Способ молекулярно-генетической идентификации популяций древесных видов растений


 


Владельцы патента RU 2505956:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермский государственный национальный исследовательский университет" (RU)

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу молекулярно-генетической идентификации древесных видов растений, который включает выбор эффективных стабильных молекулярных маркеров, сбор материала, проведение молекулярно-генетического анализа с использованием ПЦР, анализ выявленных ISSR-маркеров и определение идентификационных (мономорфных и полиморфных), анализ полученных данных после секвенирования, составление молекулярно-генетической формулы, составление штрихкода, составление генетического паспорта. Способ характеризуется тем, что в молекулярно-генетическую формулу и штрихкод, помимо идентификационных фрагментов ДНК разного размера, амплифицированных в результате полимеразной цепной реакции (ПЦР), вносят и другие структурные изменения геномов, такие как делеции, дупликации, однонуклеотидные замены (SNP - Single Nucleotide Polymorphism), выявленные при сравнительном анализе нуклеотидных последовательностей после секвенирования геномной ДНК. Изобретение позволяет эффективно идентифицировать древесные виды растений на нуклеотидном уровне. 6 з.п. ф-лы, 1 ил.

 

Изобретение относится к молекулярно-генетической идентификации популяций древесных видов растений.

В настоящее время актуальным является проблема генетической паспортизации и идентификации особей, популяций, видов растений и животных, включая человека. ДНК-идентификация используется во всех развитых странах (Животовский, 2001). Геномы растений значительно больше генома человека и число полностью расшифрованных геномов растений невелико (Зеленин, 2003), поэтому вопросы идентификации вида растения и паспортизации популяций или групп популяций разработаны в значительно меньшей степени (Боронникова, 2008).

В 2006 году в России была разработана методика единовременной инвентаризации объектов единого генетико-селекционного комплекса (ЕГСК) в лесном фонде Российской Федерации с целью идентификации всех объектов ЕГСК, оценки их состояния, сбора информации о структуре ЕГСК, их количественном и качественном составе и других параметров, необходимых для подготовки перспективных планов развития лесного селекционного семеноводства. В качестве формы учета использовался паспорт, основанный на внешних морфологических признаках без записи генетических особенностей объектов ЕГСК (Паленова и др., 2008).

На данный момент остро стоит проблема охраны прав собственности на селекционные достижения, которая тесно связана с возможностью идентификации сортовой и видовой принадлежности растений (Соболев и др., 2006). Ранее для идентификации растений применяли методы, которые базировались на оценке ряда морфологических признаков (Малышев, 2006). Для большинства видов и сортов растений характерно большое разнообразие морфологических признаков. С их помощью в настоящее время оценивают генофонд популяции, уровень изменчивости, генетическое разнообразие и другие показатели (Рамазанова, 2008). По мере создания все большего количества сортов и изучения разных видов растений этих признаков становится недостаточно. Кроме того, морфологические признаки имеют определенные ограничения, связанные с субъективностью в анализе признака. На них оказывает влияние окружающая среда и техника обработки. Некоторые диагностические признаки проявляются только на конкретной стадии развития растения (цветение или созревание плода). По морфологическим признакам также трудно различить растения близкородственного происхождения (Малышев, 2006).

Сложности, связанные с использованием морфологических признаков, приводят к необходимости поиска новых, более удобных и надежных методов идентификации сортов и видов растений. К настоящему времени установлено, что генетические различия между отдельными организмами наиболее полно представлены на уровне ДНК. С помощью современных молекулярных методов эти различия можно обнаружить и использовать для идентификации отдельных линий, сортов и видов растений. Молекулярные методы основаны на применении ДНК-маркеров и являются дальнейшим развитием существующих в настоящее время методов, основанных на применении морфологических или биохимических (белковых) маркеров (Малышев, 2006).

