Способ моделирования молниеносного сепсиса, вызванного микстинфекцией на фоне ожоговой травмы


 


Владельцы патента RU 2507601:

Сахаров Сергей Павлович (RU)

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения патогенетического механизма развития молниеносного сепсиса с целью поиска новых патогенетических и этиотропных методов лечения сепсиса. Модель молниеносного сепсиса вызывают микстинфекцией на фоне ожоговой травмы. Для этого кроликам, под наркозом, наносят термический ожог площадью 12-23% площади поверхности тела путем погружения спины и боковой поверхности туловища в воду при температуре 90° на 10 секунд. Затем подкожно вводят 1,0 мл некультурабельной культуры Staphylococcus aureus в концентрации 105 микробных клеток в 1 мл. Через 60 минут вводят некультурабельную культуру Pseudomonas aeruginosa подкожно также в объеме 1,0 мл с концентрацией 105 микробных клеток в 1 мл. Способ позволяет изучить влияние некультурабельной микстинфекции на развитие инфекционного процесса, вызванного в восприимчивом организме, а также разработать новые методы лабораторной диагностики, лечения и профилактики молниеносного сепсиса в условиях циркуляции некультурабельных бактерий. 2 табл., 2 пр.

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для эпидемического расследования вспышек инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи, и изучения патогенетического механизма развития молниеносного сепсиса с целью поиска новых патогенетических и этиотропных методов лечения сепсиса.

Термин «сепсис» предложил Гиппократ более двух тысяч лет назад, подразумевая под этим понятием распад тканей, неизбежно сопровождающийся гниением, болезнью и смертью. В настоящее время сепсис по-прежнему остается одной из самых актуальных проблем современной медицины в силу неуклонной тенденции к росту заболеваемости и стабильно высокой летальностью [Краснов М.В., Краснов В.М. Сепсис у детей раннего возраста: современные критерии диагноза и принципы лечения. / Клиническая микробиология и антимикробная терапия // 2010, №1 (40). - С.28-39]. Сепсис является частой причиной летальности в отделениях реанимации и интенсивной терапии. Бактериальные инфекции наиболее часто становятся причиной септического шока. В США ежегодно диагностируют 300-500 тыс. случаев сепсиса, и несмотря на возрастающие возможности интенсивной терапии у пациентов с септическим шоком летальность достигает 60%. [Белобородов В.Б. Актуальные вопросы диагностики и лечения сепсиса. http//old.consilium-medicum.com/media/consilium/mdex.shtmlj. По данным Т.Г. Спиридоновой с соавт. у пациентов с глубокими ожогами летальность при сепсисе составляет 57,1% [Спиридонова Т.Г., Смирнов С. В., Лазарева Е.Б., Евдокимова Н.В., Меньшикова Е.Д. Особенности бактериемии и сепсиса у больных с термической травмой /Неотложная медицина. - 2011, №1. www.criticaLru/emergency/hage.php?what=articles&chapter=20111.

Основным возбудителем сепсиса является Pseudomonas aeruginosa. Микроб обильно обсеменяет медицинское оборудование, циркулирует среди персонала и пациентов, вызывает до 20% внутрибольничных инфекций, треть всех поражений мочеполовой системы у урологических больных и считается причиной 20-25% гнойно-хирургических инфекций и первичных грамотрицательных бактериемий; часто инфекция наблюдается у больных с ожогами и заболеваниями мочевого пузыря, а резервуарами возбудителя могут быть самые различные объекты (например, сырые овощи, букеты цветов) [Медицинская микробиология /Ред. В.И. Покровский, О.К. Поздеев. - М.: ГЭОТАР, МЕДИЦИНА, 1998. - 1200 с.].

М.Т. Абидов с соавт. предложили способ моделирования грамположительного стафилококкового сепсиса [патент RU №2058598 от 20.04.1996]. Для моделирования сепсиса автор предложил использовать препарат аминофталгидрозид, подавляющий бактерицидную активность нейтрофильных гранулоцитов. Препарат использован при внутривенном введении. На фоне этого препарата вводили внутривенно культуру культивируемого стафилококка в высокой концентрации (108 степени), обычно выделяемой только в лабораторных условиях. Такие условия возникновения сепсиса практически не наблюдаются в клинической практике. Прежде всего, больные не получают препараты, снижающие бактерицидную активность сывороток крови, а внутривенное проникновение микробов в такой концентрации (108 степени) практически не наблюдается у пациентов. Предложенная экспериментальная модель может быть использована только для проведения научно-исследовательских работ. Кроме того, в практическом здравоохранении чаще сепсис вызывает микстинфекция.

