Способ моделирования иммунозависимого невынашивания аллогенной беременности у лабораторных мышей


 


Владельцы патента RU 2511107:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "НИИ морфологии человека" Российской академии медицинских наук (RU)

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования иммунозависимого невынашивания беременности для изучения иммунологии и иммунопатологии беременности, оценки эффективности доклинических испытаний способов лечения и профилактики невынашивания беременности иммунной этиологии. Способ включает введение самкам лабораторных мышей N-ацетил-β-1-О-гептилмурамил-L-аланил-D-изоглутамина внутрибрюшинно в дозе 20 мкг в 0,1 мл 0,9% раствора NaCl на 1 животное. Введение осуществляют на 5-е сутки беременности в период имплантации бластоцисты и на 7-е сутки в начале периода плацентации. Способ обеспечивает высокий уровень резорбции эмбрионов, высокую воспроизводимость модели и возможность использования как линейных, так и нелинейных животных. 3 пр., 3 табл.

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к способам моделирования иммунозависимого невынашивания беременности у человека на лабораторных животных. Областью применения изобретения являются фундаментальные исследования в области иммунологии беременности и доклиническая оценка средств и методов профилактики и терапии невынашивания беременности иммунной этиологии.

Для изучения патогенеза репродуктивных потерь, разработки новых эффективных диагностических, профилактических и терапевтических мер, направленных на сохранение беременности, широко используют экспериментальные модели невынашивания беременности in vivo. При этом исследования часто выполняются на мышах, которые обладают типом строения плаценты и маточно-плацентарной области, характером материнского и плодного кровообращения, близкими к таковым у человека. Существуют сингенные и аллогенные модели индуцированных абортов у мышей [17]. Наиболее адекватно привычное невынашивание беременности неустановленной этиологии воспроизводит мышиная модель, в условиях которой при скрещивании различающихся по антигенам главного комплекса гистосовместимости самок линии CBA/J (Н-2k) с самцами линии DBA/2 (Н-2d) наблюдается частота эмбриональных потерь от 10 до 30% в отсутствие экзогенных абортогенных факторов [11, 13]. Недостатком модели является невысокий уровень резорбции эмбрионов, а также связь невынашивания беременности с биологическими особенностями данных линий мышей, затрудняющих экстраполяцию данных на патологию человека.

Наиболее близким к заявленному является способ моделирования абортов при аллогенной беременности у лабораторных животных, вызванных введением самкам липополисахарида (ЛПС) - компонента стенки грамотрицательных бактерий [10, 12]. Недостатком модели является то, что ЛПС вызывает активацию иммунной системы, приводящую к развитию системного воспалительного ответа с вовлечением множественных патогенетических механизмов, приводящих к нарушению функций ряда систем организма - эндокринной, сердечно-сосудистой, дыхательной, выделительной, пищеварительной. Поэтому ЛПС-индуцированные аборты у мышей не являются вполне адекватной моделью для исследования иммунологических механизмов невынашивания.

Задача изобретения - получение воспроизводимого иммуноопосредованного невынашивания аллогенной беременности с высокой частотой резорбции эмбрионов у линейных и нелинейных лабораторных мышей.

Заявленный способ моделирования иммунозависимого невынашивания аллогенной беременности заключается во введении самкам мышей гликозида мурамилдипептида - N-ацетил-β-1-О-гептилмурамил-L-аланил-D-изоглутамина (С7МДП), внутрибрюшинно в дозе 20 мкг в 0,1 мл 0,9% раствора NaCl на 1 животное (1 мг/кг) в период завершения имплантации бластоцисты (5-е сутки беременности) и в начале периода плацентации (7-е сутки беременности). Выбранная доза С7МДП соответствует ED50, определенной в предварительной серии экспериментов на септических моделях in vivo [4, 5]. Выбор вводимого вещества обусловлен тем, что мурамилдипептид является компонентом пептидогликана клеточной стенки бактерий и известен как эффективный модификатор биологических реакций [3], а β-гликозилирование - как один из доказанных вариантов увеличения иммуномодулирующей активности молекулы МДП [1, 2, 8]. Гликозиды МДП, в частности С7МДП, обладают способностью направлять дифференцировку Т-хелперов в сторону Th1-клеток и тем самым стимулировать клеточные иммунные реакции [7, 15] и продукцию провоспалительных цитокинов: интерферона-γ (ИФН-γ), фактора некроза опухоли (ФНО) и интерлейкина-1 (ИЛ-1) [6, 9]. С другой стороны С7МДП усиливает продукцию цитокинов ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-10, связанных с гуморальным (Th2) типом иммунного ответа [9], характерным для нормально протекающей беременности [17]. Абортогенный эффект Th1 цитокинов при аллогенной беременности доказан введением самкам СВА×DBA/2 высоких доз ИФН-γ и/или ФНО-α [11], ИЛ-12 [16]. Однако концентрация Тh1 цитокинов, достаточная для реализации противоопухолевого и противоинфекционного эффектов С7МДП на моделях опухолевого роста и сепсиса у мышей-самцов C57BL/6 [3, 4, 5, 8], может не достигать уровней, вызывающих аборты (резорбцию эмбрионов) у беременных самок. Таким образом, плейотропные эффекты С7МДП в отношении продукции Th1 и Th2 позволяют предположить как толерогенное, так и абортогенное действие при аллогенной беременности у нелинейных самок и самок СВА. Кратность и сроки введения препарата были выбраны для обеспечения длительного повышения уровня цитокинов, являющихся короткоживущими молекулами из-за непродолжительности времени синтеза и высокой скорости выведения, в период от завершения имплантации бластоцисты до начала формирования плаценты, чтобы исключить возможность негативного влияния С7МДП на процесс имплантации и/или плацентации.