Методы, основанные на использовании ДНК-маркеров, обладают рядом преимуществ по сравнению с другими методами идентификации. Они позволяют в значительно большей степени выявить объективные различия между исследуемыми образцами и, следовательно, существенно повысить разрешающую способность анализа. Молекулярные методы можно применять на любых стадиях развития растений, начиная с семян. Исследованию можно подвергать разные части растения, например, клубни, листья, стебли или другие органы. Результат останется неизменным. ДНК-методы незаменимы в спорных случаях, когда применение традиционных подходов не позволяет достоверно различить исследуемые образцы (Малышев, 2006). Молекулярные методы, основанные на применении ДНК-маркеров, в меньшей степени подвержены генотипической изменчивости и, в большинстве случаев, имеют кодоминантный тип наследования (Рамазанова, 2008).

Данные, полученные с помощью анализа ДНК, являются наиболее объективными для описания сортов и видов растений (Малышев, 2006). На их основе проводится паспортизация сортов и гибридов многих сельскохозяйственных культур - мягкой пшеницы (Сиволап и др., 2000), картофеля, томата, льна и свеклы (Малышев, 2006), сои (Рамазанова, 2008; Брик, Сиволап, 2001) и малины (Соболев и др.2006).

Прототипом предлагаемого технического решения является способ, описанный в автореферате диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Боронниковой СВ. «Молекулярно-генетический анализ генофондов редких и исчезающих видов растений Пермского края»: Автореф. дис. на соиск. уч. степ, док. биол. наук. - Уфа, 2009. С.26-31.

Методика молекулярно-генетической паспортизации редких и нуждающихся в охране травянистых видов растений разработана на примере природных популяций двух видов Adonis vernalis и A. sibirica. Она включает в себя семь этапов: 1 - выбор эффективных стабильных молекулярных маркеров, 2 - сбор материала, 3 - проведение молекулярно-генетического анализа с использованием ПЦР (полимеразной цепной реакции), 4 - анализ выявленных ISSR- и IRAP-маркеров и определение идентификационных (мономорфных и полиморфных), а также составление молекулярно-генетической формулы (5 этап), штрих-кода (6 этап) и генетического паспорта (7 этап).

На первом этапе разработки методики была решена задача выбора эффективных стабильных молекулярных маркеров, позволяющих выявить высокий уровень полиморфизма ДНК, анализировать большую часть генома растений, получить четко воспроизводимые результаты на основании анализа данных молекулярно-генетических исследований двух видов рода Adonis. Всем этим требованиям отвечали ISSR- и IRAP-маркеры.

На втором этапе паспортизации в природных популяциях двух видов рода Adonis собраны фрагменты листьев, из которых выделена ДНК.

На третьем этапе были отобраны наиболее информативные четыре ISSR- и пять IRAP-праймеров, с помощью которых выявлены ISSR- и IRAP-маркеры у двух видов рода Adonis. Проведен ПЦР-анализ выделенных проб ДНК.

На четвертом этапе для двух видов рода Adonis выявлены 10 ISSR- и 17 IRAP-мономорфных фрагментов и 9 ISSR- и 21 IRAP-полиморфных фрагментов ДНК. Четко воспроизводимые при амплификации у особей одного рода фрагменты ДНК названы родовыми, а у особей одного вида - видовыми.

На пятом этапе маркеры ДНК, избранные для паспортизации, представили в виде молекулярно-генетической формулы. Автором предложена новая оригинальная запись фрагмента ДНК с указанием типа фрагмента (родовой, видовой, полиморфный), длины фрагмента и указания праймера нижним индексом, например, Asv1510IR75-

Недостатки прототипа:

1. В прототипе при составлении молекулярно-генетической формулы используются только идентификационные «родовые», «видовые», «полиморфные» и «уникальные» ДНК-маркеры без учета нуклеотидного состава последовательностей ДНК, что позволяет идентифицировать объекты на надвидовом, видовом, популяционном уровнях только с использованием длин амплифицированных фрагментов ДНК без учета однонуклеотидных замен, делеций, вставок в последовательностях ДНК.

