Способ клеточного анализа пробы при помощи виртуальной аналитической пластинки

Авторы патента:


Способ клеточного анализа пробы при помощи виртуальной аналитической пластинки
Способ клеточного анализа пробы при помощи виртуальной аналитической пластинки

 


Владельцы патента RU 2504777:

НОВАСИТ (FR)

Группа изобретений относится к способу клеточного анализа цитологической или гистологической пробы и к способу получения виртуальной аналитической пластинки. Для клеточного анализа осуществляют по меньшей мере первую обработку пробы (2), при этом указанная обработка предназначена для маркировки патологических клеток среди здоровых клеток пробы. Далее осуществляют несколько съемок изображений пробы (6), находящейся на аналитической пластинке (6) с целью получения множества изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки (6). Указанные изображения, расположенные в ряд, образуют полное изображение (20) пробы. Также осуществляют автоматическую прокрутку всех снятых изображений пробы (2) на средстве отображения с заранее определенной скоростью прокрутки, при этом упомянутую скорость предусматривают таким образом, чтобы исследователь мог анализировать изображение и определить, содержит или не содержит отображаемая зона пробы потенциально патологические клетки; прокрутка останавливается автоматически при обнаружении по меньшей мере одной аномалии, которая может свидетельствовать о наличии патологической клетки. Использование группы изобретений обеспечивает быстрый и эффективный анализ проб и снижает риск «ложных отрицательных результатов». 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 2 ил.

 

Настоящее изобретение касается способа клеточного анализа цитологической или гистологической пробы, располагаемой на аналитической пластинке, включающего следующие стадии:

- осуществляют по меньшей мере первую обработку пробы, при этом упомянутая обработка предназначена для обеспечения выявления патологических клеток среди здоровых клеток пробы,

- осуществляют съемку изображений пробы, находящейся на аналитической пластинке с целью получения множества изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки, при этом упомянутые изображения, расположенные в ряд, образуют полное изображение пробы.

Изобретение используют, в частности, для способов цитологического или гистологического анализа.

Изобретение касается также способа получения виртуальной аналитической пластинки для анализа пробы с целью обеспечения ее клеточного анализа, в частности, при помощи вышеупомянутого способа анализа.

Анализ проб используют, например, для диагноза патологий, например, на основании клеток, взятых при помощи мазков (цервикальных, вагинальных и т.д.), пункций органов (грудь, щитовидная железа, лимфатический узел и т.д.) или сбора (взятие мочи, бронхо-альвеолярный лаваж и т.д.), с целью обнаружения патологий любого типа и, в частности, предракового или ракового состояния.

Анализ проб производят опытные специалисты, обученные для обнаружения клеток, которые могут быть патологическими, в пробе, располагаемой на аналитической пластинке или предметном стекле. Чтобы можно было обнаружить потенциально патологические клетки, пробу подвергают обработке, такой как окрашивание, позволяющее выделить характеристики ядра и цитоплазмы клеток, что помогает выявить и диагностировать патологические клетки. Во время анализа пробы потенциально патологические клетки проявляют особенности тинкториального аффинитета, размера, формы как на уровне ядра, так и цитоплазмы, по отношению к нормальным клеткам.

Анализ можно производить вручную без каких-либо вспомогательных средств. В этом случае врач или специалист-лаборант перемещает пластинки с пробами под микроскопом и исследует каждую из них с целью обнаружения морфологических аномалий, указывающих на патологические клетки, которые могут соответствовать, например, предраковому или раковому состоянию. Такой способ анализа является трудоемким и занимает очень много времени. Кроме того, он не дает удовлетворительных результатов, особенно, что касается большого числа «ложных отрицательных результатов», которое достигает примерно 30%, то есть пробы считаются нормальными, тогда как у пациента имеется патология, в частности, предраковая или раковая, с риском дальнейшего развития рака у пациента, которого убедили в обратном.

Для улучшения результатов анализов было предложено улучшить взятие проб, то есть число клеток, их крепление, их окрашивание и их распределение на аналитической пластинке, а также обеспечить врача или специалиста-лаборанта, производящего анализ, информативными средствами анализа, такими как программы обработки изображений и др.

Для этого используют камеру или съемочный аппарат, чтобы получать изображения различных зон пробы, находящейся на аналитической пластинке, и передавать эти изображения в информативную систему, которая в этом случае работает на «виртуальной» аналитической пластинке.

Эта информативная система обеспечивает обработку сигнала, предварительную обработку изображений и сравнительный анализ, в случае необходимости, с использованием создаваемых или уже существующих баз данных, чтобы ускорить процесс анализа и обеспечить, таким образом, анализ большего числа проб, с целью оказания помощи врачу или лаборанту. Например, исследование изображений проб происходит автоматически, и, если обнаруживаются некоторые зоны с аномалией, соответствующие изображения выводятся на экран для врача или лаборанта, который может определить, действительно ли эти зоны показывают на наличие патологических клеток. Таким образом, врач или лаборант исследует только аномальные зоны, не тратя время на анализ зон, которые информативная система квалифицировала как нормальные. Такой способ, действительно, позволяет ускорить анализ.

Однако в этом случае врач или лаборант лишается возможности наблюдать нормальные пробы или пробы, содержащие незначительные изменения, что мешает его оценке проб и особенно повышению его квалификации и даже приводит к снижению его диагностических способностей. Действительно, анализ проб основан на уровне подготовки и на опыте врача или лаборанта, который должен исследовать пробы и сравнивать нормальные зоны и зоны, содержащие аномалии. Отсутствие такой практики при компьютерном анализе может привести к потере квалификации врачами или лаборантами и к появлению ошибок в анализах.

Настоящее изобретение призвано устранить вышеупомянутые недостатки и предложить способ анализа, который осуществляют с помощью информативных технологий, чтобы получить существенный выигрыш во времени, и который позволяет также врачам или лаборантам получать практику в исследовании как нормальных, так и аномальных проб.