Предложен способ моделирования грамотрицательного сальмонеллезного сепсиса [патент RU №2058599 от 20.04.1996 г.]. Способ не позволяет моделировать молниеносный сепсис. Созданная модель позволяет на 4 сутки установить клиническую картину развития сальмонеллезного сепсиса. Для стимуляции возникновения сепсиса авторы использовали аминофталгидрозид, искусственное введение которого подавляет функционально-метаболическую активность нейтрофильных гранулоцитов и макрофагов. Данный препарат больным не вводят и поэтому механизм возникновения сепсиса в эксперименте отличается от заболеваний, возникающих в естественных условиях. Недостатками предложенного способа являются воспроизведение моноинфекции и использование неадекватно большой инфицирующей дозы для кроликов (0,5.109 микробных клеток). Инфицирование пациентов в больничных помещениях в такой дозе обычно не происходит.

Предложен способ моделирования молниеносного сепсиса у крыс в результате перфорации слепой кишки с летальным исходом 92% случаев [Lundblad R. et al. Granulocyte colony-stimulating factor improves myelopoiesis and host defense in fulminant intra-abdominal sepsis in rats //Shock. 1995 Jul; 4 (1): 68-73, реф.]. Сепсис вызван различными бактериями желудочно-кишечного тракта. Одним из недостатков предложенного способа является то, что не установлена этиология возбудителей, вызывающих сепсис, а следовательно, нельзя провести этиотропное лечение больных. Кроме того, предложенный способ мойсет быть использован только для разработки способов лечения пациентов, а не для выявления в ЛПУ циркуляции возбудителей инфекционных заболеваний, вызывающих сепсис.

Наиболее близким техническим решением, выбранный нами в качестве прототипа, является способ моделирования молниеносного сепсиса, вызванного Pseudomonas aeruginosa [Ridings, Р.С et al. Beneficial cardiopulmonary effects of pentoxifylline in experimental sepsis are lost once septic shock is established. // Arch Surg., 1994. - Nov; 129 (11): 1144-52, реф.]. Недостатками предложенного способа является: 1. Использование высокой концентрации синегнойной палочки (5.108 микробных клеток в 1 мл); 2. Для воспроизведения молниеносного сепсиса использована моноинфекция, вызванная синегнойной палочкой; 3. Для воспроизведения экспериментальной модели использована культурабельная форма синегнойной палочки. Как известно, синегнойная палочка относится к биопленкообразующим бактериям и поэтому чаще находится в некультурабельном состоянии.

Задачей настоящего изобретения является разработка простого способа создания экспериментальной модели молниеносного сепсиса, вызванного микстинфекцией в условиях максимально приближенных к естественному инфицированию больных в стационарах.

Технический результат - простой, не требующий больших материальных затрат способ, основанный на инфицировании лабораторных животных некультурабельными бактериями Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa на фоне ожоговой травмы. Для инфицирования животных использована концентрация бактерий, которая обычно определялась на поверхности ран у больных с ожоговой болезнью.

Технический результат достигается тем, что согласно изобретению кроликам наносят термический ожог под наркозом площадью 12-23% площади поверхности тела путем погружения спины и боковой поверхности туловища в воду при температуре 90° на 10 с, затем подкожно вводят 1,0 мл некультурабельной культуры Staphylococcus aureus в концентрации 103 микробных клеток в 1 мл и через 60 мин вводят некультурабельную культуру Pseudomonas aeruginosa подкожно также в объеме 1,0 мл с концентрацией 105 микробных клеток в 1 мл.

На 1-3 сутки у животных отмечались клинические признаки молниеносного сепсиса и летальный исход при явлениях септического шока.

Сущность способа достигается тем, что ожоговая травма через механизм стресса и нарушение иммунологической реактивности организма, а также в результате интоксикации, связанной с повреждением тканей, вызывает переход некультурабельных бактерий Р. aeruginosa в культивируемое состояние с выделением ферментов агрессии и повышением проницаемости тканей. В результате этого возникает микстинфекция, вызванная некультурабельным стафилококком, культурабельными синегнойной и кишечной палочками. Escherichia coli проникает в кровь в результате пареза тонкого кишечника и инфицирует различные органы и ткани организма. Вышеперечисленные факторы вызывают развитие молниеносного септического шока.