2. Для характеристики популяций травянистых видов растений используются только сочетания полиморфных идентификационных фрагментов ДНК, выявленных методом ПЦР, и не учитываются изменения в последовательностях ДНК, выявленные методом секвенирования.

3. В молекулярно-генетической формуле представлены коды в виде букв и цифр, что не дает представление о точном положении замен или структурных изменений в последовательности ДНК изучаемого объекта.

4. Система разработана только для паспортизации на уровне сорта или популяции травянистых видов растений, то есть относительно генетически гетерогенного материала, и неприменима к относительно генетически гомогенным природным древесным популяциям растений.

5. В предлагаемой системе идентификации используются только полиморфные и не учтены мономорфные молекулярные маркеры, а также другие структурные изменения геномов на молекулярном уровне.

6. Для составления молекулярно-генетической формулы популяций травянистых видов растений предложено отбирать от 10 до 12 молекулярных маркеров (4 родовых молекулярных маркера, то есть общих и для двух изучаемых видов этого рода; 4 видовых, то есть специфических для двух изучаемых видов этого рода; от 1 до 4 полиморфных амплифицированных фрагментов ДНК, сочетания которых специфичны для исследуемых популяций), что не характеризует популяцию или сорт на нуклеотидном уровне.

7. В штрихкоде применено традиционное обозначение родовых идентификационных фрагментов ДНК толстой линией, видовых - линией средней толщины, полиморфных фрагментов - тонкой линией, но никак не отражены изменения в структуре нуклеотидной последовательности.

Задачей создания изобретения является устранение недостатков прототипа, а также возможность с высокой точностью устанавливать тождество различных объектов, наглядно отразить изменения в структуре нуклеотидной последовательности.

Поставленная задача решается с помощью существенных признаков, указанных в формуле изобретения, таких как способ молекулярной генетической идентификации древесных видов растений, которые генетически более гомогенны по сравнению с травянистыми видами растений, характеризуется тем, что в молекулярно-генетическую формулу и штрихкод помимо идентификационных фрагментов ДНК разного размера, амплифицированных в результате полимеразной цепной реакции (ПЦР), вносят и другие структурные изменения геномов, такие как делеции, дупликации, однонуклеотидные замены (SNP - Single Nucleotide Polymorphism), выявленные при сравнительном анализе нуклеотидных последовательностей после секвенирования геномной ДНК.

Для характеристики природных популяций древесных видов растений используют сочетания как полиморфных идентификационных фрагментов ДНК, выявленных методом ПЦР, так и изменения в последовательностях ДНК, выявленных методом секвенирования.

Для молекулярно-генетической идентификации популяций и форм у древесных видов растений берут данные анализа нуклеотидных последовательностей ДНК помимо идентификационных фрагментов ДНК, выявленных в результате ПЦР таких как мономорфные, с помощью которых осуществляют идентификация до рода и вида, и полиморфные, сочетания которых используют у травянистых растений для идентификации популяций.

Помимо указания в молекулярно-генетической формуле краткого обозначения рода или вида приводят однонуклеотидные замены, делеции или другие структурные изменения нуклеотидной последовательности ДНК с указанием используемых для их выявления праймеров или гена, а также положения замен или структурных изменений в последовательности.

Для молекулярно-генетической формулы используют от 14 до 16 элементов, из которых 12 являются идентификационными фрагментами ДНК, а сочетания остальных элементов характеризируют популяцию или форму на нуклеотидном уровне.

Используют четыре штрихкода для характеристики рода, четыре - для характеристики вида, от 1-х до 4-х - для характеристики популяции или формы, как при сочетании идентификационных последовательностей ДНК разного размера, так и сочетаний небольшой протяженности делеции, дупликации и однонуклеотидных замен.

В штрихкоде помимо традиционных обозначений родовых идентификационных фрагментов ДНК толстой линией, видовых - линией средней толщины, полиморфных фрагментов - тонкой линией, а изменения в структуре нуклеотидной последовательности обозначают пунктирной линией.

