Способ получения комбинированного антибактериального препарата для лечения острых кишечных инфекций


 


Владельцы патента RU 2513204:

Федеральное Бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (RU)

Изобретение относится к медицине и биотехнологии и представляет собой способ получения комбинированного антибактериального средства для лечения острых кишечных инфекций. Изобретение заключается в получении биомассы биологического компонента, представляющего собой комплекс иммуноглобулинов или биомассу бифидобактерий, смешивании ее с субстанцией антибиотика в заданных соотношениях и отличается от известных аналогов тем, что перед смешиванием двух компонентов препарата измельчению подвергают только биологический компонент и измельчение осуществляют до наибольших значений максимальной насыпной плотности измельченного материала. Изобретение позволяет повысить антибактериальную активность комбинированного препарата, что приводит к сокращению сроков лечения острой кишечной инфекции. 1 з.п. ф-лы, 1 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине и биотехнологии и касается способа получения комбинированного антибактериального средства для лечения желудочно-кишечных заболеваний, преимущественно острых кишечных инфекций.

Известно средство, обладающее антибактериальной активностью, содержащее живую культуру ацидофильных лактобактерий в сочетании с комплексом сывороточных иммуноглобулинов, взятых в одинаковых весовых частях, при концентрации жизнеспособных микробных клеток 107-108 на массу 0,1 г и процентном соотношении компонентов в комплексе иммуноглобулина G:M:A, равном (55-60):(20-25):(15-20), для получения которого сухую микробную массу соединяют с сухой биомассой КИП в соотношении 1:1 и используют для приготовления оральной или ректальной формы (RU, патент 1779377 A1, A61K 35/74, 39/395, 07.12.1992).

Недостатком известного способа является то, что он не предусматривает измельчения действующих веществ, обеспечивающего повышение их антибактериальной активности.

Известна фармацевтическая композиция антибиотиков и пребиотиков (варианты) для профилактики и лечения дисбиозов в процессе антибактериальной терапии, приготовление которой предусматривает подготовку заданных количеств порошкообразных антибиотика с размером частиц от 20 до 200 мкм и пребиотика с размером частиц до 0,3 мм с гарантированной поставщиком степенью чистоты не менее 95%, подсушку до 2-3% влажности и смешивание в массовом соотношении от 1:1 до 1:100 соответственно, введение добавок против слеживания, ароматизаторов, вкусовых корректоров и снятие статических электрических зарядов (RU, патент 2325187 C1, A61K 45/06, 27.05.2008).

Недостатком этого способа получения фармацевтической композиции является отсутствие процесса помола действующих веществ с целью повышения их антибактериальной активности после высушивания, так как процесс подсушки композиции до 2-3% влажности обязательно приведет к агрегации частиц антибиотика и олигосахарида с соответствующей потерей их дисперсности, а следовательно, и активности.

Известен комплексный бактериальный препарат энтерацид П, получение которого включает следующие этапы: приготовление питательной среды для раздельного выращивания составляющих его культур, получение инокулята, приготовление посевного материала, накопление бактериальной массы, отделение бактериальной массы от культуральной жидкости, приготовление защитной среды, смешивание бактериальной массы с защитной средой, замораживание, сушка суспензии сублимацией, измельчение сухих порошков биомассы, смешивание культур-компонентов, стандартизация, упаковка, маркировка (RU, патент 2091075 C1, A61K 35/74, 27.09.1997).

Недостатком способа получения комплексного бактериального препарата является то, что измельчение сухих порошков биомассы осуществляют не до наибольших значений максимальной насыпной плотности этих порошков, что существенным образом снижает их активность.