Для оценки эффективности заявленного способа провели исследование уровня эмбриональных потерь у линейных мышей с высоким уровнем спонтанных абортов.

Пример 1. Влияние С7МДП на уровень эмбриональных потерь при аллогенной беременности у линейных мышей с высоким уровнем спонтанных абортов (♀CBA/J×♂DBA/2).

Для исследования влияния С7МДП на частоту резорбции использовали 8-10-недельных мышей инбредных линий CBA/J (самки) и DBA/2 (самцы), с массой тела 23-25 г, полученных из филиала «Столбовая» Научного центра биомедицинских технологий РАМН. Животных содержали в стандартных условиях вивария НИИ морфологии человека РАМН. Эксперименты начинали после 2-недельной адаптации мышей к условиям вивария и осуществляли в соответствии с правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных, утвержденными приказом Минздрава СССР №577 от 12 августа 1977 г. Самок и самцов ссаживали в соотношении 3:1, день появления копулятивной пробки обозначали как 1-й день беременности. Наступление беременности верифицировали по нарастанию уровня прогестерона в сыворотке крови, полученной из хвостовой вены на 5-й день предполагаемой беременности, методом иммуноферментного анализа с использованием набора реагентов для иммуноферментного определения прогестерона в сыворотке крови «Прогестерон-ИФА» (фирма Хема-Медика, Россия). С7МДП вводили внутрибрюшинно на 5-е и 7-е сутки беременности в дозе 20 мкг в 0,1 мл 0,9% раствора NaCl на 1 животное (≈1 мг/кг). Беременным самкам контрольных групп внутрибрюшинно вводили по 0,1 мл 0,9% раствора NaCl в том же режиме. Животных выводили из эксперимента на 14-е сутки беременности и определяли частоту резорбции эмбрионов по формуле: число резорбированных эмбрионов/(число резорбированных+число живых эмбрионов)×100% [13]. Результаты представляли в виде среднего±стандартное отклонение. Межгрупповые сравнения проводили с использованием z-критерия с коррекцией Йейтса, различия считали значимыми при p<0,05. Данные проанализированы с помощью программы «Sigma Stat 3.5» (Systat Software, Inc.).

Использование заявленного способа позволило увеличить частоту резорбции эмбрионов с 31,7±5,32% до 50,0±6,54% и продемонстрировало высокую воспроизводимость (табл.1).

Таблица 1
Экспериментальные группы Число резорбированных эмбрионов/общее число эмбрионов Частота резорбции, % М±m
1. Контрольная ♀CBA/J×♂DBA/2 (n=6) 13/41 31,7±5,32
2. Опытная ♀CBA/J×♂DBA/2+С7МДП (n=6) 17/34 50,0±6,54

Повышение частоты резорбции данным способом придает известной модели спонтанного аборта у мышей CBA/J×DBA/2 максимальную чувствительность для оценки разнонаправленных воздействий на иммунозависимое невынашивание беременности. Это очень важно с позиции сокращения времени исследования и числа экспериментальных животных, используемых для решения практических задач и проверки научных гипотез, связанных с разработкой подходов к предотвращению/лечению спонтанных абортов и с изучением безопасности средств и методов, которые предполагается использовать во время беременности.

