Аналитическая ванна для проведения мультиплексного дот-иммуноанализа



Аналитическая ванна для проведения мультиплексного дот-иммуноанализа
Аналитическая ванна для проведения мультиплексного дот-иммуноанализа
Аналитическая ванна для проведения мультиплексного дот-иммуноанализа
Аналитическая ванна для проведения мультиплексного дот-иммуноанализа

 


Владельцы патента RU 2517035:

Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор"" (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор") (RU)
Закрытое акционерное общество "ИмДи" (ЗАО "ИмДи") (RU)

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для иммунохимического анализа. Аналитическая ванна для проведения мультиплексного дот-иммуноанализа представляет собой монолитный блок, выполненный из химически инертного термопластичного материала, с набором реакционных ячеек для рабочих и отмывочных растворов и термически герметизированных фольгой, имеющей слой полимерного термопластичного материала. Ячейки ванны выполнены в поперечном сечении в виде вытянутого ассиметричного шестиугольника с острыми противоположно расположенными углами, предназначенными в качестве направляющих при введении в ячейки ванны пластин иммуночипа для предотвращения их контакта с внутренней поверхностью ванны. По верхнему краю ванны выполнен выпуклый сварочный профиль в виде клиновидных в сечении буртиков, окантовывающих каждую ячейку. Изобретение обеспечивает повышение качества проведения иммунохимических реакций в ванне за счет исключения прилипания иммуночипов к внутренней поверхности стенок ячеек. 1 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 1 пр.

 

Изобретение относится к аналитическим ваннам для проведения иммунохимического анализа в наборах для дот-иммуноанализа, в частности наборах для мультиплексного (многопрофильного) выявления в препаратах крови антител к определенному спектру возбудителей инфекционных заболеваний и может быть использовано в медицине, биотехнологии и вирусологии.

Многопрофильное выявление антител проводится с использованием белковых матриц (иммуночипов), представляющих собой плотную плоскую подложку с дискретно нанесенными на нее антигенами возбудителей инфекционных заболеваний. В процессе анализа белковая матрица последовательно инкубируется в ряде рабочих и отмывочных растворов. Таким образом, для выполнения каждого теста необходим набор реакционных сосудов, количество которых определяется числом этапов процедуры анализа (не менее 6 этапов). В качестве реакционных сосудов могут использоваться пробирки или флаконы, однако при таком подходе растворы используются нерационально, а набор для анализа получается громоздким. Для анализа наиболее целесообразно использовать ванночку, разбитую на необходимое количество изолированных ячеек и заполненную готовыми растворами. В таком случае дот-анализ заключается в последовательном переносе (с заданными временными интервалами) иммуночипа по ряду ячеек. Ячейки и иммуночипы могут быть скомпонованы в блоки с взаимно сопоставимыми размерами для проведения нескольких тестов.

Наиболее близким аналогом (прототипом) предлагаемой заявки на полезную модель является проявочная ванна из наборов серии «Immunocomb» франко-израильской фирмы «Orgenics», описанная в докладе «Простые бесприборные тест-системы для подтверждения наличия антител к вирусу иммунодефицита человека 1 и 2 типа», авторы: Дробченко Н.Е.; Марголин О.; Ривец Б. ЗАО «Биоград», Санкт-Петербург, Россия; Орженикс Лтд., Явне, Израиль; Орженикс С.А., Курбевуа, Франция. Доклад сделан на Дальневосточном окружном совещании «Профилактика ВИЧ-инфекции, вирусных гепатитов В и С, выявление и лечение больных СПИД» 10-15 августа 2009 года в г. Якутск ( lectures/lecture/44). Ванна предназначена для проведения дот-иммуноанализа для выявления антител с использованием конъюгатов щелочной фосфатазы и представляет собой монолитный блок, выполненный из термопластичного синтетического материала, объединяющий 6 рядов ячеек для выполнения 12 анализов. Ванна с заполненными ячейками герметизирована фольгой.

Прототип имеет следующие недостатки:

1. Все ячейки имеют прямоугольное сечение, что не исключает прилипание иммуночипа к стенке ячейки. Такое прилипание может ограничивать контакт рабочей поверхности иммуночипа с рабочими растворами и замедлять или блокировать реакцию на этой поверхности, а также ухудшать качество отмывочных процедур, что негативно сказывается на проведении дальнейших операций и может приводить к образованию артефактов.