Известен комплексный терапевтический препарат для ветеринарии «Биофеном», способ приготовления которого по одному из вариантов состоит в следующем: все компоненты по отдельности растирают в фарфоровой ступке и вносят в емкость из расчета на 1000 мл - фуракрилина (15-20) г, этакридина лактата (10-15) г, метилурацила (10-20) г, новокаина (5-10) г, куда добавляют до 1000 мл заменитель цельного молока и тщательно перемешивают миксером или шаровой мельницей; затем фасуют по 5 г (одна доза) во флаконы для медицинских препаратов объемом 20,0 мл и хранят его в сухом, закрытом от солнечного света помещении при 8-10°С (RU, патент 2053767 C1, A61K 31/00, 10.02.1996).

Недостатком способа получения комплексного терапевтического препарата «Биофеном», который можно рассматривать как прототип предлагаемого изобретения, является ненормируемая степень измельчения действующих веществ, которая может приводить к их инактивации.

В основу заявляемого изобретения положена задача разработки способа получения комбинированного антибактериального препарата для лечения острых кишечных инфекций, содержащего биологический компонент и антибиотик.

Задача решена тем, что перед смешиванием активных компонентов препарата: антибиотика и биологического компонента, измельчению подвергают только биологический компонент и осуществляют измельчение до наибольших значений максимальной насыпной плотности измельченного материала.

Техническим результатом заявляемого изобретения является повышение антибактериальной активности комбинированного препарата, которая проявляется в сокращении сроков лечения острой кишечной инфекции.

В результате проведенных нами исследований впервые показано, что измельчение биологического компонента при приготовлении комбинированного антибактериального препарата, причем до наибольших значений максимальной насыпной плотности, позволяет не только повысить антибактериальную активность биологического компонента за счет увеличения его контактирующей с патогенным агентом поверхности, но и обеспечивает требуемое содержание в лекарственной форме дозы лекарственного вещества и антибиотика, и биологического компонента, что, в свою очередь, приводит к повышению антибактериальной активности комбинированного препарата в целом и выражается в сокращении сроков лечения подопытных животных от острой кишечной инфекции.

Заявляемый способ получения комбинированного антибактериального препарата является новым и в литературе не описан.

Сущность изобретения поясняется на следующих примерах, показывающих повышение антибактериальной активности комбинированного препарата, которая проявляется в сокращении сроков лечения острой кишечной инфекции при реализации заявляемого способа.

Содержание в препаратах жизнеспособных анаэробных микроорганизмов Bifidobacterium bifidum определяли в жидких питательных средах методом предельных разведении. Биологическую активность препаратов иммуноглобулинов характеризовали антисальмонеллезной активностью (в титрах РПГА) по ФС 42-3347-97. Максимальную насыпную плотность измельченных порошков определяли в соответствии с рекомендациями (Макаров Ю.И. Аппараты для смешения сыпучих материалов. - М.: Машиностроение, 1973. - с.18-20).

Антибактериальную активность комбинированных препаратов, приготовленных по заявленному способу, проверяли при лечении острых кишечных инфекций у обезьян на базе ГУ НИИ медицинской приматологии РАМН (г.Сочи-Адлер).

Испытания разработанных препаратов проведены на обезьянах вида макак резус обоего пола разного возраста (1,3-18,3 лет) весом 2,5-10,0 кг, спонтанно болеющих ОКИ с выраженным диарейным синдромом.

Диарейный синдром - частый жидкий стул со зловонным запахом без патологической примеси от 6 до 8 раз в сутки, умеренная сниженная активность.

Всех животных вылавливали из групповых клеток и вольер и размещали в индивидуальных. Животных сравниваемых групп подбирали методом свободной выборки, которые были репрезентативны по возрасту, весу и полу. Животных содержали на брикетированных кормах, изготовляемых на брикетировочном заводе ГУ НИИ медицинской приматологии РАМН по рецептуре, разработанной фирмой "Альтрогге" для приматов.