Для оценки эффективности заявленного способа моделирования иммунологического невынашивания аллогенной беременности у линейных животных с нормальной фертильностью было проведено исследование на мышах линий СВА и Balb/c.

Пример 2. Влияние С7МДП на уровень эмбриональных потерь при аллогенной беременности у линейных мышей с нормальной фертильностью (♀CBA/J×♂BALB/c).

Для исследования влияния С7МДП на частоту резорбции использовали 8-10-недельных мышей инбредных линий CBA/J (самки) и BALB/c (самцы), с массой тела 23-25 г, полученных из филиала «Столбовая» Научного центра биомедицинских технологий РАМН. Животных содержали в стандартных условиях вивария НИИ морфологии человека РАМН. При внутрибрюшинном введении на 5-е и 7-е сутки беременности 0,9% раствора NaCl показатели резорбции эмбрионов на 14-й день гестации у самок CBA/J, оплодотворенных самцами BALB/c, составил 16,2±3,96% (табл.2). Двукратное внутрибрюшинное введение С7МДП приводило к резорбции эмбрионов у всех животных опытной группы и статистически значимо увеличивало частоту резорбции эмбрионов в условиях фертильного контроля CBA/J×BALB/c до 45,4±6,31%.

Таблица 2
Экспериментальные группы Число резорбированных эмбрионов / общее число эмбрионов Частота резорбции, % М±m Достоверность различий
1. ♀CBA/J×♂BALB/c (n=7) 6/37 16,2±3,96
P1-2=0,017
2. ♀CBA/J×♂BALB/с +С7МДП (n=5) 15/33 45,4±6,31

Достигнутый благодаря применению С7МДП высокий уровень резорбции эмбрионов при фертильном сочетании у мышей CBA/J×BALB/c указывает на высокую эффективность данной модели.

Одной из трудностей использования моделей различных патологических процессов на линейных животных является сложность экстраполяции полученных результатов на человека, обусловленная физиологическими особенностями линий животных, в первую очередь особенностями функционирования иммунной системы. В связи с этим для расширения применимости модели и приближения ее к патологии беременности у человека было проведено моделирование невынашивания беременности у нелинейных лабораторных мышей.

Пример 3. Влияние С7МДП на уровень эмбриональных потерь при аллогенной беременности у нелинейных мышей.

В работе использовали 8-10-недельных самок F1, полученных от скрещивания ♀CBA/J×♂DBA/2, оплодотворенных самцами F1, полученных от скрещивания ♀CBA/J×♂BALB/c. Потомство F1 было получено в виварии ФГБУ «НИИ морфологи человека» РАМН. Количество животных в контрольной и экспериментальной группах - 5.

У животных контрольной группы резорбции эмбрионов на 14-й день беременности не наблюдали (табл.3). Двукратное введение С7МДП на 5-е и 7-е сутки беременности вызывало резорбцию эмбрионов у 100% животных, уровень которой варьировал от 12,5% до 37,5%, составляя в среднем 27,78±10,94%, что статистически значимо превышало показатель контрольной группы.

Таблица 3
Экспериментальные группы Число резорбированных эмбрионов/ общее число эмбрионов Частота резорбции, % M±m Достоверность различий
1. ♀F1CBA×DBA×♂F1 CBA×BALB/c (n=5) 0/42 0% Р1-2=0,036
2. ♀F1CBA×DBA×♂F1 CBA×BALB/c+С7МДП (n=5) 6/22 27,78±10,94%

Известно, что частота репродуктивных потерь при нормальной беременности у мышей составляет менее 10% и обусловлена элиминацией эмбрионов с хромосомными аномалиями [10, 14]. Следовательно, увеличение частоты резорбции после введения иммуномодулятора С7МДП нелинейным беременным самкам обусловлено иммунологическими причинами.

Техническим результатом заявленного решения является достижение высокого уровня резорбции эмбрионов у линейных и нелинейных мышей с нормальной фертильностью, а также повышение частоты резорбции эмбрионов у мышей со спонтанными абортами при 100%-ной воспроизводимости модели.

Литература

1. Земляков А.Е., Цикалов В.В., Калюжин О.В., Курьянов В.О., Чирва В.Я. Гликозиды N-ацетилмурамоил-L-аланил-D-изоглутамина. Влияние конфигурации гликозидного центра и природы агликона на биологическую активность // Биоорганическая химия. - 2003. - Т.29. - №3. - С.316-322.