2. Все ячейки одинаковы по размерам и уровню заполнения реагентами, что нерационально в плане расходования наиболее дорогостоящих компонентов реакции, таких как конъюгат и проявляющий раствор (субстрат). При выполнении анализа такие компоненты требуются в объемах в несколько раз меньших, чем отмывочные растворы.

3. Верхний край ванны выполнен плоскими, что при термической запайке ячеек фольгой может приводить к деформации верхней части ячеек.

4. Число рядов ячеек недостаточно для выполнения анализов с большим числом стадий, например, тестов для выявления антигенов или тестов с использованием коллоидного золота.

Техническим результатом настоящего изобретения является повышение качества проведения иммунохимических реакций в ванне за счет исключения прилипания иммуночипов к внутренней поверхности стенок ячеек и повышение долговечности ванны за счет исключения возможности деформации ячеек ванны в процессе их термической запайки фольгой. Дополнительным техническим результатом является снижение расхода наиболее дорогостоящих реагентов за счет выполнения рядов ячеек ванны разными по объему и размерам

Указанный технический результат достигается тем, что в аналитической ванне для проведения мультиплексного дот-иммуноанализа, представляющая собой монолитный блок, выполненный из химически инертного термопластичного материала, с набором реакционных ячеек для реакционных и отмывочных растворов и термически герметизированных фольгой со слоем полимерного теормопластичного материала согласно изобретения:

- ячейки ванны выполнены в поперечном сечении в виде вытянутого ассиметричного шестиугольника с острыми противоположно расположенными углами, предназначенными в качестве направляющих при введении в ячейки ванны пластин иммуночипа для предотвращения контакта их поверхностей (при этом пластины иммуночипа в ячейках ориентированы рабочей поверхностью в сторону большего объема ячеек для лучшего взаимодействия с большим нормированным количеством рабочего раствора);

- по верхнему краю ванны выполнен выпуклый сварочный профиль в виде клиновидных в сечении буртиков, окантовывающих каждую ячейку, который повышает надежность герметизации ячеек ванны и препятствует их деформации при термической запайке.

- ячейки для рабочих растворов реакции выполнены с меньшей площадью сечения, чем для отмывочных растворов, что способствует рациональному использованию рабочих растворов и снижает стоимость тест-системы.

Кроме того, количество рядов ячеек увеличено до 11, что позволяет реализовывать различные схемы анализа, в том числе по выявлению антигенов и тестов с использованием многостадийных вариантов усиления оптического сигнала.

Описание графических материалов. На фиг.1 приведена схема аналитической ванны для выполнения пяти мультиплексных дот-иммуноанализов с использованием конъюгатов на основе коллоидного золота, с усилением сигнала физическим проявлением и стабилизацией окраски щелочным раствором тиомочевины. На фиг.2 - то же, разрез по А-А. На фиг.3 приведена схема нанесения антигенов и контролей на белковую матрицу, расположенную на пластине иммуночипа, а на фиг.4 представлены результаты дот-иммуноанализа пяти образцов препаратов крови.

Описание конструкции заявляемой аналитической ванны.

Аналитическая ванна изготавливается из инертного термопластичного синтетического материала, например из полипропилена, литьем под давлением в пресс-форме определенной конфигурации (фиг.1). Ванна может быть изготовлена в виде монолитного блока 1, в котором имеется определенное число модулей 2, например 5 модулей, как изображено на фиг.1, каждый из которых рассчитан на выполнение одного анализа. Каждый модуль 2 имеет несколько (по числу операций анализа) малых ячеек 3 и больших ячеек 4 для размещения в них пластин 5 иммуночипа. Каждая ячейка 3 и 4 по верхнему краю имеет буртики 6 (сварочный контур) треугольного сечения, высотой 0,5 мм. В ванне однотипные (одного размера) ячейки 3 или 4 модулей 2 образуют ряды 7, каждый из которых заполнен определенным рабочим или отмывочным раствором. На фиг.1 приведено 11 рядов однотипных ячеек. Ячейки 3 для рабочих растворов реакции выполнены с меньшей площадью сечения, чем для отмывочных растворов, что способствует рациональному использованию рабочих растворов и снижает стоимость тест-системы. Заполненная растворами аналитическая ванна с помощью термопресса запаивается фольгой со слоем полипропилена. При этом температура и давление пресса подбираются таким образом, чтобы расплавлялись только слой полипропилена на фольге и клиновидные буртики 6 (сварочный контур), что устраняет деформацию ячеек 3 и 4 ванны. Готовая ванна маркируется с указанием наименования теста, а также обозначения буквами (А-Е) модулей и цифрами (1-11) рядов однотипных ячеек.

