Способ трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута в эксперименте



Способ трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута в эксперименте
Способ трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута в эксперименте
Способ трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута в эксперименте
Способ трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута в эксперименте
Способ трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута в эксперименте
Способ трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута в эксперименте
Способ трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута в эксперименте
Способ трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута в эксперименте
Способ трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута в эксперименте

 


Владельцы патента RU 2513249:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный научный центр трансплантологии и искусственных органов имени академика В.И. Шумакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к экспериментальной медицине. Формируют сплошной свободный полнослойный кожный лоскут размером 1,5 см у крысы. Иссекают фасцию, покрывающую раневую поверхность, с обнажением подлежащей мышцы на прежнем ложе. Фиксируют по противолежащим краям лоскут к краю кожи. Сшивают между собой свободные края кожи. Через 8-9 суток разъединяют и разводят в стороны сросшиеся над лоскутом края кожи. Способ обеспечивает оптимальные условия приживления кожного лоскута, позволяет достигнуть полного контакта с подлежащими тканями, улучшения развития микроциркуляторного русла, без применения медикаментозных средств, стимулирующих ангиогенез. 1 пр. 9 ил.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной трансплантологии. Способ может быть использован в качестве модели аутотрансплантации кожного лоскута.

Принято считать, что трансплантация кожного лоскута у подопытных животных, в частности у крыс, могла бы служить удобной моделью для изучения в эксперименте ряда фундаментальных проблем трансплантологии. Выполнять эксперименты на крысах удобно, так как крысы являются выносливыми животными, хорошо переносят различные виды наркоза и манипуляций и поэтому при работе с ними результаты могут быть воспроизводимы и подвергнуты статистической обработке.

Для разработки и применения новых методов повышения эффективности приживления кожных аллотрансплантатов необходим способ, обеспечивающий в большинстве случаев надежное приживление аутотрансплантата кожи. Другими словами, оптимальная методика трансплантации кожного лоскута, разработанная на аутотрансплантатах, может быть перенесена на аллотрансплантацию кожных лоскутов. При этом исследователь сможет заниматься проблемами приживления чужеродного материала, абстрагируясь от техники трансплантации.

Из данных литературы следует, что приживление сплошных свободных полнослойных трансплантатов кожи у крыс, даже аутотрансплантатов, наступает далеко не всегда и достигает лишь 37,5-41,6% (А.А.Задорожный, С.И.Катаев, С.Ю.Штрыголь. Динамика кровотока в аутотрансплантатах кожи разных участков тела у крыс по данным лазерной допплеровской флоуметрии. Методология флоуметрии, Выпуск 5, 2001 г., стр.179-196). Невысокий процент приживления аутотрансплантатов кожи у крыс не позволяет использовать этих животных для моделирования аллотрансплантации кожи и осуществления объективной оценки эффективности приживления кожи по новым предлагаемым методам.

Определяющим условием успешного приживления полнослойных аутотрансплантатов кожи является восстановление в них адекватного питания (оксигенации и метаболизма) за счет быстрого восстановления микроциркуляции и последующего врастания новых сосудов из сосудистых сетей мышечно-фасциального ложа. Полноценность восстановления микроциркуляции в трансплантате кожи зависит, прежде всего, от надежной иммобилизации его к поверхности раневого ложа, способствующей капилляризации трансплантата (Радостина А.И., Мушенко Т., Меноте С. Состояние микроциркуляторного русла при ауто- и аллотрансплантации кожи у белых крыс. Сердечно-сосудистая система в клинике и эксперименте. Сборник научных трудов. Университет Дружбы Народов им. Патриса Лумумбы. - М., 1984, - С.93-95).