В этой связи объектом изобретения является способ анализа вышеупомянутого типа, дополнительно включающий следующие стадии:

- осуществляют автоматическую прокрутку изображений на средстве отображения с заранее определенной скоростью прокрутки, при этом упомянутую скорость предусматривают таким образом, чтобы исследователь мог анализировать изображение и определить, содержит или не содержит отображаемая зона пробы потенциально патологические клетки,

- прокрутку останавливают при обнаружении, по меньшей мере, одной аномалии, которая может свидетельствовать о наличии патологической клетки,

при этом остановка прокрутки происходит автоматически в результате автоматического анализа изображения, при этому упомянутую остановку осуществляют, если в изображении обнаружен отдельный объект, определяемый как аномальный.

Таким образом, врач или лаборант наблюдает как нормальные зоны, так и аномальные зоны пробы, и анализ происходит быстрее, чем ручной анализ, за счет автоматической прокрутки полученных изображений. Кроме того, способ в соответствии с настоящим изобретением позволяет полностью воспроизвести изображение пробы, чтобы не прибегать к использованию микроскопа, при помощи съемочного аппарата, обеспечивающего получение изображений, отображающих всю поверхность аналитической пластинки, что будет описано ниже.

Согласно другим отличительным признакам способа анализа:

- скорость прокрутки изображений регулируется,

- способ дополнительно включает стадию возобновления прокрутки после анализа зоны пробы, содержащей аномалию, при этом упомянутый этап возобновления происходит по команде исследователя,

- способ включает стадию автоматической остановки прокрутки на изображении, не содержащем аномалии или соответствующем объектам, необходимым для оценки репрезентативности пробы, при этом возобновление прокрутки происходит по команде исследователя после подтверждения, что изображение не содержит аномалии,

- пробу подвергают двум разным видам обработки, которые позволяют маркировать патологические клетки среди клеток пробы, при этом осуществляют две стадии съемок изображений, при этом каждая стадия съемок позволяет производить обнаружение аномалий по одному из видов обработки, осуществляемых на пробе, при этом данные изображений, полученные на каждой стадии съемок, накладывают друг на друга, чтобы исследователь мог переходить от изображения одной зоны, полученного во время одной стадии съемок, к изображению этой же зоны, полученному во время другой стадии съемок, при прокрутке изображений,

- переход от изображения зоны на одной стадии съемок к изображению этой же зоны, снятой на другой стадии съемок, происходит, если в изображении обнаружена аномалия,

- стадии обработки являются стадиями окрашивания или маркировки пробы при помощи флуорофоров,

- отображение изображения, полученного на другой стадии съемки, сопровождается выводом на экран информации об отображаемой зоне пробы и/или о всей пробе и/или о пациенте, у которого взяли пробу,

- способ включает стадию увеличения изображения для просмотра детали отображаемой зоны,

- степень увеличения можно регулировать.

Объектом настоящего изобретения является также способ получения виртуальной пластинки для анализа пробы с целью ее клеточного анализа, включающий следующие стадии:

- получают пробу,

- осуществляют первую стадию обработки пробы, при этом упомянутая обработка позволяет маркировать патологические клети относительно остальных клеток,

- осуществляют вторую стадию обработки пробы, при этом упомянутая обработка позволяет маркировать патологические клети относительно остальных клеток иначе, чем на первой стадии обработки,

- пробу помещают на аналитическую пластинку перед или после, или между стадиями обработки пробы.

Этот способ дополнительно включает следующие стадии:

- осуществляют первую съемку изображений пробы, находящейся на аналитической пластинке, чтобы получить множество изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки, при этом упомянутые изображения, расположенные рядом друг с другом, образуют полное изображение пробы, при этом упомянутые изображения позволяют обнаружить патологические клетки, маркированные во время первой стадии обработки,

- осуществляют вторую съемку изображений пробы, находящейся на аналитической пластинке, чтобы получить множество изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки, при этом упомянутые изображения, расположенные рядом друг с другом, образуют полное изображение пробы, при этом упомянутые изображения позволяют обнаружить другие клеточные аномалии, отличные от маркированных на первой стадии обработки,

- упомянутые полученные изображения образуют виртуальную аналитическую пластинку.

Такой способ позволяет очень просто получить изображение пробы, позволяющее обнаруживать двумя разными путями потенциально патологические клетки и получать большое число данных о пробе, что будет описано ниже.

Согласно другим отличительным признакам способа получения:

- способ дополнительно включает стадию наложения данных изображений, полученных во время первой съемки изображений, и данных изображений, полученных во время второй съемки изображений,

- первая стадия обработки пробы является стадией флуоресцентной маркировки,

- первая стадия обработки включает стадию введения в пробу контрольных шариков, при этом упомянутые шарики служат метками для регулировки съемки изображений,

- вторая стадия обработки пробы является стадией окрашивания по Папаниколау.

После этого виртуальную аналитическую пластинку, полученную при помощи описанного выше способа получения, подвергают анализу при помощи описанного выше способа анализа.

Другие аспекты и преимущества настоящего изобретения будут более очевидны из нижеследующего описания, представленного в качестве примера, со ссылками на прилагаемые чертежи, на которых:

Фиг. 1 - схематичный вид различных стадий способа получения виртуальной аналитической пластинки в соответствии с настоящим изобретением.

Фиг.2 - блок-схема различных стадий способа клеточного анализа в соответствии с настоящим изобретением.

Фиг. 1 иллюстрирует способ получения виртуальной аналитической пластинки 1 с целью клеточного анализа с помощью информативной системы. Под виртуальной пластинкой следует понимать совокупность информации и сгруппированных цифровых данных, касающихся пробы 2.

Пробу 2 получают, например, путем взятия мазков (цервикальных, вагинальных и т.д.), пункций органов (грудь, щитовидная железа, лимфатический узел и т.д.) или сбора (взятие мочи, бронхо-альвеолярный лаваж и т.д.). На первой стадии А пробу переводят во взвешенное состояние, например, в пробирке или в флаконе 4 для проб.

