Способ культивирования ооцист эймерий крупного рогатого скота

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Владельцы патента RU 2503001:

Государственное научное учреждение Смоленский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Российской академии сельскохозяйственных наук (RU)

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно ветеринарной паразитологии. Способ культивирования ооцист эймерий крупного рогатого скота, включающий микроскопирование процесса споруляции, отличающийся тем, что используют флотационный раствор, приготовленный из 1,5 кг технической гранулированной аммиачной селитры и 1 л кипяченой воды, с помощью которого в медицинских стаканчиках суспензируют 3 г исследуемых фекалий с 50 мл раствора, суспензию процеживают через металлическое сито, отстаивают 5 минут, шприцом без иглы отсасывают 12 мл верхнего слоя, переносят в центрифужные пробирки, центрифугируют 1 минуту при 1500 об/мин, поверхностную пленку (1-2 капли) снимают проволочной петлей и переносят на обезжиренное предметное стекло с овалом, прочерченным восковым карандашом, добавляют 3-4 капли водопроводной воды, предметные стекла кладут на штатив, затем штатив помещается в эксикатор, а далее ставят в термостат с температурой 25-28°C и ежедневно микроскопируют на наличие процессов споруляции. Изобретение обеспечивает упрощение способа.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к ветеринарной паразитологии. Изобретение направлено на решение проблемы методов профилактики и борьбы с протозойными болезнями (эймериозами) крупного и мелкого рогатого скота.

Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является выполнение комплекса эпизоотических вопросов, связанных с установлением видовой принадлежности простейших. Технический результат, достигаемый с помощью изобретения, состоит в повышении эффективности определения видовой принадлежности ооцист, за счет их быстрой споруляции и проявления морфологических признаков.

Способ прост в освоении любым практическим лабораторным работником, связанным с вопросами ветеринарной паразитологии.

Известно, что в кишечном тракте крупного рогатого скота паразитирует 17 видов эймерий, которые с фекалиями животных попадают во внешнюю среду не спорулированными, для того, чтобы в них прошли процессы созревания (споруляции), необходимы определенные благоприятные условия (М.Ш. Акбаев, Н.Е. Косменков и др. «Паразитология и инвазионные болезни животных», М.: Колосс, 2000 - С.743; М.В. Крылов «Определение паразитических простейших (человека, домашних животных и сельскохозяйственных растений)» - С.-Пб.: Зоологический институт РАН, 1996. - С.602).

Предлагаются простые и сложные способы культивирования ооцист до состояния споруляции. Тем не менее простые сводятся к следующему: пробы фекалий, содержащие ооцисты, помещают в чашки Петри, дно которых выстлано фильтровальной бумагой. Материал увлажняют 2% раствором бихромата калия. Для лучшей аэрации и сохранения влажности крышку чашки Петри приоткрывают.

С интервалом в 24 часа берут пробы материала и исследуют под микроскопом; или собранные методом концентрации ооцисты отмывают водой путем центрифугирования один или два раза, помещают в чашки Петри и заливают очень тонким слоем 2% раствором бихромата калия. Затем эти чашки помещают в термостат при 25-28C°. Ежедневно ооцисты просматривают под микроскопом непосредственно в чашках Петри (Наиболее близкий аналог - М.В. Крылов «Определитель паразитических простейших (человека, домашних животных и сельскохозяйственных растений)» - С.-Пб.: Зоологический институт РАН, 1996 - С.545). Сложные методы для быстрого спорулирования ооцист требуют аэрации среды путем ввода трубки через которую поступает воздух от микрокомпрессора или же пропускания воздуха через пористый фильтр №4, впаянный в дно сосуда (В.Р. Гобзем «Кокцидиоз телят». - Минск: Урожай, 1972. - С.103).

Недостатками простых способов являются:

1) споруляция ооцист в фекалиях, помещенных в чашки Петри и увлажненных 2% раствором бихромата калия, наблюдается только у отдельных видов, т.е. споруляция е превышает 2%;

2) необходимость проведения однократного или двукратного центрифугирования материала в воде;

3) бихромат калия является химическим реагентом, обладающим концерагенными свойствами.

Недостатками сложных методов является необходимость дополнительных технических приспособлений и сложности контроля за споруляцией.

С целью исключения этих недостатков предлагается способ культивирования ооцист включающий флотационный метод, т.е. основанный на всплывании ооцист в растворах высокой плотности.