2. Калюжин О.В. Иммуномодулирующая активность гликозидных производных N-ацетилмурамил-L-аланил-D-изоглутамина // Вестник новых медицинских технологий. - 2003. - Т.10. - №1-2. - С.28-32.

3. Калюжин О.В. Производные мурамилдипептида в эксперименте и клинике // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1998. - №1. - С.104-108.

4. Калюжин О.В., Калина Н.Г., Баштаненко А.Ф., Шкалев М.В., Кузовлев Ф.Н., Калюжин В.В. Стимуляция резистентности мышей к бактериальной инфекции гликозидами мурамилдипептида // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2003. - Т.135. - №5. - С.531-535.

5. Калюжин О.В., Калюжин В.В., Земляков А.Е., Елкина С.И., Шкалев М.В., Сергеев В.В. Стимуляция неспецифической резистентности мышей β-гептилгликозид-мурамилдипептидом // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1999. - Т.127. - №5. - С.543-545.

6. Калюжин О.В., Нелюбов М.В., Калюжина Е.В., Кузовлев Ф.Н., Шкалев М.В. Влияние конфигурации гликозидной связи и структуры агликона гликозидов мурамилдипептида на их способность стимулировать продукцию интерлейкина-1 и фактора некроза опухоли макрофагами // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2002. - Т.134. - №9. - С.326-328.

7. Калюжин О.В., Фукс Б.Б., Бовин Н.В., Земляков А.Е., Чирва В.Я. Иммуномодулирующая активность новых производных мурамилдипептида in vitro // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1994. - Т.117. - №5. - С.510-513.

8. Караулов А.В. Калюжин О.В., Земляков А.Е. Биологическая активность гликозидных производных N-ацетилмурамил-L-аланил-D-изоглутамина // Российский биотерапевтический журнал. - 2002. - Т.1. - №1. - С.14-24.

9. Михайлова Л.П., Макарова О.В., Калюжин О.В., Трунова Г.В., Диатроптов М.Е., Серебряков С.Н. Влияние глимурида на продукцию цитокинов спленоцитами мышей C57BL/6 и BALB/c // Иммунология. - 2004. - Т.25. - №3. - С.152-154.

10. Chaouat G., Menu Е., Clark D.A. et al. Control of fetal survival in CBA x DBA/2 mice by lymphokine therapy // J. Reprod. Fertil. - 1990. - Vol.89 (2). - P.447-458.

11. Clark D.A., Chaouat G., Arck P.C. et al. Cutting Edge: Cytokine-dependent abortion in CBA x DBA/2 mice is mediated by the procoagulant fgl2 prothrombinase // J. Immunology. - 1998. - Vol.160. - P.545-549.

12. Clark D.A. Manuel J. Lee L. et al. Ecology of danger-dependent cytokine-boosted spontaneous abortion in the СВА x DBA/2 mouse model. I. Synergistic effect of LPS and (TNF-alpha+IFN-gamma) on pregnancy loss // Am. J. Reprod. Immunol. - 2004. - Vol.52 (6). - P.370-378).

13. Du M.-R., Dong L., Zhou W.-H. et al. Cyclosporin A improves pregnancy outcome by promoting functions of trophoblasts and inducing maternal tolerance to the allogeneic fetus in abortion-prone matings in the mouse // Biol. Reproduction. - 2007. - Vol.76. - P.906-914.

14. Girardi G. Yarilin D., Thurman J. M. et al. Complement activation induces dysregulation of angiogenic factors and causes fetal rejection and growth restriction // JEM. - 2006. - Vol.203 (9). - P.2165-2175.

15. Kalyuzhin O.V., Zemlyakov A.E. & Fucks B.B. Distinctive immunomodulating properties and interactivity with model membranes and cells of two homologous muramyl dipeptide derivatives // Int. J. Immunopharmacol. - 1996. - Vol.18 (11). - P.651-659.

16. Knackstedt M.K., Zenclussen A.C., Hertwig K. et al. Th1 cytokines and the prothrombinase fgl2 in stress-triggered and inflammatory abortion // Am. J. Reprod. Immunol. - 2003. - Vol.49 (4). - P.210-220.

17. Kwak-Kim J., Park J. Ch., Kyong H. et al. Immunological modes of pregnancy loss // Am. J. Reprod. Immunol. - 2010. - Vol.63 (6). - P.611 - 623.