Вышеперечисленная совокупность существенных признаков позволяет получить следующий технический результат - с высокой точностью устанавливать тождество различных объектов, наглядно отразить изменения в структуре нуклеотидной последовательности.

Предлагаемый способ иллюстрируется следующим примером, см. Фиг.1. Молекулярно-генетический штрих-код популяции Р. tremula {Pt I): POPt - фрагменты ДНК, общие для видов Р.tremula и Р.balsamifera; Ptv - фрагменты ДНК, характерные для Р.tremula; Ptp - полиморфные фрагменты ДНК.

В молекулярно-генетическую формулу и штрихкод помимо идентификационных фрагментов ДНК разного размера, амплифицированных в результате полимеразной цепной реакции (ПЦР), вносят и другие структурные изменения геномов, такие как делеции, дупликации, однонуклеотидные замены (SNP - Single Nucleotide Polymorphism), выявленные при сравнительном анализе нуклеотидных последовательностей после секвенирования геномной ДНК. Предложен уникальный способ молекулярной идентификации древесных видов растений на примере природных популяций двух видов Populus tremula L. и Populus balsamifera L. Она включает в себя восемь этапов: 1 - выбор эффективных стабильных молекулярных маркеров, 2 - сбор материала, 3 - проведение молекулярно-генетического анализа с использованием ПЦР (полимеразной цепной реакции), 4 - анализ выявленных ISSR-маркеров и определение идентификационных (мономорфных и полиморфных), проведение секвенцовой реакции и электрофореза в секвенаторе, а также анализ полученных данных после секвенирования (5 этап), составление молекулярно-генетической формулы (6 этап), штрих-кода (7 этап) и генетического паспорта (8 этап).

Данный способ можно использовать для идентификации древесных видов растений на самом точном нуклеотидном уровне. В связи с высокой актуальностью использования осины, а также высокой востребованностью идентификации древесины для экспорта за границу, имеет место задача точной идентификации вида растений и происхождения древесины, что возможно как для лиственных, так и хвойных древесных видов растений только с использованием современных молекулярно-генетических методов. Возникшие проблемы могут быть решены применением молекулярных ДНК-маркеров на основе. Эти маркеры используются на всех фазах развития растения. Для выделения ДНК подходит любой растительный материал - кора, корневые отростки, листья, почки, цветки, пыльца, и даже гербарий. Пробы ДНК хранятся длительное время и многократно применяются для анализа.

Первыми буквами названия рода (POP) обозначили (см. Фиг) родовые идентификационные фрагменты ДНК с указателем г от rod нижним индексом, например, POPr860X11. Видовые идентификационные фрагменты обозначены как Pt и Pb с указанием v от vid, например, Ptv950X9. Полиморфные фрагменты ДНК мы предлагаем обозначить индексом p от polimorph, например, Ptp660M27. Как родовые, так и видовые фрагменты ДНК являются мономорфными и установлены с использованием ISSR-метода. Полиморфные фрагменты ДНК (при их различных сочетаниях) позволили составитьуникальную генетическую формулу популяции. Для паспортизации популяций видов рода Populus было отобрано по 4 родовых и видовых фрагментов ДНК, а также от одного до четырех полиморфных фрагментов ДНК, сочетания которых специфичны для исследуемых популяций. Это минимальное число фрагментов ДНК, с помощью которых удалось провести паспортизацию. Гетерогенные природные популяции можно охарактеризовать разными сочетаниями полиморфных фрагментов ДНК. Также приводятся однонуклеотидные замены, делеции или другие структурные изменения нуклеотидной последовательности ДНК с указанием гена, а также положения замены или структурных изменений в последовательности.

