Производное амида салициловой кислоты, обладающее антибактериальной, противогрибковой и антилизоцимной активностью



Производное амида салициловой кислоты, обладающее антибактериальной, противогрибковой и антилизоцимной активностью
Производное амида салициловой кислоты, обладающее антибактериальной, противогрибковой и антилизоцимной активностью
Производное амида салициловой кислоты, обладающее антибактериальной, противогрибковой и антилизоцимной активностью
Производное амида салициловой кислоты, обладающее антибактериальной, противогрибковой и антилизоцимной активностью

 


Владельцы патента RU 2504536:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Волгоградский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к водорастворимому производному амида салициловой кислоты, а именно к натриевой соли этилового эфира N-салицилоилглицина (2-[(2-этокси-2-оксоэтил)карбомоил]феноляту натрия), и может быть использовано в химико-фармацевтической промышленности. Технический результат - натриевая соль этилового эфира N-салицилоилглицина, обладающая антибактериальной, противогрибковой и антилизоцимной активностью. 3 табл., 4 пр.

 

Изобретение относится к новым водорастворимым производным амида салициловой кислоты (СК) с этиловым эфиром глицина (аминоуксусная кислота), а именно натриевой соли этилового эфира N-салицилоилглицина (2-[(2-этокси-2-оксоэтил)карбомоил]фенолят натрия) и его применению в качестве антибактериального и противогрибкового средства, проявляющего антилизоцимную активность.

Поиски новых антибактериальных препаратов, несмотря на большое число уже синтезированных антибактериальных веществ, до сих пор являются одной из важнейших задач и проблем химиотерапии бактериальных инфекций. Осложнениями в терапии известными препаратами являются случаи тяжелых форм бактериальных инфекций, вызванные штаммами бактерий, устойчивыми к применяющимся средствам, в том числе штаммами с множественной лекарственной устойчивостью. Важное значение приобретают поиски хорошо растворимых и малотоксичных соединений, которые могли бы применяться парентерально. Известны антибактериальные лекарственные средства, относящиеся по химическому строению к производным β-лактамов (пенициллины, цефалоспорины, цефамицины), аминогликозидов (канамицин, гентамицин, неомицин, стрептомицин), тетрациклинов, сульфамидным препаратам, фторхинолонам (Лоуренс Д.П. Бенитт Клиническая фармакология. - М.: Медицина, 1991. - Т.1. - С.364). Однако все они имеют побочные реакции: аллергии разного типа, лейкопения (цефалоспорины, сульфамидные препараты), нефротоксичность, вестибулотоксичность (аминогликозиды), нейротоксичность и подавление функций костного мозга, гемолитическая анемия (стрептомицин).

Что касается грибковых заболеваний, то в последние десятилетия отмечается их значительный рост. Это связано со многими факторами и, в частности, с широким применением в медицинской практике антибиотиков широкого спектра действия, иммунодепрессантов и других групп лекарственных средств. В связи с тенденцией к росту грибковых заболеваний (в том числе ассоциированных с ВИЧ-инфекцией, онкогематологическими заболеваниями), развитием устойчивости возбудителей к имеющимся лекарственным средствам, возросла потребность в эффективных противогрибковых средствах. Хотя токсичность последних поколений этих препаратов значительно меньше, большое количество побочных эффектов остается нерешенной проблемой противогрибковых медикаментов. Они являются токсичными для печени и почек, вызывают расстройства пищеварительного тракта, кожную сыпь, неврологические нарушения, расстройства вкуса. При применении препарата могут отмечаться местные реакции, такие как болезненность, жжение и зуд.

Салициловую кислоту (CAS 69-72-7) в настоящее время используют как кератолитическое, антисептическое, местнораздражающее и противовоспалительное средство. Вследствие плохой растворимости в воде и высокой кислотности применяют СК только местно и наружно в виде мазей и 1-2% спиртовых растворов. При применении СК возможны местные реакции в виде зуда, жжения, кожной сыпи, аллергические реакции [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - Т.2. - М.: Новая волна. - 2002. - С.377].