Описание процесса использования заявляемой аналитической ванны.

При выполнении анализа ячейки 3 и 4 вскрывают перфоратором, в первый ряд ячеек вносят исследуемые образцы сыворотки или цельной капиллярной крови и погружают в них пластины 5 иммуночипа. Острые противоположно расположенные углы ячеек 3 и 4 предназначены в качестве направляющих при введении в ячейки ванны пластин 5 иммуночипа для предотвращения контакта их поверхностей со стенками ячеек 3 и 4. При этом пластины 5 иммуночипа в ячейках 3 и 4 ориентированы рабочей поверхностью в сторону большего объема указанных ячеек для лучшего взаимодействия с большим нормированным количеством рабочего раствора. Затем пластины 5 иммуночипа вынимают и через определенные интервалы времени последовательно переносят по следующим рядам 7 ячеек 3 и 4, после выемки из последнего ряда визуально учитывают результат по наличию или отсутствию темных пятен в местах нанесения на пластины 5 иммуночипа иммунореагентов. Для одиночных анализов вскрывают и используют отдельные модули 2.

Пример 1. Использование аналитической ванны для выполнения анализа гуморальных антител с использованием конъюгата на основе коллоидного золота.

Ванну для анализа с применением конъюгатов коллоидного золота заполняют растворами:

- ряд 1 - раствор для разведения образцов - ТСБ-Т с 0,05% (в/о) казеина, рН 9,0;

- ряды 2, 3, 5, 6 - раствор для отмывок (ТСБ-Т) - 0,1 М Трис-HCl с 0,15 М NaCl и 0,1% твин-20, рН 7,2-7,4;

- ряд 4 - конъюгат антител против иммуноглобулинов человека или белка A Staphylococcus aureus с коллоидным золотом;

- ряды 7, 8, 9, 11 - дистиллированная вода (ряд 8 заполняется на ½ объема ячейки). При приготовлении проявителя за 3 мин до проявления в ячейки ряда 8 вносят по таблетке сухого компонента проявителя (лимонная кислота и метол в соотношении 5:2, соответственно), а непосредственно перед проявлением - ½ объема ячейки 0,4%-го водного раствора нитрата серебра.

- ряд 10 - стабилизатор оптического сигнала - 1% тиомочевины и 1% - гидроокиси натрия в дистиллированной воде.

Заполненные ванны герметизируют. При выполнении анализа герметизирующее покрытие вскрывают перфоратором. Анализ выполняют при комнатной температуре.

При выполнении анализа используют иммуночипы с нанесенными на пластины 5 антигенами вирусов кори, краснухи и паротита (фиг.3). Перечень и время выполнения отдельных операций при выполнении анализа препаратов крови приведены в таблице 1.

Таблица 1.
Перечень и время выполнения отдельных операций при выявлении специфических антител в препаратах крови
№ ячейки Операция Время, мин
1 Инкубация с образцом сыворотки крови в разведении 1:100 или капиллярной крови в разведении 1:50 20
2 Отмывка 1 2
3 Отмывка 2 2
4 Инкубация с рабочим разведением конъюгата 20
5 Отмывка 3 2
6 Отмывка 4 2
7 Отмывка 5 2
8 Проявление иммуночипов 7
9 Отмывка 6 1
10 Усиление и стабилизация оптического сигнала 1
11 Отмывка 7 1
Общее время анализа 60

После выемки из ячейки №11 (табл.1) иммуночипы подсушивают на воздухе и визуально учитывают результаты по наличию темных пятен в местах нанесения вирусных антигенов. Контролем работоспособности теста служит наличие темного пятна в зоне К+, оценку фоновых явлений проводят по зоне, свободной от антигенов (зона К-). Результаты анализа пяти образцов крови приведены на фиг.4.

