные механизмы в физиологии и патологии беременности // Иммунология, 2005. - Т.9. - №2. - С.103-108).

Вышеизложенные данные о частоте невынашивания беременности и значении инфекционного фактора определяют необходимость разработки прогностических критериев угрозы прерывания беременности инфекционно-воспалительного генеза, что позволит снизить процент плодовых потерь за счет своевременного формирования групп риска и комплекса лечебно-профилактических мероприятий.

На сегодняшний день ранней диагностике и прогнозированию угрожающих состояний беременности посвящено значительное количество работ. При этом просматриваются два основных направления разрабатываемых методик: биохимические и иммунологические, с одной стороны и инструментальные - с другой. При этом к инструментальным в основном относятся методы УЗИ.

Из первой группы методов известен способ ранней диагностики невынашивания беременности путем определения в периферической крови уровня растворимой формы рецептора sFlt-1 в сыворотке крови беременной в 1 триместре (патент РФ №2444734, 2010). К недостаткам метода относятся его трудоемкость и неспецифичность.

Известен способ прогнозирования угрозы невынашивания беременности путем определения содержания периферических Т-лимфоцитов до, и после инкубации с АМГФ (патент РФ №2077727, 1997). Недостатком данных способов является их трудоемкость.

Известен способ доклинического прогнозирования невынашивания беременности путем определения в плазме крови содержания фибринмономерных комплексов. По их величине прогнозируют прерывание беременности в I, II или III триместрах (патент РФ №2123698, 1998). К недостаткам метода относится его неспецифичность.

Известен способ прогнозирования исхода беременности при угрожающих преждевременных родах путем определения в периферической крови популяций CD3+ и CD16+ иммунокомпетентных клеток (патент РФ №2132069, 1999). К недостаткам метода можно отнести: наличие дорогостоящего оборудования, что затрудняет широкое использование данного способа, время проведения методики 4 часа.

Известен способ определения в сыворотке крови беременных с сексуально-трансмиссивными и условно-патогенными инфекциями ИЛ-12 и ИЛ-10 (О.В. Шитова, Э.Ю. Хагина, Н.А. Осна и др. Уровень ИЛ-10 и ИЛ-12 у беременных с сексуально-трансмиссивными и условно-патогенными инфекциями // Медицинская иммунология, 1999 г. - т.1. - N2. - стр.94). Недостатком является отсутствие конкретных значений по прогнозированию невынашивания беременности.

Известен способ прогнозирования угрозы прерывания беременности по определению концентрации эстриола, плацентарного лактогена и интерлейкина (ИЛ)-6 в сыворотке крови (патент РФ №2285926, 2006).

Известен способ прогнозирования невынашивания беременности путем ультразвукового исследования органов малого таза и определения в сыворотке крови прогестерона, хорионического гонадотропина и уровня альфа-2-микроглобулина в сыворотке крови (патент РФ №2004135161, 2006). Недостатком данного способа является его неспецифичность.

Известен способ прогнозирования исхода беременности при угрожающих преждевременных родах путем определения в сыворотке периферической крови количественного показателя нитрит-ионов (патент РФ №2272574, 2006). Недостатками данного способа являются:

неоднократное исследование периферической крови беременной, данный способ не позволяет до начала сохраняющей терапии прогнозировать исход беременности при преждевременных родах,

отсутствует унифицированная методика определения количественного показателя нитрит-ионов.

Известен способ прогнозирования акушерской патологии, путем определения в сыворотке крови беременной женщины в 1 триместре содержания фактора роста плаценты (ФРП) и сосудисто-эндотелиального фактора роста (СЭФР) с последующим расчетом коэффициента их соотношения беременной беременности (патент РФ №2339954, 2008).

Недостатки данного метода: трудоемкость, возможность использования только в специализированных учреждениях на соответствующем оборудовании. Из вышеизложенного очевидно, что на сегодняшний день основными недостатками способов прогнозирования невынашивания беременности являются неспецифичность и трудоемкость.

Известен способ прогноза невынашивания беременности путем определения содержания цитокинов в периферической крови и слизи цервикального канала у женщин с невынашиванием беременности инфекционного генеза по уровню ИФН-γ и ИЛ-8 в периферической крови и слизи цервикального канала, повышение которых служит маркерами неблагополучия на ранних этапах беременности (Т.Н. Сумеди, Л.В. Ганковская, Е.Н. Долгина и др. Содержание цитокинов в периферической крови и слизи цервикального канала у женщин с невынашиванием беременности инфекционного генеза // Российский журнал иммунологии, 2005 г. - т.9. - N2. - стр.93-102).