На стадии В пробу подвергают первой обработке, предназначенной для маркировки патологических клеток относительно других клеток. Согласно варианту выполнения, эта первая обработка является флуоресцентной маркировкой, которая позволяет не только выделить патологические клетки, но также определить различные характеристики пробы. Действительно, эта флуоресцентная маркировка выявляет специфическую компоненту ядра или цитоплазмы и позволяет выделить их относительно друг друга с целью выбора потенциально патологических клеток. Такая маркировка, если она является специфической для ДНК, позволяет определить количественно ДНК клеток пробы, например, для анализа плоидности, или, если она является специфической для канцерогенного вируса, такого как вирус папилломы человека, например, в случае анализа мазка из шейки матки, позволяет пометить в качестве мишеней потенциально патологические клетки.

Флуоресцентную маркировку осуществляют, например, автоматически при помощи автомата 4, оборудованного пипеточными средствами, используемыми одновременно для растворения пробы и для смешивания пробы с флуоресцентными молекулами. Согласно варианту выполнения, в раствор пробы 2 вводят контрольные шарики. Такие шарики помечены флуоресцентной молекулой и позволяют облегчить автоматическую регулировку во время съемок изображений пробы, что будет описано ниже.

На стадии С маркированную пробу 2 помещают на аналитическую пластинку 6. Как известно, нанесение клеток на пластинку 6 осуществляют, например, путем декантации. Пробу 2 выливают в декантационную камеру 8, дно которой открыто в сторону аналитической пластинки 6. Абсорбционные средства 10 обеспечивают абсорбцию раствора по мере осаждения клеток на аналитическую пластинку 6. Такой способ нанесения известен, и его подробное описание опускается.

На стадии D пробу подвергают второй обработке, предназначенной для окрашивания клеток, что известно специалисту и описано для морфологического анализа. Согласно варианту выполнения, этой второй обработкой является окрашивание по методу Папаниколау. Такое окрашивание известно уже давно, и семиология, широко раскрытая в литературе, обеспечивает распознавание возможных аномалий, соответствующих, например, присутствию предраковых или раковых клеток. Это окрашивание позволяет также распознавать различные типы клеток и их число, чтобы определить репрезентативное качество пробы и, например, определить, является проба репрезентативной или нет. Стадию окрашивания по Папаниколау можно также осуществлять при помощи автоматических пипеточных средств.

Стадию декантации клеточной суспензии можно осуществлять до, после или между вышеуказанными стадиями маркировки и окрашивания.

Описанные выше стадии, комбинирующие флуоресцентную маркировку и известное окрашивание для клеточного анализа являются простыми в осуществлении и позволяют получить легко читаемую пробу, а также важную дополнительную информацию о пробе. Можно применять и другие известные методы окрашивания, но они имеют определенные недостатки. Так, можно предусмотреть стехиометрическое окрашивание, которое дает окрашивание клеток, пропорциональное количеству ДНК, что позволяет определить ее количественно и, следовательно, выявить и анализировать патологические клетки в рамках плоидности. Однако такое специфическое окрашивание, например, если речь идет об окрашивании по Фелгену, несовместимо с окрашиванием по Папаниколау и требует повторного нанесения клеток на пластинку для осуществления анализа врачом или цитолаборантом. В некоторых областях пытались комбинировать стехиометрическое окрашивание с окрашиванием по Папаниколау и применили окрашивающее вещество, содержащее тионин и требующее фиксации метанолом, который является токсичным и который тем более изменяет окрашивание по Папаниколау в его интерпретации, в частности, с ядрами, хроматин которых проявляется слишком «темным» для тонкого анализа состава упомянутых ядер и, следовательно, затрудняет анализ при диагнозе предракового или ракового состояния.

Можно использовать маркер, отличный от маркеров, используемых для количественного определения ДНК, такой как гиперицин или специальный маркер пролиферации или маркер патогенных факторов, таких как канцерогенные вирусы типа вируса папилломы человека, например, в случае мазка из шейки матки.

На стадии Е аналитическую пластинку 6, содержащую пробу, включающую один или несколько специфических флуоресцентных маркеров и окрашенную красителем, известным для морфологического анализа клетки, а также контрольные флуоресцентные шарики, позволяющие улучшить регулировку, подвергают однократно или многократно воздействию источника света, возбуждающего флуоресценцию, непрерывного или пульсирующего, когерентного или не когерентного, в любой области спектра от ультрафиолетовой до инфракрасной, освещающего пробу с целью обеспечения съемок изображений пробы при помощи аппарата 14 съемок изображений. Флуоресцентная съемка изображений позволяет осуществлять автоматическую регулировку, благодаря контрольным флуоресцентным шарикам, и получить, таким образом, максимальное количество изображений с оптимальным фокусированием. Совокупность изображений пробы, полученных флуоресцентным методом, которая может соответствовать одному или нескольким облучениям источником света, возбуждающего флуоресценцию, позволяет отличить нормальные клетки от патологических клеток.

На стадии F аналитическую пластинку 6, содержащую пробу, включающую один или несколько специфических флуоресцентных маркеров и окрашенную красителем, известным для морфологического анализа клетки, подвергают облучению белым светом 16 для получения изображений пробы при помощи устройства 14 съемок изображений. Съемка изображений в белом свете позволяет получить изображения пробы, окрашенной по методу Папаниколау, и выявить стандартные диагностические критерии, используемые специалистами для осуществления диагноза.

Флуоресцентную съемку изображений осуществляют перед съемкой изображений в белом свете, чтобы избежать явлений отбеливания (или “beaching”) изображения, которое может произойти во время флуоресцентной съемки изображений, если пластинку предварительно осветить белым светом, что может помешать использованию изображений в флуоресцентном виде.