Таким образом, из изложенного выше видно, что в заявляемом изобретении достигается следующий технический результат:

- повышается качество проведения иммунохимических реакций в ванне за счет исключения прилипания иммуночипов к внутренней поверхности стенок ячеек;

- увеличивается долговечность ванны за счет исключения возможности деформации ячеек ванны в процессе их термической запайки фольгой;.

- снижаются расходы наиболее дорогостоящих реагентов за счет выполнения рядов ячеек ванны разными по объему и размерам.

1. Аналитическая ванна для проведения мультиплексного дот-иммуноанализа, представляющая собой монолитный блок, выполненный из химически инертного термопластичного материала, с набором реакционных ячеек для рабочих и отмывочных растворов и термически герметизированных фольгой, имеющей слой полимерного теормопластичного материала, отличающаяся тем, что ячейки ванны выполнены в поперечном сечении в виде вытянутого ассиметричного шестиугольника с острыми противоположно расположенными углами, предназначенными в качестве направляющих при введении в ячейки ванны пластин иммуночипа для предотвращения их контакта с внутренней поверхностью ванны, а по верхнему краю ванны выполнен выпуклый сварочный профиль в виде клиновидных в сечении буртиков, окантовывающих каждую ячейку.

2. Аналитическая ванна по п.1, отличающаяся тем, что ячейки ванны для реакционных рабочих растворов выполнены с меньшей площадью сечения, чем для отмывочных растворов.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине и описывает способ оценки эффективности стимуляции антиоксидантной активности путем определения концентрации восстановленного глутатиона, при этом дополнительно в инкубационную среду добавляют 1,4-дитиоэритритол и аскорбиновую кислоту и при увеличении уровня восстановленного глутатиона с 0,75 нмоль/мг белка до 0,90 нмоль/мг белка и более стимуляцию антиоксидантной системы оценивают как эффективную, а при росте уровня восстановленного глутатиона с 0,75 нмоль/мг белка до 0,80 нмоль/мг белка и менее стимуляцию антиоксидантной активности оценивают как неэффективную.

Изобретение относится к области медицины и касается рекомбинантных химерных полипептидов, несущих эпитопы различных иммунодоминантных белков спирохет комплекса Borellia Burgdorferisensu lato, и способа серодиагностики иксодового клещевого боррелиоза.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использовано для оценки функционального состояния лимфоцитов человека. Для этого проводят оценку реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) при стимуляции их в течение 72 часов фитогемагглютинином (ФГА) иммуноцитохимическим методом в люминесцентном микроскопе в реакции непрямой иммунофлюоресценции.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования бронхолегочной дисплазии у недоношенных детей с экстремально низкой массой тела (ЭНМТ) при рождении.
Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для серологической оценки токсичности анатоксина Bordetella pertussis. Сущность способа заключается в том, что в лунки 96-луночных полистироловых планшетов с иммобилизированной гамма-глобулиновой фракцией кроличьих антисывороток к коклюшному токсину вносят исследуемые образцы полуфабриката бесклеточной коклюшной вакцины, прибавляют к ним пероксидазный конъюгат гамма-глобулиновой фракциии кроличьих антисывороток к коклюшному токсину, добавляют к ним субстратную смесь и регистрируют оптическую плотность смеси и на основе оптической плотности выявляют титр присоединившегося к иммуносорбенту коклюшного токсина.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использовано для количественного определения клеток-предшественников в кроветворной ткани.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической иммунологии, и может быть использовано для оценки напряженности адаптации у пациентов с ургентной хирургической патологией органов брюшной полости. Способ оценки напряженности адаптации у пациентов с ургентной хирургической патологией органов брюшной полости, характеризующийся тем, что определяют количество лейкоцитов; абсолютные количества CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD20+, CD25+, CD38+, CD95+ лимфоцитов; абсолютное количество CD16+ нейтрофилов; содержание иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM; количество фагоцитирующих нейтрофилов и циркулирующих иммунных комплексов в крови пациента; затем по формулам множественной регрессии рассчитывают значения пятнадцати главных компонент, определяющих показатели иммунного статуса; затем рассчитывают индивидуальный показатель напряженности адаптации - SГК как среднее квадратическое отклонение попарно между главными компонентами, составляющими между собой 105 пар, по формуле: S Г К = 1 105 ∑ i = 1, x = 1 15 ( Г К i − Г К х ) 2 где ГКi, ГКx - главные компоненты: ГК-1-ГК-15; и при значениях SГК<1,0 оценивают напряженность адаптации как критическую, приводящую к срыву механизмов адаптации.
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано врачами других специальностей. Сущность способа: у беременных по данным проведенного ультразвукового исследования выявляют наличие новообразований придатков, выявляют наличие синдрома задержки развития плода I и II степени (СЗРП).
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики нарушений микроциркуляции при остеоартрозе у женщин, работающих в условиях физического перенапряжения.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа количественного определения фиксированного вируса бешенства штамма «Москва 3253». Способ предусматривает обеззараживание и выделение РНК из вируссодержащего материала, постановку реакции обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентным учетом результатов в режиме «реального времени» с использованием специфичных праймеров RV5-5'-GTTGGGCACTGAAACTGCTA-3', RV6-5'-GAATCTCCGGGTTCAAGAGT-3' и зонда RV7-5'-ROX-AATCCTCCTTGAACTCCATGCGACAGA-BHQ2.