Новый способ составления и записи молекулярно-генетической формулы заключается в том, что наравне с выявлением идентификационных маркеров ДНК при помощи ПЦР-анализа для древесных видов растений в молекулярно-генетическую формулу и штрихкод вносятся данные о новых структурных изменениях, выявленных при сравнительном анализе нуклеотидных последовательностей после секвенирования геномной ДНК.

Новый способ записи содержит полную информацию об идентификационном молекулярном маркере, включая краткое обозначение вида или рода растения, точное положение замен или других структурных изменений в последовательности ДНК с указанием гена, положения в гене, в котором обнаружена замена, и используемых для их выявления праймеров.

Основным достижением предлагаемого способа является механизм обобщения данных молекулярно-генетического анализа посредством выявления идентификационных маркеров одновременно несколькими инновационными методами анализа геномов, такими как ПНР и секвенирование последовательностей ДНК, идентификация объектов на самом точном нуклеотидном уровне, а также запись результатов в виде модифицированных молекулярно-генетической формулы и штрихкода.

Молекулярно-генетическая идентификация имеет важное значение, поскольку позволяет на научной основе и с высокой точностью устанавливать тождество различных объектов (например, ввозимой древесины из России в Китай), для получения точной информации о легальности продажи данного древесного сырья.

Таким образом, предлагаемый «Способ молекулярно-генетической идентификации популяций древесных видов растений» позволяет проводить идентификацию объектов на самом точном нуклеотидном уровне.

1. Способ молекулярно-генетической идентификации древесных видов растений, которые генетически более гомогенны по сравнению с травянистыми видами растений, включающий: выбор эффективных стабильных молекулярных маркеров, сбор материала, проведение молекулярно-генетического анализа с использованием ПЦР, анализ выявленных ISSR-маркеров и определение идентификационных (мономорфных и полиморфных), анализ полученных данных после секвенирования, составление молекулярно-генетической формулы, составление штрих-кода, составление генетического паспорта, а также характеризующийся тем, что в молекулярно-генетическую формулу и штрих-код помимо идентификационных фрагментов ДНК разного размера, амплифицированных в результате полимеразной цепной реакции (ПЦР), вносят и другие структурные изменения геномов, такие как делеции, дупликации, однонуклеотидные замены (SNP - Single Nucleotide Polymorphism), выявленные при сравнительном анализе нуклеотидных последовательностей после секвенирования геномной ДНК.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что для характеристики природных популяций древесных видов растений используют сочетания как полиморфных идентификационных фрагментов ДНК, выявленных методом ПЦР, так и изменения в последовательностях ДНК, выявленных методом секвенирования.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что для молекулярно-генетической идентификации популяций и форм у древесных видов растений берут данные анализа нуклеотидных последовательностей ДНК помимо идентификационных фрагментов ДНК, выявленных в результате ПЦР, таких как мономорфные, с помощью которых осуществляют идентификацию до рода и вида, и полиморфные, сочетания которых используют у травянистых растений для идентификации популяций.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что помимо указания в молекулярно-генетической формуле краткого обозначения рода или вида приводят однонуклеотидные замены, делеции или другие структурные изменения нуклеотидной последовательности ДНК с указанием используемых для их выявления праймеров или гена, а также положения замен или структурных изменений в последовательности.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что для молекулярно-генетической формулы используют от 14 до 16 элементов, из которых 12 являются идентификационными фрагментами ДНК, а сочетания остальных элементов характеризируют популяцию или форму на нуклеотидном уровне.

6. Способ по п.1, отличающийся тем, что используют четыре штрих-кода для характеристики рода, четыре - для характеристики вида, от 1 до 4 - для характеристики популяции или формы, как при сочетании идентификационных последовательностей ДНК разного размера, так и сочетаний небольшой протяженности делеций, дупликаций и однонуклеотидных замен.