Тяжесть эндогенной интоксикации при сепсисе определяется массивностью поступления в кровоток продуктов распада тканей. При нарушении барьерной антитоксической функции печени в сыворотке крови возрастает концентрация микроэлементов с переменной валентностью, к которым относится двухвалентное железо. Являясь активаторами перекисного окисления липидов, ферроионы истощают резервы антиоксидантной защиты организма, что приводит к гиперактивации процессов перекисного окисления липидов, возрастанию в системном кровотоке средне- и низкомолекулярных пептидов, прогрессированию эндогенной интоксикации и осложнению сепсиса полиорганной недостаточностью и инфекционно-токсическим шоком.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом: кролика помещают в клетку в соответствии с требованиями санитарных правил (Утв. Главным Государственным санитарным врачом №1045-73) на 3 дня карантина для адаптации кроликов к новым клеткам в эксперименте Животных содержат в виварии при температуре воздуха 24-26°С в соответствии с приказом МЗ РФ №267 от 19.06.2003 и требованиями Европейской конвенции (Страсбург, 1986) по содержанию, кормлению и уходу за подопытными животными, выводу их из эксперимента и последующей утилизации. У кролика удаляли волосяной покров со спины и боковой поверхности туловища площадью 25% поверхности тела.

Наркоз осуществляли по методике предложенной А.В. Разиной [Разина А.В. Влияние различных вариантов общей анестезии и операционной травмы на организм кроликов. Автореф. канд. дисс.. Троицк. - 2010]. Премедикацию проводили 2% раствором ксилазина гидрохлорида (рометара) в дозе 5,0 мг/кг, а на его фоне внутримышечно вводили 5% раствор золетина в дозе 7,5 мг/кг массы тела кролика соответственно. У кроликов регистрировалось состояние общей анестезии достаточной по глубине и продолжительности для воспроизведения экспериментальной ожоговой травмы.

Поверхность спины и боковые поверхности туловища кролика погружали в водяную баню на 10 с при температуре 90°С. На ожоговую поверхность накладывали стерильную асептическую марлевую повязку и подкожно кролику вводили 1,0 мл некультурабельных бактериЙ S. aureus в концентрации 105 микробных клеток в 1 мл, а затем через 60 мин некультурабельную культуру P.aeruginosa в концентрации 1,0 мл 105 микробных клеток в 1 мл. Некультурабельные бактерии получали по методике, предложенной Л.Б. Козловым с соавт. [Патент RU №2470074 от 20.12.2012 г. Способ выделения некультивируемых бактерий стафилококка]. Клинические проявления микстинфекции регистрировали в течение 21 дня.

Примеры практического использования предлагаемого способа

Пример 1.

Кролика породы «шиншилла» помещали в клетку в соответствии с требованиями санитарных правил (Утв. Главным Государственным санитарным врачом №1045-73) на 3 дня карантина для адаптации кролика к новой клетке в эксперименте. Кролика содержали в виварии при температуре воздуха 24-26°С в соответствии с приказом МЗ РФ №267 от 19.06.2003 и требованиями Европейской конвенции (Страсбург, 1986) по содержанию, кормлению и уходу за подопытными животными, выводу их из эксперимента и последующей утилизации. Со спины и боковой поверхности тела кролика удаляли волосяной покров.

Наркоз осуществляли по следующей методике: Премедикацию проводили 2% раствором ксилазина гидрохлорида (рометара) в дозе 5,0 мг/кг, а на его фоне внутримышечно вводили 5% раствор золетина в дозе 7,5 мг/кг массы тела кролика соответственно. Затем погружали очищенную от шерсти поверхность в водяную баню на 10 с при температуре 90°С. На ожоговую поверхность накладывали стерильную асептическую марлевую повязку и подкожно кролику вводили 1,0 мл некультурабельные бактерии S. aureus в концентрации 105 микробных клеток в 1 мл и через 60 мин 1,0 мл некультурабельную культуру P. aeruginosa в концентрации 103 микробных клеток в 1 мл. Некультурабельные бактерии получали по методике предложенной Л.Б. Козловым с соавт. [Патент RU №2470074 от 20.12.2012 г.]. Через сутки у кролика регистрировались клинические симптомы сепсиса, а через 52 часа кролик погиб в результате микстинфекции, вызванной культурабельными синегнойной и кишечной палочками и некультурабельным S. aureus. При вскрытии животного площадь глубокого ожога составила 13,0% площади поверхности тела кролика.