Недостатком данного способа является то, что для повышения точности прогнозирования исследуется два маркера: ИФН-γ и ИЛ-8, тогда как наши исследования показали, что достаточно исследовать один значимый маркер воспаления MIP-1α. Также следует принимать во внимание, что при урогенитальной инфекции особо значимыми являются показатели местного иммунитета. В связи с этим, более целесообразно исследовать MIP-1α не в сыворотке крови, а в цервикальной слизи. Данный способ принят нами за прототип.

Недостатки прототипа устраняются в заявляемом способе.

Задача изобретения - повышение точности прогнозирования угрозы невынашивания беременности в 1 триместре при урогенитальной инфекции для назначения своевременных лечебных мероприятий.

Поставленная задача решается тем, что у беременных женщин с выявленной урогенитальной инфекцией в 1 триместре проводят определение в слизи цервикального канала уровня MIP-1α и при значении уровня MIP-1α в цервикальной слизи выше 36,9 пг/мл прогнозируют высокий риск невынашивания беременности в 1 триместре.

Технический результат состоит в том, что данный способ обладает высокой точностью, чувствительностью и специфичностью.

MIP-1α играет большую роль в сохранении иммунной толерантности при беременности, что дает возможность на более ранних сроках прогнозировать угрозу невынашивания беременности при наличие урогенитальной инфекции для проведения своевременных профилактических и лечебных мероприятий.

Нами в доступной литературе не выявлено использование определения уровня MIP-1α в цервикальной слизи в качестве скринингового маркера для доклинического прогнозирования угрозы невынашивания беременности при урогенитальной инфекции.

Современные исследования показывают, что в хориодецидуальном интерфейсе, в котором происходит контакт тканей матери и плода, устанавливается сеть сигналов, включающая инфильтрацию лейкоцитов и секрецию провоспалительных цитокинов. Регуляция направленного движения лейкоцитов является одним из важнейших путей обеспечения течения беременности и осуществляется под действием хемокинов (MIP-1α). Установлено, что MIP-1α участвует в избирательном привлечении Th-1 лимфоцитов, неблагоприятных для течения беременности (Ledingham МА, Thomson AJ, Jordan F, Young A Cell adhesion molecules expression in the cervix and myometrium during pregnancy and parturition // Obstet Gynecol. - 2001. - №97. - P.235-242). Усиление макрофагами синтеза MIP-1α происходит в ответ на бактериальные и вирусные продукты, что в свою очередь вызывает увеличение выработки провоспалительных цитокинов ФНО-α, IL1-β (Witczak M, Torbe A, Czajka R. Maternal serum and amniotic fluid IL-1 alpha, IL-1 beta, IL-6 and IL-8 levels in preterm and term labor complicated by PROM [in Polish] // Ginekol Pol. - 2003. - №74. - P.1343-1347).

Особая роль MIP-1α обусловлена также вовлечением в регуляцию воспаления и ангиогенеза. Кроме того, MIP-1α запускает процессы активации интегринов, обеспечивающих процессы межклеточного взаимодействия, являясь факторами активации Т-лимфоцитов и NK-клеток. Воспалительная реакция, опосредованная MIP-1α приводит к растворению коллагена, разрыву плодных оболочек, а также сокращению миометрия (Gomez-Lopez N, Estrada-Gutierrez G, Jimenez-Zamudio L. Fetal membranes exhibit selective leukocyte chemotaxic activity during human labor // J Reprod Immunol. - 2009. - №80. - P.122-131).

Таким образом, MIP-1α следует рассматривать как важную регуляторную составляющую со способностью инициировать события, которые характеризуют преждевременное прерывание беременности.

Изучение местных компонентов иммунной системы позволит оценить уровень иммунологической резистентности и направленность иммунного ответа при воздействие урогенитальных патогенов. Все вышеуказанное явилось основанием к исследованию изменений уровня MIP-1α в слизи цервикального канала для прогноза невынашивания беременности при урогенитальной инфекции. Наши исследования позволили установить очень важные количественные величины MIP-1α, которые являются определяющими для отбора беременных в группу риска.

