Некоторые химические структуры, композиции и способы



Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы
Некоторые химические структуры, композиции и способы

 


Владельцы патента RU 2513636:

Интелликайн ЭлЭлСи (US)

Изобретение относится к новым соединениям структурной формулы I, которые обладают ингибирующей активностью в отношении фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3-киназы). В формуле I: В представляет собой группировку формулы II:, где Wc представляет собой 6-10-членный арил, q равен 0, 1, 2, 3 или 4; X отсутствует или представляет собой -(CH(R9))z-, z равен 1; Y представляет собой -N(R9)-; Wd представляет собой R1 и R2 представляют собой C1-6алкил или галогено; R3 представляет собой водород или С1-6алкил; и в каждом случае R9 независимо представляет собой водород или С1-6алкил. Изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей указанные соединения, и к способу ингибирования PI3-киназы у субъекта, где субъект страдает от заболевания, представляющего собой рак, костное расстройство, воспалительное заболевание, иммунное заболевание, заболевание нервной системы, метаболическое заболевание, респираторное заболевание, тромбоз или сердечно-сосудистое заболевание. 3 н. и 21 з.п. ф-лы, 11 ил., 6 табл., 43 пр.

 

В данной заявке преимущество приоритета заявлено в отношении предварительных заявок США с серийными №61/009971, поданной 4 января 2008 г.; 61/194294, поданной 26 сентября 2008 г., и 61/201146, поданной 5 декабря 2008 г., и одновременно рассматриваемой заявки под номером 35280-714.602 в реестре патентных поверенных, поданной при этом, каждая из которых тем самым включена во всей своей полноте посредством ссылки.

Предшествующий изобретению уровень техники

Активность клеток можно регулировать внешними сигналами, которые стимулируют или ингибируют внутриклеточные события. Процесс, посредством которого стимулирующие или ингибирующие сигналы передаются в клетку и внутри клетки с целью вызвать внутриклеточный ответ, называется сигнальной трансдукцией. В течение последних десятилетий были выявлены каскады событий, происходящих при сигнальной трансдукции, и обнаружено, что они играют центральную роль в множестве биологических ответов. Обнаружено, что нарушения в различных компонентах путей сигнальной трансдукции вызывают большое число заболеваний, включая многочисленные формы рака, воспалительные расстройства, метаболические расстройства, сосудистые и нервные болезни (Gaestel et al. Current Medicinal Chemistry (2007) 14: 2214-2234).

Киназы представляют собой класс важных сигнальных молекул. Киназы в целом можно подразделить на протеинкиназы и липидкиназы, и некоторые киназы проявляют двойную специфичность. Протеинкиназы представляют собой ферменты, которые фосфорилируют другие белки и/или самих себя (то есть аутофосфорилирование). Протеинкиназы в целом можно подразделить на три основные группы на основании использования ими субстрата: тирозинкиназы, которые преимущественно фосфорилируют субстраты по остаткам тирозина (например, еrb2, рецептор PDGF (фактор роста из тромбоцитов), рецептор EGF (эпидермальный фактор роста), рецептор VEGF (фактор роста эндотелия сосудов), src, abl), серин/треонинкиназы, которые предпочтительно фосфорилируют субстраты по остаткам серина и/или треонина (например, mTorC1 (комплекс 1 мишени рапамицина у млекопитающих), mTorC2, ATM (мутированный ген атаксии-телангиэктазии), ATR (видоизмененной атаксии-телангиэктазии и родственного Rad3), DNA-PK (активируемая ДНК протеинкиназа), Akt (протеинкиназа В)) и киназ с двойной специфичностью, которые фосфорилируют субстраты по остаткам тирозина, серина и/или треонина.

Липидкиназы представляют собой ферменты, которые катализируют фосфорилирование липидов. Эти ферменты и полученные в результате фосфорилированные липиды и происходящие из липидов биологически активные органические молекулы играют роль во многих разнообразных физиологических процессах, включая клеточную пролиферацию, миграцию, адгезию и дифференцировку. Некоторые липидкиназы являются связанными с мембранами и катализируют фосфорилирование липидов, содержащихся в клеточных мембранах или связанных с клеточными мембранами. Примеры таких ферментов включают фосфоинозитид-киназы (такие как PI3 (фосфатидилинозит-3)-киназы, РI4-киназы), диацилглицеролкиназы и сфингозинкиназы.

Сигнальный путь с участием фосфоинозитид-3-киназ (PI3K) представляет собой одну из систем, которые в наибольшей степени подвержены мутациям при различных видах рака у человека. Также передача сигнала через PI3K является ключевым фактором при многих других заболеваниях у человека. Процесс передачи сигнала через PI3K вовлечен во многие болезненные состояния, включая аллергический контактный дерматит, ревматоидный артрит, остеоартрит, воспалительные заболевания кишечника, хроническое обструктивное расстройство легких, псориаз, рассеянный склероз, астму, расстройства, связанные с осложнениями диабета и воспалительными осложнениями сердечно-сосудистой системы, такие как острый коронарный синдром.

PI3K являются членами уникального и консервативного семейства внутриклеточных липидкиназ, которые фосфорилируют группу 3'-ОН фосфатидилинозитов или фосфоинозитидов. РI3К-семейство содержит 15 киназ с различными субстратными специфичностями, картинами экспрессии и способами регуляции (Katso et al., 2001). PI3K класса I (р110α, р110β, р110δ и р110γ) обычно активируются тирозинкиназами или G-белок-связанными рецепторами с получением PIP3 (фосфатидилинозит-трифосфат), который вовлекает расположенные ниже "по течению" эффекторы, такие как эффекторы в пути Akt/PDK1 (Akt/фосфоинозитид-зависимая киназа-1), mTOR, киназы Тес-семейства и ГТФазы Rho-семейства. РI3-киназы классов II и III играют ключевую роль во внутриклеточном прохождении сигнала посредством синтеза PI(3)P (фосфатидилинозит-3-фосфата) и PI(3,4)P2 (фосфатидилинозит-3,4-бифосфата). PIKK (фосфатидилинозитолкиназы) представляют собой протеинкиназы, которые регулируют клеточный рост (mTORCI) или контролируют целостность генома (ATM, ATR, DNA-PK и hSmg-1).

Изоформа дельта (δ) PI3K класса I вовлечена, в частности, в ряд заболеваний и биологических процессов. PI3Kδ экспрессируется главным образом в гематопоэтических клетках, включая лейкоциты, такие как Т-клетки, дендритные клетки, нейтрофилы, тучные клетки, В-клетки и макрофаги. PI3Kδ вовлечена как неотъемлемая часть в такие функции иммунной системы млекопитающих, как функция Т-клеток, активация В-клеток, активация тучных клеток, функция дендритных клеток и активность нейтрофилов. Вследствие своей неотъемлемой роли в функционировании иммунной системы, PI3Kδ также вовлечена в ряд заболеваний, связанных с нежелательным иммунным ответом, таких как аллергические реакции, воспалительные заболевания, опосредованный воспалением ангиогенез, ревматоидный артрит, аутоиммунные заболевания, такие как обыкновенная волчанка, астма, эмфизема и другие респираторные заболевания. Другая PI3K класса I, вовлеченная в функционирование иммунной системы, включает PI3Kγ, которая играет роль в передаче сигнала лейкоцитов и вовлечена в воспаление, ревматоидный артрит и аутоиммунные заболевания, такие как обыкновенная волчанка.

Медиаторы, расположенные ниже "по течению" в РI3К-пути сигнальной трансдукции, включают Akt и мишень рапамицина у млекопитающих (mTOR). Akt содержит плекстрин-гомологичный (РН) домен, который связывается с PIP3, что вызывает активацию Akt-киназы. Akt фосфорилирует многие субстраты и является центральным расположенным ниже "по течению" эффектором PI3K для получения разнообразных клеточных ответов. Одна из важных функций Akt заключается в увеличении активности mTOR посредством фосфорилирования ТЭС(комплекс туберозного склероза) 2 и других механизмов. mTOR является серин-треонинкиназой, родственной липидкиназам РI3К-семейства. mTOR вовлечен в широкий диапазон биологических процессов, включая клеточный рост, клеточную пролиферацию, подвижность и выживание клеток. Сообщалось о дизрегуляции mTOR-пути при различных типах рака. mTOR представляет собой многофункциональную киназу, которая интегрирует сигналы ростовых факторов и питательных веществ для регуляции трансляции белков, потребления питательных веществ, аутофагии и митохондриальной функции.

По существу, киназы, в частности PI3K, являются важнейшими мишенями для разработки лекарственных средств. Сохраняется необходимость в ингибиторах PI3K, подходящих для разработки лекарственных средств. Настоящее изобретение направлено на удовлетворение такой потребности и обеспечивает соответствующие преимущества, в том числе путем предложения новых классов ингибиторов киназ.

Сущность изобретения

В одном аспекте настоящего изобретения предложены приведенные ниже соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли, где

Wd представляет собой гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

В представляет собой группировку формулы II:

где Wc представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил, и q равен целому числу 0, 1, 2, 3 или 4;

X отсутствует или представляет собой -(CH(R9))z-, и z равен целому числу 1;

Y отсутствует или представляет собой -N(R9)-;

R1 представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, алкокси, амидо, алкоксикарбонил, сульфонамидо, галогено, циано или нитро;

R2 представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, гетероарилалкил, алкокси, амино, галогено, циано, гидрокси или нитро;

R3 представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкокси, амидо, амино, алкоксикарбонил, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро;

R5, R6, R7 и R8 независимо представляют собой водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро; и

в каждом случае R9 независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил или гетероциклоалкил.

В другом аспекте настоящего изобретения предложены соединения, представляющие собой соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли, где

Wd представляет собой гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

В представляет собой алкил, амино, гетероалкил или группировку формулы II:

,

где Wc представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил, и q равен целому числу 0, 1, 2, 3 или 4;

X отсутствует или представляет собой -(CH(R9))z-, и z независимо представляет собой целое число 1, 2, 3 или 4;

Y отсутствует, представляет собой -О-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)2-, -N(R9)-, -C(=O)-(CHR9)2- -C(=O)-, -N(R9)(C=O)-, -N(R9)(C=O)NH- или -N(R9)C(R9)2-;

R1 представляет собой водород, алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси, нитро, фосфат, мочевину или карбонат;

R2 представляет собой алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси,нитро, фосфат, мочевину или карбонат;

R3 представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси, арил, гетероарил или нитро;

R5, R6, R7 и R8 независимо представляют собой водород, С14алкил, С25алкенил, С25алкинил, С35циклоалкил, С14гетероалкил, С14алкокси, С14амидо, амино, ацил, С14ацилокси, алкоксикарбонил, С1-С4 сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро; и

в каждом случае R9 независимо представляет собой водород, C110алкил, С37циклоалкил, гетероциклоалкил или С210гетероалкил.

В некоторых из воплощений X представляет собой -СН2-, -СН(СН2СН3) или -СН(СН3)-.

В некоторых воплощениях X-Y представляет собой -СН2-N(СН3), -СН2-N(CH2CH3), -CH(CH2CH3)-NH- или -CH(CH3)-NH-.

В некоторых воплощениях Wd представляет собой пиразолопиримидин формулы III:

,

где R11 представляет собой Н, алкил, галогено, амино, амидо, гидрокси или алкокси, и R12 представляет собой Н, алкил, алкинил, алкенил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил. В некоторых воплощениях Wd представляет собой пиразолопиримидин формулы III, где R11 представляет собой Н, алкил, галогено, амино, амидо, гидрокси или алкокси, и R12 представляет собой циано, амино, карбоновую кислоту или амидо.

В некоторых воплощениях соединение формулы I имеет структуру формулы IV:

,

где R11 представляет собой Н, алкил, галогено, амино, амидо, гидрокси или алкокси, и R12 представляет собой Н, алкил, алкинил, алкенил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил. В некоторых воплощениях соединение формулы I имеет структуру формулы IV, где R11 представляет собой Н, алкил, галогено, амино, амидо, гидрокси или алкокси, и R12 представляет собой циано, амино, карбоновую кислоту или амидо.

В некоторых воплощениях соединения формулы I R11 представляет собой амино. В некоторых воплощениях соединения формулы I R12 представляет собой алкил, алкенил, алкинил, гетероарил, арил или гетероциклоалкил. В некоторых воплощениях соединения формулы I R12 представляет собой циано, амино, карбоновую кислоту или амидо. В некоторых воплощениях соединения формулы I R12 представляет собой моноциклический гетероарил. В некоторых воплощениях соединения формулы I R12 представляет собой бициклический гетероарил.

В некоторых воплощениях соединения формулы I это соединение имеет структуру формулы V:

.

В некоторых из воплощений формулы I X-Y представляет собой N(СН2СН3)СН2- или N(СН3)СН2-. В некоторых из воплощений формулы I соединение имеет структуру формулы VI:

В некоторых из воплощений формулы I R3 представляет собой -Н, -СН3) -Cl или -F.

В некоторых из воплощений формулы I R5, R6, R7 и R8 представляют собой водород.

В некоторых из воплощений формулы I В представляет собой группировку формулы II:

,

где Wc представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил, и q равен целому числу 0, 1, 2, 3 или 4.

В другом аспекте изобретения предложено соединение, имеющее структуру формулы I, и его фармацевтически приемлемые соли, где В представляет собой группировку формулы II,

где Wc представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил; и q равен целому числу 0, 1, 2, 3 или 4;

X отсутствует или представляет собой -(CH(R9))z-; и z независимо равен целому числу 1;

Y отсутствует или представляет собой -N(R9)-;

когда Y отсутствует, Wd представляет собой: , или когда Y присутствует, Wd представляет собой: ;

R1 представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, алкокси, амидо, алкоксикарбонил, сульфонамидо, галогено, циано или нитро;

R2 представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, гетероарилалкил, алкокси, амино, галогено, циано, гидрокси или нитро;

R3 представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкокси, амидо, амино, алкоксикарбонил, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро;

в каждом случае R9 независимо представляет собой водород, C110алкил, циклоалкил или гетероциклоалкил; и R12 представляет собой Н, алкил, алкинил, алкенил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил.

В другом аспекте изобретения предложено соединение, имеющее структуру формулы I, и его фармацевтически приемлемые соли, где:

В представляет собой алкил, амино, гетероалкил или группировку формулы II,

где Wc представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил; и q равен целому числу 0, 1, 2, 3 или 4;

X отсутствует или представляет собой -(CH(R9))z-; и z независимо представляет собой целое число 1, 2, 3 или 4;

Y отсутствует, представляет собой -N(R9)- или -N(R9)-CH(R9)-;

Wd представляет собой: или ;

R1 представляет собой водород, алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси, нитро, фосфат, мочевину или карбонат;

R2 представляет собой алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси, нитро или фосфат;

R3 представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси, нитро, арил или гетероарил;

в каждом случае R9 независимо представляет собой водород, С110алкил, С37циклоалкил, гетероциклоалкил или С210гетероалкил; и

R12 представляет собой Н, алкил, алкинил, алкенил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил, циклоалкил, циано, амино, карбоновую кислоту, алкоксикарбонил или амидо.

В некоторых воплощениях R3 представляет собой -Н, -СН3, -СН2СН3, -CF3, -Cl или -F. В других воплощениях R3 представляет собой -СН3, -Cl или -F.

В некоторых воплощениях В представляет собой группировку формулы II, где Wc представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил; и q равен целому числу 0, 1, 2, 3 или 4. В некоторых воплощениях В представляет собой гетероциклоалкил. В некоторых воплощениях В представляет собой моноциклический гетероарил. В некоторых воплощениях В представляет собой замещенный фенил. В некоторых воплощениях В представляет собой замещенный алкил.

В некоторых воплощениях В представляет собой -(CH2)2-NRaRa, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, или -NRaRa соединены вместе с образованием циклической группировки.

В некоторых воплощениях R1 представляет собой Н, -F, -Cl, -CN, -СН3, изопропил, -CF3, -ОСН3, нитро или фосфат. В некоторых воплощениях R1 представляет собой фосфат.

В некоторых воплощениях R2 представляет собой галогено, гидрокси, циано или нитро; и q равен 1. В некоторых воплощениях R2 представляет собой фосфат; и q равен 1. В некоторых воплощениях R2 представляет собой алкил или галогено; и q равен 1 или 2.

В некоторых воплощениях X представляет собой -СН2-, -СН(СН2СН3) или -СН(СН3)-. В некоторых воплощениях X-Y представляет собой -CH2-N(CH3), -CH2-N(CH2CH3), -CH(CH2CH3)-NH- или -CH(CH3)-NH-. В некоторых воплощениях представляет собой N(CH2CH3)CH2- или N(СН3)СН2-.

В некоторых воплощениях R12 представляет собой моноциклический гетероарил. В некоторых воплощениях R12 представляет собой бициклический гетероарил. В некоторых воплощениях R12 представляет собой гетероциклоалкил.

В некоторых воплощениях соединение формулы I имеет структуру формулы IV-A:

.

В некоторых воплощениях соединение формулы I имеет структуру формулы V-A:

.

В некоторых воплощениях соединение формулы I имеет структуру формулы IV-A или формулы V-A.

В некоторых воплощениях соединение формулы I имеет структуру формулы V-B:

.

В некоторых воплощениях соединение формулы I имеет структуру формулы VI-A:

.

В другом аспекте изобретения предложена композиция, содержащая фармацевтически приемлемый эксципиент и одно или более соединений формулы I, формулы IV, IV-A, V, V-A, V-B, VI и VI-А. В некоторых воплощениях композиция находится в жидкой, твердой, полутвердой форме, форме геля или аэрозольной форме.

В другом аспекте изобретения предложен способ ингибирования фосфатидилинозитол-3-киназы (РI3-киназы), включающий приведение в контакт РI3-киназы с эффективным количеством одного или более соединений, изложенных в данной заявке. Например, стадия приведения в контакт включает применение одного или более соединений формулы I, IV, IV-A, V, V-A, V-B, VI и VI-А. В некоторых воплощениях стадия приведения в контакт включает приведение в контакт с клеткой, которая содержит указанную РI3-киназу. В некоторых воплощениях данного способа ингибирование происходит у субъекта, страдающего от расстройства, ассоциированного с неправильной работой одного или более типов РI3-киназы. Некоторые типичные заболевания, вовлекающие неправильную работу одного или более типов РI3-киназы, выбраны из группы, состоящей из аутоиммунных заболеваний, ревматоидного артрита, респираторного заболевания, аллергических реакций и различных типов рака. Если желательно, соединение, используемое в данном способе, имеет структуру формулы IV, где R11 представляет собой амино, R12 представляет собой замещенный фенил.

В некоторых воплощениях данного способа ингибирование происходит у субъекта, страдающего от ревматоидного артрита или респираторного заболевания, и где соединение имеет структуру формулы IV, где R11 представляет собой амино, R12 представляет собой бициклический гетероарил.

В некоторых воплощениях способ включает введение субъекту второго терапевтического агента.

В еще одном другом аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания, проявляющего нежелательный иммунный ответ. Способ включает стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, одного или более соединений, изложенных в данной заявке, включая соединения формулы I, IV, IV-A, V, V-A, V-B, VI и/или VI-А в количестве, которое эффективно в улучшении указанного нежелательного иммунного ответа. В некоторых воплощениях одно или более соединений ингибируют независимую от Т-клеток активацию В-клеток, о чем свидетельствует уменьшение в продукции анти-ТМР(тринитрофенил) lgG3 по меньшей мере примерно в пять раз при введении тестируемому животному в дозе 2 раза в сутки (BID) в количестве менее чем примерно 30 мг/кг.

В некоторых воплощениях подвергаемое лечению заболевание связано с опуханием сустава или с болью в суставе у субъекта. Данный способ может быть эффективен в улучшении одного или более симптомов ревматоидного артрита, о чем свидетельствует уменьшение среднего диаметра сустава по меньшей мере примерно на 10% через 17 суток и/или уменьшение диаметра голеностопного сустава по меньшей мере на 5-10% или более после лечения в течение от нескольких суток до нескольких недель, в том числе, например уменьшение диаметра голеностопного сустава по меньшей мере на 5% через 7 суток лечения. В другом воплощении нежелательный иммунный ответ подтвержден усиленной продукцией антител против коллагена II типа, и применение одного или более соединений по изобретению уменьшает уровень антител против коллагена II типа в сыворотке крови с ED50 менее чем примерно 10 мг/кг.

Включение посредством ссылки

Все публикации, патенты и заявки на патент, упомянутые в данной заявке, включены в данную заявку посредством ссылки в той же степени, как если бы было конкретно и в индивидуальном порядке указано, что каждая отдельная публикация, патент или заявка на патент включены посредством ссылки.

Краткое описание графических материалов

В прилагаемой формуле изобретения подробно изложены новые признаки изобретения. Более полное понимание признаков и преимуществ настоящего изобретения будет достигнуто посредством ссылки на следующее далее подробное описание, в котором излагаются иллюстративные воплощения, где используются принципы изобретения, и в сопровождающих графических материалах которого:

на фиг.1 изображен типичный протокол измерения независимой от Т-клеток продукции TNP-специфических антител in vivo (BDA1 - брахидактилия типа А1; ELISA - фермент-связанный иммуносорбентный анализ);

на фиг.2 изображено кратное уменьшение величины TNP-специфического lgGS-ответа на антигены (Аg), обусловленного соединениями 7 и 53 формулы IV, по сравнению с растворителем в качестве контроля при введении перорально (п/о);

на фиг.3 изображен дозозависимый эффект перорального введения два раза в сутки соединения 53 формулы IV на уменьшение увеличения диаметра голеностопного сустава (Ank) во времени в модели развивающегося индуцированного коллагеном артрита у крыс. Также представлены результаты для контрольных крыс без артрита, контрольных крыс с артритом, которым вводили растворитель в качестве отрицательного контроля, и контрольных крыс с артритом, которым два раза в сутки вводили метотрексат (МТХ) (IK-1 - индуцированный коллагеном 1);

на фиг.4 изображен дозозависимый эффект соединений 7 и 53 формулы IV на улучшение гистопатологической картины голеностопного сустава при введении в модели развивающегося индуцированного коллагеном артрита у крыс. Также представлены результаты для контрольных крыс с артритом, которым вводили растворитель в качестве отрицательного контроля или метотрексат;

на фиг.5 изображен дозозависимый эффект соединений 7 и 53 формулы IV на улучшение гистопатологической картины коленного сустава при введении в модели развивающегося индуцированного коллагеном артрита у крыс. Также представлены результаты для контрольных крыс с артритом, которым вводили растворитель в качестве отрицательного контроля или метотрексат в качестве положительного контроля;

на фиг.6 изображен дозозависимый эффект соединений 7 и 53 формулы IV на уменьшение уровня антител против коллагена II типа in vivo при введении в модели развивающегося индуцированного коллагеном артрита у крыс. Также представлены результаты для крыс с артритом, которым вводили растворитель в качестве отрицательного контроля или метотрексат (МТХ);

на фиг.7 изображен дозозависимый эффект соединения 7 формулы IV на улучшение гистопатологической картины голеностопного сустава при введении в модели развивающегося индуцированного коллагеном артрита у крыс. Также представлены результаты для контрольных крыс с артритом, которым вводили растворитель, и крыс с артритом, которым вводили метотрексат;

на фиг.8 изображен дозозависимый эффект соединения 53 формулы IV, вводимого один раз в сутки, на гистопатологию голеностопного сустава в модели индуцированного коллагеном установленного артрита у крыс. Также представлены результаты для контрольных крыс с артритом, которым вводили растворитель, и крыс с артритом, которым вводили энбрел;

на фиг.9 изображен дозозависимый эффект соединения 53 формулы IV, вводимого два раза в сутки, на гистопатологию голеностопного сустава в модели индуцированного коллагеном установленного артрита у крыс. Также представлены результаты для контрольных крыс с артритом, которым вводили растворитель, и крыс с артритом, которым вводили энбрел;

на фиг.10 изображен дозозависимый эффект соединения 53 формулы IV на увеличение среднего объема лапы в модели индуцированного адъювантом артрита;

на фиг.11 изображен эффект во времени соединения 53 формулы IV на среднюю массу крыс в модели индуцированного адъювантом артрита у крыс.

Подробное описание изобретения

Несмотря на то, что в данной заявке показаны и изложены предпочтительные воплощения настоящего изобретения, специалистам в данной области техники будет очевидно, что такие воплощения приведены только в качестве примера. У специалистов в данной области техники сразу же появятся идеи многочисленных вариаций, изменений и замещений без отклонения от изобретения. Следует понимать, что при практическом применении изобретения могут быть использованы различные альтернативы воплощениям изобретения, изложенным в данной заявке. Подразумевается, что прилагаемая формула определяет объем изобретения и что тем самым охватываются способы и структуры, попадающие в пределы объема этой формулы, и их эквиваленты.

Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в данной заявке, имеют те же самые значения, как они обычно понимаются специалистом в области техники, к которой принадлежит это изобретение. Все патенты и публикации, упоминаемые в данной заявке, включены посредством ссылки.

Как употребляется в описании и формуле изобретения, форма единственного числа включает ссылки на множественное число, если контекст явно не обуславливает иное.

Как он использован в данной заявке, "агент" или "биологически активный агент" относится к биологическому, фармацевтическому или химическому соединению или другой группировке. Неограничивающие примеры включают простую или сложную органическую или неорганическую молекулу, пептид, белок, олигонуклеотид, антитело, производное антитела, фрагмент антитела, производное витаминов, углевод, токсин или химиотерапевтическое соединение. Могут быть синтезированы различные соединения, например небольшие молекулы и олигомеры (например, олигопептиды и олигонуклеотиды) и синтетические органические соединения на основе различных коровых структур. Дополнительно, соединения для скрининга могут быть получены из различных природных источников, таких как, например, экстракты из растений или животных и тому подобное. Специалист в данной области техники может легко распознать, что нет ограничения в отношении структурной природы агентов по настоящему изобретению.

Термин "агонист", как он использован в данной заявке, относится к соединению, обладающему способностью инициировать или усиливать биологическую функцию белка-мишени, будь то посредством ингибирования активности или экспрессии белка-мишени. Соответственно, термин "агонист" определен в контексте биологической роли полипептида-мишени. Несмотря на то что предпочтительные агонисты, приведенные в данной заявке, специфично взаимодействуют с (например, связываются с) мишенью, соединения, которые инициируют или усиливают биологическую активность полипептида-мишени посредством взаимодействия с другими членами пути сигнальной трансдукции, одним из членов которого является данный полипептид-мишень, также конкретно включены в рамки этого определения.

Термины "антагонист" и "ингибитор" используются взаимозаменяемо, и они относятся к соединению, обладающему способностью ингибировать биологическую функцию белка-мишени, будь то посредством ингибирования активности или экспрессии белка-мишени. Соответственно, термины "антагонист" и "ингибиторы" определены в контексте биологической роли белка-мишени. Несмотря на то, что предпочтительные антагонисты, приведенные в данной заявке, специфично взаимодействуют с (например, связываются с) мишенью, соединения, которые ингибируют биологическую активность белка мишени посредством взаимодействия с другими членами пути сигнальной трансдукции, одним из членов которого является данный белок-мишень, также конкретно включены в рамки этого определения. Предпочтительная биологическая активность, ингибируемая антагонистом, связана с развитием, ростом или распространением опухоли или нежелательным иммунным ответом, который проявляется в виде аутоиммунного заболевания.

"Противораковый агент", "противоопухолевый агент" или "химиотерапевтический агент" относится к любому агенту, полезному в лечении неопластического состояния. Один из классов противораковых агентов содержит химиотерапевтические агенты. "Химиотерапия" означает введение одного или более химиотерапевтических лекарственных средств и/или других агентов пациенту, страдающему раком, различными способами, включая внутривенный, пероральный, внутримышечный, внутрибрюшинный (в/б), внутрипузырный, подкожный (п/к), трансдермальный, трансбуккальный или ингаляционный или в форме суппозитория.

Термин "клеточная пролиферация" относится к явлению, благодаря которому количество клеток изменяется в результате деления. Этот термин также охватывает клеточный рост, в результате которого морфология клеток изменяется (например, они увеличиваются в размере), что согласуется с пролиферативным сигналом.

Термин "совместное введение", "вводимый в комбинации с" и их грамматические эквиваленты, как они использованы в данной заявке, охватывают введение двух или более агентов животному с тем, чтобы оба агента и/или их метаболиты присутствовали в животном в одно и то же время. Совместное введение включает одновременное введение в раздельных композициях, введение в разное время в раздельных композициях или введение в композиции, в которой присутствуют оба агента.

Термин "эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" относится к такому количеству соединения, изложенного в данной заявке, которое достаточно для получения эффекта предполагаемого применения, включая, но не ограничиваясь этим, лечение заболеваний, которые описаны ниже. Терапевтически эффективное количество может варьировать в зависимости от предполагаемого применения (in vitro или in vivo) или субъекта и болезненного состояния, которое лечат, например массы и возраста субъекта, тяжести болезненного состояния, способа введения и тому подобного, которое легко может быть определено специалистом обычной квалификации в данной области техники. Термин также применяется к дозе, которая будет индуцировать конкретный ответ в клетках-мишенях, например уменьшение адгезии тромбоцитов и/или миграции клеток. Конкретная доза будет варьировать в зависимости от конкретного выбранного соединения, режима введения, которому необходимо следовать, того, вводят ли ее в комбинации с другими соединениями, хронометрирования введения, ткани, в которую ее вводят, и физической системы доставки, в которой она вносится.

Как они используются в данной заявке, термины "лечение" или "процесс лечения" либо "облегчение" или "уменьшение интенсивности" используются в данной заявке взаимозаменяемо. Эти термины относятся к подходу для получения полезных или желаемых результатов, включая, но не ограничиваясь этим, терапевтическую пользу и/или профилактическую пользу. Под терапевтической пользой понимают устранение или уменьшение интенсивности основного расстройства, которое лечат. Также терапевтической пользы достигают путем устранения или уменьшения интенсивности одного или более физиологических симптомов, связанных с основным расстройством, таким образом, что у пациента наблюдают улучшение, несмотря на то, что пациент все еще может быть поражен основным расстройством. Для профилактической пользы композиции могут быть введены пациенту, имеющему риск развития конкретного заболевания, или пациенту с подтвержденным одним или более чем одним физиологическим симптомом заболевания, возможно, даже если диагноз этого заболевания возможно не поставлен.

"Терапевтический эффект", как этот термин использован в данной заявке, охватывает терапевтическую пользу и/или профилактическую пользу, как описано выше. Профилактический эффект включает задержку или устранение возникновения заболевания или состояния, задержку или устранение приступа симптомов заболевания или состояния, замедление, прекращение или обращение развития заболевания или состояния или любую их комбинацию.

Термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к солям, происходящим из ряда органических и неорганических противоионов, хорошо известных в данной области техники. Фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты могут быть образованы с неорганическими кислотами и органическими кислотами. Неорганические кислоты, из которых могут происходить соли, включают, например, соляную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, фосфорную кислоту и тому подобное. Органические кислоты, из которых могут происходить соли, включают, например, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, гликолевую кислоту, пировиноградную кислоту, щавелевую кислоту, малеиновую кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, фумаровую кислоту, винную кислоту, лимонную кислоту, бензойную кислоту, коричную кислоту, миндальную кислоту, метансульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, п-толуолсульфоновую кислоту, салициловую кислоту и тому подобное. Фармацевтически приемлемые соли присоединения основания могут быть образованы с неорганическими и органическими основаниями. Неорганические основания, из которых могут происходить соли, включают, например, основания натрия, калия, лития, аммония, кальция, магния, железа, цинка, меди, марганца, алюминия и тому подобного. Органические основания, из которых могут происходить соли, включают, например, первичные, вторичные и третичные амины, замещенные амины, в том числе существующие в природе замещенные амины, циклические амины, основные ионообменные смолы и тому подобное, конкретно такие, как изопропиламин, триметиламин, диэтиламин, триэтиламин, трипропиламин и этаноламин. В некоторых воплощениях фармацевтически приемлемая соль присоединения основания выбрана из солей аммония, калия, натрия, кальция и магния.

"Фармацевтически приемлемый носитель" или "фармацевтически приемлемый эксципиент" включает любые и все растворители, диспергирующие среды, вещества для покрытия, антибактериальные и противогрибковые агенты, изотонические и замедляющие всасывание агенты и тому подобное. Использование таких сред и агентов для фармацевтически активных веществ хорошо известно в данной области техники. За исключением случаев, когда любая традиционная среда или агент будут несовместимы с активным ингредиентом, их применение в терапевтических композициях по изобретению предполагается. Дополнительные активные ингредиенты также могут быть включены в композиции.

"Сигнальная трансдукция" представляет собой процесс, при котором стимулирующие или ингибирующие сигналы передаются в клетку и внутри клетки с целью вызвать внутриклеточный ответ. Модулятор пути сигнальной трансдукции относится к соединению, которое модулирует активность одного или более клеточных белков, картированных в одном и том же конкретном пути сигнальной трансдукции. Модулятор может увеличивать (агонист) или подавлять (антагонист) активность сигнальной молекулы.

Термин "селективное ингибирование" или "селективно ингибирует", как применяемый к биологически активному агенту, относится к способности агента селективно уменьшать активность мишени по передаче сигнала по сравнению с активностью не-мишени по передаче сигнала, путем прямого или опосредованного взаимодействия с мишенью.

Термин "B-ALL", который в данной заявке используется, относится к В-клеточному острому лимфобластному лейкозу.

"Субъект" относится к животному, такому как млекопитающее, например человеку. Способы, изложенные в данной заявке, могут быть полезны как для терапии человека, так и для применений в ветеринарии. В некоторых воплощениях пациентом является млекопитающее, а в некоторых воплощениях пациентом является человек.

"Лучевая терапия" означает воздействие на пациента с использованием общепринятых методов и композиций, известных практикующему врачу, радиоактивными излучателями, таким как излучающие альфа-частицы радионуклиды (например, радионуклиды актиния и тория), радиоактивные излучатели с низкой линейной передачей энергии (LET) (то есть бета-излучатели), излучатели конверсионных электронов (например, стронций-89 и самарий-153-EDTMP (самарий-153-этилендиаминтетраметиленфосфонат)), или излучению высоких энергий, включая, без ограничения, рентгеновские лучи, гамма-лучи и нейтроны.

"Пролекарство" предназначено для указания соединения, которое может быть превращено в физиологических условиях или в результате сольволиза в биологически активное соединение, описанное в данной заявке. Таким образом, термин "пролекарство" относится к предшественнику биологически активного соединения, которое является фармацевтически приемлемым. Пролекарство может быть неактивным при введении его субъекту, но может превращаться in vivo в активное соединение, например, в результате гидролиза. Соединение, являющееся пролекарством, зачастую дает преимущества в растворимости, тканевой совместимости или замедленном высвобождении в организме млекопитающего (см., например, Bundgard, Н., Design of Prodrugs (1985), pp.7-9, 21-24 (Elsevier, Amsterdam)). Обсуждение пролекарств приведено в Higuchi, Т., et al., "Pro-drugs as Novel Delivery Systems", A.C.S. Symposium Series, Vol.14 и в Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B.Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987; и то, и другое полностью включено в данную заявку посредством ссылки. Также предполагается, что термин "пролекарство" включает в себя любые ковалентно связанные носители, из которых высвобождается активное соединение in vivo, когда такое пролекарство вводят субъекту-млекопитающему. Пролекарства активного соединения, как описано в данной заявке, могут быть получены посредством модификации функциональных групп, присутствующих в активном соединении, таким образом, чтобы эти модифицированные соединения расщеплялись или в результате стандартного манипулирования, или in vivo с получением исходного активного соединения. Пролекарства включают соединения, где группа гидрокси, амино или меркапто связана с любой группой, которая, когда это пролекарство активного соединения вводят субъекту-млекопитающему, отщепляется с образованием свободной группы гидрокси, свободной группы амино или свободной группы меркапто, соответственно. Примеры пролекарств включают, но не ограничиваются этим, ацетатные, формиатные и бензоатные производные спирта или ацетамида, формамидные и бензамидные производные функциональной группы амина в активном соединении и тому подобное.

Термин "in vivo" относится к событию, которое происходит в организме субъекта.

Термин "in vitro" относится к событию, которое происходит вне организма субъекта. Например, анализ in vitro охватывает любой анализ, проводимый вне субъекта. Анализы in vitro охватывают анализы с использованием клеток, в которых применяют живые или мертвые клетки. Анализы in vitro также охватывают бесклеточный анализ, в котором никаких интактных клеток не используют.

Также, если не указано иное, подразумевается, что структуры, описанные в данной заявке, включают соединения, отличающиеся только наличием одного или более чем одного обогащенного изотопом атома. Например, соединения, имеющие представленные структуры, за исключением замены водорода на дейтерий или тритий, либо замены углерода на 13С- или 14С-обогащенный углерод, включены в объем этого изобретения.

Соединения по настоящему изобретению также могут содержать изотопы атомов для одного или более атомов, входящих в состав таких соединений в неестественных пропорциях. Например, соединения могут быть радиоактивно помечены с помощью радиоактивных изотопов, таких как, например, тритий (3Н), йод-125 (125I) или углерод-14 (14С). Все изотопные варианты соединений по настоящему изобретению, как радиоактивные, так и нерадиоактивные, попадают в объем настоящего изобретения.

В том случае, когда в данной заявке используются диапазоны для описания физических свойств, таких как молекулярная масса, или химических свойств, таких как химические формулы, подразумевается, что включены все комбинации и подкомбинации диапазонов и конкретные соответствующие им воплощения. Термин "примерно", когда он относится к количеству или диапазону числовых значений, означает, что упоминаемые количество или диапазон числовых значений представляют собой приближение в пределах разброса экспериментальных данных (или в пределах статистической погрешности эксперимента), и поэтому количество или диапазон числовых значений может варьировать, например, 1%-15% от установленного количества или диапазона числовых значений. Термин "содержащий" (и родственные термины, такие как "содержат" или "содержит" либо "имеющий" или "включающий") включает эти воплощения, например, воплощение любой композиции объекта, композиции, способа или процесса или тому подобного, которые "состоят из" или "по существу состоят из" описанных признаков.

Следующие далее сокращения и термины имеют указанные значения повсюду в данной заявке:

PI3-K - фосфоинозитид-3-киназа; PI - фосфатидилинозит; PDK - фосфоинозитид-зависимая киназа; DNA-PK - зависимая от дезоксирибонуклеиновой кислоты протеинкиназа; PTEN - делеция фосфатазы и гомолога тензина на хромосоме десять; PIKK - киназа, подобная фосфоинозитидкиназе; СПИД - синдром приобретенного иммунодефицита; ВИЧ - вирус иммунодефицита человека; Mel - метилиодид; РОСI3 - оксихлорид фосфора; KCNS - изотиоцианат калия; ТСХ - тонкослойная хроматография; МеОН - метанол; и СНСl3 - хлороформ.

Сокращения, используемые в данной заявке, имеют свое традиционное значение в области химии и биологии.

"Алкил" относится к радикалу с прямой или разветвленной углеводородной цепью, состоящему исключительно из атомов углерода и водорода, не содержащему никакого ненасыщения, имеющему от одного до десяти атомов углерода (например, С110алкил). Во всех случаях, когда он появляется в данной заявке, диапазон числовых значений, такой как "1-10", относится к каждому целому числу в заданном диапазоне; например, "1-10 атомов углерода" означает, что алкильная группа может состоять из 1 атома углерода, 2 атомов углерода, 3 атомов углерода и т.д., вплоть до и включая 10 атомов углерода, хотя настоящее определение также охватывает вариант термина "алкил", когда никакой диапазон числовых значений не обозначен. В некоторых воплощениях им является С14алкильная группа. Типичные алкильные группы включают, но никоим образом не ограничиваются этим, метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втop-бутил, изобутил, третичный бутил, пентил, изопентил, неопентил, гексил, септил, октил, нонил, децил и тому подобное. Алкил присоединяется к остатку молекулы через одинарную связь, например метил (Me), этил (Et), н-пропил, 1-метилэтил (изопропил), н-бутил, н-пентил, 1,1-диметилэтил (mpem-бутил), 3-метилгексил, 2-метилгексил и тому подобное. Если в данном описании конкретно не указано иное, то алкильная группа возможно замещена одним или более чем одним заместителем, которые независимо представляют собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, трифторметил, трифторметокси, нитро, триметилсиланил, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O),Ra (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил.

"Алкиларил" относится к -(алкил)арильному радикалу, где арил и алкил такие, как они раскрыты в данной заявке, и которые возможно замещены одним или более чем одним из заместителей, описанных в качестве подходящих заместителей для арила и алкила, соответственно.

"Алкилгетарил" относится к -(алкил)гетарильному радикалу, где гетарил и алкил такие, как они описаны в данном изобретении, и которые возможно замещены одним или более чем одним из заместителей, описанных в качестве подходящих заместителей для арила и алкила, соответственно.

"Алкилгетероциклоалкил" относится к -(алкил)гетероцикл ильному радикалу, где алкил и гетероциклоалкил такие, как они в данной заявке описаны, и которые возможно замещены одним или более чем одним из заместителей, описанных в качестве подходящих заместителей для гетероциклоалкила и алкила, соответственно.

"Алкеновая" группировка относится к группе, состоящей по меньшей мере из двух атомов углерода и по меньшей мере одной углерод-углеродной двойной связи, а "алкиновая" группировка относится к группе, состоящей по меньшей мере из двух атомов углерода и по меньшей мере одной углерод-углеродной тройной связи. Алкильная группировка, независимо от того, является она насыщенной или ненасыщенной, может представлять собой разветвленную, прямую цепь или быть циклической.

"Алкенил" относится к радикалу-группе с прямой или разветвленной углеводородной цепью, состоящему исключительно из атомов углерода и водорода, содержащему по меньшей мере одну двойную связь и имеющему от двух до десяти атомов углерода (то есть С210алкенил). Во всех случаях, когда он появляется в данной заявке, диапазон числовых значений, такой как "2-10" относится к каждому целому числу в заданном диапазоне; например, "2-10 атомов углерода" означает, что алкенильная группа может состоять из 2 атомов углерода, 3 атомов углерода и т.д., вплоть до и включая 10 атомов углерода. В некоторых воплощениях алкенил содержит от двух до восьми атомов углерода. В других воплощениях алкенил содержит от двух до пяти атомов углерода (например, С25алкенил). Алкенил присоединен к остатку молекулы через одинарную связь, например этенил (то есть винил), проп-1-енил (то есть аллил), бут-1-енил, пент-1-енил, пента-1,4-диенил и тому подобное. Если в данном описании конкретно не указано иное, то алкенильная группа возможно замещена одним или более заместителями, независимо представляющими собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, трифторметил, трифторметокси, нитро, триметилсиланил, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O),Ra (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил.

"Алкенил-циклоалкил" относится к -(алкенил)циклоалкильному радикалу, где алкенил и циклоалкил такие, как они описаны в данном изобретении, и которые возможно замещены одним или более чем одним из заместителей, описанных в качестве подходящих заместителей для алкенила и циклоалкила, соответственно.

"Алкинил" относится к радикалу-группе с прямой или разветвленной углеводородной цепью, состоящему исключительно из атомов углерода и водорода, содержащему по меньшей мере одну тройную связь, имеющему от двух до десяти атомов углерода (то есть С210алкинил). Во всех случаях, когда он появляется в данной заявке, диапазон числовых значений, такой как "2-10" относится к каждому целому числу в заданном диапазоне; например, "2-10 атомов углерода" означает, что алкинильная группа может состоять из 2 атомов углерода, 3 атомов углерода и т.д., вплоть до и включая 10 атомов углерода. В некоторых воплощениях алкинил содержит от двух до восьми атомов углерода. В других воплощениях алкинил имеет от двух до пяти атомов углерода (например, С25алкинил). Алкинил присоединен к остатку молекулы через одинарную связь, например, этинил, пропинил, бутинил, пентинил, гексинил и тому подобное. Если в данном описании конкретно не указано иное, то алкинильная группа возможно замещена одним или более заместителями, независимо представляющими собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, трифторметил, трифторметокси, нитро, триметилсиланил, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил.

"Алкинил-циклоалкил" относится к -(алкинил)циклоалкильному радикалу, где алкинил и циклоалкил такие, как они описаны в данной заявке, и которые возможно замещены одним или более чем одним из заместителей, описанных в качестве подходящих заместителей для алкинила и циклоалкила, соответственно.

"Карбоксальдегид" относится к радикалу -(С=O)Н.