Способ моделирования иммунозависимого невынашивания аллогенной беременности у лабораторных мышей, заключающийся введением самкам мышей N-ацетил-β-1-О-гептилмурамил-L-аланил-D-изоглутамина внутрибрюшинно в дозе 20 мкг в 0,1 мл 0,9% раствора NaCl на 1 животное (≈1 мг/кг) внутрибрюшинно на 5-е сутки беременности в период имплантации бластоцисты и на 7-е сутки беременности в начале периода плацентации.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для изучения средств, предназначенных для коррекции ишемии.

Изобретение относится к области использования растительных объектов для контроля токсического эффекта нескольких лекарственных препаратов. Способ включает комплексную оценку морфофизиологических нарушений, наблюдаемых в фитотестах.

Изобретение относится к экспериментальной медицине. Иссекают кожу до поверхностной фасции в виде круга диаметром 20 мм, после чего по краям раны накладывают кисетный шов.

Изобретение относится к устройствам для дисперсного анализа радиоактивных аэрозолей, а также к средствам обучения в медицине, оно предназначено для моделирования фракционного осаждения аэрозольных частиц в отделах респираторного тракта человека.
Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к токсикологии. Исследуют поведение потомства белых крыс, подвергшихся воздействию токсического вещества, с помощью теста «открытое поле».
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения патогенетического механизма развития молниеносного сепсиса с целью поиска новых патогенетических и этиотропных методов лечения сепсиса.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, стоматологии и патофизиологии. Моделирование инфицированной раны слизистой оболочки полости рта проводят на внутренней поверхности нижней губы животного по средней линии.

Изобретение относится к медицине, а именно к способам профилактики развития опухолей у экспериментальных животных с высокой частотой спонтанного опухолеобразования.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции ишемии кожного лоскута на питающей ножке. Для этого лабораторным животным моделируют кожный лоскут на вторые сутки эксперимента.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и хирургии, и может быть использовано для коррекции ишемии скелетной мышцы. Для этого лабораторным животным на вторые сутки эксперимента моделируют ишемию мышц голени.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и касается способов управляемого снижения агрегационной активности тромбоцитов in vitro. Для этого в плазму, содержащую 200-220 тыс./мкл тромбоцитов, непосредственно после ее получения, вводят мексидол. При этом мексидол используют в концентрации от 0,1 до 0,8 мг/мл инкубационной смеси. Инкубацию проводят в течение 10-15 минут при комнатной температуре. Способ обеспечивает агрегационную активность тромбоцитов до необходимой экспериментатору величины.