Прибор 14 съемки изображений позволяет «сканировать» пробу 2 с очень высоким разрешением и получать с одной пластинки изображения в флуоресцентном режиме и в белом свете. Аналитическую пластинку сканируют строка за строкой. Таким образом, каждое снятое изображение представляет собой полосу 18 небольшой ширины аналитической пластинки. Расположенные рядом изображения позволяют получить полное изображение 20 пластинки 6 с пробой и, следовательно, полное изображение пробы 2, как показано на фиг. 1 для стадии G. Такой метод построчной съемки изображений является более эффективным, чем съемка «поле за полем», применявшаяся до настоящего времени, и позволяет привести к единому стандарту множество проходов в флуоресцентном режиме и одновременно свести к минимуму возможность отбеливания (или “bleaching”). Таким образом, изображение 20, полученное при помощи одного и того же прибора 14 и самым простым способом, является точным отображением пробы, сочетающим большое число данных в флуоресцентном режиме и в белом свете.

Прибор для съемок изображений является, например, прибором типа “Nanozoomer”, выпускаемым компанией HAMAMATSU.

Цифровые данные, полученные при помощи прибора 14 в флуоресцентном режиме и в белом свете, накладывают затем друг на друга при помощи информативной системы обработки, чтобы информативная система обработки могла переходить от данных, полученных при одном освещении, к данным, полученным при другом освещении, для каждой полосы 18 изображения пробы.

Таким образом, получают виртуальную аналитическую пластинку, образованную изображением 20 и данными, связанными с этим изображением, которую можно анализировать при помощи способа клеточного анализа, описание которого следует ниже со ссылками на фиг. 2.

Клеточный анализ происходит путем исследования изображений пробы 2 врачом или лаборантом, занимающимся обнаружением патологических клеток для постановки диагноза, за которым может последовать более углубленное обследование и даже лечение. Из соображений надежности присутствие врача или лаборанта является обязательным, поэтому обнаружение потенциально патологических клеток не может быть полностью автоматическим.

На стадии Н изображения, окрашенные стандартным методом, таким как метод Папаниколау, и снятые в белом свете, выводятся на средство отображения, такое как экран, и прокручиваются перед глазами врача или лаборанта, занимающегося исследованием. Прокруткой изображений управляет информативная система, поэтому эта прокрутка является автоматической. Каждое изображение выводится на весь экран без вывода дополнительных данных о пациенте, чтобы не отвлекать внимание врача или лаборанта во время анализа (или “screening” на английском языке), причем в течение заранее определенного времени, рассчитанного таким образом, чтобы позволить врачу или лаборанту исследовать проецируемое изображение в полном объеме и обнаружить возможную аномалию в изображении.

Время отображения каждого изображение может регулировать врач или лаборант в зависимости от своего опыта или в зависимости от других данных. Например, если проба была взята у пациента из «группы риска» с высокой степенью вероятности обнаружения патологических клеток, время отображения можно отрегулировать на более продолжительное, чтобы произвести более тщательное исследование пробы. С виртуальной аналитической пластинкой могут быть связаны данные о пациенте, введенные в базу данных, и их можно присовокупить к изображению пробы, взятой у этого пациента. В зависимости от этих данных время отображения может регулироваться автоматически. Например, информативная система содержит множество заранее установленных значений времени отображения, каждое из которых соответствует степени риска обнаружения аномалии у пациента. Эту степень риска сообщает врач, взявший пробу, и ее приобщают к взятой пробе. Таким образом, информативная система отмечает степень риска и соответственно регулирует время отображения. Время отображения может также устанавливать вручную врач или лаборант.

Таким образом, прокручиваемые изображения являются изображениями, полученными при окрашивании по Папаниколау. Изобретения при этом окрашивании позволяют обнаруживать возможное присутствие аномалий, соответствующих, например, наличию предраковых или раковых клеток, семиология которых известна давно и широко описана в литературе. Кроме того, как было указано выше, окрашивание по Папаниколау позволяет проверить, соответствует ли проба критериям Bethesda, например, при взятии мазка из шейки матки, и подтвердить или не подтвердить пробу. Проверка критериев Bethesda может осуществляться автоматически информативной системой при помощи программы анализа изображений. Эта программа может, например, подсчитывать клетки на изображении 20 и проверить, что было взято не менее 5000 клеток и что были взяты определенные типы клеток, свидетельствующие о хорошем качестве пробы, такие как эндоцервикальные клетки или соединительные клетки. Программа может также считывать другие данные о пробе клеток. Информативная система приобщает эти данные к изображению 20 для дополнения виртуальной аналитической пластинки.

Врач или лаборант визуально исследует каждое изображение, выведенное на экран, и определяет на этапе I наличие или отсутствие аномалии. Это обнаружение может также автоматически осуществлять информативная система при помощи программы анализа изображений.

В случае, когда ни врач или лаборант, ни информативная система не обнаружили аномалии в отображаемом изображении, способ возвращается на этап Н и продолжается проецированием следующего изображения после истечения установленного времени отображения.

Согласно варианту выполнения, предусмотрена стадия J, во время которой информативная система автоматически останавливает прокрутку изображений на изображении, на котором не обнаружено никакой аномалии, и ожидает подтверждения врача или лаборанта для возобновления прокрутки. Остановка на таком изображении позволяет детально анализировать так называемые контрольные изображения, чтобы подтвердить то, что можно считать нормальной пробой. Остановку на так называемых нормальных изображениях можно осуществлять произвольно или после определенного числа выведенных на экран изображений. Далее следует подробное описание анализа изображения, касающееся анализа изображения, содержащего аномалию.

Если врач или лаборант, или информативная система обнаруживают аномалию на стадии I, способ продолжается на стадии К путем остановки прокрутки изображений.

Остановку прокрутки изображений производит автоматически информативная система, если она обнаружила аномалию, или вручную врач или лаборант, если он захотел исследовать изображение более детально или если он обнаружил аномалию.