"Карбоксил" относится к радикалу -(С=O)ОН.

"Циано" относится к радикалу -CN.

"Циклоалкил" относится к моноциклическому или полициклическому радикалу, который содержит только углерод и водород и может быть насыщенным или частично ненасыщенным. Циклоалкильные группы включают группы, имеющие 3-10 кольцевых атомов (то есть С310циклоалкил). Во всех случаях, когда он появляется в данной заявке, диапазон числовых значений, такой как "3-10" относится к каждому целому числу в заданном диапазоне; например, "3-10 атомов углерода" означает, что циклоалкильная группа может состоять из 3 атомов углерода и т.д., вплоть до и включая 10 атомов углерода. В некоторых воплощениях им является С38циклоалкильный радикал. В некоторых воплощениях им является С35циклоалкильный радикал. Иллюстративные примеры циклоалкильных групп включают, но не ограничиваются этим, следующие группировки: циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклопентенил, циклогексил, циклогексенил, циклосептил, циклооктил, циклононил, циклодецил, норборнил и тому подобное. Если в данном описании конкретно не указано иное, то циклоалкильная группа возможно замещена одним или более заместителями, независимо представляющими собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, трифторметил, трифторметокси, нитро, триметилсиланил, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил.

"Циклоалкил-алкенил" относится к -(циклоалкил)алкенильному радикалу, где циклоалкил и гетероциклоалкил такие, как они описаны в данной заявке, и которые возможно замещены одним или более чем одним из заместителей, описанных в качестве подходящих заместителей для гетероциклоалкила и циклоалкила, соответственно.

"Циклоалкил-гетероциклоалкил" относится к -(циклоалкил)-гетероциклильному радикалу, где циклоалкил и гетероциклоалкил такие, как они описаны в данной заявке, и которые возможно замещены одним или более чем одним из заместителей, описанных в качестве подходящих заместителей для гетероциклоалкила и циклоалкила, соответственно.

"Циклоалкил-гетероарил" относится к -(циклоалкил)гетероарильному радикалу, где циклоалкил и гетероциклоалкил такие, как они описаны в данной заявке, и которые возможно замещены одним или более чем одним из заместителей, описанных в качестве подходящих заместителей для гетероциклоалкила и циклоалкила, соответственно.

Термин "алкокси" относится к группе -О-алкил, включающей 1-8 атомов углерода в прямой, разветвленной, циклической конфигурации и их комбинации, присоединенные к исходной структуре через атом кислорода. Примеры включают метокси, этокси, пропокси, изопропокси, циклопропилокси, циклогексилокси и тому подобное. "Низший алкокси" относится к алкоксигруппам, содержащим от одного до шести атомов углерода. В некоторых воплощениях С14алкил представляет собой алкильную группу, которая охватывает алкилы как с прямой, так и с разветвленной цепью из 1-4 атомов углерода.

Термин "замещенный алкокси" относится к группе алкокси, где алкильная составляющая замещена (то есть -O-(замещенный алкил)). Если в данном описании конкретно не указано иное, то алкильная группировка алкоксигруппы возможно замещена одним или более заместителями, независимо представляющими собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, трифторметил, трифторметокси, нитро, триметилсиланил, -ORa, SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O),Ra (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил.

Термин "алкоксикарбонил" относится к группе формулы (алкокси)(С=O)-, присоединенной через углерод карбонила, при этом группа алкокси имеет указанное количество атомов углерода. Так, C16алкоксикарбонильная группа представляет собой алкоксигруппу, имеющую 1-6 атомов углерода, присоединенных через свой кислород к карбонильному линкеру. "Низший алкоксикарбонил" относится к алкоксикарбонильной группе, где алкоксигруппа представляет собой низшую алкоксигруппу. В некоторых воплощениях С14алкокси представляет собой алкоксигруппу, которая охватывает алкоксигруппы как с прямой, так и разветвленной цепью из 1-4 атомов углерода.

Термин "замещенный алкоксикарбонил" относится к группе (замещенный алкил)-О-С(О)-, где данная группа присоединена к исходной структуре через карбонильную функциональную группу. Если в данном описании конкретно не указано иное, алкильная группировка алкоксикарбонильной группы возможно замещена одним или более заместителями, независимо представляющими собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, трифторметил, трифторметокси, нитро, триметилсиланил, -ORa, SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O),Ra (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил.

"Ацил" относится к группам (алкил)-С(О)-, (арил)-С(О)-, (гетероарил)-С(О)-, (гетероалкил)-С(О)- и (гетероциклоалкил)-С(О)-, где данная группа присоединена к исходной структуре через карбонильную функциональную группу. В некоторых воплощениях им является С110ацильный радикал, что обозначает общее количество атомов в цепи или в кольце алкильной, арильной, гетероарильной или гетероциклоалкильной части ацилоксигруппы плюс карбонильный углерод ацила, то есть три остальных атома в кольце или цепи плюс карбонил. Если радикал R представляет собой гетероарил или гетероциклоалкил, то гетероатомы в кольце или атомы в цепи вносят вклад в общее количество атомов в цепи или в кольце. Если в данном описании конкретно не указано иное, то "R" ацилоксигруппы возможно замещен одним или более заместителями, независимо представляющими собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, трифторметил, трифторметокси, нитро, триметилсиланил, -ORa, SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O),Ra (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил.

"Ацилокси" относится к радикалу R(C=O)O-, где "R" представляет собой алкил, арил, гетероарил, гетероалкил или гетероциклоалкил, такие, как они описаны в данной заявке. В некоторых воплощениях им является радикал C14ацилокси, что обозначает общее количество атомов в цепи или в кольце алкильной, арильной, гетероарильной или гетероциклоалкильной части ацилоксигруппы плюс углерод карбонильной группы ацила, то есть три остальных атома в кольце или цепи плюс карбонил. Если радикал R представляет собой гетероарил или гетероциклоалкил, то гетероатомы в кольце или атомы в цепи вносят вклад в общее количество атомов в цепи или в кольце. Если в данном описании конкретно не указано иное, то "R" ацилоксигруппы возможно замещен одним или более заместителями, независимо представляющими собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, трифторметил, трифторметокси, нитро, триметилсиланил, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил.

"Амино" или "амин" относится к радикалу-группе -N(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, если в данном описании конкретно не указано иное. Если группа -N(Ra)2 имеет два Ra, не являющиеся водородом, то они могут быть объединены с атомом азота с образованием 4-, 5-, 6- или 7-членного кольца. Например, подразумевается, что -N(Ra)2 включает, но не ограничивается этим, 1-пирролидинил и 4-морфолинил. Если в данном описании конкретно не указано иное, то аминогруппа возможно замещена одним или более заместителями, независимо представляющими собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, трифторметил, трифторметокси, нитро, триметилсиланил, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O),Ra (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, и каждая из этих группировок возможно может быть замещена, как определено в данной заявке.

Термин "замещенный амино" также относится к N-оксидам каждой из групп -NHRd и NRdRd, которые описаны выше. N-оксиды могут быть получены путем обработки соответствующей аминогруппы, например, перекисью водорода или м-хлорпероксибензойной кислотой. Специалисту в данной области известны условия реакции для проведения N-окисления.

"Амид" или "амидо" относится к химической группировке, имеющей формулу -C(O)N(R)2 или -NHC(O)R, где R выбран из группы, состоящей из водорода, алкила, циклоалкила, арила, гетероарила (связанного через кольцевой углерод) и гетероалициклического радикала (связанного через кольцевой углерод), причем каждая группировка сама возможно может быть замещена. В некоторых воплощениях им является радикал С14амидо или амидный радикал, причем в общее количество атомов углерода в этом радикале включен атом углерода карбонила амида. R2 в -N(R)2 амида возможно может быть взят вместе с азотом, к которому он присоединен, с образованием 4-, 5-, 6- или 7-членного кольца. Если в данном описании конкретно не указано иное, то группа амидо возможно независимо замещена одним или более чем одним из заместителей, которые приведены в данной заявке для алкила, циклоалкила, арила, гетероарила или гетероциклоалкила. Амид может представлять собой молекулу аминокислоты или пептида, присоединенную к соединению формулы (I), в результате чего образуется пролекарство. Любая амин-, гидрокси- или карбоксилсодержащая боковая цепь в соединениях, изложенных в данной заявке, может быть амидирована. Методики и конкретные группы для получения таких амидов известны специалистам в данной области техники и могут быть легко обнаружены в справочных материалах, таких как книга Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3-е изд., John Wiley & Sons, New York, N.Y., 1999, которая включена в данной заявке во всей своей полноте посредством ссылки.

Термин "ароматический" или "арил" относится к ароматическому радикалу, содержащему от шести до десяти кольцевых атомов (например, С610ароматический радикал или С610арил), который имеет по меньшей мере одно кольцо, содержащее коньюгированную систему пи-электоронов, которая является карбоциклической (например, фенил, флуоренил и нафтил). Бивалентные радикалы, образованные из замещенных производных бензола и имеющие свободные валентности на кольцевых атомах, называются замещенными фениленовыми радикалами. Бивалентные радикалы, образованные из одновалентных полициклических углеводородных радикалов, названия которых оканчиваются на "-ил", в результате удаления одного атома водорода от атома углерода со свободной валентностью, называют, добавляя "-иден" к названию соответствующего одновалентного радикала, например, нафтильная группа с двумя точками присоединения называется нафтилиденом. Во всех случаях, когда он появляется в данной заявке, диапазон числовых значений, такой как "6-10" относится к каждому целому числу в заданном диапазоне; например, "6-10 кольцевых атомов" означает, что арильная группа может состоять из 6 кольцевых атомов, 7 кольцевых атомов и т.д., вплоть до и включая 10 кольцевых атомов. Термин включает моноциклические или полициклические, образованные из конденсированных колец (то есть колец, которые имеют общие смежные пары кольцевых атомов), группы. Если в данном описании конкретно не указано иное, то арильная группировка возможно замещена одним или более заместителями, независимо представляющими собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, трифторметил, трифторметокси, нитро, триметилсиланил, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O),Ra (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил.

"Аралкил" или "арилалкил" относится к (арил)алкильному радикалу, где арил и алкил такие, как они изложены в данной заявке, и которые возможно замещены одним или более чем одним из заместителей, описанных в качестве подходящих заместителей для арила и алкила, соответственно.

"Сложноэфирный" относится к химическому радикалу формулы -COOR, где R выбран из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, арила, гетероарила (связанного через кольцевой углерод) и гетероалициклического радикала (связанного через кольцевой углерод). Любая амин-, гидрокси- или карбоксилсодержащая боковая цепь в соединениях, изложенных в данной заявке, может быть этерифицирована. Методики и конкретные группы для получения таких эфиров известны специалистам в данной области техники и могут быть легко обнаружены в справочных материалах, таких как книга Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3-е изд., John Wiley & Sons, New York, N.Y., 1999, которая включена в данное описание во всей своей полноте посредством ссылки. Если в данном описании конкретно не указано иное, то сложноэфирная группа возможно замещена одним или более заместителями, независимо представляющими собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, трифторметил, трифторметокси, нитро, триметилсиланил, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил.

"Фторалкил" относится к алкильному радикалу, как он определен выше, который замещен одним или более радикалами фторо, как определено выше, например, трифторметилу, дифторметилу, 2,2,2-трифторэтилу, 1-фторметил-2-фторэтилу и тому подобному. Алкильная часть фторалкильного радикала возможно может быть замещена, как описано выше для алкильной группы.

"Галогено", "галогенид" или, альтернативно, "галоген" означает фторо, хлоро, бромо или иодо. Термины "галогеноалкил", "галогеноалкенил", "галогеноалкинил" и "галогеноалкокси" включают структуры алкила, алкенила, алкинила и алкокси, замещенные одной или более чем одной группой галогено или их комбинациями. Например, термины "фторалкил" и "фторалкокси" включают группы галогеноалкил и галогеноалкокси соответственно, в которых галогено представляет собой фтор.

"Гетероалкил", "гетероалкенил" и "гетероалкинил" включают возможно замещенные алкильные, алкенильные и алкинильные радикалы, которые имеют один или более скелетных атомов в цепи, выбранных из атома, не являющегося углеродом, например кислорода, азота, серы, фосфора или их комбинаций. Может быть приведен диапазон числовых значений, например С14 гетероалкил, относящийся к длине цепи в целом, длина которой в этом примере составляет 4 атома. Например, радикал -СН2ОСН2СН3 обозначается как "С4"гетероалкил, который содержит гетероатомный центр при поатомном описании длины цепи. Присоединение к остатку молекулы может быть осуществлено либо через гетероатом, либо углерод в гетероалкильной цепи. Гетероалкильная группа может быть замещена одним или более заместителями, независимо представляющими собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, нитро, оксо, тиоксо, триметилсиланил, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)S(O),Ra (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил.

"Гетероалкиларил" относится к -(гетероалкил)арильному радикалу, где гетероалкил и арил такие, как они описаны в данной заявке, и которые возможно замещены одним или более чем одним из заместителей, описанных в качестве подходящих заместителей для гетероалкила и арила, соответственно.

"Гетероалкилгетероарил" относится к -(гетероалкил)гетероарильному радикалу, где гетероалкил и гетероарил такие, как они описаны в данной заявке, и которые возможно замещены одним или более чем одним из заместителей, описанных в качестве подходящих заместителей для гетероалкила и гетероарила, соответственно.

"Гетероалкилгетероциклоалкил" относится к -(гетероалкил)гетероцикло-алкильному радикалу, где гетероалкил и гетероарил такие, как они описаны в данной заявке, и которые возможно замещены одним или более чем одним из заместителей, описанных в качестве подходящих заместителей для гетероалкила и гетероциклоалкила, соответственно.

"Гетероалкилциклоалкил" относится к -(гетероалкил)циклоалкильному радикалу, где гетероалкил и циклоалкил такие, как они описаны в данном изобретении, и которые возможно замещены одним или более чем одним из заместителей, описанных в качестве подходящих заместителей для гетероалкила и циклоалкила, соответственно.

"Гетероарил" или, альтернативно, "гетероароматический" относится к 5-18-членному ароматическому радикалу (например, С513гетероарилу), который включает один или более кольцевых гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы, и который может быть моноциклической, бициклической, трициклической или тетрациклической кольцевой системой. Во всех случаях, когда он появляется в данной заявке, диапазон числовых значений, такой как "5-18", относится к каждому целому числу в заданном диапазоне; например, "5-18 кольцевых атомов" означает, что гетероарильная группа может состоять из 5 кольцевых атомов, 6 кольцевых атомов и т.д., вплоть до и включая 18 кольцевых атомов. Бивалентные радикалы, образованные из одновалентных гетероарильных радикалов, названия которых оканчиваются на "-ил", в результате удаления одного атома водорода от атома со свободной валентностью, называют, добавляя "-идеи" к названию соответствующего одновалентного радикала, например, пиридильная группа с двумя точками присоединения представляет собой пиридилиден. N-содержащая "гетероароматическая" или "гетероарильная" группировка относится к ароматической группе, в которой по меньшей мере одним из скелетных атомов кольца является атом азота. Полициклическая гетероарильная группа может быть конденсированной или неконденсированной. Гетероатом(ы) в гетероарильном радикале возможно окислен(ы). Один или более атомов азота, если они присутствуют, возможно кватернизированы. Гетероарил присоединен к остатку молекулы через любой атом кольца(ец). Примеры гетероарилов включают, но не ограничиваются этим, азепинил, акридинил, бензимидазолил, бензиндолил, 1,3-бензодиоксолил, бензофуранил, бензооксазолил, бензо[d]тиазолил, бензотиадиазолил, бензо[b][1,4]диоксепинил, бензо[b][1,4]оксазинил, 1,4-бензодиоксанил, бензонафтофуранил, бензоксазолил, бензодиоксолил, бензодиоксинил, бензоксазолил, бензопиранил, бензопиранонил, бензофуранил, бензофуранонил, бензофуразанил, бензотиазолил, бензотиенил (бензотиофенил), бензотиено[3,2-d]пиримидинил, бензотриазолил, бензо[4,6]имидазо[1,2-а]пиридинил, карбазолил, циннолинил, циклопента[d]пиримидинил, 6,7-дигидро-5Н-циклопента[4,5]тиено[2,3-d]пиримидинил, 5,6-дигидробензо[h]хиназолинил, 5,6-дигидробензо[h]циннолинил, 6,7-дигидро-5Н-бензо[6,7]циклогепта[1,2-с]пиридазинил, дибензофуранил, дибензотиофенил, фуранил, фуразанил, фуранонил, фуро[3,2-с]пиридинил, 5,6,7,8,9,10-гексагидроцикло-окта[d]пиримидинил, 5,6,7,8,9,10-гексагидроциклоокта[d]пиридазинил, 5,6,7,8,9,10-гексагидроциклоокта[d]пиридинил, изотиазолил, имидазолил, индазолил, индолил, индазолил, изоиндолил, индолинил, изоиндолинил, изохинолил, индолизинил, изоксазолил, 5,8-метано-5,6,7,8-тетрагидрохиназолинил, нафтиридинил, 1,6-нафтиридинонил, оксадиазолил, 2-оксоазепинил, оксазолил, оксиранил, 5,6,6а,7,8,9,10,10а-октагидробензо[h]хиназолинил, 1-фенил-1H-пирролил, феназинил, фенотиазинил, феноксазинил, фталазинил, птеридинил, пуринил, пиранил, пирролил, пиразолил, пиразоло[3,4-d]пиримидинил, пиридинил, пиридо[3,2-d]пиримидинил, пиридо[3,4-d]пиримидинил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, пирролил, хиназолинил, хиноксалинил, хинолинил, изохинолинил, тетрагидрохинолинил, 5,6,7,8-тетрагидрохиназолинил, 5,6,7,8-тетрагидробензо[4,5]тиено[2,3-d]пиримидинил, 6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[4,5]тиено[2,3-d]пиримидинил, 5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,5-с]пиридазинил, тиазолил, тиадиазолил, тиапиранил, триазолил, тетразолил, триазинил, тиено[2,3-d]пиримидинил, тиено[3,2-d]пиримидинил, тиено[2,3-с]пиридинил и тиофенил (то есть тиенил). Если в данном описании конкретно не указано иное, гетероарильная группировка возможно замещена одним или более заместителями, независимо представляющими собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, нитро, оксо, тиоксо, триметилсиланил, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)S(O)tRa (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил.

Замещенный гетероарил также включает кольцевые системы, замещенные одним или более заместителями на основе оксида (-O-), как например, пиридинил-N-оксиды.

"Гетероарилалкил" относится к группировке, имеющей арильную группировку, как она описана в данном изобретении, соединенную с алкиленовой группировкой, как она описана в данном изобретении, при этом такое присоединение к остатку молекулы осуществляется через алкиленовую группу.

"Гетероциклоалкил" относится к стабильному 3-18-членному неароматическому кольцевому радикалу, содержащему от двух до двенадцати атомов углерода и от одного до шести гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы. Во всех случаях, когда он появляется в данной заявке, диапазон числовых значений, такой как "3-18" относится к каждому целому числу в заданном диапазоне; например, "3-18 кольцевых атомов" означает, что гетероциклоалкильная группа может состоять из 3 кольцевых атомов, 4 кольцевых атомов и т.д., вплоть до и включая 18 кольцевых атомов. В некоторых воплощениях им является С510гетероциклоалкил. В некоторых воплощениях им является С410гетероциклоалкил. В некоторых воплощениях им является С310гетероциклоалкил. Если в данном описании конкретно не указано иное, гетероциклоалкильный радикал представляет собой моноциклическую, бициклическую, трициклическую или тетрациклическую кольцевую систему, которая может включать конденсированные или соединенные мостиковой связью кольцевые системы. Гетероатомы в гетероциклоалкильном радикале возможно могут быть окислены. Один или более атомов азота, если они присутствуют, возможно кватернизированы. Гетероциклоалкильный радикал является частично или полностью насыщенным. Гетероциклоалкил может быть присоединен к остатку молекулы через любой атом кольца(ец). Примеры таких гетероциклоалкильных радикалов включают, но не ограничиваются этим, диоксоланил, тиенил[1,3]дитианил, декагидроизохинолил, имидазолинил, имидазолидинил, изотиазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, октагидроиндолил, октагидроизоиндолил, 2-оксопиперазинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопирролидинил, оксазолидинил, пиперидинил, пиперазинил, 4-пиперидонил, пирролидинил, пиразолидинил, хинуклидинил, тиазолидинил, тетрагидрофурил, тритианил, тетрагидропиранил, тиоморфолинил, тиаморфолинил, 1-оксо-тиоморфолинил и 1,1-диоксо-тиоморфолинил. Если в данном описании конкретно не указано иное, то гетероциклоалкильная группировка возможно замещена одним или более заместителями, независимо представляющими собой: алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гидрокси, галогено, циано, нитро, оксо, тиоксо, триметилсиланил, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)S(O)tRa (где t равен 1 или 2), -S(O)tORa (где t равен 1 или 2), -S(O)tN(Ra)2 (где t равен 1 или 2) или PO3(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероарил или гетероарилалкил.

"Гетероциклоалкил" также включает бициклические кольцевые системы, где одно неароматическое кольцо, состоящее обычно из 3-7 кольцевых атомов, содержит по меньшей мере 2 атома углерода в дополнение к 1-3 гетероатомам, независимо выбранным из кислорода, серы и азота, а также комбинации, содержащие по меньшей мере один из вышеупомянутых гетероатомов; а другое кольцо, состоящее обычно из 3-7 кольцевых атомов, возможно содержит 1-3 гетероатома, независимо выбранных из кислорода, серы и азота, и не является ароматическим.

"Изомеры" представляют собой разные соединения, имеющие одну и ту же молекулярную формулу. "Стереоизомеры" представляют собой изомеры, которые отличаются только расположением этих атомов в пространстве. "Энантиомеры" представляют собой пару стереоизомеров, которые являются неналагающимися зеркальными отражениями друг друга. Смесь 1:1 пары энантиомеров представляет собой "рацемическую" смесь. Для обозначения рацемической смеси, где целесообразно, используется термин "(±)". "Диастереоизомерами" называют стереоизомеры, имеющие по меньшей мере два асимметрических атома, но которые не являются зеркальными отражениями друг друга. Абсолютная стереохимия определяется по R-S-системе Кана-Ингольда-Прелога. В том случае, когда соединение представляет собой чистый энантиомер, стереохимия для каждого хирального атома углерода может быть определена или как R, или как S. Разделенные соединения, абсолютная конфигурация которых неизвестна, могут быть обозначены как (+) или (-) в зависимости от направления (право- или левовращающие), в котором они вращают плоско-поляризованный свет на длине волны D-линии натрия. Некоторые из соединений, изложенных в данной заявке, содержат один или более асимметрических центров и поэтому могут быть источником энантиомеров, диастереомеров и других стереоизомерных форм, которые можно определить в терминах абсолютной стереохимии как (R)-или (S)-. Подразумевается, что предложенные в изобретении химические структуры, фармацевтические композиции и способы включают все такие возможные изомеры, включая рацемические смеси, оптически чистые формы и промежуточные смеси. Оптически активные (R)- и (S)-изомеры могут быть получены с использованием хиральных синтонов или хиральных реагентов или разделены с использованием традиционных методик. Если соединения, изложенные в данной заявке, содержат олефиновые двойные связи или другие центры геометрической асимметрии и если не указано иное, то подразумевается, что соединения включают как Е, так и Z геометрические изомеры.

"Группировка " относится к конкретному сегменту или функциональной группе молекулы. Под химическими группировками часто понимают химические структуры, встроенные в молекулу или присоединенные к ней.

"Нитро" относится к радикалу -NO2.

"Окса" относится к радикалу -О-.

"Оксо" относится к радикалу =O.

"Таутомеры" представляют собой различающиеся по структуре изомеры, которые взаимопревращаются в результате таутомеризации. "Таутомеризация" представляет собой форму изомеризации и включает прототропную таутомеризацию или таутомеризацию с переносом протона, которая считается подгруппой химии кислотно-основных взаимодействий. Подразумевается, что "прототропная таутомеризация" или "таутомеризация с переносом протона" включает миграцию протона, которая сопровождается изменениями в кратности связи, часто с взаимопревращением одинарной связи и смежной двойной связи. Если существует возможность таутомеризации (например, в растворе), то может быть достигнуто химическое равновесие таутомеров. Примером таутомеризации является кето-енольная таутомеризация. Специфическим примером кето-енольной таутомеризации является взаимопревращение таутомеров пентан-2,4-диона и 4-гидроксипент-3-ен-2-она. Другим примером таутомеризации является фенол-кето-таутомеризация. Специфическим примером фенол-кето-таутомеризации является взаимопревращение таутомеров пиридин-4-ола и пиридин-4(1Н)-она.

Соединения по настоящему изобретению также могут содержать изотопы атомов для одного или более атомов, входящих в состав таких соединений, в неестественных пропорциях. Например, соединения могут быть радиоактивно помечены с помощью радиоактивных изотопов, таких как, например, тритий (3Н), йод-125 (125I) или углерод-14 (14С). Все изотопные варианты соединений по настоящему изобретению, независимо от того, являются они радиоактивными или нет, попадают в объем настоящего изобретения.

"Уходящая(ий) группа или атом" представляет собой любую группу или любой атом, которые в условиях реакции будут отщепляться от исходного вещества, способствуя таким образом прохождению реакции по конкретному сайту. Подходящими примерами таких групп, если не указано иное, являются атомы галогена, группы мезилокси, п-нитробензолсульфонилокси и тозилокси.

Термин "защитная группа" имеет значение, с которым его традиционно ассоциируют в органическом синтезе, то есть это группа, которая избирательно блокирует один или более реакционноспособных сайтов в многофункциональном соединении, таким образом, что химическая реакция может протекать избирательно по другому незащищенному реакционноспособному сайту, и таким образом, что данная группа может быть легко удалена после завершения избирательной реакции. Описан ряд защитных групп, например, в Т.Н. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, третье издание, John Wiley & Sons, New York (1999). Например, защищенной по гидроксигруппе формой является такая, где по меньшей мере одна из групп гидрокси, присутствующих в соединении, защищена гидрокси-защитной группой. Подобным образом могут быть защищены амины и другие реакционноспособные группы.

"Сольват" относится к соединению (например, соединению, выбранному из соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли) в физической ассоциации с одной или более молекулами фармацевтически приемлемого растворителя. Очевидно, что "соединение формулы I" охватывает соединение формулы I и сольваты этого соединения, а также их смеси.

"Замещенный" означает, что упоминаемая группа может быть замещена одной или более чем одной дополнительной группой(ами), по отдельности и независимо выбранной из ацила, алкила, алкиларила, циклоалкила, аралкила, арила, углевода, карбоната, гетероарила, гетероциклоалкила, гидрокси, алкокси, арилокси, меркапто, алкилтио, арилтио, циано, галогено, карбонила, сложного эфира, тиокарбонила, изоцианато, тиоцианато, изотиоцианато, нитро, оксо, пергалогеноалкила, перфторалкила, фосфата, силила, сульфинила, сульфонила, сульфонамидила, сульфоксила, сульфоната, мочевины и амино, включая моно- и ди-замещенные аминогруппы и их защищенные производные. Ди-замещенные аминогруппы охватывают такие группы, которые образуют кольцо вместе с азотом аминогруппы, такие как, например, морфолино. Сами заместители могут быть замещены, например, циклоалкильный заместитель может иметь галогенид, замещенный по одному или более чем одному атому углерода в кольце, и тому подобное. Защитные группы, которые могут образовывать защищенные производные вышеупомянутых заместителей, известны специалистам в данной области техники и могут быть найдены в таких ссылках, как Greene и Wuts, указанных выше.

"Сульфанил" относится к группам: -S-(возможно замещенный алкил), -S-(возможно замещенный арил), -S-(возможно замещенный гетероарил) и -S-(возможно замещенный гетероциклоалкил).

"Сульфинил" относится к группам: -S(O)-H, -S(O)-(возможно замещенный алкил), -S(O)-(возможно замещенный амино), -S(O)-(возможно замещенный арил), -S(O)-(возможно замещенный гетероарил) и -S(O)-(возможно замещенный гетероциклоалкил).

"Сульфонил" относится к группам: -S(O2)-H, -S(O2)-(возможно замещенный алкил), -S(O2)-(возможно замещенный амино), -в(O2)-(возможно замещенный арил), -S(O2)-(возможно замещенный гетероарил) и -S(O2)-(возможно замещенный гетероциклоалкил).

"Сульфонамидил" или "сульфонамидо" относится к радикалу -S(=O)2-NRR, где каждый R независимо выбран из группы, состоящей из водорода, алкила, циклоалкила, арила, гетероарила (связанного через кольцевой углерод) и гетероалициклического радикала (связанного через кольцевой углерод). Группы R в -NRR радикала -S(=O)2-NRR могут быть взяты вместе с азотом, к которому они присоединены, с образованием 4-, 5-, 6- или 7-членного кольца. В некоторых воплощениях им является C110сульфонамидо, где каждый R в сульфонамидо содержит суммарно 1 углерод, 2 углерода, 3 углерода или 4 углерода. Группа сульфонамидо возможно замещена одним или более чем одним из заместителей, описанных для алкила, циклоалкила, арила, гетероарила, соответственно.

"Сульфоксил" относится к радикалу -S(=O)2OH.

"Сульфонат" относится к радикалу -S(=O)2-OR, где R выбран из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, арила, гетероарила (связанного через кольцевой углерод) и гетероалициклического радикала (связанного через кольцевой углерод). Сульфонатная группа возможно замещена по R одним или более чем одним из заместителей, описанных для алкила, циклоалкила, арила, гетероарила, соответственно.

Если замещающие группы определены посредством своих традиционных химических формул, написанных слева направо, то они в равной степени охватывают химически идентичные заместители, которые получались бы в результате написания структуры справо налево, например, -СН2O- есть эквивалент -ОСН2-.

Соединения по настоящему изобретению также включают кристаллические и аморфные формы таких соединений, в том числе, например, полиморфы, псевдополиморфы, сольваты, гидраты, несольватированные полиморфы (включая ангидраты), конформационные полиморфы и аморфные формы соединений, а также их смеси. "Кристаллическая форма", "полиморф" и "новая форма" могут использоваться в данной заявке взаимозаменяемо, и подразумевается, что они включают все кристаллические и аморфные формы соединения, в том числе, например, полиморфы, псевдополиморфы, сольваты, гидраты, несольватированные полиморфы (включая ангидраты), конформационные полиморфы и аморфные формы, а также их смеси, если не упомянута конкретная кристаллическая или аморфная форма.

Химические структуры включают, но не ограничиваются этим, соединения формулы I и все их фармацевтически приемлемые формы. Фармацевтически приемлемые формы соединений, приведенных в данной заявке, включают фармацевтически приемлемые соли, хелаты, нековалентные комплексы, пролекарства и их смеси. В некоторых воплощениях соединения, изложенные в данной заявке, находятся в форме фармацевтически приемлемых солей. Таким образом, термины "химическая структура" и "химические структуры" также охватывают фармацевтически приемлемые соли, хелаты, нековалентные комплексы, пролекарства и смеси.

К тому же, если соединение формулы I получают в виде соли присоединения кислоты, свободное основание может быть получено путем подщелачивания раствора соли кислоты. И наоборот, если продукт представляет собой свободное основание, то соль присоединения, в частности фармацевтически приемлемая соль присоединения, может быть получена путем растворения свободного основания в подходящем органическом растворителе и обработки данного раствора кислотой в соответствии с традиционными методиками получения солей присоединения кислоты из основных соединений. Специалисты в данной области техники распознают различные методологии синтеза, которые могут быть использованы для получения нетоксичных фармацевтически приемлемых солей присоединения.

В одном аспекте настоящего изобретения предложено соединение формулы I.

или его фармацевтически приемлемая соль, где

Wd представляет собой гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

В представляет собой алкил, амино, гетероалкил или группировку формулы II:

,

где Wc представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил,и

q равен целому числу 0, 1, 2, 3 или 4;

X отсутствует или представляет собой -(CH(R9))z-; и z независимо равен целому числу 1, 2, 3 или 4;

Y отсутствует, представляет собой -О-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)2-, -N(R9)-, -C(=O)-(CHR9)z-, -C(=O)-, -N(R9)-C(=O)- или -N(R9)-C(=O)NH-, -N(R9)C(R9)2- или -C(=O)-(CHR9)z-;

R1 представляет собой водород, алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси, нитро, фосфат, мочевину или карбонат;

R2 представляет собой алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси, нитро, фосфат, мочевину или карбонат;

R3 представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси, нитро, арил или гетероарил;

R5, R6, R7 и R8 независимо представляют собой водород, С14алкил, С25алкенил, С25алкинил, С35циклоалкил, С14гетероалкил, С14алкокси, С14амидо, амино, ацил, С14ацилокси, С14 сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро; и

в каждом случае R9 независимо представляет собой водород, d-Сюалкил, С37циклоалкил, гетероциклоалкил или С210гетероалкил.

В некоторых воплощениях В представляет собой незамещенный или замещенный алкил, включая, но не ограничиваясь этим, -(CH2)2-NRaRa, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, фторалкил, карбоциклил, карбоциклилалкил, арил, аралкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил или гетероарилалкил, или NRaRa соединены вместе с образованием циклической группировки, которая включает, но не ограничивается этим, пиперидинил, пиперазинил и морфолинил. В некоторых воплощениях В представляет собой незамещенный или замещенный амино. В некоторых воплощениях В представляет собой незамещенный или замещенный гетероалкил.

.

В некоторых воплощениях В представляет собой группировку формулы II, где Wc представляет собой член, выбранный из группы, состоящей из незамещенного или замещенного арила, замещенного фенила, незамещенного или замещенного гетероарила, включая, но не ограничиваясь этим, пиридин-2-ил, пиридин-3-ил, пиридин-4-ил, пиримидин-4-ил, пиримидин-2-ил, пиримидин-5-ил или пиразин-2-ил, незамещенного или замещенного моноциклического гетероарила, незамещенного или замещенного бициклического гетероарила, гетероарила, содержащего два гетероатома в качестве кольцевых атомов, незамещенного или замещенного гетероарила, содержащего кольцевой атом азота, гетероарила, содержащего два кольцевых атома азота, гетероарила, содержащего азот и серу в качестве кольцевых атомов, незамещенного или замещенного гетероциклоалкила, включая, но не ограничиваясь этим, морфолинил, тетрагидропиранил, пиперазинил и пиперидинил, незамещенного или замещенного циклоалкила, включая, но не ограничиваясь этим, циклопентил и циклогексил.

В некоторых воплощениях В представляет собой одну из следующих группировок:

-СН3 -СН2СН3 -СН(СН3)2

.

В некоторых воплощениях В замещен одним или более чем одним из алкила, гетероалкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, алкокси, амидо, амино, ацила, ацилокси, алкоксикарбонила, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро, при этом каждый алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси или сульфонамидо сам может быть замещен.

В некоторых воплощениях R1 представляет собой член, выбранный из группы, состоящей из водорода, незамещенного или замещенного алкила, незамещенного или замещенного гетероалкила, незамещенного или замещенного алкенила, незамещенного или замещенного алкинила, незамещенного или замещенного циклоалкила или незамещенного или замещенного гетероциклоалкила. В некоторых воплощениях R1 представляет собой незамещенный или замещенный арил, незамещенный или замещенный арилалкил, незамещенный или замещенный гетероарил или незамещенный или замещенный гетероарилалкил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой незамещенный или замещенный алкокси, незамещенный или замещенный амидо, незамещенный или замещенный амино. В некоторых воплощениях R1 представляет собой незамещенный или замещенный ацил, незамещенный или замещенный ацилокси, незамещенный или замещенный алкоксикарбонил или незамещенный или замещенный сульфонамидо. В некоторых воплощениях R1 представляет собой галогено, который включает -Cl, -F, -I и -Вr. В некоторых воплощениях R1 выбран из группы, состоящей из циано, гидрокси, нитро, незамещенного или замещенного фосфата, незамещенной или замещенной мочевины и карбоната.

В некоторых воплощениях, когда R1 представляет собой алкил, R1 представляет собой метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, втop-бутил, пентил, гексил или гептил.

В некоторых воплощениях, когда R1 представляет собой алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил, сульфонамидо или гидрокси, R1 замещен фосфатом, или незамещенной мочевиной, или замещенной мочевиной, или карбоновой кислотой или карбонатом.

В некоторых воплощениях, когда R1 представляет собой алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо, R1 замещен одним или более чем одним из алкила, гетероалкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила, арилалкила, гетероарила, гетероарилалкила, алкокси, амидо, амино, ацила, ацилокси, алкоксикарбонила, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро, при этом каждый алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо сам может быть замещен.

В некоторых воплощениях R2 представляет собой член, выбранный из группы, состоящей из незамещенного или замещенного алкила, незамещенного или замещенного гетероалкила, незамещенного или замещенного алкенила, незамещенного или замещенного алкинила, незамещенного или замещенного циклоалкила и незамещенного или замещенного гетероциклоалкила. В некоторых воплощениях R2 представляет собой незамещенный или замещенный арил, незамещенный или замещенный арилалкил, незамещенный или замещенный гетероарил или незамещенный или замещенный гетероарилалкил. В некоторых воплощениях R2 представляет собой незамещенный или замещенный алкокси, незамещенный или замещенный амидо, незамещенный или замещенный амино. В некоторых воплощениях R2 представляет собой незамещенный или замещенный ацил, незамещенный или замещенный ацилокси, незамещенный или замещенный алкоксикарбонил или незамещенный или замещенный сульфонамидо. В некоторых воплощениях R2 представляет собой галогено, который представляет собой -I, -F, -Cl или -Вr. В некоторых воплощениях R2 выбран из группы, состоящей из циано, гидрокси, нитро, карбоновой кислоты и карбоната. В некоторых воплощениях R2 представляет собой незамещенный или замещенный фосфат. В некоторых воплощениях R2 представляет собой незамещенную или замещенную мочевину. В некоторых воплощениях, когда R2 представляет собой алкил, R2 представляет собой метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, тpeт-бутил, втор-бутил, пентил, гексил или гептил.

В некоторых воплощениях, когда R2 представляет собой алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил, сульфонамидо или гидрокси, он замещен фосфатом, замещен мочевиной или замещен карбонатом.

В некоторых воплощениях, когда R2 представляет собой алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо, он замещен одним или более чем одним из алкила, гетероалкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, алкокси, амидо, амино, ацила, ацилокси, алкоксикарбонила, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро, при этом каждый алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо сам может быть замещен.

В некоторых воплощениях q равен целому числу 0. В некоторых воплощениях q равен целому числу 1. В некоторых воплощениях q равен целому числу 2. В некоторых воплощениях q равен целому числу 3. В некоторых воплощениях q равен целому числу 4.

В некоторых воплощениях соединения формулы I R3 представляет собой член, выбранный из группы, состоящей из водорода, незамещенного или замещенного алкила, незамещенного или замещенного алкенила и незамещенного или замещенного алкинила. В некоторых воплощениях R3 представляет собой незамещенный или замещенный арил, незамещенный или замещенный гетероарил, незамещенный или замещенный циклоалкил или незамещенный или замещенный гетероциклоалкил. В некоторых воплощениях R3 представляет собой незамещенный или замещенный алкокси, незамещенный или замещенный амидо, незамещенный или замещенный амино. В некоторых воплощениях R3 представляет собой незамещенный или замещенный ацил, незамещенный или замещенный ацилокси, незамещенный или замещенный алкоксикарбонил или незамещенный или замещенный сульфонамидо. В некоторых воплощениях R3 представляет собой галогено, который представляет собой -I, -F, -Cl или -Вr.

В некоторых воплощениях R3 выбран из группы, состоящей из циано, гидрокси и нитро. В некоторых воплощениях, когда R3 представляет собой алкил, R3 представляет собой метил, этил, пропил, изопропил, w-бутил, трет-бутил, втор-бутил, пентил, гексил или гептил. В некоторых воплощениях R3 представляет собой -CF3.

В некоторых воплощениях, когда R3 представляет собой алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо, он замещен одним или более чем одним из алкила, гетероалкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, алкокси, амидо, амино, ацила, ацилокси, алкоксикарбонила, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро, причем каждый алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо сам может быть замещен.

В некоторых воплощениях соединения формулы I R5 представляет собой водород, незамещенный или замещенный алкил (включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14алкил). В некоторых воплощениях R5 представляет собой незамещенный или замещенный алкенил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С26алкенил. В некоторых воплощениях R5 представляет собой незамещенный или замещенный алкинил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С26алкинил. В некоторых воплощениях R5 представляет собой незамещенный или замещенный циклоалкил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С35циклоалкил. В некоторых воплощениях R5 представляет собой незамещенный или замещенный гетероциклоалкил. В некоторых воплощениях R5 представляет собой незамещенный или замещенный гетероалкил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14гетероалкил. В некоторых воплощениях R5 представляет собой незамещенный или замещенный алкокси, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14алкокси. В некоторых воплощениях R5 представляет собой незамещенный или замещенный амидо, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14амидо. В некоторых воплощениях R5 представляет собой незамещенный или замещенный амино. В некоторых воплощениях R5 представляет собой незамещенный или замещенный ацил, незамещенный или замещенный ацилокси, незамещенный или замещенный С14ацилокси, незамещенный или замещенный алкоксикарбонил, незамещенный или замещенный сульфонамидо или незамещенный или замещенный С14сульфонамидо. В некоторых воплощениях R5 представляет собой галогено, который представляет собой -I, -F, -Cl или -Вr. В некоторых воплощениях R5 выбран из группы, состоящей из циано, гидрокси и нитро. В некоторых других воплощениях R5 представляет собой -СН3, -СН2СН3, н-пропил, изопропил, -ОСН3, -ОСН2СН3 или -CF3.

В некоторых воплощениях, когда R5 представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероалкил, ацил, алкокси, амидо, амино, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо, R5 возможно замещен одним или более чем одним из алкила, гетероалкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, алкокси, амидо, амино, ацила, ацилокси, алкоксикарбонила, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро, причем каждый алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо сам может быть замещен.

В некоторых воплощениях соединения формулы I R6 представляет собой водород, незамещенный или замещенный алкил (включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14алкил). В некоторых воплощениях R6 представляет собой незамещенный или замещенный алкенил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С25алкенил. В некоторых воплощениях R6 представляет собой незамещенный или замещенный алкинил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С25алкинил. В некоторых воплощениях R6 представляет собой незамещенный или замещенный циклоалкил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С35циклоалкил. В некоторых воплощениях R6 представляет собой незамещенный или замещенный гетероциклоалкил. В некоторых воплощениях R6 представляет собой незамещенный или замещенный гетероалкил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14гетероалкил. В некоторых воплощениях R6 представляет собой незамещенный или замещенный алкокси, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14алкокси. В некоторых воплощениях R6 представляет собой незамещенный или замещенный амидо, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14амидо. В некоторых воплощениях R6 представляет собой незамещенный или замещенный амино. В некоторых воплощениях R6 представляет собой незамещенный или замещенный ацил, незамещенный или замещенный ацилокси, незамещенный или замещенный С14ацилокси, незамещенный или замещенный алкоксикарбонил, незамещенный или замещенный сульфонамидо или незамещенный или замещенный С14сульфонамидо. В некоторых воплощениях R6 представляет собой галогено, который представляет собой -I, -F, -Cl или -Вr. В некоторых воплощениях R6 выбран из группы, состоящей из циано, гидрокси и нитро. В некоторых других воплощениях R6 представляет собой -СН3, -СН2СН3, н-пропил, изопропил, -ОСН3, -ОСН2СН3 или -CF3.

В некоторых воплощениях, когда R6 представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероалкил, ацил, алкокси, амидо, амино, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо, R6 возможно замещен одним или более чем одним из алкила, гетероалкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, алкокси, амидо, амино, ацила, ацилокси, алкоксикарбонила, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро, причем каждый алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо сам может быть замещен.