Возможность практического осуществления заявленного изобретения подтверждается следующим: пробу фекалий от одного животного или объединенную от группы животных весом примерно 3 грамма кладут в медицинские стаканчики формы усеченного конуса, с делениями на 30 мл (полный объем их 50 мл), заливают небольшим количеством флотационного раствора (1,5 кг технической гранулированной аммиачной селитры на 1 л кипяченой воды), стеклянной палочкой размешивают до появления равномерной взвеси. Затем объем флотационной жидкости доводят до 50 мл и взвесь переливают через металлическое ситечко в такой же стаканчик и вновь объем флотационного раствора доводят до 50 мл. Из последнего стаканчика, после 5 минутного раствора верхний слой раствора (12 мл) отсасывают шприцом без иглы и переносят в центрифужную пробирку. Наполненные одинаковым объемом (12 мл) раствора, пробирки центрифугируют 1 минуту при 1500 об/мин. Всплывшие ооцисты снимают проволочной петлей (1-2 капли) и переносят на обезжиренное предметное стекло на котором предварительно восковым карандашом обведен овал (2,5-3 см в диаметре) и добавляют 3-4 капли водопроводной воды для снижения концентрации флотационной раствора. Стекла помещают на предметный столик и микроскопируют на наличие ооцист. Затем стекла помещают в штатив и ставят в эксикатор. На дно которого наливают водопроводную воду, для предупреждения высыхания ооцист. Эксикатор помещают в термостат с температурой 25-28°C. Ежедневно, стекла с материалом, микроскопируют и следят за споруляцией одних и тех же ооцист эймерий.

Предложенный способ культивирования ооцист имеет существенные отличия от описанных как в паразитологической так и в биологической литературе.

Способ культивирования ооцист эймерий крупного рогатого скота, включающий микроскопирование процесса споруляции, отличающийся тем, что используют флотационный раствор, приготовленный из 1,5 кг технической гранулированной аммиачной селитры и 1 л кипяченой воды, с помощью которого в медицинских стаканчиках суспензируют 3 г исследуемых фекалий с 50 мл раствора, суспензию процеживают через металлическое сито, отстаивают 5 мин, шприцом без иглы отсасывают 12 мл верхнего слоя, переносят в центрифужные пробирки, центрифугируют 1 мин при 1500 об/мин, поверхностную пленку (1-2 капли) снимают проволочной петлей и переносят на обезжиренное предметное стекло с овалом, прочерченным восковым карандашом, добавляют 3-4 капли водопроводной воды, предметные стекла кладут на штатив, затем штатив помещается в эксикатор, а далее ставят в термостат с температурой 25-28°C и ежедневно микроскопируют на наличие процессов споруляции.

Настоящее изобретение относится к медицине и описывает способ повышения эффективности наступления беременности, заключающийся в том, что осуществляют с учетом состояния системы фибринолиза по индексу активирующей фибринолиз способности эндотелия и при его значениях менее 11,0 ед.

Способ получения жизнеспособной гетерогенной популяции клеток кожи // 2502999

Изобретение относится к области фармацевтики и биологии и представляет собой способ получения жизнеспособной гетерогенной популяции клеток кожи, включающий забор биоптата кожи на глубину 2 мм, гомогенизацию ткани в 0,9% водном растворе хлорида натрия при температуре +23…+25°C, извлечение гомогената, фильтрование гомогената через инертную фильтровальную перегородку с диаметром пор 20 мкм, центрифугирование гомогената при 400 g в течение 5 минут при температуре +23…+25°C.

Способ выявления повышенной активированности т-лимфоцитов // 2502998

Изобретение относится к области иммунологии, лабораторной диагностике и предназначено для выявления повышенной активированности Т-лимфоцитов. Сущность способа: у обследуемых лиц производится забор крови из вены и выделение из нее лимфоцитов.

Способ определения риска смерти в отдаленном периоде после перенесенного инфаркта миокарда // 2502464

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии. У пациента с острым инфарктом миокарда (ОИМ) при госпитализации снимают ЭКГ, делают клинический и биохимический анализы крови, анализируют анамнез.

Способ прогнозирования неблагоприятного годового исхода у пациентов с острым коронарным синдромом с подъемом сегмента st после чрескожного коронарного вмешательства // 2502459

Изобретение относится к области медицины, а именно к кардиологии. Для прогнозирования неблагоприятного годового исхода у пациентов с острым коронарным синдромом с подъемом сегмента ST, подвергшихся чрескожному коронарному вмешательству, проводят анализ результатов клинических и лабораторных методов исследования.