7. Способ по п.1, отличающийся тем, что в штрих-коде помимо традиционных обозначений родовых идентификационных фрагментов ДНК толстой линией, видовых - линией средней толщины, полиморфных фрагментов - тонкой линией, а изменения в структуре нуклеотидной последовательности обозначают пунктирной линией.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии, в частности к способам получения трансгенных форм картофеля in vitro сорта Скороплодный, устойчивых к абиотическим и биотическим стрессам.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу оценки степени пленчатости зерна генотипа ячменя по сравнению со степенью пленчатости других генотипов ячменя одного года репродукции, включающий взятие навески сухого зерна каждого генотипа, помещение ее в жидкость, выдерживание навески зерна в этой жидкости в течение определенного времени, извлечение навески и повторное взвешивание.
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой питательную среду для укоренения побегов яблони и груши in vitro. .

Изобретение относится к способу получения растений-регенерантов ириса мечевидного (I.ensata Thunb.) in vitro. .

Изобретение относится к способу скрининга популяции растений листовых овощей на присутствие особей, обнаруживающих пониженную чувствительность к этилену и физиологическим нарушениям, в частности к Бурой Пятнистости и Пожелтению по сравнению с контрольным растением.
Изобретение относится к области сельского хозяйства и может быть использовано для оценки качества зерна генотипов ячменя пивоваренного направления. .

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в сельском хозяйстве в области растениеводства на открытом грунте и в сооружениях защищенного грунта.

Изобретение относится к биотехнологии. .

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу создания трансгенных линий растений, продуцирующих белок с высоким уровнем экспрессии, включающему трансформацию растений экспрессирующим вектором, включающим плазмиду, содержащую ген, кодирующий β-глюкуронидазу, 35S промотор, nos терминатор транскрипции. При этом выше промотора гена встраивают терминатор транскрипции, обладающий способностью эффективно обрывать геномные транскрипты в растительном геноме и эффективно защищать экспрессию трансгена в геноме растения от последующих репрессий. Изобретение позволяет создавать трансгенные линии растений, продуцирующие белок с высоким уровнем экспрессии. 1 ил., 3 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области физиологии растений. Изобретение представляет собой способ оценки устойчивости растений к засолению почвы. При реализации способа проводят фиксацию корней 3- и 6-дневных проростков тестируемых растений и приготовление препаратов мацерированных клеток. Осуществляют иммунофлуоресцентное окрашивание препарата антителами к белку, формирующему микротрубочки цитоскелета, с последующим микроскопическим анализом окрашенного препарата и сравнением препарата с контрольным образцом. О солеустойчивости сельскохозяйственного растения судят по нарушению параллельности ориентации кортикальных пучков микротрубочек цитоскелета 6-дневных образцов относительно ориентации кортикальных микротрубочек цитоскелета 3-дневных образцов. Изобретение позволяет оценить устойчивость растений к засолению почвы. 6 з.п. ф-лы.
(57) Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии. Листовые экспланты, вычлененные из тридцатидневных асептических растений исходных сортов, выращенных в сосудах 1 л, помещают в чашки Петри с жидкой средой определенного состава и прединкубируют, кокультивируют и культивируют на питательных средах определенного состава. При появлении регенерантов размером не менее 10 мм их срезают и переносят на среду определенного состава. Проводят первый этап отбора форм, устойчивых к возбудителям фитофтороза и альтернариоза, путем культивирования срезанных регенерантов на среде МС с 50 мл/л канамицина сульфата в течение 30-45 дней при 22-25°C и освещенности 6000-10000 лк при 16-часовом фотопериоде с последующим отбором укоренившихся регенерантов картофеля с зелеными листьями и стеблями. Проводят второй этап отбора форм, устойчивых к возбудитялям фитофтороза и альтернариоза, включающий проверку укоренившихся растений методом ПЦР на наличие целевой ДНК и размножение регенерантов с подтвержденной ПЦР вставкой целевой ДНК микрочеренкованием. Использование заявленного способа позволяет получить устойчивые к возбудителям фитофтороза и альтернариоза формы картофеля. 5 табл.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к растению, обладающему повышенной устойчивостью к AHAS-ингибирующему гербициду, включающему, по крайней мере, одну Shiloh-8 IMI нуклеиновую кислоту, его части, растительной клетке и семени. Описана нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид, обеспечивающий увеличение гербицидной устойчивости растения. Раскрыты экспрессионная кассета и растительный вектор трансформации, включающие указанную нуклеиновую кислоту. Описаны способы контроля сорняков, произрастающих поблизости растения, обладающего повышенной устойчивостью к AHAS-ингибирующему гербициду. Раскрыт способ получения растения, имеющего повышенную устойчивость к AHAS-ингибирующему гербициду, а также способ повышения активности AHAS в растении. Описан способ отбора клетки, трансформированной вектором, содержащим IMI нуклеиновую кислоту. Также раскрыты способ повышения устойчивости к AHAS-ингибирующему гербициду, а также способ борьбы с нежелательной растительностью, включающий обработку AHAS-ингибирующим гербицидом. Изобретение позволяет получить растение, устойчивое к AHAS-ингибирующему гербициду, что позволяет эффективно бороться с сорняками, произрастающими поблизости от него. 28 н. и 29 з.п. ф-лы, 3 ил., 5 табл., 3 пр.