В качестве прототипа выбран способ трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута с размерами 2,5×2,5 см у крыс, включающий иммобилизацию трансплантата к раневой поверхности с помощью узловых швов, а также применение лейкопластыря в течение 5 дней и введение ретаболила, дополнительно индуцирующего анаболические процессы и капилляризацию трансплантата (А.А. Задорожный, С.Ю. Штрыголь, С.И. Катаев. Влияние ретаболила и аппликации лейкопластыря на приживление и объемный кровоток в аутотрансплантатах кожи разных участков тела у крыс. Методология флоуметрии, Выпуск 6, 2002 г. стр.131-142).

Метод позволяет повысить процент приживления полнослойных трансплантатов кожи с 41,6% до 66,6% при наложении узловых швов и до 87,5% при сочетанном применении швов, лейкопластыря и ретаболила.

Данный способ не обеспечивает стопроцентной приживаемости лоскута, так как не позволяет создать надежную фиксацию лоскута к раневой поверхности, восстановить адекватное питание в нем и требует дополнительного применения медикаментозных средств общего действия до и после трансплантации для стимуляции ангиогенеза.

Таким образом, на сегодняшний день надежный и воспроизводимый способ аутотрансплантации кожного лоскута крысам с максимально высоким процентом приживления (близким к 100%) без применения медикаментозных средств общего действия в экспериментальной трансплантологии отсутствует.

Задачей настоящего изобретения является создание воспроизводимого способа аутотрансплантации сплошного свободного полнослойного кожного лоскута у крыс, который может быть использован в качестве трансплантационной модели.

Технический результат, достигаемый при осуществлении изобретения, заключается в обеспечении надежного приживления кожного лоскута за счет создания условий адекватного диффузного питания тканей аутотрансплантата путем исключения пережатия его микрососудов и окружающих тканей при сохранении надежной фиксации в области ложа; а также в упрощении и удешевлении способа за счет исключения дополнительного применения медикаментозных средств общего действия, стимулирующих ангиогенез.

Нами эмпирически подобраны размеры трансплантата, а также предложена оригинальная двойная фиксация трансплантата в тканях, что позволяет, с одной стороны, обеспечить максимально полный контакт трансплантата с подлежащими тканями, а с другой стороны, улучшить диффузионное питание в нем на этапе развития микроциркуляторного русла и избежать ишемического повреждения - ведущего фактора отторжения.

Отсутствие необходимости применения фармпрепаратов не только упрощает и удешевляет способ, но и позволяет изучать истинное приживление аллотрансплантатов, влиять с помощью иммунофармакологических препаратов на толерантность организма к трансплантату.

Сущность изобретения заключается в следующем.

Для трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута в эксперименте формируют сплошной свободный полнослойный кожный лоскут у крысы. Размещают его на прежнем ложе и фиксируют в нем. При этом формируют кожный лоскут округлой формы с наибольшим размером 1,5 см. Иссекают фасцию, покрывающую раневую поверхность, с обнажением подлежащей мышцы или мышц. Фиксацию выполняют по противолежащим краям лоскута, захватывая край лоскута и край кожи, примыкающей к нему. Затем закрывают лоскут путем сшивания между собой свободных краев кожи, примыкающей к лоскуту. Через 8-9 суток разъединяют и разводят в стороны сросшиеся над лоскутом края кожи, обнажая его.

В частном случае кожный лоскут формируют на спине в области грудной клетки.

Фиксация каждого из противолежащих краев лоскута может быть выполнена в одной точке.

Фиксация противолежащих краев лоскута может быть выполнена путем наложения швов, которые снимают через 15-20 суток.

Перед закрытием лоскута его и рану орошают раствором антибиотика, в качестве раствора антибиотика используют 0,4% раствор гентамицина сульфата в физиологическом растворе.

Способ осуществляется следующим образом.

Обездвиживают и проводят общую анестезию животному - крысе. На спине в области грудной клетки удаляют волосяной покров выщипыванием и последующим сбриванием остатков волос безопасной бритвой, обрабатывают операционное поле 70% раствором этилового спирта.