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской генетике, и может быть использовано для определения вероятности возникновения врожденных пороков развития плода у беременных женщин. Для этого проводят забор крови, определяют путем молекулярно-генетического анализа полиморфизм гена фермента детоксикации GSTT1 в лимфоцитарной ДНК. Затем выявляют путем иммуноферментного анализа антител класса А и G - IgA, IgG, специфичных к бензо[а]пирену Bp, эстрадиолу Es и прогестерону Pg в сыворотке крови, служащих показателями иммунной реакции организма на воздействие тератогенных факторов. При определении повышенных значений соотношений уровней антител IgA Bp/Es>2, IgA Bp/Pg>2, IgG Bp/Es>2, IgG Bp/Pg>3 у носителей генотипа GSTT1 «0/0» делают вывод о высокой индивидуальной чувствительности беременной женщины к действию тератогенных факторов. В связи с этим делают прогноз о высокой вероятности возникновения врожденных пороков развития плода. При определении пониженных значений соотношений уровней антител IgA Bp/Es<2, IgA Bp/Pg<2, IgG Bp/Es<2, IgG Bp/Pg<3 у носителей генотипа GSTT1 «+» делают вывод о высокой индивидуальной устойчивости беременной женщины к действию тератогенных факторов. В связи с этим делают прогноз о низкой вероятности возникновения врожденных пороков развития плода. Предложенный способ обеспечивает повышение точности и информативности определения вероятности врожденных пороков. 3 пр., 7 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования риска развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника. Сущность способа состоит в том, что у больных с воспалительными заболеваниями кишечника с помощью иммуноферментного анализа в крови определяют уровень α-дефензина (αД) в нг/мл в плазме крови и содержание β-дефензина (βД) в нг/г и кальпротектина (ФК) в мкг/г в кале, рассчитывают вероятность развития рецидива воспалительного заболевания кишечника (p) в % по формуле. При полученном значении вероятности, равном или превышающем 50%, прогнозируют высокий риск развития рецидива, а при полученном значении вероятности менее 50% прогнозируют низкий риск развития рецидива. Использование заявленного способа позволяет своевременно спрогнозировать риск развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника. 2 пр.
Настоящее изобретение относится к области медицины, а именно - к лабораторной диагностике и иммунологии, и может быть использовано для проведения исследований клинического материала и пищевых продуктов на наличие ботулотоксинов. Сущность: твердую подложку с размером пор 0,17-0,45 мкм погружают на 1 ч в раствор поливалентной противоботулинической сыворотки, разведенной 1:100 0.01 M фосфатным буфером pH 7.2, далее подложку высушивают на воздухе, затем точечно наносят исследуемый материал в объеме 1-2 мкл. После полного впитывания исследуемого материала подложку промывают дважды 0.01 M фосфатным буфером pH 7.2, содержащим 0.05% твина 20, затем помещают подложку в 2%-ный раствор БСА на ФБР или 2%-ный раствор казеината натрия на ФБР на 30 мин. После чего подложку двукратно промывают ФБР-твином и затем помещают ее в раствор поливалентной противоботулинической сыворотки, меченной частицами коллоидного серебра, на 1 ч. После этого погружают подложку на 3-5 мин в водный раствор, содержащий 0.5% лимонной кислоты, 0.1% метола и 0.2% азотнокислого серебра, и затем промывают подложку проточной водой. После чего визуально определяют наличие ботулинических токсинов в исследуемом материале: если на подложке формируются серые пятна в местах нанесения материала, то исследуемый материал содержит ботулинические токсины, если на подложке нет окрашивания - материал не содержит ботулинических токсинов. Способ позволяет обнаруживать минимальные количества ботулотоксинов, экспрессен, экономичен, прост в постановке и учете результатов реакции, доступен для широкого применения, может осуществляться в полевых условиях, не требует оснащения дорогостоящими реактивами и оборудованием. 1 з.п. ф-лы, 4 пр.