При этом изображение отображается с более высокой степенью увеличения, чтобы детально исследовать аномалию. Одновременно на экран можно вывести данные о пациенте, чтобы предоставить врачу дополнительную помощь при принятии решения.

Способ в соответствии с настоящим изобретением обеспечивает автоматическую остановку прокрутки изображений на изображении, содержащем потенциально патологические элементы. Таким образом, способ позволяет снизить процент ложных отрицательных результатов и соответственно повысить чувствительность обнаружения патологических проб, соответствующих аномалиям клеток, которые могли быть пропущены врачом или лаборантом, за счет того, что информативная система выявляет патологические клетки на изображениях, снятых как в флуоресцентном режиме, так в белом свете, в отличие от врача или лаборанта, который основывает свой первый анализ только на изображениях в белом свете, то есть на изображениях пробы, окрашенной по методу Папаниколау.

На стадии L изображение, выведенное на экран при окрашивании методом Папаниколау, на котором прокрутка была остановлена, связывают с изображением этой же зоны, снятой в флуоресцентном режиме, чтобы анализировать пробу, помеченную флуорофорами, в морфологическом и/или спектральном плане. Это отображение позволяет врачу или лаборанту уточнить свой анализ отображаемых клеток и подтвердить или не подтвердить, являются ли некоторые из них потенциально патологическими. Кроме того, при отображении флуоресцентного изображения одновременно на экран можно выводить другие данные, такие как количественные данные, спектральные данные или данные о пациенте, у которого была взята проба, и т.д. Этот более тонкий анализ в сочетании с автоматической остановкой прокрутки позволяет уменьшить число ложных отрицательных результатов. Кроме того, например, в рамках взятия мазка из шейки матки контроль диагноза, производимого врачом или лаборантом, по зонам, выбранным системой, позволяет сохранить уровень надежности цитологического диагноза, который в данном случае приближается к 95%. За счет этого критерии чувствительности и специфичности исследуемого мазка становятся более близкими и высокими.

На этой стадии врач или лаборант может свободно производить увеличение отдельных зон отображаемого изображения как в белом свете, так и в флуоресцентном режиме. Врач или лаборант может также перейти по своему усмотрению от изображения при окрашивании по Папаниколау к флуоресцентному изображению.

Возобновление прокрутки может произойти только по команде врача или лаборанта на стадии М, например, путем нажатия на кнопку подтверждения. Это позволяет убедиться, что, если прокрутка была остановлена автоматически, отображаемое изображение, содержащее возможную аномалию, было действительно исследовано врачом или лаборантом, что позволяет повысить степень надежности и обеспечивает повышение качества анализа. Это же относится и к нормальным изображениям, выведенным на экран во время описанной выше стадии J.

Описанный выше способ обеспечивает быстрый и эффективный анализ проб. Этот способ снижает риск «ложных отрицательных результатов», способствуя углубленному анализу изображений, содержащих возможную аномалию.

Кроме того, сохраняется возможность повышения квалификации врачей или лаборантов, поскольку на экран выводятся все изобретения, как нормальные, так и содержащие аномалии. Кроме того, способ обеспечивает широкую возможность манипулирования, в частности, за счет приобщения данных о пациенте и о пробе к данным отображаемых изображений.

1. Способ клеточного анализа цитологической или гистологической пробы (2), располагаемой на аналитической пластинке (6), включающий следующие стадии:
- осуществляют по меньшей мере первую обработку пробы (2), при этом указанная обработка предназначена для обеспечения выявления патологических клеток среди здоровых клеток пробы,
- осуществляют съемку изображений пробы (6), находящейся на аналитической пластинке (6), с целью получения множества изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки (6), при этом упомянутые изображения, расположенные в ряд, образуют полное изображение (20) пробы,
отличающийся тем, что он дополнительно включает следующие стадии:
- осуществляют автоматическую прокрутку всех снятых изображений пробы (2) на средстве отображения с заранее определенной скоростью прокрутки, при этом упомянутую скорость предусматривают таким образом, чтобы исследователь мог анализировать изображение и определить, содержит или не содержит отображаемая зона пробы потенциально патологические клетки,
- прокрутку останавливают при обнаружении по меньшей мере одной аномалии, которая может свидетельствовать о наличии патологической клетки,
и тем, что остановка прокрутки происходит автоматически в результате автоматического анализа изображения, при этом указанную остановку осуществляют, если в изображении обнаружен отдельный объект, определяемый как аномальный.

2. Способ анализа по п.1, отличающийся тем, что скорость прокрутки изображений регулируется.

3. Способ анализа по п.1, отличающийся тем, что он дополнительно включает стадию возобновления прокрутки после анализа зоны пробы, содержащей аномалию, при этом указанная стадия возобновления происходит по команде исследователя.

4. Способ анализа по п.1, отличающийся тем, что он включает стадию автоматической остановки прокрутки на изображении, не содержащем аномалии или соответствующем объектам, необходимым для оценки репрезентативности пробы, при этом возобновление прокрутки происходит по команде исследователя после подтверждения, что изображение не содержит аномалии.

5. Способ анализа по п.1, отличающийся тем, что пробу (2) подвергают двум разным видам обработки, которые позволяют маркировать патологические клетки среди клеток пробы, при этом осуществляют две стадии съемок изображений, при этом каждая стадия съемок позволяет производить обнаружение аномалий по одному из видов обработки, осуществляемых на пробе, при этом данные изображений, полученные на каждой стадии съемок, накладывают друг на друга, чтобы исследователь мог переходить от изображения зоны, полученного во время одной стадии съемок, к изображению этой же зоны, полученному во время другой стадии съемок, при прокрутке изображений.

6. Способ анализа по п.5, отличающийся тем, что переход от изображения зоны, снятой на одной стадии съемок, к изображению этой же зоны, снятой на другой стадии съемок, происходит, если в изображении обнаружена аномалия.