Способ оценки морфофункционального состояния диференцированных в дофаминергические нейроны индуцированных плюрипотентных стволовых клеток больных паркинсонизмом // 2501853

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины. Предложен способ оценки морфофункционального состояния индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) больных паркинсонизмом путем проведения их дифференцировки в дофаминергические нейроны, для чего воздействуют на ИПСК факторами, индуцирующими их дифференцировку в дофаминергические нейроны, а затем высаживают их на мультиэлектродную матрицу, обработанную опорным субстратом матригель/фибронектин, после чего, начиная с 3-5 дня вплоть до 8-10 дня, проводят динамическую регистрацию сетевой спонтанной биоэлектрической активности и при наличие к 3-5 дню сетевой спонтанной биоэлектрической активности в виде одиночных спайков, а к 8-10 дню упорядоченной пачечной спайковой активности на сформированном на микроэлектродах монослое оценивают морфофункциональное состояние как нейрональную направленность дифференцировки ИПСК в дофаминергические нейроны.

Способ прогнозирования невынашивания беременности в ранние сроки // 2501017

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования невынашивания беременности в ранние сроки. Сущность изобретения состоит в том, что у беременных женщин с выявленной урогенитальной инфекцией в 1 триместре проводят определение в слизи цервикального канала уровня MIP-1α.

Способ определения липолитической активности в субклеточных фракциях бактерий // 2501014

Изобретение относится к области биохимии и микробиологии и может быть использовано для определения липолитической активности в субклеточных фракциях бактерий. Сущность способа состоит в том, что среда, содержит агарозу или агар (500 мг), неионный детергент (50 мкл), хлористый кальций (12,5 мг), 0,05 М Трис-HCl буфер pH 8,3 (до 100 мл), причем после застывания среды в ней делают лунки, в которые вносят исследуемый образец в объеме 10-50 мкл на одну лунку, затем среду с исследуемым образцом инкубируют при 37°C в течение 12 часов и визуально определяют наличие или отсутствие липолитической активности в исследуемом образце.

Способ диагностики гипоксии плода в родах // 2501012

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для диагностики гипоксии плода в родах. Для этого за 30 минут до родов проводят кардиотокографию.

Способ калибровки системы газовой хроматографии - масс спектрометрии (гх-мс), оснащенной специальным по, для определения маркеров микроорганизмов в исследуемой пробе материала биологического происхождения // 2501011

Изобретение относится к биохимическим методам исследования с использованием измерения по селективным ионам, характеризующим маркеры микроорганизмов, для молекулярного микробиологического анализа.

Способ дифференциальной диагностики геморрагического и ишемического типов инсультов // 2503002

Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии. Предложен способ дифференциальной диагностики геморрагического и ишемического типов инсультов в остром периоде. Определяют количество низкомолекулярной фракции ДНК, сравнивая в течение суток электрофореграммы, полученные из плазмы крови больных, со стандартами известной концентрации. При выявлении количества 80-87 нг/мл низкомолекулярной ДНК через 3 часа после начала острого инсульта диагностируют геморрагический тип инсульта. При обнаружении 80-87 нг/мл низкомолекулярной ДНК через сутки после начала острого инсульта диагностируют ишемический тип инсульта. Изобретение обеспечивает эффективный способ дифференциальной диагностики геморрагического и ишемического типов инсультов за счет количественного определения низкомолекулярной фракции ДНК после начала острого инсульта. 1 ил., 1 табл., 2 пр.

Способ оценки нарушения трансаминирования в синцитиотрофобласте в третьем триместре беременности при обострении герпес-вирусной инфекции путем определения гистохимическим методом активности пиридоксальфосфатдегидрогеназы в синцитиотрофобласте плаценты // 2503007

Изобретение относится к области медицины и касается способа оценки трансаминирования в синцитиотрофобласте. Сущность способа: гистохимическим методом определяют активность пиридоксальфосфатдегидрогеназы. Оценивают нарушение трансаминирования в синцитиотрофобласте плаценты при титре антител к вирусу герпеса 1:12800 и снижении активности пиридоксальфосфатдегидрогеназы ниже 12,5±0,37 усл. ед., что проявляется увеличением алаттрансаминазы до 0,58±0,002 ммоль/л в гомогенате плаценты.