В некоторых воплощениях соединения формулы I R7 представляет собой водород, незамещенный или замещенный алкил (включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14алкил). В некоторых воплощениях R7 представляет собой незамещенный или замещенный алкенил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С25алкенил. В некоторых воплощениях R7 представляет собой незамещенный или замещенный алкинил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С25алкинил. В некоторых воплощениях R7 представляет собой незамещенный или замещенный циклоалкил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С35циклоалкил. В некоторых воплощениях R7 представляет собой незамещенный или замещенный гетероциклоалкил. В некоторых воплощениях R7 представляет собой незамещенный или замещенный гетероалкил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14гетероалкил. в некоторых воплощениях R7 представляет собой незамещенный или замещенный алкокси, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14алкокси. В некоторых воплощениях R7 представляет собой незамещенный или замещенный амидо, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14амидо. В некоторых воплощениях R7 представляет собой незамещенный или замещенный амино. В некоторых воплощениях R7 представляет собой незамещенный или замещенный ацил, незамещенный или замещенный ацилокси, незамещенный или замещенный С14ацилокси, незамещенный или замещенный алкоксикарбонил, незамещенный или замещенный сульфонамидо или незамещенный или замещенный С14сульфонамидо. В некоторых воплощениях R7 представляет собой галогено, который представляет собой -I, -F, -Cl или -Вr. В некоторых воплощениях R7 выбран из группы, состоящей из циано, гидрокси и нитро. В некоторых других воплощениях R7 представляет собой -СН3, -СН2СН3, н-пропил, изопропил, -ОСН3, -ОСН2СН3 или -CF3.

В некоторых воплощениях, когда R7 представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероалкил, ацил, алкокси, амидо, амино, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо, R7 возможно замещен одним или более чем одним из алкила, гетероалкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, алкокси, амидо, амино, ацила, ацилокси, алкоксикарбонила, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро, причем каждый алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо сам может быть замещен.

В некоторых воплощениях соединения формулы I R8 представляет собой водород, незамещенный или замещенный алкил (включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14алкил). В некоторых воплощениях R8 представляет собой незамещенный или замещенный алкенил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С25алкенил. В некоторых воплощениях R8 представляет собой незамещенный или замещенный алкинил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С25алкинил. В некоторых воплощениях R8 представляет собой незамещенный или замещенный циклоалкил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С35циклоалкил. В некоторых воплощениях R8 представляет собой незамещенный или замещенный гетероциклоалкил. В некоторых воплощениях R8 представляет собой незамещенный или замещенный гетероалкил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14гетероалкил. В некоторых воплощениях R8 представляет собой незамещенный или замещенный алкокси, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14алкокси. В некоторых воплощениях R8 представляет собой незамещенный или замещенный амидо, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С14амидо. В некоторых воплощениях R8 представляет собой незамещенный или замещенный амино. В некоторых воплощениях R8 представляет собой незамещенный или замещенный ацил, незамещенный или замещенный ацилокси, незамещенный или замещенный С14ацилокси, незамещенный или замещенный алкоксикарбонил, незамещенный или замещенный сульфонамидо или незамещенный или замещенный С14 сульфонамидо. В некоторых воплощениях R8 представляет собой галогено, который представляет собой -I, -F, -Cl или -Вr. В некоторых воплощениях R8 выбран из группы, состоящей из циано, гидрокси и нитро. В некоторых других воплощениях R8 представляет собой -СН3, -СН2СН3, н-пропил, изопропил, -ОСН3, -ОСН2СН3 или -CF3.

В некоторых воплощениях, когда R8 представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероалкил, ацил, алкокси, амидо, амино, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо, R8 возможно замещен одним или более чем одним из алкила, гетероалкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, алкокси, амидо, амино, ацила, ацилокси, алкоксикарбонила, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро, причем каждый алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо сам может быть замещен.

В некоторых воплощениях соединения формулы I R5, R6, R7 и R8 представляют собой Н.

В некоторых воплощениях соединения формулы I X отсутствует. В некоторых воплощениях X представляет собой -(CH(R9))z; и z независимо равен целому числу 1, 2, 3 или 4.

В некоторых воплощениях R9 представляет собой незамещенный или замещенный алкил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный C110алкил. В некоторых воплощениях R9 представляет собой незамещенный или замещенный циклоалкил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С37циклоалкил. В некоторых воплощениях R9 представляет собой метил или водород. В некоторых воплощениях R9 представляет собой незамещенный или замещенный гетероциклоалкил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С210гетероалкил. В некоторых воплощениях R9 представляет собой незамещенный или замещенный гетероалкил, включая, но не ограничиваясь этим, незамещенный или замещенный С210гетероалкил.

Когда R9 представляет собой любое из приведенного выше, в некоторых воплощениях X представляет собой -СН2-, -СН2СН2-, -СН2СН2СН2-, -СН(СН3)-или -СН(СН2СН3)-. В некоторых воплощениях, когда X представляет собой -СН(СН3)-, -СН(СН3)- находится в (S)- или (R)-стереохимической конфигурации.

В некоторых воплощениях соединения формулы I Y отсутствует. В некоторых воплощениях Y представляет собой -О-, -S-, -S(=0)-, -S(=O)2-, -С(=O)-, -N(R9)(C=O)-, -N(R9)(C=O)NH-, -N(R9)C(R9)2- (такие как например -N(R9)CH2-, конкретно -N(CH3)CH2-, N(CH(CH3)2)CH2- или N(CH2CH3)CH2-), -N(R9)-, -N(CH3)-, -N(CH2CH3)- или -N(CH(CH3)2)-. В некоторых воплощениях Y представляет собой -C(=O)-(CHR9)z-; и z независимо равен целому числу 1, 2, 3 или 4.

В некоторых воплощениях X-Y представляет собой -СН2-, -CH2-N(CH3), -CH(CH3)-NH-, (S) -CH(GH3)-NH- или (R) -CH(CH3)-NH-. В некоторых воплощениях X-Y представляет собой -N(CH3)-CH2-, N(CH2CH3)CH2-, -N(CH(CH3)2)CH2- или -NHCH2-.

В некоторых воплощениях соединения формулы I Wd представляет собой член, выбранный из группы, состоящей из незамещенного или замещенного гетероциклоалкила, незамещенного или замещенного арила и незамещенного или замещенного гетероарила. В некоторых воплощениях Wd представляет собой незамещенный или замещенный моноциклический гетероарил или незамещенный или замещенный бициклический гетероарил. В некоторых воплощениях Wd представляет собой бициклический гетероарил, имеющий по меньшей мере один гетероатом, например, бициклический гетероарил, имеющий по меньшей мере один кольцевой атом азота. В некоторых воплощениях Wd представляет собой бициклический гетероарил, имеющий по меньшей мере два гетероатома, например, бициклический гетероарил, имеющий по меньшей мере два кольцевых атома азота. В некоторых воплощениях Wd представляет собой бициклический гетероарил, имеющий два гетероатома в кольце, которое присоединено к XY. В некоторых воплощениях Wd представляет собой бициклический гетероарил, имеющий два кольцевых атома азота в кольце, к которому присоединен XY. В некоторых воплощениях Wd представляет собой бициклический гетероарил, имеющий четыре гетероатома, например, бициклический гетероарил, имеющий четыре кольцевых атома азота. В некоторых воплощениях Wd представляет собой незамещенный или замещенный 4-амино-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил, незамещенный или замещенный 7-амино-2-метил-2Н-пиразоло[4,3-d]пиримидин-3-ил, незамещенный или замещенный 6-метиленил-9Н-пурин-6-ил или незамещенный или замещенный 6-амино-9Н-пурин-9-ил.

В некоторых воплощениях Wd представляет собой одно из следующего:

,

где Ra представляет собой водород, галогено, фосфат, мочевину, карбонат, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероалкил или гетероциклоалкил;

R11 представляет собой Н, алкил, галогено, амино, амидо, гидрокси или алкокси, и

R12 представляет собой Н, алкил, циано, алкинил, алкенил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил, циклоалкил, амино, карбоновую кислоту, алкоксикарбонил или амидо.

В некоторых воплощениях Wd представляет собой:

.

В некоторых воплощениях Wd представляет собой:

.

В некоторых воплощениях Wd представляет собой:

.

В некоторых воплощениях Wd представляет собой:

.

В некоторых воплощениях Wd Ra представляет собой член, выбранный из группы, состоящей из водорода, галогено, фосфата, мочевины, карбоната, незамещенного или замещенного алкила, незамещенного или замещенного алкенила, незамещенного или замещенного алкинила, незамещенного или замещенного циклоалкила, незамещенного или замещенного гетероалкила и незамещенного или замещенного гетероциклоалкила.

В некоторых воплощениях Wd, когда Ra представляет собой алкил, алкинил, циклоалкил, гетероалкил или гетероциклоалкил, он замещен фосфатом, мочевиной или карбонатом.

В некоторых воплощениях соединения формулы I R11 является членом группы, состоящей из водорода, незамещенного или замещенного алкила и галогено, который включает -I, -F, -Cl или -Вr. В некоторых воплощениях R11 представляет собой незамещенный или замещенный амино, незамещенный или замещенный амидо, гидрокси или незамещенный или замещенный алкокси. В некоторых воплощениях R11 представляет собой фосфат, незамещенную или замещенную мочевину или карбонат.

В некоторых воплощениях, когда R11 представляет собой алкил, амино, амидо, гидрокси или алкокси, он замещен фосфатом, мочевиной или карбонатом.

В некоторых воплощениях соединения формулы I -X-Y-Wd представляет собой одну из следующих группировок:

В некоторых воплощениях соединения формулы I R12 является членом группы, состоящей из водорода, циано, галогено, незамещенного или замещенного алкила и незамещенного или замещенного алкинила, незамещенного или замещенного алкенила. В некоторых воплощениях R12 представляет собой незамещенный или замещенный арил. В некоторых воплощениях R12 представляет собой незамещенный или замещенный гетероарил, который включает, но не ограничивается этим, гетероарил, имеющий 5-членное кольцо, гетероарил, имеющий шестичленное кольцо, гетероарил по меньшей мере с одним кольцевым атомом азота, гетероарил с двумя кольцевыми атомами азота, моноциклический гетероарил и бициклический гетероарил. В некоторых воплощениях R12 представляет собой незамещенный или замещенный гетероциклоалкил, который включает, но не ограничивается этим, гетероциклоалкил с одним кольцевым атомом азота, гетероциклоалкил с одним кольцевым атомом кислорода, R12 представляет собой гетероциклоалкил с одним кольцевым атомом серы, 5-членный гетероциклоалкил, 6-членный гетероциклоалкил, насыщенный гетероциклоалкил, ненасыщенный гетероциклоалкил, гетероциклоалкил, имеющий ненасыщенную группировку, присоединенную к гетероциклоалкильному кольцу, гетероциклоалкил, замещенный оксо, и гетероциклоалкил, замещенный двумя оксо. В некоторых воплощениях R12 представляет собой незамещенный или замещенный циклоалкил, включая, но не ограничиваясь этим, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклоалкил, замещенный одним оксо, циклоалкил, имеющий ненасыщенную группировку, присоединенную к циклоалкильному кольцу. В некоторых воплощениях R12 представляет собой незамещенный или замещенный амидо, карбоновую кислоту, незамещенный или замещенный ацилокси или незамещенный или замещенный алкоксикарбонил.

В некоторых воплощениях, когда R12 представляет собой алкил, алкинил, алкенил, арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил, он замещен фосфатом. В некоторых воплощениях, когда R12 представляет собой алкил, алкинил, алкенил, арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил, он замещен мочевиной. В некоторых воплощениях, когда R12 представляет собой алкил, алкинил, алкенил, арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил, он замещен карбонатом.

В некоторых воплощениях, когда R12 представляет собой алкил, алкинил, алкенил, арил, гетероарил, гетероциклоалкил, циклоалкил, алкоксикарбонил, амидо или ацилокси, он замещен одним или более чем одним из алкила, гетероалкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, алкокси, амидо, амино, ацила, ацилокси, алкоксикарбонила, сульфонамидо, галогено, циано, гидрокси или нитро, причем каждый алкил, гетероалкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, алкокси, амидо, амино, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил или сульфонамидо сам может быть замещен.

В некоторых воплощениях R12 в Wd представляет собой одну из следующих группировок:

-CN, -Br, -Cl, -I, -H, -Me, -Et, -изо-Рr,

В некоторых воплощениях Wd представляет собой пиразолопиримидин формулы III:

где R11 представляет собой Н, алкил, галогено, амино, амидо, гидрокси или алкокси; и R12 представляет собой Н, алкил, алкинил, алкенил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил. В некоторых воплощениях R11 представляет собой амино; и R12 представляет собой Н, алкил, алкинил, алкенил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил. В некоторых воплощениях R11 представляет собой амино; и R12 представляет собой алкил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил. В некоторых воплощениях R11 представляет собой амино; и R12 представляет собой моноциклический гетероарил. В некоторых воплощениях R11 представляет собой амино; и R12 представляет собой бициклический гетероарил. В некоторых воплощениях R11 представляет собой амино; и R12 представляет собой циано, амино, карбоновую кислоту, ацилокси, алкоксикарбонил или амидо.

В некоторых воплощениях изобретения соединение формулы I представляет собой соединение, имеющее структуру формулы IV:

.

В некоторых воплощениях соединения формулы IV R11 представляет собой Н, алкил, галогено, амино, амидо, гидрокси или алкокси; и R12 представляет собой Н, алкил, алкинил, алкенил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил. В другом воплощении R11 представляет собой амино; и R12 представляет собой алкил, алкенил, гетероарил, арил или гетероциклоалкил. В некоторых воплощениях R11 представляет собой амино; и R12 представляет собой циано, амино, карбоновую кислоту, алкоксикарбонил или амидо.

В некоторых воплощениях соединение формулы IV представляет собой соединение формулы IV-A:

.

Согласно изобретению также предложены соединения формулы I, имеющие структуру любой из формул V, V-A, V-B, VI или VI-A:

Любые из описанных элементов и их заместителей для соединений формулы I могут быть использованы в любой комбинации.

В одном аспекте R3 представляет собой Н, СН3, CF3, Cl или F; В представляет собой группировку формулы II:

,

где Wc представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил; R1 представляет собой Н, -F, -Cl, -CN, -СН3, изопропил, -CF3, -ОСН3, нитро или фосфат; R2 представляет собой галогено, гидрокси, циано или нитро; q равен целому числу 0, 1, 2, 3 или 4; R5, R6, R7 и R8 представляют собой Н; X отсутствует или представляет собой (CH2)z; z равен 1; Y отсутствует или представляет собой -N(R9)-; R9 представляет собой водород, C110алкил, С37циклоалкил или С210гетероалкил; и Wd представляет собой пиразолопиримидин или пурин.

В другом аспекте R3 представляет собой Н, СН3, CF3, Cl или F; В представляет собой группировку формулы II, которая представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил, R1 представляет собой Н, -F, -Cl, -CN, -СН3, изопропил, -CF3, -ОСН3, нитро или фосфат; R2 представляет собой галогено, гидрокси, циано или нитро; q равен 0, 1 или 2; R5, R6, R7 и R8 представляют собой Н; X отсутствует или представляет собой (CH2)z; z равен 1; Y отсутствует или представляет собой -N(R9)-; R9 представляет собой водород, метил или этил; Wd представляет собой: или R11 представляет собой амино; и R12 представляет собой Н, алкил, алкинил, алкенил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил.

В другом аспекте R3 представляет собой Н, СН3, CF3, Cl или F; В представляет собой группировку формулы II, которая представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил, R1 представляет собой Н, -F, -Cl, -CN, -СН3, изопропил, -CF3, -ОСН3, нитро или фосфат; R2 представляет собой галогено, гидрокси, циано или нитро; q равен 0, 1 или 2; X представляет собой (CH2)z; z равен 1; R5, R6, R7 и R8 представляют собой Н; Y отсутствует; и Wd представляет собой: ; R11 представляет собой амино; и R12 представляет собой Н, алкил, алкинил, алкенил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил.

В другом аспекте R3 представляет собой Н, СН3, CF3, Cl или F; В представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил, R1 представляет собой Н, -F, -Cl, -CN, -СН3, изопропил, -CF3, -ОСН3, нитро или фосфат; R2 представляет собой галогено, гидрокси, циано или нитро; q равен О, 1 или 2; R5, R6, R7 и R8 представляют собой Н; X представляет собой (СН2)z; z равен 1; X представляет собой (СН2)z; z равен 1; Y представляет собой -N(R9)-; R9 представляет собой водород, метил или этил; и Wd представляет собой ;

R11 представляет собой амино; и R12 представляет собой Н, алкил, алкинил, алкенил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил.

В другом аспекте R3 представляет собой арил, гетероарил, Н, СН3, CF3, Cl или F; В представляет собой алкил или группировку формулы II:

,

где Wc представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил; и q равен целому числу 0, 1, 2, 3 или 4; R1 представляет собой Н, -F, -Cl, -CN, -СН3, изопропил, -CF3, -ОСН3, нитро или фосфат; R2 представляет собой галогено, гидрокси, циано, нитро или фосфат; q равен 0, 1 или 2; R5, R6, R7 и R8 представляют собой Н; X отсутствует или представляет собой (CH(R9))z; z представляет собой целое число 1, 2, 3 или 4; Y отсутствует, представляет собой -N(R9)- или -N(R9)CH(R9)-; R9 представляет собой водород, алкил, циклоалкил или гетероалкил; и Wd представляет собой пиразолопиримидин или пурин.

В другом аспекте R3 представляет собой арил, гетероарил, Н, СН3, CF3, Cl или F; В представляет собой алкил или группировку формулы II, которая представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил; R1 представляет собой Н, -F, -Cl, -CN, -СН3, изопропил, -CF3, -ОСН3, нитро или фосфат; R2 представляет собой галогено, гидрокси, циано, нитро или фосфат; q равен 0, 1 или 2; R5, R6, R7 и R8 представляют собой Н; X отсутствует или представляет собой (CH(R9))z; z равен целому числу 1, 2, 3 или 4; Y отсутствует, представляет собой -N(R9)- или -N(R9)CH(R9)-; R9 представляет собой водород, метил или этил; Wd представляет собой: или ; R11 представляет собой амино; и R12 представляет собой Н, алкил, алкинил, алкенил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил, циклоалкил, циано, амино, карбоновую кислоту, алкоксикарбонил или амидо.

В другом аспекте R3 представляет собой Н, СН3, CF3, Cl или F; В представляет собой алкил или группировку формулы II, которая представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил; R1 представляет собой Н, -F, -Cl, -CN, -СН3, изопропил, -CF3, -ОСН3, нитро или фосфат; R2 представляет собой галогено, гидрокси, циано, нитро или фосфат; q равен 0, 1 или 2; R5, R6, R7 и R8 представляют собой Н; X представляет собой (CH(R9))z; z равен целому числу 1; Y отсутствует или представляет собой -N(R9)CH(R9)-; R9 представляет собой водород, метил или этил; Wd представляет собой: ; R11 представляет собой амино; и R12 представляет собой Н, алкил, алкинил, алкенил, галогено, арил, гетероарил, гетероциклоалкил, циклоалкил, циано, амино, карбоновую кислоту, алкоксикарбонил или амидо.

В другом аспекте R3 представляет собой арил, гетероарил, Н, СН3, CF3, Cl или F; В представляет собой группировку формулы II, которая представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил; R1 представляет собой Н, -F, -Cl, -CN, -СН3, изопропил, -CF3, -ОСН3, нитро или фосфат; R2 представляет собой галогено, гидрокси, циано, нитро или фосфат; q равен 0, 1 или 2; R5, R6, R7 и R8 представляют собой Н; X отсутствует или представляет собой (CH(R9))z; z равен целому числу 1, 2, 3 или 4; Y отсутствует, представляет собой -N(R9)- или -N(R9)CH(R9)-; R9 представляет собой водород, метил или этил; и Wd представляет собой: .

В другом аспекте R3 представляет собой арил, гетероарил, Н, СН3, CF3, Cl или F; В представляет собой группировку формулы II, которая представляет собой арил, гетероарил, гетероциклоалкил или циклоалкил; R1 представляет собой Н, -F, -Cl, -CN, -СН3, изопропил, -CF3, -ОСН3, нитро или фосфат; R2 представляет собой галогено, гидрокси, циано, нитро или фосфат; q равен 0, 1 или 2; R5, R6, R7 и R8 представляют собой Н; X отсутствует; Y представляет собой -N(R9)CH(R9)-; R9 представляет собой водород, метил или этил; и Wd представляет собой: .

Описаны дополнительные типичные соединения по настоящему изобретению, имеющие подструктуру формулы IV-A.

.

Некоторые иллюстративные соединения по настоящему изобретению, имеющие структуру формулы IV-A, включают соединения, в которых R3 представляет собой -Н, -Cl, -F или -СН3, в комбинации с любой группировкой В, описанной в Таблице 1, и любым R12, как он описан в Таблице 2. Соединение формулы IV-A включает любую комбинацию R3, В и R12. Дополнительные типичные соединения формулы IV-A проиллюстрированы в Таблице 4.

Таблица 1
Иллюстративные группировки В в соединениях формулы I
№ под
класса
В № под
класса
В № под
класса
В
В-1 В-2 В-3 -СН(СН3)2
В-4 В-5 В-6
В-7 В-8 В-9
В-10 В-11 В-12
В-13 В-14 В-15
В-16 В-17 В-18
В-19 В-20 В-21
В-22 В-23 В-24
В-25 B-26 B-27
В-28 B-29 B-30
В-31 B-32 B-33
В-34 B-35 B-36
В-37 B-38 B-39
В-40 B-41 B-42
В-43 B-44 B-45
В-46 B-47 B-48
В-49 B-50 B-51
В-52 B-53 B-54
В-55 B-56 B-57
В-58 B-59 B-60
В-61 B-62 B-63
В-64 B-65 B-66
В-67 B-68 B-69
В-70 B-71 B-72
В-73 B-74 B-75
В-76 B-77 B-78
В-79 B-80 B-81
В-82 B-83 B-84
В-85 B-86 B-87 -CH3
В-88 -CH2CH3 B-89 B-90
В-91 В-92 В-93
В-94 В-95 В-96
В-97 В-98 В-99
В-100 В-101 В-102
Таблица 2
Иллюстративные примеры R12 в соединениях формулы I
№ под-
класса
R12 № под-
класса
R12 № под-
класса
R12
12-1 -CN 12-2 -Вr 12-3 -Cl
12-4 -СН2СН3 12-5 -СН3 12-6 -СН(СН3)2
12-7 12-8 12-9
12-10 12-11 12-12
12-13 12-14 12-15
12-16 12-17 12-18
12-19 12-20 12-21
12-22 12-23 12-24
12-25 12-26 12-27
12-28 12-29 12-30
12-31 12-32 12-33
12-34 12-35 -H 12-36
12-37 12-38 12-39
12-40 12-41 12-42
12-43 12-44 12-45
12-46 2-47 2-48
12-49 12-50 12-51
12-52 12-53 12-54
12-55 12-56 12-57
12-58 12-59 12-60
12-61 -I 12-62 12-63
12-64 12-65 12-66
12-67 12-68 12-69
12-70 12-71 12-72
12-73 12-74 12-75
12-76 12-77 12-78
12-79 12-80 12-81
12-82 12-83 12-84
12-85 12-86 12-87
12-88 12-89 12-90
12-91 12-92 12-93
12-94 12-95 12-96

Другие иллюстративные соединения по настоящему изобретению имеют структуру формулы V-A, в которой В представляет собой группировку, описанную в Таблице 2, в комбинации с R3, который представляет собой -Н, -Cl, -F или -СН3; и R9, который представляет собой -Н, -СН3 или -СН2СН3.

.

Другие иллюстративные соединения по настоящему изобретению имеют структуру формулы V-B, в которой В представляет собой группировку, описанную в Таблице 2, в комбинации с R3, который представляет собой -Н, -Cl, -F или -СН3; и R9, который представляет собой -Н, -СН3 или -СН2СН3.

Другие иллюстративные соединения по настоящему изобретению имеют структуру формулы VI-A, в которой В представляет собой группировку, описанную в Таблице 2, в комбинации с R3, который представляет собой -Н, -Cl, -F или -СН3; и R9, который представляет собой -Н, -СН3 или -СН2СН3.

Дополнительные типичные соединения по настоящему изобретению включают, но не ограничиваются этим, следующие:

.

Химические структуры, изложенные в данной заявке, могут быть синтезированы в соответствии с одной или более иллюстративными схемами в данной заявке и/или методиками, хорошо известными в данной области техники.

Если не указано иначе, реакции, изложенные в данной заявке, протекают при атмосферном давлении, в общем случае в диапазоне температур от -10°С до 200°С. Более того, за исключением случаев, когда указано иное, подразумевается, что продолжительность реакций и условия указаны приблизительно, например, они протекают при примерно атмосферном давлении в диапазоне температур от примерно -10°С до примерно 110°С в течение периода времени от примерно 1 до примерно 24 часов; продолжительность реакций, оставляемых на ночь, в среднем составляет период времени примерно 16 часов.

Термины "растворитель", "органический растворитель" или "инертный растворитель" каждый означают растворитель, инертный в условиях описываемой при этом реакции, включая, например, бензол, толуол, ацетонитрил, тетрагидрофуран ("THF"), диметилформамид ("DMF"), хлороформ, метиленхлорид (или дихлорметан (DCM)), диэтиловый эфир, метанол, N-метилпирролидон ("NMP"), пиридин и тому подобное. Если не указано иначе, растворители, используемые в реакциях, изложенных в данной заявке, являются инертными органическими растворителями. Если не указано иначе, на каждый грамм лимитирующего реагента, эквивалентный объем составляет один см3 (сс) (или мл) растворителя.

При желании, выделение и очистка химических структур и промежуточных соединений, изложенных в данной заявке, могут быть осуществлены с использованием любой подходящей методики разделения или очистки, такой как, например, фильтрация, экстракция, кристаллизация, колоночная хроматография, тонкослойная хроматография или толстослойная хроматография или комбинация этих методик. Конкретные иллюстрации подходящих методик разделения и выделения могут быть получены посредством ссылки на приведенные ниже примеры. Тем не менее, также могут быть использованы другие эквивалентные методики разделения или выделения.

При желании, (R)- и (S)-изомеры соединений по настоящему изобретению, если они присутствуют, могут быть разделены способами, известными специалистам в данной области техники, например, посредством образования диастереоизомерных солей или комплексов, которые могут быть разделены, например, кристаллизацией; посредством образования диастереоизомерных производных, которые могут быть разделены, например, кристаллизацией, газо-жидкостной или жидкостной хроматографией; посредством избирательного взаимодействия одного энантиомера с энантиомер-специфичным реагентом, например ферментативного окисления или восстановления, с последующим разделением модифицированных и немодифицированных энантиомеров; или посредством газо-жидкостной или жидкостной хроматографии в хиральном окружении, например на хиральной подложке, такой как диоксид кремния со связанным хиральным лигандом, или в присутствии хирального растворителя. Альтернативно, конкретный энантиомер может быть синтезирован в результате асимметрического синтеза с использованием оптически активных реагентов, субстратов, катализаторов или растворителей или в результате превращения одного энантиомера в другой путем асимметрической трансформации.

Соединения, изложенные в данной заявке, возможно могут быть приведены в контакт с фармацевтически приемлемой кислотой с образованием соответствующих солей присоединения кислоты.

Большинство возможно замещенных исходных соединений и других реагентов имеются в продаже, например у Aldrich Chemical Company (Milwaukee, WI), или могут быть легко получены специалистами в данной области техники с использованием обычно применяемой методологии синтеза.

В общем случае соединения по изобретению могут быть синтезированы с использованием соответствующей комбинации общих хорошо известных способов синтеза. Методики, полезные при синтезе этих химических структур, как легко понятны, так и доступны специалистам в релевантной области техники с учетом настоящего описания.

Соединения по изобретению могут быть синтезированы с использованием соответствующей комбинации известных в данной области техники способов синтеза. Приведенное ниже обсуждение приведено для иллюстрации некоторых разнообразных способов, доступных для использования в получении соединений по изобретению, и не предназначено для ограничения объема реакций или последовательностей реакций, которые могут быть использованы в получении соединений по настоящему изобретению.

Реакционная схема 1:

Согласно Схеме 1, стадии 1, соединение формулы 101, где X представляет собой N или CR7, превращают в соединение формулы 103, например, посредством двустадийного процесса сочетания Хека с соединением формулы 102 с последующей катализируемой кислотой циклизацией в метаноле. Продукт, соединение формулы 103, выделяют. Согласно Схеме 1, стадии 2, соединение формулы 103 превращают в соединение формулы 104, например, посредством взаимодействия с соответственно замещенным анилином. Продукт, соединение формулы 104, выделяют. Согласно Схеме 1, стадии 3, соединение формулы 104 превращают в соединение формулы 105, например, посредством восстановления с использованием алюмогидрида лития. Продукт, соединение формулы 105, выделяют. Согласно Схеме 1, стадии 4, соединение формулы 105 превращают в соединение формулы 106, например, путем взаимодействия с тионилхлоридом. Продукт, соединение формулы 106, выделяют. Согласно Схеме 1, стадии 5, соединение формулы 106 превращают в соединение формулы 107, например, путем алкилирования с пиразолопиримидином, используя основание, такое как карбонат калия. Продукт, соединение формулы 107, выделяют. Согласно Схеме 1, стадии 6, соединение формулы 107 превращают в соединение формулы 108, например, посредством реакции Сузуки. Продукт, соединение формулы 108, выделяют и дополнительно очищают.

Реакционная схема 2:

Согласно Схеме 2, стадии 1, соединение формулы 201, где X представляет собой N или CR7, превращают в соединение формулы 202, например, с использованием реагента, подходящего для введения хлорангидрида кислоты, например, оксалилхлорида. Продукт, соединение формулы 202, возможно выделяют. Согласно Схеме 2, стадии 2, соединение формулы 202 превращают в соединение формулы 203, например, путем взаимодействия, например, с ариламином. Продукт, соединение формулы 203, выделяют. Согласно Схеме 2, стадии 3, соединение формулы 203 превращают в соединение формулы 204, например, посредством сочетания Стилле, используя соответствующий винил-станнан. Продукт, соединение формулы 204, выделяют. Согласно Схеме 2, стадии 4, соединение формулы 204 превращают в третичный амид, соединение формулы 205, путем взаимодействия с хлорэтилацетатом и основанием гидридом натрия. Соединение формулы 205 выделяют. Согласно Схеме 2, стадии 5, соединение формулы 205 окисляют до альдегида, используя, например, тетраоксид осмия и периодинат натрия. Продукт, соединение формулы 206, выделяют. Согласно Схеме 2, стадии 6, соединение формулы 206 превращают в соединение формулы 104, например, посредством альдольной реакции в этаноле в присутствии основания, такого как карбонат цезия. Продукт, соединение формулы 104, выделяют. Согласно Схеме 2, стадии 7, соединение формулы 104 восстанавливают до первичного спирта путем восстановления с использованием, например, алюмогидрида лития, с получением соединения формулы 105, которое выделяют. Согласно Схеме 2, стадии 8, соединение формулы 105 превращают в соединение формулы 207 путем взаимодействия с четырехбромистым углеродом и трифенилфосфином. Соединение формулы 207 выделяют. Это соединение может быть центральным промежуточным соединением в синтезе соединений по изобретению.

Реакционная схема 3:

Согласно Схеме 3, стадии 9, соединение формулы 207, где X представляет собой N или CR7, синтезируют, как описано на Реакционной схеме 2, и превращают в соединение формулы 107 путем сочетания с соединением формулы 208 в присутствии основания, например, трет-бутилата калия. Соединение формулы 107 выделяют. Согласно Схеме 3, стадии 10, соединение формулы 107 превращают в соединение формулы 108 путем сочетания, например, с арилбороновой кислотой в присутствии катализаторов реакции сочетания и основания, например, ацетата палладия, трифенилфосфина и карбоната натрия, например. Соединение формулы 108 выделяют.

Реакционная схема 4:

Согласно Реакционной схеме 4, стадии 1, йодсодержащий сложный эфир 401 приводят во взаимодействие с алкином в присутствии палладиевого катализатора, иодида меди и триэтиламина (TEA) с целью присоединения данного алкина к арильному ядру соединения 401 с получением соединения формулы 402. Соединение формулы 402 возможно выделяют. Согласно Реакционной схеме 4, стадии 2, соединение формулы 402 обрабатывают основанием гидроксидом калия с получением карбоновой кислоты, соединения формулы 403, если продукт реакции подкисляют, или ее соли. Соединение формулы 403 возможно выделяют. Согласно Реакционной схеме 4, стадии 3, соединение формулы 403 обрабатывают бис(ацетонитрил)дихлорпалладием(Н) и TEA для осуществления внутримолекулярного замыкания кольца с получением соединения формулы 404. Соединение формулы 404 выделяют. Согласно Реакционной схеме 4, стадии 4, соединение формулы 404 приводят во взаимодействие с первичным амином с получением соединения формулы 405. Соединение формулы 405 возможно выделяют. Согласно Реакционной схеме 4, стадии 5, соединение формулы 405 обрабатывают соляной кислотой, удаляя защитную группу на азоте и получая соединение формулы 406. Соединение формулы 406 возможно выделяют. Согласно Реакционной схеме 4, стадии 6, соединение формулы 406 приводят во взаимодействие с соединением формулы 407 с получением соединения формулы 408. Соединение формулы 408 выделяют.

Реакционная схема 5:

Согласно Реакционной схеме 5, стадии 1, йодсодержащий сложный эфир 401 приводят во взаимодействие с алкином 501 в присутствии палладиевого катализатора реакции сочетания, иодида меди и TEA с получением соединения формулы 502. Соединение формулы 502 возможно выделяют. Согласно Реакционной схеме 5, стадии 2, соединение формулы 502 обрабатывают основанием гидроксидом калия, получая карбоксилат или свободную кислоту соединения формулы 503. Согласно Реакционной схеме 5, стадии 3, соединение формулы 503 обрабатывают бис(ацетонитрил)-дихлорпалладием(II) и TEA для осуществления внутримолекулярного замыкания кольца с получением соединения формулы 504. Соединение формулы 504 возможно выделяют. Согласно Реакционной схеме 5, стадии 4, соединение формулы 504 обрабатывают первичным амином с получением соединения формулы 505. Соединение формулы 505 выделяют.

Реакционная схема 6:

Согласно Реакционной схеме 6, стадии 1, йодсодержащий сложный эфир 401 приводят во взаимодействие с алкином 601 в присутствии палладиевого катализатора реакции сочетания, иодида меди и TEA с получением соединения формулы 602. Соединение формулы 602 возможно выделяют. Согласно Реакционной схеме 6, стадии 2, соединение формулы 602 обрабатывают основанием гидроксидом калия, получая карбоксилат или свободную кислоту соединения формулы 603. Согласно Реакционной схеме 6, стадии 3, соединение формулы 603 обрабатывают бис(ацетонитрил)-дихлорпалладием(II) и TEA для осуществления внутримолекулярного замыкания кольца с получением соединения формулы 604. Соединение формулы 604 возможно выделяют. Согласно Реакционной схеме 6, стадии 4, соединение формулы 604 обрабатывают первичным амином с получением соединения формулы 605. Соединение формулы 605 выделяют. Согласно Реакционной схеме 6, стадии 5, соединение формулы 605 обрабатывают кислотой для удаления защитной группы ТНР, получая соединение формулы 606. Соединение формулы 606 выделяют.

Реакционная схема 7:

Согласно Реакционной схеме 7, стадии 1, соединение формулы 701 синтезируют разными способами синтеза, включая варианты Схем 1 или 2, где, например, используют бензиламин на стадии превращения соединения формулы 103 в соединение формулы 104. Бензильная защитная группа амина может быть удалена в соответствии со стандартными химическими реакциями удаления защиты с получением соединения 701. Согласно другому примеру превращения соединения формулы 103 в соединение формулы 701 соединение формулы 701 получают обработкой соединения формулы 103 аммиаком. Соединение формулы 701 превращают в соединение формулы 702 путем алкилирования амидного азота, используя ряд 2-углеродсодержащих синтонов, которые могут быть подвергнуты процедуре удаления защиты, окисления и повторного введения защиты в виде соответствующего кеталя на соединение формулы 702. Согласно Реакционной схеме 7, стадии 2-1, соединение формулы 702 преобразуют, например, посредством восстановительного аминирования сложноэфирной группировки с целью введения пуринильной группировки соединения формулы 703 или, альтернативно, алкилируют с целью такого введения пуринильной группировки и получения соединения формулы 703. Согласно Реакционной схеме 7, стадии 3-1, соединение формулы 703 обрабатывают кислотой для удаления кетальной защитной группы с получением соединения формулы 704. Соединение формулы 704 выделяют. Согласно Реакционной схеме 7, стадии 4-1, соединение формулы 704 подвергают восстановительному аминированию с использованием амина, получая соединение формулы 705. Соединение формулы 705 выделяют. Согласно Реакционной схеме 7, стадии 2-2, соединение формулы 702 преобразуют в соответствии со стадиями 7 и 8 Схемы 2 и стадией 9 Схемы 3 с целью введения пиразолопиримидиновой группировки соединения формулы 706. Соединение формулы 706 выделяют. Согласно Реакционной схеме 7, стадии 3-2, соединение формулы 706 обрабатывают кислотой для удаления кетальной защитной группы с получением соединения формулы 707. Соединение формулы 707 выделяют. Согласно Реакционной схеме 7, стадии 4-2, соединение формулы 707 подвергают восстановительному аминированию, используя амин, с получением соединения формулы 708. Соединение формулы 708 выделяют.

Реакционная схема 8:

Согласно Реакционной схеме 8, стадии 1, соединение формулы 701 синтезируют, как описано на Схеме 7, или посредством любых других общеизвестных химических реакций. Соединение формулы 701 преобразуют путем алкилирования амидного азота, используя ряд 2-углеродсодержащих синтонов, которые могут быть подвергнуты процедуре удаления защиты, и превращают в алкокси-защищенную разновидность, как показано для соединения формулы 801, которое может быть выделено. Согласно Реакционной схеме 8, стадии 2, соединение формулы 801 преобразуют с использованием химических реакций, описанных на стадии 2-1 Схемы 7, с целью введения пуринильной группировки и такое полученное соединение преобразуют путем удаления защиты, активации и аминирования с использованием амина, получая соединение формулы 802, которое выделяют.

Согласно Реакционной схеме 8, стадии 3, соединение формулы 801 преобразуют с использованием химических реакций, описанных на стадии 2-2 Схемы 7, с целью введения пиразолопиримидиновой группировки и такое полученное соединение преобразуют путем удаления защиты, активации и аминирования с использованием амина, получая соединение формулы 803, которое выделяют.

Реакционная схема 9:

Согласно Реакционной схеме 9, стадии 1, соединение формулы 901 обрабатывают амином с получением соединения формулы 902. Соединение формулы 902 выделяют. Согласно Реакционной схеме 9, стадии 2, соединение формулы 902 обрабатывают оксихлоридом фосфора с образованием соединения формулы 903. Соединение формулы 903 выделяют. Согласно Реакционной схеме 9, стадии 3, соединение формулы 903 приводят во взаимодействие с аминопурином формулы 904 с получением соединения формулы 905. Соединение формулы 905 выделяют. Согласно Реакционной схеме 9, стадии 4, соединение формулы 905 обрабатывают соляной кислотой для удаления защитной группы на азоте пуриновой группировки с получением соединения формулы 906. Соединение формулы 906 выделяют.

Реакционная схема 10:

Согласно Реакционной схеме 10, стадии 1, соединение формулы 1001 обрабатывают сложным эфиром винилогического ряда 1002, используя, например реакцию Хека с последующей циклизацией, с получением соединения формулы 1003. Соединение формулы 1003 выделяют. Согласно Реакционной схеме 10, стадии 2, соединение формулы 1003 приводят во взаимодействие с 4-амино-N-Вос-пиперидином с получением соединения формулы 1004. Соединение формулы 1004 выделяют. Соединение формулы 1004 может быть использовано в качестве промежуточного соединения в синтезе соединений по изобретению.

Реакционная схема 11:

Согласно Реакционной схеме 11, стадии 1, соединение формулы 1101 обрабатывают алкиниловым спиртом, например, формулы 1102, в присутствии иодида меди и катализатора палладия на угле с получением соединения формулы 1103. Соединение формулы 1103 выделяют. Согласно Реакционной схеме 11, стадии 1, соединение формулы 1102 приводят во взаимодействие с 4-амино-N-Вос-пиперидином с получением соединения формулы 1103. Соединение формулы 1103 выделяют. Соединение формулы 1103 может быть использовано в качестве промежуточного соединения в синтезе соединений по изобретению.

Соединения формулы I могут быть синтезированы с использованием реакционных схем, которые изложены в данной заявке, или вариантов этих способов.

Эти химические структуры могут быть синтезированы с использованием соответствующей комбинации общих хорошо известных способов синтеза.

В некоторых воплощениях соединения по настоящему изобретению демонстрируют один или более функциональных характерных признаков, раскрытых в данной заявке. Например, одно или более соединений, являющихся объектом изобретения, специфично связываются с РI3-киназой. В некоторых воплощениях IC50 для соединения, являющегося объектом изобретения, в отношении р110α, р110β, р110γ или р110δ составляет менее чем примерно 1 мкМ, менее чем примерно 100 нМ, менее чем примерно 50 нМ, менее чем примерно 10 нМ, менее чем примерно 1 нМ, менее чем примерно 0,5 нМ, менее чем примерно 100 пМ или менее чем примерно 50 пМ.

В некоторых воплощениях одно или более чем одно соединение, являющееся объектом изобретения, может селективно ингибировать один или более членов фосфатидилинозитол-3-киназ (РI3-киназа) I типа или I класса с величиной IC50 примерно 100 нМ, 50 нМ, 10 нМ, 5 нМ, 100 пМ, 10 пМ или 1 пМ или меньше, как измерено в киназном анализе in vitro.

В некоторых воплощениях одно или более чем одно из соединений, являющихся объектом изобретения, может селективно ингибировать одну или две киназы из фосфатидилинозитол-3-киназ (РI3-киназа) I типа или I класса, состоящих из РI3-киназы α, РI3-киназы β, РI3-киназы γ и РI3-киназы δ. В некоторых аспектах некоторые из соединений, являющихся объектом изобретения, селективно ингибируют РI3-киназу 5 по сравнению со всеми другими РI3-киназами I типа. В других аспектах некоторые из соединений, являющихся объектом изобретения, селективно ингибируют РI3-киназу δ и PI3-киназу γ по сравнению с остальными РI3-киназами I типа. В еще одних других аспектах некоторые из соединений, являющихся объектом изобретения, селективно ингибируют РI3-киназу α и РI3-киназу δ по сравнению с остальными РI3-киназами I типа. В еще одних некоторых других аспектах некоторые из соединений, являющихся объектом изобретения, селективно ингибируют PI3-киназу 6 и РI3-киназу α по сравнению с остальными РI3-киназами I типа. В еще одних некоторых других аспектах некоторые из соединений, являющихся объектом изобретения, селективно ингибируют РI3-киназу 6 и РI3-киназу β по сравнению с остальными РI3-киназами I типа, или селективно ингибируют PI3-киназу δ и РI3-киназу α по сравнению с остальными РI3-киназами I типа, или селективно ингибируют РI3-киназу α и РI3-киназу γ по сравнению с остальными РI3-киназами I типа, или селективно ингибируют РI3-киназу γ и РI3-киназу β по сравнению с остальными РI3-киназами I типа.

В еще одном другом аспекте ингибитор, который селективно ингибирует один или более киназ из РI3-киназ I типа, или ингибитор, который селективно ингибирует одну или более чем одну РI3-киназу I типа, опосредующую пути передачи сигнала, альтернативно может пониматься как относящийся к соединению, которое демонстрирует вызывающую 50%-ное ингибирование концентрацию (IC50) в отношении заданной РI3-киназы I типа, которая ниже по меньшей мере в 10 раз, по меньшей мере в 20 раз, по меньшей мере в 50 раз, по меньшей мере в 100 раз, по меньшей мере в 1000 раз, по меньшей мере в 10100 раз или ниже IC50 для данного ингибитора в отношении остальных других РI3-киназ I типа.

Фармацевтические композиции

Согласно данному изобретению предложены фармацевтические композиции, содержащие одно или более соединений по настоящему изобретению.

В некоторых воплощениях согласно данному изобретению предложены фармацевтические композиции для лечения заболеваний или состояний, связанных с нежелательным, сверхактивным, причиняющим вред или повреждающим иммунным ответом у млекопитающего. Такой нежелательный иммунный ответ может быть связан с или может вызывать, например, астму, эмфизему, бронхит, псориаз, аллергию, анафилаксию, аутоиммунные заболевания, ревматоидный артрит, реакцию "трансплантат против хозяина" и красную волчанку. Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть использованы для лечения других респираторных заболеваний, включая, но не ограничиваясь этим, заболевания, поражающие доли легкого, плевральную полость, бронхиолы, трахею, верхние дыхательные пути или нервы и участвующую в акте дыхания мускулатуру.