Пример 1. Комплекс иммуноглобулинов получали в соответствии с патентом RU 2371200, А61К 39/395, С07К 16/06, 27.10.2009. Сублимированную биомассу иммуноглобулинов измельчали в электромагнитном аппарате до наибольших значений максимальной насыпной плотности измельченной биомассы (0,36 г/см3). Соотношение в ней фракций IgG:IgM:IgA составляло соответственно (56-60):(16-22):(21-24), а специфическая антисальмонеллезная активность - 1:320 в титрах РПГА.

Субстанцию офлоксацина (производитель NANJING FOREIGN ECONOMIC & TRADE DEVELOPMENT CO., LTD, CHINA) измельчению не подвергали. Содержание действующего вещества в субстанции составляло 99,4%.

Измельченную биомассу иммуноглобулинов и субстанцию офлоксацина смешивали в аппарате периодического действия СМ-30 в заданном соотношении и готовую смесь фасовали во флаконы ФО-1-10 таким образом, чтобы каждый флакон содержал 250 мг офлоксацина и 300 мг измельченной биомассы иммуноглобулинов.

В качестве препарата сравнения использовали смесь компонентов в тех же количествах, что и в заявленном препарате, но растертых в фарфоровой ступке в соответствии с прототипом.

Результаты испытаний представлены в таблице.

Пример 2. Комплекс иммуноглобулинов получали в соответствии с патентом RU 2371200, А61К 39/395, С07К 16/06, 27.10.2009. Сублимированную биомассу иммуноглобулинов измельчали в электромагнитном аппарате до наибольших значений максимальной насыпной плотности измельченной биомассы (0,36 г/см3). Соотношение в ней фракций IgG:IgM:IgA составляло соответственно (56-60):(16-22):(21-24), а специфическая антисальмонеллезная активность - 1:320 в титрах РПГА.

Субстанцию хлорамфеникола (производитель Northeast General Pharmaceutical Factory, China) измельчению не подвергали. Содержание действующего вещества в субстанции составляло 99,72%.

Измельченную биомассу иммуноглобулинов и субстанцию хлорамфеникола смешивали в аппарате периодического действия СМ-30 в заданном соотношении и готовую смесь фасовали в твердые желатиновые капсулы таким образом, чтобы каждая капсула содержала 300 мг хлорамфеникола и 120 мг измельченной биомассы иммуноглобулинов.

В качестве препарата сравнения использовали смесь компонентов в тех же количествах, что и в заявленном препарате, но растертых в фарфоровой ступке в соответствии с прототипом.

Результаты испытаний представлены в таблице.

Пример 3. Сухую биомассу Bifldobacterium bifidum 1 получали в соответствии с ВФС 42-3378-99 на бифидумбактерин сухой. Содержание жизнеспособных микроорганизмов в сухой биомассе составляло 2×109 КОЕ/г.Сублимированную биомассу бифидобактерий измельчали в электромагнитном аппарате до наибольших значений максимальной насыпной плотности измельченной биомассы (0,34 г/см3). Содержание жизнеспособных микроорганизмов в измельченной биомассе оставалось тем же, что и в сухой, и составляло 2×109 КОЕ/г.

Субстанцию офлоксацина (производитель NANJING FOREIGN ECONOMIC & TRADE DEVELOPMENT CO., LTD, CHINA) измельчению не подвергали. Содержание действующего вещества в субстанции составляло 99,4%.

Измельченную биомассу бифидобактерий и субстанцию офлоксацина смешивали в аппарате периодического действия СМ-30 в заданном соотношении и готовую смесь фасовали в твердые желатиновые капсулы №0 таким образом, чтобы каждая капсула содержала 200 мг офлоксацина и 200 мг измельченной биомассы бифидобактерий с содержанием КОЕ не ниже 2×107 КОЕ/г.

В качестве препарата сравнения использовали смесь компонентов в тех же количествах, что и в заявленном препарате, но растертых в фарфоровой ступке в соответствии с прототипом.

Результаты испытаний представлены в таблице.