Изобретение относится к медицине и касается способа определения К-антигена Streptococcus pneumoniae для серологической диагностики циркулирующих штаммов пневмококков путем постановки реакции агглютинации на стекле с использованием определенного набора диагностических агглютинирующих пневмококковых сывороток, состоящего из 4 пуловых сывороток, в составе которых содержатся следующие антитела к К-антигенам, в первой из которых содержатся антитела к К-антигенам: 23F, 19F, 6A, 7F, 4, 14, во второй пуловой сыворотке: 19F, 18C, 9V, 6B, 4, 5, 14, в третьей пуловой сыворотке: 6A, 9V, 19A, 1, 4, 5, 14, в четвертой пуловой сыворотке: 7F, 6B, 1, 3, 5, 14. Изобретение обеспечивает сокращение трудозатрат, снижение трудоемкости, простоту, объективность оценки результата в сроки более короткие (2-3 раза), чем в прототипе. 13 пр.
Изобретение относится к медицине и, в частности к гематологии, вирусологии и инфекционным заболеваниям и описывает способ диагностики вирусных гепатитов путем определения в пробе крови РНК или ДНК вирусов методом ПЦР, при этом в случае отсутствия РНК или ДНК вирусов в сыворотке, плазме крови или «шапке» сгустка крови исследование проводят в сгустке крови больного, предварительно отделенном от сыворотки крови, высушенном и растворенном в физиологическом растворе хлористого натрия, и в случае наличия РНК или ДНК вирусов диагностируют гепатит. Способ обеспечивает повышение точности диагностики. 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии. Предложен способ прогнозирования исхода острого периода ишемического инсульта, заключающийся в определении в венозной крови на 1-й день ишемического инсульта соотношения содержания лиганда растворимого 6 члена суперсемейства рецепторов фактора некроза опухоли (sFasL) и растворимого рецептора Fas (sFas) (sFasL/sFas), и при соотношении концентраций sFasL/sFas, меньшем или равном 2,41±0,26, прогнозируют благоприятный исход, при большем 2,67 -неблагоприятный исход. 2 пр., 3 ил.
Изобретение относится к области медицинской диагностики и касается способа прогнозирования риска развития рассеянного склероза (РС) у больных с оптическим невритом. Сущность способа: в сыворотке крови пациента с острым оптическим невритом определяют значение разницы оптической плотности при длине волны 492 нм исследуемой сыворотки и контрольной сыворотки, в качестве которой используют смешанный пул сывороток здоровых людей, регистрируют величины пиковой латентности Р100 зрительных вызванных потенциалов (ЗВП) и амплитуды N95 паттерн-электроретинографии (ПЭРГ) на стандартный стимул. При значении разницы оптической плотности исследуемой сыворотки и контрольной сыворотки, равном или более 0,2, снижении амплитуды N95 ПЭРГ на стандартный стимул на 10% и более по сравнению с нормой и удлинении пиковой латентности Р100 ЗВП на 10% и более по сравнению с нормой, прогнозируют высокий риск развития рассеянного склероза. При значении разницы оптической плотности исследуемой сыворотки и контрольной сыворотки менее 0,2, снижении амплитуды N95 ПЭРГ на стандартный стимул менее чем на 10% по сравнению с нормой и удлинении пиковой латентности Р100 ЗВП менее чем на 10% по сравнению с нормой прогнозируют невысокий риск развития PC. Способ обеспечивает повышение надежности прогнозирования риска развития РС, отличается простотой и скоростью выполнения, не требует применения дорогостоящих методов исследования, не связан с травмированием тканей глаза. 2 пр.