Используя культуральные методы выделить S. aureus не удалось (посев на мясо-пептонный, молочно-солевой, желточно-солевой и кровяной агар).

Синегнойная палочка выделялась из всех органов вскрытого животного, а кишечная палочка выделялась только из сердца. Для выделения культурабельных бактерий P. aeruginosa проводили посев на селективную среду ЦПХ-агар, 5% кровяной агар и агар Эндо. Идентификацию бактерий проводили на основании изучения культуральных и морфологических свойств бактерий, пигментообразованию, способности образовывать цитохромоксидазу, росту на среде Кинг А, среде Хью-Лейфсена и ацетамидном агаре, способности роста при 42°С и отсутствии роста при 5°С.

Е. coli выделяли на среде Эндо при температуре 37°С. Через 18-24 ч инкубации в термостате с этой среды отбирали красные лактозоположительные колонии эшерихий и агглютинировали их на стекле с поливалентной ОК-сывороткой, содержащей антитела к 22 сероварам энтеропатогенных кишечных палочек (ЭПКП). При положительной реакции агглютинации колонии пересевали на скошенный агар и на следующие сутки выделенную культуру агглютинировали с поливалентными сыворотками. На заключительном этапе серологической идентификации ЭПКП ставили развернутую реакцию агглютинации со специфическими сыворотками. При положительной развернутой реакции агглютинации выделенной культуры проводили посев на среды Гисса для изучения ее сахаролитических и протеолитических свойств.

Пример 2

Кролика породы «шиншилла» помещали в клетку в соответствии с требованиями санитарных правил (Утв. Главным Государственным санитарным врачом №1045-73) на 3 дня карантина для адаптации кролика к новой клетке в эксперименте. Кролика содержали в виварии при температуре воздуха 24-26°С в соответствии с приказом МЗ РФ №267 от 19.06.2003 и требованиями Европейской конвенции (Страсбург, 1986) по содержанию, кормлению и уходу за подопытными животными, выводу их из эксперимента и последующей утилизации.

Со спины и боковой поверхности тела кролика удаляли волосяной покров. Наркоз осуществляли по следующей методике: Премедикацию проводили 2% раствором ксилазина гидрохлорида (рометара) в дозе 5,0 мг/кг, а на его фоне внутримышечно вводили 5% раствор золетина в дозе 7,5 мг/кг массы тела кролика соответственно. Затем погружали очищенную от шерсти поверхность кролика в водяную баню на 10 с при температуре 90°С. На ожоговую поверхность накладывали стерильную асептическую марлевую повязку и подкожно кролику вводили 1,0 мл некультурабельные бактерии S.aureus в концентрации 103 микробных клеток в 1 мл и через 60 мин 1,0 мл некультурабельную культуру P. aeruginosa в концентрации 105 микробных клеток в 1 мл. Некультурабельные бактерии выделяли по методике предложенной Л.Б. Козловым с соавт. [Патент RU №2470074 от 20.12.2012 г.]. В первые же сутки у кролика регистрировались клинические симптомы сепсиса и через 17 часов кролик погиб в результате микстинфекции, вызванной культурабельными бакатериями P. aeruginosa и некультурабельным S. aureus. Площадь ожога составила 15,38% площади поверхности тела. Культурабельные культуры S. aureus и E. coli из крови и внутренних органов выделить не удалось. Выделение и идентификацию синегнойной палочки, золотистого стафилококка и кишечной палочки проводили по описанным выше методикам.

Предложенный способ апробирован на базе ООО Научно-производственного инновационного предприятия «Тюменский институт микробиологических технологий». Под наблюдением находилось 16 кроликов породы «шиншилла». Результаты исследований представлены в таблице 1. Установлено, что молниеносный токический сепсис с летальным исходом возникал через 17-52 часа после микстинфекции, вызванной некультурабельными бактериями S. aureus и P. aeruginosa на фоне ожоговой болезни. Клинические проявления болезни регистрировались у экспериметальных животных в 100%, а летальный исход - в 87,5% случаев. Оценка положительного эффекта применения предложенной экспериментальной модели по сравнению с прототипом представлена в таблице 2.