Избегая сильного сдавливания, производят захват кожи зажимом, имеющим кольцеобразную форму бранш. Вырезают кожный лоскут скальпелем или лезвием безопасной бритвы, удерживаемым хирургическим зажимом, производя разрез по контуру бранш. Лоскут должен быть округлой формы с наибольшим размером (диаметром) 1,5 см.

Вырезанный кожный лоскут кладут на стерильный ватный диск, пропитанный 0,4% раствором гентамицина на физиологическом растворе. После остановки кровотечения в ране выделяют и иссекают фасцию спины, покрывающую раневую поверхность. Лоскут накладывают на обнаженные группы мышц. Фиксацию лоскута выполняют наложением швов по противолежащим краям, захватывая край кожи лоскута и край кожи, примыкающей к лоскуту. Затем закрывают лоскут путем сшивания между собой свободных краев кожи, примыкающей к нему. Перед закрытием лоскута его и рану орошают раствором антибиотика. В качестве раствора антибиотика используют 0,4% раствор гентамицина сульфата в физиологическом растворе.

После завершения операции на рану наносят мазь левомеколь, покрывают стерильной салфеткой и накладывают круговую повязку.

Через 8-9 суток повязку снимают. Снимают швы, разъединяют и разводят в стороны сросшиеся над кожным лоскутом края кожи, обнажая его.

Швы, фиксирующие местоположение кожного лоскута в двух противолежащих точках, снимают через 15-20 суток.

Для доказательства возможности реализации заявленного назначения и достижения указанного технического результата приводим следующие данные.

Предлагаемый способ трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута был испытан на 14 крысах породы Вистар и 5 крысах породы Август. Трансплантированный кожный лоскут прижился у всех 19 животных, участвовавших в эксперименте.

Пример

Обездвижили и провели общую анестезию крысе породы Вистар весом 410 г ветеринарным препаратом золетил, который вводили подкожно в дозе 12 мг. Для подавления агрессивного поведения животное предварительно наркотизировали этиловым эфиром в эксикаторе. Продолжительность анестезии составила 1 час 20 минут.

На фотографии 1 изображено операционное поле на спине в области грудной клетки. Его готовили путем удаления волосяного покрова выщипыванием и последующим сбриванием остатков волос безопасной бритвой. Обрабатывали операционное поле 70% раствором этилового спирта.

Фотографии 2, 3, 4 и 5 демонстрируют вырезание кожного лоскута и аутотрансплантацию, которые осуществляли следующим образом.

Избегая сильного сдавливания, произвели захват кожи зажимом, имеющим кольцеобразную форму бранш. Вырезали кожный лоскут скальпелем. Получили лоскут округлой формы с наибольшим размером 1,5 см. Вырезанный кожный лоскут поместили на стерильный ватный диск, пропитанный 0,4% раствором гентамицина на физиологическом растворе. После остановки кровотечения в ране иссекли фасцию спины, покрывающую раневую поверхность. Лоскут наложили на обнаженные группы мышц. Фиксацию лоскута выполнили наложением швов по противолежащим, наиболее удаленным друг от друга краям, захватывая край кожи лоскута и край кожи, примыкающий к лоскуту. Фиксацию каждого из противолежащих краев лоскута выполнили в одной точке. Затем закрыли лоскут путем сшивания между собой свободных краев кожи, примыкающих к нему. Перед закрытием лоскута его и рану орошали раствором антибиотика. В качестве раствора антибиотика использовали 0,4% раствор гентамицина сульфата в физиологическом растворе.

После завершения операции на рану нанесли мазь левомеколь, покрыли стерильной салфеткой и наложили круговую повязку.

Фотография 6 демонстрирует снятие повязки, которое производят через 8-9 суток после трансплантации.

На фотографии 7 изображены рана и кожный лоскут в ней после снятия швов, разъединения и разведения в стороны сросшихся над кожным лоскутом краев кожи через 8-9 суток после трансплантации.