7. Способ анализа по п.1, отличающийся тем, что стадии обработки являются стадиями окрашивания или маркировки пробы при помощи флуорофоров.

8. Способ анализа по п.6, отличающийся тем, что отображение изображения, полученного на другой стадии съемки, сопровождается выводом на экран информации об отображаемой зоне пробы, и/или о всей пробе, и/или о пациенте, у которого взяли пробу.

9. Способ анализа по п.1, отличающийся тем, что он включает стадии увеличения изображения для просмотра детали отображаемой зоны.

10. Способ анализа по п.9, отличающийся тем, что степень увеличения можно регулировать.

11. Способ получения виртуальной пластинки для анализа пробы (2) с целью ее клеточного анализа при помощи способа анализа по любому из пп.1-10, включающий следующие стадии:
- получают пробу (2),
- осуществляют первую стадию обработки пробы, при этом упомянутая обработка позволяет маркировать патологические клетки относительно остальных клеток,
- осуществляют вторую стадию обработки пробы, при этом упомянутая обработка позволяет маркировать патологические клетки относительно остальных клеток иначе, чем на первой стадии обработки,
- пробу (2) помещают на аналитическую пластинку (6) перед, или после, или между стадиями обработки пробы (2),
отличающийся тем, что он дополнительно включает следующие стадии:
- осуществляют первую съемку изображений пробы (2), находящейся на аналитической пластинке (6), чтобы получить множество изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки, при этом упомянутые изображения, расположенные рядом друг с другом, образуют полное изображение (20) пробы, при этом упомянутые изображения позволяют обнаружить патологические клетки, маркированные во время первой стадии обработки,
- осуществляют вторую съемку изображений пробы (2), находящейся на аналитической пластинке (6), чтобы получить множество изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки (6), при этом указанные изображения, расположенные рядом друг с другом, образуют полное (20) изображение пробы, при этом указанные изображения позволяют обнаружить другие клеточные аномалии, отличные от маркированных на первой стадии обработки,
- указанные полученные изображения образуют виртуальную аналитическую пластинку.

12. Способ получения по п.11, отличающийся тем, что он дополнительно включает стадию наложения данных изображений, полученных во время первой съемки изображений, и данных изображений, полученных во время второй съемки изображений.

13. Способ получения по п.11, отличающийся тем, что первая стадия обработки пробы является стадией флуоресцентной маркировки.

14. Способ получения по п.13, отличающийся тем, что первая стадия обработки включает стадию введения в пробу контрольных шариков, при этом указанные шарики служат метками для регулировки съемки изображений.

15. Способ получения по п.11, отличающийся тем, что вторая стадия обработки пробы является стадией окрашивания по Папаниколау.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии, и используется для диагностики ишемической нефропатии у новорожденного. Способ заключается в том, что осуществляют проведение в течение 1-3 дней жизни диагностического тестирования по анамнестическим и биохимическим показателям, включающим определение гестационного возраста, концентрацию ионов натрия в крови, микроальбумина в моче, отношения содержания карбоангидразы к креатинину в моче и концентрацию непрямого билирубина в крови с последующим вычислением вероятности (Р) ишемической нефропатии по формуле.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам диагностики, и может быть использовано для оценки угрозы формирования гипоксии в третьем триместре гестации.
Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии. Сущность способа прогнозирования инфекционного воспаления послеоперационной раны при накостном остеосинтезе длинных трубчатых костей состоит в том, что проводят анализ клеточного состава крови и определяют лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ) Я.Я.
Изобретение относится к области медицины, а именно к онкогинекологии. Определяют иммунологические показатели: абсолютное количество лимфоцитов (лим_аб), TNFα (TNFα_к) и IL-10 (IL-10_к) в периферической крови, а также TNFα (TNFα_c) и IL-4 (IL-4_c) в цервикальной слизи.

Изобретение относится к области медицины, в частности к применению молекулярных маркеров ВПЧ ВКР и их качественных и количественных характеристик для прогнозирования течения гиперпролиферативных заболеваний ШМ.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования индивидуального риска развития бронхиальной астмы в регионах с высокой и низкой распространенностью гельминтных инфекций.

Изобретение относится к области медицины, а именно к терапии, кардиологии, патофизиологии, биохимии и фармакологии. Для оценки развития ишемической болезни сердца рассчитывают значение дискриминантной функции по набору показателей: возраст, рост, вес, индекс Кетле, константа Брока, абдоминальное ожирение, триглицериды, общий холестерин, холестерин липопротеидов высокой плотности, холестерин липопротеидов низкой плотности, холестерин липопротеидов очень низкой плотности, коэффициент атерогенности, артериальное давление, глюкоза, аланинаминотрансфераза, аспартатаминотрансфераза, лактатдегидрогеназа, α-амилаза, общий белок, альбумин, мочевая кислота, мочевина, креатинин, креатинкиназа, щелочная фосфатаза, билирубин общий, билирубин прямой, АДФ-индуцированная агрегация тромбоцитов, коллаген-индуцированная агрегация тромбоцитов, количество тромбоцитов, средний объем тромбоцита, количество эритроцитов, гематокрит, гемоглобин, средний объем эритроцита, коэффициент распределения эритроцитов по объему, среднее содержание гемоглобина в крови, количество лейкоцитов, процент сегментоядерных нейтрофилов, процент эозинофилов, процент базофилов, процент лимфоцитов, процент моноцитов, среднее содержание гемоглобина в эритроците.

Изобретение относится к области медицины и касается способа оценки трансаминирования в синцитиотрофобласте. Сущность способа: гистохимическим методом определяют активность пиридоксальфосфатдегидрогеназы.

Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии. Предложен способ дифференциальной диагностики геморрагического и ишемического типов инсультов в остром периоде.
Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно ветеринарной паразитологии. Способ культивирования ооцист эймерий крупного рогатого скота, включающий микроскопирование процесса споруляции, отличающийся тем, что используют флотационный раствор, приготовленный из 1,5 кг технической гранулированной аммиачной селитры и 1 л кипяченой воды, с помощью которого в медицинских стаканчиках суспензируют 3 г исследуемых фекалий с 50 мл раствора, суспензию процеживают через металлическое сито, отстаивают 5 минут, шприцом без иглы отсасывают 12 мл верхнего слоя, переносят в центрифужные пробирки, центрифугируют 1 минуту при 1500 об/мин, поверхностную пленку (1-2 капли) снимают проволочной петлей и переносят на обезжиренное предметное стекло с овалом, прочерченным восковым карандашом, добавляют 3-4 капли водопроводной воды, предметные стекла кладут на штатив, затем штатив помещается в эксикатор, а далее ставят в термостат с температурой 25-28°C и ежедневно микроскопируют на наличие процессов споруляции.
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для дооперационного определения плотности ядра хрусталика. Для этого у больного в сыворотке венозной крови определяют фактор роста эндотелия сосудов (ФРЭС). При его значении у больных, страдающих сахарным диабетом 1 типа, 141-187 пг/мл диагностируют 1 степень и очень низкую плотность ядра хрусталика, при значении - 188-234 пг/мл диагностируют 2 степень и низкую плотность ядра хрусталика, при значении - 235-280 пг/мл диагностируют 3 степень и умеренную плотность ядра хрусталика. У больных, страдающих сахарным диабетом 2 типа, при значении ФРЭС - 281-330 пг/мл диагностируют 2 степень и низкую плотность ядра хрусталика, при значении - 331-382 пг/мл диагностируют 3 степень и умеренную плотность ядра хрусталика, при значении - 383-432 пг/мл диагностируют 4 степень и высокую плотность ядра хрусталика, при значении - 433-478 пг/мл диагностируют 5 степени и очень высокую плотность ядра хрусталика. У больных, не страдающих сахарным диабетом, при значении ФРЭС - 290-336 пг/мл диагностируют 2 степень и низкую плотность ядра хрусталика, при значении - 337-379 пг/мл диагностируют 3 степень и умеренную плотность ядра хрусталика, при значении - 380-426 пг/мл диагностируют 4 степень и высокую плотность ядра хрусталика, при значении - 427-465 пг/мл диагностируют 5 степень и очень высокую плотность ядра хрусталика. Изобретение позволяет проводить факоэмульсификацию с использованием щадящих параметров ультразвука, что минимизирует его воздействие на ткани глазного яблока и уменьшает риск связанных с ними осложнений в послеоперационном периоде у пациентов с сахарным диабетом. 2 таб., 2 пр.
Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к средствам для определения чувствительности различных микроорганизмов, в том числе бактерий и грибов, к антимикробным веществам. Для определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным веществам осуществляют забор биологического материала, инкубацию содержащихся в нем микроорганизмов на питательной среде, введение в питательную среду исследуемого антимикробного вещества с последующей оценкой результата. Для культивирования микроорганизмов используют плотную богатую питательную среду. Исследуемое антимикробное вещество вводят в питательную среду до начала культивирования микроорганизмов в концентрации, близкой к максимально достижимой в месте забора биологического материала. Оценку чувствительности микроорганизмов к антимикробному веществу осуществляют после появления видимого роста микроорганизмов в контрольном посеве. К питательной среде могут быть добавлены витамины, и/или аминокислоты, и/или пищевые добавки. Использование способа позволяет повысить точность определения чувствительности микроорганизмов к антимикробному веществу. 11 з.п. ф-лы, 6 пр.
Изобретение относится к области медицины, в частности к эндохирургии. Для определения индивидуального риска развития острого панкреатита после эндоскопических транспапиллярных вмешательств проводят анализ демографических данных и результатов биохимического исследования крови. В ходе предоперационного обследования определяют показатель риска развития острого панкреатита (ПРРП) по формуле: ПРРП=(A1×2/An+B1/100)×(40/C1)×D×E, где: A1 - значения амилазы крови пациента; Аn - максимальные значения амилазы крови в норме; B1 - значение билирубина крови пациента; С1 - возраст пациента; D - пол пациента: D=2, если пациент - женщина и D=1, если пациент - мужчина; Е - характер основного заболевания: Е=1 - у пациентов с опухолями гепатопанкреатобилиарной зоны, Е=2 - у пациентов с холедохолитиазом, Е=3 - у пациентов с вирсунголитиазом, со стенозом большого сосочка двенадцатиперстной кишки, а также у больных при сочетании холедохолитиаза и стеноза большого сосочка двенадцатиперстной кишки. При ПРРП<0,5 риск развития острого панкреатита меньше 2%; при ПРРП=0,5-0,99 риск развития 2-10%; при ПРРП=1-1,99 риск развития 11-20%; при ПРРП=2-3,99 риск развития 21-30%; при ПРРП=4-5 риск развития 31-40%; при ПРРП>5 - более 40%. Способ позволяет повысить точность определения индивидуального риска развития острого панкреатита после эндоскопических транспапиллярных вмешательств, за счет определения объективного интегрального диагностического показателя - показателя риска развития острого панкреатита (ПРРП), основанного на многофакторном анализе информативных критериев конкретного пациента. 2 пр.
Изобретение относится к паразитологии. Для выделения и обнаружения личинок филяриат-микрофилярий, получают микроскопические препараты, для чего пробу крови помещают в пробирку с антикоагулянтом К3-ЭДТА, отделяют плазму от форменных элементов путем осаждения в течение 20-24 часов при температуре 4-15°С без центрифугирования. При этом осадок на своей поверхности, граничащей с плазмой, образует форму воронки, на дне которой концентрируются личинки филяриат-микрофилярий, из дна воронки отбирают 15-20 мкл жидкости - плазмы, смешивают с 1% раствором Люголя, готовят мазки, проводят микроскопирование и сбор гельминтов. Изобретение позволяет уменьшить трудоемкость выделения из крови микрофилярий.