В некоторых воплощениях согласно данному изобретению предложены фармацевтические композиции для лечения таких расстройств, как гиперпролиферативное расстройство, включая, но не ограничиваясь этим, рак, такой как острый миелоидный лейкоз, рак вилочковой железы, головного мозга, легких, плоскоклеточный рак, рак кожи, глаз, ретинобластома, внутриглазная меланома, рак полости рта и ротоглотки, мочевого пузыря, желудочно-кишечного тракта, желудка, поджелудочной железы, мочевого пузыря, молочной железы, шейки матки, головы, шеи, почечной сферы, почек, печени, яичников, предстательной железы, толстой кишки, пищевода, яичка, гинекологической сферы, щитовидной железы, ЦНС (центральная нервная система), ПНС (периферическая нервная система), СПИД-ассоциированный (например, лимфома и саркома Капоши) или индуцируемый вирусами рак. В некоторых воплощениях указанная фармацевтическая композиция предназначена для лечения доброкачественного гиперпролиферативного расстройства, такого как доброкачественная гиперплазия кожи (например, псориаз), повторный стеноз или доброкачественное гиперпролиферативное расстройство предстательной железы (например, доброкачественная гипертрофия предстательной железы (ВРН)).

Также, согласно изобретению предложены композиции для лечения заболеваний печени (включая диабет), панкреатита или болезни почек (включая пролиферативный гломерулонефрит и индуцируемое диабетом почечное заболевание) или боли у млекопитающего.

Более того, согласно изобретению предложена композиция для предупреждения имплантации бластоцитов у млекопитающего.

Изобретение также относится к композиции для лечения заболевания, относящегося к васкулогенезу или ангиогенезу у млекопитающего, которое может проявляться в виде опухолевого ангиогенеза, хронического воспалительного заболевания, такого как ревматоидный артрит, воспалительного заболевания кишечника, атеросклероза, кожных заболеваний, таких как псориаз, экзема и склеродермия, диабета, диабетической ретинопатии, ретинопатии недоношенных, возрастной дегенерации желтого пятна, гемангиомы, глиомы, меланомы, саркомы Капоши и рака яичников, молочной железы, легких, поджелудочной железы, предстательной железы, толстой кишки и эпидермоидного рака.

Фармацевтические композиции, являющиеся объектом изобретения, обычно изготавливают содержащими терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента или его фармацевтически приемлемых соли, сложного эфира, пролекарства, сольвата, гидрата или производного. Там, где это желательно, фармацевтические композиции содержат фармацевтически приемлемую соль и/или ее координационный комплекс и один или более из фармацевтически приемлемых эксципиентов, носителей, включая инертные твердые разбавители и наполнители, разбавителей, включая стерильный водный раствор и различные органические растворители, веществ, увеличивающих проницаемость, солюбилизаторов и адъювантов.

Фармацевтические композиции, являющиеся объектом изобретения, могут быть введены сами по себе или в комбинации с одним или более чем одним другим агентом, который обычно вводят в форме фармацевтических композиций. Там, где это желательно, соединения по изобретению и другой(ие) агент(ы) могут быть смешаны в одном препарате или оба компонента могут быть приготовлены в виде отдельных препаратов для использования их в комбинации по отдельности или в одно и то же время.

В некоторых воплощениях концентрация одного или более соединений, предложенных в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, составляет менее 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%,14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,4%, 0,3%, 0,2%, 0,1%, 0,09%, 0,08%, 0,07%, 0,06%, 0,05%, 0,04%, 0,03%, 0,02%, 0,01%, 0,009%, 0,008%, 0,007%, 0,006%, 0,005%, 0,004%, 0,003%, 0,002%, 0,001%, 0,0009%, 0,0008%, 0,0007%, 0,0006%, 0,0005%, 0,0004%, 0,0003%, 0,0002% или 0,0001% масс/масс, масс/об. или об./об.

В некоторых воплощениях концентрация одного или более соединений по настоящему изобретению составляет более 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19,75%, 19,50%, 19,25% 19%, 18,75%, 18,50%, 18,25% 18%, 17,75%, 17,50%, 17,25% 17%, 16,75%, 16,50%, 16,25% 16%, 15,75%, 15,50%, 15,25% 15%, 14,75%, 14,50%, 14,25% 14%, 13,75%, 13,50%, 13,25% 13%, 12,75%, 12,50%, 12,25% 12%, 11,75%, 11,50%, 11,25% 11%, 10,75%, 10,50%, 10,25% 10%, 9,75%, 9,50%, 9,25% 9%, 8,75%, 8,50%, 8,25% 8%, 7,75%, 7,50%, 7,25% 7%, 6,75%, 6,50%, 6,25% 6%, 5,75%, 5,50%, 5,25% 5%, 4,75%, 4,50%, 4,25%, 4%, 3,75%, 3,50%, 3,25%, 3%, 2,75%, 2,50%, 2,25%, 2%, 1,75%, 1,50%, 125%, 1%, 0,5%, 0,4%, 0,3%, 0,2%, 0,1%, 0,09%, 0,08%, 0,07%, 0,06%, 0,05%, 0,04%, 0,03%, 0,02%, 0,01%, 0,009%, 0,008%, 0,007%, 0,006%, 0,005%, 0,004%, 0,003%, 0,002%, 0,001%, 0,0009%, 0,0008%, 0,0007%, 0,0006%, 0,0005%, 0,0004%, 0,0003%, 0,0002% или 0,0001% масс/масс, масс/об. или об./об.

В некоторых воплощениях концентрация одного или более соединений по настоящему изобретению находится в диапазоне от приблизительно 0,0001% до приблизительно 50%, от приблизительно 0,001% до приблизительно 40%, от приблизительно 0,01% до приблизительно 30%, от приблизительно 0,02% до приблизительно 29%, от приблизительно 0,03% до приблизительно 28%, от приблизительно 0,04% до приблизительно 27%, от приблизительно 0,05% до приблизительно 26%, от приблизительно 0,06% до приблизительно 25%, от приблизительно 0,07% до приблизительно 24%, от приблизительно 0,08% до приблизительно 23%, от приблизительно 0,09% до приблизительно 22%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 21%, от приблизительно 0,2% до приблизительно 20%, от приблизительно 0,3% до приблизительно 19%, от приблизительно 0,4% до приблизительно 18%, от приблизительно 0,5% до приблизительно 17%, от приблизительно 0,6% до приблизительно 16%, от приблизительно 0,7% до приблизительно 15%, от приблизительно 0,8% до приблизительно 14%, от приблизительно 0,9% до приблизительно 12%, от приблизительно 1% до приблизительно 10% масс/масс, масс/об. или об./об. об./об.

В некоторых воплощениях концентрация одного или более соединений по настоящему изобретению находится в диапазоне от приблизительно 0,001% до приблизительно 10%, от приблизительно 0,01% до приблизительно 5%, от приблизительно 0,02% до приблизительно 4,5%, от приблизительно 0,03% до приблизительно 4%, от приблизительно 0,04% до приблизительно 3,5%, от приблизительно 0,05% до приблизительно 3%, от приблизительно 0,06% до приблизительно 2,5%, от приблизительно 0,07% до приблизительно 2%, от приблизительно 0,08% до приблизительно 1,5%, от приблизительно 0,09% до приблизительно 1%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,9% масс/масс, масс/об. или об./об.

В некоторых воплощениях количество одного или более соединений по настоящему изобретению равно или меньше 10 г, 9,5 г, 9,0 г, 8,5 г, 8,0 г, 7,5 г, 7,0 г, 6,5 г, 6,0 г, 5,5 г, 5,0 г, 4,5 г, 4,0 г, 3,5 г, 3,0 г, 2,5 г, 2,0 г, 1,5 г, 1,0 г, 0,95 г, 0,9 г, 0,85 г, 0,8 г, 0,75 г, 0,7 г, 0,65 г, 0,6 г, 0,55 г, 0,5 г, 0,45 г, 0,4 г, 0,35 г, 0,3 г, 0,25 г, 0,2 г, 0,15 г, 0,1 г, 0,09 г, 0,08 г, 0,07 г, 0,06 г, 0,05 г, 0,04 г, 0,03 г, 0,02 г, 0,01 г, 0,009 г, 0,008 г, 0,007 г, 0,006 г, 0,005 г, 0,004 г, 0,003 г, 0,002 г, 0,001 г, 0,0009 г, 0,0008 г, 0,0007 г, 0,0006 г, 0,0005 г, 0,0004 г, 0,0003 г, 0,0002 г или 0,0001 г.

В некоторых воплощениях количество одного или более соединений по настоящему изобретению составляет более 0,0001 г, 0,0002 г, 0,0003 г,.0,0004 г, 0,0005 г, 0,0006 г, 0,0007 г, 0,0008 г, 0,0009 г, 0,001 г, 0,0015 г, 0,002 г, 0,0025 г, 0,003 г, 0,0035 г, 0,004 г, 0,0045 г, 0,005 г, 0,0055 г, 0,006 г, 0,0065 г, 0,007 г, 0,0075 г, 0,008 г, 0,0085 г, 0,009 г, 0,0095 г, 0,01 г, 0,015 г, 0,02 г, 0,025 г, 0,03 г, 0,035 г, 0,04 г, 0,045 г, 0,05 г, 0,055 г, 0,06 г, 0,065 г, 0,07 г, 0,075 г, 0,08 г, 0,085 г, 0,09 г, 0,095 г, 0,1 г, 0,15 г, 0,2 г, 0,25 г, 0,3 г, 0,35 г, 0,4 г, 0,45 г, 0,5 г, 0,55 г, 0,6 г, 0,65 г, 0,7 г, 0,75 г, 0,8 г, 0,85 г, 0,9 г, 0,95 г, 1 г, 1,5 г, 2 г, 2,5, 3 г, 3,5, 4 г, 4,5 г, 5 г, 5,5 г, 6 г, 6,5 г, 7 г, 7,5 г, 8 г, 8,5 г, 9 г, 9,5 г или 10 г.

В некоторых воплощениях количество одного или более соединений по настоящему изобретению находится в диапазоне 0,0001-10 г, 0,0005-9 г, 0,001-8 г, 0,005-7 г, 0,01-6 г, 0,05-5 г, 0,1-4 г, 0,5-4 г или 1-3 г.

Соединения по изобретению эффективны в широком диапазоне доз. Например, при лечении взрослого человека примерами дозировок, которые могут быть использованы, являются дозировки 0,01-1000 мг; 0,5-100 мг; 1-50 мг в сутки и 5-40 мг в сутки. Типичная дозировка составляет 10-30 мг в сутки. Точная дозировка будет зависеть от способа введения, формы, в которой вводят соединение, субъекта, подвергаемого лечению, массы тела субъекта, подвергаемого лечению, и предпочтения и опыта лечащего врача.

Ниже описаны неограничивающие типичные фармацевтические композиции и способы их изготовления.

Фармацевтические композиции для перорального введения. В некоторых воплощениях согласно данному изобретению предложена фармацевтическая композиция для перорального введения, содержащая соединение по настоящему изобретению и фармацевтический эксципиент, подходящий для перорального введения.

В некоторых воплощениях согласно данному изобретению предложены твердая фармацевтическая композиция для перорального введения, содержащая: (1) эффективное количество соединения по настоящему изобретению; возможно (2) эффективное количество второго агента; и (3) фармацевтический эксципиент, подходящий для перорального введения. В некоторых воплощениях композиция дополнительно содержит: (4) эффективное количество третьего агента.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция может представлять собой жидкую фармацевтическую композицию, подходящую для перорального приема. Фармацевтические композиции по изобретению, подходящие для перорального введения, могут быть представлены в виде дискретных лекарственных форм, таких как капсулы, саше или таблетки либо жидкости или аэрозольные спреи, каждая из которых содержит предварительно определенное количество активного ингредиента в виде порошка или в гранулах, растворе или суспензии в водной или безводной жидкости, эмульсии типа масло-в-воде или жидкой эмульсии типа вода-в-масле. Такие лекарственные формы могут быть изготовлены любым из способов, известных в фармацевтике, тем не менее, все способы включают стадию приведения активного ингредиента в ассоциацию с носителем, который составляет один или более чем один необходимый ингредиент. В общем случае композиции изготавливают путем непрерывного и равномерного смешивания активного ингредиента с жидкими носителями или тонкоизмельченными твердыми носителями или ими обоими и затем, если необходимо, придания продукту формы желаемого вида. Например, таблетка может быть изготовлена путем прессования или формования, возможно с одним или более чем одним вспомогательным ингредиентом. Прессованные таблетки могут быть изготовлены путем прессования в подходящей машине активного ингредиента в свободно текучей форме, такой как порошок или гранулы, возможно смешанного с таким эксципиентом, как связующее вещество, смазывающее вещество, инертный разбавитель и/или поверхностно-активное вещество или диспергирующий агент, но не ограничиваясь этим. Формованные таблетки могут быть изготовлены путем формования в подходящей машине смеси порошкообразного соединения, увлажненного инертным жидким разбавителем.

Более того, данное изобретение охватывает безводные фармацевтические композиции и лекарственные формы, содержащие активный ингредиент, поскольку вода может способствовать разрушению некоторых соединений. Например, в области фармацевтики вода может быть добавлена (например, 5%) как средство для моделирования длительного хранения с целью определения таких характеристик, как срок годности или стабильность композиций во времени. Безводные фармацевтические композиции и лекарственные формы по изобретению могут быть изготовлены с использованием безводных ингредиентов или ингредиентов с низким содержанием влаги и условий с низким содержанием влаги или низкой влажностью. Фармацевтические композиции и лекарственные формы по изобретению, которые содержат лактозу, могут быть изготовлены безводными, если в процессе изготовления, упаковки и/или хранения предполагается существенный контакт с влажностью и/или влагой. Безводную фармацевтическую композицию можно изготавливать и хранить таким образом, чтобы сохранить ее безводное состояние. Соответственно, безводные композиции могут быть упакованы с использованием материалов, известных тем, что они защищают от попадания воды, таких которые могут быть включены в подходящие наборы, определенные в фармакологическом справочнике. Примеры подходящей упаковки включают, но не ограничиваются этим, фольгу, пластик или тому подобное для герметичного укупоривания, одноразовые контейнеры, блистерные упаковки и контурные упаковки ленточного типа.

Активный ингредиент может быть объединен в однородной смеси с фармацевтическим носителем в соответствии с традиционными методиками приготовления фармацевтических смесей. Носитель может принимать большое разнообразие форм в зависимости от формы препарата, желательной для введения. При изготовлении композиций лекарственной формы для перорального введения в качестве носителей могут быть использованы любые обычные фармацевтические среды, такие как, например, вода, гликоли, масла, спирты, корригенты, консерванты, окрашивающие вещества и тому подобное в случае пероральных жидких препаратов (таких как суспензии, растворы и эликсиры) или аэрозолей; или такие носители, как крахмалы, сахара, микрокристаллическая целлюлоза, разбавители, гранулирующие агенты, смазывающие вещества, связующие вещества и разрыхлители, могут быть использованы в случае пероральных твердых препаратов, в некоторых воплощениях без использования лактозы. Например, подходящие носители включают порошки, капсулы и таблетки, содержащие твердые пероральные препараты. Если необходимо, на таблетки может быть нанесено покрытие с использованием стандартных водных или безводных методик.

Связующие вещества, подходящие для использования в фармацевтических композициях и лекарственных формах, включают, но не ограничиваются этим, кукурузный крахмал, картофельный крахмал или другие крахмалы, желатин, природные и синтетические смолы, такие как аравийская камедь, альгинат натрия, альгиновая кислота, другие альгинаты, порошкообразный трагакант, гуаровая камедь, целлюлоза и ее производные (например, этилцеллюлоза, ацетат целлюлозы, кальциевая соль карбоксиметилцеллюлозы, натриевая соль карбоксиметил целлюлозы), поливинилпирролидон (PVP), метилцеллюлоза, прежелатинизированный крахмал, гидроксипропилметилцеллюлоза, микрокристаллическая целлюлоза и их смеси.

Примеры подходящих наполнителей для использования в фармацевтических композициях и лекарственных формах, изложенных в данной заявке, включают, но не ограничиваются этим, тальк, карбонат кальция (например, в гранулах или порошке), микрокристаллическую целлюлозу, порошкообразную целлюлозу, декстраны, каолин, маннит, кремниевую кислоту, сорбит, крахмал, прежелатинизированный крахмал и их смеси.

В композициях по изобретению могут быть использованы разрыхлители, чтобы приготовить таблетки, которые распадаются при помещении их в водное окружение. Если разрыхлителя будет слишком много, при изготовлении могут быть получены таблетки, которые могут распадаться в бутылке. Слишком малое количество может оказаться недостаточным для того, чтобы происходило разрушение, и таким образом может изменять скорость и степень высвобождения активного ингредиента(ов) из лекарственной формы. Таким образом, для образования лекарственных форм соединений, изложенных в данной заявке, может быть использовано достаточное количество разрыхлителя, то есть не слишком маленькое и не слишком большое, чтобы не оказывать пагубного воздействия на высвобождение активного ингредиента(ов). Количество используемого разрыхлителя может варьировать в зависимости от типа композиции и способа введения и может быть легко оценено специалистом обычной квалификации в данной области техники. В фармацевтической композиции может быть использовано от примерно 0,5 до примерно 15 массовых процентов разрыхлителя или от примерно 1 до примерно 5 массовых процентов разрыхлителя. Разрыхлители, которые можно использовать для образования фармацевтических композиций и лекарственных форм по изобретению, включают, но не ограничиваются этим, агар-агар, альгиновую кислоту, карбонат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, натриевую соль кроскармелозы, кросповидон, полакрилин калия, натрия крахмала гликолят, крахмал из картофеля или тапиоки, другие крахмалы, прежелатинизированный крахмал, другие крахмалы, глины, другие альгины, другие целлюлозы, смолы или их смеси.

Смазывающие вещества, которые могут быть использованы для образования фармацевтических композиций и лекарственных форм по изобретению, включают, но не ограничиваются этим, стеарат кальция, стеарат магния, минеральное масло, легкое минеральное масло, глицерин, сорбит, маннит, полиэтиленгликоль (ПЭГ), другие гликоли, стеариновую кислоту, лаурилсульфат натрия, тальк, гидрогенизированное растительное масло (например, арахисовое масло, хлопковое масло, подсолнечное масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло), стеарат цинка, этилолеат, этиллаурат, агар или их смеси. Дополнительные смазывающие вещества включают, например, силикагель силоид, коагулированный аэрозоль синтетического диоксида кремния или их смеси. Смазывающее вещество возможно может быть добавлено в количестве менее чем примерно 1 массовый процент от фармацевтической композиции.

Если желательны водные суспензии и/или эликсиры для перорального введения, то основной активный ингредиент для них может быть объединен с различными подсластителями или корригентами, окрашивающим веществом или красителями и, если так будет необходимо, эмульгирующими и/или суспендирующими агентами, вместе с такими разбавителями, как вода, этанол, пропиленгликоль, глицерин и их различные комбинации.

Таблетки могут быть без покрытия или с покрытием, нанесенным на них посредством известных методик, для замедления распадаемости и всасывания в желудочно-кишечном тракте и тем самым для обеспечения непрерывного действия в течение более продолжительного периода времени. Например, можно использовать такое обеспечивающее задержку по времени вещество, как глицерил-моностеарат или глицерил-дистеарат. Композиции для перорального применения также могут быть представлены в виде твердых желатиновых капсул, где активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем, например, карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином, или в виде мягких желатиновых капсул, где активный ингредиент смешан с водной или масляной средой, например, арахисовым маслом, вазелиновым маслом или оливковым маслом.

Поверхностно-активные вещества, которые могут быть использованы для образования фармацевтических композиций и лекарственных форм по изобретению, включают, но не ограничиваются этим, гидрофильные поверхностно-активные вещества, липофильные поверхностно-активные вещества и их смеси. То есть, может быть использована смесь гидрофильных поверхностно-активных веществ, может быть использована смесь липофильных поверхностно-активных веществ или может быть использована смесь по меньшей мере одного гидрофильного поверхностно-активного вещества и по меньшей мере одного липофильного поверхностно-активного вещества.

Подходящее гидрофильное поверхностно-активное вещество обычно может иметь величину HLB по меньшей мере 10, тогда как подходящие липофильные поверхностно-активные вещества обычно могут иметь величину HLB, равную или менее чем примерно 10. Эмпирическим параметром, используемым для характристики относительной гидрофильности и гидрофобности неионных амфифильных соединений, является гидрофильно-липофильный баланс (величина "HLB"). Поверхностно-активные вещества с более низкими величинами HLB являются более липофильными или гидрофобными и имеют более высокую растворимость в маслах, тогда как поверхностно-активные вещества с более высокими величинами HLB являются более гидрофильными и имеют более высокую растворимость в водных растворах. В общем случае считается, что гидрофильными поверхностно-активными веществами являются такие соединения, которые имеют величину HLB выше примерно 10, а также анионные, катионные или цвиттерионные соединения, для которых шкала HLB обычно не применяется. Аналогично, липофильными (то есть гидрофобными) поверхностно-активными веществами являются соединения, имеющие величину HLB, равную или меньшую, чем примерно 10. Однако величина HLB поверхностно-активного вещества представляет собой всего лишь приближенный ориентир, обычно используемый при изготовлении фармацевтических и косметических эмульсий в промышленности.

Гидрофильные поверхностно-активные вещества могут быть либо ионными, либо неионными. Подходящие ионные поверхностно-активные вещества включают, но не ограничиваются этим, соли алкиламмония; соли фусидовой кислоты; производные жирных кислот и аминокислот, олигопептидов и полипептидов; производные глицеридов и аминокислот, олигопептидов и полипептидов; лецитины и гидрогенизированные лецитины; лизолецитины и гидрогенизированные лизолецитины; фосфолипиды и их производные; лизофосфолипиды и их производные; соли сложных эфиров жирных кислот и карнитина; соли алкилсульфатов; соли жирных кислот; докузат натрия; ациллактилаты; моно- и диацетилированные сложные эфиры винной кислоты и моно- и диглицеридов; сукцинилированные моно- и диглицериды; сложные эфиры лимонной кислоты и моно- и диглицеридов; и их смеси.

Среди вышеупомянутой группы ионные поверхностно-активные вещества включают в качестве примера: лецитины, лизолецитин, фосфолипиды, лизофосфолипиды и их производные; соли сложных эфиров жирных кислот и карнитина; соли алкилсульфатов; соли жирных кислот; докузат натрия; ациллактилаты; моно- и диацетилированные сложные эфиры винной кислоты и моно- и диглицеридов; сукцинилированные моно- и диглицериды; сложные эфиры лимонной кислоты и моно- и диглицеридов; и их смеси.

Ионные поверхностно-активные вещества могут представлять собой ионизированные формы лецитина, лизолецитина, фосфатидилхолина, фосфатидилэтаноламина, фосфатидилглицерина, фосфатидной кислоты, фосфатидилсерина, лизофосфатидилхолина, лизофосфатидилэтаноламина, лизофосфатидилглицерина, лизофосфатидной кислоты, лизофосфатидил-серина, ПЭГ-фосфатидилэтаноламина, PVP-фосфатидилэтаноламина, лактиловые сложные эфиры жирных кислот, стеароил-2-лактилат, стеароиллактилат, сукцинилированные моноглицериды,

моно/диацетилированные сложные эфиры винной кислоты и моно/диглицеридов, сложные эфиры лимонной кислоты и моно/диглицеридов, холилсаркозин, капроат, каприлат, капрат, лаурат, миристат, пальмитат, олеат, рицинолеат, линолеат, линоленат, стеарат, лаурилсульфат, teracecyl сульфат, докузат, лауроил-карнитины, пальмитоил-карнитины, миристоил-карнитины и их соли и смеси.

Гидрофильные неионные поверхностно-активные вещества могут включать, но не ограничиваются этим, алкилглюкозиды; алкилмальтозиды; алкилтиоглюкозиды; лаурил-макроголглицериды; алкиловые простые эфиры полиоксиалкилена, такие как алкиловые простые эфиры полиэтиленгликолей; алкилфенолы полиоксиалкилена, такие как алкилфенолы полиэтиленгликолей; сложные эфиры жирных кислот и алкилфенолов полиоксиалкилена, такие как моноэфиры жирных кислот и полиэтиленгликоля и диэфиры жирных кислот и полиэтиленгликоля; сложные эфиры жирных кислот и полиэтиленгликоль-глицерина; сложные эфиры жирных кислот и полиглицерина; сложные эфиры жирных кислот и полиоксиалкилен-сорбитана, такие как сложные эфиры жирных кислот и полиэтиленгликоль-сорбитана; гидрофильные продукты переэтерификации полиола по меньшей мере с одним членом группы, состоящей из глицеридов, растительных масел, гидрогенизированных растительных масел, жирных кислот и стеринов; полиоксиэтилен-стерины, их производные и аналоги; полиоксиэтилированные витамины и их производные; блоксополимеры полиоксиэтилена и полиоксипропилена и их смеси; сложные эфиры жирных кислот и полиэтиленгликоль-сорбитана и гидрофильные продукты переэтерификации полиола по меньшей мере с одним членом группы, состоящей из триглицеридов, растительных масел и гидрогенизированных растительных масел. Полиол может представлять собой глицерин, этиленгликоль, полиэтиленгликоль, сорбит, пропиленгликоль, пентаэритрит или сахарид.

Другие гидрофильные неионные поверхностно-активные вещества включают, без ограничения, ПЭГ-10 лаурат, ПЭГ-12 лаурат, ПЭГ-20 лаурат, ПЭГ-32 лаурат, ПЭГ-32 дилаурат, ПЭГ-12 олеат, ПЭГ-15 олеат, ПЭГ-20 олеат, ПЭГ-20 диолеат, ПЭГ-32 олеат, ПЭГ-200 олеат, ПЭГ-400 олеат, ПЭГ-15 стеарат, ПЭГ-32 дистеарат, ПЭГ-40 стеарат, ПЭГ-100 стеарат, ПЭГ-20 дилаурат, ПЭГ-25 глицерилтриолеат, ПЭГ-32 диолеат, ПЭГ-20 глицериллаурат, ПЭГ-30 глицериллаурат, ПЭГ-20 глицерилстеарат, ПЭГ-20 глицерилолеат, ПЭГ-30 глицерилолеат, ПЭГ-30 глицериллаурат, ПЭГ-40 глицериллаурат, ПЭГ-40 пальмоядровое масло, ПЭГ-50 гидрогенизированное касторовое масло, ПЭГ-40 касторовое масло, ПЭГ-35 касторовое масло, ПЭГ-60 касторовое масло, ПЭГ-40 гидрогенизированное касторовое масло, ПЭГ-60 гидрогенизированное касторовое масло, ПЭГ-60 кукурузное масло, ПЭГ-6 капрат/каприлат-глицериды, ПЭГ-8 капрат/каприлат-глицериды, полиглицерил-10-лаурат, ПЭГ-30 холестерин, ПЭГ-25 фитостерин, ПЭГ-30 соевый стерин, ПЭГ-20 триолеат, ПЭГ-40 сорбитан олеат, ПЭГ-80 сорбитан лаурат, полисорбат 20, полисорбат 80, РОЕ-9 простой лауриловый эфир, РОЕ-23 простой лауриловый эфир, РОЕ-10 простой олеиловый эфир, РОЕ-20 простой олеиловый эфир, РОЕ-20 простой стеариловый эфир, токоферил-ПЭГ-100-сукцинат, ПЭГ-24-холестерин, полиглицерил-10-олеат, Твин 40, Твин 60, моностеарат сахарозы, монолаурат сахарозы, монопальмитат сахарозы, серию ПЭГ 10-100 нонилфенолов, серию ПЭГ 15-100 октилфенолов и полоксамеры.

Подходящие липофильные поверхностно-активные вещества включают, только в качестве примера: жирные спирты; сложные эфиры жирных кислот и глицерина; ацетилированные сложные эфиры жирных кислот и глицерина; сложные эфиры жирных кислот и низших спиртов; сложные эфиры жирных кислот и пропиленгликоля; сложные эфиры жирных кислот и сорбитана; сложные эфиры жирных кислот и полиэтиленгликоль-сорбитана; стерины и производные стеринов; полиоксиэтилированные стерины и производные стеринов; алкиловые простые эфиры полиэтиленгликолей; сложные эфиры сахаров; простые эфиры сахаров; производные молочной кислоты и моно- и диглицеридов; гидрофобные продукты переэтерификации полиола по меньшей мере с одним членом группы, состоящей из глицеридов, растительных масел, гидрогенизированных растительных масел, жирных кислот и стеринов; растворимые в масле витамины/производные витаминов; и их смеси. Среди этой группы предпочтительные липофильные поверхностно-активные вещества включают сложные эфиры жирных кислот и глицерина, сложные эфиры жирных кислот и пропиленгликоля и их смеси, или ими являются гидрофобные продукты переэтерификации полиола по меньшей мере с одним членом группы, состоящей из растительных масел, гидрогенизированных растительных масел и триглицеридов.

В одном воплощении композиция может включать солюбилизатор для обеспечения хорошей солюбилизации и/или растворения соединения по настоящему изобретению и для сведения к минимуму осаждения соединения по настоящему изобретению. Это может быть особенно важным для композиций, предназначенных для неперорального применения, например композиций для инъекций. Солюбилизатор также может быть добавлен для увеличения растворимости гидрофильного лекарственного средства и/или других компонентов, таких как поверхностно-активные вещества, или для поддержания композиции в виде стабильного или гомогенного раствора или дисперсии.

Примеры подходящих солюбилизаторов включают, но не ограничиваются этим, следующее далее: спирты и полиолы, такие как этанол, изопропанол, бутанол, бензиловый спирт, этиленгликоль, пропиленгликоль, бутандиолы и их изомеры, глицерин, пентаэритрит, сорбит, маннит, транскутол, диметил-изосорбид, полиэтиленгликоль, полипропиленгликоль, поливиниловый спирт, гидроксипропилметилцеллюлозу и другие производные целлюлозы, циклодекстрины и производные циклодекстринов; простые эфиры полиэтиленгликолей, имеющих среднюю молекулярную массу от примерно 200 до примерно 6000, такие как простой эфир ПЭГ и тетрагидрофурфурилового спирта (гликофурол) или метокси-ПЭГ; амиды и другие азотсодержащие соединения, такие как 2-пирролидон, 2-пиперидон, эпсилон-капролактам, N-алкилпирролидон, N-гидроксиалкилпирролидон, N-алкилпиперидон, N-алкилкапролактам, диметилацетамид и поливинилпирролидон; сложные эфиры, такие как этилпропионат, трибутилцитрат, ацетилтриэтилцитрат, ацетилтрибутилцитрат, триэтилцитрат, этилолеат, этилкаприлат, этилбутират, триацетин, пропиленгликоля моноацетат, пропиленгликоля диацетат, ε-капролактон и их изомеры, δ-валеролактон и их изомеры, β-бутиролактон и их изомеры; и другие солюбилизаторы, известные в данной области техники, такие как диметилацетамид, диметилизосорбид, N-метилпирролидоны, монооктаноин, моноэтиловый простой эфир диэтиленгликоля и вода.

Кроме того, могут быть использованы смеси солюбилизаторов. Примеры включают, но не ограничиваются этим, триацетин, триэтилцитрат, этилолеат, этилкаприлат, диметилацетамид, N-метилпирролидон, N-гидроксиэтил-пирролидон, поливинилпирролидон, гидроксипропилметил-целлюлозу, гидроксипропил-циклодекстрины, этанол, полиэтиленгликоль 200-100, гликофурол, транскутол, пропиленгликоль и диметилизосорбид. Особенно предпочтительные солюбилизаторы включают сорбит, глицерин, триацетин, этиловый спирт, ПЭГ-400, гликофурол и пропиленгликоль.

Количество солюбилизатора, которое может быть включено, особенно не ограничивают. Количество заданного солюбилизатора может быть ограничено биологически приемлемым количеством, которое может быть легко определено специалистом в данной области техники. В некоторых случаях преимуществом может быть включение количества солюбилизаторов, намного превышающего биологически приемлемые количества, например с целью максимального увеличения концентрации лекарственного средства, при этом избыток солюбилизатора удаляют перед введением композиции пациенту, используя традиционные методики, такие как дистилляция или упаривание. Так, если он присутствует, солюбилизатор может находиться в массовом отношении, составляющем 10%, 25%, 50%, 100% или вплоть до примерно 200% по массе включительно из расчета на объединенную массу лекарственного средства и других эксципиентов. Если необходимо, также можно использовать очень небольшие количества солюбилизатора, такие как 5%, 2%, 1% или даже меньше. Обычно, солюбилизатор может присутствовать в количестве от примерно 1% до примерно 100%, в более типичном случае от примерно 5% до примерно 25% по массе.

Кроме того, композиция может включать одно или более чем одно из фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ и эксципиентов. Такие вспомогательные вещества и эксципиенты включают, без ограничения, вещества, уменьшающие липкость, противовспенивающие вещества, буферные агенты, полимеры, антиоксиданты, консерванты, хелатирующие агенты, вещества, изменяющие вязкость, вещества, изменяющие тоничность, корригенты, красители, отдушки, заглушающие агенты, суспендирующие агенты, связующие вещества, наполнители, смягчители, смазывающие вещества и их смеси.

В дополнение к этому, в композицию могут быть включены кислота или основание для облегчения технологии изготовления, для усиления стабильности или по другим причинам. Примеры фармацевтически приемлемых оснований включают аминокислоты, сложные эфиры аминокислот, гидроксид аммония, гидроксид калия, гидроксид натрия, гидрокарбонат натрия, гидроксид алюминия, карбонат кальция, гидроксид магния, алюмосиликат магния, синтетический алюмосиликат, синтетический гидрокальцит, гидроксид алюминия магния, диизопропилэтиламин, этаноламин, этилендиамин, триэтаноламин, триэтиламин, триизопропаноламин, триметиламин, трис(гидроксиметил)аминометан (ТРИС) и тому подобное. Также подходят основания, которые являются солями фармацевтически приемлемой кислоты, такой как уксусная кислота, акриловая кислота, адипиновая кислота, альгиновая кислота, алкансульфоновая кислота, аминокислоты, аскорбиновая кислота, бензойная кислота, борная кислота, масляная кислота, карбоновая кислота, лимонная кислота, жирные кислоты, муравьиная кислота, фумаровая кислота, глюконовая кислота, гидрохинонсульфоновая кислота, изоаскорбиновая кислота, молочная кислота, малеиновая кислота, щавелевая кислота, лара-бромфенилсульфоновая кислота, пропионовая кислота, л-толуолсульфоновая кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, янтарная кислота, дубильная кислота, винная кислота, тиогликолевая кислота, толуолсульфоновая кислота, мочевая кислота и тому подобное. Соли полипротонных кислот, такие как фосфат натрия, гидрофосфат динатрия и дигидрофосфат натрия, также могут быть использованы. Если основанием является соль, то катион может быть любым удобным и фармацевтически приемлемым катионом, таким как аммоний, катионы щелочных металлов, щелочноземельных металлов и тому подобное. Пример может включать, но не ограничиваться этим, натрий, калий, литий, магний, кальций и аммоний.

Подходящими кислотами являются фармацевтически приемлемые органические или неорганические кислоты. Примеры подходящих неорганических кислот включают соляную кислоту, бромистоводородную кислота, иодистоводородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, борную кислоту, фосфорную кислоту и тому подобное. Примеры подходящих органических кислот включают уксусную кислоту, акриловую кислоту, адипиновую кислоту, альгиновую кислоту, алкансульфоновые кислоты, аминокислоты, аскорбиновую кислоту, бензойную кислоту, борную кислоту, масляную кислоту, карбоновую кислоту, лимонную кислоту, жирные кислоты, муравьиную кислоту, фумаровую кислоту, глюконовую кислоту, гидрохинонсульфоновую кислоту, изоаскорбиновую кислоту, молочную кислоту, малеиновую кислоту, метансульфоновую кислоту, щавелевую кислоту, пара-бромфенилсульфоновую кислоту, пропионовую кислоту, п-толуолсульфоновую кислоту, салициловую кислоту, стеариновую кислоту, янтарную кислоту, дубильную кислоту, винную кислоту, тиогликолевую кислоту, толуолсульфоновую кислоту, мочевую кислоту и тому подобное.

Фармацевтические композиции для инъекций. В некоторых воплощениях согласно данному изобретению предложена фармацевтическая композиция для инъекций, содержащая соединение по настоящему изобретению и фармацевтический эксципиент, подходящий для инъекций. Компоненты и количества агентов в таких композициях такие, как они описаны в данной заявке.

Формы, в которые могут быть включены новые композиции по настоящему изобретению для их введения путем инъекции, включают водные или масляные суспензии или эмульсии с кунжутным маслом, кукурузным маслом, хлопковым маслом или арахисовым маслом, а также эликсиры, маннит, декстрозу или стерильный водный раствор и подобные фармацевтические разбавители.

Водные растворы в физиологическом растворе также традиционно используются для инъекций. Также могут быть использованы этанол, глицерин, пропиленгликоль, жидкий полиэтиленгликоль и тому подобное (и их подходящие смеси), производные циклодекстринов и растительные масла. Надлежащую текучесть можно поддерживать, например, путем использования вещества для покрытия, такого как лецитин, для поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсии и путем использования поверхностно-активных веществ. Предотвращение действия микроорганизмов может быть осуществлено различными антибактериальными и противогрибковыми агентами, например парабенами, хлорбутанолом, фенолом, сорбиновой кислотой, тимеросалом и тому подобным.

Стерильные инъекционные растворы готовят путем введения соединения по настоящему изобретению в необходимом количестве в соответствующий растворитель вместе с различными другими ингредиентами, которые перечислены выше, как будет необходимо, с последующей стерилизацией фильтрованием. Обычно дисперсии готовят путем введения различных стерильных активных ингредиентов в стерильный разбавитель, который содержит основную диспергирующую среду и необходимые другие ингредиенты из тех, которые перечислены выше. В случае стерильных порошков для приготовления стерильных инъекционных растворов некоторыми желаемыми способами изготовления являются методики вакуумной сушки и лиофилизационной сушки, которые позволяют получить порошок активного ингредиента плюс любого дополнительного желаемого ингредиента из раствора, подвергнутого предварительной стерилизации фильтрованием.

Фармацевтические композиции для местной (например, трансдермальной) доставки. В некоторых воплощениях согласно данному изобретению предложена фармацевтическая композиция для трансдермальной доставки, содержащая соединение по настоящему изобретению и фармацевтический эксципиент, подходящий для трансдермальной доставки.

Композиции по настоящему изобретению могут быть изготовлены в виде препаратов в твердой, полутвердой или жидкой формах, подходящих для локального или местного введения, таких как гели, водорастворимые желе, кремы, лосьоны, суспензии, пенки, порошки, взвеси, мази, растворы, масла, пасты, суппозитории, спреи, эмульсии, солевые растворы, растворы на основе диметилсульфоксида (DMSO). Как правило, использование носителей, имеющих более высокие значения плотности, позволяет получить область с пролонгированным действием активных ингредиентов. Напротив, композиция в растворе может обеспечивать более быстрое действие активного ингредиента на выбранную область.

Фармацевтические композиции также могут содержать подходящие носители или эксципиенты в твердой или гелеобразной фазе, представляющие собой соединения, которые позволяют увеличить проникновение или способствуют доставке молекул терапевтических средств через определяемый роговым слоем кожи барьер проницаемости. Существует много таких усиливающих проникновение молекул, известных специалистам в области композиций для местного применения. Примеры таких носителей и эксципиентов включают, но не ограничиваются этим, увлажнители (например, мочевину), гликоли (например, пропиленгликоль), спирты (например, этанол), жирные кислоты (например, олеиновую кислоту), поверхностно-активные вещества (например, изопропилмиристат и лаурилсульфат натрия), пирролидоны, глицеринмонолаурат, сульфоксиды, терпены (например, ментол), амины, амиды, алканы, алканолы, воду, карбонат кальция, фосфат кальция, различные сахара, крахмалы, производные целлюлозы, желатин и полимеры, такие как полиэтиленгликоли.

В другой типичной композиции, предназначенной для применения в способах по настоящему изобретению, используются устройства для трансдермальной доставки ("пластыри"). Такие трансдермальные пластыри могут быть использованы для обеспечения непрерывной или прерываемой инфузии соединения по настоящему изобретению в регулируемых количествах либо в присутствии, либо в отсутствие другого агента.

Конструкция и применение трансдермальных пластырей для доставки фармацевтических агентов хорошо известны в данной области техники. См., например, патенты США №5023252, 4992445 и 5001139. Такие пластыри могут быть сконструированы для непрерывной, пульсирующей доставки или доставки по необходимости фармацевтических агентов.

Фармацевтические композиции для ингаляции. Композиции для ингаляции или инсуффляции включают растворы и суспензии в фармацевтически приемлемых, водных или органических растворителях или их смесях и порошках. Жидкие или твердые композиции могут содержать подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты, которые описаны выше. Предпочтительно, композиции вводят пероральным или назальным способом через дыхательные пути для оказания местного или системного эффекта. Композиции предпочтительно в фармацевтически приемлемых растворителях можно распылять, используя инертные газы. Распыляемые растворы можно вдыхать непосредственно из распыляющего устройства или распыляющее устройство может быть присоединено к респиратору, или с помощью дыхательной установки, работающей под перемежающимся положительном давлении. Композиции в виде раствора, суспензии или порошка могут быть введены, предпочтительно перорально или назально, из устройств, с помощью которых композицию доставляют надлежащим способом.

Другие фармацевтические композиции. Фармацевтические композиции также могут быть изготовлены из композиций, изложенных в данной заявке, и одного или более чем одного фармацевтически приемлемого эксципиента, подходящего для сублингвального, трансбуккального, ректального, внутрикостного, внутриглазного, интраназального, эпидурального или интраспинального введения. Изготовление таких фармацевтических композиций хорошо известно в данной области техники. См., например, Anderson, Philip О.; Knoben, James Е.; Troutman, William G, eds., Handbook of Clinical Drug Data, десятое издание, McGraw-Hill, 2002; Pratt and Taylor, eds., Principles of Drug Action, третье издание, Churchill Livingston, New York, 1990; Katzung, ed., Basic and Clinical Pharmacology, девятое издание, McGraw Hill, 20037ybg; Goodman and Gilman, eds., The Pharmacological Basis of Therapeutics, десятое издание, McGraw Hill, 2001; Remingtons Pharmaceutical Sciences, 20-e издание, Lippincott Williams & Wilkins., 2000; Martindale, The Extra Pharmacopoeia, тридцать второе издание (The Pharmaceutical Press, London, 1999); все они включены в данное описание во всей своей полноте посредством ссылки.

Введение соединений или фармацевтической композиции по настоящему изобретению может быть осуществлено любым способом, который обеспечивает доставку соединений к месту действия. Эти способы включают пероральные способы, интрадуоденальные способы, парентеральную инъекцию (включая внутривенную, внутриартериальную, подкожную, внутримышечную, интраваскулярную, внутрибрюшинную или инфузию), местное (например, трансдермальные применения), ректальное введение, посредством локальной доставки с использованием катетера или стента или посредством ингаляции. Соединения также можно вводить внутрь жировой ткани или интратекально.

Количество вводимого соединения будет зависеть от подвергаемого лечению млекопитающего, тяжести расстройства или состояния, скорости введения, фармакокинетики соединения и выбора лечащего врача. Тем не менее, эффективная дозировка находится в диапазоне от примерно 0,001 до примерно 100 мг на кг массы тела в сутки, предпочтительно от примерно 1 до примерно 35 мг/кг/сутки в разовой или разделенных дозах. Для человека массой 70 кг это количество будет составлять от примерно 0,05 до 7 г/сутки, предпочтительно от примерно 0,05 до примерно 2,5 г/сутки. В некоторых случаях более адекватными могут оказаться уровни дозировок меньше нижнего предела вышеуказанного диапазона, тогда как в других случаях могут быть использованы существенно более высокие дозы, что не вызовет никакого опасного побочного эффекта, например, путем разделения таких больших доз на несколько небольших доз для введения в течение суток.

В некоторых воплощениях соединение по изобретению вводят в разовой дозе. Обычно такое введение будет осуществлено путем инъекции, например, внутривенной инъекции, с целью быстрого введения агента. Тем не менее, могут быть использованы другие способы, которые будут целесообразны. Разовую дозу соединения по изобретению также можно применять для лечения острого состояния.