Комбинированный препарат Средняя длительность клинических проявлений заболевания (дней)
офлоксацин + смесь иммуноглобулинов сравнения 6,3
заявленный 5,1
хлорамфеникол + сравнения 10,4
смесь иммуноглобулинов заявленный 9,2
офлоксацин + биомасса бифидобактерий сравнения 10,1
заявленный 9,1

Как следует из анализа представленных в таблице результатов исследований, терапевтической эффективности комбинированных антибактериальных препаратов, приготовленных по заявленному способу, измельчение биологических компонентов, входящих в состав этих препаратов, до наибольших значений максимальной насыпной плотности, а также отсутствие помола антибиотиков обеспечивает сокращение сроков лечения острых кишечных инфекций у испытуемых приматов в 1,1 раза по сравнению с препаратами сравнения. Следовательно заявляемый способ позволяет получать препарат с повышенной антибактериальной активностью.

1. Способ получения комбинированного антибактериального препарата для лечения острых кишечных инфекций, содержащего антибиотик и биологический компонент, представляющий собой комплекс иммуноглобулинов или биомассу бифидобактерий, предусматривающий получение биомассы биологического компонента, смешивание ее с субстанцией антибиотика в заданных соотношениях, отличающийся тем, что перед смешиванием двух компонентов препарата измельчению подвергают только биологический компонент и измельчение осуществляют до наибольших значений максимальной насыпной плотности измельченного материала.

2. Способ по п.1, при котором в качестве биологического компонента используется комплекс иммуноглобулинов или биомасса бифидобактерий с содержанием КОЕ не ниже 2×107 КОЕ/г.



 

Похожие патенты:

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и представляет собой гуманизированные синтетические аналоги (R6313/G2) вариабельных доменов моноклонального scFv антитела 6313/G2 к рецептору ангиотензина II типа 1, т.е.

Настоящая группа изобретений относится к области биотехнологии. Предложено гуманизированное анти-CD79b антитело и его антигенсвязывающий фрагмент, полученные из мышиного антитела MA79b и имеющие по существу аналогичную с ним аффинность связывания CD79b.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и медицины. Предложен способ профилактики или лечения воспалительного заболевания, включающего стадии получения антитела к NR10, имеющего NR10-нейтрализующую активность, и отбора антитела, подавляющего рост IL-31-зависимой клеточной линии, и введения этого антитела пациенту с воспалительным заболеванием, которое представляет собой атопический дерматит, хронический дерматит, ревматизм или остеоартрит.

Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Предложено моноклональное антитело и его антиген-связывающие части, которые специфически связывают C-концевую или центральную область фактора ингибирования миграции макрофагов (MIF).
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой терапевтическое средство для лечения ревматоидного артрита для приема в дозе 4 мг/кг/за 4 недели и более или в дозе, при которой в крови достигается эквивалентная концентрация антитела к рецептору интерлейкина-6 (антитела к IL-6R), включающее антитело к рецептору интерлейкина-6 (антитело к IL-6R).

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и касается лечения рассеянного склероза. Для этого вводятфармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100.

Настоящая группа изобретений относится к медицине, а именно к эндокринологии, и касается лечения диабета. Для этого вводят фармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к рецептору инсулин и активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложены моноклональные антитела, которые связываются с внеклеточным доменом рецепторной тирозинкиназы AXL и которые, по меньшей мере, частично ингибируют активность AXL, а также их антигенсвязывающие фрагменты.
Группа изобретений относится к области биотехнологии. Способ получения вакцины предусматривает скрещивание двух различных видов из 4: T.spiralis, T.nativa, T.pseudospiralis и T.britovi и отбор той линии, которая обладает более низкими патогенными и более высокими иммуногенными свойствами путем заражения личинками трихинелл мышей и контроля эмбриогенеза, затем через 1,5-2 месяца отделяют мышечную ткань зараженной мыши и выделяют инвазионные личинки, которые используют для повторного заражения дозой, составляющей 200-300 личинок, определяют степень заражения, а для изготовления вакцины используют ту линию трихинелл, заражение которой приводит к наиболее легкой форме заболевания мыши, а повторное заражение не приводит к заболеванию.