Способ моделирования молниеносного сепсиса, вызванного некультурабельными бактериями P. aeruginosa и S. aureus открывает новые возможности расследования эпидемических вспышек инфекционных заболеваний, связанных с оказанием медицинской помощи, в этиологии которых ведущую роль играют культурабельные и некультурабельные бактерии, а также позволяет проводить исследования по испытанию эффективного патогенетического и этиотропного лечения больных с молниеносным сепсисом, возникшим на фоне ожоговой травмы.

Таблица 2
п/п №№ Отличительные признаки способа Прототип Предложенный способ
1 Вид микробов, вызывающих сепсис P. aeruginosa S. aureus, P. aeruginosa, E. coli
2 Культурабельность бактерий Культурабельные Некультурабельные и культурабельные
3 Срок клинического проявления сепсиса (в часах) 5 28,7±2,8
4 Количество вводимой дозы бактерий в 1 мл взвеси 5.108 105
5 Вид лабораторных животных свиньи Кролики
6 Научная новизна изобретения Патент характеризует общий уровень развития техники Опыт с некультурабельными бактериями открывает новое направление в эпидемиологии, диагностике, лечении и профилактике инфекционных заболеваний
Таблица 1
Характеристика инфекционного процесса у кроликов, вызванного введением некультурабельных штаммов S. aureus и. P. aeruginosa на фоне ожоговой травмы (n=14)
№ кро
лика
Масса тела кролика до эксперимента (в граммах) Масса тела кролика при вскрытии (в граммах) Площадь глубокого ожога (в %) Средняя суточная потеря массы тела (в граммах) Срок летальности (в часах) Выделе из органов кролика при вскрытии
P. aeruginosa E. coli
1 2600 2500 12,66 100.0 39 + -
2 2300 2230 15,38 70,0 17 + -
4 3600 3525 17,77 75,0 18 + -
5 2100 2025 14,68 75,0 21 + -
6 2600 2500 22,85 100,0 49 + -
7 2560 2500 17,15 60,0 20 + -
8 2100 2045 16,66 55,0 18 + -
9 3150 3075 13,51 75,0 22 + -
10 3750 3660 17,77 90,0 36 + +
12 2700 2605 20,0 95,0 48 + +
13 3700 3630 12,45 70,0 22 + -
14 2600 2535 17,15 65,0 21 + -
15 2660 2600 16,58 60,0 19 + -
16 3300 3200 13,0 100,0 52 + +
2837,14±129,92 2759,28±128,74 16,32±0,81 77,86±3,54 28,71±2,76 100% 21,4%
Примечание:
В таблицу не включены кролики под номерами 3 и 11 с площадью ожога 14,1% и 14,7% соответственно в связи с тем, что животные прожили в течение 21 дня.

Способ моделирования молниеносного сепсиса, вызванного микстинфекцией на фоне ожоговой травмы отличающийся тем, что кроликам наносят термический ожог под наркозом площадью 12-23% площади поверхности тела путем погружения спины и боковой поверхности туловища в воду при температуре 90° на 10 с, затем подкожно вводят 1,0 мл некультурабельной культуры Staphylococcus aureus в концентрации 105 микробных клеток в 1 мл и через 60 мин вводят некультурабельную культуру Pseudomonas aeruginosa подкожно также в объеме 1,0 мл с концентрацией 105 микробных клеток в 1 мл.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, стоматологии и патофизиологии. Моделирование инфицированной раны слизистой оболочки полости рта проводят на внутренней поверхности нижней губы животного по средней линии.