Изобретение относится к экспериментальной медицине. Формируют сплошной свободный полнослойный кожный лоскут размером 1,5 см у крысы. Иссекают фасцию, покрывающую раневую поверхность, с обнажением подлежащей мышцы на прежнем ложе. Фиксируют по противолежащим краям лоскут к краю кожи. Сшивают между собой свободные края кожи. Через 8-9 суток разъединяют и разводят в стороны сросшиеся над лоскутом края кожи. Способ обеспечивает оптимальные условия приживления кожного лоскута, позволяет достигнуть полного контакта с подлежащими тканями, улучшения развития микроциркуляторного русла, без применения медикаментозных средств, стимулирующих ангиогенез. 1 пр. 9 ил.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции ишемии в условиях редуцированного кровообращения. Для этого лабораторным животным моделируют кожный лоскут на вторые сутки эксперимента. L-норвалин вводят внутрижелудочно в суточной дозе 10,0 мг/кг с первых суток эксперимента каждые 46 часов эксперимента. Способ обеспечивает увеличение выживаемости кожного лоскута в условиях редуцированного кровообращения за счет активации процесса прекондиционирования фармакологическим препаратом. 1 табл.
Изобретение относится к судебной медицине и может быть использовано для определения давности наступления смерти по морфологическим изменениям гнилостно измененных спаек. Для этого при судебно-медицинском исследовании трупа производят забор спаек и участка мышечной ткани брюшной стенки из места прикрепления спайки. Затем с образцов этих тканей получают гистологические срезы, которые окрашивают гематоксилином и эозином, трихромом по Масону и Зербино. Далее проводят микроскопическое исследование окрашенных срезов. Если в срезах определяют потерю клеточного состава в окраске гематоксилином и эозином, при сохранении окраски мышечных клеток по Зербино и окрашивании коллагеновых и ретикулярных волокон в окраске трихромом по Масону, то устанавливают давность наступления смерти от 7 до 10 суток. Если исследуемые ткани дополнительно теряют способность к окрашиванию мышечных клеток по Зербино, то устанавливают давность наступления смерти в период с 10 до 14 суток. Если в срезах не окрашиваются ретикулярные волокна, при сохранении окраски коллагеновых волокон трихромом по Масону, то устанавливают давность наступления смерти свыше 14 суток. Способ повышает точность определения давности наступления смерти до 14 суток посмертного периода.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается разработки способов лечения невынашивания беременности и других заболеваний матки, связанных с несостоятельностью эндометрия. Для этого в экспериментальных условиях в стенку матки крысы, находящейся в состоянии псевдобеременности, вводят суспензию, содержащую 300 тысяч стволовых клеток эндометрия, выделенных из менструальной крови женщины. Затем крысе проводят подкожное введение прогестерона в дозе 2 мг на грамм веса животного. Способ обеспечивает стимуляцию образования децидуальной оболочки эндометрия, при этом создавая модель управления децидуальной реакции при помощи трансплантации стволовых клеток, в т.ч. человеческого происхождения.2 табл.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано как способ моделирования первичного склерозирующего холангита. Для этого крысе вводят пикрилсульфоновую кислоту в просвет проксимального отдела слепой кишки в дозе 0,07-0,15 мг/кг и в сигмовидную кишку в дозе 0,02-0,05 мг/кг. Интервал между введениями составляет 45-60 минут. Способ обеспечивает воспроизведение комплекса клинических проявлений заболевания. 3 пр.
Изобретение относится к области медицины и ветеринарии и предназначено для повышения устойчивости организма к острой гипоксии в эксперименте. В первый, третий и пятый день тренировки лабораторному животному вводят амтизол в дозе 25 мг/кг. Во второй, четвертый и шестой день животным создают умеренную гипобарическую гипоксию путем «подъема на высоту 5000 метров» с экспозицией 60 минут. Способ позволяет увеличить продолжительность жизни животных при тяжелой гипобарической гипоксии как в период срочной, так и в период долгосрочной адаптации к гипоксии. 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины и биологии, а именно к проктологии, и может быть использовано для создания модели энкопреза. За неделю до операции по созданию энкопреза животным выпаивают в сутки не менее 40 мл раствора папаверина - 1 мл 2%-ного раствора папаверина в 100 мл физиологического раствора. За 3 суток до вмешательства лишают их твердой пищи, прекращают давать папаверин и выпаивают по 40 мл воды в сутки, готовя к операции, заключающейся в трапециевидном иссечении глубиной 1,5 см двух фрагментов мягких тканей анальной области размером по 15-17% окружности прямой кишки на 4 и 8 часах по «воображаемому циферблату» при возвращении животных на стандартную диету через 3 суток после операции. Способ обеспечивает создание устойчивого и наиболее близкого к распространенной в клинике состояния недержания кала.
Изобретение относится к экспериментальной фармакологии и хирургии и может быть использовано для коррекции ишемии скелетной мышцы. Для этого крысам с ишемией мышц голени, моделируемой на вторые сутки эксперимента, внутрижелудочно вводят ресвератрол в суточной дозе 2,0 мг/кг, каждые 46 часов первые 7 суток эксперимента. Уровень микроциркуляции в мышце голени оценивают на 28 сутки создания ишемии. Способ обеспечивает эффективное лечение ишемии скелетной мышцы в эксперименте за счет стимуляции неоангиогенеза. 1 пр., 1 табл.

Изобретение относится к экспериментальной медицине. Устройство содержит стартовый и рабочие отсеки, оснащенные кормушками для подачи жидкой пищи. Средства автоматизированной подачи пищи содержат компьютер, емкостной датчик, формирователь импульсов и соленоид. Средства автоматизированной регистрации содержат инфракрасные и тензометрические датчики, мостовую схему, многоканальный усилитель и регистратор. Кормушки выполнены в виде брусков с углублениями для пищи. Кормушка оснащена съемными вставками, содержащими пищевые углубления с меньшими размерами. Углубления кормушки снабжены съемными вкладышами, которые имитируют вид и количество закладываемой в углубления пищи. В стартовом и рабочих отсеках установлены инфракрасные датчики, в центральном углублении размещен емкостной датчик, а в углублениях кормушки - тензометрические датчики. Датчики последовательно соединены с многоканальным усилителем и регистратором, обеспечивающим регистрацию времени побежки к кормушкам и количества подаваемой и съеденной пищи. Компьютер с помощью средств автоматизированной подачи пищи обеспечивает изменение размера предъявляемой пищи и интервалов времени между отдельно подаваемыми порциями. Изобретение обеспечивает повышение точности и автоматизацию экспериментального тестирования. 3 ил.
Наверх