Способ осуществляют следующим образом:

У беременной с урогенитальной инфекцией в 1 триместре исследуют цервикальную слизь.

Смыв секрета цервикального канала производят 1 мл физиологического раствора, после чего аспират помещают в пробирку для гомогенизации. Определение уровня MIP-1α проводят методом иммуноферментного анализа с использованием тест-систем Bender Medsistems (Австрия). Учет реакции проводят на мультискане (ORGANON TEHNIKA, Финляндия) при длине волны 450 нм. При выявлении уровня MIP-1α в цервикальной слизи 36,9 пг/мл и выше прогнозируют угрозу прерывания беременности, что позволяет акушеру-гинекологу своевременно назначить адекватную терапию.

Пример 1

Беременная П-ва., 23 лет. Беременность 3-я, в анамнезе 2 самоаборта в сроке 11 недель. На учете в женской консультации состоит с 6 недель. При наружном осмотре - матка увеличена до 8 недель беременности, шейка размягчена по периферии, эндоцервицит. При ПЦР диагностике выявлена Chlamidia trachomatis, дисбиоз. Определен уровень MIP-1α в цервикальной слизи - 46,2 пг/мл. Заключение: прогнозируется высокий риск угрозы прерывания беременности. В сроке 10 недель появились клинические признаки угрозы прерывания беременности: боли внизу живота. Беременная госпитализирована в отделение патологии беременных с диагнозом: угроза самоаборта. При пальпации матка приходит в тонус, при осмотре шейка матки размягчена на всем протяжении. По данным УЗИ - участок отслойки ветвистого хориона. В стационаре проведена антибактериальная и метаболическая терапия, однако боли внизу живота усилились, появились кровянистые выделения из половых путей. В сроке 11 недель произошло прерывание беременности, что подтвердило прогноз, сделанный по заявляемому способу.

Пример 2

Беременная Л-ва., 26 лет. Беременность 2-я, в анамнезе медицинский аборт в сроке 6 недель, при предгравидарной подготовке-терапия уреаплазмоза. Обратилась для планового обследования. Жалоб нет. При осмотре тело матки увеличено до 6-7 недель беременности, что соответствует периоду аменореи, наружный зев закрыт, шейка матки с признаками эндоцервицита. При ПЦР диагностике выявлены Ureaplasma urealiticum. Беременная обследована по заявляемому способу. Содержание MIP-1α в цервикальной слизи - 36,5 пг/мл. Заключение: риск прерывания беременности отсутствует. Дальнейшее наблюдение за данной беременной не выявило осложнений в течение беременности. Роды произошли в срок. Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 3

Беременная Ш-ко., 24 лет. Беременность 2-я, в анамнезе медицинский аборт. На учете в женской консультации по беременности состоит с 7 недель. При наружном осмотре - эндоцервицит. При ПЦР диагностике выявлены Trichomonas vaginalis. Herpes virus-2. Определен уровень MIP-1α в цервикальной слизи - 36,9 пг/мл. Заключение: прогнозируется высокий риск угрозы прерывания беременности. В сроке 13 недель беременности появились клинические признаки угрозы прерывания беременности: кровянистые выделения из половых путей, тянущие боли внизу живота. Беременная госпитализирована в специализированный стационар с диагнозом при поступление: угроза самоаборта. При осмотре матка легко возбудима, размягчена на всем протяжение. По данным УЗИ - гипертонус матки. Несмотря на проводимую сохраняющую и антибактериальную терапию, тянущие боли внизу живота усилились, перешли в схваткообразные. В сроке 14 недель произошло прерывание беременности, что подтвердило сделанный прогноз.

Достоверность способа подтверждена нашими клинико-лабораторными исследованиями. По заявляемому способу было обследовано 58 женщин в 1 триместре беременности с маркерами урогенитальной инфекции. У 35 из них (1 группа) уровень MIP-1α в цервикальной слизи составил 36,9 пг/мл и выше, что свидетельствовало о риске невынашивания беременности и было подтверждено в процессе дальнейшего клинико-лабораторного наблюдения. У 23 беременных (2 группа) данные показатели MIP-1α были ниже, что предполагало благоприятное течение беременности. В первой группе процент угрозы прерывания составил 87,9%, в сравнении с 13,0% во 2-й группе.