В некоторых воплощениях соединение по изобретению вводят в виде многократных доз. Введение может быть выполнено примерно один раз, два раза, три раза, четыре раза, пять раз, шесть раз или более шести раз в сутки. Введение может быть выполнено примерно один раз месяц, один раз каждые две недели, один раз в неделю или один раз в каждые из последующих суток. В другом воплощении соединение по изобретению и другой агент вводят вместе от примерно одного раза в сутки до примерно 6 раз в сутки. В другом воплощении введение соединения по изобретению и агента продолжают выполнять в течение менее чем примерно 7 суток. В еще одном другом воплощении введение продолжают выполнять в течение более чем примерно 6, 10, 14, 28 суток, двух месяцев, шести месяцев или одного года. В некоторых случаях осуществляют непрерывное введение и поддерживают его так долго, как это необходимо.

Введение агентов по изобретению может продолжаться так долго, как это необходимо. В некоторых воплощениях агент по изобретению вводят в течение более 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 14 или 28 суток. В некоторых воплощениях агент по изобретению вводят в течение менее 28, 14, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 суток. В некоторых воплощениях агент по изобретению вводят постоянно, например для лечения хронических эффектов.

Эффективное количество соединения по изобретению может быть введено или в разовой дозе, или в виде множественных доз любым из приемлемых способов введения агентов, обладающих сходным применением, включая ректальный, трансбуккальный, интраназальный и трансдермальный способы, путем внутриартериальной инъекции, внутривенно, внутрибрюшинно, парентерально, внутримышечно, подкожно, перорально, местно или в виде средства для ингаляции.

Композиции по изобретению также могут быть доставлены с помощью устройства с пропиткой или покрытием, такого как стент, например, или вводимый в артерию полимерный материал цилиндрической формы. Такой способ введения может помочь, например, в предупреждении или уменьшении рестеноза после таких процедур, как баллонная ангиопластика. Без связи с теорией полагают, что соединения по изобретению могут замедлять или ингибировать миграцию и пролиферацию гладкомышечных клеток в стенке артерии, которые вносят вклад в рестеноз. Соединение по изобретению может быть введено, например, путем локальной доставки из страт стента, из трансплантата стента, из трансплантатов или из покрытия или оболочки стента. В некоторых воплощениях соединение по изобретению смешивают с матрицей. Такая матрица может представлять собой полимерную матрицу и может служить для связывания соединения со стентом. Полимерные матрицы, подходящие для такого использования, включают, например, сложные полиэфиры или сополимеры сложных полиэфиров на основе лактона, такие как полилактид, поликапролактонгликолид, сложные полиортоэфиры, полиангидриды, полиаминокислоты, полисахариды, полифосфазены, сополимеры поли-[(простой эфир)-(сложный эфир)] (например PEO-PLLA (сополимер на основе полиэтиленоксида и полимолочной кислоты)); полидиметилсилокеан, поли(этилен-винилацетат), полимеры или сополимеры на основе акрилата (например, полигидроксиэтил-метилметакрилат, поливинил-пирролидинон), фторированные полимеры, такие как политетрафторэтилен и сложные эфиры целлюлозы. Подходящие матрицы могут быть неразлагаемыми или могут со временем разлагаться, высвобождая соединение или соединения. Соединения по изобретению могут быть нанесены на поверхность стента различными способами, такими как нанесение покрытия методом погружения/центрифугирования, нанесение покрытия методом распыления, нанесение покрытия методом погружения и/или нанесение покрытия с помощью щеточного устройства (brush-coating). Соединение может быть нанесено в расворителе, и растворитель может быть оставлен для выпаривания, в результате чего образуется слой соединения на стенте. Альтернативно, соединение может быть локализовано в корпусе стента или трансплантата, например в микроканалах или микропорах. После имплантации соединение диффундирует из корпуса стента для контакта со стенкой артерии. Такие стенты могут быть изготовлены путем погружения стента, изготавливаемого с тем, чтобы он содержал такие микропоры или микроканалы, в раствор соединения по изобретению в подходящем растворителе с последующим выпариванием растворителя. Избыток лекарственного средства на поверхности стента может быть удален путем дополнительной непродолжительной промывки растворителем. В следующих других воплощениях соединения по изобретению могут быть связаны ковалентной связью со стентом или трансплантатом. Можно использовать ковалентный линкер, который разрушается in vivo, приводя к высвобождению соединений по изобретению. Для такой цели может быть использована любая биологически лабильная связь, как например, сложноэфирная, амидная или ангидридная связи. Соединения по изобретению могут быть дополнительно введены интраваскулярно из баллона, используемого в процессе ангиопластики. Для уменьшения рестеноза также может быть выполнено экстраваскулярное введение соединений путем внесения композиций по изобретению через перикард или адвентициальную оболочку.

Разнообразные стентовые устройства, которые могут быть использованы как описано, раскрыты, например, в следующих ссылках, все они тем самым включены здесь посредством ссылки: патент США №5451233; патент США №5040548; патент США №5061273; патент США №5496346; патент США №5292331; патент США №5674278; патент США №3657744; патент США №4739762; патент США №5195984; патент США №5292331; патент США №5674278; патент США №5879382; патент США №6344053.

Соединения по изобретению могут быть введены дозированно. В данной области техники известно, что вследствие межличностной вариабельности в фармакокинетике соединений, индивидуализация режима введения является необходимой чертой для оптимальной терапии. Режим дозирования для соединения по изобретению может быть определен на основании обычного экспериментирования с учетом настоящего описания.

В том случае, когда соединение по изобретению вводят в композицию, которая содержит один или более агентов и этот агент имеет более короткий период полувыведения по сравнению с соединением по изобретению, стандартные лекарственные формы агента и соединения по изобретению могут быть соответственным образом скорректированы.

Фармацевтическая композиция, являющаяся объектом изобретения, может быть, например, в форме, подходящей для перорального введения в виде таблетки, капсулы, пилюли, порошка, композиций с непрерывным высвобождением, раствора, суспензии, для парентеральной инъекции в виде стерильного раствора, суспензии или эмульсии, для местного введения в виде мази или крема или для ректального введения в виде суппозитория. Такая фармацевтическая композиция может быть в стандартных лекарственных формах, подходящих для однократного введения точных дозировок. Фармацевтическая композиция будет включать традиционный фармацевтический носитель или эксципиент и соединение по изобретению в качестве активного ингредиента. В дополнение к этому, она может включать другие медицинские или фармацевтические агенты, носители, адъюванты и т.д.

Типичные формы для парентерального введения включают растворы или суспензии активного соединения в стерильных водных растворах, например растворах водного пропиленгликоля или декстрозы. Такие лекарственные формы могут быть подходящим образом забуферены, если необходимо.

Активность соединений по настоящему изобретению может быть определена согласно следующей методике, а также методике, описанной ниже в разделе Примеры. Активность киназы оценивают путем измерения, в присутствии киназы, включения γ-33Р-фосфата из γ-33Р-АТФ в содержащий N-концевую His-метку субстрат, который экспрессируется в Е.coli и который очищают традиционными способами. Этот анализ выполняют в 96-луночном полипропиленовом планшете. Инкубируемая смесь (100 мкл) содержит 25 мМ Hepes (N-2-гидроксиэтил-пиперазин-N-2-этансульфоновая кислота), pH 7,4, 10 мМ MgCl2, 5 мМ β-глицерофосфат, 100 мкМ Na-ортованадат, 5 мМ DTT (дитиотреитол), 5 нМ киназу и 1 мкМ субстрат. Ингибиторы суспендируют в DMSO и все реакции, включая контроли, выполняют при конечной концентрации DMSO, равной 1%. Реакции инициируют добавлением 10 мкМ АТФ (в дозе 0,5 мкКи γ-33Р-АТФ/лунка) и инкубируют при температуре окружающей среды в течение 45 минут. Добавляют равный объем 25%-ной ТСА (трихлоруксусной кислоты) для остановки реакции и осаждения белков. Осажденные белки захватывают на фильтровальных планшетах с фильтром из стекловолокна В и избыток меченого АТФ отмывают, используя харвестер Tomtec MACH III. Планшеты оставляют сушиться на воздухе, после чего в каждую лунку добавляют по 30 мкл Packard Microscint 20 и планшеты просчитывают с использованием Packard TopCount.

Согласно изобретению также предложены наборы. Наборы включают соединение или соединения по настоящему изобретению, как они изложены в данной заявке, в подходящей упаковке, и письменный документ, который может включать инструкции по применению, обсуждение клинических исследованией, список побочных эффектов и тому подобное. Такие наборы также могут включать такую информацию, как ссылки из научной литературы, материалы, относящиеся к инструкциям по применению препарата, результаты клинических испытаний и/или краткий отчет о них и тому подобное, в которых указаны или установлены активности и/или преимущества данной композиции и/или в которых описаны дозировки, способы введения, побочные эффекты, лекарственные взаимодействия или другая информация, полезная учреждениям и специалистам, обеспечивающим медицинское обслуживание. Такая информация может быть основана на результатах различных исследований, например исследований с использованием экспериментальных животных, участвующих в моделях in vivo, и исследований, основанных на клинических испытаниях на людях. Данный набор может дополнительно содержать другой агент. В некоторых воплощениях соединение по настоящему изобретению и агент представлены в наборе в виде отдельных композиций в отдельных контейнерах. В некоторых воплощениях соединение по настоящему изобретению и агент представлены в наборе в виде единой композиции в контейнере. Подходящая упаковка и дополнительные изделия для применения (например, мерный стаканчик для жидких препаратов, обертывание в фольгу для сведения в минимуму воздействия воздуха и тому подобное) известны в данной области техники и могут быть включены в набор. Наборы, изложенные в данной заявке, могут быть предложены, выставлены на продажу и/или рекламированы учреждениям и специалистам, обеспечивающим медицинское обслуживание, включая врачей, медицинских сестер, фармацевтов, должностных лиц, ответственных за составление формуляров лекарственных средств, и тому подобное. Кроме того, наборы, в некоторых воплощениях, можно продавать непосредственно потребителю.

Способы

Кроме того, согласно изобретению предложены способы применения соединений или фармацевтических композиций по настоящему изобретению для лечения болезненных состояний, включая, но не ограничиваясь этим, заболевания, связанные с неправильной работой РI3-киназы одного или более типов. Подробное описание состояний и расстройств, опосредуемых р110δ-киназной активностью, приведено в заявке Sadu и др., WO 01/81346, которая включена в данное описание во всей своей полноте посредством ссылки для всех назначений.

Способы лечения, предложенные в данной заявке, включают введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению. В одном воплощении настоящего изобретения предложен способ лечения воспалительного расстройства, включая аутоиммунные заболевания, у млекопитающего. Способ включает введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемых соли, сложного эфира, пролекарства, сольвата, гидрата или производного. Примеры аутоиммунных заболеваний включают, но не ограничиваются этим, острый диссеминирующий энцефаломиелит (ADEM), болезнь Аддисона, антифосфолипидный синдром (APS), гипопластическую анемию, аутоиммунный гепатит, глютеновую энтеропатию, болезнь Крона, сахарный диабет (1 типа), синдром Гудпасчера, болезнь Грейвса, синдром Гийена-Барре (GBS), болезнь Хашимото, красную волчанку, множественный склероз, тяжелую псевдопаралитическую миастению, опсоклонус-миоклонус синдром (OMS), ретробульбарный неврит, тиреоидит Орда, пузырчатку, полиартрит, первичный биллиарный цирроз, псориаз, ревматоидный артрит, синдром Рейтера, артериит Такаясу, темпоральный артериит (также известный как "гигантоклеточный артериит"), аутоиммунную гемолитическую анемию с синдромом тепловых агглютининов, гранулематоз Вегенера, универсальную алопецию, болезнь Шагаса, синдром хронической усталости, вегетативную дистонию, эндометриоз, гнойный гидраденит, интерстициальный цистит, нейромиотонию, саркоидоз, склеродермию, язвенный колит, витилиго и вульводинию. Другие расстройства включают нарушения резорбции кости и тромбоз.

В некоторых воплощениях способ лечения воспалительных или аутоиммунных заболеваний включает введение субъекту (например, млекопитающему) терапевтически эффективного количества одного или более соединений по настоящему изобретению, которые селективно ингибируют PI3K-δ и/или РI3К-γ по сравнению со всеми другими РI3-киназами I типа. Такое селективное ингибирование PI3K-δ и/или РI3К-γ может иметь преимущество при лечении любого из заболеваний или состояний, изложенных в данной заявке. Например, селективное ингибирование PI3K-δ может ингибировать воспалительные ответы, ассоциированные с воспалительными заболеваниями, аутоиммунным заболеванием или заболеваниями, связанными с нежелательным иммунным ответом, включая, но не ограничиваясь этим, астму, эмфизему, аллергию, дерматит, ревматоидный артрит, псориаз, красную волчанку или реакцию "трансплантат против хозяина". Кроме того, селективное ингибирование PI3K-δ может обеспечивать уменьшение воспалительного или нежелательного иммунного ответа без сопутствующего уменьшения способности ослаблять бактериальную, вирусную и/или грибковую инфекцию. Селективное ингибирование как PI3K-δ, так и РI3К-γ может иметь преимущество в большей степени ингибирования воспалительного ответа у субъекта, чем это можно было бы получить с использованием ингибиторов, которые селективно ингибируют только PI3K-δ или РI3К-γ. В одном из аспектов один или более способов, являющихся объектом изобретения, эффективны в уменьшении продукции антигенспецифических антител in vivo примерно в 2 раза, 3 раза, 4 раза, 5 раз, 7,5 раза, 10 раз, 25 раз, 50 раз, 100 раз, 250 раз, 500 раз, 750 раз или примерно 1000 раз или больше. В другом аспекте один или более способов, являющихся объектом изобретения, эффективны в уменьшении продукции антигенспецифических IgG3 и/или IgGM in vivo примерно в 2 раза, 3 раза, 4 раза, 5 раз, 7,5 раза, 10 раз, 25 раз, 50 раз, 100 раз, 250 раз, 500 раз, 750 раз или примерно 1000 раз или больше.

В одном из аспектов один или более способов, являющихся объектом изобретения, эффективны в уменьшении интенсивности симптомов, ассоциированных с ревматоидным артритом, включая, но не ограничиваясь этим, уменьшение опухания суставов, уменьшение уровней антител против коллагена в сыворотке крови и/или уменьшение патологии суставов, такой как резорбция кости, поражение хряща, паннус и/или воспаление. В другом аспекте способы, являющиеся объектом изобретения, эффективны в уменьшении воспаления голеностопного сустава по меньшей мере примерно на 2%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 50%, 60% или примерно 75%-90%. В другом аспекте способы, являющиеся объектом изобретения, эффективны в уменьшении воспаления коленного сустава по меньшей мере примерно на 2%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 50%, 60% или примерно 75%-90% или больше. В еще одном другом аспекте способы, являющиеся объектом изобретения, эффективны в уменьшении уровней антител против коллагена II типа в сыворотке крови по меньшей мере примерно на 10%, 12%, 15%, 20%, 24%, 25%, 30%, 35%, 50%, 60%, 75%, 80%, 86%, 87% или примерно 90% или больше. В другом аспекте способы, являющиеся объектом изобретения, эффективны в уменьшении показателей по гистопатологической шкале для голеностопного сустава примерно на 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 75%, 80%, 90% или больше. В еще одном другом аспекте способы, являющиеся объектом изобретения, эффективны в уменьшении показателей по гистопатологической шкале для коленного сустава примерно на 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 75%, 80%, 90% или больше.

В других воплощениях настоящего изобретения предложены способы применения соединений или фармацевтических композиций для лечения респираторных заболеваний, включая, но не ограничиваясь этим, заболевания, поражающие доли легкого, плевральную полость, бронхиолы, трахею, верхние дыхательные пути или нервы и участвующую в акте дыхания мускулатуру. Например, предложены способы для лечения обструктивной болезни легких. Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) представляет собой обобщающий термин для группы заболеваний респираторного тракта, которые характеризуются обструкцией или ограничением дыхательных путей. Состояниями, включенными в этот обобщающий термин, являются: хроническое бронхит, эмфизема и бронхоэктаз.

В другом воплощении соединения, изложенные в данной заявке, используют для лечения астмы. Кроме того, соединения или фармацевтические композиции, изложенные в данной заявке, могут быть применены для лечения эндотоксикоза и сепсиса. В одном воплощении соединения или фармацевтические композиции, изложенные в данной заявке, используют для лечения ревматоидного артрита (RA). В еще одном другом воплощении соединения или фармацевтические композиции, изложенные в данной заявке, используют для лечения контактного или атопического дерматита. Контактный дерматит включает раздражающий дерматит, фототоксический дерматит, аллергический дерматит, фотоаллергический дерматит, контактную крапивницу, системный дерматит контактного типа и тому подобное. Раздражающий дерматит может иметь место, когда на кожу наносят слишком много вещества или когда кожа обладает чувствительностью к определенному веществу. Атопический дерматит, иногда называемый экземой, представляет собой вид дерматита - атопическое кожное заболевание.

Изобретение также относится к способу лечения гиперпролиферативного расстройства у млекопитающего, включающему введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемых соли, сложного эфира, пролекарства, сольвата, гидрата или производного. В некоторых воплощениях указанный способ относится к лечению рака, такого как острый миелоидный лейкоз, рак вилочковой железы, головного мозга, легкого, плоскоклеточный рак, рак кожи, глаз, ретинобластома, внутриглазная меланома, рак полости рта и ротоглотки, мочевого пузыря, желудочно-кишечного тракта, желудка, поджелудочной железы, мочевого пузыря, молочной железы, шейки матки, головы, шеи, почечной сферы, почек, печени, яичников, предстательной железы, колоректальный рак, рак пищевода, яичка, гинекологической сферы, щитовидной железы, ЦНС, ПНС, СПИД-ассоциированный (например, лимфома и саркома Калоши) или индуцируемый вирусами рак. В некоторых воплощениях указанный способ относится к лечению доброкачественного гиперпролиферативного расстройства, такого как доброкачественная гиперплазия кожи (например, псориаз), рестеноз или доброкачественное гиперпролиферативное расстройство предстательной железы (например, доброкачественная гипертрофия предстательной железы (ВРН)).

Изобретение также относится к способу лечения заболевания, связанного с васкулогенезом или ангиогенезом, у млекопитающего, включающему введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемых соли, сложного эфира, пролекарства, сольвата, гидрата или производного. В некоторых воплощениях указанный способ относится к лечению заболевания, выбранного из группы, состоящей из опухолевого ангиогенеза, хронического воспалительного заболевания, такого как ревматоидный артрит, атеросклероза, воспалительного заболевания кишечника, кожных заболеваний, таких как псориаз, экзема и склеродермия, диабета, диабетической ретинопатии, ретинопатии недоношенных, возрастной макулярной дегенерации, гемангиомы, глиомы, меланомы, саркомы Капоши и рака яичников, молочной железы, легкого, поджелудочной железы, предстательной железы, толстой кишки и эпидермоидного рака.

Пациенты, которые могут быть подвергнуты лечению соединениями по настоящему изобретению или фармацевтически приемлемыми солью, сложным эфиром, пролекарством, сольватом, гидратом или производным указанных соединений в соответствии со способами по данному изобретению, включают, например, пациентов, которым был поставлен диагноз псориаз; рестеноз; атеросклероз; ВРН; рак молочной железы, такой как дуктальная карцинома в ткани протоков молочной железы, виды медуллярного рака, виды коллоидного рака, тубулярные карциномы и воспалительный рак молочной железы; рак яичников, включая эпителиальные опухоли яичников, такие как аденокарцинома в яичнике и аденокарцинома, которая мигрирует из яичника в брюшную полость; рак матки; рак шейки матки, такой как аденокарцинома в эпителии шейки, включая плоскоклеточный(ые) рак и аденокарциномы; рак предстательной железы, например, рак предстательной железы, выбранный из следующего далее: аденокарциномы или аденокарциномы, которая мигрирует в кость; рак поджелудочной железы, такой как эпителиоидная карцинома в ткани протоков поджелудочной железы и аденокарцинома в протоке поджелудочной железы; рак мочевого пузыря, такой как переходно-клеточный рак в мочевом пузыре, уротелиальные карциномы (переходно-клеточные карциномы), опухоли в уротелиальных клетках, выстилающих мочевой пузырь, плоскоклеточный рак, аденокарциномы и мелкоклеточный рак; лейкоз, такой как острый миелоидный лейкоз (AML), острый лимфоцитарный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, волосатоклеточный лейкоз, миелодисплазия, миелопролиферативные расстройства, острый миелогенный лейкоз (AML), хронический миелогенный лейкоз (CML), мастоцитоз, хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), множественная миелома (ММ) и миелодиспластический синдром (MDS); рак кости; рак легкого, такой как немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), который подразделяется на плоскоклеточный рак, аденокарциномы и крупноклеточные недифференцируемые карциномы, и мелкоклеточный рак легкого; рак кожи, такой как базальноклеточный рак, меланома, плоскоклеточный рак и актинический кератоз, представляющий собой состояние кожи, которое иногда развивается в плоскоклеточный рак; глазная ретинобластома; кожная или внутриглазная меланома (меланома глаза); первичный рак печени (рак, который начинается в печени); рак почек; рак щитовидной железы, как например, папиллярный, фолликулярный, медуллярный и анапластический; СПИД-ассоциированная лимфома, такая как диффузная В-крупноклеточная лимфома, В-клеточная иммунобластная лимфома и мелкоклеточная лимфома из нерасщепленных клеток; саркома Капоши; виды рака, индуцируемые вирусами, включая рак, индуцируемый вирусом гепатита В (HBV), вирусом гепатита С (HCV), и гепатоклеточную карциному; рак, индуцируемый Т-лимфотропным вирусом человека 1 типа (HTLV-1), и Т-клеточный лейкоз/лимфома взрослых; и рак, индуцируемый папиллома-вирусом человека (HPV), и рак шейки матки; виды рака центральной нервной системы (ЦНС), такие как первичная опухоль головного мозга, которая включает глиомы (астроцитому, анапластическую астроцитому или мультиформную глиобластому), олигодендроглиому, эпендимому, менингиому, лимфому, шванному и медуллобластому; виды рака периферической нервной системы (ПНС), такие как акустическая невринома и злокачественная опухоль оболочек периферических нервов (MPNST), включая нейрофибромы и шванномы, злокачественна фиброзна цитома, злокачественная фиброзная гистиоцитома, злокачественная менингиома, злокачественная мезотелиома и злокачественная смешанная опухоль Мюллера; рак полости рта и ротоглотки, такой как рак подроточной части глотки, рак гортани, носоглоточный рак и рак ротоглотки; рак желудка, такой как лимфомы, стромальные опухоли и карциноидные опухоли желудочно-кишечного тракта; рак яичка, такой как эмбрионально-клеточные опухоли (GCT), которые включают семиномы и несеминомные опухоли, и гонадные стромальные опухоли, которые включают опухоли из клеток Лейдига и опухоли из клеток Сертоли; рак вилочковой железы, такой как тимомы, карциномы тимуса, болезнь Ходжкина, неходжкинские лимфомы карциноиды или карциноидные опухоли; рак прямой кишки; и рак толстой кишки.

Изобретение также относится к способу лечения диабета у млекопитающего, включающему введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемых соли, сложного эфира, пролекарства, сольвата, гидрата или производного.

К тому же, соединения, изложенные в данной заявке, могут быть применены для лечения акне.

К тому же, соединения, изложенные в данной заявке, могут быть применены для лечения артериосклероза, включая атеросклероз. Артериосклероз представляет собой общий термин, описывающий любое склерозирование средних или больших артерий. Атеросклероз представляет собой склерозирование артерии главным образом из-за атеросклеротической бляшки.

Другие соединения, изложенные в данной заявке, могут быть применены для лечения гломерулонефрита. Гломерулонефрит представляет собой первичное или вторичное аутоиммунное почечное заболевание, характеризующееся воспалением клубочков. Оно может быть бессимптомным или протекать вместе с гематурией и/или протеинурией. Существует много общепризнанных типов, которые подразделяют на острый, подострый или хронический гломерулонефрит. Причины бывают инфекционные (бактериальные, вирусные или паразитические патогены), аутоиммунные или паранеопластические.

К тому же, соединения, изложенные в данной заявке, могут быть применены для лечения бурсита, волчанки, острого диссеминирующего энцефаломиелита (ADEM), болезни Аддисона, антифосфолипидного синдрома (APS), гипопластической анемии, аутоиммунного гепатита, глютеновой энтеропатии, болезни Крона, сахарного диабета (1 типа), синдрома Гудпасчера, болезни Грейвса, синдрома Гийена-Барре (GBS), болезни Хашимото, воспалительного заболевания кишечника, красной волчанки, тяжелой псевдопаралитической миастении, опсоклонус-миоклонус синдрома (OMS), ретробульбарного неврита, тиреоидита Орда, остеоартрита, увеоретинита, пузырчатки, полиартрита, первичного биллиарного цирроза, синдрома Рейтера, артериита Такаясу, темпорального артериита, аутоиммунной гемолитической анемии с синдромом тепловых агглютининов, гранулематоза Вегенера, универсальной алопеции, болезни Шагаса, синдрома хронической усталости, вегетативной дистонии, эндометриоза, гнойного гидраденита, интерстициального цистита, нейромиотонии, саркоидоза, склеродермии, язвенного колита, витилиго, вульводинии, аппендицита, артериита, артрита, блефарита, бронхиолита, бронхита, цервицита, холангита, холецистита, хориоамнионита, колита, конъюнктивита, цистита, дакриоаденита, дерматомиозита, эндокардита, эндометрита, энтерита, энтероколита, эпикондилита, эпидидимита, фасцита, фиброзита, гастрита, гастроэнтерита, гингивита, гепатита, гидраденита, илеита, ирита, ларингита, мастита, менингита, миелита, миокардита, миозита, нефрита, омфалита, оофорита, орхита, остита, отита, панкреатита, паротита, перикардита, перитонита, фарингита, плеврита, флебита, пневмонита, проктита, простатита, пиелонефрита, ринита, сальпингита, синусита, стоматита, синовита, тендонита, тонзилита, увеита, вагинита, васкулита или вульвита.

Изобретение также относится к способу лечения сердечно-сосудистого заболевания у млекопитающего, включающему введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемых соли, сложного эфира, пролекарства, сольвата, гидрата или производного. Примеры сердечно-сосудистых состояний включают, но не ограничиваются этим, атеросклероз, рестеноз, васкулярную окклюзию и обструктивную болезнь сонной артерии.

В другом аспекте настоящего изобретения предложены способы нарушения функции лейкоцитов или нарушения функции остеокластов. Способ включает приведение лейкоцитов или остеокластов в контакт с нарушающим функцию количеством соединения по изобретению.

В другом аспекте настоящего изобретения предложены способы лечения глазного заболевания путем введения одного или более чем одного соединения или одной или более чем одной фармацевтической композиции, являющихся объектом изобретения, в глаз субъекта.

Кроме того, предложены способы введения соединений по настоящему изобретению посредством глазных капель, внутриглазной инъекции, интравитреальной инъекции, местно или посредством использования устройства, элюирующего лекарственное средство, микрокапсул, имплантата или микроструйного устройства. В некоторых случаях соединения по настоящему изобретению вводят вместе с носителем или эксципиентом, который улучшает проникновение соединения внутрь глаза, таким как масляная и водная эмульсия с коллоидными частицами, имеющими масляное ядро, окруженное пленкой на границе раздела фаз.

В некоторых случаях коллоидные частицы включают по меньшей мере один катионный агент и по меньшей мере одно неионное поверхносто-активное вещество, такое как полоксамер, тилоксапол, полисорбат, производное полиоксиэтилена и касторового масла, сложный эфир сорбитана или полиоксил-стеарат. В некоторых случаях катионным агентом является алкиламин, третичный алкиламин, соединение четвертичного аммония, катионный липид, аминоспирт, соль бигуанида, катионное соединение или их смесь. В некоторых случаях катионным агентом является соль бигуанида, такая как хлоргексидин, полиаминопропил-бигуанид, фенформин, алкилбигуанид или их смесь. В некоторых случаях соединение четвертичного аммония представляет собой бензалконий-галогенид, лауралконий-галогенид, цетримид, гексадецилтриметиламмоний-галогенид, тетрадецилтриметил-аммоний-галогенид, додецилтриметиламмоний-галогенид, цетримоний-галогенид, бензетоний-галогенид, бегеналконий-галогенид (behenalkonium halide), цеталконий-галогенид, цетэтилдимоний-галогенид (cetethyldimonium halide), цетилпиридиний-галогенид, бензододециний-галогенид, хлораллил-метенамин-галогенид, миристилалконий-галогенид, стеаралконий-галогенид или смесь двух или более чем двух из них. В некоторых случаях катионный агент представляет собой бензалконий-хлорид, лауралконий-хлорид, бензододециний-бромид, бензетоний-хлорид, гексадецилтриметиламмоний-бромид, тетрадецилтриметиламмоний-бромид, додецилтриметиламмоний-бромид или смесь двух или более чем двух из них. В некоторых случаях масляная фаза представляет собой минеральное масло и легкое минеральное масло, триглицериды с цепью средней длины (МСТ), кокосовое масло; гидрогенизированные масла, включая гидрогенизированное хлопковое масло, гидрогенизированное пальмовое масло, гидрогенизированное касторовое масло или гидрогенизированное соевое масло; производные полиоксиэтилена и гидрогенизированного касторового масла, включая полиоксил-40 и гидрогенизированное касторовое масло, полиоксил-60 и гидрогенизированное касторовое масло или полиоксил-100 и гидрогенизированное касторовое масло.

Кроме того, согласно изобретению предложены способы модуляции киназной активности путем приведения киназы в контакт с количеством соединения по изобретению, достаточным для модуляции активности киназы. Модуляция может представлять собой ингибирование или активацию киназной активности. В некоторых воплощениях согласно изобретению предложены способы ингибирования киназной активности путем приведения киназы в контакт с количеством соединения по изобретению, достаточным для ингибирования активности киназы. В некоторых воплощениях согласно изобретению предложены способы ингибирования киназной активности в растворе путем приведения указанного раствора в контакт с количеством соединения по изобретению, достаточным для ингибирования активности киназы в указанном растворе. В некоторых воплощениях согласно изобретению предложены способы ингибирования киназной активности в клетке путем приведения указанной клетки в контакт с количеством соединения по изобретению, достаточным для ингибирования активности киназы в указанной клетке. В некоторых воплощениях согласно изобретению предложены способы ингибирования киназной активности в ткани путем приведения указанной ткани в контакт с количеством соединения по изобретению, достаточным для ингибирования активности киназы в указанной ткани. В некоторых воплощениях согласно изобретению предложены способы ингибирования киназной активности в организме путем приведения указанного организма в контакт с количеством соединения по изобретению, достаточным для ингибирования активности киназы в указанном организме. В некоторых воплощениях согласно изобретению предложены способы ингибирования киназной активности у животного путем приведения указанного животного в контакт с количеством соединения по изобретению, достаточным для ингибирования активности киназы у указанного животного. В некоторых воплощениях согласно изобретению предложены способы ингибирования киназной активности у млекопитающего путем приведения указанного млекопитающего в контакт с количеством соединения по изобретению, достаточным для ингибирования активности киназы у указанного млекопитающего. В некоторых воплощениях согласно изобретению предложены способы ингибирования киназной активности у человека путем приведения указанного человека в контакт с количеством соединения по изобретению, достаточным для ингибирования активности киназы у указанного человека. В некоторых воплощениях % киназной активности после приведения киназы в контакт с соединением по изобретению составляет менее 1, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 90, 95 или 99% киназной активности, замеряемой в отсутствие указанной стадии приведения в контакт.

В некоторых воплощениях киназа представляет собой липидкиназу или протеинкиназу. В некоторых воплощениях киназа выбрана из группы, состоящей из РI3-киназы, включая разные изоформы, такие как РI3-киназа α, РI3-киназа β, РI3-киназа γ, РI3-киназа δ; DNA-PK; mТоr; Аbl, VEGFR, эфринового рецептора В4 (EphB4); рецепторной тирозинкиназы ТЕК (TIE2); Fms-подобной тирозинкиназы 3 (FLT-3); рецептора ростового фактора из тромбоцитов (PDGFR); RET; ATM; ATR; hSmg-1; Hck; Src; рецептора эпидермального фактора роста (EGFR); KIT (рецептор фактора роста стволовых клеток); инсулинового рецептора (IR) и IGFR (рецептор инсулиноподобного фактора роста).

Кроме того, согласно изобретению предложены способы модуляции PI3-киназной активности путем приведения РI3-киназы в контакт с количеством соединения по изобретению, достаточным для модуляции активности PI3-киназы. Модуляция может представлять собой ингибирование или активацию РI3-киназной активности. В некоторых воплощениях согласно изобретению предложены способы ингибирования РI3-киназной активности путем приведения РI3-киназы в контакт с количеством соединения по изобретению, достаточным для ингибирования активности РI3-киназы. В некоторых воплощениях согласно изобретению предложены способы ингибирования PI3-киназной активности. Такое ингибирование может происходить в растворе, в клетке, экспрессирующей одну или более чем одну РI3-киназу, в ткани, содержащей клетку, экспрессирующую одну или более чем одну РI3-киназу, или в организме, экспрессирующем одну или более чем одну РI3-киназу. В некоторых воплощениях согласно изобретению предложены способы ингибирования РI3-киназной активности у животного (включая млекопитающих, например, людей) путем приведения указанного животного в контакт с количеством соединения по изобретению, достаточным для ингибирования активности РI3-киназы у указанного животного.

Комбинированное лечение

Также, согласно настоящему изобретению предложены способы комбинированной терапии, в которых агент, известный тем, что модулирует другие пути или другие компоненты того же пути или даже перекрывающиеся наборы ферментов-мишеней, используют в комбинации с соединением по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемыми солью, сложным эфиром, пролекарством, сольватом, гидратом или производным. В одном аспекте такая терапия включает, но не ограничивается этим, комбинацию соединения, являющегося объектом изобретения, с химиотерапевтическими агентами, терапевтическими антителами и лучевой терапией для обеспечения синергического или аддитивного терапевтического эффекта.

В одном аспекте соединения или фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут проявлять синергическую или аддитивную эффективность при введении в комбинации с агентами, которые ингибируют продукцию или активность IgE. Такая комбинация может снижать нежелательный эффект высокого уровня IgE, ассоциированный с применением одного или более ингибиторов PI3Kδ, если такой эффект имеет место. Это может быть особенно полезно в лечении аутоиммунных и воспалительных расстройств (AND), таких как ревматоидный артрит. Кроме того, введение ингибиторов PI3Kδ или РI3Кδ/γ по настоящему изобретению в комбинации с ингибиторами mTOR также может приводить к синергическому действию посредством усиленного ингибирования РI3К-пути.

В отдельном, но родственном аспекте настоящего изобретения предложено комбинированное лечение заболевания, ассоциированного с PI3K6, включающее введение ингибитора PI3K6 и агента, который ингибирует продукцию или активность IgE. Для этой комбинации применимы другие типичные ингибиторы PI3Kδ и они описаны, например, в патенте США №6800620. Такое комбинированное лечение особенно полезно для лечения аутоиммунных и воспалительных заболеваний (AND), в том числе ревматоидного артрита, но им не ограничивается.

Агенты, которые ингибируют продукцию IgE, известны в данной области техники и включают, но не ограничиваются этим, один или более агентов из TEI-9874, 2-(4-(6-циклогексилокси-2-нафтилокси)фенилацетамид)бензойной кислоты, рапамицина, аналогов рапамицина (то есть рапалогов), ингибиторов TORC1, ингибиторов TORC2 и любых других соединений, которые ингибируют mTORC1 и mTORC2. Агенты, которые ингибируют активность IgE, включают, например, анти-IgE антитела, такие как, например, омализумаб и TNX-901.

Для лечения аутоиммунных заболеваний соединения или фармацевтические композиции, являющиеся объектом изобретения, могут быть использованы в комбинации с обычно назначаемыми лекарственными средствами, включая, но не ограничиваясь этим, Enbrel®, Remicade®, Humira®, Avonex® и Rebif®. Для лечения респираторных заболеваний соединения или фармацевтические композиции, являющиеся объектом изобретения, могут быть введены в комбинации с обычно назначаемыми лекарственными средствами, включая, но не ограничиваясь этим, Xolair®, Advair®, Singulair® и Spiriva®.

Соединения по изобретению могут быть изготовлены или введены вместе с другими агентами, которые действуют, устраняя симптомы воспалительных состояний, таких как энцефаломиелит, астма и другие заболевания, изложенные в данной заявке. Эти агенты включают нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (NSAID), например, ацетилсалициловую кислоту; ибупрофен; напроксен; индометацин; набуметон; толметин и т.д. Кортикостероиды используются для уменьшения воспаления и подавления активности иммунной системы. Наиболее часто назначаемым лекарственным средством этого типа является преднизон. Хлороквин (арален) или гидроксихлороквин (плаквенил) также могут быть очень полезны для некоторых индивидуумов с диагнозом волчанка. Их наиболее часто назначают при кожных и суставных симптомах волчанки. Азатиоприн (имуран) и циклофосфамид (цитоксан) подавляют воспаление и имеют тенденцию подавлять иммунную систему. Другие агенты, например метотрексат и циклоспорин, используются для регуляции симптомов волчанки. Антикоагулянты применяют для предупреждения быстрого сворачивания крови. Диапазон антикоагулянтов варьирует от аспирина в очень низкой дозе, что предупреждает адгезию тромбоцитов, до гепарина/кумадина.

В одном из других аспектов данное изобретение также относится к фармацевтической композиции для ингибирования аномального клеточного роста у млекопитающего, которая содержит количество соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемых соли, сложного эфира, пролекарства, сольвата, гидрата или производного в комбинации с количеством противоракового агента (например, химиотерапевтического агента). Многие химиотерапевтические средства в настоящее время известны в данной области техники и могут быть использованы в комбинации с соединениями по изобретению.

В некоторых воплощениях химиотерапевтическое средство выбрано из группы, состоящей из ингибиторов митоза, алкилирующих агентов, антиметаболитов, интеркалирующих антибиотиков, ингибиторов ростовых факторов, ингибиторов клеточного цикла, ферментов, ингибиторов топоизомеразы, модификаторов биологического ответа, антигормонов, ингибиторов ангиогенеза и антиандрогенов. Неограничивающими примерами являются химиотерапевтические агенты, цитотоксические агенты и небольшие непептидные молекулы, такие как гливек (иматиниба мезилат), велкад (бортезомиб), казодекс (бикалутамид), пресса (гефитиниб) и адриамицин, а также множество химиотерапевтических агентов. Неограничивающие примеры химиотерапевтических агентов включают алкилирующие агенты, такие как тиотепа и циклофосфамид (CYTOXAN™); алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбоквон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метиламеламины, включая алтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметилоломеламин; азотистые аналоги иприта, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, холофосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлоретамин, гидрохлорид оксида мехлоретамина, мелфалан, новэмбихин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, урациловый иприт; нитрозомочевины, такие как кармустин, хлорзотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин, ранимустин; антибиотики, такие как аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, калихеамицин, карабицин, карминомицин, карзинофилин, Casodex™, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-L-норлейцин, доксорубицин, эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, марцелломицин, митомицины, микофеноловая кислота, ногаламицин, оливомицины, пепломицин, потфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонигрин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, зиностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат и 5-фторурацил (5-FU); аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; пуриновые аналоги, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; пиримидиновые аналоги, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидезоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин; андрогены, такие как калустерон, дромостанолона пропионат, эпитиостанол, мепитиостан, тестолактон; антиадренальные средства, такие как аминоглутетимид, митотан, трилостан; пополнитель фолиевой кислоты, такой как фолиновая кислота; ацеглатон; гликозид альдофосфамида; аминолевулиновую кислоту; амсакрин; бестрабуцил; бисантрен; эдатраксат; дефофамин; демеколцин; диазиквон; элфомитин; эллиптиния ацетат; этоглуцид; галлия нитрат; гидроксимочевину; лентинан; лонидамин; митоквазон; митоксантрон; мопидамол; нитракрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; подофиллиновую кислоту; 2-этилгидразид; прокарбазин; PSK.R™; разоксан; сизофиран; спирогерманий; тенуазоновую кислоту; триазиквон; 2,2',2''-трихлортриэтиламин; уретан; виндезин; дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид ("Ara-С''); циклофосфамид; тиотепа; таксаны, например, паклитаксел (TAXOL™, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.) и доцетаксел (TAXOTERE™, Rhone-Poulenc Rorer, Antony, France); ретиноевую кислоту; эсперамицины; капецитабин; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из упомянутых выше. Также в качестве веществ, подходящих для улучшения состояния клеток при химиотерапии, включены антигормональные агенты, которые действуют регулируя или ингибируя гормональную активность опухолей, такие как антиэстрогены, в том числе, например, тамоксифен (Nolvadex™), ралоксифен, ингибирующие ароматазу 4(5)-имидазолы, 4-гидрокситамоксифен, триоксифен, кеоксифен, LY 117018, онапристон и торемифен (фарестон); и антиандрогены, такие как флутамид, нилутамид, бикалутамид, лейпролид и госелерин; хлорамбуцил; гемцитабин; 6-тиогуанин; меркаптопурин; метотрексат; аналоги платины, такие как цисплатин и карбоплатин; винбластин; платина; этопозид (VP-16); ифосфамид; митомицин С; митоксантрон; винкристин; винорелбин; навелбин; новантрон; тенипозид; дауномицин; аминоптерин; кселода; ибандронат; каптотецин-11 (СРТ-11); ингибитор топоизомеразы RFS 2000; дифторметилорнитин (DMFO). Там, где это желательно, соединения или фармацевтическая композиция по настоящему изобретению могут быть использованы в комбинации с обычно назначаемыми противораковыми лекарственными средствами, такими как Herceptin®, Avastin®, Erbitux®, Rituxan®, Taxol®, Arimidex®, Taxotere® и Velcade®.

Данное изобретение также относится к способу применения соединений или фармацевтической композиции в комбинации с лучевой терапией для ингибирования аномального клеточного роста или к способу лечения гиперпролиферативного расстройства у млекопитающего. Методики применения лучевой терапии известны в данной области техники, и эти методики могут быть использованы в комбинированной терапии, изложенной в данной заявке. Введение соединения по изобретению в такой комбинированной терапии может быть определено, как изложено в данной заявке.

Лучевая терапия может быть проведена путем использования одного из нескольких способов или комбинации способов, включая, без ограничения, наружную дистанционную лучевую терапию, внутреннюю лучевую терапию, облучение с использованием имплантата, стереотаксическую радиохирургию, системную лучевую терапию, радиотерапию и длительную или кратковременную интерстициальную брахитерапию. Термин "брахитерапия", как он использован в данной заявке, относится к лучевой терапии, осуществляемой посредством пространственно ограниченного радиоактивного вещества, вводимого в место опухоли или рядом с ней или в другое место пролиферативного заболевания ткани. Подразумевается, что термин включает, без ограничения, воздействие радиоактивных изотопов (например, At-211, I-131, 1-125, Y-90, Re-186, Re-188, Sm-153, Bi-212, P-32 и радиоактивных изотопов Lu). Подходящие источники излучения для использования в качестве улучшающего состояние клеток вещества по настоящему изобретению включают как твердые вещества, так и жидкости. В качестве неограничивающего примера, источником излучения может быть радионуклид, такой как 1-125, 1-131, Yb-169, lr-192 в качестве твердого источника, 1-125 в качестве твердого источника или другие радионуклиды, которые испускают протоны, бета-частицы, гамма-излучение или другие виды излучения, используемые в терапии. Кроме того, радиоактивное вещество может представлять собой жидкость, приготовленную из любого раствора радионуклида(ов), например, раствора 1-125 или 1-131, или радиоактивную жидкость можно приготовить используя взвесь подходящей жидкости, содержащей небольшие частицы твердых радионуклидов, таких как Au-198, Y-90. Кроме того, радионуклид(ы) может быть включен в гель или входить в состав радиоактивных микросфер.

Не ограничивая себя какой-либо теорией, можно сказать, что соединения по настоящему изобретению могут делать аномальные клетки более чувствительными к лечению облучением в целях уничтожения и/или ингибирования роста таких клеток. Соответственно, данное изобретение также относится к способу сенсибилизации аномальных клеток у млекопитающего к лечению облучением, включающему введение млекопитающему количества соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемых соли, сложного эфира, пролекарства, сольвата, гидрата или производного, которое эффективно для сенсибилизации аномальных клеток к лечению облучением. Количество соединения, соли или сольвата в этом способе может быть определено в соответствии со способами определения эффективных количеств таких соединений, изложенных в данной заявке.