Так как в структуре нового производного имеется амидная группа, то нужно отметить, что в медицинской практике среди используемых амидов СК известны: салициламид (CAS 65-45-2), который назначают внутрь в качестве болеутоляющего и жаропонижающего средства, оксафенамид (CAS 526-18-1) усиливает образование и выделение желчи, оказывает спазмолитическое действие и снимает или уменьшает спазмы желчевыводящих путей, тиаприд и султоприд оказывают антидофаминергическое действие которые применяют наружно в качестве обезболивающих и противовоспалительных средств [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - T.1. - М.: Новая волна. - 2002. - С.74]. Натриевая соль салициловой кислоты (энтерсалил, диуретин, натрия салицилат, CAS 54-21-7) оказывает аналгезирующее, жаропонижающее и противовоспалительное действие [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - Т.1. - М.: Новая волна. - 2002. - С.167].

Целью изобретения является новое водорастворимое малотоксичное производное амида салициловой кислоты. Поставленная цель достигается структурой нового антибактериального и противогрибкового средства, обладающего антилизоцимной активностью, а именно натриевой соли этилового эфира N-салицилоилглицина (2-[(2-этокси-2-оксоэтил)карбомоил]фенолят натрия) формулы

и использования ее в качестве антибактериального и противогрибкового средства.

Заявляемое водорастворимое соединение в связи с установленной нами его высокой антибактериальной, противогрибковой и антилизоцимной активностью и низкой токсичностью представляет интерес как новый антибактериальный и противогрибковый препарат для применения перорально (таблетки, капсулы) и парентерально (внутримышечно, под кожу, внутривенно).

В патенте США (US 7842696) имеются данные о способе получения и ингибирующей активности этилового эфира (2-гидроксибензоиламино)уксусной кислоты (CAS 5853-89-4) по отношению к десатуразе Ко-А жирных кислот - фермента, катализирующего превращение одинарной связи между атомами углерода в ацильных цепях в двойные связи (C=C). Никаких данных об антибактериальной и/или противогрибковой активности в описании изобретения не приводится. Какие-либо указания на возможность получения водорастворимого производного этого соединения в патенте также отсутствуют.

Водорастворимая натриевая соль этилового эфира N-салицилоилглицина (2-[(2-этокси-2-оксоэтил)карбомоил]фенолят натрия) получена нами впервые.

Кроме того, одним из факторов, способствующих персистенции микроорганизмов, является способность бактерий деградировать лизоцим - антилизоцимная активность (АЛА), которая сообщает микроорганизмам устойчивость к внутриклеточному перевариванию, действию внеклеточного лизоцима в условиях макроорганизма или создает селективные преимущества в биоценозах с микробами-антагонистами, продуцентами лизоцима. В связи с вышеизложенным представлялось актуальным изучить АЛА для заявляемого соединения.

Пример 1. Натриевая соль этилового эфира N-салицилоилглицина (2-[(2-этокси-2-оксоэтил)карбомоил]фенолят натрия). Этиловый эфир N-салицилоилглицина может быть получен по известной методике, указанной в патенте US 7842696. Для получения натриевой соли этилового эфира салицилоилглицина 4,6 г (100 ммоль) этилата натрия, 35 г толуола и 22,3 г (100 ммоль) этилового эфира N-салицилоилглицина смешивают и при перемешивании нагревают при температуре 100°C в течение 15 минут. После охлаждения продукт отделяют фильтрованием, промывают небольшим количеством бензола и сушат. Получают белое кристаллическое вещество (23,03 г, 94%) с температурой плавления выше 270°C. Натриевая соль этилового эфира N-салицилоилглицина: в спектре ЯМР 1H (ДМСО-d6) отсутствует сигнал фенольного гидроксила (1H, Ph-OH).

Пример 2. Определение антимикробной (Staphylococcus aureus, Escherichia coli) и противогрибковой (Candida albicans) активности. Для исследования противомикробной активности химических веществ нами был использован метод прямой иммунодиффузии. Микробные культуры смывали со сред 3 мл физиологического раствора и готовили взвесь, содержащую 500 млн микробных тел в 1 мл по стандарту мутности. Делали посев сплошным газоном на поверхности мясо-пептонного агара и среде Сабуро в чашки Петри. Нами использовались стерильные диски фильтровальной бумаги, стандартного образца для качественного определения чувствительности бактерий. Далее соблюдая стерильность, диски пропитывали 2% раствором вещества (в физиологическом растворе) и накладывали на среду, согласно правилам методики. Чашки Петри инкубировали в термостате при 37°C. Делали не менее пяти исследований. Через 24-48 часа вокруг дисков измерялись диаметры зоны задержки роста (ДЗЗР) в миллиметрах и заносили в таблицы. Статистическая обработка экспериментального материала и анализ достоверности различий по t-критерию Стьюдента были проведены с помощью программы Excel ХР (таблица 1).