Результаты статистического анализа в среде пакета прикладных программ STATISTIKA 6 позволили разработать прогностическое правило формирования групп риска среди беременных с выявленными маркерами урогенитальной инфекции с использованием метода логистической регрессии (Ребров О.Ю. "Статистический анализ медицинских данных", Москва, Медиа сфера, 2003). Полученное правило обеспечивает высокую точность, чувствительность и специфичность метода.

ТОЧНОСТЬ (ИП+ИО)/(ИП+ИО+ЛП+ЛО) 92,50%

ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ИП/(ИП+ЛО) 85,71%

СПЕЦИФИЧНОСТЬ ИО/(ИО+ЛП) 100,00%

ЛОЖНОПОЛОЖИТЕЛЬНАЯ ДОЛЯ ДИАГНОЗОВ ЛП/(ЛП + ИО) 0,00%

ЛОЖНООТРИЦАТЕЛЬНАЯ ДОЛЯ ДИАГНОЗОВ ЛО/(ИП + ЛО) 14,29%

ТОЧНОСТЬ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ ИП/(ИП + ЛП) 100,00%

ТОЧНОСТЬ ОТРИЦАТЕЛЬНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ ИО/(ЛО + ИО) 86,36%

Преимущество заявляемого метода состоит в том, что у беременных с урогенитальной патологией уже в 1 триместре на основании высокочувствительных современных лабораторных маркеров производится прогнозирование невынашивания беременности, с целью раннего назначения адекватной терапии. В клинической практике это позволит снизить угрозу перинатальных потерь за счет своевременного выявления беременных группы риска и начала адекватных лечебных мероприятий.

Данный способ неинвазивен, обладает быстротой исполнения с использованием стандартных тест-систем, что позволяет широко использовать его в практическом здравоохранение.

Способ прогнозирования невынашивания беременности в ранние сроки при урогенитальной инфекции путем исследования слизи цервикального канала, отличающийся тем, что в слизи цервикального канала определяют уровень MIP-1α, и при его значениях 36,9 пг/мл и выше прогнозируют высокий риск невынашивания беременности в 1 триместре.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к клинической биохимии, и может быть использовано в лабораторной диагностике для определения атерогенности крови по уровню содержания минимально модифицированных липопротеинов низкой плотности (ММ-ЛПНП) в сыворотке или плазме крови человека.
Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии и иммунологии, и предназначено для прогнозирования неэффективности консервативной терапии тяжелой формы язвенного колита при тотальном поражении толстой кишки.

Изобретение относится к области биохимии. Используют липосомы в качестве матрицы для активированного фермента - пероксидазы хрена.
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу определения антител к Mycobacterium leprae. Способ включает выявление в сыворотках крови антител к Mycobacterium leprae с помощью иммуноферментного метода.

Настоящее изобретение относится к иммунологии и биотехнологии. Предложены варианты антитела или его фрагмента, специфичных в отношении β-амилоидного белка.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано у больных гемобластозами для прогноза развития рецидива заболевания после проведения аутологичной трансплантации стволовых кроветворных клеток (АТСКК).

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, может быть использовано для диагностики скрытой активности туберкулеза у детей и подростков. Для этого проводят оценку состояния специфического клеточного иммунитета с помощью модифицированной реакции бластной трансформации лимфоцитов (мРБТЛ) с туберкулином (ППД-Л) и определение уровня интерферона-гамма (ИФН-γ) с ППД-Л с использованием малого объема (200 мкл) цельной крови и 4-х разведении антигена ППД-Л.

Группа изобретений относится к лабораторной диагностике и может быть использована для проведения анализов, основанных на реакции агглютинации частиц. Аналитический наконечник (100), предназначенный для выполнения визуально детектируемой реакции агглютинации после всасывания в него реактивов и образца, включает: первое отверстие (110) для приложения отрицательного или положительного давления к внутреннему объему аналитического наконечника; камеру для образца (120); по меньшей мере, одну боковую камеру (130), которая расположена по периметру камеры для образца; камеру детектирования (150), находящуюся в жидкостной связи с камерой для образца; переходную зону (140) между камерой детектирования и камерой для образца для вращательного перемешивания образца; второе отверстие (160) для всасывания реактивов и образца во внутренний объем аналитического наконечника или для удаления их оттуда.