Соединения или фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть использованы в комбинации с количеством одного или более веществ, выбранных из антиангиогенезных агентов, ингибиторов сигнальной трансдукции и антипролиферативных агентов.

Антиангиогенезные агенты, такие как ингибиторы ММР-2 (матриксной металлопротеиназы 2), ингибиторы ММР-9 (матриксной металлопротеиназы 9) и ингибиторы СОХ-11 (циклооксигеназы 11), могут быть использованы вместе с соединением по настоящему изобретению и фармацевтическими композициями, изложенными в данной заявке. Примеры полезных ингибиторов СОХ-П включают CELEBREX™ (алекоксиб), валдекоксиб и рофекоксиб. Примеры полезных ингибиторов матриксных металлопротеиназ описаны в WO 96/33172 (опубликованной 24 октября, 1996 г.), WO 96/27583 (опубликованной 7 марта 1996 г.), заявке на европейский патент №97304971.1 (поданной 8 июля

1997 г.), заявке на европейский патент №99308617.2 (поданной 29 октября 1999 г.), WO 98/07697 (опубликованной 26 февраля 1998 г.), WO 98/03516 (опубликованной 29 января 1998 г.), WO 98/34918 (опубликованной 13 августа 1998 г.), WO 98/34915 (опубликованной 13 августа 1998 г.), WO 98/33768 (опубликованной 6 августа 1998 г.), WO 98/30566 (опубликованной 16 июля 1998 г.), публикации европейского патента 606046 (опубликованной 13 июля 1994 г.), публикации европейского патента 931788 (опубликованной 28 июля 1999 г.), WO 90/05719 (опубликованной 31 мая 1990 г.), WO 99/52910 (опубликованной 21 октября 1999 г.), WO 99/52889 (опубликованной 21 октября 1999 г.), WO 99/29667 (опубликованной 17 июня 1999 г.), международной заявке РСТ №PCT/IB98/01113 (поданной 21 июля 1998 г.), заявке на европейский патент №99302232.1 (поданной 25 марта 1999 г.), заявке на патент Великобритании №9912961.1 (поданной 3 июня 1999 г.), предварительной заявке США №60/148464 (поданной 12 августа 1999 г.), патенте США 5863949 (опубликованном 26 января 1999 г.), патенте США 5861510 (опубликованном 19 января 1999 г.) и публикации европейского патента 780386 (опубликованной 25 июня 1997 г.), все они включены в данное описание во всей своей полноте посредством ссылки. Предпочтительными ингибиторами ММР-2 и ММР-9 являются такие, которые имеют незначительную активность или не имеют никакой активности в отношении ингибирования ММР-1. Более предпочтительными являются такие, которые селективно ингибируют ММР-2 и/или АМР-9 по сравнению с другими матриксными металлопротеиназами (то есть МАР-1, ММР-3, ММР-4, ММР-5, ММР-6, ММР-7, ММР-8, ММР-10, ММР-11, ММР-12 и ММР-13). Некоторыми конкретными примерами ингибиторов ММР, полезных в настоящем изобретении, являются AG-3340, RO 32-3555 и RS 13-0830.

Изобретение также относится к способу лечения и к фармацевтической композиции для лечения сердечно-сосудистого заболевания у млекопитающего, содержащей количество соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемых соли, сложного эфира, пролекарства, сольвата, гидрата или производного или их меченного изотопом производного и количество одного или более терапевтических агентов, используемых для лечения сердечно-сосудистых заболеваний.

Примерами для использования применительно к сердечно-сосудистым заболеваниям являются антитромботические агенты, например, простациклин и салицилаты, тромболитические агенты, например, стрептокиназа, урокиназа, тканевой активатор плазминогена (ТРА) и анизоилированный активаторный комплекс плазминогена и стрептокиназы (APSAC), антитромбоцитарные агенты, например, ацетилсалициловая кислота (ASA) и клопидрогель, вазодилататоры, например, нитраты, лекарственные средства, блокирующие кальциевые каналы, антипролиферативные агенты, например, колхицин и алкилирующие агенты, интеркалирующие агенты, модулирующие рост факторы, такие как интерлейкины, трансформирующий ростовой фактор-бета и соединения, родственные фактору роста из тромбоцитов, моноклональные антитела, направленные против ростовых факторов, противовоспалительные агенты, как стероидные, так и нестероидные средства, и другие агенты, которые могут модулировать тонус сосудов, функцию, артериосклероз и реакцию заживления на повреждение сосудов или органов после воздействия. Согласно изобретению в состав комбинаций или веществ для покрытия также могут быть включены антибиотики. Более того, вещество для покрытия можно использовать для осуществления терапевтической доставки к очагу в стенке сосуда. Благодаря включению активного агента в набухаемый полимер активный агент будет высвобождаться по мере набухания полимера.

Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть изготовлены и введены вместе с веществами, представляющими собой жидкие или твердые тканевые барьеры, также известными как смазывающие вещества. Примеры тканевых барьеров включают, но не ограничиваются этим, полисахариды, политиканы, сепрафильм, интерсид и гиалуроновую кислоту.

Лекарственные средства, которые могут быть введены вместе с соединениями, изложенными в данной заявке, включают любые подходящие лекарственные средства, с пользой доставляемые ингаляцией, например, аналгетики, например, кодеин, дигидроморфин, эрготамин, фентанил или морфин; ангинозные препараты, например, дилтиазем; антиаллергические средства, например, кромогликат, кетотифен или недокромил; противоинфекционные средства, например, цефалоспорины, пенициллины, стрептомицин, сульфонамиды, тетрациклины или пентамидин; антигистамины, например, метапирилен; противовоспалительные средства, например, беклометазон, флунизолид, будесонид, типредан, триамцинолона ацетонид или флутиказон; противокашлевые средства, например, носкапин; бронходилататоры, например, эфедрин, адреналин, фенотерол, формотерол, изопреналин, метапротеренол, фенилэфрин, фенилпропаноламин, пирбутерол, репротерол, римитерол, сальбутамол, салметерол, тербуталин, изоэтарин, тулобутерол, орципреналин или (-)-4-амино-3,5-дихлор-α-[[[6-[2-(2-пиридинил)этокси]гексил]-амино]метил]бензолметанол; диуретики, например амилорид; антихолинергические средства, например, ипратропий, атропин или окситропий; гормоны, например, кортизон, гидрокортизон или преднизолон; ксантины, например, аминофиллин, холина теофиллинат, лизина теофиллинат или теофиллин; и терапевтические белки и пептиды, например, инсулин или глюкагон. Специалисту в данной области техники будет очевидно, что там, где это целесообразно, лекарственные средства могут быть использованы в форме солей (например, в виде солей щелочных металлов или аминов или в виде солей присоединения кислоты) или в виде сложных эфиров (например, низших алкиловых эфиров) или в виде сольватов (например, гидратов) для оптимизации активности и/или стабильности лекарственного средства.

Другие типичные терапевтические агенты, полезные для комбинированной терапии, включают, но не ограничиваются этим, описанные выше агенты, лучевую терапию, антагонисты гормонов, гормоны и их рилизинг-факторы, тиреоидные и антитиреоидные лекарственные средства, эстрогены и прогестины, андрогены, адренокортикотропный гормон;

адренокортикостероиды и их синтетические аналоги; ингибиторы синтеза и действия гормонов коры надпочечников, инсулина, пероральных гипогликемических агентов и фармакологии эндокринного отдела поджелудочной железы; агенты, воздействующие на кальцификацию и ремоделирование кости: кальций, фосфат, гормон паращитовидной железы, витамин D, кальцитонин, витамины, такие как водорастворимые витамины, комплекс витаминов В, аскорбиновая кислота, жирорастворимые витамины, витамины А, K и Е, ростовые факторы, цитокины, хемокины, агонисты и антагонисты мускариновых рецепторов; антихолинэстеразные агенты; агенты, действующие на нервно-мышечный синапс и/или вегетативный ганглий; катехоламины, симпатомиметические лекарственные средства и агонисты или антагонисты адренергического рецептора; и агонисты и антагонисты рецептора 5-гидрокситриптамина (5-НТ, серотонина).

Терапевтические агенты также могут включать агенты против боли и воспаления, такие как гистамин и антагонисты гистамина, брадикинин и антагонисты брадикинина, 5-гидрокситриптамин (серотонин), липидные вещества, созданные путем биотрансформации продуктов селективного гидролиза мембранных фосфолипидов, эйкозаноиды, простагландины, тромбоксаны, лейкотриены, аспирин, нестероидные противовоспалительные агенты, болеутоляющие-жаропонижающие средства, агенты, ингибирующие синтез простагландинов и тромбоксанов, селективные ингибиторы индуцибельной циклооксигеназы, селективные ингибиторы индуцибельной циклооксигеназы-2, аутакоиды, гормоны паракринного действия, соматостатин, гастрин, цитокины, опосредующие взаимодействия, вовлеченные в гуморальный и клеточный иммунные ответы, аутакоиды липидов, эйкозаноиды, Р-адренергические агонисты, ипратропий, глюкокортикоиды, метилксантины, блокаторы натриевых каналов, агонисты опиоидных рецепторов, блокаторы кальциевых каналов, стабилизаторы мембран и ингибиторы лейкотриенов.

Дополнительные терапевтические агенты, рассматриваемые в данной заявке, включают диуретики, вазопрессин, агенты, воздействующие на удержание воды почками, реннин, ангиотензин, агенты, полезные в лечении ишемии миокарда, антигипертензивные агенты, ингибиторы ангиотензин-превращающего фермента, антагонисты β-адренергического рецептора, агенты для лечения гиперхолестеринемии и агенты для лечения дислипидемии.

Другие рассматриваемые терапевтические агенты включают лекарственные средства, используемые для регуляции кислотности желудочно-кишечного тракта, средства для лечения пептических язв, средства для лечения гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, прокинетические агенты, противорвотные средства, средства, применяемые при синдроме раздраженного кишечника, средства, применяемые при диарее, средства, применяемые при запоре, средства, применяемые при воспалительном заболевании кишечника, средства, применяемые при заболевании желчевыводящих путей, средства, применяемые при заболевании поджелудочной железы. Терапевтические агенты, используемые для лечения протозойных инфекций, лекарственные средства, используемые для лечения малярии, амебиаза, лямблиоза, трихомоноза, трипаносомоза и/или лейшманиоза, и/или лекарственные средства, используемые в химиотерапии гельминтоза. Другие терапевтические агенты включают антимикробные агенты, сульфонамиды, триметоприм-сульфаметоксазол хинолоны и агенты для инфекций мочевыводящих путей, пенициллины, цефалоспорины и другие, β-лактамные антибиотики, агент, содержащий аминогликозид, ингибиторы синтеза белка, лекарственные средства, используемые в химиотерапии туберкулеза, комплексного заболевания, вызванного Mycobacterium avium, и лепры, противогрибковые агенты, противовирусные агенты, в том числе неретровирусные агенты и противоретровирусные агенты.

Примеры терапевтических антител, которые могут быть объединены с соединением, являющимся объектом изобретения, включают, но не ограничиваются этим, антитела против рецепторных тирозинкиназ (цетуксимаб, панитумумаб, трастузумаб), антитела против CD20 (кластер дифференцировки 20) (ритуксимаб, тозитумомаб) и другие антитела, такие как алемтузумаб, бевацизумаб и гемтузумаб.

Кроме того, в способах, изложенных в данной заявке, предусматриваются терапевтические агенты, используемые для иммуномодуляции, как например, иммуномодуляторы, иммуносупрессивные агенты, толерогены и иммуностимуляторы. Помимо этого, терапевтические агенты, воздействующие на кровь и органы кроветворения, гематопоэтические агенты, ростовые факторы, минералы и витамины, антикоагулянтные, тромболитические и антитромбоцитарные лекарственные средства.

Дополнительные терапевтические агенты, которые могут быть объединены с соединением, являющимся объектом изобретения, можно найти в книге Goodman и Gilman "The Pharmacological Basis of Therapeutics", десятое издание, под редакцией Hardman, Limbird и Gilman, или в Настольном справочнике врача (Physician's Desk Reference); и то и другое включено в данное описание во всей своей полноте посредством ссылки.

Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть использованы в комбинации с агентами, изложенными в данной заявке, или другими подходящими агентами в зависимости от подвергаемого лечению состояния. Другими словами, в некоторых воплощениях соединения по изобретению будут введены вместе с другими агентами, как описано выше. При использовании в комбинированной терапии соединения, изложенные в данной заявке, могут быть введены вместе со вторым агентом одновременно или по отдельности. Такое введение в комбинации может включать одновременное введение двух агентов в одной и той же лекарственной форме, одновременное введение в отдельных лекарственных формах и раздельное введение. То есть, соединение, изложенное в данной заявке, и любой из агентов, описанных выше, могут быть изготовлены вместе в одной и той же лекарственной форме и введены одновременно. Альтернативно, соединение по настоящему изобретению и любой из агентов, описанных выше, могут быть введены одновременно, при этом оба агента присутствуют в отдельных композициях. В другом альтернативном варианте за соединением по настоящему изобретению может быть сразу введен и любой из агентов, описанных выше, или наоборот. Согласно протоколу раздельного введения соединение по настоящему изобретению и любой из агентов, описанных выше, могут быть введены с интервалом в несколько минут, или с интервалом в несколько часов, или с интервалом в несколько суток.

Примеры и подготовительные примеры, представленные ниже, дополнительно иллюстрируют соединения по настоящему изобретению и способы получения таких соединений и приведены в качестве примера. Следует понимать, что объем настоящего изобретения никоим образом не ограничен объемом следующих далее примеров и подготовительных примеров. В следующих далее примерах молекулы с единственным хиральным центром, если не указано иное, существуют в виде рацемической смеси. Такие молекулы с двумя или более хиральными центрами, если не указано иное, существуют в виде рацемической смеси диастереомеров. Единичные энантиомеры/диастереомеры могут быть получены способами, известными специалистам в данной области техники.

ПРИМЕРЫ

Пример 1. Синтез 3-((4-амино-3-(3-гидроксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она (Соединение 1613) (способ А).

Схема 12. Описан синтез 3-((4-амино-3-(3-гидроксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она (Соединение 1613).

Раствор 2-амино-6-метилбензойной кислоты (1601) (106,5 г; 705 ммоль) в Н2O (200 мл) охлаждали до 0-5°С, медленно добавляли концентрированную HCl (250 мл). Раствор перемешивали в течение 15 мин при 0-5°С. По каплям при 0-5°С добавляли раствор нитрита натрия (58,4 г; 6,85 моль) в Н2O (120 мл) и полученную смесь перемешивали в течение 30 мин. Затем указанный выше раствор добавляли к раствору KI (351 г; 2,11 моль) в Н2O (200 мл) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 16 ч. Раствор выливали в ледяную воду (2000 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×1000 мл). Объединенный органический слой промывали водным NaOH (15%, 3×200 мл). Водный слой подкисляли до pH 1 и экстрагировали этилацетатом (3×1000 мл). Объединенные органические слои сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 2-иод-6-метилбензойную кислоту (1602) (145 г; выход 79%) в виде желтого твердого вещества.

К перемешиваемой смеси 2-иод-6-метилбензойной кислоты (1602) (105 г; 400 ммоль), Pd(OAc)2 (27 г; 120 ммоль) и PPh3 (63 г; 240 моль) в THF (1000 мл) при КТ добавляли трибутил(винил)олово (152 г; 480 ммоль). Полученную смесь нагревали до температуры дефлегмации в течение ночи. Смесь оставляли охлаждаться до КТ, фильтровали через силикагель (10 г) и затем концентрировали в вакууме. Остаток выливали в ледяную воду (1000 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×1000 мл). Объединенный органический слой промывали водным NaOH (15%-ным, 5×200 мл). Объединенный водный слой подкисляли до pH 1, экстрагировали этилацетатом (3×1000 мл). Объединенный органический слой сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 2-метил-6-винилбензойную кислоту (1603) (61 г; выход 95%) в виде желтого твердого вещества.

Смесь 2-метил-6-винилбензойной кислоты (1603) (56 г; 350 ммоль) и тионилхлорида (208 г; 1750 ммоль) в толуоле (400 мл) перемешивали при температуре дефлегмации в течение 2 ч. Смесь концентрировали в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 2-метил-6-винилбензоилхлорид (1604) (63 г; выход 95%) в виде желтого масла. Полученный продукт использовали непосредственно на следующей стадии без очистки.

Смесь о-толуидина (45 г; 420 ммоль) и триэтиламина (71 г; 70 ммоль) в CH2Cl2 (300 мл) перемешивали в течение 10 мин при КТ. К этой смеси добавляли 2-метил-6-винилбензоилхлорид (1604) (63 г; 35 ммоль) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Раствор выливали в воду (300 мл), экстрагировали CH2Cl2 (3×200 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме, что позволило получить неочищенный продукт. Неочищенный продукт суспендировали в IPE (изопропиловый эфир) (300 мл), перемешивали при температуре дефлегмации в течение 30 мин и затем охлаждали до 0-5°С. Осадок собирали фильтрованием и затем сушили в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 2-метил-N-о-толил-6-винилбензамид (1605) (81 г; выход 80%) в виде желтого твердого вещества.

К раствору 2-метил-N-о-толил-6-винилбензамида (1605) (80 г; 320 ммоль) в DMF (250 мл) при КТ медленно добавляли NaH (60%-ный в минеральном масле; 25,6 г; 640 ммоль) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. К этой смеси добавляли этилхлорацетат (78 г; 640 ммоль) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 2 ч. Раствор выливали в воду (500 мл), экстрагировали этилацетатом (3×200 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт суспендировали в МеОН (160 мл), перемешивали при температуре дефлегмации в течение 10 мин и затем охлаждали до 0-5°С. Осадок собирали фильтрованием и затем сушили в вакууме, что позволило получить желаемый продукт этил-2-(2-метил-N-о-толил-6-винилбензамидо)ацетат (1606) (67 г; выход 62%) в виде белого твердого вещества.

К перемешиваемой смеси этил-2-(2-метил-N-о-толил-6-винилбензамидо)ацетата (1606) (67 г; 200 ммоль) в 1,4-диоксане (300 мл) и Н2O (100 мл) при КТ добавляли тетроксид осмия (20 мг) и перемешивали при КТ в течение 30 мин. К этой смеси добавляли периодат натрия (86 г; 400 ммоль) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали через силикагель (10 г), фильтрат экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и остаток затем сушили в вакууме, что позволило получить желаемый продукт этил-2-(2-формил-6-метил-N-о-толилбензамидо)ацетат (1607) (38 г; выход 57%) в виде желтого твердого вещества.

К перемешиваемому раствору этил-2-(2-формил-6-метил-N-о-толилбензамидо)ацетата (1607) (38 г; 112 ммоль) в ЕtOН (200 мл) и этилацетате (100 мл) при КТ добавляли карбонат цезия (22 г; 112 ммоль). Полученную смесь дегазировали, снова заполняли аргоном три раза и затем перемешивали при 50°С в течение 5 ч. Смесь оставляли охлаждаться до КТ, фильтровали через силикагель (10 г) и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток выливали в Н2O (200 мл), экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (50 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт суспендировали в IPE (120 мл), нагревали до температуры дефлегмации в течение 10 мин и затем охлаждали до 0-5°С. Осадок собирали фильтрованием и затем сушили в вакууме, что позволило получить желаемый продукт этил-8-метил-1-оксо-2-о-толил-1,2-дигидроизохинолин-3-карбоксилат (1608) (28 г; выход 77%) в виде белого твердого вещества.

К перемешиваемому раствору алюмогидрида лития (8,28 г; 218 моль) в безводном THF (500 мл) при -78°С в атмосфере азота медленно в течение 10 мин добавляли этил-8-метил-1-оксо-2-о-толил-1,2-дигидроизохинолин-3-карбоксилат (1608) (28 г; 87 ммоль). Полученную смесь оставляли нагреваться до -30°С, перемешивали в течение 30 мин, и данные ТСХ показали, что реакция завершена. Затем смесь охлаждали до -78°С и медленно добавляли воду (50 мл). Смесь оставляли нагреваться до КТ, фильтровали через силикагель (10 г) и фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт выливали в Н2О (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (50 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт суспендировали в этилацетате (30 мл) и перемешивали в течение 10 мин. Твердое вещество собирали фильтрованием и затем сушили в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 3-(гидроксиметил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (1609) (22 г; выход 92%) в виде белого твердого вещества.

РВr3 (25,6 г; 95 ммоль) медленно добавляли к перемешиваемому раствору DMF (11,5 г; 158 моль) в ацетонитриле (200 мл) при 0°С и полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин. Медленно добавляли 3-(гидроксиметил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1-(2Н)-он (1609) (22 г; 78,8 ммоль). Затем реакционную смесь оставляли нагреваться до КТ и перемешивали в течение 30 мин. Медленно добавляли насыщенный водный раствор NaHCO3 (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом, сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт суспендировали в IPE (50 мл) и затем перемешивали в течение 10 мин. Осадок собирали фильтрованием и затем сушили в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 3-(бромметил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (1610) (21 г; выход 80%) в виде белого твердого вещества.

3-Иод-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин (108) (10,8 г; 41,4 ммоль) и трет-бутилат калия (4,4 г; 40 ммоль) растворяли в безводном DMF (150 мл) и перемешивали при КТ в течение 30 мин. Добавляли 3-(бромметил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (1610) (13,7 г; 40 ммоль). Полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин, выливали в ледяную воду (300 мл) и затем экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (50 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали примерно до 100 мл в вакууме, осадок собирали фильтрованием, что позволило получить первую партию желаемого продукта 3-((4-амино-3-иод-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она (1611) (12 г; выход 60%) в виде белого твердого вещества. Фильтрат концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (2-20% MeOH/DCM), что позволило получить вторую партию желаемого продукта 3-((4-амино-3-иод-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она (1611) (6 г; выход 30%) в виде белого твердого вещества.

3-((4-Амино-3-иод-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (1611) (13 г; 24,9 ммоль) и 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенол (1612) (6,6 г; 30 ммоль) растворяли в смеси DMF-EtOH-H2O (120 мл; 40 мл; 40 мл). Последовательно добавляли Pd(OAc)2 (1,684 г; 7,5 ммоль), PPh3 (3,935 г; 15 ммоль) и Na2CO3 (13,25 г; 125 ммоль). Полученную смесь дегазировали, снова заполняли аргоном три раза и затем перемешивали при 100°С в течение 1 ч. Смесь оставляли охлаждаться до КТ, фильтровали через силикагель (10 г) и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (2-20% MeOH/DCM), что позволило получить продукт (1613) (9 г; выход 76%) в виде светло-желтого твердого вещества. Затем указанный выше продукт суспендировали в ЕtOН (100 мл) и нагревали до температуры дефлегмации в течение 30 мин. Смесь оставляли охлаждаться до КТ и твердое вещество собирали фильтрованием. Твердое вещество затем суспендировали в ЕА (этилацетате) (100 мл) и перемешивали в течение ночи. Осадок собирали фильтрованием затем сушили в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 3-((4-амино-3-(3-гидроксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (1613) (8,4 г; выход 69%) в виде белого твердого вещества.

Пример 2. Синтез 3-((4-амино-3-(3-гидроксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она (Соединение 1613) (способ В).

Схема 13. Описан синтез 3-((4-амино-3-(3-гидроксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она (Соединение 1613) способом В.

3-(3-Метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин (1701) (964 мг; 4 ммоль) и трет-бутилат калия (0,44 г; 4 ммоль) растворяли в безводном DMF (150 мл) и перемешивали при КТ в течение 30 мин. Добавляли 3-(бромметил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (1610) (1,37 г; 4,0 ммоль). Полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин, выливали в ледяную воду (30 мл) и затем экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (25 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (2-20% MeOH/DCM), что позволило получить желаемый продукт 3-((4-амино-3-(3-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (1702) (1,4 г; выход 70%) в виде белого твердого вещества.

К раствору 3-((4-амино-3-(3-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она (1702) (100 мг; 0,2 ммоль) в CH2Cl2 (20 мл) при -78°С в атмосфере азота добавляли ВВr3 (1 мл) и полученную смесь перемешивали при -78°С в течение 3 ч. Смесь оставляли нагреваться до КТ, выливали в смесь лед-вода (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (20 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (10-50% MeOH/CH2Cl2), что позволило получить желаемый продукт 3-((4-амино-3-(3-гидроксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (1613) (87 мг; выход 91%) в виде белого твердого вещества.

Пример 3. Синтез (R)-3-((4-амино-3-(3-гидроксибут-1-инил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она (Соединение 1802).

Схема 14. Описан синтез (R)-3-((4-амино-3-(3-гидроксибут-1-инил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она (Соединение 1802).

3-((4-Амино-3-иод-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (1611) (522 мг; 1 ммоль) и (R)-бут-3-ин-2-ол(84 мг; 1,2 ммоль) растворяли в безводном THF (40 мл). Смесь дегазировали и снова заполняли азотом три раза. Последовательно добавляли Pd(PPh3)2Cl2 (12 мг; 0,1 ммоль), CuI (47 мг; 0,25 ммоль) и (изо-Pr)2NH (505 мг; 5 ммоль). Полученную смесь дегазировали, снова заполняли аргоном три раза и затем перемешивали при температуре дефлегмации в течение 4 ч. Смесь оставляли охлаждаться до КТ, фильтровали через силикагель (10 г) и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (2-20% MeOH/DCM), что позволило получить продукт 3(R)-3-((4-амино-3-(3-гидроксибут-1-инил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (1802) (324 мг; выход 70%) в виде светло-желтого твердого вещества.

Пример 4. Синтез 3-((6-амино-9Н-пурин-9-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она (Соединение 1902).

Схема 15. Описан синтез 3-((6-амино-9Н-пурин-9-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она (Соединение 1902).

9Н-Пурин-6-амин (1901) (540 мг; 4,0 ммоль) растворяли в безводном DMF (20 мл). Добавляли NaH (60%-ный в минеральном масле; 160 мг; 4,0 ммоль) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Добавляли 3-(бромметил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (1610) (1,37 г; 4,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин, выливали в смесь лед-вода (30 мл) и затем экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (25 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (2-20% MeOH/DCM), что позволило получить желаемый продукт 3-((6-амино-9Н-пурин-9-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (1902) (1,1 г; выход 70%) в виде белого твердого вещества.

Пример 5. Синтез 3-((4-амино-3-(3-гидроксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-2-изопропил-8-метилизохинолин-1(2Н)-она (Соединение 2013).

Схема 16. Описан синтез 3-((4-амино-3-(3-гидроксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-2-изопропил-8-метилизохинолин-1(2Н)-она (Соединение 2010).

К перемешиваемой смеси 2-иод-6-метилбензойной кислоты (1602) (105 г; 400 ммоль), Pd(OAc)2 (27 г; 120 ммоль) и PPh3 (63 г; 240 моль) в THF (1000 мл) при КТ добавляли трибутил(винил)олово (152 г; 480 ммоль). Полученную смесь нагревали до температуры дефлегмации в течение ночи. Смесь оставляли охлаждаться до КТ, фильтровали через силикагель (10 г) и затем концентрировали в вакууме. Остаток выливали в ледяную воду (1000 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×1000 мл). Объединенный органический слой промывали водным NaOH (15%-ным; 5×200 мл). Объединенный водный слой подкисляли до pH 1, экстрагировали этилацетатом (3×1000 мл). Объединенный органический слой сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 2-метил-6-винилбензойную кислоту (1603) (61 г; выход 95%) в виде желтого твердого вещества.

Смесь 2-метил-6-винилбензойной кислоты (1603) (56 г; 350 ммоль) и тионилхлорида (208 г; 1750 ммоль) в толуоле (400 мл) перемешивали при температуре дефлегмации в течение 2 ч. Смесь концентрировали в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 2-метил-6-винилбензоилхлорид (1604) (63 г; выход 95%) в виде желтого масла. Полученный продукт использовали непосредственно на следующей стадии без очистки.

Пропан-2-амин (2001) (59 г; 1,0 моль) и этилхлорацетат (122 г; 1,0 моль) растворяли в толуоле (200 мл) и смесь перемешивали при температуре дефлегмации в течение 2 ч. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до КТ, выливали в смесь лед-вода (500 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×250 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (50 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (10-50% ЕА/РЕ), что позволило получить продукт этил-2-(изопропиламино)ацетат (2002) (70 г; выход 51%) в виде масла.

Этил-2-(изопропиламино)ацетат (2002) (14,5 г; 100 ммоль) и триэтиламин (200 г; 200 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (300 мл) и смесь перемешивали в течение 10 мин при КТ. Добавляли 2-метил-6-винилбензоилхлорид (1604) (18 г; 100 ммоль) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Реакционную смесь выливали в воду (300 мл) и экстрагировали CH2Cl2 (3×200 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (50 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме, что позволило получить неочищенный продукт. Неочищенный продукт суспендировали в IPE (изопропиловом эфире) (300 мл), перемешивали при температуре дефлегмации в течение 30 мин и затем охлаждали до 0-5°С. Осадок собирали фильтрованием и затем сушили в вакууме, что позволило получить желаемый продукт этил-2-(N-изопропил-2-метил-6-винилбензамидо)-ацетат (2003) (14,5 г; выход 50%) в виде желтого твердого вещества.

К перемешиваемому раствору этил-2-(N-изопропил-2-метил-6-винилбензамидо)ацетата (2003) (14,0 г; 48,0 ммоль) в 1,4-диоксане (100 мл) и Н2О (30 мл) добавляли тетроксид осмия (20 мг) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. К этой смеси добавляли периодат натрия (22 г; 100 ммоль) и затем перемешивали при КТ в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали через силикагель (10 г), фильтрат экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (50 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и остаток затем сушили в вакууме, что позволило получить желаемый продукт этил-2-(2-формил-N-изопропил-6-метилбензамидо)ацетат (2004) (8,33 г; выход 57%) в виде желтого твердого вещества.

К перемешиваемому раствору этил-2-(2-формил-N-изопропил-6-метилбензамидо)ацетата (2004) (8,3 г; 28,0 ммоль) в ЕtOН (100 мл) и этилацетате (50 мл) при КТ добавляли карбонат цезия (5,9 г; 30 ммоль). Полученную смесь дегазировали, снова заполняли аргоном три раза и затем перемешивали при 50°С в течение 5 ч. Смесь оставляли охлаждаться до КТ, фильтровали через силикагель (10 г) и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток выливали в Н2О (200 мл), экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (50 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт суспендировали в IPE (120 мл), перемешивали при температуре дефлегмации в течение 10 мин и затем охлаждали до 0-5°С. Осадок собирали фильтрованием и затем сушили в вакууме, что позволило получить желаемый продукт этил-2-изопропил-8-метил-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-3-карбоксилат (2005) (5,35 г; выход 70%) в виде белого твердого вещества.

К перемешиваемому раствору алюмогидрида лития (2,88 г; 76 моль) в безводном THF (200 мл) при -78°С медленно в течение 10 мин в атмосфере азота добавляли этил-2-изопропил-8-метил-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-3-карбоксилат (2005) (5,2 г; 19 ммоль). Полученную смесь оставляли нагреваться до -30°С, перемешивали в течение 30 мин, и данные ТСХ показали, что реакция завершена. Затем смесь охлаждали до -78°С медленно добавляли воду (50 мл). Смесь оставляли нагреваться до КТ, фильтровали через силикагель (10 г) и фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт выливали в Н2О (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (50 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт суспендировали в этилацетате (30 мл) и перемешивали в течение 10 мин. Твердое вещество собирали фильтрованием, затем сушили в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 3-(гидроксиметил)-2-изопропил-8-метилизохинолин-1(2Н)-он (2006) (3,51 г; выход 80%) в виде белого твердого вещества.

К раствору 3-(гидроксиметил)-2-изопропил-8-метилизохинолин-1 (2Н)-она (2006) (1,61 г; 7,0 ммоль) в CH2Cl2 добавляли PPh3 (3,67 г; 14,0 ммоль) и смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Смесь охлаждали до 0°С и порциями добавляли СВr4 (4,64 г; 14,0 ммоль). Полученную смесь перемешивали при температуре от 0°С до КТ в течение 30 мин и затем концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (30-50% ЕА/РЕ), что позволило получить желаемый продукт 3-(бромметил)-2-изопропил-8-метилизохинолин-1(2Н)-он (2007) (1,65 г; выход 80%) в виде белого твердого вещества.

Смесь 3-иод-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амина (108) (1,3 г; 5 ммоль) и трет-бутилата калия (0,55 г; 5 ммоль) в безводном DMF (20 мл) перемешивали при КТ в течение 30 мин и затем добавляли 3-(бромметил)-2-изопропил-8-метилизохинолин-1(2Н)-он (2007) (1,47 г; 5 ммоль). Полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин, выливали в смесь лед-вода (30 мл) и затем экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (25 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (2-20% MeOH/DCM), что позволило получить желаемый продукт 3-((4-амино-3-иод-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-2-изопропил-8-метилизохинолин-1(2Н)-он (2008) (1,66 г; выход 70%) в виде белого твердого вещества.

К перемешиваемой смеси 3-((4-амино-3-иод-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-2-изопропил-8-метилизохинолин-1(2Н)-она (2008) (95 мг; 0,2 ммоль) и 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенола (66 мг; 0,3 ммоль) в смеси DMF-EtOH-H2O (3:1:1; 20 мл) последовательно добавляли Pd(OAc)2 (16 мг; 0,075 ммоль), PPh3 (39,3 мг; 0,15 ммоль) и Na2CO3 (132 мг; 1,25 ммоль). Полученную смесь дегазировали, снова заполняли аргоном три раза и затем перемешивали при 100°С в течение 1 ч. Смесь оставляли охлаждаться до КТ, фильтровали через силикагель (10 г) и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (2-20% MeOH/DCM), что позволило получить продукт 3-((4-амино-3-(3-гидроксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-2-изопропил-8-метилизохинолин-1(2Н)-он (2009) (53 мг; выход 61%) в виде светло-желтого твердого вещества.

Пример 6. Синтез 8-метил-3-((метил(9Н-пурин-6-ил)амино)метил)-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она.

Схема 17. Описан синтез 8-метил-3-((метил(9Н-пурин-6-ил)амино)метил)-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она (Соединение 4004).

3-(Бромметил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (342 мг; 1,0 ммоль) (1610) растворяли в растворе метиламина (100 мл) и перемешивали в течение 2 ч. Смесь выливали в смесь льда в воде (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (20 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 8-метил-3-((метиламино)метил)-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (4001) (250 мг; выход 86%) в виде желтого твердого вещества. Полученный продукт использовали непосредственно на следующей стадии без очистки.

8-Метил-3-((метиламино)метил)-2-о-толилизохинолин-1 (2Н)-он (233 мг; 0,8 ммоль) (4001) и 6-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин (4002) (238 мг; 1,0 ммоль) растворяли в ЕtOН (50 мл) и полученную смесь перемешивали при температуре дефлегмации в течение 2 ч. Смесь оставляли охлаждаться до КТ и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (2-20% MeOH/DCM), что позволило получить продукт 8-метил-3-((метил(9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)амино)метил)-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (4003) (200 мг; выход 51%) в виде светло-желтого твердого вещества.

8-Метил-3-((метил(9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)амино)метил)-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (4003) (180 мг; 0,36 ммоль) растворяли в МеОН (HCl) (50 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 2 ч. К реакционной смеси добавляли водный раствор NаНСО3 и pH подводили до 9. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 8-метил-3-((метил(9Н-пурин-6-ил)амино)метил)-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он (4004) (80 мг; выход 54%) в виде желтого твердого вещества.

Пример 7. Синтез 3-(1-(9Н-пурин-6-иламино)этил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она.

Схема 18. Описан синтез 3-(1-(9Н-пурин-6-иламино)этил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она (Соединение 4106).

К перемешиваемому раствору 3-(гидроксиметил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она 1609 (2,79 г; 10 ммоль) в CH2Cl2 (200 мл) добавляли МnO2 (5 г) и полученную смесь перемешивали при температуре дефлегмации в течение 3 ч. Смесь оставляли охлаждаться до КТ и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (10-50% ЕА/РЕ), что позволило получить продукт 8-метил-1-оксо-2-о-толил-1,2-дигидроизохинолин-3-карбальдегид 4101 (2,5 г; выход 90%) в виде белого твердого вещества.

8-Метил-1-оксо-2-o-толил-1,2-дигидроизохинолин-3-карбальдегид 4101 (2,4 г; 8,6 ммоль) растворяли в безводном THF (280 мл) и охлаждали до -78°С в атмосфере азота. Медленно добавляли метил-MgBr (2 М; 5 мл; 10 ммоль) и полученную смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч. Добавляли Н2O (5 мл) и затем раствор выливали в смесь лед-вода (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом, сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и оставшийся продукт очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (10-50% ЕА/РЕ), что позволило получить продукт 3-(1-гидроксиэтил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он 4102 (1,8 г; выход 71%) в виде белого твердого вещества.

К раствору 3-(1-гидроксиэтил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-она 4102 (1,6 г; 5,5 ммоль) в CH2Cl2 добавляли PPh3 (2,88 г; 11,0 ммоль) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Затем к смеси порциями при 0°С добавляли СВr4 (3,64 г; 11,0 ммоль). Полученную смесь оставляли нагреваться до КТ, перемешивали в течение 30 мин и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (30-50% ЕА/РЕ), что позволило получить желаемый продукт 3-(1-бромэтил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он 4103 (1,8 г; выход 91%) в виде белого твердого вещества.

К перемешиваемому раствору 9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-амина 4103 (436 мг; 2 ммоль) в безводном DMF (10 мл) добавляли NaH (60%-ный в минеральном масле; 77 мг; 2 ммоль) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Добавляли 3-(1-бромэтил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он 4104 (700 мг; 2 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч, выливали в смесь лед-вода (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенный органический слой промывали рассолом (20 мл), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (10-50% MeOH/DCM), что позволило получить продукт 8-метил-3-(1-(9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-иламино)этил)-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он 4105 (500 мг; выход 51%) в виде белого твердого вещества.

8-Метил-3-(1-(9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-иламино)этил)-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он 4105 (180 мг; 0,36 ммоль) растворяли в МеОН (HCl) (50 мл) и перемешивали в течение 2 ч. К реакционной смеси добавляли водный раствор NaHCО3 и pH подводили до 9. Смесь затем фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 3-(1-(9Н-пурин-6-иламино)этил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1 (2Н)-он 4106 (80 мг; выход 54%) в виде желтого твердого вещества.

Пример 8. Синтез 3-(4-амино-1-((8-метил-1-оксо-2-о-толил-1,2-дигидроизохинолин-3-ил)метил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-ил)-5-фторфенил-дигидрофосфата.

Схема 19. Описан синтез 3-(4-амино-1-((8-метил-1-оксо-2-о-толил-1,2-дигидроизохинолин-3-ил)метил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-ил)-5-фторфенил-дигидрофосфата (Соединение 4303).

3-((4-Амино-3-(3-фтор-5-гидроксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)метил)-8-метил-2-о-толилизохинолин-1(2Н)-он 4301 (250 мг; 0,5 ммоль) растворяли в безводном THF (15 мл) в темноте в круглодонной колбе (покрытой алюминиевой фольгой) и охлаждали до 0°С в атмосфере аргона. Добавляли СВr4 (498 мг; 1,5 ммоль), затем диэтилфосфит (129 мкл; 1,0 ммоль) и триэтиламин (417 мкл; 1,5 ммоль). Полученную смесь перемешивали в темноте при температуре от 0°С до КТ в течение 16 ч. Затем смесь распределяли между этилацетатом и рассолом. Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя метанолом и дихлорметаном, что позволило получить желаемый продукт 3-(4-амино-1-((8-метил-1-оксо-2-о-толил-1,2-дигидроизохинолин-3-ил)метил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-ил)-5-фторфенил-диэтилфосфат 4302 (200 мг; выход 62%) в виде беловатого твердого вещества.

3-(4-Амино-1-((8-метил-1-оксо-2-о-толил-1,2-дигидроизохинолин-3-ил)метил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-ил)-5-фторфенил-диэтилфосфат 4302 (170 мг; 0,26 ммоль) растворяли в безводном CH3CN (5 мл) и охлаждали до 0°С в атмосфере аргона. Медленно с помощью шприца добавляли TMSBr (триметилсилил-Вr) (0,34 мл; 2,64 ммоль) и полученную смесь перемешивали при температуре от 0°С до КТ в течение 16 ч. Данные LC-MS (жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии) показали, что израсходовано небольшое количество исходного материала, поэтому добавляли дополнительные количества TMSBr (0,1 мл) и перемешивали при КТ в течение 5 ч. Данные LC-MS показали полную конверсию исходного материала. Смесь концентрировали в вакууме и остаток растворяли в Et2O (10 мл) и Н2O (0,5 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Смесь концентрировали в вакууме, что позволило получить желаемый продукт 3-(4-амино-1-((8-метил-1-оксо-2-о-толил-1,2-дигидроизохинолин-3-ил)метил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-ил)-5-фторфенил-дигидрофосфат 4303 (140 мг; выход 91%).