Пример 3. Определение антилизоцимной активности.

Антилизоцимную активность определяют чашечным методом, для этого готовят разведение лизоцима: взвешивают 10 мг лизоцима, добавляют 10 мл физиологического раствора. К 0,5 мл полученного разведения добавляют 9,5 мл физиологического раствора (50 мкг/мл). Готовят разведения лизоцима: к 0,1 мл полученного разведения добавляют 0,9 мл физиологического раствора (1 мкг/мл); к 0,2 мл - 0,8 мл физиологического раствора (2 мкг/мл); к 0,3 мл разведения лизоцима - 0,7 мл физиологического раствора (3 мкг/мл) и т.д. Заливают чашки Петри, добавляя к каждому разведению 4 мл 1,5% питательного агара. Готовят контроль, добавляя 1 мл физиологического раствора к 4 мл 1,5% питательного агара. Чашки подсушивают в термостате при 37°C в течение 10-15 минут. Готовят 1 млрд взвесь исследуемых культур в физиологическом растворе и наносят в виде бляшек на поверхность приготовленных сред. Чашки помещают в термостат при 37°C на 18-24 часа. Выросшие макроколонии обрабатывают парами хлороформа, наливая его в крышку чашки Петри (в течение 10 минут). Готовят 1 млрд взвесь суточной агаровой культуры Micrococcus luteus в физиологическом растворе, разливают по 0,1 мл в пробирки и заливают каждую чашку вторым слоем, добавляя к индикаторной культуре микрококка 3 мл 0,7% питательного агара. Чашки помещают в термостат на 24 часа при 37°C и проводят учет результатов опыта по наличию роста микрококка вокруг колоний исследуемых культур. Учитывают уровень выраженности признака по принятой градации: 0 мкг/мл, 1 мкг/мл, 2 мкг/мл, 3 мкг/мл, 4 мкг/мл, 5 мкг/мл. За уровень антилизоцимной активности исследуемых культур принимают максимальное значение концентрации лизоцима в среде, при которой еще наблюдается рост индикаторного штамма (таблица 2, 3).

Пример 4. Определение острой токсичности. Острую суточную токсичность при однократном введении изучали на мышах (самках и самцах) массой 25-30 г. Соединение в изотоническом растворе хлорида натрия вводили животным внутрибрюшинно в различных возрастающих дозах однократно. Наблюдение за животными проводили в течение суток, отмечая количество погибших животных. Расчет ЛД50 проводили по методу Литчфилда и Уилкоксона. Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью пакета Microsoft Open Office и Biostatics 4.03 с использованием однофакторного дисперсионного анализа, критериев множественного сравнения Стьюдента с поправкой Бонферрони (таблица 1).

Исследования острой токсичности заявляемого водорастворимого производного амида СК показали, что по классификации опасности (вредности) веществ натриевая соль этилового эфира N-салицилоилглицина при внутрибрюшинном введении мышам (ЛД50=1729,62 мг/кг) относится к классу умеренно токсичных соединений [Саноцкий И.В. Уланова И.П. Критерий вредности в гигиене и токсикологии при оценке опасности химических соединений. - М.: Медицина, 1975. - 328 с.]. А анализ данных по антибактериальной, противогрибковой и антилизоцимной активности заявляемого соединения и вещества сравнения - салицилата натрия, показал, что заявляемое соединение - натриевая соль этилового эфира N- салицилоилглицина - проявляет выраженный антибактериальный и противогрибковый эффект в сочетании с антилизоцимной активностью.

Таблица 1
Антибактериальная и противогрибковая активность и острая суточная токсичность (ЛД50)
Вещества ЛД50, мг/кг Диаметр зон задержки роста, мм
Staphylococcus aureus Escherichia coli Candida albicans
Физиологический раствор, 0,9% NaCl 4000 - - -
Раствор салицилата натрия 540 - - -
Натриевая соль этилового эфира N-салицилоилглицина 1729,56* (1579,57÷1893,80) 7±0,412* 7±0,523* 14±2,506*
* - данные статистически достоверны p<0,05
Таблица 2
Выраженность антилизоцимной активности натриевой соли этилового эфира салицилоилглицина
Виды микроорганизмов АЛА, баллов
Низкая (1-2 мкг/мл) Средняя (3-4 мкг/мл) Высокая (5-6 мкг/мл) M±m мкг/мл
Candida albicans 2 4 - 3±0,6
Staphyllococcus aureus 2 - - 2±0,3
Escherichia coli 2 3 - 2±0,6
* - данные статистически достоверны p<0,05
Таблица 3
Выраженность антилизоцимной активности салицилата натрия
Виды микроорганизмов АЛА, баллов
Низкая (1-2 мкг/мл) Средняя (3-4 мкг/мл) Высокая (5-6 мкг/мл) M±m мкг/мл
Candida albicans 1 - - 1±0,4
Staphyllococcus aureus - - - -
Escherichia coli 1 - - 1±0,3
* - данные статистически достоверны p<0,05