Изобретение относится к медицине, а именно к способам профилактики развития опухолей у экспериментальных животных с высокой частотой спонтанного опухолеобразования.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции ишемии кожного лоскута на питающей ножке. Для этого лабораторным животным моделируют кожный лоскут на вторые сутки эксперимента.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и хирургии, и может быть использовано для коррекции ишемии скелетной мышцы. Для этого лабораторным животным на вторые сутки эксперимента моделируют ишемию мышц голени.
Изобретение относится к экспериментальной фармакологии и хирургии и может быть использовано для коррекции ишемии скелетной мышцы. Для этого крысам моделируют ишемию мышц голени на вторые сутки проводимого эксперимента.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных. Способ включает воспроизведение модели гестоза у крыс линии Wistar ежедневным в течение 7 дней внутрибрюшинным введением L-нитроаргининметилового эфира в дозе 25 мг/кг.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для изучения механизмов коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной кардиологии, и может быть использовано для изучения вопросов патогенеза нефрогенной артериальной гипертензии и для скрининговых и детальных фармакологических исследований.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии. Для выявления психотропных свойств изучаемых веществ осуществляют моделирование эмоционально-физической стрессовой ситуации, достигаемой помещением животных в цилиндр с холодной водой.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования мелкоочаговых мозговых геморрагий у новорожденных крыс. Для этого новорожденных крыс в возрасте 3-х дней помещают в камеру и подвергают воздействию звука силой 70 дБ, частотой 110 Гц, на протяжении 60 минут.
Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к токсикологии. Исследуют поведение потомства белых крыс, подвергшихся воздействию токсического вещества, с помощью теста «открытое поле». Регистрируют количество актов «обнюхивание», «локомоции», «движения на месте». Рассчитывают прогностический индекс по формуле: Р=1/(1+е-у), где Р - прогностический индекс - вероятность наличия генетических изменений; е - математическая константа, равная 2,72; у - регрессионное уравнение: у=7,04-0,65Х|+1,45Х2-0,64Х3, где цифровые показатели - константы и регрессионные коэффициенты; Х1 - количество актов «обнюхивание»; Х2 - количество актов «локомоции»; Х3 - количество актов «движение на месте». При Р больше 0 и меньше 0,5 вероятность наличия генетических изменений определяют как минимальную, при Р больше 0,5 и меньше 1, вероятность генетических изменений оценивают как высокую. Способ расширяет арсенал методов оценки генетических нарушений у экспериментальных животных. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к устройствам для дисперсного анализа радиоактивных аэрозолей, а также к средствам обучения в медицине, оно предназначено для моделирования фракционного осаждения аэрозольных частиц в отделах респираторного тракта человека. Импактор-фантом респираторного тракта человека содержит каскадные элементы, расположенные в пробоотборной корзине, размещенной в корпусе, к верхней части которого посредством резьбового соединения присоединен штуцер. Каждый каскадный элемент, кроме последнего, состоит из сопельной пластины 4, 8, 12, 16, 20, 24, с сопельными отверстиями, коллекторной пластины 6, 10, 14, 18, 22, 26 с нанесенным на ее поверхность вязким веществом и разделительного кольца 7, 9, 15, 17, 19, 25, 27, в качестве последнего каскадного элемента используется фильтр 28. Семь каскадных элементов установлены с возможностью осуществления инерционного осаждения аэрозолей для моделирования фракционного осаждения аэрозолей в отделах респираторного тракта человека. Коллекторные пластины 6, 10, 14, 18, 22, 26 выполнены с возможностью обеспечить инерционное осаждение размерной фракции аэрозолей, осаждающейся в разных частях дыхательных путей. Технический результат состоит в обеспечении оценки распределения дозы внутреннего облучения по тканям и органам респираторного тракта человека при ингаляционном поступлении радиоактивных аэрозолей. 2 з.п. ф-лы, 6 ил., 2 табл.

Изобретение относится к экспериментальной медицине. Иссекают кожу до поверхностной фасции в виде круга диаметром 20 мм, после чего по краям раны накладывают кисетный шов. Формируют кожно-фасциальные узловые швы. На поверхности дна раны рассекают поверхностную фасцию перпендикулярными разрезами с образованием ячеек размерами 5×5 мм. Способ позволяет моделировать трофические раны с воспроизведением условий локальной гипоксии и нарушения микроциркуляции. 1 ил., 1 пр.