Швы, фиксирующие местоположение кожного лоскута в двух противолежащих точках, сняли через 15-20 суток.

Фотографии 8а и 8б демонстрируют приживление аутотрансплантата кожи у двух крыс на 25 сутки после трансплантации.

Таким образом, способ позволяет достигнуть 100% приживления аутотрансплантата без дополнительного применения медикаментозных препаратов общего действия, ускоряющих ангиогенез.

Уменьшение площади трансплантата в условиях двойной фиксации позволяет достигнуть максимально полного контакта с подлежащими тканями и улучшения диффузионного питания на этапе развития микроциркуляторного русла в трансплантате и избежать его ишемического повреждения.

Отсутствие необходимости применения фармпрепаратов позволяет изучить истинное приживление аллотрансплантатов и влиять с помощью иммунофарм препаратов на толерантность организма к трансплантату.

1. Способ трансплантации сплошного свободного полнослойного аутологичного кожного лоскута в эксперименте, включающий формирование сплошного свободного полнослойного кожного лоскута у крысы, размещение его на прежнем ложе и фиксацию в нем, отличающийся тем, что формируют кожный лоскут округлой формы с наибольшим размером 1,5 см, иссекают фасцию, покрывающую раневую поверхность, с обнажением подлежащей мышцы или мышц, а фиксацию выполняют по противолежащим краям лоскута, захватывая край лоскута и край кожи, примыкающей к лоскуту; затем закрывают лоскут путем сшивания между собой свободных краев кожи, примыкающей к нему; через 8-9 суток разъединяют и разводят в стороны сросшиеся над лоскутом края кожи, обнажая его.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что кожный лоскут формируют на спине в области грудной клетки.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что фиксацию каждого из противолежащих краев лоскута выполняют в одной точке.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что фиксацию противолежащих краев лоскута выполняют путем наложения швов.

5. Способ по п.4, отличающийся тем, что швы, фиксирующие противолежащие края, снимают через 15-20 суток.

6. Способ по п.1, отличающийся тем, что перед закрытием лоскута его и рану орошают раствором антибиотика.

7. Способ по п.6, отличающийся тем, что в качестве раствора антибиотика используют 0,4% раствор гентамицина сульфата в физиологическом растворе.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и касается способов управляемого снижения агрегационной активности тромбоцитов in vitro.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования иммунозависимого невынашивания беременности для изучения иммунологии и иммунопатологии беременности, оценки эффективности доклинических испытаний способов лечения и профилактики невынашивания беременности иммунной этиологии.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для изучения средств, предназначенных для коррекции ишемии.

Изобретение относится к области использования растительных объектов для контроля токсического эффекта нескольких лекарственных препаратов. Способ включает комплексную оценку морфофизиологических нарушений, наблюдаемых в фитотестах.

Изобретение относится к экспериментальной медицине. Иссекают кожу до поверхностной фасции в виде круга диаметром 20 мм, после чего по краям раны накладывают кисетный шов.

Изобретение относится к устройствам для дисперсного анализа радиоактивных аэрозолей, а также к средствам обучения в медицине, оно предназначено для моделирования фракционного осаждения аэрозольных частиц в отделах респираторного тракта человека.
Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к токсикологии. Исследуют поведение потомства белых крыс, подвергшихся воздействию токсического вещества, с помощью теста «открытое поле».
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения патогенетического механизма развития молниеносного сепсиса с целью поиска новых патогенетических и этиотропных методов лечения сепсиса.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, стоматологии и патофизиологии. Моделирование инфицированной раны слизистой оболочки полости рта проводят на внутренней поверхности нижней губы животного по средней линии.