Настоящее изобретение относится к способам диагностики фиброза печени у субъекта, включающим определение уровней экспрессии плазминогена урокиназного типа, матричной металлопротеиназы 9 и β-2-микроглобулина, вычисление на их основании балльной оценки и постановку диагноза.

Группа изобретений относится к области битехнологии и медицины. Предложен полисахарид, выделенный из штамма Bifidobacterium infantis NCIMB 41003 и имеющий структуру [-β(1,3)-D-GalpNAc-β(1,4)-D-Glcp-]n, где данная дисахаридная единица повторяется n раз, что дает полисахарид с молекулярной массой более 100000 Да.

Изобретение относится к композициям, предназначенным для младенцев с низкой массой тела при рождении. Пробиотическая композиция, предназначенная для достижения полного энтерального питания у младенцев, имеющих массу тела при рождении не более 1500 г, содержит пробиотические штаммы, выбранные из вида Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus reuteri, Bifidobacterium longum или их смесей.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для нормализации (улучшения, восстановления, стимуляции) репродуктивной функции млекопитающих и, в частности человека.
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к применению штамма Lactococcus casei ВКПМ В-8730. Штамм Lactococcus casei ВКПМ В-8730 получен на доступных питательных средах и применяется в качестве бактериальной закваски при приготовлении кисломолочных продуктов.
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к применению штамма Enterococcus durans ВКПМ В-8731. Штамм Enterococcus durans ВКПМ В-8731 получен на доступных питательных средах и применяется в качестве бактериальной закваски при приготовлении кисломолочных продуктов.
Изобретение относится к медицине и ветеринарии. Способ получения аутопробиотика, содержащего живые бифидобактерии и лактобациллы, для восстановления микроэкологии кишечника человека и животных включает выделение живых бифидобактерий и лактобацилл из кишечника хозяина и использование их в виде аутомикроорганизмов, при этом бифидобактерии и лактобациллы выделяют одновременно в виде естественного комплекса индигенных микроорганизмов путем разведения содержимого толстой кишки хозяина жидкой средой с добавлением селективных компонентов, но не оказывающих ингибирующего действия на бифидобактерии и лактобациллы, добавления в него раствора разведенной слюны того же хозяина, культивирования смеси и последующего пересева на питательную среду для культивирования бифидобактерий и лактобацилл без добавления селективных агентов.

Группа изобретений относится к области микробиологии и биотехнологии. Предложены штаммы Lactobacillus crispatus ВКМ B-2727D, Lactobacillus gasseri BKM B-2728D и Lactobacillus plantarum ВКМ В-2731D, обладающие антагонистической активностью по отношению к патогенным и условно-патогенным микроорганизмам.
(57) Изобретение относится к области биотехнологии и предназначено для пермебиализации мембран первичных гепатоцитов. Способ включает обработку клеток печени пороформирующим гемолизином Hlyll Bacillus cereus, увеличивающим эффективность проникновения внутрь клеток низкомолекулярных веществ, при котором воздействуют на гепатоциты Hlyll из В.cereus в диапазоне концентраций 0,1-1 мкг/мл.
Изобретение относится к медицине и биотехнологии и касается антибактериального средства для лечения желудочно-кишечных заболеваний, преимущественно острых кишечных инфекций, в том числе неустановленной этиологии.
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к штамму Bacillus licheniformis BKM B-2712D. Штамм Bacillus licheniformis обладает антагонизмом по отношению к Salmonella typhi, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes и резистентностью к антибиотикам: стрептомицину и налидиксовой кислоте.

Изобретение относится к медицине и клеточной биотехнологии. Для получения биологически активной субстанции после электростимуляции куриных голов в режиме 100-120 В, силой тока 3-5 А в течение 3-5 секунд осуществляют забор и инкубацию крови.
Наверх