Изобретение относится к области использования растительных объектов для контроля токсического эффекта нескольких лекарственных препаратов. Способ включает комплексную оценку морфофизиологических нарушений, наблюдаемых в фитотестах. Тестируют каждый препарат отдельно, а также их жидкие смеси в различной концентрации. Морфофизиологические нарушения выявляют на семенах кресс-салата (Lepidium sativum). При этом показателями морфофизиологических нарушений служат снижение всхожести семян, снижение средней общей длины проростков и изменение среднего сухого веса проростков. После статистической обработки результатов прогнозируют возможный токсический эффект смеси лекарственных препаратов, что позволяет проводить предварительный, перед клиническими испытаниями, скрининг лекарственных препаратов. 6 пр., 6 табл., 1 ил.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для изучения средств, предназначенных для коррекции ишемии. Для этого лабораторным животным моделируют кожный лоскут на вторые сутки эксперимента. Ресвератрол вводят внутрижелудочно в суточной дозе 2,0 мг/кг с первых суток эксперимента каждые 46 часов. Способ, являясь нетоксичным с минимальным числом противопоказаний, обеспечивает увеличение выживаемости кожного лоскута в условиях редуцированного кровообращения за счет активации процесса прекондиционирования. 1 табл., 1 пр.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования иммунозависимого невынашивания беременности для изучения иммунологии и иммунопатологии беременности, оценки эффективности доклинических испытаний способов лечения и профилактики невынашивания беременности иммунной этиологии. Способ включает введение самкам лабораторных мышей N-ацетил-β-1-О-гептилмурамил-L-аланил-D-изоглутамина внутрибрюшинно в дозе 20 мкг в 0,1 мл 0,9% раствора NaCl на 1 животное. Введение осуществляют на 5-е сутки беременности в период имплантации бластоцисты и на 7-е сутки в начале периода плацентации. Способ обеспечивает высокий уровень резорбции эмбрионов, высокую воспроизводимость модели и возможность использования как линейных, так и нелинейных животных. 3 пр., 3 табл.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и касается способов управляемого снижения агрегационной активности тромбоцитов in vitro. Для этого в плазму, содержащую 200-220 тыс./мкл тромбоцитов, непосредственно после ее получения, вводят мексидол. При этом мексидол используют в концентрации от 0,1 до 0,8 мг/мл инкубационной смеси. Инкубацию проводят в течение 10-15 минут при комнатной температуре. Способ обеспечивает агрегационную активность тромбоцитов до необходимой экспериментатору величины.

Изобретение относится к экспериментальной медицине. Формируют сплошной свободный полнослойный кожный лоскут размером 1,5 см у крысы. Иссекают фасцию, покрывающую раневую поверхность, с обнажением подлежащей мышцы на прежнем ложе. Фиксируют по противолежащим краям лоскут к краю кожи. Сшивают между собой свободные края кожи. Через 8-9 суток разъединяют и разводят в стороны сросшиеся над лоскутом края кожи. Способ обеспечивает оптимальные условия приживления кожного лоскута, позволяет достигнуть полного контакта с подлежащими тканями, улучшения развития микроциркуляторного русла, без применения медикаментозных средств, стимулирующих ангиогенез. 1 пр. 9 ил.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции ишемии в условиях редуцированного кровообращения. Для этого лабораторным животным моделируют кожный лоскут на вторые сутки эксперимента. L-норвалин вводят внутрижелудочно в суточной дозе 10,0 мг/кг с первых суток эксперимента каждые 46 часов эксперимента. Способ обеспечивает увеличение выживаемости кожного лоскута в условиях редуцированного кровообращения за счет активации процесса прекондиционирования фармакологическим препаратом. 1 табл.
Изобретение относится к судебной медицине и может быть использовано для определения давности наступления смерти по морфологическим изменениям гнилостно измененных спаек. Для этого при судебно-медицинском исследовании трупа производят забор спаек и участка мышечной ткани брюшной стенки из места прикрепления спайки. Затем с образцов этих тканей получают гистологические срезы, которые окрашивают гематоксилином и эозином, трихромом по Масону и Зербино. Далее проводят микроскопическое исследование окрашенных срезов. Если в срезах определяют потерю клеточного состава в окраске гематоксилином и эозином, при сохранении окраски мышечных клеток по Зербино и окрашивании коллагеновых и ретикулярных волокон в окраске трихромом по Масону, то устанавливают давность наступления смерти от 7 до 10 суток. Если исследуемые ткани дополнительно теряют способность к окрашиванию мышечных клеток по Зербино, то устанавливают давность наступления смерти в период с 10 до 14 суток. Если в срезах не окрашиваются ретикулярные волокна, при сохранении окраски коллагеновых волокон трихромом по Масону, то устанавливают давность наступления смерти свыше 14 суток. Способ повышает точность определения давности наступления смерти до 14 суток посмертного периода.
Наверх