Изобретение относится к медицине, а именно к способам профилактики развития опухолей у экспериментальных животных с высокой частотой спонтанного опухолеобразования.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции ишемии в условиях редуцированного кровообращения. Для этого лабораторным животным моделируют кожный лоскут на вторые сутки эксперимента. L-норвалин вводят внутрижелудочно в суточной дозе 10,0 мг/кг с первых суток эксперимента каждые 46 часов эксперимента. Способ обеспечивает увеличение выживаемости кожного лоскута в условиях редуцированного кровообращения за счет активации процесса прекондиционирования фармакологическим препаратом. 1 табл.
Изобретение относится к судебной медицине и может быть использовано для определения давности наступления смерти по морфологическим изменениям гнилостно измененных спаек. Для этого при судебно-медицинском исследовании трупа производят забор спаек и участка мышечной ткани брюшной стенки из места прикрепления спайки. Затем с образцов этих тканей получают гистологические срезы, которые окрашивают гематоксилином и эозином, трихромом по Масону и Зербино. Далее проводят микроскопическое исследование окрашенных срезов. Если в срезах определяют потерю клеточного состава в окраске гематоксилином и эозином, при сохранении окраски мышечных клеток по Зербино и окрашивании коллагеновых и ретикулярных волокон в окраске трихромом по Масону, то устанавливают давность наступления смерти от 7 до 10 суток. Если исследуемые ткани дополнительно теряют способность к окрашиванию мышечных клеток по Зербино, то устанавливают давность наступления смерти в период с 10 до 14 суток. Если в срезах не окрашиваются ретикулярные волокна, при сохранении окраски коллагеновых волокон трихромом по Масону, то устанавливают давность наступления смерти свыше 14 суток. Способ повышает точность определения давности наступления смерти до 14 суток посмертного периода.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается разработки способов лечения невынашивания беременности и других заболеваний матки, связанных с несостоятельностью эндометрия. Для этого в экспериментальных условиях в стенку матки крысы, находящейся в состоянии псевдобеременности, вводят суспензию, содержащую 300 тысяч стволовых клеток эндометрия, выделенных из менструальной крови женщины. Затем крысе проводят подкожное введение прогестерона в дозе 2 мг на грамм веса животного. Способ обеспечивает стимуляцию образования децидуальной оболочки эндометрия, при этом создавая модель управления децидуальной реакции при помощи трансплантации стволовых клеток, в т.ч. человеческого происхождения.2 табл.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано как способ моделирования первичного склерозирующего холангита. Для этого крысе вводят пикрилсульфоновую кислоту в просвет проксимального отдела слепой кишки в дозе 0,07-0,15 мг/кг и в сигмовидную кишку в дозе 0,02-0,05 мг/кг. Интервал между введениями составляет 45-60 минут. Способ обеспечивает воспроизведение комплекса клинических проявлений заболевания. 3 пр.
Изобретение относится к области медицины и ветеринарии и предназначено для повышения устойчивости организма к острой гипоксии в эксперименте. В первый, третий и пятый день тренировки лабораторному животному вводят амтизол в дозе 25 мг/кг. Во второй, четвертый и шестой день животным создают умеренную гипобарическую гипоксию путем «подъема на высоту 5000 метров» с экспозицией 60 минут. Способ позволяет увеличить продолжительность жизни животных при тяжелой гипобарической гипоксии как в период срочной, так и в период долгосрочной адаптации к гипоксии. 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины и биологии, а именно к проктологии, и может быть использовано для создания модели энкопреза. За неделю до операции по созданию энкопреза животным выпаивают в сутки не менее 40 мл раствора папаверина - 1 мл 2%-ного раствора папаверина в 100 мл физиологического раствора. За 3 суток до вмешательства лишают их твердой пищи, прекращают давать папаверин и выпаивают по 40 мл воды в сутки, готовя к операции, заключающейся в трапециевидном иссечении глубиной 1,5 см двух фрагментов мягких тканей анальной области размером по 15-17% окружности прямой кишки на 4 и 8 часах по «воображаемому циферблату» при возвращении животных на стандартную диету через 3 суток после операции. Способ обеспечивает создание устойчивого и наиболее близкого к распространенной в клинике состояния недержания кала.
Изобретение относится к экспериментальной фармакологии и хирургии и может быть использовано для коррекции ишемии скелетной мышцы. Для этого крысам с ишемией мышц голени, моделируемой на вторые сутки эксперимента, внутрижелудочно вводят ресвератрол в суточной дозе 2,0 мг/кг, каждые 46 часов первые 7 суток эксперимента. Уровень микроциркуляции в мышце голени оценивают на 28 сутки создания ишемии. Способ обеспечивает эффективное лечение ишемии скелетной мышцы в эксперименте за счет стимуляции неоангиогенеза. 1 пр., 1 табл.