Способ индивидуальной количественной оценки развития ишемической болезни сердца // 2503405

Изобретение относится к области медицины, а именно к терапии, кардиологии, патофизиологии, биохимии и фармакологии. Для оценки развития ишемической болезни сердца рассчитывают значение дискриминантной функции по набору показателей: возраст, рост, вес, индекс Кетле, константа Брока, абдоминальное ожирение, триглицериды, общий холестерин, холестерин липопротеидов высокой плотности, холестерин липопротеидов низкой плотности, холестерин липопротеидов очень низкой плотности, коэффициент атерогенности, артериальное давление, глюкоза, аланинаминотрансфераза, аспартатаминотрансфераза, лактатдегидрогеназа, α-амилаза, общий белок, альбумин, мочевая кислота, мочевина, креатинин, креатинкиназа, щелочная фосфатаза, билирубин общий, билирубин прямой, АДФ-индуцированная агрегация тромбоцитов, коллаген-индуцированная агрегация тромбоцитов, количество тромбоцитов, средний объем тромбоцита, количество эритроцитов, гематокрит, гемоглобин, средний объем эритроцита, коэффициент распределения эритроцитов по объему, среднее содержание гемоглобина в крови, количество лейкоцитов, процент сегментоядерных нейтрофилов, процент эозинофилов, процент базофилов, процент лимфоцитов, процент моноцитов, среднее содержание гемоглобина в эритроците. На основании полученного значения дискриминантной функции делают вывод о наличии начала развития ИБС, 50% риска развития заболевания или 100% развитии ИБС. Способ позволяет провести индивидуальную количественную оценку развития ишемической болезни сердца в зависимости от пола пациента, на основании значения дискриминантной функции. 5 ил., 2 табл., 2 пр.

Способ прогнозирования индивидуального риска развития бронхиальной астмы в регионах с высокой и низкой распространенностью гельминтных инфекций // 2503959

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования индивидуального риска развития бронхиальной астмы в регионах с высокой и низкой распространенностью гельминтных инфекций. Определяют факт наличия либо отсутствия описторхоза, полиморфные варианты генов и вероятность отнесения индивида к группе с низким или высоким риском развития бронхиальной астмы. При обнаружении одной из комбинаций риска в соответствии с моделью SOCS5-IFNG-описторхоз у пациента диагностируют высокий риск развития бронхиальной астмы. В случае обнаружения одной из протективных комбинаций в соответствии с моделью IL4-TBX21-SOCS5 у пациента диагностируют низкий риск развития бронхиальной астмы. Изобретение позволяет прогнозировать высокий и низкий риск бронхиальной астмы с учетом описторхозной инвазии. 2 табл., 2 пр.

Способ оценки состояния гиперпролиферативных заболеваний шейки матки // 2503960

Изобретение относится к области медицины, в частности к применению молекулярных маркеров ВПЧ ВКР и их качественных и количественных характеристик для прогнозирования течения гиперпролиферативных заболеваний ШМ. Способ осуществляется поэтапно: 1) из соскобов из цервикального канала и биоптатов ШМ выделяют ДНК ВПЧ; 2) определяют генотип вируса; 3) отбирают пациенток с ВПЧ16-позитивной CIN; 4) методом ПНР в реальном времени определяют число копий ДНК вируса и степень интеграции ее в хозяйский геном (физический статус); 5) устанавливают пороговый уровень вирусной нагрузки с учетом физического статуса вируса (6,5 lg копий ДНК ВПЧ 16 на клетку); 6) классифицируют пациенток в зависимости от установленного порогового уровня вирусной нагрузки и физического статуса вируса (эписомальная или интегрированная форма); 7) выявляют пациенток с неблагоприятным прогнозом, имеющих высокую вирусную нагрузку (>6.5 lg копий ДНК на клетку) при эписомальной форме вируса или низкую нагрузку (<6.5 lg копий ДНК на клетку) при интегрированной форме вируса. Способ позволяет провести раннее прогнозирование неблагоприятного течения цервикальных интраэпителиальных неоплазий и возможного перехода их в рак ШМ. 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 4 пр.