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и описывает способ прогнозирования адаптационных возможностей организма ребенка к хирургическому вмешательству по поводу несращения губы и неба. До операции, в течение 3-4 дней ежедневно, однократно у ребенка берут пробу слюны из ротовой полости, высушивают ее 1-2 часа при комнатной температуре и центральную зону полученной фации исследуют микроскопически, при этом за норму принимают кристаллы в виде «елочки» с супротивным расположением ветвей первого порядка, образующими в совокупности фон «морозного узора», с равномерным распределением кристаллов, и прогнозируют благоприятный фон для хирургического вмешательства, а при обнаружении кристаллов неправильной формы с рядом ответвлений на каждой «елочке» и в целом - неупорядоченным фоном по общему рисунку и его плотности, определяют состояние организма ребенка, неблагоприятное для хирургического вмешательства. Техническим результатом является упрощение, удешевление и доступность способа оценки адаптационных возможностей организма ребенка, повышение достоверности прогнозирования. 2 ил., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины. Для диагностики синдрома инсулинорезистентности проводят исследование слюны больного. К капле слюны больного добавляют каплю 0,9% раствора хлорида натрия. Выдерживают полученный препарат в течение 24 часов в горизонтальном положении при комнатной температуре, влажности 50-70%, вдали от прямых солнечных лучей и нагревательных приборов и исследуют под микроскопом. По наличию в кристаллограмме округлых, неправильной формы кристаллов в поле зрения на фоне четких ромбовидных центров кристаллизации с расходящимися лучами определяют наличие инсулинорезистентности, при отсутствии отдельных округлых, неправильной формы кристаллов на всем поле зрения судят об отсутствии инсулинорезистентности. Способ позволяет диагностировать метаболические изменения в организме при микроскопическом исследовании слюны пациента. 4 ил., 2 табл.
Изобретение относится к области ветеринарии. Для ранней диагностики заболевания молочной железы коров проводят определение электропроводности молока по каждой четверти вымени в каждую дойку. Предварительно у здоровой коровы, прошедшей диспансеризацию в течение трех дней, в утреннее и вечернее доение определяют электропроводность молока в процессе доения по каждой четверти вымени. Рассчитывают абсолютную среднюю электропроводность молока по каждой четверти вымени за три дня. В дальнейшем при каждом доении определяют показатель средней электропроводности молока по каждой четверти вымени и при отклонении показателя средней электропроводности молока хотя бы в одной из четвертей вымени в процессе доения от абсолютной средней электропроводности соответствующей четверти вымени в сторону увеличения на 10-15% и более диагностируют субклиническую форму мастита. Способ позволяет диагностировать субклиническую форму мастита. 1 табл., 1 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностике злокачественных новообразований иммунологическими методами. Проводят лабораторное исследование. При лабораторном исследовании определяют иммунологические показатели: содержание CD10×109/л, CD20×109/л, CD25×109/л лимфоцитов периферической крови, функциональный резерв нейтрофилов цервикальной слизи, уровень ИЛ-10 крови и уровни ИНФ-γ крови и ФНО-α цервикальной слизи. На основании полученных данных вычисляют показатель, на основании значения которого диагностируют carcinoma in situ или цервикальную интраэпителиальную неоплазию III степени. Способ позволяет осуществить дифференциальную диагностику стадий канцерогенеза шейки матки, тем самым усовершенствовать подходы к лечению женщин с тяжелой дисплазией и преинвазивным раком шейки матки и сохранить полноценную репродуктивную функцию у данной категории пациенток. 4 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии. Для прогнозирования эффективности предоперационной лучевой терапии плоскоклеточных карцином головы и шеи проводят иммуноферментное исследование уровня ТИМП-1 и ТИМП-2 в сыворотке крови. Дополнительно определяют уровень ММП-2 и размер первичной опухоли согласно международной классификации TNM. Рассчитывают дискриминантные функции Y1 и Y2, на основании сравнения которых прогнозируют эффективность предоперационной лучевой терапии. Способ повышает точность и информативность прогнозирования эффективности предоперационной лучевой терапии плоскоклеточных карцином головы и шеи за счет оценки наиболее информативных показателей. 2 пр.
Изобретение относится к медицине, онкологии, лечению больных раком легкого, которым противопоказано оперативное лечение. Проводят введение химиопрепаратов (ХП), инкубированных с аутокровью, - аутогемохимиотерапию (АГХТ) и лучевую терапию (ЛТ). При этом до начала лечения у больного определяют в крови уровень пролактина и прогестерона, затем до начала АГХТ больной начинает прием бромокриптина 2,5 мг один раз в день во время еды и введение оксипрогестерона капроната 2 раза в неделю с интервалом в 3 суток по 1 мл внутримышечно. Затем проводят курс АГХТ, состоящий из 1-3 введений ХП на аутокрови, и в случае полной резорбции опухоли больного подвергают оперативному лечению в объеме пневмонэктомии, а в случае частичной резорбции через две недели после последнего введения ХП на аутокрови проводят ЛТ: вначале по 2 Гр 2 раза в день с интервалом 4-5 часов, начиная с 5 дней в неделю до достижения очаговой дозы 28 Гр. Затем 2 нед. перерыв, далее по 4 Гр ежедневно, 3 фракции облучения в неделю, всего 6 фракций, до СОД за весь курс ЛТ 52 Гр. На протяжении всего лечения больной продолжает прием бромокриптина и оксипрогестерона капроната под контролем уровней пролактина и прогестерона в крови: по сравнению с показателями до лечения уровень пролактина должен снижаться к концу лечения, а уровень прогестерона - увеличиваться. Способ обеспечивает улучшение результатов консервативного лечения больных данной группы: уменьшение размеров опухолевого очага и лимфоузлов, вплоть до полного регресса первичной опухоли в 30%, переход больных в резектабельное состояние, улучшение качества жизни больных. 2 пр., 1 табл.
Наверх