Изобретение относится к экспериментальной медицине. Устройство содержит стартовый и рабочие отсеки, оснащенные кормушками для подачи жидкой пищи. Средства автоматизированной подачи пищи содержат компьютер, емкостной датчик, формирователь импульсов и соленоид. Средства автоматизированной регистрации содержат инфракрасные и тензометрические датчики, мостовую схему, многоканальный усилитель и регистратор. Кормушки выполнены в виде брусков с углублениями для пищи. Кормушка оснащена съемными вставками, содержащими пищевые углубления с меньшими размерами. Углубления кормушки снабжены съемными вкладышами, которые имитируют вид и количество закладываемой в углубления пищи. В стартовом и рабочих отсеках установлены инфракрасные датчики, в центральном углублении размещен емкостной датчик, а в углублениях кормушки - тензометрические датчики. Датчики последовательно соединены с многоканальным усилителем и регистратором, обеспечивающим регистрацию времени побежки к кормушкам и количества подаваемой и съеденной пищи. Компьютер с помощью средств автоматизированной подачи пищи обеспечивает изменение размера предъявляемой пищи и интервалов времени между отдельно подаваемыми порциями. Изобретение обеспечивает повышение точности и автоматизацию экспериментального тестирования. 3 ил.

Изобретение относится к биомедицине, в частности к исследованию выносливости и поведения подопытных животных, и может быть использовано при разработке и исследовании новых медицинских средств. Для этого предложено проводить изучение кинезодинамики и поведения подопытных животных. Для этого животное предварительно обучают целенаправленному плаванию, например поиску кормушки или убежища. Далее, в процессе эксперимента животное помещают в воду, в которой создают искусственное однонаправленное течение потока, предпочтительно ламинарное. Регулируют скорость течения и температуру воды, а также давление воздуха над потоком. При этом регистрацию движения животного осуществляют с помощью бесконтактных средств, а физического состояния - с помощью беспроводных средств и приспособлений. Способ обеспечивает получение в ускоренном режиме объективных данных о поведении и физическом состоянии, в т.ч. физической выносливости животного, за счет помещения животного в экстремальные условия существования и принуждения к нерефлекторному поведению без физического побудительного воздействия. 1 ил., 1 пр., 6 табл.

Изобретение относится к области медицинской и ветеринарной травматологии, хирургии и касается лечения различных травм кости, в частности переломов и трещин. Для этого фиксируют фрагменты поврежденной кости гипсовой повязкой или бинтом из полимерного материала. В зону перелома вводят водный раствор, содержащий 1-гидроксиэтилидендифосфоновую кислоту в количестве 1.80-2.06 г/л, хлорид кальция безводный в количестве 1.44-2.22 г/л, нитрат гадолиния(III) гексагидрат в количестве 0.30-0.40 г/л, хлорид диспрозия(III) гексагидрат в количестве 0.038-0.076 г/л, рН раствора 7.3-7.8. Указанное средство перед введением в зону перелома доводят до температуры 30-100°С, выдерживают при этой температуре в течение 1-48 час и затем охлаждают до комнатной температуры. Способ обеспечивает сокращение времени регенерации костной ткани в месте травмирования, в т.ч. за счет предварительного обеспечения оптимального термодинамического созревания кристаллитов, при малотоксичности раствора и его стабильности в условиях длительного хранения. 3 табл., 35 пр.
Наверх