Пример 9. Величины IC50 для отдельных соединений

Таблица 3
Данные in vitro по IC50 для отдельных соединений
IC50 (нМ) + (больше 10 мкМ) ++ (меньше 10 мкМ) +++ (меньше 1 мкМ) ++++ (меньше 100 нМ)
PI3K δ Соединение № Соединение № Соединение № Соединение №
1, 5, 22, 27, 38, 39, 40, 41, 46, 92, 117, 118, 120, 129, 132, 164, 165, 172, 188, 186, 193, 194 4, 14, 15, 17, 18, 21, 26, 29, 31, 32, 34, 35, 36, 42, 43, 44, 45, 47, 49, 57, 69, 71, 85, 87, 94, 106, 107, 143, 175, 179, 181, 182, 183, 187, 189, 192 2, 3, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 16, 19, 20, 23, 24, 25, 28, 30, 33, 37, 48, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 70, 72, 73, 74, 75, 76, 77,
78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 86, 88, 89, 90, 91, 93, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 119, 123, 124, 125, 126, 128, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 141, 142, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151. 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 173, 174, 176, 177, 178, 180, 185, 188, 190, 191
PI3K γ Соединение № Соединение № Соединение № Соединение №
1, 4, 5, 18, 38, 43, 60, 69, 169, 172, 192, 193, 194 17, 34, 35, 37, 38, 40, 42, 57, 61, 65, 91, 92, 94, 105, 107, 140, 164, 170, 175, 179, 184, 186, 187, 189 2, 8, 9, 10, 11, 14, 15, 20, 22, 27, 28, 39, 41, 46, 47, 49, 51, 55, 58, 66, 70, 71, 73, 76, 78, 80, 93, 98, 99, 100, 103, 104, 106, 108, 109, 161, 162, 163, 165, 166, 180, 188 3, 6, 7, 12, 13, 16, 19, 21, 23, 24, 25, 26, 29, 30, 31, 33, 36, 44, 45, 48, 50, 52, 53, 54, 56, 59, 62, 63, 64, 67, 68, 72, 74, 75, 77, 79, 81, 82, 83, 84, 86, 87, 88, 89, 90, 95, 96, 97, 101, 102, 142, 145,
146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 160, 167, 168, 171, 173, 174, 176, 177, 178, 182, 185, 190, 191
PI3K α Соединение № Соединение № Соединение № Соединение №
6, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 64, 65, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 79, 80, 81, 82, 83, 85, 87, 88, 91, 93, 96, 98, 99, 100, 103, 104, 105, 106, 107, 109, 110, 111, 112, 114, 140, 146, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 169, 170, 172, 174, 175, 179, 180, 183, 184, 188, 190, 191, 192, 193, 194 3, 7, 63, 66, 84, 86, 89, 90, 97, 108, 113, 115, 152, 168, 171, 173, 185, 190 53, 95, 101, 102, 145, 147, 149, 151, 177 142, 148, 150, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 176
PI3K β Соединение №
8, 9, 10, 11, 14, 21, 22, 24, 26, 27, 28, 29, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 46, 52, 54, 56, 57, 59, 60, 64, 68, 69, 70, 73, 76, 78, 79, 80, 87, 88, 91, 93, 98, 103, 104, 105, 107, 109, 112, 140, 146, 152, 162, 163, 164, 165, 166, 169, 170, 172, 175, 179, 180, 183, 184, 188, 190, 191, 192, 193, 194
Соединение №
3, 12, 13, 23, 25, 53, 55, 58, 61, 63, 65, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 96, 99, 106, 108, 110, 111, 113, 114, 115, 145, 147, 149, 151, 154, 158, 160, 161, 167, 168, 171, 173, 174, 177, 178,190, 191
Соединение №
7, 62, 66, 82, 89, 90, 95, 97, 100, 102, 150, 153, 159, 176, 185
Соединение №
101, 142, 155, 156, 157
Пролиферация В-клеток, ЕС50 (нМ) Соединение № Соединение № Соединение № Соединение №
38, 162 1, 2, 5, 22, 26, 27, 39, 40, 43, 49, 57, 71, 87, 112 4, 8, 9, 10, 11, 14, 15, 18, 19, 20, 21, 24, 25, 28, 29, 30, 31, 32, 34, 35, 36, 41, 42, 45, 46, 47, 50, 51, 61, 69, 70, 76, 77, 78, 79, 80, 85, 86, 91, 98, 100, 103, 104, 105, 106, 107, 110, 111, 114, 119, 124, 133, 135, 145, 152, 161, 162, 163, 169 3, 6, 7, 12, 13, 16, 17, 23, 33, 37, 44, 48, 53, 54, 55, 62, 63, 66, 67, 68, 72, 73, 74, 75, 81, 82, 83, 84, 88, 89, 90, 93, 95, 96, 97, 99, 101, 102, 108, 109, 113, 115, 123, 125, 126, 128, 134, 136, 137, 138, 139, 141, 142, 144, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159,
160, 166, 167, 168, 170, 171, 173, 174, 176, 177, 178, 180, 187, 185, 188, 190, 191

Таблица 4. Структуры соединений, дающих IC50, приведенные в Таблице 3

Структура
Соединение 1 Соединение 2 Соединение 3 Соединение 4 Соединение 5
Соединение 6 Соединение 7 Соединение 8 Соединение 9 Соединение 10
Соединение 11 Соединение 12 Соединение 13 Соединение 14 Соединение 15
Структура
Соединение 16 Соединение 17 Соединение 18 Соединение 19 Соединение 20
Соединение 21 Соединение 22 Соединение 23 Соединение 24 Соединение 25
Соединение 26 Соединение 27 Соединение 28 Соединение 29 Соединение 30
Соединение 31 Соединение 32 Соединение 33 Соединение 34 Соединение 35
Соединение 36 Соединение 37 Соединение 38 Соединение 39 Соединение 40
Структура
Соединение 41 Соединение 42 Соединение 43 Соединение 44 Соединение 45
Соединение 46 Соединение 47 Соединение 48 Соединение 49 Соединение 50
Соединение 51 Соединение 52 Соединение 53 Соединение 54 Соединение 55
Соединение 56 Соединение 57 Соединение 58 Соединение 59 Соединение 60
Соединение 61 Соединение 62 Соединение 63 Соединение 64 Соединение 65
Структура
Соединение 66 Соединение 67 Соединение 68 Соединение 69 Соединение 70
Соединение 71 Соединение 72 Соединение 73 Соединение 74 Соединение 75
Соединение 76 Соединение 77 Соединение 78 Соединение 79 Соединение 80
Соединение 81 Соединение 82 Соединение 83 Соединение 84 Соединение 85
Соединение 86 Соединение 87 Соединение 88 Соединение 89 Соединение 90
Структура
Соединение 91 Соединение 92 Соединение 93 Соединение 94 Соединение 95
Соединение 96 Соединение 97 Соединение 98 Соединение 99 Соединение 100
Соединение 101 Соединение 102 Соединение 103 Соединение 104 Соединение 105
Соединение 106 Соединение 107 Соединение 108 Соединение 109 Соединение 110
Соединение 111 Соединение 112 Соединение 113 Соединение 114 Соединение 115
Структура
Соединение 116 Соединение 117 Соединение 118 Соединение 119 Соединение 120
Соединение 121 Соединение 122 Соединение 123 Соединение 124 Соединение 125
Соединение 126 Соединение 127 Соединение 128 Соединение 129 Соединение 130
Соединение 131 Соединение 132 Соединение 133 Соединение 134 Соединение 135
Соединение 136 Соединение 137 Соединение 138 Соединение 139 Соединение 140
Структура
Соединение 141 Соединение 142 Соединение 143 Соединение 144 Соединение 145
Соединение 146 Соединение 147 Соединение 148 Соединение 149 Соединение 150
Соединение 151 Соединение 152 Соединение 153 Соединение 154 Соединение 155
Соединение 156 Соединение 157 Соединение 158 Соединение 159 Соединение 160
Структура
Соединение 161 Соединение 162 Соединение 163 Соединение 164 Соединение 165
Соединение 166 Соединение 167 Соединение 168 Соединение 169 Соединение 170
Соединение 171 Соединение 172 Соединение 173 Соединение 174 Соединение 175
Соединение 176 Соединение 177 Соединение 178 Соединение 179 Соединение 180
Соединение 181 Соединение 182 Соединение 183 Соединение 184 Соединение 185
Структура
Соединение 186 Соединение 187 Соединение 188 Соединение 189 Соединение 190
Соединение 191 Соединение 192 Соединение 193 Соединение 194

Пример 10. Анализы экспрессии и ингибирования р110а/р85а, р110β/р85α, р110δ/р85α и р110γ.

PI3-K класса I может быть или приобретена (р110α/р85α, р110β/р85α, р110δ/р85α от Upstate и р110γ от Sigma), или экспрессирована, как описано ранее (Knight и др., 2004). Величины IC50 измеряют используя или стандартный ТСХ-анализ для липидкиназной активности (описанный ниже), или высокопроизводительный анализ с захватом на мембране. Киназные реакции проводят готовя реакционную смесь, содержащую киназу, ингибитор (конечная концентрация DMSO 2%), буфер (25 мМ HEPES; pH 7,4; 10 мМ MgCl2) и свежеприготовленный, обработанный ультразвуком фосфатидилинозит (100 мкг/мл). Реакции инициируют добавлением раствора АТФ, содержащего 10 мкКи γ-32Р-АТФ, до конечной концентрации 10 или 100 мкМ и оставляют протекать в течение 5 минут при комнатной температуре. Далее для проведения ТСХ-анализа реакции останавливают добавляя 105 мкл 1 н. HCl, затем 160 мкл смеси CHCl3:MeOH (1:1). Двухфазную смесь перемешивают на вортексе, быстро центрифугируют и органическую фазу переносят в новую пробирку, используя наконечник пипетки для нанесения на гель, предварительно покрытый CHCl3. Этот экстракт наносят в виде пятна на ТСХ-пластинки и хроматографируют в течение 3-4 часов в растворе 65:35 н-пропанол:1 М уксусная кислота. Затем ТСХ-пластинки сушат, помещают на экран фосфоимиджера (Storm, Amersham) и производят количественное определение. Киназную активность для каждого соединения измеряют для 10-12 концентраций ингибитора, представляющих собой двукратные разведения от наивысшей тестируемой концентрации (обычно 200 мкМ). Для соединений, демонстрирующих значительную активность, определения IC50 повторяют от двух до четырех раз, и представленные величины являются средним значением этих независимых измерений.

Доступны другие имеющиеся в продаже наборы или системы для анализа активностей PI3-K. Имеющиеся в продаже наборы или системы могут быть использованы для скрининга ингибиторов и/или агонистов PI3-K, включая, но не ограничиваясь этим, РI3-киназы α, β, δ и γ. Типичной системой является система для анализа РI3-киназы (человека) HTRF™ от Upstate. Данный анализ может быть проведен в соответствии с методиками, предлагаемыми производителем. Кратко, этот анализ представляет собой исследование резонансного переноса энергии флуоресценции с разрешением по времени (TR-FRET), в котором опосредованно измеряют продукт PIP3, образованный в результате действия PI3-K. Киназную реакцию проводят в микротитрационном планшете (например, 384-луночном микротитрационном планшете). Общий объем реакционной смеси составляет приблизительно 20 мкл на одну лунку. На первой стадии в каждую лунку помещают по 2 мкл раствора тестируемого соединения в 20%-ном диметилсульфоксиде, что приводит к получению конечной концентрации DMSO 2%. Далее в каждую лунку добавляют приблизительно по 14,5 мкл смеси киназа/РIР2 (фосфатидилинозит-дифосфат) (разбавленной в 1Х реакционном буфере) для получения конечной концентрации киназы 0,25-0,3 мкг/мл и PIP2 10 мкМ. Планшет герметично закрывают и инкубируют в течение 15 минут при комнатной температуре. Для запуска реакции в каждую лунку добавляют по 3,5 мкл раствора АТФ (разбавленного в 1Х реакционном буфере) до получения конечной концентрации АТФ 10 мкМ. Планшет герметично закрывают и инкубируют в течение 1 часа при комнатной температуре. Реакцию останавливают путем добавления по 5 мкл раствора для остановки реакции на одну лунку и затем по 5 мкл детектирующей смеси на одну лунку. Планшет герметично закрывают, инкубируют в течение 1 часа при комнатной температуре и затем прочитывают на соответствующем планшетном ридере. Данные анализируют и величины IC50 получают, используя GraphPad Prism 5.

Пример 11. Анализы экспрессии и ингибирования Аbl

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении Аbl-киназы можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники, или со способами, изложенными ниже. Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть проанализированы в трех повторах в отношении рекомбинантной полноразмерной Аbl или Аbl (T315I) (Upstate) в анализе, содержащем 25 мМ HEPES, pH 7,4; 10 мМ MgCl2; 200 мкМ АТФ (2,5 мкКи γ-32Р-АТФ) и 0,5 мг/мл BSA (бычий сывороточный альбумин). Оптимизированный пептидный субстрат для Аbl EAIYAAPFAKKK используют в качестве фосфоакцептора (200 мкМ). Реакции останавливают, нанося реакционную смесь в виде пятен на фосфоцеллюлозные пластинки, которые промывают 0,5%-ной фосфорной кислотой (приблизительно 6 раз, каждый раз по 5-10 минут). Пластинки сушат и перенесенное радиоактивное соединение количественно измеряют посредством визуализация с использованием радионуклида фосфора (phosphorimaging).

Пример 12. Анализы экспрессии и ингибирования Нсk

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении Hck-киназы можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники, или со способами, изложенными ниже. Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть проанализированы в трех повторах в отношении рекомбинантной полноразмерной Нск в анализе, содержащем 25 мМ HEPES, pH 7,4; 10 мМ MgCl2; 200 мкМ АТФ (2,5 мкКи γ-32Р-АТФ) и 0,5 мг/мл BSA. Оптимизированный пептидный субстрат для киназ Src-семейства EIYGEFKKK используют в качестве фосфоакцептора (200 мкМ). Реакции останавливают, нанося реакционную смесь в виде пятен на фосфоцеллюлозные пластинки, которые промывают 0,5%-ной фосфорной кислотой (приблизительно 6 раз, каждый раз по 5-10 минут). Пластинки сушат и радиоактивное соединение количественно измеряют посредством визуализации с использованием радионуклида фосфора.

Пример 13. Анализы экспрессии и ингибирования инсулинового рецептора (IR)

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении рецепторной киназы IR можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники, или со способами, изложенными ниже. Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть проанализированы в трех повторах в отношении рекомбинантного киназного домена рецептора инсулина (Upstate) в анализе, содержащем 25 мМ HEPES, pH 7,4; 10 мМ MgCl2; 10 мМ MnCl2; 200 мкМ АТФ (2,5 мкКи γ-32Р-АТФ) и 0,5 мг/мл BSA. В качестве субстрата используют поли-E-Y (сополимер глутаминовой кислоты и тирозина) (Sigma; 2 мг/мл). Реакции останавливают, нанося реакционную смесь в виде пятен на нитроцеллюлозу, которую промывают смесью 1 М МаСl/1%-ная фосфорная кислота (приблизительно 6 раз, каждый раз по 5-10 минут). Пластинки сушат и радиоактивное соединение количественно измеряют посредством визуализации с использованием радионуклида фосфора.

Пример 14. Анализы экспрессии и ингибирования Src

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении Src-киназы можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники, или со способами, изложенными ниже. Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть проанализированы в трех повторах в отношении рекомбинантной полноразмерной Src или Src (T338I) в анализе, содержащем 25 мМ HEPES, pH 7,4; 10 мМ MgCl2; 200 мкМ АТФ (2,5 мкКи γ-32Р-АТФ) и 0,5 мг/мл BSA. Оптимизированный пептидный субстрат для киназ Src-семейства EIYGEFKKK используют в качестве фосфоакцептора (200 мкМ). Реакции останавливают, нанося реакционную смесь в виде пятен на фосфоцеллюлозные пластинки, которые промывают 0,5%-ной фосфорной кислотой (приблизительно 6 раз, каждый раз по 5-10 минут). Пластинки сушат и радиоактивное соединение количественно измеряют посредством визуализации с использованием радионуклида фосфора.

Пример 15. Анализы экспрессии и ингибирования DNA-PK (DNAK)

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении киназы DNAK можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники. DNA-PK может быть приобретена у Promega и проанализирована с использованием системы для анализа DNA-PK (Promega) в соответствии с инструкциями производителя.

Пример 16. Анализы экспрессии и ингибирования mTOR

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении mTOR можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники, или со способами, изложенными ниже, Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть протестированы в отношении рекомбинантной mTOR (Invitrogen) в анализе, содержащем 50 мМ HEPES, pH 7,5; 1 мМ EGTA (этиленгликоль-тетрауксусную кислоту); 10 мМ МgСl2; 2,5 мМ, 0,01% Твина; 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи µ-32Р-АТФ) и 3 мкг/мл BSA. В качестве субстрата используют рекомбинантный PHAS-1/4EBP1 (фосфорилированный термо- и кислотоустойчивый белок-1/4Е-связывающий белок-1 (phosphorylated heat and acid stable protein-1/4E binding protein-1)) крысы (Calbiochem, 2 мг/мл). Реакции останавливают, нанося реакционную смесь в виде пятен на нитроцеллюлозу, которую промывают смесью 1 М МаСl/1%-ная фосфорная кислота (приблизительно 6 раз, каждый раз по 5-10 минут). Пластинки сушат и радиоактивное соединение количественно измеряют посредством визуализации с использованием радионуклида фосфора.

В продаже имеются другие наборы или системы для анализа активности mTOR. Например, можно использовать набор для анализа киназ LanthaScreen™ (Invitrogen) для тестирования ингибиторов mTOR, изложенных в данной заявке. Этот анализ основан на применении FRET-платформы с временным разрешением, где измеряют фосфорилирование 4ЕВР1, меченного GFP (зеленым флюоресцентным белком), под действием киназы mTOR. Киназную реакцию проводят в белом 384-луночном микротитрационном планшете. Общий реакционный объем составляет 20 мкл на одну лунку, и реакционный буфер имеет следующий состав: 50 мМ HEPES, pH 7,5; 0,01% полисорбата 20; 1 мМ EGTA; 10 мМ МnСl2 и 2 мМ DTT. На первой стадии в каждую лунку помещают по 2 мкл раствора тестируемого соединения в 20%-ном диметилсульфоксиде, что приводит к получению конечной концентрации DMSO 2%. После этого добавляют по 8 мкл на одну лунку mTOR, разбавленной в реакционном буфере до конечной концентрации 60 нг/мл. Для запуска реакции в каждую лунку добавляют по 10 мкл смеси ATФ/GFP-4EBP1 (разбавленной в реакционном буфере) до получения конечной концентрации АТФ 10 мкМ и GFP-4EBP1 0,5 мкМ. Планшет герметично закрывают и инкубируют в течение 1 часа при комнатной температуре. Реакцию останавливают путем добавления по 10 мкл на одну лунку смеси Тb-анти-рТ46-4ЕВР1-антитело/ЕОТА (этилендиаминтетрауксусная кислота) (разведенной в буфере для TR-FRET) до получения конечной концентрации антитела 1,3 нМ и EDTA 6,7 мМ. Планшет герметично закрывают, инкубируют в течение 1 часа при комнатной температуре и затем прочитывают на планшетном ридере с настройками для TR-FRET LanthaScreen™. Данные анализируют и величины IC50 получают, используя GraphPad Prism 5.

Пример 17. Анализы экспрессии и ингибирования рецептора фактора роста эндотелия сосудов.

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении рецептора VEGF можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники, или со способами, изложенными ниже. Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть протестированы в отношении киназного домена рекомбинантного KDR (киназный инсерционный доменсодержащий рецептор (Invitrogen) рецептора в анализе, содержащем 25 мМ HEPES, pH 7,4; 10 мМ MgCl2; 0,1% ВМЕ (2-меркаптоэтанол); 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи γ-32Р-АТФ) и 3 мкг/мл BSA. В качестве субстрата используют поли-E-Y (Sigma; 2 мг/мл). Реакции останавливают, нанося реакционную смесь в виде пятен на нитроцеллюлозу, которую промывают смесью 1 М NaСl/1%-ная фосфорная кислота (приблизительно 6 раз, каждый раз по 5-10 минут). Пластинки сушат и радиоактивное соединение количественно измеряют посредством визуализации с использованием радионуклида фосфора.

Пример 18. Анализы экспрессии и ингибирования эфринового рецептора В4 (ЕрnВ4)

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении EphB4 можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники, или со способами, изложенными ниже. Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть протестированы в отношении киназного домена рекомбинантного эфринового рецептора В4 (Invitrogen) в анализе, содержащем 25 мМ HEPES, pH 7,4; 10 мМ MgCl2; 0,1% ВМЕ; 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи µ-32Р-АТФ) и 3 мкг/мл BSA. В качестве субстрата используют поли-E-Y (Sigma; 2 мг/мл). Реакции останавливают, нанося реакционную смесь в виде пятен на нитроцеллюлозу, которую промывают смесью 1 М NаСl/1%-ная фосфорная кислота (приблизительно 6 раз, каждый раз по 5-10 минут). Пластинки сушат и радиоактивное соединение количественно измеряют посредством визуализации с использованием радионуклида фосфора.

Пример 19. Анализы экспрессии и ингибирования рецептора эпидермального фактора роста (EGFR)

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении киназы EGFR можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники, или со способами, изложенными ниже. Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть протестированы в отношении киназного домена рекомбинантного EGF рецептора (Invitrogen) в анализе, содержащем 25 мМ HEPES, pH 7,4; 10 мМ MgCl2; 0,1% ВМЕ; 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи µ-32Р-АТФ) и 3 мкг/мл BSA. В качестве субстрата используют поли-E-Y (Sigma; 2 мг/мл). Реакции останавливают, нанося реакционную смесь в виде пятен на нитроцеллюлозу, которую промывают смесью 1 М NaСl/1%-ная фосфорная кислота (приблизительно 6 раз, каждый раз по 5-10 минут). Пластинки сушат и радиоактивное соединение количественно измеряют посредством визуализации с использованием радионуклида фосфора.

Пример 20. Анализы экспрессии и ингибирования KIT

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении киназы KIT можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники, или со способами, изложенными ниже. Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть протестированы в отношении киназного домена рекомбинантного KIT (Invitrogen) в анализе, содержащем 25 мМ HEPES, pH 7,4; 10 мМ MgCl2; 1 мМ DTT; 10 мМ MnCl2; 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи µ-32Р-АТФ) и 3 мкг/мл BSA. В качестве субстрата используют поли-E-Y (Sigma; 2 мг/мл). Реакции останавливают, нанося реакционную смесь в виде пятен на нитроцеллюлозу, которую промывают смесью 1 М NаСl/1%-ная фосфорная кислота (приблизительно 6 раз, каждый раз по 5-10 минут). Пластинки сушат и радиоактивное соединение количественно измеряют посредством визуализации с использованием радионуклида фосфора.

Пример 21. Анализы экспрессии и ингибирования RET

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении киназы RET можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники, или со способами, изложенными ниже. Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть протестированы в отношении киназного домена рекомбинантного RET (Invitrogen) в анализе, содержащем 25 мМ HEPES, pH 7,4; 10 мМ MgCl2; 2,5 мМ DTT; 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи µ-32Р-АТФ) и 3 мкг/мл BSA. Оптимизированный пептидный субстрат для Abl EAIYAAPFAKKK используют в качестве фосфоакцептора (200 мкМ). Реакции останавливают, нанося реакционную смесь в виде пятен на фосфоцеллюлозные пластинки, которые промывают 0,5%-ной фосфорной кислотой (приблизительно 6 раз, каждый раз по 5-10 минут). Пластинки сушат и радиоактивное соединение количественно измеряют посредством визуализации с использованием радионуклида фосфора.

Пример 22. Анализы экспрессии и ингибирования рецептора ростового фактора из тромбоцитов (PDGFR)

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении киназы PDGFR можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники, или со способами, изложенными ниже. Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть протестированы в отношении киназного домена рекомбинантного рецептора PDGF (Invitrogen) в анализе, содержащем 25 мМ HEPES, pH 7,4; 10 мМ MgCl2; 2,5 мМ DTT; 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи µ-32Р-АТФ) и 3 мкг/мл BSA. Оптимизированный пептидный субстрат для Abl EAIYAAPFAKKK используют в качестве фосфоакцептора (200 мкМ). Реакции останавливают, нанося реакционную смесь в виде пятен на фосфоцеллюлозные пластинки, которые промывают 0,5%-ной фосфорной кислотой (приблизительно 6 раз, каждый раз по 5-10 минут). Пластинки сушат и радиоактивное соединение количественно измеряют посредством визуализации с использованием радионуклида фосфора.

Пример 23. Анализы экспрессии и ингибирования Fms-подобной тирозинкиназы 3 (FLT-3)

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении киназы FLT-3 можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники, или со способами, изложенными ниже. Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть протестированы в отношении киназного домена рекомбинантного FLT-3 (Invitrogen) в анализе, содержащем 25 мМ HEPES, pH 7,4; 10 мМ MgCl2; 2,5 мМ DTT; 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи µ-32Р-АТФ) и 3 мкг/мл BSA. Оптимизированный пептидный субстрат для Abl EAIYAAPFAKKK используют в качестве фосфоакцептора (200 мкМ). Реакции останавливают, нанося реакционную смесь в виде пятен на фосфоцеллюлозные пластинки, которые промывают 0,5%-ной фосфорной кислотой (приблизительно 6 раз, каждый раз по 5-10 минут). Пластинки сушат и перенесенное радиоактивное соединение количественно измеряют с помощью визуализация с использованием радионуклида фосфора.

Пример 24. Анализы экспрессии и ингибирования рецепторной тирозинкиназы ТЕК (TIE2)

Перекрестную активность или ее отсутствие для одного или более соединений по настоящему изобретению в отношении киназы TIE2 можно измерить в соответствии с любой методикой, известной в данной области техники, или со способами, изложенными ниже. Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть протестированы в отношении киназного домена рекомбинантного TIE2 (Invitrogen) в анализе, содержащем 25 мМ HEPES, pH 7,4; 10 мМ MgCl2; 2 мМ DTT; 10 мМ MnCl2; 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи µ-32Р-АТФ) и 3 мкг/мл BSA. В качестве субстрата используют поли-E-Y (Sigma; 2 мг/мл). Реакции останавливают, нанося реакционную смесь в виде пятен на нитроцеллюлозу, которую промывают смесью 1 М NаСl/1%-ная фосфорная кислота (приблизительно 6 раз, каждый раз по 5-10 минут). Пластинки сушат и перенесенное радиоактивное соединение количественно измеряют с помощью визуализации с использованием радионуклида фосфора.

Пример 25. Анализ активации и пролиферации В-клеток

Способность одного или более соединений, являющихся объектом изобретения, ингибировать активацию и пролиферацию В-клеток определяют в соответствии со стандартными методиками, известными в данной области техники. Например, установлен метод анализа клеточной пролиферации in vitro, в котором измеряют метаболическую активность живых клеток. Анализ проводят в 96-луночном микротитрационном планшете, используя восстановление красителя Alamar Blue. В-клетки селезенки Balb/c очищают, применяя градиент Ficoll-Paque™ PLUS, с последующим магнитным разделением клеток с использованием набора для выделения В-клеток MACS (Miletenyi). Клетки высевают на планшеты в объеме 90 мкл в количестве 50000 клеток/лунка в среде для В-клеток (среда RPMI (Roswell Park Memorial Institute) + 10% FBS (эмбриональная бычья сыворотка) + пенициллин/стрептомицин + 50 мкМ bМЕ) + 5 мМ HEPES). Соединение, изложенное в данной заявке, разбавляют в среде для В-клеток и добавляют в объеме 10 мкл. Планшеты инкубируют в течение 30 мин при 37°С и 5% СO2 (конечная концентрация DMSO 0,2%). Затем добавляют по 50 мкл смеси для стимулирования В-клеток, содержащей или LPS (липополисахарид) (10 мкг/мл), или F(ab')2 антитела осла против IgM мыши (5 мкг/мл) плюс рекомбинантный IL4 (интерлейкин-4) мыши (2 нг/мл) в среде для В-клеток. Планшеты инкубируют в течение 72 часов при 37°С и 5% СO2. В каждую лунку добавляют реагент Alamar Blue в объеме 15 мкл и планшеты инкубируют в течение 5 часов при 37°С и 5% СO2. Флуоресценцию Alamar Blue прочитывают при 560Ех/590Ет (возбуждение на длине волны 560 нм, эмиссия на длине волны 590 нм) и величины IC50 или ЕС50 рассчитывают, используя GraphPad Prism 5.

Пример 26. Анализ пролиферации опухолевой клеточной линии

Способность одного или более соединений, являющихся объектом изобретения, ингибировать пролиферацию опухолевой клеточной линии определяют в соответствии со стандартными методиками, известными в данной области техники. Например, можно провести анализ клеточной пролиферации in vitro, в котором измеряют метаболическую активность живых клеток. Данный анализ проводят в 96-луночном микротитрационном планшете, используя восстановление Alamar Blue. Опухолевые клеточные линии человека получают из АТСС (Американская коллекция типовых культур) (например, MCF7, U-87 MG; MDA-MB-468, РС-3), выращивают до конфлюентного состояния во флаконах Т75, проводят трипсинизацию с использованием 0,25%-ного трипсина, промывают один раз средой для опухолевых клеток (DMEM (модифицированная Дульбекко среда Игла) + 10% FBS) и высевают на планшеты в объеме 90 мкл в количестве 5000 клеток/лунка в среде для опухолевых клеток. Соединение, изложенное в данной заявке, разбавляют в среде для опухолевых клеток и добавляют в объеме 10 мкл. Планшеты инкубируют в течение 72 часов при 37°С и 5% СO2. В каждую лунку добавляют реагент Alamar Blue в объеме 15 мкл и планшеты инкубируют в течение 3 часов при 37°С и 5% СO2. Флуоресценцию Alamar Blue прочитывают при 560Ех/590Еm и величины IC50 рассчитывают, используя GraphPad Prism 5.

Пример 27. Противоопухолевая активность in vivo

Можно провести оценку соединений, изложенных в данной заявке, в ряде моделей опухолей человека и мыши.

Модели опухолей, устойчивых к паклитакселу.

1. Модель рака яичника, полученная на клиническом материале.

Эта опухолевая модель создана в результате биопсии опухоли пациента с раком яичника. Биоптат опухоли взят у пациента.

Соединения, изложенные в данной заявке, вводят бестимусным мышам, несущим опухоли с установленной стадией развития, используя схему: каждые 2 суток × 5.

2. Ксенотрансплантат рака яичника человека А2780Тах (с мутантным тубулином).

А2780Тах представляет собой модель устойчивого к паклитакселу рака яичника человека. Он получен из чувствительной исходной линии А2780 в результате совместной инкубации с паклитакселом и верапамилом, агентом, устраняющим MDR (множественную лекарственную устойчивость). Показано, что механизм устойчивости к нему не является родственным механизму MDR и объясняется наличием мутации в гене, кодирующем белок бета-тубулин.

Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть введены мышам, несущим опухоли с установленной стадией развития, по схеме: каждые 2 суток ×5.

3. Ксенотрансплантат рака толстой кишки человека HCT116/VM46 (с множественной лекарственной устойчивостью)

НСТ116/VM46 представляет собой MDR-устойчивый рак толстой кишки из чувствительной исходной линии НСТ116. При росте in vivo в бестимусных мышах HCT116/VM46 неизменно демонстрирует высокую устойчивость к паклитакселу.

Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть введены мышам, несущим опухоли с установленной стадией развития, по схеме: каждые 2 суток ×5.

4. Модель мышиной саркомы М5076

М5076 представляет собой мышиную фибросаркому, от природы резистентную к паклитакселу in vivo.

Соединения, изложенные в данной заявке, могут быть введены мышам, несущим опухоли с установленной стадией развития, по схеме: каждые 2 суток ×5.

Одно или более соединений по изобретению могут быть использованы в комбинации с другими терапевтическими агентами in vivo для ксенотрансплантатов рака толстой кишки человека с множественной лекарственной устойчивостью HCT/VM46 или для любой другой модели, известной в данной области техники, включая модели, изложенные в данной заявке.

Пример 28. Анализ стабильности в присутствии микросом

Стабильность одного или более соединений, являющихся объектом изобретения, определяют в соответствии со стандартными методиками, известными в данной области техники. Например, стабильность одного или более соединений, являющихся объектом изобретения, устанавливают в анализе in vitro. В частности, можно провести анализ стабильности в присутствии микросом in vitro, в котором измеряют стабильность одного или более соединений, являющихся объектом изобретения, при взаимодействии с микросомами из печени мыши, крысы или человека. Взаимодействие микросом с соединениями проводят в пробирке Эппендорфа емкостью 1,5 мл. Каждая пробирка содержит 0,1 мкл NADPH (никотинамидадениндинуклеотида восстановленного) (10,0 мг/мл); 75 мкл микросом из печени мыши, крысы или человека (20,0 мг/мл); 0,4 мкл 0,2 М фосфатного буфера и 425 мкл ddH2O (дважды дистиллированной воды). Пробирка с отрицательным контролем (без NADPH) содержит 75 мкл микросом из печени мыши, крысы или человека (20,0 мг/мл); 0,4 мкл 0,2 М фосфатного буфера и 525 мкл ddH2O. Взаимодействие инициируют путем добавления 1,0 мкл 10,0 мМ тестируемого соединения. Пробирки с реакционной смесью инкубируют при 37°С. По 100 мкл образца отбирают в новую пробирку Эппендорф, содержащую 300 мкл холодного метанола, через 0, 5, 10, 15, 30 и 60 минут от начала реакции. Образцы центрифугируют при 15000 об/мин для удаления белка. Супернатант центрифугированного образца переносят в новую пробирку. Концентрацию стабильного соединения в супернатанте после взаимодействия с микросомами измеряют жидкостной хроматографией/масс-спектрометрией (LC-MS).

Пример 29. Анализ стабильности в плазме крови

Стабильность одного или более соединений, являющихся объектом изобретения, в плазме крови определяют в соответствии со стандартными методиками, известными в данной области техники. См., например, Rapid Соmmun. Mass Spectrom., 10: 1019-1026. Приведенная ниже методика представляет собой HPLC-MS/MS-анализ с использованием плазмы крови человека; возможно также использование плазмы других видов, включая обезьяну, собаку, крысу и мышь. Замороженную гепаринизированную плазму крови человека размораживают на холодной водяной бане и перед использованием центрифугируют в течение 10 минут при 2000 об/мин при 4°С. Соединение, являющееся объектом изобретения, добавляют из 400 мкМ концентрированного раствора к аликвоте предварительно нагретой плазмы с получением конечного объема для проведения анализа 400 мкл (или 800 мкл для определения периода полувыведения), содержащего 5 мкМ тестируемого соединения и 0,5% DMSO. Реакционные смеси инкубируют со встряхиванием в течение 0 минут и 60 минут при 37°С или в течение 0, 15, 30, 45 и 60 минут при 37°С для определения периода полувыведения. Реакции останавливают, перенося 50 мкл инкубационной смеси в 200 мкл охлажденного на льду ацетонитрила и перемешивая посредством встряхивания в течение 5 минут. Образцы центрифугируют при 6000 × g в течение 15 минут при 4°С и по 120 мкл супернатанта отбирают в чистые пробирки. Затем образцы упаривают досуха и подвергают анализу с использованием HPLC-MS/MS.

Там, где желательно, одновременно с тестируемыми соединениями тестируют одно или более чем одно контрольное соединение или соединение сравнения (5 мкМ): одно соединение, пропоксикаин, с низкой стабильностью в плазме, и другое соединение, пропантелин, с промежуточной стабильностью в плазме.

Образцы повторно разводят в смеси ацетонитрил/метанол/вода (1/1/2, об./об./об.) и анализируют с использованием обращенно-фазовой (RP) HPLC-MS/MS, применяя метод селективного мониторинга реакций (SRM). Условия проведения HPLC включают двойной насос для LC с автодозатором, комбинированный режим работы, С12, колонку 2×20 мм и программу градиента. Площади пиков, соответствующих аналитам, регистрируют с использованием HPLC-MS/MS. Соотношение исходного соединения, оставшегося через 60 минут, и количества на момент времени ноль, выраженное в процентах, принимают за стабильность в плазме. В случае определения периода полувыведения его определяют из наклона начального линейного участка логарифмической кривой зависимости оставшегося соединения (%) от времени, предполагая наличие кинетики первого порядка.

Пример 30. Химическая стабильность

Химическую стабильность одного или более соединений, являющихся объектом изобретения, определяют в соответствии со стандартными методиками, известными в данной области техники. Далее приводятся подробности типичной методики определения химической стабильности соединения, являющегося объектом изобретения. Стандартным буфером, используемым для анализа химической стабильности, является фосфатно-солевой буфер (PBS) с pH 7,4; можно использовать и другие подходящие буферы. Соединение, являющееся объектом изобретения, добавляют из 100 мкМ концентрированного раствора к аликвоте PBS (в двух повторах) с получением конечного объема для проведения анализа 400 мкл, содержащего 5 мкМ тестируемое соединение и 1% DMSO (для определения периода полувыведения готовят образец общим объемом 700 мкл). Реакционные смеси инкубируют со встряхиванием в течение 0 минут и 24 часов при 37°С; для определения периода полувыведения образцы инкубируют в течение 0, 2, 4, 6 и 24 часов. Реакции останавливают путем незамедлительного добавления 100 мкл инкубационной смеси к 100 мкл ацетонитрила и встряхивания на вортексе в течение 5 минут. Образцы далее хранят при -20°С до проведения HPLC-MS/MS-анализа. Там, где желательно, контрольное соединение или соединение сравнения, такое как хлорамбуцил (5 мкМ), тестируют одновременно с представляющим интерес соединением, являющимся объектом изобретения, поскольку это соединение в значительной степени гидролизуется в течение 24 часов. Образцы анализируют с использованием (RP)HPLC-MS/MS, применяя метод селективного мониторинга реакций (SRM). Условия проведения HPLC включают двойной насос для LC с автодозатором, комбинированный режим работы, С12, колонку 2×20 мм и программу градиента. Площади пиков, соответствующих аналитам, регистрируют с использованием HPLC-MS/MS. Соотношение исходного соединения, оставшегося через 24 часа, и количества на момент времени ноль, выраженное в процентах, принимают за химическую стабильность. В случае определения периода полувыведения его определяют из наклона начального линейного участка логарифмической кривой зависимости оставшегося соединения (%) от времени, предполагая наличие кинетики первого порядка.

Пример 31. Анализ Akt-киназы

Клетки, содержащие компоненты пути Akt/mTOR, включая, но не ограничиваясь этим, миобласты L6, клетки B-ALL, В-клетки, Т-клетки, лейкозные клетки, клетки костного мозга, р190-трансдуцированные клетки, клетки с положительной филадельфийской хромосомой (Ph+) и эмбриональные фибробласты мыши, обычно растят в средах для выращивания клеток, таких как DMEM, дополненных эмбриональной бычьей сывороткой и/или антибиотиками, и растят до конфлюентного состояния.

С целью сравнения влияния одного или более соединений, приведенных в данной заявке, на активацию Akt, указанные клетки истощают по сыворотке в течение ночи и инкубируют с одним или более чем одним соединением, изложенным в данной заявке, или с примерно 0,1% DMSO в течение от приблизительно 1 минуты до примерно 1 часа, после чего стимулируют инсулином (например, 100 нМ) в течение от примерно 1 минуты до примерно 1 часа. Клетки подвергают лизису путем соскабливания их в охлажденный во льду лизирующий буфер, содержащий детергенты, такие как например, додецилсульфат натрия, и ингибиторы протеаз (например, PMSF (фенилметилсульфонил-фторид)). После приведения клеток в контакт с лизирующим буфером раствор подвергают краткому облучению ультразвуком, осветляют центрифугированием, разделяют с использованием SDS-PAGE (электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии додецил сульфата натрия), переносят на нитроцеллюлозу или PVDF (поливинилиденфторид) и подвергают иммуноблоттингу, используя антитела к фосфо-Akt (pAkt) S473, фосфо-Akt Т308, Akt и В-актину (Cell Signaling Technologies).

В результате продемонстрировано, что одно или более соединений из настоящего описания ингибируют стимулируемое инсулином фосфорилирование Akt в положении S473. Альтернативно, некоторые соединения, изложенные в данной заявке, дополнительно ингибируют стимулируемое инсулином фосфорилирование Akt в положении Т308. Такой класс соединений может ингибировать Akt более эффективно, чем рапамицин, и может быть отнесен к ингибиторам mTORC2 или ингибиторам киназ, расположенных "вверх по течению", таких как PI3K или Akt.

Пример 32. Передача сигнала в крови посредством киназ

РI3К/Аkt/mТоr-опосредованную передачу сигнала измеряют в клетках крови, используя метод phosflow (Methods Enzymol. 2007, 434: 131-54). Преимуществом этого способа является то, что по своей природе он представляет собой метод анализа единичной клетки, так что дает возможность детектировать клеточную гетерогенность, а не средние по популяции величины. Это позволяет одновременно проводить распознавание состояния сигнальных путей в различных популяциях, определяемых по другим маркерам. Кроме того, метод phosflow является количественным методом с высокой чувствительностью. Для тестирования влияния одного или более соединений, представленных в данной заявке, нефракционированные спленоциты или мононуклеарные клетки периферической крови стимулируют антителами против CD3 для инициации передачи сигнала с участием Т-клеточных рецепторов. После этого клетки фиксируют и окрашивают на предмет наличия поверхностных маркеров и внутриклеточных фосфопротеинов. Ожидается, что ингибиторы, изложенные в данной заявке, ингибируют анти-СD3-опосредованное фосфорилирование Akt-S473 и S6, в то время как рапамицин ингибирует фосфорилирование S6 и усиливает фосфорилирование Akt в условиях тестирования.

Аналогично, аликвоты цельной крови инкубируют в течение 15 минут с растворителем (например, 0,1% DMSO) или киназными ингибиторами в различных концентрациях, после чего добавляют стимулирующие вещества для проведения перекрестного сшивания Т-клеточного рецептора (TCR) (анти-CD3 с вторичным антителом) или В-клеточного рецептора (BCR), используя антитела против легкой цепи каппа (Fab'2-фрагментов). Приблизительно через 5 и 15 минут образцы фиксируют (например, холодным 4%-ным параформальдегидом) и используют для метода phosflow. Применяют поверхностное окрашивание для различения Т- и В-клеток, используя антитела к маркерам клеточной поверхности, которые известны в данной области техники. Уровень фосфорилирования киназных субстратов, таких как Akt и S6, далее измеряют, инкубируя фиксированные клетки с мечеными антителами, специфичными к фосфорилированным изоформам этих белков. Популяцию клеток затем анализируют с использованием проточной цитометрии.

Пример 33. Анализ образования колоний

Клетки костного мозга мыши, непосредственно перед этим трансформированные р190-содержащим ретровирусом BCR-Аbl (обозначаемые в данной заявке как р190-трансдуцированные клетки), высевают в присутствии различных комбинаций лекарственных средств примерно на 7 суток на метилцеллюлозные среды М3630 с рекомбинантным IL-7 человека примерно в 30% сыворотке и подсчитывают количество образовавшихся колоний путем визуального наблюдения в микроскоп.

Альтернативно, мононуклеарные клетки периферической крови человека получают от пациентов с положительной филадельфийской хромосомой (Рh+) и с отрицательной филадельфийской хромосомой (Ph-) по данным начального диагноза или с рецидивом заболевания. Живые клетки выделяют и обогащают по CD19+CD34+В-клеткам-предшественникам. После нахождения в течение ночи в жидкой культуре клетки высевают на среду methocult GF+ Н4435 (Stem Cell Technologies), дополненную цитокинами (IL-3, IL-6, IL-7, G-CSF (гранулоцитарный колониестимулирующий фактор), GM-CSF (гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор), CF, лигандом для FIt3 и эритропоэтином) и известными химиотерапевтическими агентами в различных концентрациях в комбинации с любыми соединениями из настоящего описания. Колонии подсчитывают через 12-14 суток, используя микроскоп. Это способ может быть применен для тестирования доказательств кумулятивной или синергической активности.

Пример 34. Влияние киназных ингибиторов на лейкозные клетки in vivo

Самок мышей-реципиентов облучают летальной дозой, используя источник γ-излучения, двумя отдельными дозами с интервалом примерно 4 ч, приблизительно по 5 Гр каждая. Примерно через 1 ч после второй дозы облучения мышам вводят в/в (внутривенной) инъекцией примерно 1×106 лейкозных клеток (например, Ph+ клеток человека или мыши или р190-трансдуцированных клеток костного мозга). Эти клетки вводят вместе с противолучевой дозой, равной примерно 5×106 нормальных клеток костного мозга от мышей-доноров в возрасте 3-5 недель. Реципиентам дают антибиотики в воде и проводят ежесуточный мониторинг. Мышей, заболевших примерно через 14 суток, подвергают эвтаназии и извлекают лимфоидные органы для анализа. Лечение киназными ингибиторами начинают примерно через 10 суток после введения лейкозных клеток и продолжают ежесуточно до тех пор, пока мыши не заболеют, или максимально приблизительно до 35 суток после введения трансплантата. Ингибиторы дают с применением перорального лаважа.

Клетки периферической крови собирают приблизительно на 10-е сутки (до лечения) и после эвтаназии (после лечения), приводят в контакт с мечеными антителами против hCD4 (CD4 человека) и подсчитывают с использованием проточной цитометрии. Это способ может быть использован для демонстрации того, что благодаря синергическому эффекту одного или более соединений, изложенных в данной заявке, в комбинации с известными химиотерапевтическими агентами значительно уменьшается количество лейкозных клеток крови по сравнению с лечением только лишь известными химиотерапевтическими агентами (например, Гливеком) в условиях тестирования.

Пример 35. Лечение мышей, являющихся моделями заболевания волчанкой

У мышей, у которых отсутствует ингибирующий рецептор FcγRIIb, препятствующий РI3К-опосредованной передаче сигнала в В-клетках, с высокой вероятностью развивается волчанка. FcγRIIb-нокаутированные мыши (R2KO, Jackson Labs) считаются подходящей моделью такого заболевания у человека, поскольку некоторые пациенты с диагнозом волчанки демонстрируют пониженную экспрессию или функцию FcγRIIb (S.Bolland and J.V.Ravtech, 2000. Immunity 12: 277-285).

У R2KO-мышей развивается волчаночноподобное заболевание с антинуклеарными антителами, гломерулонефритом и протеинурией в возрасте примерно 4-6 месяцев. Для этих экспериментов в качестве эталонного соединения используют аналог рапамицина RAD001 (поставляемый LC Laboratories) и его вводят перорально. Показано, что это соединение облегчает симптомы волчанки в модели B6.Sle1z.Sle3z (Т. Wu et al. J. Clin. Invest. 117: 2186-2196).

Мышей, являющихся моделями заболевания волчанкой, таких как R2KO, BXSB или MLR/Ipr, в возрасте примерно 2 месяцев подвергают лечению в течение примерно двух месяцев. Мышам дают дозы: растворителя, RAD001 (примерно 10 мг/кг) или изложенных в данной заявке соединений (от приблизительно 1 мг/кг до примерно 500 мг/кг). На протяжении приблизительно всего периода тестирования отбирают образцы крови и мочи и анализируют на антинуклеарные антитела (в разведениях в сыворотке) или концентрацию белка (в моче). Сыворотку также тестируют на антитела против ssDNA (одноцепочечная ДНК) и против dsDNA (двухцепочечная ДНК) посредством ELISA (иммуноферментный твердофазный анализ). Животных подвергают эвтаназии на 60-е сутки и извлекают ткани для определения веса селезенки и заболевания почек. Гломерулонефрит оценивают посредством окрашивания срезов почек с помощью Н&Е (гематоксилина и эозина). Других животных исследуют примерно через два месяца после прекращения лечения, используя те же самые конечные точки.