Изобретение относится к сельскому хозяйству и биотехнологии. Изобретение представляет собой способ экспресс-определения параметров симбиотического взаимодействия арбускулярной микоризы и растения. Предложенный способ позволяет проводить оценку микоризации корней растений намного точнее и быстрее, что будет использовано при экспресс-определении параметров симбиоза арбускулярной микоризы - симбиотической эффективности грибов арбускулярной микоризы, входящих в состав биопрепаратов-усилителей роста растений, а также индексов микоризации. 5 з.п. ф-лы, 4 ил., 4 табл., 4 пр.

Изобретение относится к генетике и репродуктивной биологии растений. Изобретение представляет собой способ получения восстановителей мужской фертильности сорго, несущих гены-восстановители фертильности (Rf) для стерильных цитоплазм типов М35-1А и 9Е, включающий опыление ЦМС-линий пыльцой доноров генов Rf, выделение фертильных форм в потомстве гибрида, несущего гены Rf, оценку их восстановительной способности в тест-кроссах с ЦМС-линиями, где выделение фертильных форм и оценку их восстановительной способности в тест-кроссах с ЦМС-линиями осуществляют путем устройства искусственных стабильных селективных фонов: («засушника»), используемого для выделения фертильных форм и оценки их восстановительной способности в тест-кроссах с ЦМС-линиями, и «влажника», устраиваемого для сравнительной оценки выделенных фертильных форм, причем селективные фоны устраивают в период формирования генеративной сферы у растений-доноров генов Rf, гибридов F1, их самоопыленного потомства и тест-кроссов на протяжении числа вегетации, достаточного для достижения практически приемлемой восстановительной способности восстановителя мужской фертильности в тест-кроссе. Изобретение позволяет отбирать формы (растения), несущие гены-восстановители мужской фертильности для ЦМС-индуцирующих цитоплазм сорго типов М35-1А, 9Е, генетически близких между собой. 1 ил., 6 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу получения лилий, содержащих в лепестках делфинидин. При этом способ включает введение в лилии гена флавоноид-3′,5′-гидроксилазы (F3′5′H) из колокольчиков, введение фрагмента гена флавоноид-3′-гидроксилазы (F3′H) из лилий, введение фрагмента гена дигидрофлавонол 4-редуктазы (DFR) из лилий, синтез делфинидина в результате деятельности введенного гена F3′5′H, с подавлением при этом экспрессии эндогенного гена F3′H, который участвует в синтезе цианидина в лепестках лилий, и получение лилий, которые содержат дельфинидин в лепестках. Изобретение позволяет эффективно получать лилии, содержащие в лепестках делфинидин. 4 з.п. ф-лы, 3 ил., 6 табл., 8 пр.
Наверх