Способ прогнозирования неблагоприятного течения местнораспространенных форм рака шейки матки, ассоциированного с вирусом папилломы человека // 2504326

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкогинекологии. Определяют иммунологические показатели: абсолютное количество лимфоцитов (лим_аб), TNFα (TNFα_к) и IL-10 (IL-10_к) в периферической крови, а также TNFα (TNFα_c) и IL-4 (IL-4_c) в цервикальной слизи. На основании полученных данных вычисляют показатель F(x): F(x)=9,265+1,749×(лим_аб)+0,013×(IL-4_c)+0,005×(IL-10_к)-0,410×(TNFα_к)-0,206×(TNFα_c). При значении F(x) больше 0,555 прогнозируют неблагоприятное течение опухолевого процесса, а если меньше - благоприятное течение. Способ позволяет повысить достоверность прогноза за счет учета иммунологических показателей как крови, так и цервикального секрета. 3 табл., 2 прим.

Способ прогнозирования инфекционного воспаления послеоперационной раны при накостном остеосинтезе длинных трубчатых костей // 2504774

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии. Сущность способа прогнозирования инфекционного воспаления послеоперационной раны при накостном остеосинтезе длинных трубчатых костей состоит в том, что проводят анализ клеточного состава крови и определяют лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ) Я.Я. Кальф-Калифа на 3 сутки после перелома. При его значении 1,8 и более при последующем выполнении накостного остеосинтеза прогнозируют развитие инфекционного воспаления в ране. Использование заявленного способа позволяет осуществить раннее прогнозирование инфекционного воспаления в области послеоперационной раны при накостном остеосинтезе переломов длинных трубчатых костей. 1 табл., 3 пр.

Способ оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции на оксигенацию гемоглобина в третьем триместре гестации на фоне определения количества гемоглобина и 2,3 дфг в эритроцитах периферической крови // 2504775

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам диагностики, и может быть использовано для оценки угрозы формирования гипоксии в третьем триместре гестации. Для этого в периферической крови определяют титр антител к цитомегаловирусу, содержание в эритроцитах периферической крови 2,3 дифосфоглицерата, гемоглобина цитофотометрическим методом, оксигемоглобина в периферической крови. При нарастании титра антител к цитомегаловирусу до 1:1600, содержании 2,3 дифосфоглицерата до 7,2 мкмоль/мл, снижении гемоглобина до 72,25 усл. ед., снижении оксигемоглобина до 96,0% создается угроза формирования гипоксии. Способ позволяет изучить характер оксигенации гемоглобина в эритроцитах периферичекой крови беременных при обострении в третьем триместре гестации цитомегаловирусной инфекции. 2 ил.

Способ диагностики ишемической нефропатии у новорожденных // 2504776

Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии, и используется для диагностики ишемической нефропатии у новорожденного. Способ заключается в том, что осуществляют проведение в течение 1-3 дней жизни диагностического тестирования по анамнестическим и биохимическим показателям, включающим определение гестационного возраста, концентрацию ионов натрия в крови, микроальбумина в моче, отношения содержания карбоангидразы к креатинину в моче и концентрацию непрямого билирубина в крови с последующим вычислением вероятности (Р) ишемической нефропатии по формуле. При значении Р больше 50% диагностируют ишемическую нефропатию у новорожденного. Использование заявленного способа позволяет осуществить раннюю диагностику ишемической нефропатии у новорожденных. 6 табл., 4 пр.

Способ клеточного анализа пробы при помощи виртуальной аналитической пластинки // 2504777

Группа изобретений относится к способу клеточного анализа цитологической или гистологической пробы и к способу получения виртуальной аналитической пластинки. Для клеточного анализа осуществляют по меньшей мере первую обработку пробы (2), при этом указанная обработка предназначена для маркировки патологических клеток среди здоровых клеток пробы. Далее осуществляют несколько съемок изображений пробы (6), находящейся на аналитической пластинке (6) с целью получения множества изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки (6). Указанные изображения, расположенные в ряд, образуют полное изображение (20) пробы. Также осуществляют автоматическую прокрутку всех снятых изображений пробы (2) на средстве отображения с заранее определенной скоростью прокрутки, при этом упомянутую скорость предусматривают таким образом, чтобы исследователь мог анализировать изображение и определить, содержит или не содержит отображаемая зона пробы потенциально патологические клетки; прокрутка останавливается автоматически при обнаружении по меньшей мере одной аномалии, которая может свидетельствовать о наличии патологической клетки. Использование группы изобретений обеспечивает быстрый и эффективный анализ проб и снижает риск «ложных отрицательных результатов». 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 2 ил.