Водорастворимое производное амида салициловой кислоты формулы

обладающее антибактериальным, противогрибковым действием и антилизоцимной активностью.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к соединениям или их фармацевтически приемлемым солям для доставки биологически активных веществ, таких как амилин, антигены, антимикробные, антигмигреневые и антивирусные препараты, предсердный натрийуретический фактор, бисфосфонаты, кальцитонит, холецистокинин и т.д.

Изобретение относится к диамидам аминокислот по положению, не являющемуся -положением, формулы (1), где R1 выбран из группы, состоящей из функциональных групп: алкил, галоген, NO2 , ОН, ОСН3, присутствующих либо поодиночке, либо в сочетании, и R2 представляет собой Н, которые полезны в качестве адъювантов для введения активных биологических агентов, и к фармацевтическим композициям, содержащим указанные диамиды формулы (1).

Изобретение относится к способам стереоселективного получения приводных фенилизосерина общей формулы в которой R обозначает радикал фенил или радикал третбутокси; R1 обозначает защитную группу функции окси-группы.

Изобретение относится к способу элантиоселективного получения производных фенилизосерина общей формулы 1*, где R означает фенил или трет.бутокси, R'означает защитную группу для спиртовой функции.

Изобретение относится к области фармакологии и медицины и касается конъюгата госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой с молекулярной массой 780-180000 Да при соотношении госсипол: натрийкарбоксиметилцеллюлоза (1-5):(99-95) масс.% и содержанием низкомолекулярной фракции с молекулярной массой от 780 Да до 1500 Да до 20% и высокомолекулярной фракции с молекулярной массой от 1500 Да до 180000 Да до 80%, конъюгата госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой с молекулярной массой от 780 до 1500 Да при соотношении госсипол: натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,35-1,76):(99,65-98,24) масс.%, конъюгата госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой с молекулярной массой от 1500 Да до 180000 Да при соотношении госсипол: натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,65-3,23):(99,35-96,77) масс.% и способов их получения.

Изобретение относится к области медицины, фармацевтики и нанотехнологий, конкретно к фармацевтической композиции на основе флуконазола - противогрибкового средства из группы производных триазола, получаемого химическим синтезом, и к способу ее получения.

Изобретение относится к применению фурацилина в качестве фотосенсибилизатора. Изобретение обеспечивает повышение антимикробной активности фурацилина при воздействии света, спектральный диапазон которого соответствует спектру электронного поглощения фурацилина.

Изобретение относится к области гигиены и может быть использовано для обработки кожного покрова, для защиты от заражения, дезинфекции ступней ног и обуви с целью профилактики грибковых заболеваний.

Изобретение относится к ветеринарии. .

Изобретение относится к области микрокапсулирования лекарственных препаратов на примере риванола, который может быть использован в качестве противомикробного, противогрибкового препарата наружного применения.

Изобретение относится к новым производным циклических 5-нитропиридин-2-ил-тиоалкенил-4-дитиокарбаматов, которые соответствуют общей формуле (I) или их фармацевтически приемлемым кислотно- или основно-аддитивным солям.

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины и касается средства для лечения и дезинфекции на основе алкил, арил-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензил)фосфоний бромидов и нитратов общей формулы I, обладающего одновременной бактерицидной, фунгицидной и антиоксидантной активностью при низких концентрациях, высокой термостойкостью и низкой токсичностью, которое может найти применение в медицине и ветеринарии.

Изобретение относится к области фармацевтической промышленности и медицины, в частности предназначено для лечения и ухода за полостью рта, содержащей количество антиоксиданта, представляющее собой отношение веса экстракта к весу антиоксиданта в диапазоне 1:1 до 5:1, и экстракта магнолии.

Изобретение относится к медицине, а именно к челюстно-лицевой хирургии и травматологии, и может быть использовано для формирования антимикробного покрытия при изготовлении внутритканевых эндопротезов на титановой основе.
Наверх