Заявленная группа изобретений относится к области медицины и предназначена для выявления пациентов с повреждением сердца и оценки эффективности проводимой терапии.

Настоящее изобретение относится к медицине и описывает способ ранней диагностики развивающегося пролапса тазовых органов у женщин репродуктивного возраста при отсутствии клинических признаков, заключающийся в отборе материала ткани стенки влагалища, проведении гистохимического анализа, определении количества и состояния эластиновых фибрилл, содержания матриксных белков LOXL1 и FBLN5, в котором развивающийся пролапс тазовых органов диагностируют при снижении количества эластиновых фибрилл и их фрагментации и при одновременном уменьшении содержания матриксных белков LOXL1 и в эпителии, эндотелии сосудов, фибробластах, экстрацеллюлярном матриксе по отношению к одноименным показателям у здоровых женщин.
Изобретение относится к области биохимии и микробиологии и может быть использовано для определения липолитической активности в субклеточных фракциях бактерий. Сущность способа состоит в том, что среда, содержит агарозу или агар (500 мг), неионный детергент (50 мкл), хлористый кальций (12,5 мг), 0,05 М Трис-HCl буфер pH 8,3 (до 100 мл), причем после застывания среды в ней делают лунки, в которые вносят исследуемый образец в объеме 10-50 мкл на одну лунку, затем среду с исследуемым образцом инкубируют при 37°C в течение 12 часов и визуально определяют наличие или отсутствие липолитической активности в исследуемом образце.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для диагностики гипоксии плода в родах. Для этого за 30 минут до родов проводят кардиотокографию.

Изобретение относится к биохимическим методам исследования с использованием измерения по селективным ионам, характеризующим маркеры микроорганизмов, для молекулярного микробиологического анализа.
Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии и иммунологии, и предназначено для прогнозирования неэффективности консервативной терапии тяжелой формы язвенного колита при тотальном поражении толстой кишки.
Изобретение относится к областям биологии и медицины. Для диагностики бесплодия позвоночных животных и человека обоего пола сравнивают концентрации иммунореактивности уротензина 2 в крови, определяемой методом реакции прямой гемагглютинации между бесплодными особями и особями, способными к детородной функции.

Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии, а именно к способу дифференциальной диагностики гнойных и серозных менингитов у детей. Способ состоит в определении показателей микробицидной активности нейтрофильных лейкоцитов: ферментов миелопероксидазы, цитохромоксидазы, кислой фосфатазы в ликворе больных гнойным и серозным менингитами с помощью спектрофотометрического анализа.

Изобретение относится к медицине и предназначено для дифференциальной диагностики типа гепаторенального синдрома алкогольного генеза. Определяют уровни креатинина и альбумина в сыворотке крови.
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности назначения лазеротерапии пациенту с угревой болезнью (акне).
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству. Для дифференциальной диагностики гипертензивных состояний при беременности проводят исследование основных параметров гемодинамики, кислородного статуса и уровня лактата крови женщины в третьем триместре беременности.
Изобретение относится к биологии и медицине, а именно к определению композиционного состава биологических минерализованных тканей. Способ включает исследование образцов в нативном состоянии и на различных этапах деорганификации гистоморфометрическим методом.

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины. Предложен способ оценки морфофункционального состояния индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) больных паркинсонизмом путем проведения их дифференцировки в дофаминергические нейроны, для чего воздействуют на ИПСК факторами, индуцирующими их дифференцировку в дофаминергические нейроны, а затем высаживают их на мультиэлектродную матрицу, обработанную опорным субстратом матригель/фибронектин, после чего, начиная с 3-5 дня вплоть до 8-10 дня, проводят динамическую регистрацию сетевой спонтанной биоэлектрической активности и при наличие к 3-5 дню сетевой спонтанной биоэлектрической активности в виде одиночных спайков, а к 8-10 дню упорядоченной пачечной спайковой активности на сформированном на микроэлектродах монослое оценивают морфофункциональное состояние как нейрональную направленность дифференцировки ИПСК в дофаминергические нейроны. Изобретение может быть использовано для характеристики репрограммированных клеточных линий больных паркинсонизмом и проверки их способности дифференцироваться в определенный фенотип нейронов в целях транспланталогии и при тестировании лекарств. 1 з.п. ф-лы, 4 ил, 1 пр.
Наверх