Изобретение относится к медицине. При осуществлении способа через 3 ч после перорального введения препарата «Аласенс» в дозе 15 мг/кг массы тела получают трехканальное RGB флуоресцентное изображение зоны интереса. Оценивают долю участия красного канала в изображении опухоли. Оценивают значение Rcut=(R/(R+G+B))·100%, где Rcut - доля участия красного канала в изображении здоровой кожи, R, G и В - яркости красного, зеленого и синего каналов изображения здоровой кожи. Из полученного трехканального RGB флуоресцентного изображения формируют изображение в оттенках серого I(x,y). Для каждой точки изображения I(x,y) вычисляют отношение , где R(x,y), G(x,y), В(x,y) - яркости красного, зеленого и синего каналов RGB флуоресцентного изображения с координатами x, y. Выполняют действие I(x,y)=0 для точек, в которых значение меньше 10%. При отображении опухоли на полученном результирующем изображении I(x,y) диагностируется злокачественная опухоль, а при исчезновении опухоли - доброкачественная. Способ позволяет повысить информационную способность за счет более точного отображения границ недоброкачественной опухоли. 1 прим.

Изобретение относится к области медицинской и ветеринарной иммунологии и предназначено для определения функциональной активности комплемента по его действию на инфузории. В измерительные ячейки прибора для автоматизированного подсчета числа живых инфузорий вносят суспензию клеток Tetrahymena pyriformis и испытуемую сыворотку крови с последующим определением числа живых клеток в каждую минуту. Совпадение динамики изменения числа живых клеток во времени для испытуемой сыворотки и контрольной, представляющей пул 10 сывороток здоровых доноров, предполагает равенство активностей сывороточного комплемента в этих сыворотках. Предлагаемое изобретение обеспечивает универсальный способ расчета определения функциональной активности комплемента с использованием пригодной для всех видов животных мишени для действия активного комплемента, не требующей дополнительной сенсибилизации антителами и не подверженной реактивному лизису. 3 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к способам иммуноанализа для детектирования или количественного измерения искомых аналитов в образцах и может быть использовано в лабораторной и клинической практике для детектирования антител, протеинов, гормонов, лекарственных форм в биологических образцах в широком диапазоне концентраций. Сущность способа заключается в том, что для каждого искомого аналита иммобилизуют на твердом носителе на первой микрозоне первый специфический связывающий компонент с высокой аффинностью к искомому аналиту, на второй микрозоне иммобилизуют первый специфический связывающий компонент с низкой аффинностью к искомому аналиту, на микрозоны одновременно вносят аналит и второй специфический связывающий компонент, меченый первой детектируемой меткой и имеющий высокую аффинность к аналиту, первую смесь инкубируют и получают первый специфический комплекс, меченый первой детектируемой меткой, к первой смеси добавляют третий специфический связывающий компонент, меченый второй детектируемой меткой и имеющий низкую аффинность к искомому аналиту, при этом второй и третий специфические связывающие компоненты имеют идентичную эпитопную специфичность, затем инкубируют вторую смесь и получают второй специфический комплекс, меченый второй детектируемой меткой, удаляют не связавшиеся компоненты реакции и детектируют сигналы меток, связанных с первым и вторым специфическими комплексами в первой и второй микрозонах, концентрацию аналита определяют путем сравнения измеренных сигналов с калибровочной кривой, построенной для известных значений концентрации аналита. Использование способа позволяет повысить точность определения концентраций аналитов. 5 з. п.ф., 3 пр., 8 ил.
Наверх