Эта модель, общепризнанная в данной области техники, может быть применена для демонстрации того, что ингибиторы киназ, изложенные в данной заявке, могут подавлять или задерживать начало развития симптомов волчанки у мышей, являющихся моделями заболевания волчанкой.

Пример 36. Анализ трансплантата костного мозга у мышей

Самок мышей-реципиентов облучают летальной дозой, используя источник γ-излучения. Примерно через 1 ч после дозы облучения мышам вводят примерно 1×106 лейкозных клеток с ранних пассажей р190-трансдуцированных культур (например, как описано в Cancer Genet. Cytogenet. 2005 Aug, 161(1): 51-6). Эти клетки вводят вместе с противолучевой дозой, равной примерно 5×106 нормальных клеток костного мозга от мышей-доноров в возрасте 3-5 недель. Реципиентам дают антибиотики в воде и проводят ежесуточный мониторинг. Мышей, заболевших примерно через 14 суток, подвергают эвтаназии и извлекают лимфоидные органы для проточной цитометрии и/или магнитного обогащения. Лечение начинают примерно на 10-е сутки и продолжают ежесуточно до тех пор, пока мыши не заболеют, или максимально приблизительно до 35 суток после введения трансплантата. Лекарственные средства вводят через желудочный зонд (п/о). В пробном эксперименте идентифицируют дозу химиотерапевтического средства, не являющуюся лечебной, но задерживающую начало развития лейкоза примерно на одну неделю или меньше; в качестве контролей используют обработку растворителем или обработку химиотерапевтическим агентом, для которого ранее в этой модели было показано, что он задерживает начало развития, но не излечивает лейкозогенез (например, иматиниб в дозе примерно 70 мг/кг два раза в сутки). На первом этапе используют р190-содержащие клетки, экспрессирующие eGFP (усиленный GFP), и посмертный анализ ограничивают подсчетом процентного содержания лейкозных клеток в костном мозге, селезенке и лимфатических узлах (LN) с использованием проточной цитометрии. На втором этапе используют р190-несущие клетки, экспрессирующие "не содержащую хвоста" форму CD4 человека, и посмертный анализ включает магнитную сортировку hCD4+ клеток из селезенки с последующим анализом иммуноблоттингом ключевых сигнальных конечных точек: pAkt-T308 и -S473; pS6 и р4ЕВР-1. В качестве контролей для детекции иммуноблоттингом сортированные клетки инкубируют перед лизисом в присутствии или в отсутствие киназных ингибиторов из настоящего описания. При желании используют метод "phosflow" для детекции pAkt-S473 и pS6-S235/236 в клетках hCD4-gated без предварительной сортировки. Такие исследования передачи сигнала особенно полезны, если, например, у получающих лекарственную терапию мышей не развивается клинический лейкоз на момент времени 35 суток. Строят графики кривой выживаемости Каплана-Мейера и проводят статистический анализ способами, известными в данной области техники. Результаты по р190-содержащим клеткам анализируют по отдельности, а также кумулятивно.

Один раз в неделю у всех мышей отбирают образцы периферической крови (100-200 мкл), начиная с 10-х суток непосредственно перед началом лечения. Плазму крови используют для измерения концентраций лекарственных средств и клетки анализируют на маркеры лейкоза (eGFP или hCD4) и биомаркеры передачи сигнала, как изложено в данной заявке.

Этот общий анализ, известный в данной области техники, может быть использован для демонстрации того, что эффективные терапевтические дозы соединений, изложенных в данной заявке, могут быть использованы для ингибирования пролиферации лейкозных клеток.

Пример 37. Анализ независимой от Т-клеток активации В-клеток TNP-фиколлом (TNP-F)

Для тестирования влияния соединений по настоящему изобретению на супрессию независимой от Т-клеток продукции антител использовали анализ активации В-клеток TNP-фиколлом, как изложено в данной заявке. Соединения по настоящему изобретению растворяли в соответствующем растворителе (например, содержащем 5% 1-метил-2-пирролидинона, 85% полиэтиленгликоля 400, 10% Солутора (solutor)). Соединения вводили мышам в возрасте 4-10 недель перорально приблизительно за 1 ч до обработки TNP-фиколлом. Для изучения влияния данных соединений на активацию В-клеток одну партию мышей объединяли в группы согласно следующей таблице:

№ группы Кол-во мышей/ группа Соединение, вводимое для лечения Группа Инъекция антигена в 1-е сут Введение соединения, начиная с 1 сут по 7-е сут
TNP-F Способ (мг/кг) Способ Режим
1 4 Растворитель Только антиген 0
2 8 - Только антиген 0 2 раза в сутки в течение 7 суток
3 8 Соединение №7 Эталон 200 мкл (0,5 мг/мл) в/б 30 п/о
4 8 1
5 8 Соединение №53 Антиген + соедин. 3
6 8 10
7 8 30
8 8 60

Четырех животных в группе 1 и восемь животных в группах 2-7 подвергали эвтаназии в СO2 через 2 часа после последнего введения соединений на 7-е сутки. Производили незамедлительный забор крови посредством пункции сердца и кровь хранили при 37°С в течение 1 ч, чтобы она свернулась, после чего инкубировали в течение ночи при 4°С для сокращения тромба. На следующий день собирали сыворотку крови путем декантации и центрифугирования при 3000 об/мин в течение 10 мин. Собранную сыворотку затем замораживали при -80°С для дальнейшего анализа.

Образцы сыворотки анализировали посредством ELISA на предмет титров антител против TNP, как изложено в данной заявке. Лунки микротитрационного планшета Nunc Maxisorb покрывали раствором TNP-BSA в количестве 100 мкл/лунка в концентрации 10 мкг/мл в фосфатно-солевом буфере (PBS). Планшет Maxisorb инкубировали в течение 1,5 часа при комнатной температуре и раствор удаляли. В каждую лунку добавляли по 200 мкл/лунка блокирующего буфера (например, 1%-ного BSA в PBS) и инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре. Планшет промывали один раз по 200 мкл/лунка 0,05% Твин-20 в PBS (буфер для промывки). В каждую лунку первой колонки (1) микротитрационного планшета добавляли разведенную 1:2 сыворотку в блокирующем буфере от каждой мыши. Сыворотку в каждой лунке колонки 1 затем разбавляли в 3 раза в блокирующем буфере и добавляли в колонку 2. Сыворотку в каждой лунке колонки 2 разбавляли в 3 раза в блокирующем буфере и добавляли в колонку 3. Данную процедуру повторяли во всех двенадцати колонках микротитрационного планшета. Микротитрационный планшет инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре. Сыворотку удаляли из планшета и планшет трижды промывали буфером для промывки. В каждую лунку добавляли по 100 мкл/лунка конъюгированных с HRP (пероксидаза хрена) антител козы против IgG3 мыши, разбавленных 1:250 в блокирующем буфере, и инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре. Конъюгированные с HRP антитела против lgG3 мыши удаляли из микротитрационного планшета и планшет промывали шесть раз буфером для промывки. В каждую лунку добавляли субстрат для HRP (200 мкл раствора ABTS (2,2'-азино-бис-(3-зтилбензтиазолин-6-сульфоновая кислота)+30% Н2О2+10 мл цитратного буфера) по 100 мкл/лунка, инкубировали в течение 2-20 минут в темноте и количество анти-TNP IgG3 определяли спектрофотометрически на 405 нм. Аналогично, количество анти-TNP IgM и общее количество Аbl (антитела) против TNP определяли, используя конъюгированные с HRP антитела против IgM мыши и конъюгированные с HRP антитела против Ig мыши, соответственно.

Результаты, приведенные на Фиг.2, также показывают, что в условиях тестирования соединения №7 и №53 демонстрируют 3,4- и 6,5-кратное снижение, соответственно, уровней IgG3 у мышей по сравнению с растворителем в качестве контроля, при уровне доз 30 мг/кг. На Фиг.2 также показано, что в условиях тестирования соединение №53 демонстрирует 29,9-кратное снижение уровней IgG3 у мышей по сравнению с растворителем в качестве контроля, при уровне доз 60 мг/кг.

Пример 38. Анализ развивающегося индуцированного коллагеном II типа артрита у крыс

С целью изучения влияния соединений по настоящему изобретению на аутоиммунное заболевание артрит использовали модель развивающегося индуцированного коллагеном артрита. Самкам крыс Льюиса делали инъекции коллагена на 0-е сутки. Бычий коллаген II типа готовили в виде раствора в концентрации 4 мг/мл в 0,01 н. уксусной кислоте. Равные объемы раствора коллагена и неполного адъюванта Фрейда эмульгировали, перемешивая вручную до тех пор, пока капелька эмульгируемого вещества не начинала сохранять свою форму в воде. Каждому грызуну посредством подкожной инъекции вводили по 300 мкл смеси, в каждый момент введения инъекции распределяя ее по трем участкам на спине.

Пероральное введение соединений начинали на 0-е сутки и продолжали по 16-е сутки включительно, вводя растворитель (5% NMP, 85% ПЭГ 400, 10% Солутол) или соединения по настоящему изобретению в растворителе или контроль (например, метотрексат) с 12-часовыми интервалами один раз в сутки. Крыс взвешивали на 0, 3, 6, 9-17-е сутки и измерения голеностопных суставов с помощью штангенциркуля проводили на 9-17-е сутки. Проводили окончательное измерение массы тела и далее животных подвергали эвтаназии на 17-е сутки. После эвтаназии отбирали кровь и отделяли задние лапы и коленные суставы. Далее кровь обрабатывали для фармакокинетических экспериментов, а также ELISA-анализа на антитела против коллагена II типа. Задние лапы взвешивали и затем вместе с коленными суставами хранили в 10%-ном формалине. Лапы и коленные суставы далее обрабатывали для проведения микроскопии. Также взвешивали печень, селезенку и вилочковую железу. Седалищные нервы готовили для гистопатологического исследования.

Коленный и голеностопный суставы фиксировали в течение 1-2 суток и декальцифицировали в течение 4-5 суток. Голеностопные суставы разрезали на две равные части в продольном направлении, коленные суставы разрезали на две равные части вдоль фронтальной плоскости. Затем суставы обрабатывали, закрепляли, делали срезы и окрашивали толуидиновым синим. Оценку суставов проводили в соответствии с приведенными далее критериями.

Воспаление коленного и голеностопного суставов

0 - в норме.

1 - минимальная инфильтрация воспалительных клеток в синовиальную/околосуставную ткань.

2 - легкая инфильтрация.

3 - умеренная инфильтрация с умеренным отеком.

4 - заметная инфильтрация с заметным отеком.

5 - сильная инфильтрация с сильным отеком.

Паннус голеностопного сустава

0 - в норме.

1 - минимальная инфильтрация паннуса в хрящ и подхрящевую кость.

2 - легкая инфильтрация (менее 1/4 большой берцовой кости или предплюсны в краевых зонах).

3 - умеренная инфильтрация (1/4-1/3 большой берцовой кости или мелкие кости предплюсны в краевых зонах).

4 - заметная инфильтрация (1/2-3/4 большой берцовой кости или предплюсны в краевых зонах).

5 - сильная инфильтрация (более 3/4 большой берцовой кости или предплюсны в краевых зонах, сильное нарушение общей структуры).

Паннус коленного сустава

0 - в норме.

1 - минимальная инфильтрация паннуса в хрящ и подхрящевую кость.

2 - легкая инфильтрация (распространяется вплоть до 1/4 поверхности или подхрящевой области большой берцовой кости или бедренной кости).

3 - умеренная инфильтрация (распространяется в диапазоне от более 1/4, но менее 1/2 поверхности или подхрящевой области большой берцовой кости или бедренной кости).

4 - заметная инфильтрация (распространяется в диапазоне от 1/2 до 3/4 поверхности большой берцовой кости или бедренной кости).

5 - сильная инфильтрация (охватывает более 3/4 поверхности).

Поражение хряща (голеностопный сустав, с акцентом на мелких

костях предплюсны)

0 - в норме.

1 - минимальное - ослабление окраски толуидиновым синим от минимальной до легкой степени без какого-либо видимого уменьшения количества хондроцитов или разрушения коллагена.

2 - легкое - легкая степень ослабления окраски толуидиновым синим с легким (поверхностным), очагового характера, уменьшением количества хондроцитов и/или разрушением коллагена.

3 - умеренное - умеренная степень ослабления окраски толуидиновым синим с умеренным (на толщину до середины зоны), многоочагового характера, уменьшением количества хондроцитов и/или разрушением коллагена, с поражением мелких костей предплюсны на 1/2-3/4 глубины.

4 - заметное - заметное ослабление окраски толуидиновым синим с заметным (на толщину до глубокой зоны), многоочагового характера, уменьшением количества хондроцитов и/или разрушением коллагена, с утратой хряща по всей толщине на 1 или более мелких костях предплюсны.

5 - тяжелое - значительное диффузное ослабление окраски толуидиновым синим со значительным (на толщину до демаркационной линии), многоочагового характера, уменьшением количества хондроцитов и/или разрушением коллагена.

Поражение хряща (коленный сустав, с акцентом на мыщелках бедренной кости).

0 - в норме.

1 - минимальное - ослабление окраски толуидиновым синим от минимальной до легкой степени без какого-либо видимого уменьшения количества хондроцитов или разрушения коллагена.

2 - легкое - легкая степень ослабления окраски толуидиновым синим с легким (поверхностным), очагового характера, уменьшением количества хондроцитов и/или разрушением коллагена.

3 - умеренное - умеренная степень ослабления окраски толуидиновым синим с умеренным (на толщину до середины зоны), от многоочагового до диффузного характера, уменьшением количества хондроцитов и/или разрушением коллагена.

4 - заметное - заметное ослабление окраски толуидиновым синим с заметным (на толщину до глубокой зоны), от многоочагового до диффузного характера, уменьшением количества хондроцитов и/или разрушением коллагена на поверхности одной бедренной кости с полной утратой или утратой, близкой к полной.

5 - тяжелое - значительное диффузное ослабление окраски толуидиновым синим со значительным (на толщину до демаркационной линии), многоочагового характера, уменьшением количества хондроцитов и/или разрушением коллагена на обеих бедренных костях и/или больших берцовых костях.

Резорбция кости (голеностопный сустав)

0 - в норме.

1 - минимальная - небольшие области резорбции, с трудом различимые при низком увеличении, редкие остеокласты.

2 - легкая - более многочисленные области резорбции, с трудом различимые при низком увеличении, остеокласты более многочисленны, менее 1/4 большой берцовой кости или костей предплюсны в краевых зонах подвергнуты резорбции.

3 - умеренная - явно заметная резорбция медуллярной трабекулярной или кортикальной кости без глубоких, на всю толщину, дефектов поверхностного слоя, утрата некоторых медуллярных трабекул, поражение различимо при низком увеличении, остеокласты более многочисленны, поражено от 1/4 до 1/3 большой берцовой кости или костей предплюсны в краевых зонах.

4 - заметная - глубокие, на всю толщину, дефекты кортикальной кости, часто с деформацией профиля остальной кортикальной поверхности, заметная утрата медуллярной части кости, многочисленные остеокласты, поражено 1/2-3/4 большой берцовой кости или костей предплюсны в краевых зонах.

5 - сильная - глубокие, на всю толщину, дефекты кортикальной кости, часто с деформацией профиля остальной кортикальной поверхности, заметная утрата медуллярной части кости, многочисленные остеокласты, поражено более 3/4 большой берцовой кости или костей предплюсны в краевых зонах, сильная деформация общей структуры.

Резорбция кости (коленный сустав)

0 - в норме.

1 - минимальная - небольшие области резорбции, с трудом различимые при низком увеличении, редкие остеокласты.

2 - легкая - более многочисленные области резорбции, некоторая утрата субхондральной кости, включая 1/4 поверхности большой берцовой кости или бедренной кости (медиальной или латеральной).

3 - умеренная - явно заметная резорбция подхрящевой кости, включая более 1/4, но менее 1/2 поверхности большой берцовой кости или бедренной кости (медиальной или латеральной).

4 - заметная - явно заметная резорбция подхрящевой кости, включая не менее 1/2, но менее 3/4 поверхности большой берцовой кости или бедренной кости (медиальной или латеральной).

5 - сильная - деформация всего сустава, обусловленная разрушением, вовлекающим более 3/4 поверхности большой берцовой кости или бедренной кости (медиальной или латеральной).

Статистический анализ массы тела/лапы, параметры AUC (площадь под кривой) для лап и гистопатологические параметры оценивали, используя t-тест Стьюдента или другие соответствующие критерии (дисперсионный анализ ANOVA с послеэкспериментальным тестом), с уровнем значимости, равным 5%. Процент ингибирования массы лапы и AUC рассчитывали, используя следующую формулу:

% ингибирования = (А-В/А)X100, где

А представляет собой среднее значение для контрольных объектов заболевания минус среднее значение для нормы;

В представляет собой среднее значение для получающих лечение объектов минус среднее значение для нормы.

Результаты, показанные на Фиг.3, демонстрируют влияние соединения №53 в дозах 10, 30 и 60 мг/кг с 12-часовыми интервалами в условиях тестирования на средний диаметр голеностопного сустава во времени в модели развивающегося индуцированного коллагеном II типа артрита у крыс. В сравнении с контролем в виде одного только растворителя или контролем в виде метотрексата, соединения по настоящему изобретению демонстрировали значительное уменьшение индуцированного артритом увеличения диаметра голеностопного сустава во времени.

Результаты, показанные на Фиг.4, демонстрируют влияние соединений №7 и №53 на гистопатологию голеностопного сустава в категориях: воспаление, паннус, повреждение хряща и резорбция кости, как описано ранее в условиях тестирования. Результаты указывают на значительное уменьшение в одной или более категориях под действием одного из соединений по настоящему изобретению (то есть соединения №53) в условиях тестирования. На Фиг.4 также показано, что в дозе 60 мг/кг в условиях тестирования имеется статистически значимое уменьшение во всех категориях гистопатологии голеностопного сустава, выявленное для одного из соединений по настоящему изобретению (то есть соединения №53). Это является подтверждением того, что одно или более соединений по настоящему изобретению могут быть полезны для лечения и ослабления симптомов заболевания артритом.

Результаты, показанные на Фиг.5, демонстрируют влияние соединений №7 и №53 в условиях тестирования на гистопатологию коленного сустава. Результаты демонстрируют дозозависимое уменьшение гистопатологии коленного сустава. Это является подтверждением того, что одно или более соединений по настоящему изобретению могут быть полезны для лечения и ослабления симптомов заболевания артритом.

Результаты, показанные на Фиг.6, демонстрируют влияние соединений №7 и №53 в условиях тестирования на уровни антител против коллагена II типа в сыворотке крови. Результаты также указывают на значительное снижение уровней антител против коллагена II типа в сыворотке крови при уровнях доз соединения №53, равных 10, 20 и 60 мг/кг, что является подтверждением того, что одно или более соединений по настоящему изобретению могут быть полезны не только для лечения и ослабления симптомов заболевания артритом, но также могут быть полезны для ингибирования самой аутоиммунной реакции.

Результаты, показанные на Фиг.7, демонстрируют влияние соединения №7 в дозах 10, 30 и 60 мг/кг с 12-часовыми интервалами в условиях тестирования на средний диаметр голеностопного сустава во времени. В сравнении с контролем в виде одного только растворителя или контролем в виде метотрексата, соединение в условиях тестирования демонстрировало значительное уменьшение индуцированного артритом увеличения диаметра голеностопного сустава во времени.

Пример 39. Анализ установленного индуцированного коллагеном II типа артрита у крыс

С целью изучения дозозависимой эффективности соединений по настоящему изобретению в ингибировании воспаления, разрушения хряща и резорбции кости с установленным на 7-е сутки индуцированным коллагеном II типа артритом у крыс соединения вводили перорально один или два раза в сутки в течение 6 суток.

Самок крыс Льюиса анестезировали и делали инъекции коллагена, приготовленные и вводимые, как описано ранее, на 0-е сутки. На 6-е сутки животных анестезировали и делали вторую инъекцию коллагена. Измерения с помощью штангенциркуля нормальных (до заболевания) правого и левого голеностопных суставов проводили на 9-е сутки. Обычно артрит появлялся на 10-11-е сутки, и крыс рандомизировали на группы, подвергаемые лечению. Рандомизацию проводили после того, как с очевидностью устанавливали опухание голеностопного сустава и имели хорошее доказательство наличия билатерального заболевания.

После отбора животных для участия в данном исследовании лечение инициировали, используя пероральный путь введения. Животные получали растворитель, контроль (энбрел) или дозы соединений два раза в сутки или один раз в сутки (2х/сут или 1х/сут, соответственно). Введение осуществляли на 1-6-е сутки, используя объем 2,5 мл/кг (2х/сут) или 5 мл/кг (1х/сут) для пероральных растворов. Крыс взвешивали на 1-7-е сутки после установления артрита и каждый день проводили измерения голеностопных суставов с помощью штангенциркуля. Конечные значения массы тела определяли на 7-е сутки и животных подвергали эвтаназии.

Результаты, показанные на Фиг.8, демонстрируют значительное уменьшение увеличения среднего диаметра голеностопного сустава во времени для соединения №53 при введении его один раз в сутки в условиях тестирования. Результаты, показанные на Фиг.9, также демонстрируют значительное уменьшение увеличения среднего диаметра голеностопного сустава во времени для соединения №53 при введении его два раза в сутки в условиях тестирования. Это является подтверждением того, что соединения по настоящему изобретению могут быть полезны для лечения аутоиммунных заболеваний, таких как артрит.

Пример 40. Анализ артрита, индуцированного адъювантом

Интратекальная катетеризация крыс

Анестезированным изофлураном крысам Льюиса (200-250 г) имплантировали интратекальный (и/т) катетер. После восстановительного периода в течение 6 сут для экспериментов использовали всех животных за исключением тех, которые демонстрировали аномалии чувствительности или двигательной активности, (менее 5% от общего количества). Для осуществления и/т введения через катетер вводили 10 мкл лекарственного средства или физиологического раствора, затем 10 мкл изотонического физиологического раствора.

Индуцированный адъювантом артрит и лекарственная терапия

Крыс Льюиса иммунизировали в основание хвоста, используя 0,1 мл полного адъюванта Фрейнда (CFA), на 0-е сутки через несколько суток после имплантации катетера (n равен 6/группа). Лекарственную терапию (например, одним или более чем одним соединением по настоящему изобретению или растворителем) обычно начинали на 8-е сутки и продолжали ежесуточно вплоть до 20-х суток. Клинические признаки артрита, как правило, появляются на 10-е сутки, и опухание лап определяли на каждые вторые сутки с использованием плетизмометрии водного смещения.

Результаты, приведенные на Фиг.10, посредством среднего изменения объема лапы для указанных схем введения показывают, что в условиях тестирования соединение №53 демонстрирует дозозависимое уменьшение увеличения среднего объема лапы по результатам измерений в этой модельной системе индуцированного адъювантом артрита. Эти результаты являются подтверждением того, что одно или более соединений по настоящему изобретению могут быть полезны для лечения одного или более заболеваний или состояний, изложенных в данной заявке.

Результаты, приведенные на Фиг.11, показывают, что соединение №53 не проявляет токсичности или другой побочной реакции в условиях тестирования, что оценено по отсутствию уменьшения массы.

Пример 41. Фармакокинетический анализ на грызунах

С целью изучения фармакокинетики соединений по настоящему изобретению из партии мышей в возрасте 4-10 недель составляют группы в соответствии со следующей таблицей:

№группы Количество мышей/ группа Соединение, вводимое для лечения Введение соединения, начиная с 1-х сут по 7-е сут
(мг/кг) Способ Режим
1 3 1 п/о 2 раза в сутки в течение 7 суток
2 3 3
3 3 10
4 3 30
5 3 60

Соединения по настоящему изобретению растворяют в соответствующем носителе (например, содержащем 5% 1-метил-2-пирролидинона, 85% полиэтиленгликоля 400, 10% Солутора (Solutor)) и вводят перорально с интервалами 12 часов один раз в сутки. Всех животных подвергают эвтаназии в СО2 через 2 часа после заключительного введения соединения. Осуществляют незамедлительный забор крови и хранят на льду для выделения плазмы. Плазму выделяют центрифугированием при 5000 об/мин в течение 10 минут. Собранную плазму замораживают для проведения фармакокинетического определения.

Ожидается, что результаты продемонстрируют фармакокинетические параметры, такие как параметры всасывания, распределения, метаболизма, экскреции и токсичности для соединений по настоящему изобретению.

Пример 42. Базотест(Ваsotest)-анализ (анализ с помощью теста активации базофилов аллергенами)

Basotest-анализ проводят, используя набор реагентов для Basotest от Orpegen Pharma. Цельную гепаринизированную кровь предварительно инкубируют с тестируемым соединением или растворителем при 37°С в течение 20 мин. Далее кровь инкубируют со стимулирующим буфером из набора для анализа (чтобы примировать клетки для получения ответа), затем с аллергеном (экстрактом пыли, содержащей пылевого клеща, или экстрактом растительного происхождения) в течение 20 мин. Процесс дегрануляции останавливают путем инкубации образцов крови на льду. После этого в клетки вводят метку, используя анти-IgE-PE (фикоэритрин), для детекции базофильных гранулоцитов, и анти-gp53-FITC для детекции gр53 (гликопротеина, экспрессируемого на активированных базофилах). После окрашивания эритроциты подвергают лизису путем добавления лизирующего раствора. Клетки промывают и анализируют с использованием проточной цитометрии. Соединения 7 и 53, в том случае, когда их тестируют в данном анализе, ингибируют индуцируемую аллергеном активацию базофильных гранулоцитов в диапазоне субмикромолярных концентраций.

Пример 43. Комбинированное применение ингибиторов PI3Kδ и агентов, которые ингибируют продукцию или активность IgE

Соединения по настоящему изобретению могут проявлять синергическую или аддитивную эффективность при введении в комбинации с агентами, которые ингибируют продукцию или активность IgE.

Агенты, которые ингибируют продукцию IgE, включают, например, один или более агентов из TEI-9874, 2-(4-(6-циклогексилокси-2-нафтилокси)-фенилацетамид)бензойной кислоты, рапамицина, аналогов рапамицина (то есть рапалогов), ингибиторов TORC1, ингибиторов TORC2 и любых других соединений, которые ингибируют mTORC1 и mTORC2. Агенты, которые ингибируют активность IgE, включают, например, антитела против IgE, такие как, например омализумаб и TNX-901.

Одно или более соединений, являющихся объектом изобретения, способных ингибировать PI3Kδ, эффективны в лечении аутоиммунных и воспалительных расстройств (AMD), например, ревматоидного артрита. Если какое-либо из соединений вызывает нежелательный уровень продукции IgE, его можно выбрать для введения в комбинации с агентом, который ингибирует продукцию IgE или активность IgE. Кроме того, введение ингибиторов PI3K5 или РI3Кб/у по настоящему изобретению в комбинации с ингибиторами mTOR также может приводить к синергизму посредством усиленного ингибирования PI3K-пути. Для установления влияния такого комбинированного лечения на AMD могут быть использованы различные модели in vivo и in vitro, включая, но не ограничиваясь этим, (а) анализ продукции антител В-клетками in vitro, (б) TNP-анализ in vivo и (в) модель индуцированного коллагеном артрита у грызунов.

(а) Анализ с использованием В-клеток

Мышей подвергают эвтаназии, селезенки извлекают и измельчают через нейлоновую сетку для получения суспензии отдельных клеток. Спленоциты промывают (после удаления эритроцитов посредством осмотического шока) и инкубируют с микрогранулами, конъюгированными с антителами против CD43 и против Мас-1 (Miltenyi Biotec). Связавшиеся с гранулами клетки отделяют от несвязавшихся клеток, используя магнитный сортер клеток. Ненужные клетки удерживаются в намагниченной колонке, а оставшиеся В-клетки собирают в проходящем потоке. Очищенные В-клетки стимулируют липополисахаридом или антителом против CD40 и интерлейкином 4. Стимулированные В-клетки обрабатывают только растворителем или растворителем вместе с PI3Kδ-ингибиторами по настоящему изобретению, такими как соединение 53, с ингибиторами mTOR, такими как рапамицин, рапалоги или ингибиторами mTORC1/C2, или без них. Ожидается, что на основании этих результатов будет продемонстрировано, что в присутствии только лишь ингибиторов mTOR (например, рапамицина) влияние на IgG- и IgE-ответ будет оказано в диапазоне от небольшого до по существу нулевого. Тем не менее, ожидается, что в присутствии ингибиторов PI3Kδ и mTOR В-клетки будут демонстрировать ослабленный IgG-ответ по сравнению с В-клетками, обработанными только растворителем, и ожидается, что В-клетки будут демонстрировать ослабленный IgE-ответ по сравнению с ответом от В-клеток, обработанных только ингибиторами PI3Kδ.

(б) TNP-анализ

Мышей иммунизировали TNP-фиколлом или TNP-KHL (гемоцианин моллюска фиссурелии) и обрабатывали: растворителем, ингибитором PI3K6, например, соединением 53 по настоящему изобретению, ингибитором mTOR, например, рапамицином, или ингибитором PI3Kδ в комбинации с ингибитором mTOR, таким как рапамицин. Содержание в сыворотке антиген-специфичного IgE измеряют посредством ELISA, используя планшеты, покрытые TNP-BSA, и изотип-специфичные меченые антитела. Ожидается, что мыши, обработанные только ингибитором mTOR, будут демонстрировать незначительное влияние или по существу никакого влияния на антиген-специфичный IgG3-ответ и никакого статистически значимого повышения IgE-ответа по сравнению с растворителем в качестве контроля. Также ожидается, что мыши, обработанные совместно ингибиторами PI3Kδ и ингибиторами mTOR, будут демонстрировать снижение антиген-специфичного IgG3-ответа по сравнению с мышами, обработанными только растворителем. Кроме того, мыши, обработанные как ингибиторами PI3Kδ, так и ингибиторами mTOR, будут демонстрировать повышение в IgE-ответе по сравнению с мышами, обработанными только ингибитором PI3Kδ.

(в) Модель индуцированного коллагеном артрита у крыс

Самок крыс Льюиса анестезируют и на 0-е сутки делают инъекции коллагена, которые готовят и вводят, как описано ранее. На 6-е сутки животных анестезируют и делают вторую инъекцию коллагена. Измерения с помощью штангенциркуля нормальных (до заболевания) правого и левого голеностопных суставов проводят на 9-е сутки. Обычно артрит появляется на 10-11-е сутки и крыс рандомизируют на группы, подвергаемые лечению. Рандомизацию проводят после того, как с очевидностью устанавливают опухание голеностопного сустава и имеется хорошее доказательство наличия билатерального заболевания.

После отбора животных для участия в данном исследовании начинают лечение. Животные получают растворитель, ингибитор PI3Kδ или ингибитор PI3Kδ в комбинации с рапамицином. Введение осуществляют на 1-6-е сутки. Крыс взвешивают на 1-7-е сутки после установления артрита и каждый день проводят измерения голеностопных суставов с помощью штангенциркуля. Конечные значения массы тела определяют на 7-е сутки и животных подвергают эвтаназии.

Ожидается, что комбинированное лечение с использованием ингибитора PI3Kδ и рапамицина будет обеспечивать большую эффективность, чем лечение только ингибитором PI3Kδ.

Несмотря на то, что в данной заявке показаны и изложены предпочтительные воплощения настоящего изобретения, специалистам в данной области техники будет очевидно, что такие воплощения приведены только в качестве примера. У специалистов в данной области техники сразу же появятся идеи многочисленных вариаций, изменений и замещений без отклонения от изобретения. Следует понимать, что при практическом применении изобретения могут быть использованы различные альтернативы воплощениям изобретения, изложенным в данной заявке. Подразумевается, что прилагаемая формула определяет объем изобретения и что тем самым охватываются способы и структуры, попадающие в пределы объема этой формулы, и их эквиваленты.

1. Соединение формулы I:

или его фармацевтически приемлемая соль, где
В представляет собой группировку формулы II:

где Wc представляет собой 6-10-членный арил; и
q равен целому числу 0, 1, 2, 3 или 4;
X отсутствует или представляет собой -(CH(R9))z-, и z равен целому числу 1;
Y представляет собой -N(R9)-;
Wd представляет собой
R1 представляет собой C1-6алкил или галогено;
R2 представляет собой C1-6алкил или галогено;
R3 представляет собой водород или С1-6алкил; и
в каждом случае R9 независимо представляет собой водород или С1-6алкил.

2. Соединение по п.1, где q равен 0.

3. Соединение по п.2, где R1 представляет собой галогено.

4. Соединение по п.2, где R1 представляет собой C1-6алкил.

5. Соединение по п.4, где R1 представляет собой метил.

6. Соединение по п.1, где R3 представляет собой C1-6алкил.

7. Соединение по п.6, где R3 представляет собой метил.

8. Соединение по п.1, где R9 представляет собой водород.

9. Соединение по п.1, где R9 представляет собой метил.

10. Соединение по п.1, где R9 представляет собой этил.

11. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение представляет собой

12. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3-киназы), содержащая фармацевтически приемлемый эксципиент и терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-11.

13. Композиция по п.12, находящаяся в жидкой, твердой, полутвердой форме, форме геля или аэрозольной форме.

14. Способ ингибирования PI3-киназы у субъекта, включающий введение этому субъекту эффективного количества соединения по любому из пп.1-11.

15. Способ по п.14, где субъект страдает от заболевания, представляющего собой рак, костное расстройство, воспалительное заболевание, иммунное заболевание, заболевание нервной системы, метаболическое заболевание, респираторное заболевание, тромбоз или сердечно-сосудистое заболевание.

16. Способ по п.15, где субъект страдает от рака.

17. Способ по п.16, где рак представляет собой рак молочной железы, рак яичника, рак матки, рак шейки матки, рак предстательной железы, рак поджелудочной железы, рак мочевого пузыря, рак кости, рак легкого, рак кожи, глазную ретинобластому, первичный рак печени, рак почки, рак щитовидной железы, рак, индуцируемый вирусами, рак центральной нервной системы, рак периферической нервной системы, рак полости рта и ротоглотки, рак желудка, рак яичка, рак вилочковой железы, рак прямой кишки или рак толстой кишки.

18. Способ по п.17, где рак легкого представляет собой немелкоклеточный рак легкого (NSCLC) или мелкоклеточный рак легкого.

19. Способ по п.16, где рак представляет собой лимфому или лейкоз.

20. Способ по п.19, где лимфома представляет собой диффузную В-крупноклеточную лимфому, В-клеточную иммунобластную лимфому и мелкоклеточную лимфому из нерасщепленных клеток.

21. Способ по п.19, где лейкоз представляет собой острый миелоидный лейкоз (AML), острый лимфоцитарный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), хронический миелоидный лейкоз, волосатоклеточный лейкоз, миелодисплазию, миелопролиферативное расстройство, мастоцитоз, множественную миелому (ММ) и миелодиспластический синдром (MDS).

22. Способ по п.16, где рак представляет собой кожную или внутриглазную меланому (меланому глаза), саркому Капоши, Т-клеточный лейкоз взрослых или Т-клеточную лимфому взрослых.

23. Способ по п.14, где в комбинации с лекарственным средством вводят второй терапевтический агент.

24. Способ по п.23, где второй агент представляет собой агент, который ингибирует продукцию IgE.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к соединению формулы (I) или к его фармацевтически приемлемой соли, где А означает -CHR7-, где R7 означает водород, C1-6 алкил, необязательно замещенный заместителем, выбранным из -ОН, -OR8, где R8 означает C1-6 алкил, -NH2, -COOH и -CONH2, C6 арил-C1 алкил, необязательно замещенный 1-3 заместителями, выбранными из -ОН, -ОР(=O)(ОН)2, -ОР(=O)(ONa)2 и C1-6 алкила, 5-9-членный гетероарил-C1 алкил, C6 циклоалкил-C1 алкил, С6 арил или C6 циклоалкил; G означает -NR6- или -О-, где R6 независимо выбирают из C1-6 алкила и С2-6 алкенила; R1 означает -Ra-R10; где Ra означает C1-6 алкилен и R10 означает нафтил или 9-10-членный бициклический конденсированный гетероарил, необязательно замещенный заместителем, выбранным из -NH2 и галогена; R2 означает -W21-W22-Rb-R20, где W21 означает -(СО)-; W22 означает -О- или -NH-; Rb означает связь или C1-6 алкилен, необязательно замещенный C1-6 алкилом; и R20 означает C1-6 алкил, С6-10 арил, необязательно замещенный галогеном, 5-6-членный гетероарил или C6 циклоалкил; и R3 означает C1-6 алкил; где "гетероарил" означает моноциклический или бициклический ароматический радикал, где 1-3 атома кольца являются гетероатомами, выбранными из азота, кислорода и серы, а оставшиеся атомы кольца являются атомами углерода; и "бициклический конденсированный" означает кольцо, которое связано с другим кольцом с образованием бициклической структуры, когда атомы, общие для обоих колец, непосредственно связаны друг с другом.

Описываются новые алкилциклогексилэфиры 5,6-дигидро-4Н-2,3,5,10b-тетрааза-бензо[е]азуленовых производных формулы I R1 - C1-8-алкил, возможно замещенный галогено, гидрокси или С1-12-алкокси, CF3, С3-7-циклоалкил, 4-6-членный гетероциклоалкил, содержащий один O; R2 - Н, С1-8-алкил, возможно замещенный OH, -(CH2)q-Ra, где Ra - 6-членный гетероарил, содержащий один N, -С(O)-С1-8-алкил, где алкил возможно замещен OH, -С(O)(СН2)qOC(O)-С1-8-алкил, -C(O)O-С1-8-алкил, -S(O)2-С1-8-алкил или -S(O)2NRiRii, где Ri и Rii одинаковы и означают С1-8-алкил, q=1; R3 - Cl или F, и фармацевтическая композиция, их содержащая.

Изобретение относится к способу получения [1S-[1α,2α,3β(1S*,2R*),5β]]-3-[7-[2-(3,4-дифторфенил)-циклопропиламино]-5-(пропилтио)-3Н-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил]-5-(2-гидроксиэтокси)-циклопентан-1,2-диола формулы (I) Технический результат - повышение выхода соединения формулы (I) и его высокое качество в отсутствие перекристаллизации.

Изобретение относится к соединению формулы (I): где R1 представляет собой NR7C(O)R8 или NR9R10; R2 представляет собой водород; R3 представляет собой галоген; R4 представляет собой водород, галоген, циано, гидрокси, С1-4алкил, C1-4алкокси, CF3, OCF3, С1-4алкилтио, S(O)(С1-4алкил), S(O)2(С1-4алкил), СО2Н или CO2(С1-4алкил); R5 представляет собой C1-6алкил (замещенный NR11R12 или гетероциклилом, который представляет собой неароматическое 5-7-членное кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, независимо выбранные из группы, содержащей азот, кислород или серу); R6 представляет собой водород, галоген, гидрокси, С1-4алкокси, CO2H или C1-6алкил (возможно замещенный группой NR15R16, морфолинилом или тиоморфолинилом); R7 представляет собой водород; R8 представляет собой С3-6циклоалкил (возможно замещенный группой NR24R25), фенил или гетероарил, который представляет собой ароматическое 5- или 6-членное кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, содержащей азот, кислород и серу, и которое возможно конденсировано с одним 6-членным ароматическим или неароматическим карбоциклическим кольцом или с одним 6-членным ароматическим гетероциклическим кольцом, где указанное 6-членное ароматическое гетероциклическое кольцо содержит от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, содержащей азот, кислород и серу; R9 представляет собой водород или C1-6алкил (возможно замещенный пиразолилом); R10 представляет собой C1-6алкил (возможно замещенный группой фенил или гетероарил, который представляет собой ароматическое 5- или 6-членное кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, независимо выбранные из группы, содержащей азот, кислород или серу, и которое возможно конденсировано с одним 6-членным гетероциклическим кольцом, где указанное 6-членное ароматическое гетероциклическое кольцо содержит 1 или 2 гетероатома, независимо выбранные из группы, содержащей азот, кислород или серу; где вышеуказанные фенильные и гетероарильные группировки в R8, R9 и R10 независимо возможно замещены группой: галоген, гидрокси, C(O)R42, C1-6алкил, C1-6гидроксиалкил, C1-6галогеноалкил, С1-6алкокси(С1-6)алкил или С3-10циклоалкил; если не указано иное, то гетероциклил возможно замещен группой C1-6алкил, (С1-6алкил)ОН, (С1-6алкил)С(O)NR51R52 или пирролидинилом; R42 представляет собой C1-6алкил; R12, R15 и R25 независимо представляют собой C1-6алкил (возможно замещенный группой гидрокси или NR55R56); R11, R16, R24, R51, R52, R55 и R56 независимо представляют собой водород или C1-6алкил; или к его фармацевтически приемлемым солям.

Описываются новые арилциклогексилэфиры 5,6-дигидро-4H-2,3,5,10b-тетрааза-бензо[e]азуленовых производных Формулы I где R - фенил, возможно замещенный циано, C1-7-алкилом, галогено-C1-7-алкилом, C1-7-алкокси или галогено; нафтил, пиразинил или пиридазинил; пиридинил, возможно замещенный галогено или C1-7-алкилом, пиримидинил, возможно замещенный C1-7-алкилом, R2 - H, C1-8-алкил, возможно замещенный OH или галогено, -(CH2)q-Ra, где Ra - 6-членный гетероарил, содержащий один N в качестве гетероатома, -C(O)-C1-8-алкил, -C(O)(CH2)qNRiRii, -C(O)O-C1-8-алкил, -S(O)2-C1-8-алкил, -S(O)2NRiRii, где Ri и Rii одинаковы и означают C1-8-алкил; q=1, R3 представляет собой Cl или F, их фармацевтически приемлемые соли и фармацевтическая композиция, их содержащая.

Изобретение относится к новым соединениям, обладающим свойствами ингибитора репликации вируса HCV. В формуле I: A1 представляет собой С6арил, замещенный -X1-R7; X1 является -S-; R7 является С6арилом, необязательно замещенным одним RA; Z1 является -N(Rb)-; каждый из W1 и W2 является N; R1 является водородом; R3 и R4 вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют 6-членное гетероциклическое кольцо, содержащее в качестве гетероатома N, где 6-членное гетероциклическое кольцо, необязательно замещенное одним RA; A2 представляет собой С6арил или 5-членный гетероциклил, содержащий в качестве гетероатома N; R2 представляет собой -N(RB)C(O)C(R5R6)N(R8)-T-RD, , или -LK-B; R6 и R8 совместно с атомами, к которым они присоединены, образуют 5-членное гетероциклическое кольцо; значения радикалов RA, R5, Т, RC, RD, RD' и RD", LK, В приведены в формуле изобретения.

Настоящее изобретение относится к новым производным хиназолина формулы , где каждый из R1, R2 и R5, независимо, представляет собой Н; один из R3 и R4 представляет собой где n - 1 или 2; каждый Ra представляет собой Н, С1-10алкил, необязательно замещенный заместителем, выбранным из группы, включающей С1-10алкокси, С1-10алкансульфонил, карбоксигруппу, 5-6-членный моноциклический гетероциклоалкил, имеющий один или несколько гетероатомов, выбранных из О и N, где атом N может быть замещен C1-10алкилом, фенил, необязательно замещенный галогеном, 5-6-членный моноциклический гетероарил, имеющий один или несколько гетероатомов, выбранных из N и S, 7-членный бициклический гетероциклоалкил, имеющий 2 атома N; С2-10алкенил; С2-10алкинил; циклоалкил, представляющий собой насыщенную циклическую группу, содержащую 3-6 атомов углерода; каждый из Rb и Rc, независимо, представляет собой Н или С1-10алкил, необязательно замещенный С1-10алкокси, или Rb и Rc, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют бициклическое кольцо следующей формулы: где каждый из m1, m2, m3 и m4 - 0, 1 или 2; А - СН; В - NR, где R - Н или С1-10алкил; и каждый из Ri, Rii, Riii, Riv, Rv, Rvi, Rvii и Rviii - Н; или 6-7-членный моноциклический гетероциклоалкил, содержащий 1-2 атома N, необязательно замещенный заместителем, выбранным из группы, включающей гидрокси, С1-10алкил, необяз